Effect of Moringa olifera leaves on growth and gut microbiota of Nile tilapia (Oreochromis niloticus)

Abstract The study was conducted to evaluate the effect of Moringa olifera on the growth and gut health of Tilapia (Oreochromis niloticus). The feed having 30% crude protein was prepared as an experimental diet with 4%, 8% and 10% M. olifera leaf supplementation, respectively. The control diet was devoid of M. olifera leaves. The 10 weeks feeding trial was carried out on 60 fish in aquaria. Fish was fed @ 3% of body weight twice a day. Diet with the high level of inclusion of M. olifera leaves significantly increased the growth rate, Survival Rate (SR), Specific Growth Rate (SGR) and Feed Conversion Efficiency (FCE) in all treatment groups compared to the control group. Similarly, Feed Conversion Ratio (FCR) gradually decreased and found highly-significant. To check the gut health of the Tilapia, random samples were selected and dissected. Nutrient agar was used as culture media to check the growth of bacteria. Pour Plate Method was used for viable colonies count by colony counter. Through staining method, the different bacteria such as Escherichia coli, Salmonella, Shigella and Pseudomonas aeruginosa were identify abundantly in the intestine of control diet fish but less number present in treatment diets groups. These results showed that M. olifera leaves up to 10% of dietary protein can be used for Nile tilapia for significant growth and healthy gut microbiota of fish.

Resumo O estudo foi conduzido para avaliar o efeito da Moringa olifera no crescimento e saúde intestinal da tilápia (Oreochromis niloticus). A ração com 30% de proteína bruta foi preparada como dieta experimental com 4%, 8% e 10% de suplementação de folhas de M. olifera, respectivamente. A dieta controle foi desprovida de folhas de M. olifera. O ensaio de alimentação de 10 semanas foi realizado em 60 peixes em aquários. O peixe pesava 3% do peso corporal duas vezes ao dia. A dieta com alto nível de inclusão de folhas de M. olifera aumentou significativamente a taxa de crescimento, taxa de sobrevivência (SR), taxa de crescimento de sobrevivência (SGR) e eficiência de conversão alimentar (FCE) em todos os grupos de tratamento em comparação com o grupo de controle. Da mesma forma, a taxa de conversão de alimentação (FCR) diminuiu gradualmente e foi considerada altamente significativa. Para verificar a saúde intestinal da tilápia, amostras aleatórias foram selecionadas e dissecadas. O ágar nutriente foi usado como meio de cultura para verificar o crescimento das bactérias. O método da placa de Verter foi usado para a contagem de colônias viáveis por contador de colônias. Através do método de coloração, diferentes como Escherichia coli, Salmonella, Shigella e Pseudomonas aeruginosa foram identificados abundantemente no intestino de peixes da dieta controle, mas em menor número nos grupos de dieta de tratamento. Esses resultados mostraram que M. olifera deixa até 10% da proteína dietética e pode ser usado para tilápia do Nilo para um crescimento significativo e microbiota intestinal saudável de peixes.

Enzymatic activity of bone markers on Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802) growth during the ossification process

Abstract In order to better understand the ossification processes in anurans our study was carried out on tadpoles and adults of Lithobates catesbeianus. In this sense, we characterized the kinetic properties of alkaline phosphatase with p-nitrophenylphosphatase (pNPP) and pyrophosphate (PPi) and evaluated the activities of tartrate-resistant acid phosphatase and acid phosphatase. The enzyme extracts were obtained from tadpoles and adult femurs, which were divided into epiphysis and diaphysis. After homogenization, the samples were submitted to differential centrifugation to obtain cell membranes and, further, to phospholipase C (PIPLC) treatment, to remove membrane-bound proteins anchored by phosphatidylinositol. The average of specific activity for pNPP hydrolysis (at pH 10.5) by alkaline phosphatase released by phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) from Bacillus cereus among different bone regions at different animal ages was 1,142.57 U.mg-1, while for PPi hydrolysis (at pH 8.0), it was 1,433.82 U.mg-1. Among the compounds tested for enzymatic activity, the one that influenced the most was EDTA, with approximately 67% of inhibition for pNPPase activity and 77% for PPase activity. In the case of kinetic parameters, the enzyme showed a Michaelian behavior for pNPP and PPi hydrolysis. The Km value was around 0.6mM for pNPPase activity and ranged from 0.01 to 0.11mM for PPase activity, indicating that the enzyme has a higher affinity for this substrate. The study of pNPP and PPi hydrolysis by the enzyme revealed that the optimum pH of actuation for pNPP was 10.5, while for PPi, which is considered the true substrate of alkaline phosphatase, was 8.0, close to the physiological value. The results show that regardless of the ossification type that occurs, the same enzyme or isoenzymes act on the different bone regions and different life stages of anurans. The similarity of the results of studies with other vertebrates shows that anurans can be considered excellent animal models for the study of biological calcification.

Resumo Para melhor compreender o processo de ossificação em anuros, nosso estudo foi conduzido em girinos e adultos de Lithobates catesbeianus. Nesse sentido, as propriedades cinéticas da fosfatase alcalina com p-nitrofenilfosfato (pNPP) e pirofosfato (PPi) foram caracterizadas, e as atividades enzimáticas das fosfatases ácida e ácida tartarato resistente foram avaliadas. Os extratos enzimáticos foram obtidos de fêmur de girinos e adultos, divididos em epífise e diáfise. Após a homogeneização as amostras foram submetidas à centrifugação diferencial para obter membrana celular e, em seguida, ao tratamento com fosfolipase C (PIPLC), para remover as proteínas de membrana ancoradas por fosfatidilinositol. A média da atividade específica da fosfatase alcalina, liberada pela PIPLC de Bacillus cereus, para a hidrólise de pNPP (pH 10,5) nas diferentes regiões do fêmur e idades dos animais foi de 1.142,57 U.mg-1, enquanto para a hidrólise do PPi (pH 8,0) foi de 1.433,82 U.mg-1. Entre os compostos testados para a atividade enzimática, o de maior influência foi o EDTA, inibindo aproximadamente 67% e 77% das atividades de pNPPase e PPase, respectivamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou comportamento Michaeliano para a hidrólise dos dois substratos. O valor de Km foi de 0,6 mM para a atividade de pNPPase e variou de 0,01 a 0,11 para a atividade de PPase, indicando uma maior afinidade por esse substrato. O estudo da hidrólise de pNPP e PPi revelou que o pH ótimo aparente de atuação foi de 10,5 para o pNPP e 8,0 para o PPi, próximo ao fisiológico, sendo que esse é considerado o substrato natural da fosfatase alcalina. Os resultados demonstram que, apesar do tipo de ossificação que ocorre, a mesma enzima ou isoenzimas, atuam nos diferentes locais do osso e estágios de vida dos anuros. A similaridade dos estudos com os realizados com outros vertebrados apontam que os anuros podem ser considerados excelentes modelos animais para o estudo da calcificação biológica.

Phallus eversion sexing in Phrynops geoffroanus (Testudines: Chelidae): a new non-invasive approach

Abstract The sexing of species is an important tool for population management. In tortoises and turtles, sexing is usually done according to secondary characteristics, such as plastron morphology or phallus eversion techniques. In this paper, we present the phallus eversion method and compare its efficiency to other existing techniques. This new method aims at shortening the management time and reducing the physical aftereffects on the animals, fostering the clinical and reproductive management of Geoffroys side-necked turtle (Phrynops geoffroanus) and related species. A sample of fifty individuals was taken in the central region of Piauí state, Northeastern Brazil. The proposed method consisted of moving the head from its resting position. The methods achieving a success rate higher than 80% were compared to each other as for the stimulation time required for phallus eversion. The method as here proposed achieved 100% efficiency in the sex determination of specimens with a linear carapace length between 10 and 34 cm. Also, when compared to the second most efficient method, it substantially reduced the time needed for managing the specimens (91%), avoiding possible sequelae in the individuals handled.

Resumo A sexagem das espécies é uma ferramenta importante para o manejo populacional. Em tartarugas, cágados e jabutis, a sexagem geralmente é feita de acordo com características secundárias, como morfologia do plastrão ou técnicas de eversão do falo. Neste artigo, apresentamos o método de eversão do falo e comparamos sua eficiência com outras técnicas existentes. Este novo método visa encurtar o tempo de manejo e reduzir os efeitos colaterais físicos nos animais, promovendo o manejo clínico e reprodutivo do cágado-de-barbicha (Phrynops geoffroanus) e espécies relacionadas. Uma amostra de cinquenta indivíduos foi coletada na região central do estado do Piauí, Nordeste do Brasil. O método proposto consiste em remover a cabeça de sua posição de repouso. Os métodos que obtiveram índice de sucesso superior a 80% foram comparados entre si quanto ao tempo de estimulação necessário para a eversão do falo. O método aqui proposto alcançou 100% de eficiência na determinação do sexo de espécimes com comprimento de carapaça linear entre 10 e 34 cm. Além disso, quando comparado ao segundo método mais eficiente, reduziu substancialmente o tempo necessário para o manejo dos espécimes (91%), evitando possíveis sequelas nos indivíduos manuseados.

Composition and spatio-temporal dynamics of aquatic bird community in humid areas of Alto Parana Atlantic Forest

Abstract The northwestern portion of the Upper Paraná Atlantic Forest ecoregion is one of the most disturbed and fragmented areas in the Atlantic Forest, and little is known about the local avifauna. In this study, we have described the composition and diversity of the aquatic avifauna of this region and analyzed the patterns of similarity with respect to the seasonal as well as spatial distribution. We used the line transect sampling technique in six distinct humid areas (including lentic and lotic water bodies) during the dry and rainy seasons of 2012 and 2013. A total of 52 species of waterfowl were recorded. The species richness of the studied areas was surprisingly distinct; only seven waterfowl species, namely Cairina moschata (Linnaeus, 1758), Tigrisoma lineatum (Boddaert, 1783), Rosthramus sociabilis (Vieillot, 1817), Aramus guarauna (Linnaeus, 1766), Vanellus chilensis (Molina, 1782), Jacana jacana (Linnaeus, 1766), and Arundinicola leucocephala (Linnaeus, 1764), were common to these six studied areas. This indicated that the other bird species that were observed might be habitat selective. Moreover, the analysis of the composition of birds in the two seasons (dry and rainy) combined with their spatial distributions showed significant dissimilarities between the areas with lotic (river and constructed wetland) and lentic (lagoons) characteristics. Nevertheless, despite the small extent and low total richness of the entire study area, it was found to be home to 1/3 of all freshwater aquatic birds documented in the state of São Paulo, with the record of 5 migratory species and 11 new species added to the northwest of the state. The heterogeneity of local aquatic environments, habitat selection combined with seasonality, and the absence of other humid locations in the surroundings can explain the diversity and distribution of these birds in the water bodies of this uninvestigated Atlantic Forest ecoregion.

Resumo A porção noroeste da ecorregião Floresta Atlântica do Alto Paraná é uma das mais alteradas e fragmentadas da Mata Atlântica, da qual pouco se sabe sobre a avifauna local. Nosso objetivo foi descrever a diversidade e composição da avifauna aquática, bem como analisar os padrões de similaridade quanto a distribuição temporal e espacial destas aves nesta ecorregião. Utilizamos a transecção linear para amostragem em seis áreas úmidas (corpos dágua lênticos e lóticos), nos períodos de seca e chuva entre 2012 e 2013. Registramos 52 espécies de aves aquáticas e as riquezas das áreas mostraram-se distintas, pois apenas Cairina moschata (Linnaeus, 1758), Tigrisoma lineatum (Boddaert, 1783), Rosthramus sociabilis (Vieillot, 1817), Aramus guarauna (Linnaeus, 1766), Vanellus chilensis (Molina, 1782), Jacana jacana (Linnaeus, 1766), and Arundinicola leucocephala (Linnaeus, 1764) foram comuns às seis áreas, o que indica seleção de habitat. Quando analisada a composição das aves nos dois períodos aliada à distribuição espacial, encontramos dissimilaridades temporais acentuadas entre os ambientes com características lóticas (rio e aterro) e lênticas (lagoas). Isto mostra que, além das diferentes épocas sazonais, é necessário analisar separadamente os diferentes tipos de áreas úmidas. Por fim, apesar da extensão pequena e baixa riqueza total, a área amostrada abrigou 1/3 das aves aquáticas de água doce para o estado de São Paulo, cinco espécies migratórias e 11 novas espécies para o noroeste do estado. A heterogeneidade de ambientes aquáticos locais, forte seleção de habitat aliada à sazonalidade e ausência de outros locais úmidos em seu entorno, explicam a diversidade e distribuição destas aves estreitamente relacionadas aos corpos dágua desta desconhecida ecorregião da Mata Atlântica.

Ecotoxicological effects of commercial herbicides on the reproductive system of aquatic arthropod Limnocoris submontandoni (Hemiptera: Naucoridae)

Abstract Worldwide, conventional agriculture makes extensive use of pesticides. Although the effects of herbicides are relatively well known in terms of environmental impacts on non-target organisms, there is very little scientific evidence regarding the impacts of herbicide residues on aquatic arthropods from tropical conservation areas. This study evaluates for the first time the toxicity of the herbicides ametryn, atrazine, and clomazone on the aquatic insect Limnocoris submontandoni (Hemiptera: Naucoridae). The lethal concentration (LC50) of herbicides was evaluated for these insects, as well as the effect of the herbicides on the insects tissues and testicles. The estimated LC50 was 1012.41, 192.42, and 46.09 mg/L for clomazone, atrazine, and ametryn, respectively. Spermatocyte and spermatid changes were observed under the effect of atrazine, and effects on spermatogenesis were observed for some concentrations of clomazone, with apparent recovery after a short time. Our results provide useful information on the effects of herbicide residues in aquatic systems. This information can help minimize the risk of long-term reproductive effects in non-target species that have been previously overlooked in ecotoxicology studies.

Resumo Em todo o mundo, a agricultura convencional faz uso extensivo de pesticidas. Embora os efeitos dos herbicidas sejam relativamente bem conhecidos em termos de impactos ambientais em organismos não-alvo, há pouca evidência científica sobre os impactos de resíduos de herbicidas em artrópodes aquáticos de áreas de conservação tropicais. Este estudo avalia pela primeira vez a toxicidade dos herbicidas ametryn, atrazine e clomazone sobre o inseto aquático Limnocoris submontandoni (Hemiptera: Naucoridae). A concentração letal (LC50) de herbicidas foi avaliada para esses insetos, bem como o efeito dos herbicidas nos tecidos e testículos dos insetos. A LC50 estimada foi de 1012,41, 192,42 e 46,09 mg/L para clomazone, atrazine e ametryn, respectivamente. Alterações nos espermatócitos e espermátides foram observadas sob o efeito de atrazine, e efeitos na espermatogênese foram observados para algumas concentrações de clomazone, com aparente recuperação após um curto período de tempo. Nossos resultados fornecem informações úteis sobre os efeitos de resíduos de herbicidas em sistemas aquáticos. Essas informações podem ajudar a minimizar o risco de efeitos reprodutivos de longo prazo em espécies não-alvo que foram negligenciadas anteriormente em estudos de ecotoxicologia.

The bioprotective role of irradiated hibiscus against harmful effects of using repeatedly frying edible oil

Abstract Repeatedly frying process of dietary edible oil has a potential role in the generation of free radicals. Therefore, questions have always been raised as to whether, there is an efficient and economical method to reduce the harmful effects of repeated use of frying edible oil. Since hibiscus has been stated to have a wide variety of therapeutic effects, it was important to investigate its properties against harmful effects of free radicals. The current study aspires to find out whether irradiated powder of hibiscus has a protective role against adverse effects of repeated use of frying edible oil. Thirty-five adult male albino rats were equally assigned into five groups. First groupG1 was fed with normal diet as control group, meanwhile, groupG2 the diet mixed with fresh oil, G3 diet mixed with repeatedly frying oil only, G4 diet mixed with frying oil treated with hibiscus and G5 diet mixed with frying oil treated with irradiated hibiscus. Feeding duration was six weeks. Fatty acid analyses of oil as well as peroxide values were determined. Blood and liver samples were collected for biochemical analyses as well as histological study. Repeatedly heated cooked oil has significant increases in peroxide value, acid value, free fatty acid and both conjugated diene and triene compared with repeatedly frying oil treated with hibiscus. Also there are significant increases in cholesterol and triglyceride and impaired in liver functions in G3compared with others. In addition, relative to the hibiscus groups, there is a substantial reduction in oxygen consumption in G3. Both hibiscus as well as irradiated hibiscus attract attention in order to play a vital and economical role against harmful effects of frequent use of frying edible oil on some biological functions but, irradiated hibiscus was more effective.

Resumo O processo de fritura repetida de óleo comestível da dieta tem papel potencial na geração de radicais livres que podem ter efeitos prejudiciais em algumas funções biológicas. Portanto, sempre se questionou se existe uma maneira eficiente e econômica de prevenir ou pelo menos reduzir os efeitos nocivos do uso repetido de óleo comestível para fritar. Como o hibisco tem ampla variedade de efeitos terapêuticos, foi importante investigar suas propriedades como agente antioxidante contra os efeitos nocivos dos radicais livres. O presente estudo pretende descobrir se o pó irradiado de hibisco tem papel protetor contra os efeitos adversos do uso repetido de óleo comestível para fritar. Trinta e cinco ratos albinos machos adultos foram divididos igualmente em cinco grupos. O primeiro grupo G1 foi alimentado com dieta normal como grupo controle, enquanto o grupo G2 dieta misturada com óleo fresco, dieta G3 misturada com óleo de fritura repetida, dieta G4 misturada com óleo de fritura tratada com hibisco e dieta G5 misturada com óleo de fritura tratada com hibisco irradiado. A duração da alimentação foi de seis semanas. Foram determinadas as análises de ácidos graxos de óleo, bem como os valores de peróxidos. Amostras de sangue e fígado foram coletadas para análises bioquímicas e estudo histológico. O óleo cozido repetidamente aquecido tem aumentos significativos no valor de peróxido, valor de ácido, ácido graxo livre e dieno e trieno conjugados em comparação com óleo de fritura repetidamente tratado com hibisco. Também há aumentos significativos no colesterol e triglicérides e comprometimento das funções hepáticas no G3 em comparação com outros. Além disso, em relação aos grupos de hibiscos, há uma redução substancial no consumo de oxigênio no G3. Tanto o hibisco como o hibisco irradiado chamam atenção por desempenhar papel vital e econômico contra os efeitos nocivos do uso frequente de óleo comestível para fritar em algumas funções biológicas, mas o hibisco irradiado foi mais eficaz.

Oxidative and osmotolerant effects in Salvator merianae (Squamata: Teiidae) red blood cells during hibernation

Abstract Hibernation is a natural condition of animals that lives in the temperate zone, although some tropical lizards also experience hibernation annually, such as the lizard native from South America, Salvator merianae, or tegu lizard. Even though physiological and metabolic characteristic associated with hibernation have been extensively studied, possible alterations in the red blood cells (RBC) integrity during this period remains unclear. Dehydration and fasting are natural consequences of hibernating for several months and it could be related to some cellular modifications. In this study, we investigated if the osmotic tolerance of RBCs of tegu lizard under hibernation is different from the cells obtained from animals while normal activity. Additionally, we indirectly investigated if the RBCs membrane of hibernating tegus could be associated with oxidation by quantifying oxidized biomolecules and the activity of antioxidant enzymes. Our findings suggest that RBCs are more fragile during the hibernation period, although we did not find evidence of an oxidative stress scenario associated with the accentuated fragility. Even though we did not exclude the possibility of oxidative damage during hibernation, we suggested that an increased RBCs volume as a consequence of hypoosmotic blood during hibernation could also affect RBCs integrity as noted.

Resumo A hibernação é uma condição natural dos animais que vivem na zona temperada, embora alguns lagartos tropicais também experenciem hibernação anualmente, como é o caso do lagarto nativo da América do Sul, Salvator merianae ou teiú. Embora as características fisiológicas e metabólicas associadas à hibernação tenham sido amplamente estudadas, possíveis alterações na integridade das hemácias durante esse período ainda permanecem obscuras. A desidratação e o jejum são consequências naturais da hibernação por vários meses e podem estar relacionadas a algumas modificações celulares. Neste estudo, investigamos se a tolerância osmótica de hemácias do lagarto teiú sob hibernação são diferentes das células obtidas de animais em atividade normal. Além disso, investigamos indiretamente por meio da quantificação de biomoléculas oxidadas e da atividade de enzimas antioxidantes se a membrana das hemácias dos teiús em hibernação poderia estar associada à oxidação. Nossos resultados sugerem que as hemácias possuem maior fragilidade durante o período de hibernação, embora não tenhamos encontrado evidências de um cenário de estresse oxidativo associado à essa fragilidade acentuada. Embora não tenhamos excluído a possibilidade de dano oxidativo durante a hibernação, sugerimos que um aumento no volume das hemácias como consequência de sangue hipoosmótico durante a hibernação também poderia afetar a integridade de hemácias, tal como foi observado.

Forest yield prediction under different climate change scenarios using data intelligent models in Pakistan

Abstract This study aimed to develop and evaluate data driven models for prediction of forest yield under different climate change scenarios in the Gallies forest division of district Abbottabad, Pakistan. The Random Forest (RF) and Kernel Ridge Regression (KRR) models were developed and evaluated using yield data of two species (Blue pine and Silver fir) as an objective variable and climate data (temperature, humidity, rainfall and wind speed) as predictive variables. Prediction accuracy of both the models were assessed by means of root mean squared error (RMSE), mean absolute error (MAE), correlation coefficient (r), relative root mean squared error (RRMSE), Legates-McCabes (LM), Willmotts index (WI) and Nash-Sutcliffe (NSE) metrics. Overall, the RF model outperformed the KRR model due to its higher accuracy in forecasting of forest yield. The study strongly recommends that RF model should be applied in other regions of the country for prediction of forest growth and yield, which may help in the management and future planning of forest productivity in Pakistan.

Resumo Este estudo teve como objetivo desenvolver e avaliar modelos baseados em dados para previsão da produção florestal em diferentes cenários de mudanças climáticas na divisão florestal Gallies do distrito de Abbottabad, Paquistão. Os modelos Random Forest (RF) e Kernel Ridge Regression (KRR) foram desenvolvidos e avaliados usando dados de produção de duas espécies (pinheiro-azul e abeto-prateado) como uma variável objetiva e dados climáticos (temperatura, umidade, precipitação e velocidade do vento) como preditivos variáveis. A precisão da previsão de ambos os modelos foi avaliada por meio de erro quadrático médio (RMSE), erro absoluto médio (MAE), coeficiente de correlação (r), erro quadrático médio relativo (RRMSE), Legates-McCabes (LM), índice de Willmott (WI) e métricas Nash-Sutcliffe (NSE). No geral, o modelo RF superou o modelo KRR devido à sua maior precisão na previsão do rendimento florestal. O estudo recomenda fortemente que o modelo RF seja aplicado em outras regiões do país para previsão do crescimento e produtividade florestal, o que pode ajudar no manejo e planejamento futuro da produtividade florestal no Paquistão.

An estimation of optimum dietary concentration of soy bean meal for carps (Catla catla, Labeo rohita and Cirhinus mrigala)

Abstract Soybean meal is an inexpensive plant origin protein which has been used in practical diets as a replacement of animal protein such as fish meal or chicken meal, due to the uneconomical price of animal protein diets. Consequently, a research study was conducted on some commercial species of Indian major carps i.e. Catla (Cattla cattla), Rohu (Labeo rohita) and Mrigala (Cirhinus mrigala) (Hamilton, 1822) to estimate optimum dietary protein requirement of soy bean meal in diet in an intensive polyculture. Three different diets (SBM I, SBM II and SBM III) were formulated by 80%, 50% and 20% replacement of fish meal with soybean meal from a 45% fish meal diet (control).Highest monthly mean weight gain was obtained by SBM II (with 35% CP and about 50% substitution of fish meal), while SBM III (45% Crude Protein and about 20% substitution of fish meal) was stood second. All tested diets respond enormously by producing high yield as compare to control diet, though SBM II generated highest yield among all. On the bases of the following research, it was revealed that the SBM can surrogate even50% fish meal without any augmentation of other amino acids in the diet of Indian major carps.

Resumo O farelo de soja é uma proteína de origem vegetal de baixo custo que tem sido usada em dietas práticas como um substituto da proteína animal, como farinha de peixe ou farinha de frango, devido ao preço não econômico das dietas com proteína animal. Consequentemente, um estudo/pesquisa foi realizado com algumas espécies comerciais de carpas principais indianas, ou seja, Catla (Cattla cattla), Rohu (Labeo rohita) e Mrigala (Cirhinus mrigala) (Hamilton, 1822), para estimar a necessidade ideal de proteína dietética de farelo de soja na dieta em uma policultura intensiva. Três dietas diferentes (SBM I, SBM II e SBM III) foram formuladas por 80%, 50% e 20% de substituição de farinha de peixe por farelo de soja de uma dieta de 45% de farinha de peixe (controle). O maior ganho de peso médio mensal foi obtido por SBM II (com 35% PB e cerca de 50% de substituição de farinha de peixe), enquanto SBM III (45% de proteína bruta e cerca de 20% de substituição de farinha de peixe) ficou em segundo lugar. Todas as dietas testadas respondem enormemente produzindo alto rendimento em comparação com a dieta controle, embora SBM II tenha gerado o maior rendimento entre todas. Com base na pesquisa a seguir, foi revelado que o SBM pode substituir até 50% da farinha de peixe sem qualquer aumento de outros aminoácidos na dieta das carpas principais indianas.

Introgression of bacterial leaf blight (BLB) resistant gene, Xa7 into MARDI elite variety, MR219 by marker assisted backcrossing (MABC) approach

Abstract Bacterial leaf blight (BLB) is one of the major rice diseases in Malaysia. This disease causes substantial yield loss as high as 70%. Development of rice varieties which inherited BLB resistant traits is a crucial approach to promote and sustain rice industry in Malaysia. Hence, this study aims were to enhance BLB disease resistant characters of high yielding commercial variety MR219 through backcross breeding approach with supporting tool of marker-assisted selection (MAS). Broad spectrum BLB resistance gene, Xa7 from donor parent IRBB7 were introgressed into the susceptible MR219 (recurrent parent) using two flanking markers ID7 and ID15. At BC3F4, we managed to generate 19 introgressed lines with homozygous Xa7 gene and showed resistant characteristics as donor parent when it was challenged with Xanthomonas oryzae pv. oryzae through artificial inoculation. Recurrent parent MR219 and control variety, MR263 were found to be severely infected by the disease. The improved lines exhibited similar morphological and yield performance characters as to the elite variety, MR219. Two lines, PB-2-107 and PB-2-34 were chosen to be potential lines because of their outstanding performances compared to parent, MR219. This study demonstrates a success story of MAS application in development of improved disease resistance lines of rice against BLB disease.

Resumo A mancha bacteriana das folhas (BLB) é uma das principais doenças do arroz na Malásia. Essa doença causa perdas substanciais de rendimento de até 70%. O desenvolvimento de variedades de arroz que herdaram características de resistência ao BLB é uma abordagem crucial para promover e sustentar a indústria do arroz na Malásia. Portanto, o objetivo deste estudo foi aumentar os caracteres BLB resistentes a doenças da variedade comercial MR219 de alto rendimento por meio de uma abordagem de cruzamento retrocruzamento com ferramenta de apoio de seleção assistida por marcador (MAS). O gene de resistência a BLB de amplo espectro, Xa7 do pai doador IRBB7, foi introgressado no MR219 suscetível (pai recorrente) usando dois marcadores flanqueadores ID7 e ID15. No BC3F4, conseguimos gerar 19 linhagens introgressadas com o gene Xa7 homozigoto e apresentamos características de resistência como genitor doador quando desafiado com Xanthomonas oryzae pv. oryzae por inoculação artificial. O pai recorrente MR219 e a variedade controle, MR263, estavam gravemente infectados pela doença. As linhas melhoradas exibiram características morfológicas e de desempenho de rendimento semelhantes às da variedade elite, MR219. Duas linhas, PB-2-107 e PB-2-34, foram escolhidas como linhas potenciais por causa de seus desempenhos excelentes em comparação com a mãe, MR219. Este estudo demonstra uma história de sucesso de aplicação de MAS no desenvolvimento de linhas de arroz melhoradas com resistência a doenças contra a doença BLB.

Reduced genetic diversity and the success of the invasive peacock bass (Cichliformes: Cichlidae)

Abstract Several species of Cichla successfully colonized lakes and reservoirs of Brazil, since the 1960s, causing serious damage to local wildlife. In this study, 135 peacock bass were collected in a reservoir complex in order to identify if they represented a single dominant species or multiple ones, as several Cichla species have been reported in the basin. Specimens were identified by color pattern, morphometric and meristic data, and using mitochondrial markers COI, 16S rDNA and Control Region (CR). Overlapping morphological data and similar coloration patterns prevented their identification using the taxonomic keys to species identification available in the literature. However, Bayesian and maximum likelihood from sequencing data demonstrated the occurrence of a single species, Cichla kelberi. A single haplotype was observed for the 16S and CR, while three were detected for COI, with a dominant haplotype present in 98.5% of the samples. The extreme low diversity of the transplanted C. kelberi evidenced a limited number of founding maternal lineages. The success of this colonization seems to rely mainly on abiotic factors, such as increased water transparency of lentic environments that favor visual predators that along with the absence of predators, have made C. kelberi a successful invader of these reservoirs.

Resumo Muitas espécies de Cichla colonizaram com sucesso lagos e reservatórios do Brasil desde os anos 1960, causando graves prejuízos à vida selvagem nesses locais. Neste estudo, 135 tucunarés foram coletados em um complexo de reservatórios a fim de identificar se representavam uma espécie dominante ou múltiplas espécies, uma vez que diversas espécies de Cichla foram registradas na bacia. Os espécimes foram identificados com base na coloração, dados morfométricos e merísticos, e por marcadores mitocondriais COI, 16S rDNA e Região Controle (RC). A sobreposição dos dados morfométricos e o padrão similar de coloração impediram a identificação utilizando as chaves de identificação disponíveis na literatura. Entretanto, as análises bayesiana e de máxima verossimilhança de dados moleculares demonstraram a ocorrência de uma única espécie, Cichla kelberi. Um único haplótipo foi observado para o 16S e RC, enquanto três foram detectados para o COI, com um haplótipo dominante presente em 98,5% das amostras. A baixa diversidade nos exemplares introduzidos de C. kelberi evidenciou um número limitado de linhagens maternas fundadoras. O sucesso da invasão parece depender de fatores abióticos, como a maior transparência da água de ambientes lênticos que favorece predadores visuais que, atrelado à ausência de predadores, fez do C. kelberi um invasor bem-sucedido nesses reservatórios.

Monitoring the feeding and parental care behavior of a pair of free-living owls (Tyto furcata) in the nest during the reproductive period in Rio de Janeiro, Brazil

Abstract The American Barn Owl (Tyto furcata) lives in urban, periurban and wild environments and feeds mainly on small rodents, meaning it has great importance in the biological control of pests. The aim of this work was to describe the reproductive, parental and eating habits of a pair of American barn owls naturally living outside a residence in the urban area of the municipality of Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro state, Brazil. A wood box was installed on an outside wall of the home, monitored by a video camera. A spreadsheet was created to keep track of the observations recorded. The female laid four eggs, and after an incubation period of 30-32 days all the eggs hatched, but only two chicks survived after cannibalism among the chicks. Initially, the male provided the food to the chicks and the female remained in the nest caring for the brood. After approximately a month, the female also began to leave the nest and return with prey, which was offered to the chicks, with the male also continuing this behavior. The chicks left the nest in September, 2017. The data obtained show the existence of cooperation and division of tasks between male and female owls during the reproductive period.

Resumo A coruja-das-torres americana (Tyto furcata) vive em ambientes urbanos e se alimenta principalmente de pequenos roedores, sendo de grande importância no controle biológico de pragas. O objetivo deste trabalho foi descrever os hábitos alimentares, parentais e reprodutivos de um casal de corujas-das-torres americanas, naturalmente vivendo fora de uma residência na zona urbana do município de Campos dos Goytacazes, estado do Rio de Janeiro, Brasil. Uma caixa de madeira foi instalada em uma parede externa da casa, monitorada por uma câmera de vídeo. Uma planilha foi criada para manter o controle das observações registradas. A fêmea pôs quatro ovos, e após período de incubação de 30-32 dias todos os ovos eclodiram, mas apenas dois filhotes sobreviveram após o canibalismo entre os filhotes. Inicialmente, o macho fornecia a comida aos filhotes e a fêmea permanecia no ninho cuidando da ninhada. Depois de cerca de um mês, a fêmea também começou a sair do ninho e voltar com a presa, que era oferecida aos filhotes, com o macho também continuando com esse comportamento. Os filhotes deixaram o ninho em setembro de 2017. Os dados obtidos mostram a existência de cooperação e divisão de tarefas entre corujas machos e fêmeas durante o período reprodutivo.

Survey of Portulacaceae family flora in Taif, Saudi Arabia

Abstract The presence of weeds in areas of agricultural activities is a hinderance to the development of these activities. It is important to take advantage of the vast open spaces suitable for agriculture and provide food security for humans, and also it is an important indicator for determining the feasibility of growing crops, benefiting from yield and determining the percentage of loss, clearing fields through agricultural practices, that protect crops from weed attack and agricultural practice method must be followed that will reduce weed presence. This study was conducted during the years 2018 to 2020 to evaluate Portulacaceae of Flora in the Taif area in the Kingdom of Saudi Arabia at different altitudes (Area 1 =1700 m, Area 2 =1500 m, Area 3 =1500 m, Area 4 =500 m Area 5 = 2200 m, and Area 6 = 2200 m). The results show that there were 2,816 individuals of Portulaca oleracea weed, with the highest density found in A 1, followed by A 2, while in A 5 and A 6, no weeds were recorded. The highest density of weeds were in the Pomegranate fields, followed by Grape fields. The lowest density was found in A man field. The results of this study will help to take the necessary measures to combat weeds and its management in areas of agricultural activity, while more studies are needed to survey the ecology of weeds of Taif in The Kingdom of Saudi Arabia.

Resumo A presença de plantas daninhas em áreas de atividades agrícolas é um entrave ao desenvolvimento dessas atividades. É importante aproveitar os vastos espaços abertos adequados para a agricultura e dar segurança alimentar para o homem. Também é um indicador importante para determinar a viabilidade de cultivo de lavouras, beneficiando-se da produtividade e determinando o percentual de perda, desmatando campos agrícolas, práticas que protegem as lavouras do ataque de ervas daninhas, e métodos de práticas agrícolas devem ser seguidos para reduzir a presença de ervas daninhas. Este estudo foi realizado durante os anos de 2018 a 2020 para avaliar Portulacaceae de flora na área de Taif, no Reino da Arábia Saudita, em diferentes altitudes (Área 1 = 1.700 m, Área 2 = 1.500 m, Área 3 = 1.500 m, Área 4 = 500 m, Área 5 = 2.200 m, e Área 6 = 2.200 m). Os resultados mostram que houve 2.816 indivíduos de planta daninha Portulaca oleracea, com a maior densidade encontrada em A 1, seguida de A 2, enquanto em A 5 e A 6, nas plantas daninhas foram registrados. A maior densidade de ervas daninhas estava nos campos de romã, seguido pelos campos de uva. A densidade mais baixa foi encontrada no campo A man. Os resultados deste estudo ajudarão a tomar as medidas necessárias para combater as ervas daninhas e seu manejo em áreas de atividade agrícola, enquanto mais estudos são necessários para levantar a ecologia das ervas daninhas de Taif na Arábia Saudita.

Efficacy of Purpureocillium lilacinum AUMC 10149 as biocontrol agent against root-knot nematode Meloidogyne incognita infecting tomato plant

Abstract Root-knot nematode Meloidogyne incognita is among the biotic factors which has greatly affected both the yield and the quality of the tomato crop. The egg parasitic nematode, Purpureocillium lilacinum (Pl) is considered as one of the most promising agents in controlling and overcoming this plant pathogen. The nematicidal effect of the native isolate Pl AUMC 10149 on second stage juveniles survival and egg hatching of M. incognita at different times of exposure was tested in vitro. The obtained data showed that Pl gave a maximum percentage of J2 mortality (97.6%) and egg hatching inhibition (79.8%) after 72 hours of exposure. The potentiality of Pl as well as Bio-Nematon to control M. incognita infecting tomato was conducted using different times of application in vivo. Nine treatments with five replicates were used for such bioagents compared with the nematicide Oxamyl. Each seedling was inoculated with 1000 J2s of nematode/pot and 10 mL of Pl (1x1010 CFU/mL) or Bio-Nematon spore suspension (1x108 CFU/mL) 10mL/pot. The results indicated that the most effective treatments in reducing nematode population, number of galls and egg masses of M. incognita in plant roots was performed with treatment by Pl pre-planting and post-infection with Pl (Rf 1.9) giving a significant enhancement in plant length (64.9%), fresh weight (72.52%) and shoot dry weight (163.41%) without negatively impacting environment. Therefore, the present study confirmed that using P. lilacinum AUMC 10149 can be used as a practical supplement to environmentally friendly disease management of root-knot nematodes in Egypt.

Resumo O nematoide-das-galhas Meloidogyne incognita está entre os fatores bióticos que afetaram enormemente a produção e a qualidade da cultura do tomate. O nematoide parasita de ovos, Purpureocillium lilacinum (Pl), é considerado um dos mais promissores agentes no controle e superação desse fitopatógeno. O efeito nematicida do isolado nativo Pl AUMC 10149 na sobrevivência de juvenis de segundo estágio e na eclosão dos ovos de M. incognita em diferentes momentos de exposição foi testado in vitro. Os dados obtidos mostraram que o Pl deu um percentual máximo de mortalidade de J2 (97.6%) e inibição da eclosão dos ovos (79.8%) após 72 horas de exposição. A potencialidade de Pl e de Bio-Nematon para controlar M. incognita infectando tomate foi conduzida em diferentes tempos de aplicação in vivo. Nove tratamentos com cinco repetições foram usados para tais bioagentes em comparação com o nematicida Oxamyl. Cada muda foi inoculada com 1.000 J2s de nematoide / vaso e 10 mL de Pl (1×1010 CFU/mL). Ou suspensão de esporos Bio-Nematon (1×108 CFU/mL) 10mL/pot. Os resultados indicaram que os tratamentos mais eficazes na redução da população de nematoides, número de galhas e desovas de M. incognita nas raízes das plantas foram realizados com Pl pré-plantio e pós-infecção com Pl (Rf 1.9), dando um aumento significativo no comprimento da planta (64.9%), massa fresca (72.52%) e massa seca da parte aérea (163.41%) sem impactar negativamente o meio ambiente. Portanto, o presente estudo confirmou que o uso de P. lilacinum AUMC 10149 pode ser usado como um suplemento prático para o manejo ecologicamente correto de nematoides-das-galhas no Egito.

Development of chitosan based microencapsulated spray dried powder of tuna fish oil: oil load impact and oxidative stability

Abstract The impact of fish oil concentration on the oxidative stability of microcapsules through the spray drying process using chitosan and maltodextrin as wall material was studied. Emulsions were prepared with different Tuna fish oil (TFO) content (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%) while wall material concentration was kept constant. Microencapsulated powder resulting from emulsion prepared with high fish oil load have high moisture content, wettability, total oil and low encapsulation efficiency, hygroscopicity and bulk tapped density. Oxidative stability was evaluated periodically by placing microcapsules at room temperature. Microcapsules prepared with TFO-10% presented high oxidative stability in terms of peroxide value (2.94±0.04) and anisidine value (1.54±0.02) after 30 days of storage. It was concluded that optimal amounts of fish oil for microencapsulation are 10% and 20% using chitosan and maltodextrin that extended its shelf life during study period.

Resumo Foi estudado o impacto da concentração de óleo de peixe na estabilidade oxidativa de microcápsulas por meio do processo de secagem por atomização, utilizando quitosana e maltodextrina como material de parede. As emulsões foram preparadas com diferentes teores de óleo de atum (TFO) (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%), enquanto a concentração de material de parede foi mantida constante. O pó microencapsulado resultante da emulsão preparada com alta carga de óleo de peixe tem alto teor de umidade, molhabilidade e óleo total e baixa eficiência de encapsulação, higroscopicidade e densidade extraída a granel. A estabilidade oxidativa foi avaliada periodicamente colocando microcápsulas à temperatura ambiente. As microcápsulas preparadas com TFO-10% apresentaram alta estabilidade oxidativa em termos de valor de peróxido (2,94 ± 0,04) e valor de anisidina (1,54 ± 0,02) após 30 dias de armazenamento. Concluiu-se que as quantidades ideais de óleo de peixe para microencapsulação são de 10% e 20% usando quitosana e maltodextrina que prolongaram sua vida útil durante o período de estudo.

Oral glutamine dipeptide or oral glutamine free amino acid reduces burned injury progression in rats

Abstract This study was carried out to evaluate the effect of Glutamine, as a dipeptide or a free amino acid form, on the progression of burn injuries in rats. Thirty male Wistar rats were burned with a comb metal plate heated in boiling water (98 °C) for three minutes, creating four rectangular full-thickness burn areas separated by three unburned interspaces (zone of stasis) in both dorsum sides. The animals were randomized into three groups (n=10): saline solution (G1-Control) and treated groups that orally received Glutamine as dipeptide (G2-Dip) or free amino acid (G3-FreeAA). Two and seven days after burn injury, lesions were photographed for unburned interspaces necrosis evolution assessment. Seven days after injury, glutathione seric was measured and histopathological analysis was performed. By photographs, there was a significant reduction in necrosis progression in G3-Free-AA between days two and seven. Histopathological analysis at day 7 showed a significantly higher stasis zone without necrosis and a higher number of fibroblasts in G2-Dip and G3-FreeAA compared with G1-Control. Also, glutathione serum dosage was higher in G2-Dip. The plasmatic glutathione levels were higher in the G2-Dip than the G1-Control, and there was a trend to higher levels in G3-FreeAA. The reduction in histological lesions, greater production of fibroblasts, and greater amounts of glutathione may have benefited the evolution of burn necrosis, which showed greater preservation of interspaces.

Resumo Este estudo foi realizado para avaliar o efeito da Glutamina, como um dipeptídeo ou forma de aminoácido livre, na progressão de queimaduras em ratos. Trinta ratos Wistar machos foram queimados com um pente de metal aquecido em água fervente (98 °C) por três minutos, criando quatro áreas retangulares queimadas separadas por três interesespaços não queimados (zona de estase) em ambos os lados do dorso. Os animais foram randomizados em três grupos (n = 10): solução salina (G1-Controle) e grupos tratados que receberam glutamina via oral como dipeptídeo (G2-Dip) ou aminoácido livre (G3-FreeAA). Dois e sete dias após a queimadura, as lesões foram fotografadas para avaliação da evolução da necrose entre os espaços não queimados. Sete dias após a lesão, foi dosada a glutationa sérica e realizada análise histopatológica. Pelas fotografias, houve uma redução significativa na progressão da necrose no G3-Free-AA entre os dias dois e sete. A análise histopatológica no dia 7 mostrou uma zona de estase significativamente maior sem necrose e número mais elevado de fibroblastos em G2-Dip e G3-FreeAA em comparação com G1-Controle. Os níveis plasmáticos de glutationa foram maiores no G2-Dip em relação ao G1-Controle, e houve tendência a níveis mais elevados no G3-FreeAA. A redução das lesões histológicas, maior produção de fibroblastos, maior quantidade de glutationa podem ter beneficiado a evolução da necrose da queimadura, que mostrou maior preservação dos interespaços.

Performance evaluation of the commercial aquafeeds available in the market of Pakistan on Channa marulius (Sole)

Abstract The present study aimed to determine the effect of different levels of protein on the growth, body composition, amino acid profile and serology of Channa marulius fingerlings. The experiment was conducted in ten happas installed in earthen ponds, each stocked with 10 fishes for 90 days. Four commercial fish feeds having 25%, 30%, 32% and 40% crude protein (CP) levels were fed to fish at 3% of their wet body weight three times a day. The results of the study revealed that highest weight gain, feed conversion ratio and survival rate were observed in 30% protein feed. Meanwhile, moisture content was higher in fish fed with 30% CP feed while highest crude protein was recorded in 40% CP fed fish. Lowest fat content was observed in 32% CP feed. Amino acid profile of fish revealed better results in 30% CP feed. Total protein, glucose and globulin were also highest in fish feeding 30% CP feed, while albumin was highest in 40% CP feed. It is concluded that 30% CP feed showed better results in terms of growth, amino acid profile and serological parameters without effecting fish body composition.

Resumo O presente estudo teve como objetivo determinar o efeito de diferentes níveis de proteína sobre o crescimento, composição corporal, perfil de aminoácidos e sorologia de alevinos de Channa marulius. O experimento foi conduzido em dez happas instalados em tanques de terra, cada um abastecido com 10 peixes, por 90 dias. Quatro alimentos para peixes comerciais com níveis de 25%, 30%, 32% e 40% de proteína bruta (PB) foram dados aos peixes com 3% de seu peso corporal úmido três vezes ao dia. Os resultados do estudo revelaram que maior ganho de peso, taxa de conversão alimentar e taxa de sobrevivência foram observados em 30% de proteína alimentar. Enquanto isso, o conteúdo de umidade foi maior em peixes alimentados com 30% de PB, enquanto a proteína bruta mais alta foi registrada em peixes alimentados com 40% de PB. O menor conteúdo de gordura foi observado em rações com 32% de PB. O perfil de aminoácidos dos peixes revelou melhores resultados na ração com 30% de PB. Proteína total, glicose e globulina também foram maiores em peixes alimentados com ração com 30% de PB, enquanto a albumina foi mais alta com 40% de PB. Conclui-se que a ração com 30% de PB apresentou melhores resultados em termos de crescimento, perfil de aminoácidos e parâmetros sorológicos sem afetar a composição corporal dos peixes.

Insects and spiders on Acacia mangium (Fabaceae) saplings as bioindicators for the recovery of tropical degraded areas

Abstract Acacia mangium is a pioneer species with fast growth and frequently used in the recovery of degraded areas. The objectives were to evaluate insects and spiders, their ecological indices and interactions on A. mangium saplings in a tropical degraded area in recovering process. The experimental design was completely randomized with 24 replications, with treatments represented by the first and second years after A. mangium seedling planted. Numbers of leaves/branch, branches/sapling, and ground cover by A. mangium saplings, Hemiptera: Phenacoccus sp. and Pachycoris torridus; Hymenoptera: Tetragonisca angustula and Trigona spinipes, Brachymyrmex sp., Camponotus sp. and Cephalotes sp.; Blattodea: Nasutitermes sp. and Neuroptera: Chrysoperla sp.; abundance, species richness of pollinating insects, tending ants, and the abundance of Sternorrhyncha predators were greatest in the second year after planting. Numbers of Hemiptera: Aethalium reticulatum, Hymenoptera: Camponotus sp., Cephalotes sp., Polybia sp., T. angustula, T. spinipes, tending ants, pollinating insects, Sternorrhyncha predators and species richness of tending ants were highest on A. mangium saplings with greatest numbers of leaves or branches. The increase in the population of arthropods with ground cover by A. mangium saplings age increase indicates the positive impact by this plant on the recovery process of degraded areas.

Resumo Acacia mangium é uma espécie pioneira, de rápido crescimento e utilizada na recuperação de áreas degradadas. Os objetivos foram avaliar insetos e aranhas, seus índices ecológicos e interações com plantas de A. mangium em área tropical degradada em processo de recuperação. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 24 repetições, com os tratamentos representados pelos primeiro e segundo anos após a plantio de A. mangium. Os números de folhas/galhos, galhos/plantas e cobertura do solo por plantas de A. mangium, de Hemiptera: Phenacoccus sp. e Pachycoris torridus; Hymenoptera: Tetragonisca angustula e Trigona spinipes, Brachymyrmex sp., Camponotus sp. e Cephalotes sp.; Blattodea: Nasutitermes sp. e Neuroptera: Chrysoperla sp.; a abundância, riqueza de espécies de insetos polinizadores, formigas cuidadoras e a abundância de predadores de Sternorrhyncha foram maiores no segundo ano após o plantio. Os números de Hemiptera: Aethalium reticulatum, Hymenoptera: Camponotus sp., Cephalotes sp., Polybia sp., T. angustula, T. spinipes, formigas cuidadoras, insetos polinizadores, predadores de Sternorrhyncha e a riqueza de espécies de formigas cuidadoras foram maiores em plantas de A. mangium com maior altura e número de folhas ou galhos. O aumento populacional de artrópodes e da cobertura do solo com o processo de envelhecimento das plantas de A. mangium indicam impacto positivo dessa planta na recuperação de áreas degradadas.

Isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut under antibiotic-treated larval feeding

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Genetic variations and phylogenetic relationship of genus Uromastyx from Punjab Pakistan

Abstract During the present study, specimens were collected from selected sites of Cholistan desert and Kalabagh Game Reserve, Punjab province, Pakistan. Each captured specimen was tagged with voucher number and morphometric measurements were taken. The average snout to vent length was 172.559±1.40 mm and average weight was 92.1±1.30 g. The DNA of Uromastyx hardwickii was amplified and sequenced using 16S rRNA primer set. The obtained DNA sequence has shown reliable and clear species identification. After trimming ambiguous bases, the obtained 16S rRNA fragment was 520 bp while 16S rRNA fragments aligned with closely matched sequence from NCBI comprised of 510 bp. Closely matched sequences of genus Uromastyx were retrieved from NCBI in blast searches. Neighbour-joining tree of genus Uromastyx was constructed based on p-distance using MEGA X. The mean intraspecific variation was 0.095±0.01 while intraspecific variation was ranging from 0-1%. Similarly, interspecific variation of Uromastyx hardwikii with Saara asmussi, Uromastyx alfredschmidti, Uromastyx geyri, Uromastyx thomasi, Uromastyx alfredschmidti was 0-12%, 0-19%, 0-19%, 0-20%, 12-19% respectively. The newly produced DNA was submitted to NCBI and accession number was obtained (MW052563.1). Results of current study provided information about the molecular and morphological identification of Genus Uromastyx. In our recommendation, comprehensive molecular based identification of Pakistans reptiles is required to report any new or subspecies from country.

Resumo Durante o presente estudo, os espécimes foram coletados em locais selecionados do deserto do Cholistan e da Reserva de Caça de Kalabagh, província de Punjab, Paquistão. Cada espécime capturado foi etiquetado com o número do comprovante e medidas morfométricas foram realizadas. O comprimento médio do focinho à cloaca foi de 172,559 ± 1,40 mm, e o peso médio foi de 92,1 ± 1,30 g. O DNA de Uromastyx hardwickii foi amplificado e sequenciado usando o conjunto de primer 16S rRNA. A sequência de DNA obtida mostrou identificação de espécies confiável e clara. Após o corte de bases ambíguas, o fragmento de rRNA 16S obtido tinha 520 pb, enquanto os fragmentos de rRNA 16S alinhados com a sequência próxima do NCBI composta por 510 pb. Sequências semelhantes do gênero Uromastyx foram recuperadas do NCBI em pesquisas de explosão. A árvore de união de vizinhos do gênero Uromastyx foi construída com base na distância-p usando MEGA X. A variação intraespecífica média foi de 0,095 ± 0,01, enquanto a variação intraespecífica foi de 0-1%. Da mesma forma, a variação interespecífica de Uromastyx hardwikii com Saara asmussi, Uromastyx alfredschmidti, Uromastyx geyri, Uromastyx thomasi, Uromastyx alfredschmidti foi de 0-12%, 0-19%, 0-19%, 0-20%, 12-19%, respectivamente. O DNA recém-produzido foi submetido ao NCBI e o número de acesso foi obtido (MW052563.1). Os resultados do estudo atual forneceram informações sobre a identificação molecular e morfológica do Gênero Uromastyx. Em nossa recomendação, a identificação de base molecular abrangente de répteis do Paquistão é necessária para relatar qualquer nova ou subespécie do país.