Diferentes concentrações antibióticas adicionadas ao diluente de sêmen suíno / Different antibiotic concentrations added to the swine semen extender

Devido a contaminação bacteriana, utiliza-se antibióticos nos diluentes de sêmen para inibir o crescimento bacteriano durante a sua estocagem. Assim, este trabalho teve por objetivo determinar o limite de toxicidade de diferentes concentrações antibióticas da penicilina/estreptomicina adicionadas ao meio diluente do sêmen e investigar a influência sobre a motilidade espermática. Para isso, o sêmen de cinco reprodutores híbridos comerciais foi coletado uma vez por semana, durante nove semanas, através da técnica da mão enluvada. Cada ejaculado foi distribuído de forma igual entre todos os tratamentos, que consistiram em diferentes concentrações de solução de antibióticos, sendo: T1 = 0,0g/L (controle); T2 = 4,2g/L; e T3 = 12,6g/L. O sêmen diluído em água de coco em pó (ACP-103@) foi conservado por cinco dias e analisado nos dias: D0 (dia da coleta), D2 e D4 (último dia de conservação) quanto ao vigor e à motilidade espermática. Em D0, o sêmen conservado em diluente acrescido de 12,6g de solução antibiótica apresentou menor valor de vigor espermático em relação aos demais tratamentos (p<0,05). Já em D2 e D4, os tratamentos contendo antibióticos apresentaram resultados de vigor aquém dos obtidos no grupo controle (p<0,05). Em relação à motilidade espermática, os maiores percentuais de células móveis foram observados nas amostras de sêmen conservadas em ACP 0,0g/L (controle) quando comparados aos demais tratamentos (p<0,05). Conclui-se que as concentrações antibióticas utilizadas no estudo (4,2 e 12,6 g/L) mostraram efeitos tóxicos logo após a diluição do sêmen suíno, afetando de forma negativa parâmetros seminais durante a conservação a 17 °C.

Due to bacterial contamination, antibiotics are used in semen extenders to inhibit bacterial growth during storage. Thus, the present study aimed to determine the toxicity limit of different antibiotic concentrations of penicillin/streptomycin added to the semen extender and investigate the influence on sperm motility. For this purpose, semen from five commercial hybrid breeders was collected once a week for 9 weeks, using the gloved hand technique. Each ejaculate was distributed equally among all treatments, which consisted of different concentrations of antibiotic solution: T1 = 0.0g/L (control); T2 = 4.2g/L; T3 = 12.6g/L. The semen diluted in powdered coconut water (ACP-103@) was kept for 5 days and analyzed on the following days: D0 (collection day), D2, and D4 (last conservation day) for sperm vigor and motility. In D0, the semen preserved in the diluent added with 12.6 g of antibiotic solution showed a lower sperm vigor value compared to the other treatments (p<0.05). In D2 and D4, treatments containing antibiotics presented vigor results below those obtained in the control group (p<0.05). Regarding sperm motility, higher percentages of mobile cells were observed in semen samples conserved in ACP 0.0 g/L (control) when compared to the other treatments (p<0.05). It is concluded that the antibiotic concentrations used in the study (4.2 and 12.6 g/L) showed toxic effects soon after the swine semen, negatively affecting seminal parameters during storage at 17 °C.

Effect of adding anethole to the cryopreservation medium (powdered coconut water) on morphology, kinetics, and oxidative stress of buck sperm / Efeito da adição de anethole ao meio de criopreserção (água de coco em pó) na morfologia, cinética e estresse oxidativo do sêmen de bode

The quality of post-thawing goat sperm is critical to the success of artificial insemination protocols and may be influenced by extenders, cryoprotectants, and antioxidant substances. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effects of the antioxidant anethole on goat sperm diluted in preservation medium based on powdered coconut water (ACP-101c) and frozen. For that, each ejaculate was submitted to the following treatments: ACP-101c (control); control plus supplementation with 30, 300, or 2000 µg/ mL anethole. The samples were thawed and evaluated for morphology, kinetics, membrane integrity, and reactive oxygen species (ROS). The addition of anethole increased morphological abnormalities (P < 0.05), however, it did not affect sperm kinetics. Flow cytometry analysis showed that sperm cells cryopreserved with 300 µg/mL anethole had lower acrosome integrity than those cryopreserved in other treatments. Evaluation of oxidative stress revealed that cells stored in the presence of 2000 µg/mL anethole had small amounts of ROS when compared to those preserved in the control medium alone or supplemented with 300 µg/mL anethole (P < 0.05). After cryopreservation of sperm with 2000 µg/mL anethole, the highest percentage of viable sperm without ROS was observed (P < 0.05). In conclusion, despite reducing ROS levels, the supplementation of anethole in ACP-101c did not affect sperm kinetics or membrane integrity post-thawing, however, it did cause morphological damage to sperm.(AU)

A qualidade do espermatozoide caprino pós-descongelação é crítica para o sucesso dos protocolos de inseminação artificial e pode ser influenciada por extensores, crioprotetores e substâncias antioxidantes. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do antioxidante anetole sobre espermatozoides caprinos diluídos em meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP-101c) e congelados. Para tanto, cada ejaculado foi submetido aos seguintes tratamentos: ACP-101c (controle); controle mais suplementação com 30, 300 ou 2000 µg / mL de anetole. As amostras foram descongeladas e avaliadas quanto à morfologia, cinética, integridade de membranas e espécies reativas de oxigênio. A adição de anetole aumentou as anormalidades morfológicas (P < 0,05), no entanto, não afetou a cinética dos espermatozoides. A análise da citometria de fluxo mostrou que as células de esperma criopreservadas com 300 µg / mL anethole tinham integridade acrosma menor do que aquelas criopreservadas em outros tratamentos. A avaliação do estresse oxidativo revelou que as células armazenadas na presença de 2000 µg / mL anethole apresentaram pequenas quantidades de ROS quando comparadas às preservadas em meio de controle isoladamente ou suplementadas com 300 µg / mL anethole (P < 0,05). Após a criopreservação de espermatozoides com 2000 µg / mL anethole, observou-se a maior porcentagem de espermatozoides viáveis sem ROS (P < 0,05). A população com espermatozoides viáveis sem ROS foi maior quando utilizado 2.000 µg / mL (P < 0,05). Em conclusão, apesar de reduzir os níveis de ROS, a suplementação de anetole em ACP-101c não afetou a cinética espermática e a integridade da membrana pós-descongelação, entretanto, causou danos morfológicos nos espermatozoides.(AU)

Sêmen ovino e caprino imunossexado e diluído em meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP101/102c) / Ram and goat semen immunosexed and diluted in powdered coconut water-based preservation medium (ACP101/102c)

Sperm sexing aims to separate sperm populations in carriers of the "X" or "Y" chromosome. Currently, flow cytometry is a technique that allows greater accuracy; however, it causes structural changes in sperm, reduces viability, and has a high cost. As a result, other methods have been researched, including immunosexing, which uses monoclonal antibodies to detect sex-specific surface antigens. Thus, the objective of this study was to evaluate the immunosexing technique using a monoclonal antibody against sex-specific protein (HY) in the conservation of ram and goat semen in ACP101/102c. Ejaculates from five rams and five goats were collected with the aid of an artificial vagina; they were evaluated and submitted to the immunosexing protocol, according to the manufacturer's recommendations, using the Monoclonal Antibody Kit specific for mammalian sperm with "Y" chromosomes (HY; HY Biotechnology, Rio de Janeiro, RJ, Brazil). After sexing, the supernatant was resuspended in the cryopreservation diluent: ACP ram (ACP101/102c + 20% egg yolk + 7% glycerol) and ACP goat (ACP101/102c + 2.5% egg yolk + 7% glycerol), packaged in 0.25 mL straws, refrigerated at 4°C, stabilized for 30 min, frozen in liquid nitrogen vapor (-60°C) for 15 min, immersed in liquid nitrogen, and stored in cryogenic cylinders. The samples were evaluated in natura (T1), after immunosexing (T2) and after thawing (T3) for sperm motility subjectively using conventional microscopy (40x). Plasma membrane integrity (IMP) and sperm cell morphology were evaluated by the smear staining technique using eosin-nigrosine dye, and the percentages of healthy and morphologically defect spermatozoa were determined. In the evaluation of ram semen regarding sperm motility and IMP, no statistically significant differences were observed between treatments after sexing in the evaluation of absolute data (P > 0.05), with the difference being observed only between T1 and T2, and T3 (P < 0.05). Regarding the relative percentage and sperm morphology, no statistically significant differences were observed (P > 0.05). Regarding the evaluation of goat semen samples, the motility parameters were consistent with the technique submitted; however, the IMP data did not appear as expected, requiring further evaluation for a better assessment of the technique for this species. The data obtained from ram semen submitted to the immunosexing protocol, regarding the absolute evaluation of motility and IMP, demonstrated that the non-sexed semen (T1) was superior to the sexed treatments (T2 and T3); however, it is noteworthy that freezing started with approximately 50% of the cells, since the immunosexing technique results in a loss of viability of approximately 50% of the sperm, which corresponds to the ratio of sperm carrying the X chromosome. In addition, when the data in this study were transformed into relative values, no statistical differences were observed, indicating that the immunosexing protocol, as well as the freezing protocol, did not significantly affect the quality of ram sperm cells. In relation to the immunosexing of goat semen, future studies should be conducted in vitro to define a more appropriate protocol for the species and, in addition, in vivo studies should be performed to prove the quality of the technique. It was concluded that the immunosexing process using a monoclonal antibody against sex-specific protein (HY) associated with the use of powdered coconut water diluent (ACP101/102c) in the cryopreservation of semen proved to be efficient in the in vitro evaluation of ovine species.(AU)

Aspectos econômicos e avaliação do período de viabilidade de espermatozoides ovino imunossexados e diluídos em meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP-102c) / Economic aspects and evaluation of the viability period of immunosexed and diluted ram sperm in powdered coconut water conservation extender (ACP-102c)

Background: Sperm sexing is increasing in use because pre-determining the sex of the calf allows greater profitability and promotes significant gains in the productive systems that utilize the technique. Deployment of a low-cost and practical preservation methodol-ogy may further favor the cost-benefit ratio. Flow cytometry, the most commonly used sexing technique, has high costs and is very restricted. As an alternative, immunosexing has been studied, which uses sex-specific monoclonal antibodies. Thus, the objective of this study was to evaluate the immunosexing technique in conjunction with cryopreservation in ACP-102c and examine its economic aspects with regard to ram semen.Materials, Methods & Results: Ejaculates from two ram individuals were collected with the aid of an artificial vagina, evaluated, and submitted to the immunosexing protocol, according to the manufacturer’s recommendations, using the Monoclonal Antibody Kit specific for mammalian sperm with “Y” chromosomes (HY; HY Biotechnology, Rio de Janeiro-RJ, Brazil). After sexing, the supernatant was resuspended in the cryopreservation diluent: ACP (ACP-102c + 20% egg yolk + 7% glycerol), packaged in 0.25 mL straws, refrigerated to 4°C, stabilized for 30 min, frozen in liquid nitrogen vapors (-60°C) for 15 min, immersed in liquid nitrogen, and stored in cryogenic cylinders. The samples were thawed and evaluated for sperm kinetics both by using computerized semen analysis with SCA® software (Sperm Class Analyzer version 5.0) and subjectively comparing specimens from the two animals using conventional microscopy (40x). Plasma membrane integrity (IMP) and sperm cell morphology were evaluated by the smear staining technique...

Microencapsulation of hydrosoluble extract of babassu nut press cake / Microencapsulação do extrato hidrossolúvel da torta de amêndoasde babaçu

Orbignya phalerata Mart. has great socio-economic value, originating various products and by products; however, there are few studies about obtaining food products from of this raw material. In face of that reality, this study aimed to obtain powder extract from press cake of the babassu nut kernel, and to verify the influence of varying concentrations of Maltogill®10 and drying temperature on process yield through a factorial design, as well as to characterize the final product. Babassu nut used for pressing and acquisition of residual press cake and extract. Spray dryer was used to obtain the powder extract, which adopted a rotating central composite design (RCCD with 11 trials). The final product was characterized by analyses of moisture, solubility, hygroscopicity, water activity and bulk density. The experimental design showed significant influence (p ≤ 0.05) for the variables inlet temperature in the linear and quadratic models, focusing only on the linear term and the interaction between them, the model adjusted in planning was considered predictive; the best productivity obtained (80.37%), was for the temperature of 95°C with encapsulating agent of 18%. With respect to the powder product analysis, low moisture values, hygroscopicity, and density were observed, as solubility and water activity within the recommended parameters.

O babaçu tem grande valor socioeconômico, e dá origem a diversos produtos e subprodutos, todavia poucos estudos destinados a obtenção de produtos alimentícios são encontrados, diante disso este trabalho objetivou obter extrato em pó proveniente da torta de amêndoas de coco babaçu, por meio de um planejamento fatorial, verificar a influência das variáveis concentração de Maltogill®10 e temperatura de secagem sobre rendimento do processo, bem como, caracterizar o produto final. Foram utilizados amêndoas de coco babaçu, para prensagem, aquisição da torta residual e do extrato. Para obtenção do extrato em pó foi utilizado spray dryer, onde adotou-se um delineamento composto central rotacional (DCCR com 11 ensaios). O produto final foi caracterizado mediante análises de umidade, solubilidade, higroscopicidade, atividade de água e densidade aparente. O planejamento experimental mostrou influência significativa (p ≤ 0,05) para as variáveis temperatura de entrada nos modelos linear e quadrático, concentração no termo linear, e interação entre elas, o modelo ajustado no planejamento foi considerado preditivo, o melhor rendimento obtido (80,37%), foi para temperatura de 95ºC com 18% de agente encapsulante. Com relação a análises do produto em pó, notou-se baixos valores de umidade, higroscopicidade e densidade aparente, bem como solubilidade e atividade de água dentro dos parâmetros recomendados.

Microencapsulation of hydrosoluble extract of babassu nut press cake / Microencapsulação do extrato hidrossolúvel da torta de amêndoasde babaçu

Orbignya phalerata Mart. has great socio-economic value, originating various products and by products; however, there are few studies about obtaining food products from of this raw material. In face of that reality, this study aimed to obtain powder extract from press cake of the babassu nut kernel, and to verify the influence of varying concentrations of Maltogill®10 and drying temperature on process yield through a factorial design, as well as to characterize the final product. Babassu nut used for pressing and acquisition of residual press cake and extract. Spray dryer was used to obtain the powder extract, which adopted a rotating central composite design (RCCD with 11 trials). The final product was characterized by analyses of moisture, solubility, hygroscopicity, water activity and bulk density. The experimental design showed significant influence (p ≤ 0.05) for the variables inlet temperature in the linear and quadratic models, focusing only on the linear term and the interaction between them, the model adjusted in planning was considered predictive; the best productivity obtained (80.37%), was for the temperature of 95°C with encapsulating agent of 18%. With respect to the powder product analysis, low moisture values, hygroscopicity, and density were observed, as solubility and water activity within the recommended parameters.(AU)

O babaçu tem grande valor socioeconômico, e dá origem a diversos produtos e subprodutos, todavia poucos estudos destinados a obtenção de produtos alimentícios são encontrados, diante disso este trabalho objetivou obter extrato em pó proveniente da torta de amêndoas de coco babaçu, por meio de um planejamento fatorial, verificar a influência das variáveis concentração de Maltogill®10 e temperatura de secagem sobre rendimento do processo, bem como, caracterizar o produto final. Foram utilizados amêndoas de coco babaçu, para prensagem, aquisição da torta residual e do extrato. Para obtenção do extrato em pó foi utilizado spray dryer, onde adotou-se um delineamento composto central rotacional (DCCR com 11 ensaios). O produto final foi caracterizado mediante análises de umidade, solubilidade, higroscopicidade, atividade de água e densidade aparente. O planejamento experimental mostrou influência significativa (p ≤ 0,05) para as variáveis temperatura de entrada nos modelos linear e quadrático, concentração no termo linear, e interação entre elas, o modelo ajustado no planejamento foi considerado preditivo, o melhor rendimento obtido (80,37%), foi para temperatura de 95ºC com 18% de agente encapsulante. Com relação a análises do produto em pó, notou-se baixos valores de umidade, higroscopicidade e densidade aparente, bem como solubilidade e atividade de água dentro dos parâmetros recomendados.(AU)

Influência do meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP-102c) na manutenção da atividade mitocondrial de espermatozoides ovinos criopreservados / Influence of coconut powder water-based conservation medium (APC-102c) for maintaining mitochondrial activity of cryopreserved ram sperm

Background: Semen extenders are required to protect and preserve semen, and the development of suitable extenders iskey for artificial insemination. Although the use of Tris-based diluent is widespread, new diluents such as powdered coconut water have been developed for better sperm protection. One way to evaluate the effectiveness of diluents is throughmicroscopic analyses that evaluate sperm motility, vigor, and concentration. However, these analyses are limited, and maynot provide accurate results. New evaluation techniques have been studied, and one of the tests that can be used to addreliability to these analyses is mitochondrial activity evaluation, which can sum all the parameters, and provide a moreaccurate evaluation. Thus, the present study aimed to evaluate the efficacy of ACP-102c in cryopreserved ram semen.Materials, Methods & Results: Five semen samples were collected from two ram breeders using artificial vagina (n = 10).Each ejaculate was divided into the following two treatments: T1 - ACP-102c + 20% egg yolk + 7% glycerol and T2 - TRIS+ 20% egg yolk + 7% glycerol. Extended semen samples were then packed in 0.5 mL plastic straws, subjected through therefrigeration curve up to 4°C (0.35°C/min), and equilibrated for 2 h at 4°C. Subsequently, the straws were placed at 4 cmabove liquid nitrogen level (-60°C) for 15 min, immersed, and then finally stored in the liquid nitrogen at -196°C. Bothfresh and thawed samples were evaluated for total and progressive sperm motility using conventional microscopy (40x),and the same evaluator on each occasion. For plasma membrane integrity (IMP), the smear staining technique with theEosin-Nigrosin staining was used; 200 sperms were counted and classified as whole (unstained) and unhealthy (stained).Mitochondrial activity was evaluated using a cytochemical technique based on the oxidation of 3,3’-diaminobenzidine(DAB); 200 sperms were counted, and classified into four...

Influência do meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP-102c) na manutenção da atividade mitocondrial de espermatozoides ovinos criopreservados / Influence of coconut powder water-based conservation medium (APC-102c) for maintaining mitochondrial activity of cryopreserved ram sperm

Background: Semen extenders are required to protect and preserve semen, and the development of suitable extenders iskey for artificial insemination. Although the use of Tris-based diluent is widespread, new diluents such as powdered coconut water have been developed for better sperm protection. One way to evaluate the effectiveness of diluents is throughmicroscopic analyses that evaluate sperm motility, vigor, and concentration. However, these analyses are limited, and maynot provide accurate results. New evaluation techniques have been studied, and one of the tests that can be used to addreliability to these analyses is mitochondrial activity evaluation, which can sum all the parameters, and provide a moreaccurate evaluation. Thus, the present study aimed to evaluate the efficacy of ACP-102c in cryopreserved ram semen.Materials, Methods & Results: Five semen samples were collected from two ram breeders using artificial vagina (n = 10).Each ejaculate was divided into the following two treatments: T1 - ACP-102c + 20% egg yolk + 7% glycerol and T2 - TRIS+ 20% egg yolk + 7% glycerol. Extended semen samples were then packed in 0.5 mL plastic straws, subjected through therefrigeration curve up to 4°C (0.35°C/min), and equilibrated for 2 h at 4°C. Subsequently, the straws were placed at 4 cmabove liquid nitrogen level (-60°C) for 15 min, immersed, and then finally stored in the liquid nitrogen at -196°C. Bothfresh and thawed samples were evaluated for total and progressive sperm motility using conventional microscopy (40x),and the same evaluator on each occasion. For plasma membrane integrity (IMP), the smear staining technique with theEosin-Nigrosin staining was used; 200 sperms were counted and classified as whole (unstained) and unhealthy (stained).Mitochondrial activity was evaluated using a cytochemical technique based on the oxidation of 3,3-diaminobenzidine(DAB); 200 sperms were counted, and classified into four...(AU)

Elaboração e análise sensorial de amendoim doce e a entrada no mundo da pesquisa / Processing and sensory analysis of sweet peanut and entry in the world of research

Objetivamos com este trabalho realizar a produção e avaliação sensorial com teste de preferência pareada de duas formulações de amendoim doce e apresentar a pesquisa científica ás estudantes de ensino médio envolvidas no trabalho. A primeira formulação contava de 250 gramas de amendoim, 600 gramas de açúcar e 1000ml de H2O, e a segunda dos mesmos ingredientes mais 200g de chocolate em pó. Para estabelecer se existia ou não preferência entre as duas amostras foi aplicado à avaliação sensorial discriminativa, por meio do teste de comparação pareada escolha forçada, de aplicação bilateral. Foi constatado uma coloração escura, sabor doce e textura crocante do produto obtido, não havendo preferência entre o amendoim elaborado apenas com açúcar em relação ao amendoim elaborado com açúcar e chocolate em pó, assim as estudantes tiveram na prática a inserção no mundo da pesquisa.

Concentração de proteínas do plasma seminal e sua relação com a criopreservação do sêmen ovino em diferentes diluentes / Protein concentration of seminal plasma and their relation with cryopreservation of ram semen using differents extenders

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 coletas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes de trabalho. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL), e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos os diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superior ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Coconut Water Powder (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford ́s method. The eosin-nigrosin and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When criopreserved in ACP102c extender, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.

Concentração de proteínas do plasma seminal e sua relação com a criopreservação do sêmen ovino em diferentes diluentes / Protein concentration of seminal plasma and their relation with cryopreservation of ram semen using differents extenders

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 coletas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes de trabalho. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL), e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos os diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superior ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.(AU)

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Coconut Water Powder (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford ́s method. The eosin-nigrosin and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When criopreserved in ACP102c extender, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.(AU)

Powdered coconut water as preservant of semi-heavy cocks semen / Água de coco como preservante de sêmen de galos semipesados

This study aimed to evaluate the effect of powered coconut water as preservant of cocks semen in different times. The experimental method was completely randomized, with treatments constituted by different times (1, 5, 10 and 15 minutes) of powered coconut water as preservant of cocks semen (Rhode Island Red lineage with 30-weeks). After collect and use of powered coconut water as preservant, the semen samples were used for inseminated of breeders of same lineage and age (16 per treatment). 280 eggs were collected for evaluation of effects on chicks (70 eggs per treatment). Were evaluated the incubation yields, chick/egg relation and gastrointestinal tract development of chicks. The data collected were submitted for variance analysis and evaluated by Tukey test at 5% of significance. Differences (p 0.05) were observed in incubation yields, chick/egg relation and gastrointestinal tract development, with the exception (p>0.05) of oropharynx + oesophagus length and yolk sac weight. From these results, it was concluded that the powered coconut water can be used as preservation of cocks semen up to 15 minutes. Cells exposed more time to nutrients provided by the powdered coconut water showed eggs and chicks most heavier, and better results in the incubation yields and embryo development.(AU)

O objetivo com este estudo foi avaliar o efeito da água de coco como preservante do sêmen de galos em diferentes períodos. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, onde os tratamentos consistiam de diferentes períodos (1, 5, 10 e 15 minutos) de ação da água de coco como preservante do sêmen de galos (linhagem Rhode Island Red com 30 semanas). Após a coleta e submissão do sêmen a ação da água de coco, estas foram utilizadas para inseminação de 64 matrizes de mesma linhagem e idade (16 por tratamento). Foram coletados 280 ovos (70 ovos por tratamento) para avaliação dos efeitos da preservação do sêmen sobre a progênie. Foram avaliados os rendimentos de incubação, relação pinto/ovo e o desenvolvimento do trato gastrointestinal dos pintainhos. Os dados coletados foram submetidos à análise de variância e avaliados pelo teste de Tukey a 5% de significância. Diferenças (p 0,05) foram observadas nos resultados dos rendimentos de incubação, relação pinto/ovo e desenvolvimento do trato gastrointestinal, à exceção (p>0,05) dos resultados de comprimento da orofaringe + esôfago e peso do saco vitelino. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que a água de coco em pó pode ser utilizada como preservação do sêmen de galos até 15 minutos. As células expostas por mais tempo aos nutrientes da água de coco em pó proporcionaram ovos e pintos mais pesados, e melhores resultados nos rendimentos de incubação e desenvolvimento embrionário.(AU)

Powdered coconut water as preservant of semi-heavy cocks semen / Água de coco como preservante de sêmen de galos semipesados

This study aimed to evaluate the effect of powered coconut water as preservant of cocks semen in different times. The experimental method was completely randomized, with treatments constituted by different times (1, 5, 10 and 15 minutes) of powered coconut water as preservant of cocks semen (Rhode Island Red lineage with 30-weeks). After collect and use of powered coconut water as preservant, the semen samples were used for inseminated of breeders of same lineage and age (16 per treatment). 280 eggs were collected for evaluation of effects on chicks (70 eggs per treatment). Were evaluated the incubation yields, chick/egg relation and gastrointestinal tract development of chicks. The data collected were submitted for variance analysis and evaluated by Tukey test at 5% of significance. Differences (p 0.05) were observed in incubation yields, chick/egg relation and gastrointestinal tract development, with the exception (p>0.05) of oropharynx + oesophagus length and yolk sac weight. From these results, it was concluded that the powered coconut water can be used as preservation of cocks semen up to 15 minutes. Cells exposed more time to nutrients provided by the powdered coconut water showed eggs and chicks most heavier, and better results in the incubation yields and embryo development.

O objetivo com este estudo foi avaliar o efeito da água de coco como preservante do sêmen de galos em diferentes períodos. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, onde os tratamentos consistiam de diferentes períodos (1, 5, 10 e 15 minutos) de ação da água de coco como preservante do sêmen de galos (linhagem Rhode Island Red com 30 semanas). Após a coleta e submissão do sêmen a ação da água de coco, estas foram utilizadas para inseminação de 64 matrizes de mesma linhagem e idade (16 por tratamento). Foram coletados 280 ovos (70 ovos por tratamento) para avaliação dos efeitos da preservação do sêmen sobre a progênie. Foram avaliados os rendimentos de incubação, relação pinto/ovo e o desenvolvimento do trato gastrointestinal dos pintainhos. Os dados coletados foram submetidos à análise de variância e avaliados pelo teste de Tukey a 5% de significância. Diferenças (p 0,05) foram observadas nos resultados dos rendimentos de incubação, relação pinto/ovo e desenvolvimento do trato gastrointestinal, à exceção (p>0,05) dos resultados de comprimento da orofaringe + esôfago e peso do saco vitelino. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que a água de coco em pó pode ser utilizada como preservação do sêmen de galos até 15 minutos. As células expostas por mais tempo aos nutrientes da água de coco em pó proporcionaram ovos e pintos mais pesados, e melhores resultados nos rendimentos de incubação e desenvolvimento embrionário.

Perfil proteico do plasma seminal ovino e sua relação com a criopreservação nos diluentes TRIS e Água de Coco em Pó / Protein profile of ram seminal plasm and its relation relationship with cryopreservation in TRIS and Powdered Coconut Water extender

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 colheitas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas, para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes testados. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL) e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superiores ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.(AU)

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Powdered Coconut Water (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford's method. The eosin-nigrosine and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When cryopreserved in ACP102c, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.(AU)

Perfil proteico do plasma seminal ovino e sua relação com a criopreservação nos diluentes TRIS e Água de Coco em Pó / Protein profile of ram seminal plasm and its relation relationship with cryopreservation in TRIS and Powdered Coconut Water extender

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 colheitas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas, para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes testados. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL) e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superiores ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Powdered Coconut Water (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford's method. The eosin-nigrosine and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When cryopreserved in ACP102c, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.

Qualidade espermática durante a curva de resfriamento do sêmen suíno diluído em água de coco em pó visando sua criopreservação / Sperm quality during the cooling curve of swine semen diluted in coconut water extender aiming your cryopreservation

A criopreservação seminal apresenta baixos resultados produtivos. Objetivou-se testar a Água de Coco em Pó (ACP-103®) como diluente de ressuspensão após a descongelação seminal e avaliar a qualidade espermática durante a curva de resfriamento até a descongelação do sêmen. Para isso, o sêmen de 15 reprodutores foi coletado uma vez por semana, incubado a 30 oC por 15 minutos, e em seguida diluído em Beltsville Thawing Solution – BTS (controle) ou em ACP-103®, e submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi ressuspenso em seus respectivos diluentes e analisado quanto às características: vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionalidade da membrana. Durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor, motilidade espermática e funcionalidade da membrana. No entanto, a curva de resfriamento e o ACP-103® podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática.

Semen cryopreservation is associated with low productivity results. This study aimed to test the Coconut Water Powder (ACP®-103) as a ressuspension diluent after thawing semen, also evaluate sperm quality during the cooling curve until thawing of the semen. For this, the semen was collected from 15 boars once a week, incubated at 30 °C for 15 minutes, and afterwards, the samples were diluted in the diluent Beltsville Thawing Solution – BTS (Control) or ACP-103®, and subjected to a slow cooling curve, where the force and the motility were analyzed in each step. The thawed semen was ressuspended in its respective solvents and analyzed in the characteristics of vigor, motility, vitality, acrosome integrity and functionality of the membrane. During the analysis of vigor and motility that make up the cooling curve, and thawing, for analysis of vitality and intact acrosomal membrane, it was observed that there was no significant difference between treatments. Besides, after thawing, the BTS showed better results of sperm vigor, sperm motility and membrane functionality. However, the cooling curve and coconut water powder can be used in the protocol for cryopreservation of boar semen, as both ensured quality of sperm viability that may be used in artificial insemination.

Qualidade espermática durante a curva de resfriamento do sêmen suíno diluído em água de coco em pó visando sua criopreservação / Sperm quality during the cooling curve of swine semen diluted in coconut water extender aiming your cryopreservation

A criopreservação seminal apresenta baixos resultados produtivos. Objetivou-se testar a Água de Coco em Pó (ACP-103®) como diluente de ressuspensão após a descongelação seminal e avaliar a qualidade espermática durante a curva de resfriamento até a descongelação do sêmen. Para isso, o sêmen de 15 reprodutores foi coletado uma vez por semana, incubado a 30 oC por 15 minutos, e em seguida diluído em Beltsville Thawing Solution BTS (controle) ou em ACP-103®, e submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi ressuspenso em seus respectivos diluentes e analisado quanto às características: vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionalidade da membrana. Durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor, motilidade espermática e funcionalidade da membrana. No entanto, a curva de resfriamento e o ACP-103® podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática.(AU)

Semen cryopreservation is associated with low productivity results. This study aimed to test the Coconut Water Powder (ACP®-103) as a ressuspension diluent after thawing semen, also evaluate sperm quality during the cooling curve until thawing of the semen. For this, the semen was collected from 15 boars once a week, incubated at 30 °C for 15 minutes, and afterwards, the samples were diluted in the diluent Beltsville Thawing Solution BTS (Control) or ACP-103®, and subjected to a slow cooling curve, where the force and the motility were analyzed in each step. The thawed semen was ressuspended in its respective solvents and analyzed in the characteristics of vigor, motility, vitality, acrosome integrity and functionality of the membrane. During the analysis of vigor and motility that make up the cooling curve, and thawing, for analysis of vitality and intact acrosomal membrane, it was observed that there was no significant difference between treatments. Besides, after thawing, the BTS showed better results of sperm vigor, sperm motility and membrane functionality. However, the cooling curve and coconut water powder can be used in the protocol for cryopreservation of boar semen, as both ensured quality of sperm viability that may be used in artificial insemination.(AU)

QUALIDADE ESPERMÁTICA DURANTE A CURVA DE RESFRIAMENTO DO SÊMEN SUÍNO DILUÍDO EM ÁGUA DE COCO EM PÓ VISANDO SUA CRIOPRESERVAÇÃO

Abstract Semen cryopreservation is associated with low productivity results. This study aimed to test the Coconut Water Powder (ACP®-103) as a ressuspension diluent after thawing semen, also evaluate sperm quality during the cooling curve until thawing of the semen. For this, the semen was collected from 15 boars once a week, incubated at 30 ºC for 15 minutes, and afterwards, the samples were diluted in the diluent Beltsville Thawing Solution - BTS (Control) or ACP-103®, and subjected to a slow cooling curve, where the force and the motility were analyzed in each step. The thawed semen was ressuspended in its respective solvents and analyzed in the characteristics of vigor, motility, vitality, acrosome integrity and functionality of the membrane. During the analysis of vigor and motility that make up the cooling curve, and thawing, for analysis of vitality and intact acrosomal membrane, it was observed that there was no significant difference between treatments. Besides, after thawing, the BTS showed better results of sperm vigor, sperm motility and membrane functionality. However, the cooling curve and coconut water powder can be used in the protocol for cryopreservation of boar semen, as both ensured quality of sperm viability that may be used in artificial insemination.

Resumo A criopreservação seminal apresenta baixos resultados produtivos. Objetivou-se testar a Água de Coco em Pó (ACP-103®) como diluente de ressuspensão após a descongelação seminal e avaliar a qualidade espermática durante a curva de resfriamento até a descongelação do sêmen. Para isso, o sêmen de 15 reprodutores foi coletado uma vez por semana, incubado a 30 ºC por 15 minutos, e em seguida diluído em Beltsville Thawing Solution - BTS (controle) ou em ACP-103®, e submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi ressuspenso em seus respectivos diluentes e analisado quanto às características: vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionalidade da membrana. Durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor, motilidade espermática e funcionalidade da membrana. No entanto, a curva de resfriamento e o ACP-103® podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática.

Congelação do sêmen de pequenos ruminantes sem uso de gema de ovo utilizando bases vegetais em substituição à gema de ovo / Small ruminants sperm freezing without egg yolk using vegetable bases instead of egg yolk

Na conservação seminal é necessária a utilização de diluentes que forneçam nutrientes e protejam as células espermáticas contra o choque térmico. Os aditivos de origem animal, como a gema de ovo e o leite, amplamente empregados na preservação do sêmen, representam um risco potencial de contaminação. Com o intuito de reduzir esses impactos quanto ao uso de substâncias de origem animal, esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos acerca da utilização de diluentes para congelação do sêmen de pequenos ruminantes livres de gema de ovo, um diluente constituído 100% por produtos de origem vegetal.(AU)

For semen conservation, it is necessary to use extenders that provide nutrients and protect the spermatozoa against thermal shock. Animal source additives, such as egg yolk and milk, widely used in semen preservation, represent a potential contamination risk. To reduce impacts related to the use of animal origin substances, this review aimed to address the main points about the use of extenders for small ruminant sperm freezing free of egg yolk, an extender composed by 100% vegetable origin products.(AU)

Congelação do sêmen de pequenos ruminantes sem uso de gema de ovo utilizando bases vegetais em substituição à gema de ovo / Small ruminant’s sperm freezing without egg yolk using vegetable bases instead of egg yolk

Na conservação seminal é necessária a utilização de diluentes que forneçam nutrientes e protejam as células espermáticas contra o choque térmico. Os aditivos de origem animal, como a gema de ovo e o leite, amplamente empregados na preservação do sêmen, representam um risco potencial de contaminação. Com o intuito de reduzir esses impactos quanto ao uso de substâncias de origem animal, esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos acerca da utilização de diluentes para congelação do sêmen de pequenos ruminantes livres de gema de ovo, um diluente constituído 100% por produtos de origem vegetal.

For semen conservation, it is necessary to use extenders that provide nutrients and protect the spermatozoa against thermal shock. Animal source additives, such as egg yolk and milk, widely used in semen preservation, represent a potential contamination risk. To reduce impacts related to the use of animal origin substances, this review aimed to address the main points about the use of extenders for small ruminant sperm freezing free of egg yolk, an extender composed by 100% vegetable origin products.