Gas chromatography-mass spectrometry analysis of variations in the essential leaf oil of 6 Eucalyptus Species and allelopathy of mechanism 1,8-cineole / Análise por cromatografia gasosa-espectrometria de variações no óleo essencial de folhas de seis espécies de eucalipto e alelopatia de componentes principais

ABSTRACT: The Eucalyptus plant releases allelopathic chemicals into the environment mostly through the essential oils volatilized from the leaves. This study discussed the composition of the leaf oils of few seven-year-old varieties like Eucalyptus pellita (E. pel), Eucalyptus camaldulensis (E. cama), Eucalyptus grandis (E. gra), Eucalyptus dunni (E. dun), Eucalyptus saligna (E. sal), and E. grandis × E. urophylla (E. gra×E. uro) and three-year-old E. grandis × E. urophylla (E. gra × E. uro (three)). It determined the allelopathic mechanism and the types of chemical components playing the leading role. Essential oil was obtained by hydrodistillation and analyzed by the Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) method. In order to determine the effect of allelopathy, seed germination experiments were carried out at different concentrations (10-100 mL/L) of the E. Gra × E. uro leaf oil (EO) and the major components. The wheat seeds germinated by adding 1,8-cineole were used to determine the activity of α-amylase. Moreover, the mRNA expression of α-amylase in seeds was studied. The major chemical class in the essential oil was oxygenated monoterpene; 1,8-cineole (20.2-67.5%) displayed the highest content. Other substances that were high in content and ubiquitous included α-pinene (0.3-21.8%), α-terpineol (0.44-19.24%), and borneol (0.81-3.05%). The four chemical constituents and EO influenced the germination and growth of the three plants. Among them, 1,8-cineole exhibited the strongest inhibitory effect. The α-amylase activity of the 1,8-cineole-treated wheat seeds had decreased significantly. Molecular evidence suggested that 1,8-cineole decreased the α-amylase gene (AMY) expression.

RESUMO: A planta de eucalipto libera substâncias químicas alelopáticas no ambiente principalmente através dos óleos essenciais volatilizados das folhas. Este estudo teve como objetivo discutir a composição dos óleos foliares de algumas variedades com sete anos de idade como Eucalyptus pellita (E. pel), Eucalyptus camaldulensis (E. cama), Eucalyptus grandis (E. gra), Eucalyptus dunni (E. dun ), Eucalyptus saligna (E. sal) e E. grandis × E. urophylla (E. gra× E. uro) e E. grandis × E. urophylla (E. gra × E. uro(três )). Também pretendeu-se determinar o mecanismo alelopático e os tipos de componentes químicos que desempenham o papel principal. O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação e analisado pelo método de Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massa (GC-MS). Para determinar o efeito da alelopatia, experimentos de germinação de sementes foram realizados em diferentes concentrações (10-100 mL/L) do óleo foliar de E. Gra × E. uro (OE) e dos componentes majoritários. As sementes de trigo germinadas pela adição de 1,8-cineol foram usadas para determinar a atividade da α-amilase. Além disso, a expressão de mRNA de α-amilase em sementes também foi estudada.: A principal classe química do óleo essencial foi o monoterpeno oxigenado; O 1,8-cineol (20,2-67,5%) apresentou o maior teor. Outras substâncias que eram de alto teor e onipresentes incluíam α-pineno (0,3-21,8%), α-terpineol (0,44-19,24%) e borneol (0,81-3,05%). Os quatro constituintes químicos e o OE influenciaram a germinação e o crescimento das três plantas. Entre eles, o 1,8-cineol exibiu o efeito inibitório mais forte. A atividade de α-amilase das sementes de trigo tratadas com 1,8-cineol diminuiu significativamente. Evidências moleculares sugeriram que o 1,8-cineol diminuiu a expressão do gene α-amilase (AMY).

Gas chromatography-mass spectrometry analysis of variations in the essential leaf oil of 6 Eucalyptus Species and allelopathy of mechanism 1, 8-cineole / Análise por cromatografia gasosa-espectrometria de variações no óleo essencial de folhas de seis espécies de eucalipto e alelopatia de componentes principais

The Eucalyptus plant releases allelopathic chemicals into the environment mostly through the essential oils volatilized from the leaves. This study discussed the composition of the leaf oils of few seven-year-old varieties like Eucalyptus pellita (E. pel), Eucalyptus camaldulensis (E. cama), Eucalyptus grandis (E. gra), Eucalyptus dunni (E. dun), Eucalyptus saligna (E. sal), and E. grandis × E. urophylla (E. gra×E. uro) and three-year-old E. grandis × E. urophylla (E. gra × E. uro (three)). It determined the allelopathic mechanism and the types of chemical components playing the leading role. Essential oil was obtained by hydrodistillation and analyzed by the Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) method. In order to determine the effect of allelopathy, seed germination experiments were carried out at different concentrations (10-100 mL/L) of the E. Gra × E. uro leaf oil (EO) and the major components. The wheat seeds germinated by adding 1,8-cineole were used to determine the activity of α-amylase. Moreover, the mRNA expression of α-amylase in seeds was studied. The major chemical class in the essential oil was oxygenated monoterpene; 1,8-cineole (20.2-67.5%) displayed the highest content. Other substances that were high in content and ubiquitous included α-pinene (0.3-21.8%), α-terpineol (0.44-19.24%), and borneol (0.81-3.05%). The four chemical constituents and EO influenced the germination and growth of the three plants. Among them, 1,8-cineole exhibited the strongest inhibitory effect. The α-amylase activity of the 1,8-cineole-treated wheat seeds had decreased significantly. Molecular evidence suggested that 1,8-cineole decreased the α-amylase gene (AMY) expression

A planta de eucalipto libera substâncias químicas alelopáticas no ambiente principalmente através dos óleos essenciais volatilizados das folhas. Este estudo teve como objetivo discutir a composição dos óleos foliares de algumas variedades com sete anos de idade como Eucalyptus pellita (E. pel), Eucalyptus camaldulensis (E. cama), Eucalyptus grandis (E. gra), Eucalyptus dunni (E. dun ), Eucalyptus saligna (E. sal) e E. grandis × E. urophylla (E. gra× E. uro) e E. grandis × E. urophylla (E. gra × E. uro(três )). Também pretendeu-se determinar o mecanismo alelopático e os tipos de componentes químicos que desempenham o papel principal. O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação e analisado pelo método de Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massa (GC-MS). Para determinar o efeito da alelopatia, experimentos de germinação de sementes foram realizados em diferentes concentrações (10-100 mL/L) do óleo foliar de E. Gra × E. uro (OE) e dos componentes majoritários. As sementes de trigo germinadas pela adição de 1,8-cineol foram usadas para determinar a atividade da α-amilase. Além disso, a expressão de mRNA de α-amilase em sementes também foi estudada.: A principal classe química do óleo essencial foi o monoterpeno oxigenado; O 1,8-cineol (20,2-67,5%) apresentou o maior teor. Outras substâncias que eram de alto teor e onipresentes incluíam α-pineno (0,3-21,8%), α-terpineol (0,44-19,24%) e borneol (0,81-3,05%). Os quatro constituintes químicos e o OE influenciaram a germinação e o crescimento das três plantas. Entre eles, o 1,8-cineol exibiu o efeito inibitório mais forte. A atividade de α-amilase das sementes de trigo tratadas com 1,8-cineol diminuiu significativamente. Evidências moleculares sugeriram que o 1,8-cineol diminuiu a expressão do gene α-amilase (AMY).

Evaluation of antibacterial and antioxidant activity of purple araçá essential oil (Psidium rufum, Myrtaceae) / Avaliação das atividades antibacteriana e antioxidante do óleo essencial do araçá-roxo (Psidium rufum, Myrtaceae)

The aim of this study was to evaluate the antibacterial and antioxidant activities of essential oil (EO) from fresh leaves of Psidium rufum. The EO was extracted by hydrodistillation and identified by gas chromatography coupled to mass spectrometry. The antibacterial activity was evaluated by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). Antioxidant activity was determined by ß-carotene/linoleic acid co-oxidation system, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging and iron reduction methods. Hydrocarbon sesquiterpenes were the predominant class, indicating 1,8 cineole, α-longipinene as major. The EO was tested against the bacteria Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa (MIC = 2,500 µg/mL and MBC = 20,000 µg/mL); Enterococcus faecalis (MIC = 2,500µg/mL and MBC > 20,000µg/mL) and Escherichia coli (MIC > 20,000µg/mL and MBC > 20,000µg/mL). The EO showed antioxidant potential due to ß-carotene/linoleic acid co-oxidation system, with 76.63% of oxidation inhibition (1.0mg/mL) and due to the iron reduction power (5,38 µmol Fe 2+ /mg sample). The results are promising in recommending this species for the development of food, cosmetic and pharmaceutical products.

O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades antibacteriana e antioxidante do óleo essencial (OE) das folhas frescas de Psidium rufum. O OE foi extraído por hidrodestilação e identificado por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. Foi avaliada a atividade antibacteriana, determinando-se a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM). A atividade antioxidante foi determinada pelo sistema de co-oxidação ß-caroteno/ácido linoleico, pelos métodos de sequestro do radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazil e de redução do ferro. Sesquiterpenos hidrocarbonetos foram a classe predominante, indicando 1,8 cineol, α-longipineno como majoritário. O OE foi testado contra as bactérias Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa (CIM = 2,500µg/mL e CBM = 20.000µg/mL); Enterococcus faecalis (CIM=2,500µg/mL e CBM > 20.000µg/mL) e Escherichia coli (CIM > 20.000µg/mL e CBM > 20.000µg/mL). O OE apresentou potencial antioxidante pelo sistema co-oxidação ß-caroteno/ácido linoleico com 76,63% de inibição da oxidação (1,0mg/mL) e pelo poder de redução de ferro (5,38 µmol Fe2+/mg amostra). Os resultados são promissores em indicar essa espécie para o desenvolvimento de produtos alimentícios, cosméticos e farmacêuticos.

Effects of nanoparticles treatments and salinity stress on the genetic structure and physiological characteristics of Lavandula angustifolia Mill / Efeitos de tratamentos com nanopartículas e estresse salino na estrutura genética e características fisiológicas de Lavandula angustifolia Mill

Lavandula angustifolia Mill. is an aromatic herb of the Lamiaceae family, which has been widely used by humans for many centuries. In the current study, we treated L. angustifolia samples with various concentrations of ZnO and Fe2O3 nanoparticles in the presence/ absence of NaCl salinity stress to evaluate the composition of essential oils, genetic structure, glandular trichome density and cellular Zn2+ and Fe2+ contents. We used Inter Simple Sequence Repeat (ISSR) molecular markers to investigate the parameters of genetic diversity among the treated samples. Furthermore, the hydro-distilled essential oil from the aerial parts of the samples was subjected to GC and GC / MS analyses. SPSS ver. 15, PAST, PopGene, and GenAlex software were employed for statistical analyses. Intracellular concentrations of Fe2+ and Zn2+ differed under various concentrations of nanoparticles and salinity treatments, and a significant negative correlation was observed between these elements, however, nanoparticles treatment significantly increased intracellular concentrations of iron and zinc ions. We found four types of glandular trichomes on the surface of the leaf of the treated plants, and the ANOVA test revealed a significant variation for most of them. Meanwhile, the short-stalked capitate trichomes were the most frequent in most of the evaluated samples. The main and trace essential oil compounds were the same among the treated plants, meanwhile, their percentages varied among the samples. The percentages of 1,8- cineole and camphor decreased in treated plants, which affects the quality of essential oils. Parameters of genetic diversity differed among the treated samples. Furthermore, the AMOVA test demonstrated a significant genetic variation that its substantial part belonged to among treated samples. These findings revealed that the treatment of nanoparticles and salinity stress strongly influenced the genetic diversity, trichomes density, iron and zinc ions content in lavender plants.

Lavandula angustifolia Mill. é uma erva aromática da família Lamiaceae, que tem sido amplamente utilizada pelo homem há muitos séculos. No presente estudo, tratamos amostras de L. angustifolia com várias concentrações de nanopartículas de ZnO e Fe2O3 na presença/ausência de estresse salino de NaCl para avaliar a composição de óleos essenciais, estrutura genética, densidade de tricomas glandulares e teores celulares de Zn2+ e Fe2+. Usamos marcadores moleculares Inter Simple Sequence Repeat (ISSR) para investigar os parâmetros de diversidade genética entre as amostras tratadas. Além disso, o óleo essencial hidrodestilado das partes aéreas das amostras foi submetido às análises de GC e GC/MS. SPSS ver. 15, os softwares PAST, PopGene e GenAlex foram empregados para análises estatísticas. As concentrações intracelulares de Fe2+ e Zn2+ diferiram sob várias concentrações de nanopartículas e tratamentos de salinidade, e uma correlação negativa significativa foi observada entre esses elementos. No entanto, o tratamento com nanopartículas aumentou significativamente as concentrações intracelulares de íons de ferro e zinco. Encontramos quatro tipos de tricomas glandulares na superfície da folha das plantas tratadas, e o teste ANOVA revelou uma variação significativa para a maioria deles. Enquanto isso, os tricomas capitados de haste curta foram os mais frequentes na maioria das amostras avaliadas. Os compostos do óleo essencial principal e traço foram os mesmos entre as plantas tratadas, entretanto, seus percentuais variaram entre as amostras. As porcentagens de 1,8-cineol e cânfora diminuíram nas plantas tratadas, o que afeta a qualidade dos óleos essenciais. Os parâmetros de diversidade genética diferiram entre as amostras tratadas. Além disso, o teste AMOVA demonstrou uma variação genética significativa que sua parte substancial pertencia entre as amostras tratadas. Esses achados revelaram que o tratamento de nanopartículas e o estresse salino influenciaram fortemente a diversidade genética, densidade de tricomas, teor de íons ferro e zinco em plantas de lavanda.

Antimicrobial activity and chemical characterization of Laurel essential oil / Atividade antimicrobiana e caracterização química do óleo essencial de Louro / Actividad antimicrobiana y caracterización química del aceite esencial de Laurel

The factors that arouse interest in the study of essential oils as biocidal agents are numerous, such as the fact that they have antibacterial, antifungal, insecticidal, antioxidant, anti-inflammatory and larvicidal properties. The objective of this work was to evaluate the antimicrobial activity, in vitro, of the laurel (Laurus nobilis L) essential oil on the growth of pathogenic bacteria Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028 and Staphylococcus aureus ATCC 25923, at different exposure times, as well as to perform the chemical characterization. Twenty compounds were identified and quantified, representing 96.57% of the total composition. The class of oxygenated monoterpenes represented the majority class of the essential oil, with 1,8-cineol (33.8%) as the substance found in greater quantity, followed by linalool (17.79%). The third constituent in greater quantity was sabinene (12.23%), belonging to the group of monoterpene hydrocarbons. Terpinyl acetate (9.41%) was also considered to be quantitatively representative. Laurel essential oil showed bacteriostatic activity against S. Typhimurium ATCC 14028 and S. aureus ATCC 25923.(AU)

Os fatores que despertam interesse no estudo dos óleos essenciais como agentes biocidas são inúmeros, como o fato de possuírem propriedades antibacteriana, antifúngica, inseticida, antioxidante, antiinflamatória e larvicida. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana, in vitro, do óleo essencial de louro (Laurus nobilis L) sobre o crescimento das bactérias patogênicas Salmonella enterica sorovar Typhimurium ATCC 14028 e Staphylococcus aureus ATCC 25923, em diferentes tempos de exposição, assim como realizar a caracterização química do óleo. Vinte compostos foram identificados e quantificados, representando 96,57% da composição total. A classe dos monoterpenos oxigenados representou a classe majoritária do óleo essencial, sendo o 1,8-cineol (33,8%) a substância encontrada em maior quantidade, seguido do linalol (17,79%). O terceiro constituinte em maior quantidade foi o sabineno (12,23%), pertencente ao grupo dos hidrocarbonetos monoterpênicos. O acetato de terpinila (9,41%) também foi considerado quantitativamente representativo. O óleo essencial de louro apresentou atividade bacteriostática contra S. Typhimurium ATCC 14028 e S. aureus ATCC 25923.(AU)

Los factores que despiertan interés en el estudio de los aceites esenciales como agentes biocidas son innumerables, como el hecho de que tienen propiedades antibacterianas, anti fúngicas, insecticidas, antioxidantes, antiinflamatorias y larvicidas. El objetivo de este trabajo ha sido evaluar la actividad antimicrobiana, in vitro, del aceite esencial de laurel (Laurus nobilis L) sobre el crecimiento de bacterias patógenas Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028 y Staphylococcus aureus ATCC 25923, en diferentes momentos de exposición, así como realizar la caracterización química del aceite. Se identificaron y cuantificaron veinte compuestos, que representan el 96,57% de la composición total. La clase de mono terpenos oxigenados representó la clase principal de aceite esencial, siendo el 1,8-cineol (33,8%) la sustancia que se encuentra en mayor cantidad, seguida del linalol (17,79%). El tercer constituyente en mayor cantidad fue el sabineno (12,23%), perteneciente al grupo de los hidrocarburos monoterpénicos. El acetato de terpinilo (9,41%) también se consideró cuantitativamente representativo. El aceite esencial de laurel mostró actividad bacteriostática contra S. Typhimurium ATCC 14028 y S. aureus ATCC 25923.(AU)

Chemical characterization of Lavandula dentata L. essential oils grown in Uberaba-MG / Caracterização química de óleos essenciais de Lavandula dentata L. cultivados em Uberaba-MG

The essential oils of the different parts of Lavandula dentata L. (inflorescences and aerial part without inflorescences) collected in the city of Uberaba (minas Gerais State) were obtained by hydro distillation, and their chemical composition was determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry and compared to the chemical composition of essential oil of Lavandula hybrida and Lavandula officinalis. It was observed that the essential oils of the studied species have varied chemical composition and are composed mainly of monoterpenes. The essential oils of L. hybrida and L. officinalis showed a higher concentration of linalool and linaline acetate, while L. dentata L. presented higher concentration of fenchone, eucalyptol and camphor. Results indicate that the essential oil composition of L. dentata L. grown in Uberaba is similar to those produced in Curitiba - PR, providing a promising perspective for the cultivation and extraction of essential oils of this species in Minas Gerais.(AU)

Os óleos essenciais das diferentes partes de Lavandula dentata L. (inflorescências e parte aérea sem inflorescência) coletados em Uberaba - MG foram obtidos por hidrodestilação, e sua composição química foi determinada por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas e comparada à composição química de óleo essencial de Lavandula hybrida e Lavandula officinalis. Observou-se que os óleos essenciais das espécies estudadas possuem composição química variada e são compostos, principalmente, por monoterpenos. Os óleos essenciais de L. hybrida e L. officinalis apresentaram maior concentração de linalol e acetato de linalina, enquanto L. dentata L. apresentou maior concentração de fenchona, eucaliptol e cânfora. Os resultados indicam que os óleos essenciais de L. dentata L. cultivada em Uberaba são semelhantes aos produzidos em Curitiba - PR, tornando-se uma perspectiva promissora para o cultivo e extração de óleos essenciais desta espécie em Minas Gerais.(AU)

In vitro efficacy of essential oils with different concentrations of 1, 8-cineole against Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Eficácia in vitro de óleos essenciais com diferentes concentrações de 1, 8-cineol contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus

The aim of this study was to evaluate the acaricidal activity of essential oils from three species of plants with intermediary concentrations of 1,8-cineole against the tick species Rhipicephalus (Boophilus) microplus. For this purpose, five serial concentrations (100.0, 50.0, 25.0, 12.5, 6.2 mg/mL) of essential oils from Mesosphaerum suaveolens (L.) Kuntze, Ocimum gratissimum L. and Alpinia zerumbet (Pers.) B. L. Burtt & R. M. Sm. were used on larval packet and adult immersion tests. The essential oils were analysed by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS) and gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID), being detected 35.8, 24.7 and 24.0% of 1.8-cineol in the oils of M. suaveolens, O. gratissimum and A. zerumbet, respectively. The lethal concentration (LC 50) of each oil for larvae and engorged females was calculated through Probit analysis. All essential oils showed high efficacy ( 95.0%) on engorged females at the 100.0 mg/mL concentration. In regards to larvae, O. gratissimum (LC 50 = 11.9 mg/mL) was the most potent, followed by the A. zerumbet (LC50 = 19.7 mg/mL) and the M. suaveolens (LC50 = 51.6 mg/mL) essential oils. These results show that other compounds interfere with 1,8-cineole action.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade acaricida de óleos essenciais de três espécies de plantas com concentrações intermediárias de 1,8-cineol contra o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus . Dessa forma, cinco concentrações diferentes (100,0; 50,0; 25,0; 12,5; 6,2 mg/mL) de óleos essenciais de Mesosphaerum suaveolens (L.) Kuntze , Ocimum gratissimum L. e Alpinia zerumbet (Pers.) B. L. Burtt & R. M. Sm. foram avaliadas pelos testes de pacote de larvas e de imersão de adultos. Os óleos essenciais foram analisados pela cromatografia gasosa acoplada a espectometria de massa (GC/MS) e cromatografia gasosa acoplada a detector de ionização de chama (GC-FID), sendo detectados 35,8, 24,7 e 24,0% de 1,8-cineol nos óleos de M. suaveolens, O. gratissimum e A. zerumbet , respectivamente. A concentração letal (CL50) de cada óleo essencial para larvas e fêmeas ingurgitadas foi calculada por meio da análise de Probit. Todos os óleos essenciais na concentração de 100,0 mg/mL apresentaram elevada eficácia ( 95,0%) sobre fêmeas ingurgitadas. Com relação as larvas, o óleo essencial de O. gratissimum (CL50 = 11,9 mg/mL) foi o mais potente, seguido pelos óleos de A. zerumbet (LC50 = 19,7 mg/mL) e M. suaveolens (LC50 = 51,6 mg/mL). Estes resultados demonstram que outros compostos interferem na eficácia de 1,8-cineol.(AU)

Chemical composition and efficacy of essential oil and ethanol extract of Alpinia zerumbet on Staphylococcus aureus / Composição química e eficácia do óleo essencial e do extrato etanólico de Alpinia zerumbet sobre Staphylococcus aureus

The present work describes the antibacterial activity of the essential oil and the ethanol extract from leaves of Alpinia zerumbet (colônia) on Staphylococcus aureus strains isolated from cows with subclinical mastitis and standard strains ATCC 29213 and ATCC 25923, using the agar diffusion method. Ten treatments containing different concentrations of essential oil and ethanol extract (100.0; 50.0; 25.0; 12.5 and 6.3 mg.mL-1) and the control group (50% ethyl alcohol and 1% Tween solutions) were used for antimicrobial testing. The major constituents of the essential oil were  p-cimeno (32.72%), 1.8-cineol (24.05%) and 4-terpineol (20.23%), which were determined by gas chromatographymass spectrometry and gas chromatography - flame ionization detector (CG-MS/FID). Ellagic acid and three flavonoids (rutin, quercetin and campferol) were detected in the ethanol extract by means of high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-PDA). All strains showed sensitivity to the treatments with essential oil and the ethanol extract. The best response was obtained with A. zerumbet essential oil at a 100 mg.mL-1, showing complete inhibition of bacterial growth. These results demonstrate the antibacterial potential of essential oil and ethanol extract of A. zerumbet in the control of bovine mastitis.

O presente trabalho descreve a atividade antibacteriana do óleo essencial e do extrato etanólico das folhas de Alpinia zerumbet (colônia) sobre cepas de Staphylococcus aureus isoladas de vacas com mastite subclínica e cepas padrão ATCC 29213 e ATCC 25923, por meio do método de difusão em ágar. Foram utilizados 10 tratamentos contendo diferentes concentrações do óleo essencial e do extrato etanólico (100,0; 50,0; 25,0; 12,5 e 6,3 mg.mL-1) e o grupo controle (álcool etílico a 50% e Tween a 1%). Os constituintes majoritários do óleo essencial foram p-cimeno (32,72%), 1,8-cineol (24,05%) e 4-terpineol (20,23%), sendo esses determinados por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas e cromatografia a gás com detector de ionização de chama (CG-EM/DIC). No extrato etanólico foi detectado o ácido elágico e três flavonoides: rutina, quercetina e campferol, por meio de cromatografia a líquido de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodo (CLAE-DAD). Todas as cepas apresentaram sensibilidade aos tratamentos com óleo essencial e extrato etanólico. A melhor resposta foi obtida com o óleo essencial de A. zerumbet que, na concentração de 100 mg.mL-1 proporcionou inibição total do crescimento bacteriano. Esses resultados sugerem o potencial antibacteriano do óleo essencial e do extrato etanólico de A. zerumbet no controle da mastite bovina.

Composição química e eficácia do óleo essencial e do extrato etanólico de Alpinia zerumbet sobre Staphylococcus aureus / Chemical composition and efficacy of essential oil and ethanol extract of Alpinia zerumbet on Staphylococcus aureus

O presente trabalho descreve a atividade antibacteriana do óleo essencial e do extrato etanólico das folhas de Alpinia zerumbet (colônia) sobre cepas de Staphylococcus aureus isoladas de vacas com mastite subclínica e cepas padrão ATCC 29213 e ATCC 25923, por meio do método de difusão em ágar. Foram utilizados 10 tratamentos contendo diferentes concentrações do óleo essencial e do extrato etanólico (100,0; 50,0; 25,0; 12,5 e 6,3 mg.mL-1) e o grupo controle (álcool etílico a 50% e Tween a 1%). Os constituintes majoritários do óleo essencial foram p -cimeno (32,72%), 1,8-cineol (24,05%) e 4-terpineol (20,23%), sendo esses determinados por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas e cromatografia a gás com detector de ionização de chama (CG-EM/DIC). No extrato etanólico foi detectado o ácido elágico e três flavonoides: rutina, quercetina e campferol, por meio de cromatografia a líquido de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodo (CLAE-DAD). Todas as cepas apresentaram sensibilidade aos tratamentos com óleo essencial e extrato etanólico. A melhor resposta foi obtida com o óleo essencial de A. zerumbet que, na concentração de 100 mg.mL-1 proporcionou inibição total do crescimento bacteriano. Esses resultados sugerem o potencial antibacteriano do óleo essencial e do extrato etanólico de A. zerumbet no controle da mastite bovina.(AU)

The present work describes the antibacterial activity of the essential oil and the ethanol extract from leaves of Alpinia zerumbet (colônia) on Staphylococcus aureus strains isolated from cows with subclinical mastitis and standard strains ATCC 29213 and ATCC 25923, using the agar diffusion method. Ten treatments containing different concentrations of essential oil and ethanol extract (100.0; 50.0; 25.0; 12.5 and 6.3 mg.mL-1) and the control group (50% ethyl alcohol and 1% Tween solutions) were used for antimicrobial testing. The major constituents of the essential oil were p -cimeno (32.72%), 1.8-cineol (24.05%) and 4-terpineol (20.23%), which were determined by gas chromatographymass spectrometry and gas chromatography - flame ionization detector (CG-MS/FID). Ellagic acid and three flavonoids (rutin, quercetin and campferol) were detected in the ethanol extract by means of high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-PDA). All strains showed sensitivity to the treatments with essential oil and the ethanol extract. The best response was obtained with A. zerumbet essential oil at a 100 mg.mL-1, showing complete inhibition of bacterial growth. These results demonstrate the antibacterial potential of essential oil and ethanol extract of A. zerumbet in the control of bovine mastitis.(AU)

Chemical composition and efficacy of essential oil and ethanol extract of Alpinia zerumbet on Staphylococcus aureus / Composição química e eficácia do óleo essencial e do extrato etanólico de Alpinia zerumbet sobre Staphylococcus aureus

The present work describes the antibacterial activity of the essential oil and the ethanol extract from leaves of Alpinia zerumbet (colônia) on Staphylococcus aureus strains isolated from cows with subclinical mastitis and standard strains ATCC 29213 and ATCC 25923, using the agar diffusion method. Ten treatments containing different concentrations of essential oil and ethanol extract (100.0; 50.0; 25.0; 12.5 and 6.3 mg.mL-1) and the control group (50% ethyl alcohol and 1% Tween solutions) were used for antimicrobial testing. The major constituents of the essential oil were  p-cimeno (32.72%), 1.8-cineol (24.05%) and 4-terpineol (20.23%), which were determined by gas chromatographymass spectrometry and gas chromatography - flame ionization detector (CG-MS/FID). Ellagic acid and three flavonoids (rutin, quercetin and campferol) were detected in the ethanol extract by means of high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-PDA). All strains showed sensitivity to the treatments with essential oil and the ethanol extract. The best response was obtained with A. zerumbet essential oil at a 100 mg.mL-1, showing complete inhibition of bacterial growth. These results demonstrate the antibacterial potential of essential oil and ethanol extract of A. zerumbet in the control of bovine mastitis.(AU)

O presente trabalho descreve a atividade antibacteriana do óleo essencial e do extrato etanólico das folhas de Alpinia zerumbet (colônia) sobre cepas de Staphylococcus aureus isoladas de vacas com mastite subclínica e cepas padrão ATCC 29213 e ATCC 25923, por meio do método de difusão em ágar. Foram utilizados 10 tratamentos contendo diferentes concentrações do óleo essencial e do extrato etanólico (100,0; 50,0; 25,0; 12,5 e 6,3 mg.mL-1) e o grupo controle (álcool etílico a 50% e Tween a 1%). Os constituintes majoritários do óleo essencial foram p-cimeno (32,72%), 1,8-cineol (24,05%) e 4-terpineol (20,23%), sendo esses determinados por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas e cromatografia a gás com detector de ionização de chama (CG-EM/DIC). No extrato etanólico foi detectado o ácido elágico e três flavonoides: rutina, quercetina e campferol, por meio de cromatografia a líquido de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodo (CLAE-DAD). Todas as cepas apresentaram sensibilidade aos tratamentos com óleo essencial e extrato etanólico. A melhor resposta foi obtida com o óleo essencial de A. zerumbet que, na concentração de 100 mg.mL-1 proporcionou inibição total do crescimento bacteriano. Esses resultados sugerem o potencial antibacteriano do óleo essencial e do extrato etanólico de A. zerumbet no controle da mastite bovina.(AU)

2-Fenoxietanol e óleo essencial de Eucalyptus globulus como anestésico e seus efeitos sobre os indicadores de estresse em Rhamdia quelen.

Rotineiramente na aquicultura os peixes são manipulados, provocando respostas fisiológicas de estresse que podem causar imunodepressão, retardo do crescimento, dor e até morte. Com a necessidade de reduzir essas adversidades nos manejos, os anestésicos são utilizados. O objetivo desde trabalho foi avaliar a concentração ideal (IC) e seus efeitos sobre as respostas de estresse do Rhamdia quelen submetido a dois protocolos de anestesia, com 2-Fenoxietanol (2-Phe) e óleo essencial de Eucalyptus globulus (EEO) descritos em artigos distintos. No Artigo 1, a análise do perfil químico do EEO mostrou que o 1,8-cineol é o componente majoritário do óleo. Em seguida, foram realizados dois experimentos. I) Avaliação da IC: Foram testadas quatro concentrações (600, 650, 700 e 750 L L-1). Com o aumento das concentrações de OEE, os tempos de indução à anestesia dos jundiás foram reduzidos, todavia, essas concentrações não exerceram influência nos tempos de recuperação. O EEO foi considerado um anestésico eficaz para o R. quelen (128,65 ± 40,42 g) com IC de 700 L L-1 (tempo de indução 2,74 ± 0,67 min e recuperação 2,26 ± 1,09 min). Durante este experimento, não foram observadas mortalidades. II) Avaliação do estresse: Os peixes foram divididos em três grupos: controle (valores basais, sem anestésico); eugenol (50 mg L-1) e EEO (700 L L-1). Neste ensaio, o EEO inibiu a resposta primária ao estresse (o cortisol não aumentou). Entretanto, os níveis plasmáticos de glicose e lactato aumentaram. Enquanto isso, o eugenol manteve todos os indicadores de estresse iguais aos do grupo controle. Portanto, embora o EEO tenha características anestésicas adequadas, ele deve ser usado com cautela, pois não evitou alterações nos níveis plasmáticos de glicose e lactato em R. quelen. Artigo 2: Foram realizados dois experimentos. I) Avaliação da IC: Sete concentrações de 2-Phe foram testadas: 300, 400, 500, 550, 600, 650 e 700 L L-1. Aumentando as concentrações de 2-Phe, os tempos de indução diminuíram, enquanto os tempos de recuperação aumentaram. A IC de 2-Phe para anestesiar R. quelen (126,47 ± 41,14 g) foi de 700 L L-1 (indução 2,98 ± 0,34 min e tempo de recuperação 2,75 ± 0,35 min). II) Avaliação do estresse: Os peixes foram divididos em três grupos: Controle (valores basais, sem anestésico); 2-Phe (700 L L-1); e Eugenol (50 mg L-1). Os níveis plasmáticos de cortisol, glicose e lactato foram aferidos nos peixes como indicadores de estresse em dois momentos diferentes: tempo zero (T0 = anestesiado) e o tempo um (T1 = uma hora após anestesia). Os animais dos grupos 2-Phe e Eugenol apresentaram aumento significativo nos valores de glicose quando comparados ao grupo controle. O lactato plasmático em T0 dos grupos Eugenol e 2-Phe não aumentou quando comparado ao grupo controle; entretanto, em T1, um aumento significativo foi observado em ambos os anestésicos. Não foram encontradas diferenças significativas nos níveis plasmáticos de cortisol entre os tratamentos e tempos. Portanto, 700 L L-1 de 2-Phe pode ser considerado um anestésico adequado para R. quelen.

Routinely in aquaculture, fish are manipulated, causing physiological stress responses that can cause immunosuppression, growth retardation, pain and even death. With the need to reduce these adversities in management, anesthetics are used. The objective of this work was to evaluate the ideal concentration (IC) and its effects on the stress responses of Rhamdia quelen submitted to two protocols of anesthesia, with 2-Phenoxyethanol (2-Phe) and essential oil of Eucalyptus globulus (EEO) described in distinct articles. In Article 1, the analysis of the chemical profile of the EEO showed that 1,8-cineole is the major component of the oil. Then, two experiments were carried out. I) IC Assessment: Four concentrations (600, 650, 700 and 750 L L-1) were tested. With the increase in OEE concentrations, the anesthetic induction times of silver catfish were reduced, however, these concentrations did not influence recovery times. EEO was considered an effective anesthetic for R. quelen (128.65 ± 40.42 g) with a IC of 700 L L-1 (induction time 2.74 ± 0.67 min and recovery 2.26 ± 1.09 min). During this experiment, no mortalities were observed. II) Stress assessment: The fish were divided into three groups: control (baseline values, no anesthetic); eugenol (50 mg L-1) and EEO (700 L L-1). In this assay, EEO inhibited the primary stress response (cortisol did not increase). However, plasma glucose and lactate levels increased. Meanwhile, eugenol kept all stress indicators the same as the control group. Therefore, although EEO has adequate anesthetic characteristics, it should be used with caution, as it did not prevent changes in plasma glucose and lactate levels in R. quelen. Article 2: Two experiments were carried out. I) IC Assessment: Seven concentrations of 2-Phe were tested: 300, 400, 500, 550, 600, 650 and 700 L L-1. Increasing 2-Phe concentrations, induction times decreased, while recovery times increased. The 2-Phe IC for anesthetizing R. quelen (126.47 ± 41.14 g) was 700 L L-1 (induction 2.98 ± 0.34 min and recovery time 2.75 ± 0.35 min). II) Stress assessment: The fish were divided into three groups: Control (baseline values, no anesthetic); 2-Phe (700 L L-1); and Eugenol (50 mg L-1). Plasma cortisol, glucose and lactate levels were measured in fish as stress indicators at two different times: time zero (T0 = anesthetized) and time one (T1 = one hour after anesthesia). The animals in the 2-Phe and Eugenol groups showed a significant increase in glucose values when compared to the control group. Plasma lactate at T0 in the Eugenol and 2-Phe groups did not increase when compared to the control group; however, at T1, a significant increase was observed for both anesthetics. No significant differences were found in plasma cortisol levels between treatments and times. Therefore, 700 L L-1 of 2-Phe can be considered a suitable anesthetic for R. quelen.

Caracterização química e potencial carrapaticida de óleos essenciais de Eucalyptus spp. Frente a Rhipicephalus microplus

R. microplus, parasito bovino de relevância mundial, é responsável por perdas econômicas na bovinocultura. Seu controle tem encontrado barreiras como desenvolvimento de populações resistentes aos carrapaticidas convencionais. Neste cenário, estudos de alternativas de controle de R. microplus são cada vez mais relevantes, em especial carrapaticidas de origem vegetal. O presente estudo teve como objetivo o estudo da diversidade química e avaliação da atividade carrapaticida do óleo essencial (OE) de oito espécies de Eucalyptus spp. sobre larvas de R. microplus. O estudo de diversidade química foi realizado por meio de Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG-EM) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN). No ensaio in vitro, os OEs foram avaliados no teste de pacote larval (LPT) com seis repetições em cada tratamento e controle negativo sendo água destilada e Tween 80® a 3% (m v-1). Através da análise de similaridade química foi possível observar dois grupos distintos em que, para as duas técnicas avaliadas (CG-EM e RMN), as espécies E. smithii (ESM) e E. urophylla x E. camaldulensis (EURC) formaram o mesmo grupo, demonstrando serem significativamente diferentes de todas as demais espécies avaliadas. Entretanto, não apresentaram semelhanças em relação a atividade carrapaticida. Os componentes -pineno e 1,8-cineol foram apontados como os compostos que discriminaram essas duas espécies das demais. No ensaio biológico, as espécies E. grandis (EGR), E. tereticornis (ETI) e E. urophylla x E. grandis (EURG) apresentaram os maiores valores de mortalidade na menor concentração testada, com 99% de mortalidade das larvas na concentração de 1,25% (m v-1). EGR foi a espécie que apresentou os menores valores de CL50 (0,38% m v-1) e CL90 (0,78% m v-1). Através de análise multivariada foi possível sugerir que os componentes -pineno e -terpineno estariam relacionados com a atividade carrapaticida, fornecendo informação para desenvolvimento de produtos alternativos para o controle de R. microplus.

R. microplus, a bovine parasite of worldwide relevance, is responsible for economic losses in cattle farming. Its control has encountered barriers such as the development of populations resistant to conventional ticks. In this scenario, studies of alternatives to control R. microplus are increasingly relevant, especially plant-based ticks. The present study aimed to study the chemical diversity and evaluation of the tick activity of the essential oil (EO) of eight species of Eucalyptus spp. on R. microplus larvae. The study of chemical diversity was carried out by means of Gas Chromatography coupled with Mass Spectrometry (GC-MS) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR). In the in vitro assay, the EOs were evaluated in the larval pack test (LPT) with six repetitions in each treatment and negative control being distilled water and 3% Tween 80® (m v-1). Through the chemical similarity analysis it was possible to observe two distinct groups in which, for the two evaluated techniques (CG-MS and NMR), the species E. smithii (ESM) and E. urophylla x E. camaldulensis (EURC) formed the same group, demonstrating to be significantly different from all other species evaluated. However, they did not show similarities in relation to the tick activity. The -pinene and 1,8-cineole components were identified as the compounds that discriminated these two species from the others. In the biological assay, the species E. grandis (EGR), E. tereticornis (ETI) and E. urophylla x E. grandis (EURG) showed the highest mortality values at the lowest concentration tested, with 99% mortality of larvae at the concentration of 1.25% (mv-1). EGR was the species that presented the lowest values of CL50 (0.38% m v-1) and CL90 (0.78% m v-1). Through multivariate analysis it was possible to suggest that the components -pinene and -terpinene would be related to the tick activity, providing information for the development of alternative products for the control of R. microplus.

Effects of essential oils of Rosmarinus officinalis Linn. and Origanum vulgare Linn. from different origins on Sporothrix brasiliensis and Sporothrix schenckii complex / Efeitos dos óleos essenciais de Rosmarinus officinalis Linn. e Origanum vulgare Linn. de diferentes origens em Sporothrix brasiliensis e complexo Sporothrix schenckii

Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Origanum vulgare L. (oregano) are known to have antimicrobial properties, but studies on sporotrichosis are scarce. This study aimed to evaluate the anti-Sporothrix spp. activity of essential oils from commercial products and oils extracted from aerial parts of these plants and analyze their chemical constituents. S. schenckii complex and S. brasiliensis (n: 25) isolated from humans, cats, dogs, and environmental soil were tested through M27-A3 guidelines of CLSI with modification for phytotherapics. The essential oils of R. officinalis L. were similar for MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL for extracted oil; and 4.5mg/mL and 9mg/mL, respectively, for commercial oil. Both products showed MIC90 of 18mg/mL and MFC90 of 36mg/mL. In O. vulgare L., the extracted oil had better activity with MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL, and MIC90 and MFC90 of 4.5mg/mL, whereas the commercial oil showed MIC50 and MFC50 of 9mg/mL and MIC90 18mg/mL, respectively, and MFC90 of 36mg/mL. Through gas chromatography (CG/FID), thymol and α-terpinene were majority for extracted oil of O. vulgare L., and carvacrol and γ-terpinene made up the majority of the commercial oil. Both essential oils of R. officinalis L. showed 1,8-cineole and α-pinene as major. The fungal isolates were susceptible to all tested essential oils, including in itraconazole-resistant S. brasiliensis isolates. The extracted and commercial oils of the plants presented in vitro anti-Sporothrix spp. activity, and they are promising for treatment of sporotrichosis, including in cases refractory to itraconazole. More studies should be performed about toxicity and in vivo efficacy for its safe use.(AU)

Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Origanum vulgare L. (orégano) são conhecidos pelas propriedades antimicrobianas, entretanto seus estudos na esporotricose são escassos. Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-Sporothrix spp. de óleos extraídos e comerciais dessas plantas e analisar seus constituintes químicos. Isolados do complexo S. schenckii e S. brasiliensis (n: 25) de humanos, gatos, cães e solo, foram testados pela diretriz M27-A3 do CLSI com modificações para fitoterápicos. Os óleos de R. officinalis L. foram similares com CIM50 e CFM50 ≤2.25mg/mL para extraído; e 4.5mg/mL e 9mg/mL, respectivamente, para comercial. Ambos os produtos demonstraram CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Em O. vulgare L., o óleo extraído apresentou melhor atividade com CIM50 e CFM50≤2.25mg/mL e CIM90 e CFM90 de 4.5mg/mL, ao passo que o óleo comercial mostrou CIM50 e CFM50 de 9mg/mL; e CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Por meio da cromatografia gasosa (CG/FID), timol e α-terpineno foram majoritários para o óleo extraído de O. vulgare L., e carvacrol e γ-terpineno para o comercial. Ambos os óleos de R. officinalis L. apresentaram 1,8-cineol e α-pineno como prevalentes. Os isolados foram sensíveis a todos os óleos essenciais testados, inclusive S. brasiliensis, resistentes ao itraconazol. Os óleos extraídos e comerciais de R. officinalis L. e O. vulgare L. apresentaram atividade anti-Sporothrix spp. in vitro e são promissores para o tratamento da esporotricose, inclusive em casos refratários ao itraconazol. Mais estudos devem ser realizados sobre toxicidade e eficácia in vivo para seu uso seguro.(AU)

Effects of essential oils of Rosmarinus officinalis Linn. and Origanum vulgare Linn. from different origins on Sporothrix brasiliensis and Sporothrix schenckii complex / Efeitos dos óleos essenciais de Rosmarinus officinalis Linn. e Origanum vulgare Linn. de diferentes origens em Sporothrix brasiliensis e complexo Sporothrix schenckii

Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Origanum vulgare L. (oregano) are known to have antimicrobial properties, but studies on sporotrichosis are scarce. This study aimed to evaluate the anti-Sporothrix spp. activity of essential oils from commercial products and oils extracted from aerial parts of these plants and analyze their chemical constituents. S. schenckii complex and S. brasiliensis (n: 25) isolated from humans, cats, dogs, and environmental soil were tested through M27-A3 guidelines of CLSI with modification for phytotherapics. The essential oils of R. officinalis L. were similar for MIC50 and MFC50 2.25mg/mL for extracted oil; and 4.5mg/mL and 9mg/mL, respectively, for commercial oil. Both products showed MIC90 of 18mg/mL and MFC90 of 36mg/mL. In O. vulgare L., the extracted oil had better activity with MIC50 and MFC50 2.25mg/mL, and MIC90 and MFC90 of 4.5mg/mL, whereas the commercial oil showed MIC50 and MFC50 of 9mg/mL and MIC90 18mg/mL, respectively, and MFC90 of 36mg/mL. Through gas chromatography (CG/FID), thymol and -terpinene were majority for extracted oil of O. vulgare L., and carvacrol and -terpinene made up the majority of the commercial oil. Both essential oils of R. officinalis L. showed 1,8-cineole and -pinene as major. The fungal isolates were susceptible to all tested essential oils, including in itraconazole-resistant S. brasiliensis isolates. The extracted and commercial oils of the plants presented in vitro anti-Sporothrix spp. activity, and they are promising for treatment of sporotrichosis, including in cases refractory to itraconazole. More studies should be performed about toxicity and in vivo efficacy for its safe use.(AU)

Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Origanum vulgare L. (orégano) são conhecidos pelas propriedades antimicrobianas, entretanto seus estudos na esporotricose são escassos. Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-Sporothrix spp. de óleos extraídos e comerciais dessas plantas e analisar seus constituintes químicos. Isolados do complexo S. schenckii e S. brasiliensis (n: 25) de humanos, gatos, cães e solo, foram testados pela diretriz M27-A3 do CLSI com modificações para fitoterápicos. Os óleos de R. officinalis L. foram similares com CIM50 e CFM50 2.25mg/mL para extraído; e 4.5mg/mL e 9mg/mL, respectivamente, para comercial. Ambos os produtos demonstraram CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Em O. vulgare L., o óleo extraído apresentou melhor atividade com CIM50 e CFM502.25mg/mL e CIM90 e CFM90 de 4.5mg/mL, ao passo que o óleo comercial mostrou CIM50 e CFM50 de 9mg/mL; e CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Por meio da cromatografia gasosa (CG/FID), timol e -terpineno foram majoritários para o óleo extraído de O. vulgare L., e carvacrol e -terpineno para o comercial. Ambos os óleos de R. officinalis L. apresentaram 1,8-cineol e -pineno como prevalentes. Os isolados foram sensíveis a todos os óleos essenciais testados, inclusive S. brasiliensis, resistentes ao itraconazol. Os óleos extraídos e comerciais de R. officinalis L. e O. vulgare L. apresentaram atividade anti-Sporothrix spp. in vitro e são promissores para o tratamento da esporotricose, inclusive em casos refratários ao itraconazol. Mais estudos devem ser realizados sobre toxicidade e eficácia in vivo para seu uso seguro.(AU)

ATIVIDADES BIOLÓGICAS E COMPOSIÇÃO QUÍMICA DO ÓLEO ESSENCIAL DE Psidium rufum DC

Entre a grande diversidade de fruteiras nativas, destacam-se muitas da família Myrtaceae, com ampla variabilidade. Nessa família, está incluído o gênero Psidium, ao qual pertencem os araçazeiros, também chamados de araçás, que apresentam ampla distribuição no território brasileiro, bem como em outras partes do mundo. Como araçazeiros são conhecidas as espécies de Psidium produtoras de frutos comestíveis, com variações regionais no que se refere ao nome popular. Dentre os araçás, existe o Psidium rufum (araçá roxo), planta nativa com poucos estudos sobre suas atividades biológicas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as atividades biológicas e composição química do óleo essencial (OE) extraído de folhas do Psidium rufum, da família Myrtaceae, popularmente conhecida como Araçá roxo. As folhas foram coletadas e o óleo essencial (OE) extraído das folhas frescas pela técnica de hidrodestilação em aparelho Clevenger. Por meio da análise química foram identificados 55 compostos, sendo a classe majoritária os sesquiterpenos hidrocarbonetos (70,07%), tendo como majoritário o 1,8-cineol (19,00%); seguido do -longipineno (18,62%). Foi avaliada a atividade antimicrobiana e potencial antioxidante, por meio da diluição do OE do araçá roxo e da determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). A atividade antioxidante do óleo essencial foi determinada pelo sistema de co-oxidação -caroteno/ácido linoléico, pelo método de sequestro dos radicais livres DPPH e pelo método de redução do ferro (FRAP). Foi analisada a atividade acaricida sobre o Rhipicephalus (boophilus) microplus utilizando a técnica de imersão de adultos em diferentes concentrações do OE de P. rufum e atividade larvicida pela técnica de imersão larval. O OE de araçá roxo apresentou um elevando potencial antioxidante quando foi avaliado o método de atividade antioxidante pelo sistema de co-oxidação -caroteno/ácido linoleico. O óleo essencial do Psidium rufum foi testado contra quatro micro-organismos, e exerceu ação antimicrobiana contra os micro-organismos Staphylococcus aureus (CIM = 2,500 µg/mL e CBM = 20.000 µg/mL); Enterococcus faecalis (CIM = 2,500 µg/mL e CBM > 20.000 µg/mL); Pseudomonas aeruginosa (CIM = 2,500 µg/mL e CBM = 20.000 µg/mL) e Escherichia coli (CIM > 20,000 µg/mL e CBM > 20.000 µg/mL). Os resultados encontrados evidenciaram que o OE de P. rufum apresentou maior eficiência na mortalidade das larvas, com concentração letal (CL) CL50 de 2,50 mg/mL e DL99,9 de 12,57 mg/mL. O óleo essencial do araçá roxo exerceu ação antimicrobiana positiva sobre os micro-organismos testados e um elevado potencial antioxidante quando foi utilizado o método de atividade antioxidante pelo sistema de co-oxidação -caroteno/ácido linoleico. Os resultados relacionados a atividade acaricida foram promissores indicando que esta planta possa ser utilizada no controle do carrapato bovino Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

Among the great diversity of native fruit trees, many of the Myrtaceae family stand out, with wide variability. This family includes the genus Psidium, to which the araçazeiros, also called araçás, belong, which have a wide distribution in Brazilian territory, as well as in other parts of the world. The species of Psidium that produce edible fruits are known as araçazeiros, with regional variations in terms of the popular name. Among the araçás, there is Psidium rufum (purple araçá), a native plant with few studies on its biological activities. The objective of this work was to evaluate the biological activities and chemical composition of the essential oil (OE) extracted from leaves of Psidium rufum, from the Myrtaceae family, popularly known as Araçá purple. The leaves were collected and the essential oil (OE) extracted from the fresh leaves by the hydrodistillation technique in Clevenger apparatus. Through chemical analysis, 55 compounds were identified, the majority being hydrocarbon sesquiterpenes (70.07%), with 1.8-cineol (19.00%) as the major; followed by -longipinene (18.62%). Antimicrobial activity and antioxidant potential were evaluated by diluting the araçá purple OE and determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (CBM). The antioxidant activity of the essential oil was determined by the -carotene / linoleic acid co-oxidation system, the DPPH free radical scavenging method and the iron reduction method (FRAP). The acaricidal activity on Rhipicephalus (boophilus) microplus was analyzed using the adult immersion technique in different concentrations of P. rufum OE and larvicidal activity using the larval immersion technique. The araçá purple OE showed an elevating antioxidant potential when the method of antioxidant activity was evaluated by the -carotene / linoleic acid co-oxidation system. The essential oil of Psidium rufum was tested against four microorganisms, and exerted an antimicrobial action against the microorganisms Staphylococcus aureus (MIC = 2,500 µg / mL and CBM = 20,000 µg / mL); Enterococcus faecalis (MIC = 2,500 µg / mL and CBM> 20,000 µg / mL); Pseudomonas aeruginosa (MIC = 2,500 µg / mL and CBM = 20,000 µg / mL) and Escherichia coli (MIC> 20,000 µg / mL and CBM> 20,000 µg / mL). The results found showed that the P. rufum EO showed greater efficiency in larval mortality, with LD50 of 7.09 mg / mL and DL99.9 of 35.04 mg / mL. The essential oil of the purple araçá exerted a positive antimicrobial action on the tested microorganisms and a high antioxidant potential when the antioxidant activity method was used by the -carotene / linoleic acid co-oxidation system. The results related to the acaricidal activity were promising, indicating that this plant can be used to control the bovine tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

Anesthetic activity of the essential oil of Ocimum americanum in Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824) and its effects on stress parameters

The aim of this study was to evaluate the anesthetic activity of the essential oil (EO) of Ocimum americanum L. in silver catfish (Rhamdia quelen ). In the first experiment, the depressor effects and chemical composition of the leaf EO (LEO) and inflorescence EO (IEO) were compared. Juveniles (n = 10) were placed in aquaria containing different concentrations of EO (25 - 500 mg L-1) to determine the point at which anesthesia was induced and the length of the recovery period. In the following experiment, the effects of 300 and 500 mg L-1 LEO exposure on stress parameters (plasma cortisol, glucose and sodium levels) after air exposure for 1 min were assayed. Fish (n = 10 per sampling time) were sampled immediately or transferred to anesthetic-free aquaria until sampling (15, 30, 60 or 240 min). LEO was composed mainly of β-linalool and 1,8-cineole in similar proportions, whereas IEO showed β-linalool as major compound. Anesthesia was obtained in silver catfish with 200-500 mg L-1 between 4-8 min for LEO and 6-16 min for IEO. Lower EO concentrations did not reach anesthetic stage up to 30 min. LEO used as anesthetic prevented the cortisol increase and sodium loss induced by aerial exposure. Glucose levels were raised in catfish exposed to LEO compared to basal group (not air exposed) in almost all observation times. EO of O. americanum obtained from leaves was considered suitable to anesthetic procedures due to its fast induction and handling-induced stress prevention.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade anestésica do óleo essencial (EO) de Ocimum americanum L. em jundiás (Rhamdia quelen ). No primeiro experimento, os efeitos depressores e a composição química dos óleos obtidos a partir das folhas (LEO) e das inflorescências (IEO) desta espécie vegetal foram comparados. Para isto, juvenis de jundiás (n = 10) foram transferidos para aquários contendo diferentes concentrações de EO (25 - 500 mg L-1) a fim de determinar os tempos de indução aos estágios de anestesia e de recuperação. No experimento seguinte foram determinados os efeitos da exposição a 300 e 500 mg L-1 de LEO em parâmetros de estresse (cortisol, glicose e níveis de sódio plasmáticos) após os animais serem expostos durante 1 min ao ar. Os peixes (n = 10 por tempo de amostragem) foram coletados imediatamente ou transferidos para aquários livres de anestésico até amostragem (15, 30, 60 ou 240 min). LEO demonstrou ser composto majoritariamente por β-linalol e 1,8-cineol em proporções similares, enquanto que IEO apresentou β-linalol como constituinte majoritário. O estágio de anestesia foi verificado em jundiás com 200-500 mg L-1 entre 4-8 min para LEO e 6-16 min para IEO. Menores concentrações de ambos os EO não promoveram anesthesia até 30 min. O uso de LEO como anestésico preveniu o aumento de cortisol e a perda de sódio induzida pela exposição aérea. Já a glicemia encontrava-se aumentada em peixes expostos ao LEO em comparação ao grupo basal (não exposto ao ar) na maioria dos tempos de observação. Assim, EO de O. americanum obtido a partir das folhas foi considerado adequado para procedimentos anestésicos devido a sua rápida indução e capacidade de prevenir o estresse decorrente do manuseio.(AU)

Hydroxylation of 1, 8-cineole by Mucor ramannianus and Aspergillus niger

The monoterpenoid 1,8-cineole is obtained from the leaves of Eucalyptus globulus and it has important biological activities. It is a cheap natural substrate because it is a by-product of the Eucalyptus cultivation for wood and pulp production. In this study, it was evaluated the potential of three filamentous fungi in the biotransformation of 1,8-cineole. The study was divided in two steps: first, reactions were carried out with 1,8-cineole at 1 g/L for 24 h; afterwards, reactions were carried out with substrate at 5 g/L for 5 days. The substrate was hydroxylated into 2-exo-hydroxy-1,8-cineole and 3-exo-hydroxy-1,8-cineole by fungi Mucor ramannianus and Aspergillus niger with high stereoselectivity. Trichoderma harzianum was also tested but no transformation was detected. M. ramannianus led to higher than 99% of conversion within 24 h with a starting high substrate concentration (1 g/L). When substrate was added at 5 g/L, only M. ramannianus was able to catalyze the reaction, but the conversion level was 21.7% after 5 days. Both products have defined stereochemistry and could be used as chiral synthons. Furthermore, biological activity has been described for 3-exo-hydroxy-1,8-cineol. To the best of our knowledge, this is the first report on the use of M. ramannianus in this reaction.(AU)

The orchid bees (Hymenoptera, Apidae, Euglossina) in a forest fragment from western Paraná state, Brazil

An orchid bee inventory was carried out in Parque Estadual São Camilo, Palotina, Paraná (Brazil); conservation unit with about 400 hectares of Semidecidual Seasonal forest. Three bait traps were installed at the border of the fragment, each one containing the following fragrances: 1,8-cineole, eugenol, and vanilin. Sampling was carried out from 09am to 03pm, October 2011 to June 2012, summing up nine sampling days. A total of 186 specimens distributed among seven species were sampled. Eufriesea violacea with 140 specimens was the most common species, followed by Euglossa fimbriata (31), Euglossa annectans (9), Eulaema nigrita (4), Euglossa cordata (1), Euglossa pleosticta (1), and Exaerete smaragdina (1). According to qualitative and NMDS analysis, the orchid bee fauna of Parque Estadual São Camilo is representative of Semidecidual Seasonal forest, with richness comparable with other assemblages in the southern distribution of Euglossina. The sampled bee richness indicates that forest fragments, even small and isolated, are important in the conservation of this bees.

Abelhas das orquídeas (Hymenoptera, Apidae, Euglossina) em um fragmento florestal do oeste do Paraná. Um inventário de abelhas das orquídeas foi conduzido no Parque Estadual São Camilo, Palotina, Paraná, uma unidade de conservação de cerca de 400 hectares de Floresta Estacional Semidecidual. Três garrafas-armadilha foram instaladas na borda do fragmento, cada uma contendo uma das seguintes essências: 1,8-cineol, eugenol e vanilina. A amostragem foi realizada entre 09 e 15 horas, entre outubro de 2011 e junho de 2012, somando nove dias amostrais. Um total de 186 espécimens distribuídos em sete espécies foram amostrados, Eufriesea violacea com 140 indivíduos foi a mais comum, seguida de Euglossa fimbriata com 31, Euglossa annectans com nove, Eulaema nigrita com quatro, Euglossa cordata, Euglossa pleosticta e Exaerete smaragdina com apenas um indivíduo amostrado cada. De acordo com análise qualitativa e de NMDS a fauna de Euglossina de Parque Estadual São Camilo é representativa de Floresta Estacional Semidecidual, com riqueza comparável a outras áreas no sul da distribuição do grupo. A riqueza de espécie amostrada indica que fragmentos florestais, mesmo que pequenos e isolados, são importantes na conservação destas abelhas.

The orchid bees (Hymenoptera, Apidae, Euglossina) in a forest fragment from western Paraná state, Brazil

An orchid bee inventory was carried out in Parque Estadual São Camilo, Palotina, Paraná (Brazil); conservation unit with about 400 hectares of Semidecidual Seasonal forest. Three bait traps were installed at the border of the fragment, each one containing the following fragrances: 1,8-cineole, eugenol, and vanilin. Sampling was carried out from 09am to 03pm, October 2011 to June 2012, summing up nine sampling days. A total of 186 specimens distributed among seven species were sampled. Eufriesea violacea with 140 specimens was the most common species, followed by Euglossa fimbriata (31), Euglossa annectans (9), Eulaema nigrita (4), Euglossa cordata (1), Euglossa pleosticta (1), and Exaerete smaragdina (1). According to qualitative and NMDS analysis, the orchid bee fauna of Parque Estadual São Camilo is representative of Semidecidual Seasonal forest, with richness comparable with other assemblages in the southern distribution of Euglossina. The sampled bee richness indicates that forest fragments, even small and isolated, are important in the conservation of this bees.(AU)

Abelhas das orquídeas (Hymenoptera, Apidae, Euglossina) em um fragmento florestal do oeste do Paraná. Um inventário de abelhas das orquídeas foi conduzido no Parque Estadual São Camilo, Palotina, Paraná, uma unidade de conservação de cerca de 400 hectares de Floresta Estacional Semidecidual. Três garrafas-armadilha foram instaladas na borda do fragmento, cada uma contendo uma das seguintes essências: 1,8-cineol, eugenol e vanilina. A amostragem foi realizada entre 09 e 15 horas, entre outubro de 2011 e junho de 2012, somando nove dias amostrais. Um total de 186 espécimens distribuídos em sete espécies foram amostrados, Eufriesea violacea com 140 indivíduos foi a mais comum, seguida de Euglossa fimbriata com 31, Euglossa annectans com nove, Eulaema nigrita com quatro, Euglossa cordata, Euglossa pleosticta e Exaerete smaragdina com apenas um indivíduo amostrado cada. De acordo com análise qualitativa e de NMDS a fauna de Euglossina de Parque Estadual São Camilo é representativa de Floresta Estacional Semidecidual, com riqueza comparável a outras áreas no sul da distribuição do grupo. A riqueza de espécie amostrada indica que fragmentos florestais, mesmo que pequenos e isolados, são importantes na conservação destas abelhas.(AU)

Uso promissor do óleo essencial de Rosmarinus officinalis L. e Origanum majorana L. na esporotricose cutânea experimental por Sporothrix brasiliensis resistente ao itraconazol, e susceptibilidade de isolados aos óleos vegetais

O itraconazol é o fármaco de eleição no tratamento da esporotricose humana e animal, entretanto, o surgimento de Sporothrix brasiliensis com resistência in vitro tem incentivado os estudos com plantas da família Lamiaceae como fontes promissoras de moléculas antifúngicas. Dessa família, os óleos essenciais de alecrim (Rosmarinus officinalis L.) e manjerona (Origanum majorana L.) têm se destacados pela atividade antifúngica e baixa citotoxicidade. Essa tese objetivou avaliar a atividade dos óleos essenciais de plantas da família Lamiaceae em isolados clínicos de Sporothrix spp. e na esporotricose cutânea experimental por S. brasiliensis resistente ao itraconazol. Quarenta ratos Wistar adultos machos foram inoculados via subcutânea no coxim plantar esquerdo (2×105 células/mL) e, dez dias após, receberam tratamento oral (1 mL) por 30 dias nos seguintes grupos experimentais (n=10): controle com solução salina com propilenoglicol 1% (CONT); itraconazol a 10 mg/kg (ITRA); óleos essenciais de alecrim a 90 mg/ml (ALEC) e manjerona a 30 mg/ml (MANJ). Semanalmente, a evolução clínica era acompanhada e a eutanásia realizada para histopatologia e contagem fúngica (retro-isolamento). Ainda, os óleos foram avaliados por cromatografia gasosa com espectrometria de massas, e o mecanismo de ação pelos ensaios de proteção do sorbitol e efeito do ergosterol. Os resultados revelaram que os animais dos grupos ALEC e MANJ apresentaram remissão dos sinais clínicos, com ausência de edema e exsudato no membro inoculado, ao passo que CONT e ITRA mantiveram os sinais da doença. Ainda, a disseminação do S. brasiliensis para os órgãos foi menos observada no fígado, baço, linfonodos, rins e testículos dos grupos ALEC e MANJ em comparação ao CONT e ITRA (P < 0.05), revelando uma proteção sistêmica a partir da infecção subcutânea. Essa observação foi relacionada com a composição química, cujos compostos prevalentes foram terpineol-4 (34,09%) e -terpineno (14,28%) em manjerona, e 1,8-cineol (47,91%) e cânfora (12,47%) em alecrim. Não houve alteração nos valores da concentração inibitória mínima (CIM) quando adicionado o protetor osmótico, demonstrando ausência de atividade à nível de parede celular, ao passo que o uso do ergosterol elevou os valores de CIM, revelando que ambos óleos apresentaram atividade a nível de complexação com o ergosterol. Esse estudo demonstrou a eficácia do uso oral de alecrim e manjerona no tratamento da esporotricose cutânea experimental, sendo promissores como antifúngicos. Palavras-ch

Itraconazole is the drug of choice for the treatment of sporotrichosis, however, the emergence of Sporothrix brasiliensis with in vitro resistance has encouraged studies with plants of the family Lamiaceae as promising sources of antifungal molecules. From this family, essential oils of rosemary (Rosmarinus officinalis L.) and marjoram (Origanum majorana L.) have been highlighted for their antifungal activities and low cytotoxicity. This thesis aimed to evaluate the effectiveness of the essential oils of the plants from Lamiaceae family in clinical isolates of Sporothrix spp. and in the experimental cutaneous sporotrichosis by itraconazole-resistant S. brasiliensis. Forty male adult Wistar rats were inoculated subcutaneously in the left footpad (2×105 cells/mL) and, ten days later, received oral treatment (1 mL) for 30 days in the following experimental groups (n=10): control with solution saline with 1% propylene glycol (CONT); itraconazole at 10 mg/kg (ITRA); essential oils of rosemary at 90 mg/mL (ROSM) and marjoram at 30 mg/mL (MARJ). The clinical follow-up was done weekly, as well as the euthanasia for histopathology and fungal burden (retro-isolation). Furthermore, the oils were evaluated by gas chromatography with mass spectrometry, and the mechanism of action by the assays of sorbitol protection and ergosterol effect. The results showed that the animals from ALEC and MANJ groups presented remission of the clinical signs, with no edema and exudate in the inoculated limb, whereas CONT and ITRA maintained the signs of the disease. Also, the dissemination of S. brasiliensis to the organs was less observed in the liver, spleen, lymph nodes, kidneys and testicles of the ALEC and MANJ groups compared to the CONT and ITRA (P <0.05), revealing systemic protection from the subcutaneous infection. This observation was related to the chemical composition, whose prevalent compounds were terpineol-4 (34.09%) and -terpinene (14.28%) in marjoram, and 1,8-cineole (47.91%) and camphor (12.47%) in rosemary. There was no change in minimum inhibitory concentration (MIC) values when the osmotic protector was added, showing an absence of activity at the cell wall level, whereas the use of ergosterol increased MIC values, revealing that both oils presented activity at the level of complexion with ergosterol. This study demonstrated the effectiveness of the oral use of rosemary and marjoram in the treatment of experimental cutaneous sporotrichosis, being promising as antifungal.