ATP-Bioluminescence and conventional microbiology for hygiene evaluation of cutting room surfaces in poultry slaughterhouse

Background: The hygiene procedures in poultry slaughterhouses consist in the use of hot water, detergent and sanitizing, configuring Sanitation Standard Operating Procedure (SSOP). These actions control contamination in food processing environments, especially by pathogenic microorganisms, which cause diseases with impact on public health and economic losses. The microbiological control of aerobic mesophiles, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, are used as indicators of contamination. The hygienic-sanitary conditions on the surfaces of the poultry slaughterhouse cuttting room were evaluated, before and after cleaning and sanitizing procedures.Materials, Methods & Results: Conventional microbiology (Rodac plates and sponge for quantification of aerobic mesophiles, Staphylococcus aureus and Escherichia coli) and ATP-Bioluminescence were used to analyze the action of hot water and the active principles peracetic acid, quaternary ammonia and biguanide in the standard pre-operational hygiene procedure in the cutting room of the poultry slaughterhouse under Federal Inspection with slaughter capacity of more than 20.000 birds/h. The evaluations were performed on three lines of chicken thigh cuts at the same time and in a completely randomized manner on stainless steel surfaces, polyurethane belts and polyethylene boards. Samples were made in four replicates at the three surface totaling 108 assay for each microorganism. The samples were collected at the end of the cutting process, before and after washing the surfaces with hot water (between 45 and 50ºC) and after sanitization with 0.5% peracetic acid, 2% quaternary ammonia and 1% biguanide. The ATP-Bioluminescence method detected organic matter at all collected points and Rodac plates allowed a better recovery of microorganisms than sponges for quantification of aerobic mesophiles, E. coli and S. aureus.[...]

ATP-Bioluminescence and conventional microbiology for hygiene evaluation of cutting room surfaces in poultry slaughterhouse

Background: The hygiene procedures in poultry slaughterhouses consist in the use of hot water, detergent and sanitizing, configuring Sanitation Standard Operating Procedure (SSOP). These actions control contamination in food processing environments, especially by pathogenic microorganisms, which cause diseases with impact on public health and economic losses. The microbiological control of aerobic mesophiles, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, are used as indicators of contamination. The hygienic-sanitary conditions on the surfaces of the poultry slaughterhouse cuttting room were evaluated, before and after cleaning and sanitizing procedures.Materials, Methods & Results: Conventional microbiology (Rodac plates and sponge for quantification of aerobic mesophiles, Staphylococcus aureus and Escherichia coli) and ATP-Bioluminescence were used to analyze the action of hot water and the active principles peracetic acid, quaternary ammonia and biguanide in the standard pre-operational hygiene procedure in the cutting room of the poultry slaughterhouse under Federal Inspection with slaughter capacity of more than 20.000 birds/h. The evaluations were performed on three lines of chicken thigh cuts at the same time and in a completely randomized manner on stainless steel surfaces, polyurethane belts and polyethylene boards. Samples were made in four replicates at the three surface totaling 108 assay for each microorganism. The samples were collected at the end of the cutting process, before and after washing the surfaces with hot water (between 45 and 50ºC) and after sanitization with 0.5% peracetic acid, 2% quaternary ammonia and 1% biguanide. The ATP-Bioluminescence method detected organic matter at all collected points and Rodac plates allowed a better recovery of microorganisms than sponges for quantification of aerobic mesophiles, E. coli and S. aureus.[...](AU)

Removal and killing of multispecies endodontic biofilms by N-acetylcysteine

Removal of bacterial biofilm from the root canal system is essential for the management of endodontic disease. Here we evaluated the antibacterial effect of N-acetylcysteine (NAC), a potent antioxidant and mucolytic agent, against mature multispecies endodontic biofilms consisting of Actinomyces naeslundii, Lactobacillus salivarius, Streptococcus mutans and Enterococcus faecalis on sterile human dentin blocks. The biofilms were exposed to NAC (25, 50 and 100 mg/mL), saturated calcium hydroxide or 2% chlorhexidine solution for 7 days, then examined by scanning electron microscopy. The biofilm viability was measured by viable cell counts and ATP-bioluminescence assay. NAC showed greater efficacy in biofilm cell removal and killing than the other root canal medicaments. Furthermore, 100 mg/mL NAC disrupted the mature multispecies endodontic biofilms completely. These results demonstrate the potential use of NAC in root canal treatment.(AU)

ATP-Bioluminescence as a method to evaluated microbiological quality of UHT milk / ATP-Bioluminescência como método para avaliação da qualidade microbiológica de leite UAT

New approaches are needed to quickly indicate possible contamination of UHT milk, among them the technique of ATP-Bioluminescence. Therefore, the aim of this study was to compare the results of culture methods with the results of ATP-Bioluminescence technique of 102 UHT whole milk samples incubated at 48, 72, and 168 hours. UHT milk samples were analyzed for the presence of mesophilic and psychrotrophic aerobic microorganisms using Plate Count Agar (PCA), Brain-Heart Infusion (BHI) media and PetrifilmTM Aerobic Count (AC) plates. The ATP-Bioluminescence technique was applied through the Microbial Luminescent Screening (MLS) system. Significant correlations were found between counts of aerobic mesophilic microorganisms on PCA, PetrifilmTM AC, BHI and results of ATP bioluminescence technique (P≤0.05). The ATP-Bioluminescence technique had higher correlation with counting method in PCA than BHI media. At lower pass/fail limits of Relative Light Units (60, 50, 45 and 40 RLU), the number of samples identified as positive increased and statistically agreed with aerobic mesophilic microorganism counts (P>0.05). For the dairy industry, the ATP-Bioluminescence technique may become an important tool that assists the official methods to quickly monitor the microbiological quality of UHT milk though this will likely require a threshold below 150 RLU.(AU)

Novos métodos são necessários para detectar de forma rápida a contaminação do leite UAT, entre eles, a técnica de ATP-Bioluminescência. Portanto, objetivou-se comparar os resultados de métodos de cultura tradicionais com os resultados de ATP-Bioluminescência de 102 amostras de leite UAT integral incubadas por 48, 72 e 168 horas. Os leites UAT foram analisados quanto à presença de micro-organismos aeróbicos mesófilos e psicrotróficos usando os ágares PCA, BHI e placas PetrifilmTM AC. A técnica de ATP-Bioluminescência foi aplicada por meio do sistema Microbial Luminescent Screening (MLS). Significantes correlações foram obtidas entre as contagens de micro-organismos mesófilos aeróbios em PCA, PetrifilmTM AC, BHI e os resultados da técnica de ATP-Bioluminescência (p<0,05). A técnica de ATP-Bioluminescência tem maior correlação com o método de contagem em meio PCA que BHI. Quando valores limites de Unidades Relativas de Luz (60, 50, 45 e 40 RLU) foram menores, o número de amostras identificadas como positivas aumentou e concordou estatisticamente com a contagem de micro-organismos mesófilos aeróbios (P>0,05). Para as indústrias de laticínios, a técnica de ATP-Bioluminescência pode se tornar uma ferramenta auxiliar aos métodos oficiais para o monitoramento rápido da qualidade microbiológica do leite UAT, desde que sejam utilizados limites abaixo de 150 RLU.(AU)

Avaliação da qualidade microbiológica de bebida láctea e creme de leite UAT por ATP-Bioluminescência / Evaluation of microbiological quality of UHT milk drink and UHT milk cream by ATP-Bioluminescence

Embora métodos tradicionais sejam utilizados na avaliação microbiológica de produtos UAT, metodologias rápidas, baseadas em ATP-Bioluminescência, têm sido desenvolvidas. Os resultados da aplicação dessa técnica em 54 amostras de bebida láctea UAT achocolatada e 12 de creme de leite UAT foram comparados com os resultados de métodos microbiológicos, utilizando-se diferentes meios de cultura e tempos de incubação das referidas amostras. A técnica de ATP-Bioluminescência foi aplicada por meio do sistema MLS, e os resultados foram expressos em unidades relativas de luz (RLU). Em todos os tempos de incubação - 48, 72 e 168 horas - , as amostras apresentaram contagens baixas de microrganismos mesófilos e psicrotróficos aeróbios quando analisadas em meio PCA, BHI, PetrifilmTM AC e por ATP-Bioluminescência (<150 RLU), demonstrando alta especificidade da técnica. Apenas uma amostra de creme de leite UAT apresentou contagem de mesófilos aeróbios acima do padrão estabelecido pela legislação brasileira (<100 UFC/mL) quando analisada em meio PCA (260 UFC/mL) e PetrifilmTM AC (108 UFC/mL), no tempo de 168 horas. Essa alta contagem de microrganismos mesófilos aeróbios também foi detectada pela técnica de ATP-Bioluminescência (416 RLU). Os resultados da técnica de ATP-Bioluminescência foram iguais aos resultados em meio PCA, BHI e PetrifilmTM AC.(AU)

Although traditional methods are used for the microbiological evaluation of UHT products, rapid methodologies based on ATP-Bioluminescence have been developed. The results of applying this technique in 54 samples of chocolate UHT milk drink and 12 of UHT milk cream were compared with the results of microbiological methods, using different culture media and incubation times for the referred samples. The ATP-Bioluminescence technique was applied through the MLS system and the results were expressed as relative light units (RLU). In all incubation times - 48, 72, and 168 hours - , the samples showed lower counts of mesophilic and psychrotrophic aerobic microorganisms when analyzed using PCA, BHI, PetrifilmTM AC and ATP-Bioluminescence (<150RLU), demonstrating the technique's high specificity. Only one sample of UHT milk cream showed a mesophilic aerobic count above the standard established by Brazilian legislation (<100CFU/mL) when analyzed in PCA (260 CFU/mL) and PetrifilmTM AC (108CFU/mL) at 168 hours. This high count of aerobic mesophilic microorganisms was also detected by the ATP-Bioluminescence (416 RLU) technique. The results of the ATP-Bioluminescence technique were equal to the results in PCA, BHI and PetrifilmTM AC.(AU)

Avaliação das boas práticas em uma unidade de alimentação e nutrição escolar de Minas Gerais

A mudança no estilo de vida faz com que o consumidor busque cada vez mais alimentar-se fora de casa. Esta mudança exigiu que as Unidades de Alimentação e Nutrição se adequassem às novas legislações para atender à segurança dos alimentos e às exigências dos consumidores. O objetivo desta pesquisa foi investigar e avaliar as condições higienicossanitárias de todo processo de manipulação de alimentos em uma Unidade de Alimentação e Nutrição escolar de Minas Gerais, por meio da aplicação de checklist e técnica de sedimentação em placas e ATP-Bioluminescência. Para avaliar as BPF, foi utilizado o guia de verificação baseado na RDC 216 (2004) e RDC 275 (2002) com 107 itens divididos em blocos, também foi aplicado um questionário para caracterização do perfil dos funcionários da UAN. Para as análises de sedimentação em placa e ATP-Bioluminescência os pontos de amostragem foram escolhidos conhecendo-se o fluxo de produção da UAN, sendo selecionados 9 pontos e 7 funcionários. Observou-se que 46% tinham idade superior a 20 anos e a renda mensal de 77% dos funcionários é de 1 a 2 salários mínimos. Os resultados globais da aplicação da lista de verificação mostraram que a UAN analisada apresentou valores médios de 50% de atendimento nos quesitos avaliados sendo classificada no grupo 3. Para análise de ATP-biolumescência realizadas na área de preparo (PRE), mesa 1 de preparo (ME 1) e mesa 2 de preparo (ME 2), 100% das amostras obtiveram valores considerados inaceitáveis, quando comparados com a recomendação da American Public Health Association (APHA). Pode-se concluir que a UAN avaliada apresentou elevado grau de não conformidades, não atendendo 47 dos 107 itens avaliados necessários ao atendimento das condições higienicossanitárias satisfatórias, estando, portanto, em desacordo com o programa de Boas Práticas de Fabricação.(AU)

The change in lifestyle makes consumers change feed themselves away from home. This change required the Food and Nutrition Units were suited the new laws to meet food safety and consumer demand. The objective of this research was to investigate and evaluate the hygiene-sanitary around food handling process of a Power Unit and School Nutrition Minas Gerais, through the application of checklist and sedimentation technique on plates and ATP- bioluminescence. To evaluate the GMP guide verification based on RDC 216 (2004) and RDC 275 (2002) with 107 items divided into blocks a questionnaire to characterize the profile of the UNA staff was also applied. For the analysis of sedimentation plate and ATP-Bioluminescence sampling points were chosen knowing the flow of production of UAN, we selected nine points. It was observed that 46% were older than 20 years and the monthly income of 77% of the staffs 1-2 minimum wages. The overall results of the application of the checklist showed that the UAN analyzed showed mean values of 50% attendance in the variables evaluated was classified in group 3 To analyze A TP-biolumescência performed in the staging area (PRE), table 1preparation (ME 1)and table 2 preparation (ME 2), 100% of the samples had values considered unacceptable when compared with the recommendation of the American Public Health Association (APHA). It can be concluded that the UAN evaluated showed a high degree of noncompliance, not meeting 47 of the 107 assessed items necessary to meet the satisfactory sanitary conditions, and is therefore at odds with the quality program Good Manufacturing Practices.(AU)

Eficiência dos métodos microbiológicos e de ATP-bioluminescência na detecção da contaminação de diferentes superfícies / Efficiency of microbiological and ATP-bioluminescence methodologies for detecting contaminants on different surfaces

Nos últimos 30 anos, novas técnicas de análise da limpeza de superfícies, como ATP-bioluminescência, têm sido desenvolvidas. Este trabalho comparou a eficácia dos métodos de análise microbiológica de superfície, utilizando-se placas RODAC® e a contagem padrão em placas pela técnica do swab com a técnica de ATP-bioluminescência. Analisou-se a contaminação em quatro tipos de material: laminado melamínico, vidro, plástico e aço inox. As coletas das amostras foram realizadas em quatro períodos, e em cada período, após a desinfecção com álcool 70%, e após sete dias de contaminação pela exposição ao ambiente de laboratório de microbiologia. Houve total concordância entre as metodologias após a assepsia com álcool 70%. Após a contaminação da superfície dos materiais no ambiente de laboratório microbiológico, houve 63,6% de concordância entre o método clássico e das placas RODAC® (p = 0,006). Não houve diferença estatisticamente significante entre os materiais analisados quanto à contaminação após a exposição ao ambiente. Ao efetuar a análise de contaminação de superfícies, os métodos microbiológicos (clássico e placa RODAC®)não podem ser substituídos pela técnica de ATP-bioluminescência, apesar desta metodologia ser rápida em indicar se uma superfície está adequadamente limpa. (AU)

In the last 30 years new technologies to analysis the surface cleaning procedures based on rapid techniquehave been developed. This study compared the efficacy of classic methodologies for microbiological analysison surfaces, using RODAC® plates and swab, and ATP-bioluminescence technique. The microbiologicalburden was evaluated on four materials: melaminic laminate, glass, plastic and stainless steel. Sampleswere collected in four different periods, and at each period the samples were collected from the surfacesafter applying a cleaning procedure using alcohol 70% and after being exposed to the in a microbiologylaboratory for seven days. A concordance of 100% was found between the classic methodologies and theATP-bioluminescence technique after cleaning procedure; after the atmosphere exposition, 63,6% ofagreement was found between the classic methodology and the RODAC® plates technique (p = 0,006). Nosignificant differences was observed in CFU among four materials after being exposed to atmosphere forseven days. For conducting contaminants analysis on surfaces the classic microbiological methods cannotbe replaced by ATP-bioluminescence technique; although the last one can rapidly indicate whether a surfaceis clean or not, but it should be used along with classic methodologies.(AU)

Perfil de contaminação por Staphylococcus e suas enterotoxinas e monitorização das condições de higiene em uma linha de produção de queijo de coalho / Contamination profile for staphylococci and its enterotoxins and monitorization of the conditions of hygiene in a 'coalho' cheese production line

Avaliou-se o perfil de contaminação por Staphylococcus e suas enterotoxinas e monitorou-se as condições de higiene em uma linha de produção de queijo de coalho por meio da técnica de bioluminescência (ATP). A população de Staphylococcus sp. variou de <1UFC mL-1, no leite pasteurizado a 1,5 x 10(7)UFC mL-1 no leite cru, enquanto que a de Staphylococcus coagulase-positiva oscilou entre <1UFC mL-1 no leite pasteurizado e 5,0 x 10(6)UFC mL-1 no leite cru. Staphylococcus coagulase-positiva foi detectada em 100 por cento (25/25) das amostras de leite cru e em 8 por cento (2/25) das amostras de queijos. Foram identificadas 12 espécies de Staphylococcus entre os 68 isolados selecionados, sendo nove coagulase negativa e três coagulase-positiva. No leite cru observou-se alta freqüência de Staphylococcus coagulase positiva, principalmente S. aureus, enquanto que em leite pasteurizado, coalhada e queijo verificou-se alta freqüência de Staphylococcus coagulase negativa e baixa freqüência de Staphylococcus coagulase-positiva. A presença de enterotoxina estafilocócica foi constatada em 20 por cento das amostras de leite cru e, conseqüentemente, também foi detectada no leite pasteurizado, na coalhada e no queijo produzido. A dosagem de ATP permitiu avaliar o estado de higienização das superfícies, o qual foi considerado: adequado em 62,1 por cento (36/95), "estado de alerta" em 23,2 por cento (22/95) e inadequado em 14,7 por cento (14/95) das superfícies. A detecção de espécies de Staphylococcus com potencial enterotoxigênico e a presença de enterotoxinas revelam a disseminação da contaminação na linha de produção do queijo de coalho provavelmente devido a falhas na aplicação das Boas Práticas de Fabricação desde a obtenção da matéria-prima até a produção final do queijo.(AU)

This research aimed to evaluate the contamination by staphylococci and its enterotoxins as well as to monitor the conditions of hygiene from a coalho cheese production line, using ATP bioluminescence assay. Staphylococcus sp. population varied from <1CFU mL-1, in pasteurized milk to 1.5 x 107CFU mL-1, in raw milk, whereas coagulase-positive staphylococci count ranged from <1CFU mL-1, in pasteurized milk to 5.0 x 106CFU mL-1 in raw milk. Coagulase-positive staphylococci were detected in 100 percent (25/25) of the raw milk samples and in 8 percent (2/25) of cheese samples. Twelve Staphylococcus species were identified within the selected 68 isolates, being nine negative and three positive for coagulase. Raw milk samples showed a high rate of coagulase-positive, being S. aureus the most common, whereas other product samples and equipment surfaces, pieces of furniture, utensils and manipulator gloves samples presented a high frequency of coagulase-negative and low frequency of coagulase-positive. Staphylococcal enterotoxin was detected in 20 percent of the raw milk samples and therefore in pasteurized milk, curd and cheese. ATP measurement permitted to assess the effectiveness of the surfaces cleaning, being considered adequate in 62.1 percent (36/95), "alert state" in 23.2 percent (22/95) and inadequate in 14.7 percent (14/95) of surfaces evaluated. Detection of staphylococci species with enterotoxigenic potential as well as enterotoxin presence reveal dissemination of contamination at the "coalho" cheese production line, possibly due inappropriate Good Manufacturing Practices (GMP) from the initial milking step until the final cheese production.(AU)

Implantação de procedimento de higienização em unidade produtora de queijo minas artesanal, da microrregião da Canastra e avaliação pelo método de ATP-Bioluminescência / Implementation of cleaning and sanitizing procedures in cheese production unit artisanal mines, the micro Canastra and evaluation method-ATP Bioluminescence

A segurança e a viabilidade econômica da transformação do leite em seus derivados dependem fundamentalmente da correta aplicação das técnicas de higienização. Sendo assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar as condições higiênicossanitárias do ambiente e das superfícies de processamento de uma unidade produtora de queijo artesanal da microrregião da Serra da Canastra, MG, por meio da técnica ATP-Bioluminescência e propor um procedimento de higienização que contribua para a segurança e melhoria desse sistema de produção. No período mais susceptível às contaminações,ou seja, no verão, foramescolhidos 12 pontos de amostragempertencentes ao fluxograma de produçãodo queijo Minas artesanal.Esses pontos foram avaliados pelosmétodos de referência (tradicional)e ATP-Bioluminescência. Após essaavaliação inicial, foi sugerido novoprocedimento de limpeza e sanitização para esses pontos, que foramreavaliados ao longo das quatro estaçõestambém por ambos os métodos.Houve diferença (p<0,05) entre osresultados obtidos para as avaliaçõesrealizadas antes e após a aplicaçãodo procedimento proposto para amaioria dos pontos amostrados. Amicroestrutura das superfícies deequipamentos e utensílios apresentouforte interferência, pois os resultadospara os pontos de amostragem,mesa de enformagem e prensagem(MEP), prateleira de maturação (PM) e formas (F) não diferiram (p>0,05)independentemente do procedimentode higienização e das estações do ano.O método de ATP-Biolurninescêncianão apresentou concordância como método tradicional quanto à classificaçãodas condições higiênicasdas superfícies avaliadas. Isso devemuito possivelmente à presençade ATP de origem não microbianaoriunda de resíduos que não foramcompletamente eliminados na etapade limpeza e que são quantificadospelo referido método. [...] (AU)

The food safety and the economicalviability of milk processing dependon appropriated hygiene techniques.The main goal of this work was toevaluate hygienic conditions of foodprocessing environment and surfacesof an artisanal cheesemaking fromthe Canastra area by ATP- Bioluminescencemethod. In addition it wasalso proposed a hygiene procedure toimprove safety and quality of manufactureproceeding. During summer;which is more probability to microbialcontamination, twelve points ofproduction flow were chosen. Suchsamples were analyzed by traditionaland ATP- Bioluminescence methodsduring all seasons. It was suggesteda new procedure of cleaning and sanitationfor both traditional and ATPBioluminescencemethods. There wasdiference (pO.05) independent of hygienizationprocedure and year seasons.ATP- Bioluminescence did not agreewith the reference method in relationto the classification of hygienic conditionsof evaluated surfaces. Probably,the presence of non-microbial ATPfrom food residues contributed toincreasing the ATP level. The resultsfound in the present work showedthat ATP-Bioluminescence techniqueshould be used as an indicator of biologicalmaterial in surface; and it doesnot replace the traditional method.(AU)

Implantação de procedimento de higienização em unidade produtora de queijo minas artesanal, da microrregião da Canastra e avaliação pelo método de ATP-Bioluminescência / Implementation of cleaning and sanitizing procedures in cheese production unit artisanal mines, the micro Canastra and evaluation method-ATP Bioluminescence

A segurança e a viabilidade econômica da transformação do leite em seus derivados dependem fundamentalmente da correta aplicação das técnicas de higienização. Sendo assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar as condições higiênicossanitárias do ambiente e das superfícies de processamento de uma unidade produtora de queijo artesanal da microrregião da Serra da Canastra, MG, por meio da técnica ATP-Bioluminescência e propor um procedimento de higienização que contribua para a segurança e melhoria desse sistema de produção.(AU)

ATP-bioluminescence assay as an alternative for hygiene-monitoring procedures of stainless steel milk contact surfaces

ATP-bioluminescence assay was used to evaluate the cleaning and sanitizing procedures of stainless steel milk contact surfaces. Surfaces of a raw milk transportation tank, a raw milk cooling storage tank, an equalization pasteurizing tank, a pasteurized milk storage tank and a pasteurized milk packaging tank, as well as a milk centrifuge were evaluated. The Relative Light Unit (RLU) using a commercial luminometer and mesophilic aerobic counts (CFU.cm-2) on surfaces were determined. There were no significant differences (p>0.05) in RLU on the assessed surfaces before and after the cleaning and sanitizing procedures. Also, there were no significant differences (p>0.05) in CFU.cm-2 on the surfaces before the cleaning and sanitizing procedures, whereas different bacterial numbers were found on surfaces after the hygiene procedures. The surfaces of the milk centrifuge, raw milk cooling tank and milk packaging tank showed the largest mesophilic aerobic numbers after the hygiene, reaching 2.21, 2.18, and 1.21 log10, respectively. The results demonstrated that there is no agreement among the techniques for classification of hygienic conditions of the evaluated surfaces, showing a non-direct relation between RLU and CFU.cm-2. The ATP-bioluminescence method showed that 100% of the surfaces were under inadequate hygiene conditions, while the plate count method detected only 50%, based on the APHA's recommendation, and 33%, based on the WHO's recommendation. High variations in RLU measurements were observed, suggesting the need for more than only one surface analysis. The ATP-bioluminescence is not a direct replacement for microbiological testing, but provides complementary information and should be used as part of an integrated strategy.

A técnica do ATP-bioluminescência avaliou os procedimentos de higienização de superfícies em aço inoxidável dos tanques de transporte de leite cru, de estocagem de leite cru resfriado, de equilíbrio de um pasteurizador, de estocagem de leite pasteurizado e para embalagem de leite pasteurizado e, ainda, a superfície interna de uma centrífuga de leite quanto à determinação de Unidades Relativas de Luz (URL) e da contagem de mesófilos aeróbios (UFC.cm-2). Não houve diferença significativa (p>0.05) na medida de URL nas superfícies antes e depois do procedimento de higienização. Também, não houve diferença significativa (p>0.05) no número de UFC.cm-2 nas superfícies antes da higienização. No entanto, contagens bacterianas diferentes foram constatadas após este procedimento. As superfícies da centrífuga e dos tanques de leite resfriado e para embalagem de leite apresentaram as maiores contagens após a higienização, atingindo 2,21, 2,18, e 1,21 log10, respectivamente. Os resultados mostram que não há concordância entre os métodos na classificação das condições higiênicas das superfícies, indicando que não há relação direta entre RLU e UFC.cm-2. A técnica do ATP-bioluminescência indicou que 100% das superfícies estavam em condições higiênicas inadequadas, enquanto a contagem bacteriana indicou apenas 50% de acordo com as recomendações da APHA e 33% de acordo com OMS. Variações elevadas nas medidas de URL sugerem a necessidade de se realizar mais de uma análise na mesma superfície. A técnica do ATP-bioluminescência não deve simplesmente substituir os testes microbiológicos mas ser usada para se obter informações complementares para avaliar as condições higiênicas das superfícies para o processamento de leite.

Estudo comparativo dos métodos tradicional e rápido de avaliação de procedimento de higienização, usando clorexidina como sanitizante, em indústrias de laticínios / Comparative study of traditional methods and rapid evaluation procedure for cleaning, using chlorhexidine as a sanitizer in the dairying

O presente trabalho teve o objetivo de estudar comparativamente os métodos tradicional e rápido utilizados na avaliação da eficiência de procedimentos de higienização usando clorexidina como sanitizante em uma superfície característica de uma indústria de laticínios. Para isso, utilizou-se uma máquina produtora de sorvete, na qual a superfície avaliada é constituída de aço-inoxidável ANSI 316. Após a utilização do equipamento, foi realizado o procedimento de limpeza seguido de sanitização com solução de digluconato de clorexidina a 100mg.L-1. A avaliação do procedimento foi realizada pelo método tradicional de contagem padrão em placas para enumeração de mesófilos aeróbios.(...) Os resultados encontrados indicaram não haver concordância entre os métodos quanto à classificação das condições das superfícies avaliadas, no entanto, os mesmos apresentaram correlação positiva e razoavelmente alta (0,73), indicando que o método rápido, ATP-bioluminescência, é uma ferramenta útil na avaliação de procedimentos de limpeza e sanitização.(AU)

This work aimed to make a comparison between the traditional and rapid methods used in assessing theefficiency of procedures for cleaning, being the chlorhexidine the sanitizer, on a typical surface of the dairy industry. For this purpose was used a machine for ice cream production, which surface consists of stainless steel ANSI 316. After using the equipment it was cleaned and sanitized with a solution of chlorhexidine digluconate (100 mg.L-1). The assessment procedure was done using the traditional method of standard count plating for enumeration of mesophilic aerobic. In adjacent areas, the evaluation was performed using a rapid method, the technique of ATP bioluminescence. The results showed that all the assessments made by the traditional method values was less than 2 UFC.cm-2, with 66.7% of the evaluations reached three decimal reductions (3RD). For the rapid method, 17% of evaluations found the area under acceptable conditions of hygiene, 50% were in the range considered "doubtful" and 33% were in unacceptable conditions for the processing of food. The results showed no correlation between the methods with respect to the classification of the areas assessed, however, they showed a positive and reasonably high (0.73) correlation considering the results. This indicates that the rapid method, ATP-bioluminescence, is a tool useful in the evaluation of procedures for cleaning and sanitization. (AU)

Estudo epidemiológico, genotípico e fenotípico de estirpes de Staphylococcus aureus produtoras de biofilmes isoladas do ambiente de ordenha e de casos de mastite bovina

A prevalência da mastite por Staphylococcus aureus em rebanhos leiteiros ocorre devido à sua alta infectividade associada a fatores de virulência que conferem ao microrganismo a capacidade de se instalar no parênquima mamário. Sendo assim o objetivo da presente pesquisa foi avaliar as características fenotípicas, genotípicas e epidemiológicas das estirpes de S. aureus oriundas de leite de vacas com mastite bovina, leite do tanque de expansão, insufladores, mangueiras condutoras de leite, borracha do vácuo, borracha da tampa do tanque de equilíbrio, saída do tanque de equilíbrio, superfície do tanque de expansão e mãos de ordenhadores, em uma propriedade leiteira no município de Indianópolis-MG, no período de Agosto de 2008 a Setembro de 2009. Para tanto foram utilizados os seguintes testes: California Mastitis Test, isolamento microbiológico, provas bioquímicas, extração de DNA, reação em cadeia da polimerase, teste de microplacas, teste do Ágar vermelho congo, microscopia eletrônica de varredura, eletroforese de campo pulsado, teste de sensibilidade aos antimicrobianos, contagem de unidades formadores de colônias, ATP-bioluminescência, eficiência do hipoclorito de sódio e isolamento de pró-fagos e fagos. Os resultados revelaram 440 estirpes de S. aureus com produção de biofilme visualizados nos testes fenotípicos e na microscopia de varredura sendo hla, clfab, agrA e sarA os genes mais prevalentes. Foram também observados a presença de 70 pulsotipos diferentes, sendo o leite de vacas e insufladores os locais com maior quantidade de pulsotipos. Quanto a resistência bacteriana frente aos antimicrobianos foi observada uma maior resistência da Penicilina (90%), Eritromicina (80%)...

The prevalence of Staphylococcus aureus on dairy herds occur due to the high infectivity associated with virulence factors that give the organism the ability to install on the mamary gland, forming microabscesses. Therefore the objective of this study was to evaluate the phenotypic, genotypic and epidemiological strains of S. aureus derived from milk of cows with mastitis, milk tank, foamed milk conductive hoses, vacuum rubber, rubber tank cap balance, leaving the balance tank, the surface of the expansion tank and hands of milk manipulators on a dairy property in the city of Indianapolis-MG in the period August 2008 to September 2009. According to this, the following tests were used: California Mastitis Test, microbiological isolation, biochemical tests, DNA extraction, polymerase chain reaction test, microplate test, Congo red Agar test, scanning electron microscopy, pulsed-field electrophoresis, test antimicrobial susceptibility, counting colony forming units, ATP-bioluminescence, efficiency of sodium hypochlorite and isolation of pro-phages and phages. The results revealed 440 strains of S. aureus to produce biofilm showed in phenotypic tests and scanning electron microscopy and hla, clfAB, agrA and heal the most prevalent genes. It was also observed the presence of 70 different pulsotypes, and the milk of cows and blowers sites with higher amounts of pulsotypes. The bacterial resistance to antimicrobials was observed as increased resistance of penicillin (90%), erythromycin (80%) and clindamycin (74%). When the strains of S. aureus were tested with cell susceptibility to antimicrobials in biofilms it showed the highest efficiency at a concentration of 100mg / L were gentamicin and vancomycin. Concentration of 500mg / L to greater efficiency occurred against vancomycin and gentamicin...

Evaluation of food handlers training in commercial restaurants by using ATP bioluminescence methodology / Avaliação do treinamento de manipuladores de alimentos de restaurantes comerciais pelo ensaio ATP-bioluminescência

Training programs designed for food handlers are an effective way to spread the knowledge and to promote improvements on the hygienic conditions of food establishments. This study aimed at evaluating the effect of a training course on good handling practices for food handlers of selected restaurants in the region of Ouro Preto, MG, Brazil, by using ATP-bioluminescence assay. This test was used to quantify the organic load, measured by Relative Light Units RLU, in samples collected from workers hands, surfaces of work benches and utensils, which were randomly selected in each restaurant. After training, a significant improvement in the hygienic conditions was observed, as evidenced by the decrease in the RLU values in samples from all restaurants. Despite the decreased RLU values, some surfaces did not reach the recommended value for surfaces samples in the satisfactory hygienic conditions. The ATP-bioluminescence test showed to be effective for evaluating the training success, and could be a powerful tool when applied in training programs at food services, and in association with the conventional microbiological methodologies. In spite of the reduction in RLU values, indicating improvements in hygienic conditions, the training and monitoring programs should be continued.

Os programas de treinamentos para manipuladores de alimentos são meios eficazes para transmitir conhecimentos e promover melhorias nas condições higiênico-sanitárias em estabelecimentos alimentícios. Neste trabalho foi avaliado o efeito do treinamento em boas práticas de manipulação de alimentos, ministrado aos funcionários de restaurantes comerciais da região de Ouro Preto MG, por meio do teste de ATP-bioluminescência. O teste foi utilizado para quantificar a carga orgânica, medida como valor de Unidades Relativas de Luz URL, nas amostras coletadas das mãos de manipuladores, de bancadas de trabalho e de superfícies de utensílios, selecionadas aleatoriamente em cada restaurante. Após o treinamento, houve melhoria no padrão higiênico, evidenciado pela redução da carga orgânica nas superfícies avaliadas em todos os restaurantes. Apesar da redução dos valores de URL, algumas superfícies não alcançaram o valor recomendado para superfície em condições higiênicas satisfatórias. A aplicação do teste ATP-bioluminescência para avaliação do treinamento de manipuladores mostrou ser eficaz e pode ser empregado em associação com os tradicionais métodos de contagem de micro-organismos em treinamentos realizados em Unidades de Alimentação e Nutrição. Apesar da redução dos valores de URL indicar a melhoria nas condições higiênicas, o trabalho de treinamento e monitoramento deve ser conti