Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L. system

Abstract For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L. system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

Abstract For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados ​​contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Cytogenetic abnormalities in patients with hematological malignancies in Lahore city, Pakistan / Anormalidades citogenéticas em pacientes com neoplasias hematológicas na cidade de Lahore, Paquistão

Abstract Hematological and hematopoietic cells malignancies of the genes and hematopoietic cells are associated with the genetic mutation, often at the chromosomal level. The standard cytogenetic study is widely accepted as one of the main diagnostics and prognostic determinants in patients. Therefore, the current descriptive and cross-sectional study sought to determine the cytogenetic analysis of frequent hematological malignancies in Pakistan. A total of 202 peripheral bone marrow or blood samples from patients with benign and malignant hematological malignancy were taken using a conventional G-banding technique. Among enrolled patients, the mean age was 21.5 years ± 23.4, and gender-wise distribution showed a marked predominance of the male 147 (73%) population compared to the female 55 (27%). Patients in the age group (2-10 years) had the highest frequency, 48 (24%), of hematological neoplasms, followed by age (11-20 years) with 40 (20%). Normal karyotypes (46, XX/46, XY) was found in 51% (n=103) patients. Furthermore, the frequency of complex karyotype was 30 (15%), while normal was seen in 171 (85%) patients. Pre-B Acute Lymphoblastic Leukemia (Pre-B ALL) was the most prevalent malignancy of 66 (33%), followed by Chronic Myelogenous Leukemia (CML) of 41 (20%) and Acute Lymphocytic Leukemia of 29 (14%). Translocation was the most prevalent 50 (25%), followed by hypotriploidy 14 (7%) and monosomy 8 (4%) on chromosome aberration analysis. In addition, t(9:22) translocation was found to be 20 (10%) in CML, with the majority in the age group (31-40 years). This study recommends that karyotyping should be tested frequently in hematological conditions because it may provide insight into the relative chromosomal changes associated with particular malignancies.

Resumo As neoplasias hematológicas e de células hematopoiéticas dos genes e as células hematopoiéticas estão associadas à mutação genética, geralmente em nível cromossômico. O estudo citogenético padrão é amplamente aceito como um dos principais determinantes diagnósticos e prognósticos em pacientes. Portanto, o presente estudo descritivo e transversal buscou determinar a análise citogenética de neoplasias hematológicas frequentes no Paquistão. Um total de 202 amostras de medula óssea periférica ou sangue de pacientes com malignidade hematológica benigna e maligna foi coletado usando uma técnica convencional de banda G. Entre os pacientes inscritos, a média de idade foi de 21,5 anos ± 23,4, e a distribuição por gênero mostrou uma marcada predominância da população masculina de 147 (73%) em comparação com a feminina de 55 (27%). Pacientes na faixa etária (2-10 anos) tiveram a maior frequência, 48 (24%), de neoplasias hematológicas, seguida da idade (11-20 anos) com 40 (20%). Cariótipos normais (46, XX / 46, XY) foram encontrados em 51% (n = 103) dos pacientes. Além disso, a frequência de cariótipo complexo foi de 30 (15%), enquanto normal foi observada em 171 (85%) pacientes. Leucemia linfoblástica aguda pré-B (LLA Pré-B) foi a doença maligna mais prevalente de 66 (33%), seguida por leucemia mieloide crônica (LMC) de 41 (20%) e leucemia linfocítica aguda de 29 (14%). A translocação foi o 50 mais prevalente (25%), seguido por hipotriploidia 14 (7%) e monossomia 8 (4%) na análise de aberração cromossômica. Além disso, a translocação t (9:22) encontrada foi de 20 (10%) na LMC, com a maioria na faixa etária (31-40 anos). Este estudo recomenda que o cariótipo deve ser testado com frequência em condições hematológicas porque pode fornecer informações sobre as alterações cromossômicas relativas associadas a doenças malignas específicas.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-¹ and 1.0 mg mL-¹ MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-¹). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-¹, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-¹ e 1,0 mg mL-¹ foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-¹ de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-¹, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-¹ and 1.0 mg mL-¹ MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-¹). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-¹, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.(AU)

Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-¹ e 1,0 mg mL-¹ foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-¹ de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-¹, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.(AU)

Evaluation of cytotoxicity and genotoxicity of Hancornia speciosa latex in Allium cepa root model

Abstract The latex obtained from Hancornia speciosa Gomes (Mangabeira tree) is widely used in traditional medicine to treat a variety of diseases, including diarrhea, ulcer, gastritis, tuberculosis, acne and warts. In this study, the cytotoxicity and genotoxicity effects of H. speciosa latex on the root meristem cells of Allium cepa were examined. Onion bulbs were exposed to different concentrations of latex and then submitted to microscopic analysis using Giemsa stain. Water was used as a negative control and sodium azide as a positive control. The results showed that, under the testing conditions, the mitotic index (MI) of the onion roots submitted to latex treatment did not differ significantly from the negative control, which suggests that the latex is not cytotoxic. Low incidence of chromosome aberrations in the cells treated with H. speciosa latex was also observed, indicating that the latex does not have genotoxic effect either. The MI and the chromosome aberration frequency responded to the latex concentration, requiring more studies to evaluate the dosage effect on genotoxicity. The results indicate that in tested concentrations H. speciosa latex is probably not harmful to human health and may be potentially used in medicine.

Resumo O látex obtido de Hancornia speciosa é amplamente utilizado na medicina popular para tratar uma variedade de doenças, tais como: diarreia, úlcera, gastrite, tuberculose, acne e verrugas. Nesse estudo, foram avaliados os efeitos citotóxicos e genotóxicos do látex de H. speciosa sobre as células meristemáticas das raízes de Allium cepa. Os bulbos das cebolas foram expostos a diferentes concentrações de látex e depois submetidos à analise microscópica usando o corante Giemsa. A água foi usada como controle negativo e a ázida sódica como controle positivo. Os resultados mostraram que o índice mitótico (IM) das raízes de cebola submetidas ao tratamento com látex, nas condições testadas, não diferiram significativamente do controle negativo, e sugerem que o látex não é citotóxico. Também foi observada uma baixa incidência de aberrações cromossômicas nas células tratadas com látex de H. speciosa, o que sugere que o látex também não possui efeito genotóxico. O IM e a frequência de aberrações cromossômicas foram dependentes da concentração de látex. Outros estudos devem ser realizados para avaliar o efeito da dose na genotoxidade. Os resultados indicam que o látex de mangabeira, nas concentrações testadas, provavelmente não é danoso para saúde humana e pode ter potencial para ser usado na medicina.

Cytotoxicity of Cheese and Cheddar Cheese food flavorings on Allim cepa L root meristems

Abstract Despite their great importance for the food industry, flavorings, in general, raise a number of questions regarding their cytotoxicity, mutagenicity and carcinogenicity, since, in the literature, there are few studies found evaluating the toxicity on the systemic and cellular level, of these chemical compounds. The root meristems of Allium cepa (onion) are widely used for the assessment of toxicity of chemical compounds of interest. Thus, this study aimed to evaluate, in A. cepa meristematic cells, individually and in combination at the cellular level, the toxicity of synthetic Cheese and Cheddar Cheese food flavorings, identical to the natural, at doses of 1.0 and 2.0 mL, at exposure times of 24 and 48 hours. In combination we used 0.5 mL of Cheese flavor associated with 0.5 mL of Cheddar flavor; and 1.0 mL of Cheese flavor associated with 1.0 mL of Cheddar flavor, at exposure times of 24 and 48 hours. For these evaluations, we used groups of five onion bulbs, which were first embedded in distilled water and then transferred to their respective doses. The root tips were collected and fixed in acetic acid (3:1) for 24 hours. The slides were prepared by crushing and were stained with 2% acetic orcein. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each control and exposure time. The mitotic indices calculated and cellular aberrations observed were subjected to statistical analysis using the chi-square test (p 0.05). No chromosomal abnormalities nor those of mitotic spindle were observed for the treatments performed. The results, both individually and in combination, showed that the flavorings under study significantly reduced the cell division rate of the test system cells used. Therefore, under the conditions studied, the two flavorings were cytotoxic.

Resumo Apesar da grande importância para a indústria alimentícia, os aromatizantes, em geral, suscitam uma série de dúvidas quanto a sua citotoxicidade, mutagenicidade e carcinogenicidade, visto que, na literatura, poucos são os trabalhos encontrados avaliando a toxicidade, em nível sistêmico e celular, destes compostos químicos. Os meristemas de raízes de Allium cepa (cebola) são muito utilizados para a avaliação da toxicidade de compostos químicos de interesse. Desta forma, este trabalho teve por objetivo avaliar em células meristemáticas de A. cepa, de forma individual, a toxicidade em nível celular de aromatizantes alimentares sintéticos, idênticos aos naturais, de sabores Queijo e Queijo Cheddar, nas doses de 1,0 e 2,0 mL, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas; e de forma associada, onde se utilizou 0,5 mL do aromatizante sabor Queijo associado a 0,5 mL do aromatizante sabor Queijo Cheddar; e 1,0 mL do aromatizante sabor Queijo associado a 1,0 mL do aromatizante sabor Queijo Cheddar, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas. Para estas avaliações utilizou-se grupos de cinco bulbos de cebolas, que primeiramente foram enraizados em água destilada, e em seguida transferidos para as suas respectivas doses. As radículas foram coletadas e fixadas em ácido acético (3:1) por 24 horas. As lâminas foram preparadas pela técnica de esmagamento e coradas com orceína acética a 2%. Analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada controle e tempo de exposição. Os índices mitóticos calculados e as aberrações celulares observadas foram submetidos à análise estatística do Qui-quadrado (p 0,05). Não foram observadas alterações cromossômicas e anomalias de fuso mitótico para nenhum dos tratamentos realizados. Os resultados obtidos, tanto individualmente como de forma associada, mostraram que os aromatizantes em estudos reduziram de forma significativa os índices de divisões celulares das células do sistema teste utilizado. Portanto, nas condições analisadas, os dois aromatizantes foram citotóxicos.

Evaluation of cytotoxicity and genotoxicity of Hancornia speciosa latex in Allium cepa root model

Abstract The latex obtained from Hancornia speciosa Gomes (Mangabeira tree) is widely used in traditional medicine to treat a variety of diseases, including diarrhea, ulcer, gastritis, tuberculosis, acne and warts. In this study, the cytotoxicity and genotoxicity effects of H. speciosa latex on the root meristem cells of Allium cepa were examined. Onion bulbs were exposed to different concentrations of latex and then submitted to microscopic analysis using Giemsa stain. Water was used as a negative control and sodium azide as a positive control. The results showed that, under the testing conditions, the mitotic index (MI) of the onion roots submitted to latex treatment did not differ significantly from the negative control, which suggests that the latex is not cytotoxic. Low incidence of chromosome aberrations in the cells treated with H. speciosa latex was also observed, indicating that the latex does not have genotoxic effect either. The MI and the chromosome aberration frequency responded to the latex concentration, requiring more studies to evaluate the dosage effect on genotoxicity. The results indicate that in tested concentrations H. speciosa latex is probably not harmful to human health and may be potentially used in medicine.(AU)

Resumo O látex obtido de Hancornia speciosa é amplamente utilizado na medicina popular para tratar uma variedade de doenças, tais como: diarreia, úlcera, gastrite, tuberculose, acne e verrugas. Nesse estudo, foram avaliados os efeitos citotóxicos e genotóxicos do látex de H. speciosa sobre as células meristemáticas das raízes de Allium cepa. Os bulbos das cebolas foram expostos a diferentes concentrações de látex e depois submetidos à analise microscópica usando o corante Giemsa. A água foi usada como controle negativo e a ázida sódica como controle positivo. Os resultados mostraram que o índice mitótico (IM) das raízes de cebola submetidas ao tratamento com látex, nas condições testadas, não diferiram significativamente do controle negativo, e sugerem que o látex não é citotóxico. Também foi observada uma baixa incidência de aberrações cromossômicas nas células tratadas com látex de H. speciosa, o que sugere que o látex também não possui efeito genotóxico. O IM e a frequência de aberrações cromossômicas foram dependentes da concentração de látex. Outros estudos devem ser realizados para avaliar o efeito da dose na genotoxidade. Os resultados indicam que o látex de mangabeira, nas concentrações testadas, provavelmente não é danoso para saúde humana e pode ter potencial para ser usado na medicina.(AU)

Cytotoxicity of Cheese and Cheddar Cheese food flavorings on Allim cepa L root meristems / Citotoxicidade de aromatizantes alimentares de Queijo e Queijo Cheddar sob meristemas de raízes de Allim cepa L

Abstract Despite their great importance for the food industry, flavorings, in general, raise a number of questions regarding their cytotoxicity, mutagenicity and carcinogenicity, since, in the literature, there are few studies found evaluating the toxicity on the systemic and cellular level, of these chemical compounds. The root meristems of Allium cepa (onion) are widely used for the assessment of toxicity of chemical compounds of interest. Thus, this study aimed to evaluate, in A. cepa meristematic cells, individually and in combination at the cellular level, the toxicity of synthetic Cheese and Cheddar Cheese food flavorings, identical to the natural, at doses of 1.0 and 2.0 mL, at exposure times of 24 and 48 hours. In combination we used 0.5 mL of Cheese flavor associated with 0.5 mL of Cheddar flavor; and 1.0 mL of Cheese flavor associated with 1.0 mL of Cheddar flavor, at exposure times of 24 and 48 hours. For these evaluations, we used groups of five onion bulbs, which were first embedded in distilled water and then transferred to their respective doses. The root tips were collected and fixed in acetic acid (3:1) for 24 hours. The slides were prepared by crushing and were stained with 2% acetic orcein. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each control and exposure time. The mitotic indices calculated and cellular aberrations observed were subjected to statistical analysis using the chi-square test (p 0.05). No chromosomal abnormalities nor those of mitotic spindle were observed for the treatments performed. The results, both individually and in combination, showed that the flavorings under study significantly reduced the cell division rate of the test system cells used. Therefore, under the conditions studied, the two flavorings were cytotoxic.(AU)

Resumo Apesar da grande importância para a indústria alimentícia, os aromatizantes, em geral, suscitam uma série de dúvidas quanto a sua citotoxicidade, mutagenicidade e carcinogenicidade, visto que, na literatura, poucos são os trabalhos encontrados avaliando a toxicidade, em nível sistêmico e celular, destes compostos químicos. Os meristemas de raízes de Allium cepa (cebola) são muito utilizados para a avaliação da toxicidade de compostos químicos de interesse. Desta forma, este trabalho teve por objetivo avaliar em células meristemáticas de A. cepa, de forma individual, a toxicidade em nível celular de aromatizantes alimentares sintéticos, idênticos aos naturais, de sabores Queijo e Queijo Cheddar, nas doses de 1,0 e 2,0 mL, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas; e de forma associada, onde se utilizou 0,5 mL do aromatizante sabor Queijo associado a 0,5 mL do aromatizante sabor Queijo Cheddar; e 1,0 mL do aromatizante sabor Queijo associado a 1,0 mL do aromatizante sabor Queijo Cheddar, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas. Para estas avaliações utilizou-se grupos de cinco bulbos de cebolas, que primeiramente foram enraizados em água destilada, e em seguida transferidos para as suas respectivas doses. As radículas foram coletadas e fixadas em ácido acético (3:1) por 24 horas. As lâminas foram preparadas pela técnica de esmagamento e coradas com orceína acética a 2%. Analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada controle e tempo de exposição. Os índices mitóticos calculados e as aberrações celulares observadas foram submetidos à análise estatística do Qui-quadrado (p 0,05). Não foram observadas alterações cromossômicas e anomalias de fuso mitótico para nenhum dos tratamentos realizados. Os resultados obtidos, tanto individualmente como de forma associada, mostraram que os aromatizantes em estudos reduziram de forma significativa os índices de divisões celulares das células do sistema teste utilizado. Portanto, nas condições analisadas, os dois aromatizantes foram citotóxicos.(AU)

Cytotoxicity of erythrosine (E-127), brilliant blue (E-133) and red 40 (E-129) food dyes in a plant test system / Citotoxicidade dos corantes alimentares erythrosine (E-127), azul brilhante (E-133) e red 40 (E-129) em sistema-teste vegetal

The objective of this work was to evaluate the cytotoxic effect of the food dyes erythrosine, brilliant blue and red 40 on the cell cycle of Allium cepa L. Each dye was evaluated at doses of 0.4 and 4.0 ml, at exposure times of 24 and 48 hours, in onion root tip cells. Cells and the presence of chromosomal aberrations were analyzed throughout the whole cell cycle, totaling 5,000 cells for each group of bulbs. The mitotic index was calculated and the statistical analysis was conducted through the Chi-square test (p < 0.05). From the obtained results, it was verified that the food additives erythrosine and brilliant blue were not cytotoxic to the cells of the test system. However, the red 40 dye, at the two evaluated doses and the two exposure times used in this bioassay have promoted a significant reduction in cell division and induced the emergence of anaphasic and telophasic bridge aberrations and micronucleated cells. Additional cytotoxicity studies should be conducted to add information to these and other previously obtained results in order to evaluate, with property, the action of these three dyes on a cellular level.

Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito citotóxico dos corantes alimentares eritrosina, azul brilhante e vermelho 40 sobre o ciclo celular de Allium cepa L. Cada corante foi avaliado nas doses de 0,4 e 4,0mL, nos tempos de exposição de 24 e 48h, em células meristemáticas de raízes de cebolas. Foram analisadas células em todo o ciclo celular e a presença de aberrações cromossômicas, totalizando 5.000 células para cada grupo de bulbos. Calculou-se o índice mitótico e a análise estatística foi feita por meio do teste Qui-quadrado (p < 0,05). A partir dos resultados obtidos, verificou-se que os aditivos alimentares eritrosina e azul brilhante não foram citotóxicos às células do sistema-teste em questão. Já o corante vermelho 40, nas duas doses avaliadas e nos dois tempos de exposição estipulados para este bioensaio, promoveu redução significativa da divisão celular e induziu o aparecimento de aberrações dos tipos ponte anafásica, ponte telofásica e célula micronucleada. Estudos adicionais de citotoxicidade devem ser conduzidos para se somar a estes para assim avaliar, com propriedade, a ação destes três corantes em nível celular.

Genotoxicity and toxicity evaluations of ECF cellulose bleaching effluents using the Allium cepa L. Test

Toxicity and genotoxicity tests were performed on root cells of Allium cepa in order to evaluate wastewater quality following an ECF cellulose bleaching process. The results revealed a toxic effect of the effluent, with inhibition of meristem growth and generally lower values of metaphase, anaphase and telophase indices at pH 10.5 than pH 7 for all effluent concentrations. The genotoxicity effect was different from the toxic effect given that the micronucleus and the chromosomal aberration tests in anaphase-telophase cells were low over all ranges of the studied effluent concentrations.

Os testes de toxicidade e genotoxicidade foram realizados em células da raiz de Allium cepa, a fim de avaliar a qualidade do efluente na sequência de um processo de branqueamento de celulose ECF. Os resultados revelaram um efeito tóxico do efluente, com inibição de crescimento do meristema e valores geralmente baixos de metáfase, anáfase e índices de telófase, a pH 10,5 e pH 7, para todas as concentrações do efluente. O efeito de genotoxicidade foi diferente do efeito tóxico, uma vez que o micronúcleo e os testes de aberrações cromossômicas em anáfase-telófase das células foram baixos em todas as gamas de concentrações do efluente estudado.

Efficacy of aqueous garlic extract on growth, aflatoxin B1 production, and Cyto-morphological aberrations of Aspergillus flavus, causing human ophthalmic infection: topical treatment of A. flavus keratitis

By using agar well diffusion assay, antifungal activity of aqueous extract prepared from Egyptian garlic (Allium sativum L.) was evaluated in vitro against two strains of Aspergillus flavus (OC1 and OC10) causing human ocular infection. The recorded minimum inhibitory concentration (MIC) for growth inhibition of both strains was 3.60 mg/ml. Aqueous garlic extract (AGE) was used in successive in vivo tests as an attempt to cure rabbit's fungal keratitis caused by A. flavus OC1. Findings showed that diluted preparation of AGE was effective topical antifungal agent and succeeded to cure severe A. flavus keratitis in a time course less than 10 days without any observable side effects. Microscopic examination showed that AGE induced deleterious cyto-morphological aberrations inA. flavus target cells. AGE applied to Czapek's broth via contact method was more effective on growth, spores and aflatoxin B1 production than AGE applied to the same broth at the same concentration via fumigation method.(AU)

Aneuplodia de cromossomos sexuais em gato de pelagem tortoiseshell - relato de caso / Aneuploidy of sex chromosomes in a tortoiseshell cat - case report / Aneuploidía de cromosomas sexuales en un gato de pelaje tortoiseshell - reporte de un caso

A análise citogenética é uma importante etapa no diagnóstico de animais com histórico de esterilidade ou infertilidade. Durante anos, os estudos cromossômicos foram indicados para as espécies de produção. Atualmente, a procura por tais análises em animais de companhia tem aumentado. Em gatos, a coloração da pelagem tortoiseshell apresenta predominância de pêlos pretos mesclados com pêlos brancos e laranja pelo corpo todo, e, na coloração denominada calico, essas três cores se apresentam como manchas independentes, com predominância da cor branca. Porém, todos esses padrões são restritos a fêmeas. É raro observar gatos machos tortoiseshell ou calico, fruto da ocorrência de aberrações cromossômicas. Relata-se, neste caso, a análise cromossômica de um gato tortoiseshell com conjunto cromossômico diploide de 2n = 39,XXY, ou seja, um cromossomo X extra, semelhante ao que ocorre na síndrome de Klinefelter, em humanos.

Cytogenetic analysis is an important step in the diagnosis of animals with a history of infertility or sterility. While chromosomal studies have been indicated for livestock species for years, the demand for such analyzes in companion animals has recently increased. The coat color in cats known as tortoiseshell presents predominance of black hair mixed with white and orange hair all over the body and, in the color pattern known as calico, these three colors are presented as independent spots with predominance of white hair. However, all of these patterns are limited to females due to sex-linked inheritance. Male tortoiseshell or calico cats occur rarely, due to the occurrence of chromosomal aberrations. This article reports the chromosomal analysis of a male cat with tortoiseshell pelage that presented an extra X chromosome (diploid chromosome set of 2n = 39,XXY), a condition which is similar to Klinefelter syndrome in humans.

El examen citogenético representa una importante etapa en el diagnóstico de animales con antecedentes de esterilidad o infertilidad. Durante muchos años, los estudios cromosómicos sólo eran indicados para las especies utilizadas en producción animal. Actualmente, la búsqueda de dichos análisis en perros y gatos se ha incrementado. En los gatos, la coloración del pelaje tortoiseshell puede tener una predominancia de pelos negros mezclados con pelos blancos y anaranjados distribuidos en todo el cuerpo, o bien presentarse una coloración denominada calicó, en la que esos tres colores se muestran como manchas independientes, con predominancia del color blanco. Este tipo de pelaje ocurre en hembras, y en raras ocasiones puede ser observado en gatos machos, debido a la presencia de aberraciones cromosómicas. En este trabajo se relata un caso donde se realizó el análisis cromosómico de un gato tortoiseshell, que tenía un conjunto cromosómico diploide de 2n = 39,XXY, es decir un cromosoma X de más, similar a lo que ocurre en el síndrome de Klinefelter en seres humanos.

Aneuplodia de cromossomos sexuais em gato de pelagem tortoiseshell - relato de caso / Aneuploidy of sex chromosomes in a tortoiseshell cat - case report / Aneuploidía de cromosomas sexuales en un gato de pelaje tortoiseshell - reporte de un caso

A análise citogenética é uma importante etapa no diagnóstico de animais com histórico de esterilidade ou infertilidade. Durante anos, os estudos cromossômicos foram indicados para as espécies de produção. Atualmente, a procura por tais análises em animais de companhia tem aumentado. Em gatos, a coloração da pelagem tortoiseshell apresenta predominância de pêlos pretos mesclados com pêlos brancos e laranja pelo corpo todo, e, na coloração denominada calico, essas três cores se apresentam como manchas independentes, com predominância da cor branca. Porém, todos esses padrões são restritos a fêmeas. É raro observar gatos machos tortoiseshell ou calico, fruto da ocorrência de aberrações cromossômicas. Relata-se, neste caso, a análise cromossômica de um gato tortoiseshell com conjunto cromossômico diploide de 2n = 39,XXY, ou seja, um cromossomo X extra, semelhante ao que ocorre na síndrome de Klinefelter, em humanos.(AU)

Cytogenetic analysis is an important step in the diagnosis of animals with a history of infertility or sterility. While chromosomal studies have been indicated for livestock species for years, the demand for such analyzes in companion animals has recently increased. The coat color in cats known as tortoiseshell presents predominance of black hair mixed with white and orange hair all over the body and, in the color pattern known as calico, these three colors are presented as independent spots with predominance of white hair. However, all of these patterns are limited to females due to sex-linked inheritance. Male tortoiseshell or calico cats occur rarely, due to the occurrence of chromosomal aberrations. This article reports the chromosomal analysis of a male cat with tortoiseshell pelage that presented an extra X chromosome (diploid chromosome set of 2n = 39,XXY), a condition which is similar to Klinefelter syndrome in humans.(AU)

El examen citogenético representa una importante etapa en el diagnóstico de animales con antecedentes de esterilidad o infertilidad. Durante muchos años, los estudios cromosómicos sólo eran indicados para las especies utilizadas en producción animal. Actualmente, la búsqueda de dichos análisis en perros y gatos se ha incrementado. En los gatos, la coloración del pelaje tortoiseshell puede tener una predominancia de pelos negros mezclados con pelos blancos y anaranjados distribuidos en todo el cuerpo, o bien presentarse una coloración denominada calicó, en la que esos tres colores se muestran como manchas independientes, con predominancia del color blanco. Este tipo de pelaje ocurre en hembras, y en raras ocasiones puede ser observado en gatos machos, debido a la presencia de aberraciones cromosómicas. En este trabajo se relata un caso donde se realizó el análisis cromosómico de un gato tortoiseshell, que tenía un conjunto cromosómico diploide de 2n = 39,XXY, es decir un cromosoma X de más, similar a lo que ocurre en el síndrome de Klinefelter en seres humanos.(AU)

Karyotype characterization of Mugil incilis Hancock, 1830 (Mugiliformes: Mugilidae), including a description of an unusual co-localization of major and minor ribosomal genes in the family

This study reports the description of the karyotype of Mugil incilis from Venezuela. The chromosome complement is composed of 48 acrocentric chromosomes, which uniformly decrease in size. Therefore, the homologues can not be clearly identified, with the exception of one of the largest chromosome pairs, classified as number 1, whose homologues may show a subcentromeric secondary constriction, and of chromosome pair number 24, which is considerably smaller than the others. C-banding showed heterochromatic blocks at the centromeric/pericentromeric regions of all chromosomes, which were more conspicuous on chromosomes 1, given the C-positive signals include the secondary constrictions. AgNO3 and fluorescent in situ hybridization (FISH) with 45S rDNA demonstrated that the nucleolus organizer regions are indeed located on the secondary constrictions of chromosome pair number 1. FISH with 5S rDNA revealed that the minor ribosomal genes are located on this same chromosome pair, near the NORs, though signals are closer to the centromeres and of smaller size, compared to those of the major ribosomal gene clusters. This is the first description of co-localization of major and minor ribosomal genes in the family. Data are discussed from a cytotaxonomic and phylogenetic perspective.(AU)

Análise citogenética em trabalhadores rurais expostos a agrotóxicos / Cytogenetic analysis investigation in farmers exposed to pesticides

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos da exposição aos agrotóxicos em trabalhadores rurais, usando dois testes para avaliação, o colinesterásico e o citogenético, uma vez que se observa que não são obedecidas às indicações de segurança, o que consequentemente, leva a danos a saúde como os efeitos neurotóxicos, o câncer e até mesmo a morte. Foram estudados trabalhadores rurais residentes no município de São Miguel Arcanjo (SP), local que possui sua economia voltada à agricultura. Como métodos foram realizados testes citogenéticos e medida dos níveis de colinesterase. Estes níveis são constantemente dosados nos indivíduos que trabalham na agricultura, porém acredita-se que estes não refletem possíveis alterações no material genético. Os resultados mostraram um grande número de indivíduos com alterações genéticas (de 36 indivíduos analisados, 21 apresentaram algum tipo de alteração), o que leva a uma reflexão com relação ao uso indevido dos produtos tóxicos, assim como, a não utilização de equipamento de proteção individual. Estas informações sugerem a existência de uma questão social e educacional envolvida com este assunto e a necessidade de mais atenção à saúde do trabalhador em regiões rurais.

This study aimed to evaluate the genotoxic effect in agricultural workers that are exposed to pesticides, using two different tests for evaluation; the cholinesterase and the cytogenetic. At a time that we observed that indications of safety are not obeyed, what consequently, cause damages to their health as a neurotoxic effect, cancer and even death. The studied was conducted in agricultural workers residing in the city of São Miguel Arcanjo (SP) that has a major part of its economy directed to agriculture. The method was carried through cytogenetic tests and measures in the levels of cholinesterase. These levels were constantly dosed in the individuals working in agriculture; believing that these do not reflect possible alterations in the genetic material. The results had shown a great number of individuals with genetic alterations (of 36 individuals analyzed, 21 had presented some type of alteration), what has lead us to a reflection in regards to the improper use of the pesticides, as well as, not using proper personal protection equipment. This information has lead us to believe that the problem with this subject involved a social and educational matter and that perhaps we should pay more attention to the health of agricultural workers in the region.

Análise citogenética em trabalhadores rurais expostos a agrotóxicos / Cytogenetic analysis investigation in farmers exposed to pesticides

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos da exposição aos agrotóxicos em trabalhadores rurais, usando dois testes para avaliação, o colinesterásico e o citogenético, uma vez que se observa que não são obedecidas às indicações de segurança, o que consequentemente, leva a danos a saúde como os efeitos neurotóxicos, o câncer e até mesmo a morte. Foram estudados trabalhadores rurais residentes no município de São Miguel Arcanjo (SP), local que possui sua economia voltada à agricultura. Como métodos foram realizados testes citogenéticos e medida dos níveis de colinesterase. Estes níveis são constantemente dosados nos indivíduos que trabalham na agricultura, porém acredita-se que estes não refletem possíveis alterações no material genético. Os resultados mostraram um grande número de indivíduos com alterações genéticas (de 36 indivíduos analisados, 21 apresentaram algum tipo de alteração), o que leva a uma reflexão com relação ao uso indevido dos produtos tóxicos, assim como, a não utilização de equipamento de proteção individual. Estas informações sugerem a existência de uma questão social e educacional envolvida com este assunto e a necessidade de mais atenção à saúde do trabalhador em regiões rurais.(AU)

This study aimed to evaluate the genotoxic effect in agricultural workers that are exposed to pesticides, using two different tests for evaluation; the cholinesterase and the cytogenetic. At a time that we observed that indications of safety are not obeyed, what consequently, cause damages to their health as a neurotoxic effect, cancer and even death. The studied was conducted in agricultural workers residing in the city of São Miguel Arcanjo (SP) that has a major part of its economy directed to agriculture. The method was carried through cytogenetic tests and measures in the levels of cholinesterase. These levels were constantly dosed in the individuals working in agriculture; believing that these do not reflect possible alterations in the genetic material. The results had shown a great number of individuals with genetic alterations (of 36 individuals analyzed, 21 had presented some type of alteration), what has lead us to a reflection in regards to the improper use of the pesticides, as well as, not using proper personal protection equipment. This information has lead us to believe that the problem with this subject involved a social and educational matter and that perhaps we should pay more attention to the health of agricultural workers in the region.(AU)

Ovariohisterectomia por celiotomia ou videocirurgia considerando o estresse oxidativo e o estudo citogenético em gatas

Com o advento da técnica cirúrgica minimamente invasiva, a castração por cirur-gia laparoscópica vem ganhando popularidade por apresentar vantagens, como menor trauma tecidual e manipulação visceral objetiva, em comparação com pro-cedimento cirúrgico tradicional por celiotomia. Esse estudo analisou os dados dis-poníveis sobre o impacto da cirurgia minimamente invasiva em relação à OVH laparotômica considerando o estresse oxidativo e resultados de um estudo cito-genético em linfócitos do sangue periférico no cromossomo de gatas. Foram utili-zados nesse experimento quarenta gatas sem raça definida, separadas em quatro grupos, sendo os animais de dois grupos apenas anestesiados (um grupo de dez foi anestesiado durante treze minutos e o outro grupo durante quarenta e três mi-nutos). Nos outros dois grupos, os animais foram submetidos a duas técnicas dis-tintas de ovariohisterectomia por laparoscopia e por celiotomia (técnica tradicio-nal). Para os dois outros grupos que foram submetidos à cirurgia, 3 mL de sangue foram recolhidos a partir da veia cefálica, em três momentos diferentes, por punção venosa em tubos de vácuo com heparina de lítio, de cada paciente. A primeira colheita, de 1ml antes da anestesia, a segunda, de 1ml imediatamente após a cirurgia, e a outra, vinte e quatro horas após a cirurgia. Os resultados obtidos fo-ram produto da técnica operatória e não do anestésico utilizado. Houve significância estatística no grupo da laparotomia em relação ao grupo da laparotomia no tempo três em relação ao estresse oxidativo, e no tempo dois no grupo da lapa-roscopia em relação ao grupo da laparotomia. Em conclusão, o presente estudo mostrou que a laparoscopia gerou significativamente menos estresse oxidativo do que a cirurgia aberta, e apesar de ter provocado maior dano ao DNA (como quebras e aberrações), pôde se observar no grupo da laparoscopia uma tendência à normalidade dos danos no tempo três.Essa situação não foi observada no grupo da laparotomia, sugerindo um maior risco de danos nesse grupo ao longo do tempo.

With the advent of minimally invasive surgical technique, castration by laparoscop-ic surgery is gaining popularity for its advantages as less tissue trauma and objec-tive visceral manipulation compared to traditional laparotomy surgery. This study analyzed data on the impact of minimally invasive surgery compared to the lapa-rotomy OVH through oxidative stress and a cytogenetic study in peripheral blood lymphocytes in cats chromosomes. In the experiment were used 40 mongrel cats, separated into 4 groups, two groups of anesthesia (one group of 10 animals was anesthetized for 13 minutes and the other group for 43 minutes). The two other groups were subjected to the two different ovariohysterectomy techniques, lapa-roscopy through celiotomy (traditional technique) and laparoscopy. For each pa-tient were collected 3 ml blood samples from the cephalic vein at three different times by venipuncture into vacuum tubes with lithium heparin. The collect times were: 1ml before anesthesia, 1 ml immediately after surgery and 1ml 24 h after surgery. The results showed that the abnormalities presented were not product of the anesthetic technique used. There was statistical significance for the oxidative stress between the laparotomy group and the laparotomy group at times 3, and 2. In conclusion this study showed that laparoscopy generated significantly less oxi-dative stress than open surgery, and although it caused major damage to DNA, could be observed in the laparoscopy group a tendency to normality of the dam-age in time 3, this was not observed in the laparotomy group, suggesting a greater risk of damage in this group over time.

Diagnóstico genético pré-implantacional / Pre-implantational genetic diagnosis

Background: The ranks of patients seeking preimplantation genetic diagnosis (PGD) to identify embryos with monogenic disorders like cystic fibrosis or thalassemia are growing rapidly. Even so, the most common indication for preimplantation embryo testing remains the risk of chromosomal imbalance. In most cases, the PGD strategy employed for chromosomal testing involves biopsying a single cell (blastomere) from each embryo at the 6 to 10-cell stage, 3 days after fertilization. The cell is placed on a microscope slide, fixed, and then subjected to cytogenetic analysis. While the biopsied cell is being analyzed, the rest of the embryo is maintained in culture. Most infertility clinics prefer to transfer the embryos no later than day-5 post fertilization. Consequently, PGD methods need to be extremely rapid, providing a result in less than 48 hours. Review: Most chromosomal PGD protocols employ fluorescence in situ hybridization (FISH). This approach involves the hybridization of chromosome specific DNA probes, labeled with different colors, to nuclei spread on a microscope slide. The method is rapid, performs equally well whether applied to interphase nuclei, and permits enumeration of up to 10 chromosomes per cell. Initially, the PGD for aneuploidy was envisioned that most of the patients seeking PGD for aneuploidy would be those who carry a chromosomal rearrangement. Couples in which one of the partners carries a chromosomal rearrangement frequently experience miscarriage or bear children due to chromosome imbalance. However, in recent years the vast majority of patients requesting PGD for aneuploidy have in fact been chromosomally normal individuals undergoing IVF. Early methods employed five FISH probes for PGD, focusing on the chromosomes most often found to be abnormal in prenatal samples (13, 18, 21, X, and Y). Aneuploidies for these chromosomes are sometimes compatible with survival to term, leading to aneuploid syndromes. This strategy was successful in reducing the number of such syndromes, but a statistically significant improvement in embryo implantation could not be shown. Later PGD studies expanded the number of chromosomes assessed to eight. This was achieved by performing two sequential rounds of FISH analysis, assessing five chromosomes in the first round and three more in the second. The three new chromosomes added to the PGD screen (15, 16, and 22) are frequently found to be aneuploid in miscarriages. The eight-chromosome PGD protocol led to a doubling of embryo implantation rates in two separate studies and reduced the number of spontaneous abortions. Although this problem can be partially overcome by performing sequential FISH experiments on the same cell, the accuracy of the method declines with each additional hybridization. The good news is that there is a method related to FISH­comparative genomic hybridization (CGH)­ that can detect aneuploidy that affects any chromosome within a sample. In addition to offering comprehensive detection, CGH can be used on interphase cells. Conclusion: In summary, the use of FISH for the purpose of PGD has already improved IVF outcome for several groups of infertile patients, including women aged 37 and above, those with recurrent miscarriages, women with a previous comprehensive screening for aneuploidy will likely further increase the benefit of PGD to these patients and maybe even a broader range of patients. The widespread availability of CGH for PGD is nearly at hand, but while we await final refinements and validation, PGD strategies can still be improved by making the best use of current methods and reassessing the chromosomes selected for screening.

Evaluation of the genotoxic potential of Austroplenckia populnea (Reiss) Lundell chloroform fraction from barkwood extract in rodent cells in vivo

The genotoxic effect of the Austroplenckia populnea chloroform fraction from barkwood extract was tested in vivo on peripheral blood cells of Swiss mice with the comet assay (SCGE), and the clastogenic effect was investigated on peripheral blood cells of Swiss mice and bone marrow cells of Wistar rats, with the micronucleus and chromosome aberrations tests. The animals were treated by gavage with 3 concentrations of the extract: 300, 600 and 900 mg.kg-1. Peripheral blood cells of Swiss mice were collected 4 and 24 hours after the treatment to the SCGE assay and 48 and 72 hours to the micronucleus test. Bone marrow cells of Wistar rats were collected 24 hours after the treatment to the micronucleus and chromosome aberration tests. The results showed that the A. populnea chloroform fraction induced an increase in the average number of DNA damage in peripheral blood cells at the three concentrations tested, but this increase was not statistically significant. In the micronucleus and chromosome aberrations test, no significant increase was observed in the mean number of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE) of Swiss mice or MNPCE or chromosome aberrations for the rat bone marrow cells, for any of the tested doses. Our findings enable us to conclude that by the comet assay, A. populnea chloroform fraction from barkwood extract showed no genotoxic effects, and by the micronucleus and chromosome aberration tests, the extract fraction showed no clastogenic/aneugenic effects on the rodent cells tested.

O possível efeito genotóxico da fração clorofórmica de cascas de caule de Austroplenckia populnea foi testado in vivo em células do sangue periférico de camundongos Suíços pelo ensaio cometa, e o seu possível efeito clastogênico foi investigado em células de sangue periférico de camundongos Suíços e células da medula óssea de ratos Wistar, respectivamente pelos testes do micronúcleo e de aberrações cromossômicas. Os animais foram tratados por via oral com três concentrações do extrato: 300, 600 e 900 mg.kg-1 de peso corpóreo. Células do sangue periférico dos camundongos foram coletadas 4 e 24 horas após o tratamento para a realização do ensaio cometa, e 48 e 72 horas para o teste do micronúcleo. Células da medula óssea dos ratos Wistar foram coletadas 24 horas após o tratamento para os testes do micronúcleo e de aberrações cromossômicas. Os resultados mostraram que a fração clorofórmica do extrato de A. populnea induziu um pequeno aumento no número médio de danos ao DNA nas células sanguíneas nas três concentrações testadas, mas tal aumento não foi estatisticamente significativo. Nos testes do micronúcleo e de aberrações cromossômicas não houve um aumento significativo no número médio de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPM) dos camundongos, bem como nos EPM e aberrações cromossômicas nas células da medula óssea dos ratos, em nenhuma das doses testadas. Nossos resultados nos permitem concluir que, pelo ensaio cometa, a fração clorofórmica de cascas do caule de A. populnea não apresentou efeito genotóxico, e, pelos testes do micronúcleo e de aberrações cromossômicas, o extrato não mostrou efeitos clastogênicos e/ou aneugênicos nas células analisadas dos roedores.