Impact of 1, 25(OH) 2 D 3 on TG content in liver of rats with type 2 diabetes

Purpose: To evaluate the effects of 1,25 dihydroxy vitamin D3 (1,25(OH)2D3) on the content of triglyceride (TG), as well as on the gene and protein expressions of adiponectin receptor 2 (AdipoR2), p38 mitogen-activated protein kinase (P38MAPK), and lipoprotein lipase (LPL) in the liver of rats with type 2 diabetes mellitus (T2DM) so as to provide theoretical basis for exploring the mechanism by which 1,25(OH)2D3 regulates TG. Methods: Wistar rats were divided into four groups (n=25), with different treatments and detected the gene and protein expressions of AdipoR2, p38MAPK, and LPL in the liver tissue by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting. Meanwhile, the content of TG in the liver tissue was detected by the Enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The expression of AdipoR2, p38MAPK, LPL gene and protein in the liver of VitD intervention group was significantly higher than that in T2DM group (P<0.05), while the TG content was significantly lower than that in T2DM group (P<0.05). Conclusion: 1,25(OH)2D3 can decrease the content of TG in the liver, and its mechanism may be achieved by upregulating the expressions of AdipoR2, p38MAPK, and LPL in the liver.(AU)

Potencial envolvimento da adiponectina e seus receptores na modulação da esteroidogênese em corpo lúteo de cadelas ao longo do diestro / Potential involvement of adinopectin and its receptors in the modulation of steroidogenesis in corpus luteum of bitches during diestrus

No ciclo estral de cadelas a fase luteínica, denominada diestro, compreende um período que varia de 60 a 100 dias em animais não-prenhes, caracterizado pela elevação plasmática de progesterona nos primeiros 20 dias pós ovulação (p.o). A adiponectina é a mais abundante proteína secretada pelo tecido adiposo, porém sua concentração plasmática diminui significativamente em alterações metabólicas como resistência insulínica e Diabetes mellitus tipo2, alterações descritas como relacionadas em algumas cadelas com o período de diestro. O objetivo do estudo foi determinar a expressão e imunolocalização do sistema adiponectina (adiponectina e seus receptores, adipoR1 e adipoR2) no corpo lúteo de cadelas ao longo do diestro, correlacionando-o ao perfil hormonal de 17β-estradiol e progesterona, assim como à expressão de um dos genes alvo do sistema, o PPAR-γ. Para realização do estudo foram coletados corpos lúteos de 28 cadelas durante ovariosalpingohisterectomia de eleição nos dias 10, 20, 30, 40, 50, 60 e 70 pós ovulação (o dia zero da ovulação foi considerado aquele no qual a concentração plasmática de progesterona atingiu 5ng/mL). Os corpos lúteos foram avaliados por imunohistoquímica para adiponectina e seus receptores e a expressão do RNAm do PPAR-γ por PCR em tempo real. A análise estatística da avaliação gênica foi realizada com o teste ANOVA, seguido por comparação múltipla Newman-Keuls. O sinal da adiponectina apresentou-se mais intenso até os primeiros 20 dias p.o, momento de regência da progesterona; houve queda gradativa após este período, coincidindo com a ascensão do 17β-estradiol, cujo pico foi notado próximo do dia 40 p.o. A queda marcante da adiponectina ocorreu após 50 dias p.o. O sinal do adipoR1 mostrou-se bem evidente até os 40 dias p.o e o do adipoR2 até os 50 dias p. o, decaindo posteriormente. Foi observada maior expressão do gene PPAR-γ aos 10, 30 e 70 dias p.o. Estes resultados mostram que a expressão protéica da adiponectina e de seus receptores se altera ao longo do diestro e que estas alterações podem estar relacionados às alterações hormonais e expressão do PPAR- γ, participando do mecanismo fisiológico de desenvolvimento, manutenção, atividade e regressão luteínica em cadelas.(AU)

In the estrous cycle of bitches, the luteal phase or diestrus includes a period ranging from 60 to 100 days in non-pregnant animals, characterized by elevated serum progesterone during the first 20 days post-ovulation (p.o). Adiponectin is the most abundant protein secreted by adipose tissue, but plasma concentration decreases significantly in metabolic disorders like insulin resistance and diabetes mellitus type 2, described as related changes in some bitches in diestrus. The aim of this study was to determine the expression and immunolocalization of the adiponectin system (adiponectin, and adipoR1 adipoR2) in the corpus luteum during diestrus, and correlate it to hormonal profile of 17β-estradiol and progesterone, as well as the expression of a gene target of the system, the PPAR-γ. For the study, corpora lutea were collected from 28 dogs during ovariosalpingohysterectomy on days 10, 20, 30, 40, 50, 60 and 70 post ovulation (day zero of ovulation was considered the day when the plasma progesterone concentration reached 5ng/mL). The corpora lutea were evaluated by immunohistochemistry for adiponectin, adipoR1 and adipoR2 and mRNA expression of PPAR-γ by real-time PCR. Statistical analysis of gene expression was performed with ANOVA followed by Newman-Keuls multiple comparisons. Adiponectin positive signal was stronger during the first 20 days p.o, time of the regency of progesterone; there was a gradual adiponectin and progesterone decline after this period, coinciding with the rise of 17β-estradiol, whose peak was near the 40 days p.o. The markedly adiponectin decrease occurred after 50 days p.o. The signal of adipoR1 was markedly evident at 40 days p.o and that of adipoR2 up to 50 days p.o, declining afterwards. We observed higher expression of PPAR-γ gene at 10, 30 and 70 days p.o. These results show that adiponectin and its receptors protein expression is altered during the diestrus and that these changes may be related to hormonal changes and expression of PPAR-γ, participating in the physiological mechanism of development, maintenance, activity and luteal regression in bitches.(AU)

INFLUÊNCIA DA ADIPONECTINA SOBRE A MATURAÇÃO DE OÓCITOS IN VITRO NO MODELO CAPRINO

No Brasil a caprinocultura é uma atividade em potencial crescimento, isso pode ser evidenciado com maior intensidade na região nordeste, que detém a grande maioria do rebanho caprino brasileiro. Com isso, a demanda por investimentos nessa atividade vem sendo expressiva nos últimos anos, exigindo assim, maior tecnificação para melhoria e expansão desse setor. Nesse sentido, as biotecnologias voltadas para reprodução demonstram ser instrumentos eficazes, e nelas destacamos a Produção in vitro de embriões (PIVE) que promove a multiplicação de genéticas superiores em um espaço de tempo mais curto que os métodos tradicionais. Entretanto, ainda há muito para se avançar com essa técnica na espécie caprina, uma vez que, atualmente seus resultados nessa espécie ainda são variáveis e limitados o que implica em limitação a nível comercial. A adiponectina é um hormônio proteico produzido predominantemente pelo tecido adiposo, pode ser uma alternativa de incremento nessa área. Algumas de suas funções estão relacionadas à reprodução da fêmea, como influência positiva sobre a esteroidogênese e também sobre a maturação de oócitos in vitro em algumas espécies, incluindo a espécie caprina. Este trabalho teve como objetivo investigar se: 1) a adiponectina influencia a maturação meiótica de oócitos caprinos; 2) a via MAPK MEK1/2 medeia os efeitos da adiponectina durante a maturação in vitro e 3) a adiponectina afeta de forma diferente a abundância de RNAm de genes relevantes para a transdução de sinal da adiponectina em oócitos e células cumulus. A adição de adiponectina (5 µg/mL) durante a maturação de oócitos caprinos afetou a porcentagem de oócitos que completaram a maturação nuclear com sucesso (P < 0,05). A maturação nuclear de oócitos estimulada pela adiponectina foi significativamente prejudicada quando o inibidor específico de MEK ½ (U0126) foi adicionado ao meio de maturação. Não houve evidência de qualquer diferença induzida pela adiponectina na relativa abundância dos transcritos dos genes AdipoR1, AdipoR2, AMPK1, PPAR e PPAR. A expressão de AMPK2 foi significativamente inibida nas células do cumulus oriundas de complexos cumulus-oócitos maturados com 5 µg/mL de adiponectina comparados com aqueles maturados com 0 µg/mL (P < 0,05). Em conclusão, a adiponectina melhora a maturação meiótica de oócitos caprinos através da via MAPK MEK 1/2. Adicionalmente, efeitos sobre os níveis do transcrito AMPK2 foram detectados nas células do cumulus mas não nos oócitos.

In Brazil, goat farming is an activity in potential growth, this can be evidenced with greater intensity in the northeast region, which holds the great majority of the Brazilian goat herd. As a result, the demand for investments in this activity has been significant in recent years, thus requiring more technification to improve and expand this sector. In this sense, biotechnologies turned to reproduction are effective instruments, in which we highlight the In-vitro production of embryos (PIVE) that promotes the multiplication of superior genetics in a shorter period of time than traditional methods. However, there is still a long way to go with this technique in the caprine species, since its results in this species are still variable and limited, which implies limitation on the commercial level. Adiponectin is a protein hormone produced predominantly by adipose tissue, which may be an alternative to increase in this area. Some of its functions are related to female reproduction, as a positive influence on steroidogenesis and also on in vitro maturation of oocytes in some species, including the goat species. This study aimed to investigate whether: 1) adiponectin influences the meiotic maturation of goat oocytes; 2) the MAPK MEK1 / 2 pathway mediates the effects of adiponectin during in vitro maturation, and 3) adiponectin differentially affects the mRNA abundance of genes relevant for adiponectin signal transduction in oocytes and cumulus cells. The addition of adiponectin (5 g / mL) during the maturation of goat oocytes affected the percentage of oocytes that successfully completed nuclear maturation (P <0.05). Adiponectin-stimulated nuclear maturation of oocytes was significantly impaired when the specific MEK ½ (U0126) inhibitor was added to the maturation medium. There was no evidence of any difference induced by adiponectin in the relative abundance of the transcripts of the genes AdipoR1, AdipoR2, AMPK1, PPAR and PPAR. AMPK2 expression was significantly inhibited in cumulus cells from cumulus-oocyte complexes matured with 5 g / mL adiponectin compared to those matured at 0 g / mL (P <0.05). In conclusion, adiponectin improves meiotic maturation of goat oocytes via MAPK MEK 1/2. In addition, effects on AMPK2 transcript levels were detected in cumulus cells but not in oocytes.