Crescimentos de fungos produtores de micotoxinas em grãos de amendoim / Growths of mycotoxin-producing fungi on peanut grains

O amendoim (Arachis hypogaea L.) é uma oleaginosa com alto valor energético e nutricional, servindo de substrato ideal para o crescimento de fungos durante o processo de colheita, estocagem e processamento dos grãos. As micotoxinas são originadas a partir do metabolismo secundário de fungos toxigênicos; quando essas toxinas são ingeridas, podem causar efeitos tóxicos em humanos e animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a contaminação fúngica em amostras de grãos de amendoim disponíveis para o consumo humano. Foram analisadas amostras de amendoim torrado na vagem, amendoim cru (in natura) e amendoim torrado sem a vagem. A metodologia utilizada foi o método de plaqueamento direto em placas de Petri, contendo o meio cultura Sabouraud Dextrose Ágar (SDA). Porções de 40 grãos de amendoim de cada amostra foram utilizadas para o teste. Os resultados obtidos foram expressos em quantidade de grãos que apresentaram crescimento fúngico em porcentagem. Para identificação ao nível do género das colônias fúngicas isoladas, foi efetuada uma observação microscópica das suas estruturas morfológicas. Em todas as amostras estudadas ocorreram o crescimento de fungos potencialmente micotoxigênicos. Os grãos de amendoim cru (in natura) sem a vagem foram os mais contaminados por fungos como Aspergillus sp. (20%), Alternaria sp. (13,1%), Penicillium sp. (13,3%) e Fusarium sp. (23,3%) quando comparados com os grãos torrados. A presença desses fungos nas amostras de amendoim indica a possibilidade de desenvolvimento de micotoxinas potencialmente tóxicas para o humano. O processo de torrefação inibe o crescimento de determinadas espécies de fungos micotoxigênicos.(AU)

Peanut is an oilseed with high energy and nutritional value, serving as an ideal substrate for the growth of fungi during the process of harvesting, storing and processing the grains. Mycotoxins originate from the secondary metabolism of toxigenic fungi; when ingested, they can cause toxic effects in humans and animals. The objective of this work was to evaluate the fungal contamination in samples of peanut grains available for human consumption. The methodology used was the direct plating method in Petri dishes containing Sabouraud Dextrose Agar (SDA) culture. Portions of 40 peanut kernels from the samples were immersed in a 0.4% sodium hypochlorite solution for two minutes for surface disinfection, then rinsed once in distilled water. Incubation was carried out at room temperature for 7 days and the results were expressed as the amount of grains that showed fungal growth in percentage. To identify the colonies of isolated filamentous fungi at the genus level, a microscopic observation of their morphological structures was carried out, which consists of removing a sample from the edge of the colony and placing it in a drop of cotton blue (1g/L in lactic acid 88%), between slide and coverslip. Potentially toxigenic fungi were identified: Aspergillus sp., Rhizopus sp., Alternaria sp., Penicillium sp. and Fusarium sp. The presence of these fungi in peanut samples indicates the possibility of development of mycotoxins potentially toxic to humans. The roasting process may not be sufficient to destroy some mycotoxins.(AU)

Ex vivo and in vitro poultry intestinal models to evaluate antimycotoxins additives / Uso de modelos ex vivo e in vitro de intestino de aves para avaliar aditivos antimicotoxinas

In vitro tests are performed to evaluate the efficacy of antimycotoxins additives (AMAs); nevertheless, such assays show a low correlation with in vivo trials, which are also required to determine AMAs' efficacy. In search of an alternative method, the current study investigated the use of an ex vivo technique. Six AMAs (AMA1 to AMA6) had their ability to reduce intestinal absorption of aflatoxin B1 (AFB1) evaluated. Jejunal explants were obtained from broilers and subjected to two treatments per AMA in Ussing chambers: T1 (control) - 2.8 mg/L AFB1, and T2 - 2.8 mg/L AFB1 + 0.5% AMA. AMAs were also tested in vitro to assess adsorption of AFB1 in artificial intestinal fluid. In the ex vivo studies, AMA1 to AMA6 decreased intestinal absorption of AFB1 by 67.11%, 73.82%, 80.70%, 85.86%, 86.28% and 82.32%, respectively. As for the in vitro results, AMA1 to AMA6 presented an adsorption of 99.72%, 99.37%, 99.67%, 99.53%, 99.04% and 99.15%, respectively. The evaluated ex vivo model proved useful in the assessment of AMAs. No correlation was reported between ex vivo and in vitro findings. Further studies are needed to elucidate the correlation between ex vivo and in vivo results seeking to reduce animal testing.

Testes in vitro são realizados para avaliar a eficácia de aditivos antimicotoxinas (AAMs); entretanto, tais experimentos apresentam uma baixa correlação com ensaios in vivo, que também são exigidos para determinar a eficácia de AAMs. Em busca de um método alternativo, o presente estudo investigou o uso de uma técnica ex vivo. A capacidade de seis AAMs (AAM1 a AAM6) de reduzir a absorção intestinal de aflatoxina B1 (AFB1) foi avaliada. Explantes jejunais foram coletados de frangos de corte e submetidos a dois tratamentos por AAM em câmaras de Ussing: T1 (controle) - 2,8 mg/L AFB1, e T2 - 2.8 mg/L AFB1 + 0,5% AAM. Os AAMs também foram testados in vitro para verificar a adsorção de AFB1 em fluido intestinal artificial. Nos ensaios ex vivo, AAM1 ao AAM6 diminuíram a absorção intestinal de AFB1 em 67,11%, 73,82%, 80,70%, 85,86%, 86,28% e 82,32%, respectivamente. Quanto aos achados in vitro, AAM1 ao AAM6 apresentaram adsorção de 99,72%, 99,37%, 99,67%, 99,53%, 99,04% e 99,15%, respectivamente. O modelo ex vivo avaliado mostrou-se eficiente na avaliação de AAMs. Não houve correlação entre os resultados ex vivo e in vitro. Estudos adicionais são necessários para definir a correlação entre achados ex vivo e in vivo na tentativa de reduzir os testes em animais.

Effect of aflatoxin B1 on digestibility and blood parameters in horses / Digestibilidade e efeitos hematológicos da aflatoxina B 1 em equinos

This study aimed to evaluate the effect of aflatoxin B1 (AFB1) on the digestibility of nutrients and the hematological profile of horses. The assay lasted 40 days, with 12 days for adaptation and 28 days for experimentation. In the experimental stage, the horses were distributed in a completely randomized design, including three treatment groups with four animals in each group. The treatments used included 0 µg/kg (control), 50 µg/kg, and 100 µg/kg of AFB1 added to a concentrate in the basal diet. The basal diet contained mycotoxins from naturally contaminated feed. A digestibility essay was carried out at the end of the experimental period through partial feces collection, with LIPE® as an indicator. Blood samples were collected once a week during the assay for hematological and biochemical evaluations. The results of the hematological and biochemical parameters were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared by the Tukey test at 5% significance. The aflatoxins in the diet increased the leukocyte count, especially that of mature neutrophils. Creatine kinase and alkaline phosphatase (P < 0.05) activities were higher in horses fed more toxic diets. The digestibility of nutrients was unaffected by the level of mycotoxins in the diet (P > 0.05).

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o efeito da Aflatoxina B1 (AFB1) na digestibilidade dos nutrientes e no perfil hematológico de equinos. O ensaio durou 40 dias, sendo 12 dias para adaptação e 28 dias para experimentação. No período experimental, os cavalos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos, com quatro animais cada. Os tratamentos utilizados foram 0 µg/kg (controle), 50 µg/kg e 100 µg/kg de AFB1 adicionados ao concentrado da dieta basal. A dieta basal continha alimentos naturalmente contaminados com micotoxinas. Um ensaio de digestibilidade foi realizado no final do período experimental, pelo método de coleta parcial de fezes utilizando o LIPE® como indicador. Amostras de sangue foram coletadas uma vez por semana, durante o ensaio para avaliações hematológicas e bioquímicas. Os resultados dos parâmetros hematológicos, bioquímicos e do ensaio de digestibilidade foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste de Tukey a 5% de significância. As aflatoxinas da dieta aumentaram a contagem de leucócitos, principalmente os neutrófilos maduros. A creatina quinase e a fosfatase alcalina (P<0,05) apresentaram maior atividade nos equinos alimentados com dietas com maior toxicidade. A digestibilidade dos nutrientes não foi alterada pelos níveis de micotoxinas presentes nas dietas (P>0,05).

Saccharomyces cerevisiae strain associated to a fish culture additive: antifungal activity and AFB1 adsorption potential / Saccharomyces cerevisiae associada a um aditivo de piscicultura: atividade antifúngica e potencial de adsorção de AFB1

Saccharomyces cerevisae is widely applied as a probiotic in aquaculture activities, due to its ability to decontaminate the mycotoxin Aflatoxin B1 (AFB1). With this in mind, the aim of the present study was to evaluate the antifungal and anti-aflatoxigenic activities of inactivated Saccharomyces cerevisiae mixed with a commercial product (CP) of animal feed to assess its influence on the Aspergillus flavus and A. parasiticus fungi growth and on the AFB1 production. In addition, AFB1 adsorption potential of S. cerevisae and commercial product was also investigated. Different concentrations of commercial product alone and in the presence of inactivated yeast were analyzed by Aspergillus growth inhibition test, aflatoxin production by Aspergillus species and AFB1 adsorption capacity. AFB1 detection and quantification were carried out by High Performance Liquid Chromatography. The inactivated yeast and commercial product combination was effective in reducing A. flavus and A. parasiticus growth. A. flavus produced less AFB1 after the inactivated yeast treatment, whereas A. parasiticus produced significantly less AFB1 under a combination of inactivated yeast and 50% CP. Regarding AFB1 adsorption, 100% CP displayed the highest adsorption capacity at 10 ng mL-1 AFB1. At 25 ng mL-1 AFB1, only the treatment comprising inactivated yeast associated to 50% CP led to AFB1 adsorption, albeit

Saccharomyces cerevisae é uma levedura largamente utilizada como probiótico na aquicultura e que tem se destacado devido a capacidade para a descontaminação de AFB1. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade anti-fúngica e anti-aflatoxigênica da Saccharomyces cerevisae inativada e misturada a um produto comercial, observando sua influência no crescimento dos fungos Aspergillus flavus e A. parasiticus e na produção destes da Aflatoxina B1 (AFB1), investigar o potencial de adsorção da levedura e do produto comercial sobre a AFB1. Foram realizadas analises de preparação de leveduras inativadas e das soluções com o produto comercial, Ensaio do efeito inibitório de espécies de Aspergillus in vitro, Teste in vitro sobre a produção de aflatoxinas, avaliação in vitro da capacidade de adsorção de AFB1, condições cromatográficas para detecção e quantificação de AFB1 por cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A associação do aditivo comercial EPICIN – G2® e a levedura S. cerevisiae inativada foi eficaz na diminuição do cresci-mento fúngico dos A. flavus e A parasiticus. Quanto à produção de micotoxina, o A. flavus obteve menor produção com o tratamento composto por leveduras inativadas, enquanto, o A. parasiticus teve diminuição significativa na produção de AFB1 com a associação da levedura a uma concentração de 50% do produto. No referente a adsorção, em concentra-ção de 10ng/mL, o tratamento que demonstrou melhor capacidade de adsorver AFB1 foi o 100% Produto (100%). Já na concentração 25 ng/mL, somente o tratamento que associava levedura e 50% do produto, apresentou uma pequena capacidade de adsorção.

Saccharomyces cerevisiae strain associated to a fish culture additive: antifungal activity and AFB1 adsorption potential / Saccharomyces cerevisiae associada a um aditivo de piscicultura: atividade antifúngica e potencial de adsorção de AFB1

Saccharomyces cerevisae is widely applied as a probiotic in aquaculture activities, due to its ability to decontaminate the mycotoxin Aflatoxin B1 (AFB1). With this in mind, the aim of the present study was to evaluate the antifungal and anti-aflatoxigenic activities of inactivated Saccharomyces cerevisiae mixed with a commercial product (CP) of animal feed to assess its influence on the Aspergillus flavus and A. parasiticus fungi growth and on the AFB1 production. In addition, AFB1 adsorption potential of S. cerevisae and commercial product was also investigated. Different concentrations of commercial product alone and in the presence of inactivated yeast were analyzed by Aspergillus growth inhibition test, aflatoxin production by Aspergillus species and AFB1 adsorption capacity. AFB1 detection and quantification were carried out by High Performance Liquid Chromatography. The inactivated yeast and commercial product combination was effective in reducing A. flavus and A. parasiticus growth. A. flavus produced less AFB1 after the inactivated yeast treatment, whereas A. parasiticus produced significantly less AFB1 under a combination of inactivated yeast and 50% CP. Regarding AFB1 adsorption, 100% CP displayed the highest adsorption capacity at 10 ng mL-1 AFB1. At 25 ng mL-1 AFB1, only the treatment comprising inactivated yeast associated to 50% CP led to AFB1 adsorption, albeit

Saccharomyces cerevisae é uma levedura largamente utilizada como probiótico na aquicultura e que tem se destacado devido a capacidade para a descontaminação de AFB1. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade anti-fúngica e anti-aflatoxigênica da Saccharomyces cerevisae inativada e misturada a um produto comercial, observando sua influência no crescimento dos fungos Aspergillus flavus e A. parasiticus e na produção destes da Aflatoxina B1 (AFB1), investigar o potencial de adsorção da levedura e do produto comercial sobre a AFB1. Foram realizadas analises de preparação de leveduras inativadas e das soluções com o produto comercial, Ensaio do efeito inibitório de espécies de Aspergillus in vitro, Teste in vitro sobre a produção de aflatoxinas, avaliação in vitro da capacidade de adsorção de AFB1, condições cromatográficas para detecção e quantificação de AFB1 por cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A associação do aditivo comercial EPICIN G2® e a levedura S. cerevisiae inativada foi eficaz na diminuição do cresci-mento fúngico dos A. flavus e A parasiticus. Quanto à produção de micotoxina, o A. flavus obteve menor produção com o tratamento composto por leveduras inativadas, enquanto, o A. parasiticus teve diminuição significativa na produção de AFB1 com a associação da levedura a uma concentração de 50% do produto. No referente a adsorção, em concentra-ção de 10ng/mL, o tratamento que demonstrou melhor capacidade de adsorver AFB1 foi o 100% Produto (100%). Já na concentração 25 ng/mL, somente o tratamento que associava levedura e 50% do produto, apresentou uma pequena capacidade de adsorção.(AU)

Effect of bentonite on the health and dairy production of cows submitted to a diet naturally contaminated by mycotoxins / Efeito da bentonita na saúde e produção leiteira de vacas submetidas à dieta naturalmente contaminada por micotoxinas

Mycotoxins often contaminate cattle food, which can cause liver damage, immunosuppression, and reduced milk production. Although previous studies have shown the benefits of adsorbents in farm animals, knowledge regarding their mechanism of action is limited, especially when intoxication occurs due to naturally contaminated diets. The present study aimed to assess whether the daily oral administration of mycotoxin adsorbent bentonite clay based on aluminosilicate for 56 days, would attenuate these changes in 18 dairy cows, which were multiparous in the middle of the lactation stage, and were consuming a diet containing fumonisin B1 and B2, zearalenone, and desoxynivalenol. The animals were divided into treatment (TG, n = 9) and control (CG, n = 9) groups, and subjected to assessment of liver functions, hematological assessments, assessment of oxidative leucocyte metabolism by the tetrazolium nitroazul (NBT) technique, and physical chemical analysis of milk, every week for two months, totaling eight analyses. It was observed that the use of the adsorbent caused a reduction in the milk excretion of aflatoxin M1 (AFM1), an increase in levels of serum protein (p = 0.03) and albumin (p = 0.0001), an increase in leukocyte oxidative metabolism from day 24 of treatment(p = 0.05), and increased milk production from the day 16 of treatment (p = 0.08). There was no improvement in the physicochemical indices of the milk. It was concluded that the use of an aluminosilicate-based adsorbent was able to attenuate the effects of mycotoxins on the function of leukocytes and increase milk production.(AU)

Micotoxinas podem contaminar alimentos de bovinos, levando a distúrbios hepáticos, imunodepressão e redução da produção. Embora existam estudos mostrando os benefícios de adsorventes em animais de produção, há limitado conhecimento sobre sua ação quando a intoxicação de bovinos ocorre por dietas naturalmente contaminadas. O presente estudo objetivou avaliar se a administração oral diária do adsorvente de micotoxinas, argila bentonita a base de aluminossilicato durante 56 dias atenuaria alterações promovidas pelas micotoxinas em 18 vacas leiteiras, multíparas no meio do estágio da lactação, consumindo dieta contendo fumonisina B1 e B2, zearalenona (ZEA) e desoxinivalenol (DON). Os animais foram divididos, grupos tratamento (GT, n=9) e controle (GC, n=9), e submetidos às avaliações de enzimas e função hepática, hematológicas, metabolismo oxidativo de leucócitos pela técnica do nitroazul de tetrazolium (NBT) e análise físico-química do leite, a cada semana, durante dois meses, totalizando oito análises. Observou-se que o uso do adsorvente promoveu redução da excreção láctea de aflatoxina M1 (AFM1), aumento de proteína (p = 0,03) e albumina séricas (p= 0,0001), e aumento do metabolismo oxidativo leucocitário a partir do dia 24 (p = 0,05). Houve também elevação da produção leiteira a partir do 16º dia de tratamento (p= 0,008). Não foi observado melhora nos índices físico-químicos do leite dos animais e houve pouca influência na atividade das enzimas hepáticas. Conclui-se que o uso do adsorvente a base de aluminossilicato foi capaz de atenuar os efeitos das micotoxinas na função de leucócitos e de elevar a produção leiteira.(AU)

Effect of aflatoxin B1 on digestibility and blood parameters in horses

Abstract This study aimed to evaluate the effect of aflatoxin B1 (AFB1) on the digestibility of nutrients and the hematological profile of horses. The assay lasted 40 days, with 12 days for adaptation and 28 days for experimentation. In the experimental stage, the horses were distributed in a completely randomized design, including three treatment groups with four animals in each group. The treatments used included 0 µg/kg (control), 50 µg/kg, and 100 µg/kg of AFB1 added to a concentrate in the basal diet. The basal diet contained mycotoxins from naturally contaminated feed. A digestibility essay was carried out at the end of the experimental period through partial feces collection, with LIPE® as an indicator. Blood samples were collected once a week during the assay for hematological and biochemical evaluations. The results of the hematological and biochemical parameters were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared by the Tukey test at 5% significance. The aflatoxins in the diet increased the leukocyte count, especially that of mature neutrophils. Creatine kinase and alkaline phosphatase (P 0.05) activities were higher in horses fed more toxic diets. The digestibility of nutrients was unaffected by the level of mycotoxins in the diet (P > 0.05).

Resumo Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o efeito da Aflatoxina B1 (AFB1) na digestibilidade dos nutrientes e no perfil hematológico de equinos. O ensaio durou 40 dias, sendo 12 dias para adaptação e 28 dias para experimentação. No período experimental, os cavalos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos, com quatro animais cada. Os tratamentos utilizados foram 0 µg/kg (controle), 50 µg/kg e 100 µg/kg de AFB1 adicionados ao concentrado da dieta basal. A dieta basal continha alimentos naturalmente contaminados com micotoxinas. Um ensaio de digestibilidade foi realizado no final do período experimental, pelo método de coleta parcial de fezes utilizando o LIPE® como indicador. Amostras de sangue foram coletadas uma vez por semana, durante o ensaio para avaliações hematológicas e bioquímicas. Os resultados dos parâmetros hematológicos, bioquímicos e do ensaio de digestibilidade foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste de Tukey a 5% de significância. As aflatoxinas da dieta aumentaram a contagem de leucócitos, principalmente os neutrófilos maduros. A creatina quinase e a fosfatase alcalina (P 0,05) apresentaram maior atividade nos equinos alimentados com dietas com maior toxicidade. A digestibilidade dos nutrientes não foi alterada pelos níveis de micotoxinas presentes nas dietas (P>0,05).

Digestibilidade e efeitos hematológicos da aflatoxina B1 em equinos / Effect of aflatoxin B1 on digestibility and blood parameters in horses

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o efeito da Aflatoxina B1 (AFB1) na digestibilidade dos nutrientes e no perfil hematológico de equinos. O ensaio durou 40 dias, sendo 12 dias para adaptação e 28 dias para experimentação. No período experimental, os cavalos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos, com quatro animais cada. Os tratamentos utilizados foram 0 µg/kg (controle), 50 µg/kg e 100 µg/kg de AFB1 adicionados ao concentrado da dieta basal. A dieta basal continha alimentos naturalmente contaminados com micotoxinas. Um ensaio de digestibilidade foi realizado no final do período experimental, pelo método de coleta parcial de fezes utilizando o LIPE® como indicador. Amostras de sangue foram coletadas uma vez por semana, durante o ensaio para avaliações hematológicas e bioquímicas. Os resultados dos parâmetros hematológicos, bioquímicos e do ensaio de digestibilidade foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste de Tukey a 5% de significância. As aflatoxinas da dieta aumentaram a contagem de leucócitos, principalmente os neutrófilos maduros. A creatina quinase e a fosfatase alcalina (P0,05).

This study aimed to evaluate the effect of aflatoxin B1 (AFB1) on the digestibility of nutrients and the hematological profile of horses. The assay lasted 40 days, with 12 days for adaptation and 28 days for experimentation. In the experimental stage, the horses were distributed in a completely randomized design, including three treatment groups with four animals in each group. The treatments used included 0 µg/kg (control), 50 µg/kg, and 100 µg/kg of AFB1 added to a concentrate in the basal diet. The basal diet contained mycotoxins from naturally contaminated feed. A digestibility essay was carried out at the end of the experimental period through partial feces collection, with LIPE® as an indicator. Blood samples were collected once a week during the assay for hematological and biochemical evaluations. The results of the hematological and biochemical parameters were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared by the Tukey test at 5% significance. The aflatoxins in the diet increased the leukocyte count, especially that of mature neutrophils. Creatine kinase and alkaline phosphatase (P 0.05).

Micotoxinas e adsorventes na alimentação animal / Mycotoxins and adsorbents in animal feed

As micotoxinas são substâncias produzidas durante o processo metabólico de alguns fungos, elas são extremamente nocivas aos animais. Esses fungos estão presentes em diversos tipos de cereais e frutas. O milho, principal cereal utilizado na alimentação animal, pode ser acometido por fungos dos gêneros Aspergillus e Fusarium, que quando submetidos à umidade e temperaturas específicas produzem aflatoxinas, ocratoxina, fumonisinas e zearalenona que causam problemas no desempenho e produção dos animais. Os animais monogástricos, como aves e suínos, e de ceco funcional, como os equinos, são mais susceptíveis aos efeitos que essas substâncias podem causar, quando comparados aos animais ruminantes, pois estes apresentam no rúmen microrganismos que são capazes de digerir as micotoxinas. No entanto, animais como vacas leiteiras de alta produção e animais monogástricos, quando consomem alimentos contaminados durante um longo período, podem desenvolver problemas digestivos, neurológicos, queda na produção e até mesmo chegar a óbito. Diante disso, algumas técnicas vêm sendo utilizadas pelos produtores e fábricas de ração, visando o não fornecimento de grãos contaminados aos animais, como um controle de qualidade dos alimentos e o uso de adsorventes. Os adsorventes são aditivos adicionados à dieta dos animais com o objetivo de inativar as micotoxinas. Eles podem ser de origem orgânica, como as leveduras, ou inorgânicos derivados de argila. Esses aditivos se ligam à substância impedindo que estas sejam absorvidas pelo enterócito e, assim, sejam excretadas sem causar prejuízos ao metabolismo dos animais.

Mycotoxins are substances produced during the metabolic process of some fungi, they are extremely harmful to animals. These fungi are present in several types of cereals and fruits. The main cereal corn used in animal feed can be affected by fungi of the genera Aspergillus and Fusarium that when subjected to humidity and specific specifications such as aflotoxins, ochratoxin, fumonisins and zearalenone that cause problems in the performance and production of animals. Monogastric animals, such as poultry, pigs and functional dry animals such as horses, are more susceptible to the effects that these occurrences can cause, when compared to ruminant animals, as they present in the rumen, microorganisms that are capable of digesting as mycotoxins. However, animals such as high production dairy cows and monogastric animals, when consuming contaminated food for a long period can develop digestive, neurological problems, drop in production and even die. In view of this, some techniques have been used by producers and feed factories, adding the non supply of contaminated grains to animals, such as food quality control and the use of adsorbents. Adsorbents are suitable additives to the animals' diet in order to inactivate as mycotoxins. They can be of organic origin, like yeasts or inorganic derived from clay. These additives bind to a substance preventing them from being absorbed by the enterocyte, thus being excreted without causing damage to the animals' metabolism.

Biopanning the mimotopes of aflatoxin B1 and their immunogenicity / Panning de mimotopo aflatoxina B1 e sua imunogenicidade

Utilizando um anticorpo monoclonal contra a aflatoxina B1 (AFB1) como ligante, foi identificado um mimotopo específico de aflatoxina B1 após se realizarem quatro ciclos de seleção biológica de 7-peptídeos aleatórios em biblioteca de fago exibida. O mimotopo é denominado P10, e sua sequência de aminoácidos é YRRHEKD. O soro imunológico de ratos Balb/c imunizados com P10 foi especificamente ligado à aflatoxina B1-albumina, indicando que o anticorpo era específico ao AFB1. Esses resultados sugerem que é possível desenvolver a vacina baseada em mimotopo associado à toxina.(AU)

Biopanning the mimotopes of aflatoxin B1 and their immunogenicity / Panning de mimotopo aflatoxina B1 e sua imunogenicidade

Utilizando um anticorpo monoclonal contra a aflatoxina B1 (AFB1) como ligante, foi identificado um mimotopo específico de aflatoxina B1 após se realizarem quatro ciclos de seleção biológica de 7-peptídeos aleatórios em biblioteca de fago exibida. O mimotopo é denominado P10, e sua sequência de aminoácidos é YRRHEKD. O soro imunológico de ratos Balb/c imunizados com P10 foi especificamente ligado à aflatoxina B1-albumina, indicando que o anticorpo era específico ao AFB1. Esses resultados sugerem que é possível desenvolver a vacina baseada em mimotopo associado à toxina.(AU)

Saccharomyces cerevisiae as a probiotic agent and a possible aflatoxin B1 adsorbent in simulated fish intestinal tract conditions / Saccharomyces cerevisiae como agente probiótico e possível adsorvente de aflatoxina B1 em condições simuladas do trato intestinal de peixes

The aim of this study was to evaluate in vitro the probiotic potential and absorption of Saccharomyces cerevisiae for the aflatoxin B1 in simulated fish intestinal tract conditions. Three yeast strains were used, two from brewery: S. cerevisiae RC1 and S. cerevisiae RC3 and one from a fish farming environment: S. cerevisiae A8L2. The selected yeasts were subjected to the following in vitro tests: homologous inhibition, self-aggregation, co-aggregation, antibacterial activity, gastrointestinal conditions tolerance and adsorption of AFB1. All S. cerevisiae strains showed good capability of self-aggregation and co-aggregation with pathogenic bacteria. All yeast strains were able to survive the gastrointestinal conditions. In acidic conditions, the factors (strain vs. time) had interaction (P=0.0317), resulting in significant variation among the strains tested in the time periods analyzed. It was observed that there was also interaction (P=0.0062) in intestinal conditions, with an increased number of cells in the 12-hour period for all strains tested. In the adsorption test, the A8L2 strain was statistically more effective (P<0.005) for both AFB1 concentrations evaluated in this study (10 and 25ng/mL). Thus, it was observed that the strains of S. cerevisiae have potential probiotic and adsorbent of AFB1.(AU)

Objetivou-se, com esta pesquisa, avaliar in vitro o potencial probiótico e adsorvente de Saccharomyces cerevisiae para aflatoxina B1 em condições simuladas do trato intestinal de peixes. Foram utilizadas três cepas de leveduras, sendo duas provenientes de cervejaria: S. cerevisiae RC1 e S. cerevisiae RC3, e uma de ambiente de piscicultura: S. cerevisiae A8L2. As leveduras selecionadas foram submetidas aos seguintes testes in vitro: inibição homóloga, autoagregação, coagregação, atividade antibacteriana, viabilidade às condições gastrointestinais e adsorção de AFB1. Todas as estirpes de S. cerevisiae mostraram boa capacidade de autoagregação e coagregação com bactérias patogênicas. Todas as estirpes de levedura foram capazes de sobreviver às condições gastrointestinais. Em condições ácidas, os fatores (cepa x tempo) tiveram interação (P=0,0317), resultando em variações significativas entre as cepas testadas nos períodos de tempo analisados. Observou-se que também houve interação (P=0,0062) em condições intestinais, havendo um aumento do número de células no período de 12h para todas as cepas avaliadas. No ensaio de adsorção, a estirpe A8L2 foi a mais eficaz estatisticamente (P<0,005), para as duas concentrações de AFB1 avaliadas neste estudo (10 e 25ng. mL-1). Dessa forma, conclui-se que as cepas de Saccharomyces cerevisiae possuem potencial probiótico e adsorvente de AFB1.(AU)

Saccharomyces cerevisiae as a probiotic agent and a possible aflatoxin B1 adsorbent in simulated fish intestinal tract conditions / Saccharomyces cerevisiae como agente probiótico e possível adsorvente de aflatoxina B1 em condições simuladas do trato intestinal de peixes

The aim of this study was to evaluate in vitro the probiotic potential and absorption of Saccharomyces cerevisiae for the aflatoxin B1 in simulated fish intestinal tract conditions. Three yeast strains were used, two from brewery: S. cerevisiae RC1 and S. cerevisiae RC3 and one from a fish farming environment: S. cerevisiae A8L2. The selected yeasts were subjected to the following in vitro tests: homologous inhibition, self-aggregation, co-aggregation, antibacterial activity, gastrointestinal conditions tolerance and adsorption of AFB1. All S. cerevisiae strains showed good capability of self-aggregation and co-aggregation with pathogenic bacteria. All yeast strains were able to survive the gastrointestinal conditions. In acidic conditions, the factors (strain vs. time) had interaction (P=0.0317), resulting in significant variation among the strains tested in the time periods analyzed. It was observed that there was also interaction (P=0.0062) in intestinal conditions, with an increased number of cells in the 12-hour period for all strains tested. In the adsorption test, the A8L2 strain was statistically more effective (P<0.005) for both AFB1 concentrations evaluated in this study (10 and 25ng/mL). Thus, it was observed that the strains of S. cerevisiae have potential probiotic and adsorbent of AFB1.(AU)

Objetivou-se, com esta pesquisa, avaliar in vitro o potencial probiótico e adsorvente de Saccharomyces cerevisiae para aflatoxina B1 em condições simuladas do trato intestinal de peixes. Foram utilizadas três cepas de leveduras, sendo duas provenientes de cervejaria: S. cerevisiae RC1 e S. cerevisiae RC3, e uma de ambiente de piscicultura: S. cerevisiae A8L2. As leveduras selecionadas foram submetidas aos seguintes testes in vitro: inibição homóloga, autoagregação, coagregação, atividade antibacteriana, viabilidade às condições gastrointestinais e adsorção de AFB1. Todas as estirpes de S. cerevisiae mostraram boa capacidade de autoagregação e coagregação com bactérias patogênicas. Todas as estirpes de levedura foram capazes de sobreviver às condições gastrointestinais. Em condições ácidas, os fatores (cepa x tempo) tiveram interação (P=0,0317), resultando em variações significativas entre as cepas testadas nos períodos de tempo analisados. Observou-se que também houve interação (P=0,0062) em condições intestinais, havendo um aumento do número de células no período de 12h para todas as cepas avaliadas. No ensaio de adsorção, a estirpe A8L2 foi a mais eficaz estatisticamente (P<0,005), para as duas concentrações de AFB1 avaliadas neste estudo (10 e 25ng. mL-1). Dessa forma, conclui-se que as cepas de Saccharomyces cerevisiae possuem potencial probiótico e adsorvente de AFB1.(AU)

Horses fed meal contaminated with mycotoxins performing short-term exercises / Efeitos das micotoxinas na performance de equinos submetidos a exercícios de curta duração

This research was carried out to evaluate the effect of mycotoxins on the performance of horses through physiological parameters, and hematology and serum biochemistry analyses. The essay lasted 40 days, with 12 days for adaptation and 28 days of experimentation. In the experimental stage, the horses were distributed in a completely randomized design, with three treatments with four animals each. The treatments used were 0 (control), 50 ppb and 100 ppb of Aflatoxin B1 (AFB1) added to a concentrate in a basal diet. The basal diet contained mycotoxins from feedstuffs naturally contaminated. The exercise test was performed over the 21th day of the experimental stage. The exercise consisted in an interval training test with a warm-up of 17 mins at a trot followed by three gallops of 450m/min. The heart rate was monitored between the gallops. Before the exercise test and immediately after the third gallop, the physiological and blood parameters were evaluated, and continued up to 48 hours after the exercise. The results of the physiological, hematological and biochemical parameters were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared by the Tukey test at 5% of significance. The presence of AFB1 in the diet influenced the alkaline phosphatase activity, which presented higher values in horses fed diet with inclusion of 100 ppb AFB1, suggesting a hepatotoxic activity associated with the others mycotoxins naturally present in the feedstuffs.(AU)

Esta pesquisa foi conduzida para avaliar o efeito de micotoxinas no desempenho de equinos com avaliações fisiológicas e análises hematológicas e da bioquímica sérica. O ensaio durou 40 dias, com 12 dias de adaptação e 28 dias de experimentação. Na fase experimental, os equinos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado em três tratamentos, com quatro animais cada. Os tratamentos utilizados foram 0 (controle), 50 ppb e 100 ppb de Aflatoxina B1 (AFB1) adicionada ao concentrado de uma dieta basal. A dieta basal continha alimentos naturalmente contaminados por micotoxinas. O teste de desempenho foi executado no 21º dia da fase experimental por meio de teste intervalado consistindo em aquecimento ao trote por 17 minutos, seguido de três galopes de 450m/min. A frequência cardíaca (FC) foi monitorada entre os galopes. Antes do exercício e imediatamente após o terceiro galope, os parâmetros fisiológicos e sanguíneos foram avaliados e continuaram sendo monitorados até 48 horas após o exercício. Os resultados dos parâmetros fisiológicos, hematológicos e bioquímicos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste de Tukey a 5% de significância. A presença de AFB1 na dieta influenciou a atividade da fosfatase alcalina, que apresentou valores mais elevadas na dieta com inclusão de 100 ppb de AFB1, sugerindo uma atividade hepatotóxica associada às outras micotoxinas naturalmente presentes nos alimentos.(AU)

Horses fed meal contaminated with mycotoxins performing short-term exercises / Efeitos das micotoxinas na performance de equinos submetidos a exercícios de curta duração

This research was carried out to evaluate the effect of mycotoxins on the performance of horses through physiological parameters, and hematology and serum biochemistry analyses. The essay lasted 40 days, with 12 days for adaptation and 28 days of experimentation. In the experimental stage, the horses were distributed in a completely randomized design, with three treatments with four animals each. The treatments used were 0 (control), 50 ppb and 100 ppb of Aflatoxin B1 (AFB1) added to a concentrate in a basal diet. The basal diet contained mycotoxins from feedstuffs naturally contaminated. The exercise test was performed over the 21th day of the experimental stage. The exercise consisted in an interval training test with a warm-up of 17 mins at a trot followed by three gallops of 450m/min. The heart rate was monitored between the gallops. Before the exercise test and immediately after the third gallop, the physiological and blood parameters were evaluated, and continued up to 48 hours after the exercise. The results of the physiological, hematological and biochemical parameters were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared by the Tukey test at 5% of significance. The presence of AFB1 in the diet influenced the alkaline phosphatase activity, which presented higher values in horses fed diet with inclusion of 100 ppb AFB1, suggesting a hepatotoxic activity associated with the others mycotoxins naturally present in the feedstuffs.(AU)

Esta pesquisa foi conduzida para avaliar o efeito de micotoxinas no desempenho de equinos com avaliações fisiológicas e análises hematológicas e da bioquímica sérica. O ensaio durou 40 dias, com 12 dias de adaptação e 28 dias de experimentação. Na fase experimental, os equinos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado em três tratamentos, com quatro animais cada. Os tratamentos utilizados foram 0 (controle), 50 ppb e 100 ppb de Aflatoxina B1 (AFB1) adicionada ao concentrado de uma dieta basal. A dieta basal continha alimentos naturalmente contaminados por micotoxinas. O teste de desempenho foi executado no 21º dia da fase experimental por meio de teste intervalado consistindo em aquecimento ao trote por 17 minutos, seguido de três galopes de 450m/min. A frequência cardíaca (FC) foi monitorada entre os galopes. Antes do exercício e imediatamente após o terceiro galope, os parâmetros fisiológicos e sanguíneos foram avaliados e continuaram sendo monitorados até 48 horas após o exercício. Os resultados dos parâmetros fisiológicos, hematológicos e bioquímicos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste de Tukey a 5% de significância. A presença de AFB1 na dieta influenciou a atividade da fosfatase alcalina, que apresentou valores mais elevadas na dieta com inclusão de 100 ppb de AFB1, sugerindo uma atividade hepatotóxica associada às outras micotoxinas naturalmente presentes nos alimentos.(AU)

Antifungal activity and inhibition of aflatoxins production by Zingiber officinale Roscoe essential oil against Aspergillus flavus in stored maize grains / Atividade antifúngica e inibição da produção de aflatoxinas pelo óleo essencial de Zingiber officinale Roscoe contra Aspergillus flavus em grãos de milho armazenados

Essential oils are possible alternatives to the use of synthetic pesticides for control of fungal contamination. Ginger (Zingiber officinale) essential oil (GEO) is known for having antifungal and antiaflatoxigenic properties, but its use as a fumigant in situ has not been studied yet. The aim of this study was to evaluate GEOs effects upon Aspergillus flavus as a fumigant agent in stored maize grains. The main compounds reported in GEO were -zingiberene (23.85%) and geranial (14.16%), characterized by gas chromatography-mass spectrometry and nuclear magnetic resonance. The GEO was used as a fumigant in irradiated maize grains in concentrations ranging from 5 to 50 µg/g and the resulting effects were compared to a synthetic antifungal agent (carbendazim and thiram), an antifungal traditionally used for seed treatment. The antifungal efficacy of GEO against A. flavus has been proven in a dose-dependent manner through in situ (maize grains) test. The GEO inhibited aflatoxin production at concentrations 25 and 50 µg/g and controlled fungal growth. Therefore, GEO can be used as an effective and non-toxic alternative to conventional treatments in stored maize grains for the natural control of A. flavus.(AU)

Os óleos essenciais são possíveis alternativas ao uso de praguicidas sintéticos no controle da contaminação por fungos. O óleo essencial de gengibre (Zingiber officinale - OEG) é conhecido por possuir propriedades antifúngicas e antiaflatoxigênicas, mas seu uso como fumigante in situ ainda não foi estudado. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do OEG sobre Aspergillus flavus como agente fumigante em grãos de milho armazenados. Os principais compostos encontrados no OEG foram -zingibereno (23,85%) e geranial (14,16%), caracterizados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas e ressonância magnética nuclear. O OEG foi utilizado como fumigante em grãos de milho irradiados em concentrações variando de 5 a 50 µg/g e os efeitos resultantes foram comparados a um agente antifúngico sintético (carbendazim e tiram), antifúngico tradicionalmente usado para o tratamento de sementes. A eficácia antifúngica do OEG contra A. flavus foi comprovada de maneira dependente da dose através do teste in situ (grãos de milho). O OEG inibiu a produção de aflatoxina nas concentrações 25 e 50 µg/g e controlou o crescimento de fungos. Portanto, o OEG pode ser usado como uma alternativa eficaz e não tóxica aos tratamentos convencionais em grãos de milho armazenados para o controle natural de A. flavus.(AU)

Assessing the implications of mycotoxins on productive efficiency of broilers and growing pigs

The effects of mycotoxins on the productive performance of growing pigs and broilers were evaluated using meta-analytical approach. Two databases were constructed: (1) Broilers, with information collected from 51,497 birds and published in 158 scientific papers from 1980 to 2016; and (2) Pigs, with information collected from 7,743 animals and published in 72 scientific papers from 1980 to 2015. The meta-analyses were performed independently for each specie, following three sequential analyses: graphical, correlation, and variance-covariance. Broilers and pigs challenged by mycotoxins reduced (p < 0.05) feed intake by 9 and 6 %, weight gain by 15 and 11 %, and feed efficiency by 6 and 4 % compared with non-challenged animals, respectively. Aflatoxins were the most studied mycotoxins in both databases. Birds and pigs challenged by aflatoxins reduced (p < 0.05) feed intake by 10 and 8 %, growth by 15 and 11 %, and feed efficiency by 6 and 7 % compared to non-challenged animals, respectively. In both databases, variation on growth performance due to mycotoxins showed a linear relationship (p < 0.05) with the feed intake variation caused by the challenge. The intercepts of the regression-based equations were different from zero and negative, which may indicate that mycotoxins altered the maintenance requirements in challenged animals. In conclusion, both broilers and growing pigs show losses in performance responses and worse nutritional efficiency when challenged by mycotoxins.

Incidência de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em amendoins / Incidence of aflatoxins B1, B2, G1 and G2 in peanuts

Micotoxinas são substâncias tóxicas produzidas por fungos e encontradas nos alimentos. As micotoxinas mais tóxicas são as aflatoxinas, produzidas, principalmente por Aspergillus flavus. Estudos realizados no país demonstraram alta incidência dessas micotoxinas em produtos de amendoim, que representa risco à saúde da população. O objetivo do estudo foi avaliar a incidência de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em amostras de amendoins comercializados na região Nordeste do Estado de São Paulo nos períodos de 1994-2001 e 2016-2017. O método utilizado para analisar as amostras no primeiro período foi extração líquido-líquido e cromatografia em camada delgada e no segundo foi utilizando colunas de imunoafinidade, cromatografia líquida com derivatização pós-coluna e detector por fluorescência. No levantamento de 1994-2001 das 82 amostras, 39% tiveram contaminação de aflatoxinas variando de 11 a 1556 μg/kg com 37% das amostras contendo níveis maiores que 20 μg/kg, enquanto na pesquisa de 2016-17, das 56 amostras, 38% apresentaram contaminação destas toxinas variando de 0,09 a 60,40 μg/kg com 13% das amostras contendo níveis maiores que 20 μg/kg. Os resultados dos dois períodos estudados indicam que houve uma diminuição na incidência e nível das aflatoxinas estudadas, embora esta contaminação em amendoim permaneça um problema de saúde pública.

Mycotoxins are toxic compounds produced by fungi found in food. The most toxic mycotoxins are the aflatoxins produced mainly by Aspergillus flavus. Studies carried out in Brazil showed a high incidence of these mycotoxins in peanut products, a fact that represents public health problems. The aim of the study was to evaluate aflatoxins B1, B2, G1, and G2 in samples of peanuts sold in cities of the Northeast of the State of São Paulo in the period from 1994 to 2001 and from 2016 to 2017. The samples of the first period were analyzed using liquid-liquid extraction and thin-layer chromatography and the second using immunoaffinity columns, post-column derivative liquid chromatography and fluorescence detector. In the 1994-2001 survey, among 82 samples, 39% presented aflatoxins contamination ranging from 11 to 1556 μg/kg with 37% with levels greater than 20 μg/kg whereas, in the 2016-17 survey, 38% of the 56 samples presented contamination of aflatoxins ranging from 0.09 to 60.40 μg/kg and 7 samples 13% containing aflatoxins levels higher than 20 μg/kg. The results indicated there was a decrease in the incidence and level of aflatoxins, but the contamination of aflatoxins in peanuts remains a public health problem.

Assessing the implications of mycotoxins on productive efficiency of broilers and growing pigs

The effects of mycotoxins on the productive performance of growing pigs and broilers were evaluated using meta-analytical approach. Two databases were constructed: (1) Broilers, with information collected from 51,497 birds and published in 158 scientific papers from 1980 to 2016; and (2) Pigs, with information collected from 7,743 animals and published in 72 scientific papers from 1980 to 2015. The meta-analyses were performed independently for each specie, following three sequential analyses: graphical, correlation, and variance-covariance. Broilers and pigs challenged by mycotoxins reduced (p < 0.05) feed intake by 9 and 6 %, weight gain by 15 and 11 %, and feed efficiency by 6 and 4 % compared with non-challenged animals, respectively. Aflatoxins were the most studied mycotoxins in both databases. Birds and pigs challenged by aflatoxins reduced (p < 0.05) feed intake by 10 and 8 %, growth by 15 and 11 %, and feed efficiency by 6 and 7 % compared to non-challenged animals, respectively. In both databases, variation on growth performance due to mycotoxins showed a linear relationship (p < 0.05) with the feed intake variation caused by the challenge. The intercepts of the regression-based equations were different from zero and negative, which may indicate that mycotoxins altered the maintenance requirements in challenged animals. In conclusion, both broilers and growing pigs show losses in performance responses and worse nutritional efficiency when challenged by mycotoxins.(AU)

Incidência de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em amendoins / Incidence of aflatoxins B1, B2, G1 and G2 in peanuts

Micotoxinas são substâncias tóxicas produzidas por fungos e encontradas nos alimentos. As micotoxinas mais tóxicas são as aflatoxinas, produzidas, principalmente por Aspergillus flavus. Estudos realizados no país demonstraram alta incidência dessas micotoxinas em produtos de amendoim, que representa risco à saúde da população. O objetivo do estudo foi avaliar a incidência de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 em amostras de amendoins comercializados na região Nordeste do Estado de São Paulo nos períodos de 1994-2001 e 2016-2017. O método utilizado para analisar as amostras no primeiro período foi extração líquido-líquido e cromatografia em camada delgada e no segundo foi utilizando colunas de imunoafinidade, cromatografia líquida com derivatização pós-coluna e detector por fluorescência. No levantamento de 1994-2001 das 82 amostras, 39% tiveram contaminação de aflatoxinas variando de 11 a 1556 μg/kg com 37% das amostras contendo níveis maiores que 20 μg/kg, enquanto na pesquisa de 2016-17, das 56 amostras, 38% apresentaram contaminação destas toxinas variando de 0,09 a 60,40 μg/kg com 13% das amostras contendo níveis maiores que 20 μg/kg. Os resultados dos dois períodos estudados indicam que houve uma diminuição na incidência e nível das aflatoxinas estudadas, embora esta contaminação em amendoim permaneça um problema de saúde pública.(AU)

Mycotoxins are toxic compounds produced by fungi found in food. The most toxic mycotoxins are the aflatoxins produced mainly by Aspergillus flavus. Studies carried out in Brazil showed a high incidence of these mycotoxins in peanut products, a fact that represents public health problems. The aim of the study was to evaluate aflatoxins B1, B2, G1, and G2 in samples of peanuts sold in cities of the Northeast of the State of São Paulo in the period from 1994 to 2001 and from 2016 to 2017. The samples of the first period were analyzed using liquid-liquid extraction and thin-layer chromatography and the second using immunoaffinity columns, post-column derivative liquid chromatography and fluorescence detector. In the 1994-2001 survey, among 82 samples, 39% presented aflatoxins contamination ranging from 11 to 1556 μg/kg with 37% with levels greater than 20 μg/kg whereas, in the 2016-17 survey, 38% of the 56 samples presented contamination of aflatoxins ranging from 0.09 to 60.40 μg/kg and 7 samples 13% containing aflatoxins levels higher than 20 μg/kg. The results indicated there was a decrease in the incidence and level of aflatoxins, but the contamination of aflatoxins in peanuts remains a public health problem.(AU)