Iron and zinc mycelial bioaccumulation in Agaricus subrufescens strains / Bioacumulação micelial de ferro e zinco em linhagens de Agaricus subrufescens

Agaricus subrufescens, a basidiomycete native to Brazil, is worldwide cultivated due to its medicinal properties. This fungus is capable of bioaccumulating metals in the mycelial biomass when cultured in the presence of them; however, this capacity is little explored for functional food production. This study aimed to evaluate the amount of iron or zinc bioaccumulated in the vegetative mycelium of sixteen strains of A. subrufescens. Mycelia were grown in malt extract agar added with 50 mg/L of iron or with 7.5 mg/L of zinc. The metal bioaccumulation in the mycelial biomass was strain-dependent. In general, metal can inhibit or stimulate the mycelial growth ranging from -81 to +78% for iron and from -86 to +100% for zinc. The highest bioaccumulated iron and zinc concentrations in the mycelial biomass was 2,595.65 mg/kg and 1,655.83 mg/kg, respectively and occurred in the U4-4 strain. The supplementation of mycelial biomass using iron or zinc is an alternative to develop food supplements, that can be used both in the human and animal diet and in the prevention of diseases.

Agaricus subrufescens, basidiomiceto nativo do Brasil, é cultivado mundialmente devido aos seus aspectos medicinais. Este fungo tem capacidade de bioacumulação de metais na biomassa micelial, no entanto, esta propriedade é pouco explorada para a produção de alimentos funcionais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade de ferro ou zinco bioacumulada no micélio vegetativo de diversas linhagens de Agaricus subrufescens. Foram utilizadas 16 linhagens de A. subrufescens da coleção de culturas da Universidade Paranaense. O crescimento da biomassa micelial e a bioacumulação de ferro e zinco foram avaliados em micélio crescido em ágar extrato de malte adicionado de 50 mg L-1 de ferro ou 7,5 mg L-1 de zinco. A bioacumulação dos metais na biomassa micelial foi linhagem dependente. De forma geral, os metais podem inibir ou estimular o crescimento com variação entre de -81 a +78% para o ferro e de -86 a +100% para o zinco. A maior concentração de ferro na biomassa foi para o ferro de 2595,65 mg kg-1 e para o zinco de 1655,83 mg kg-1, ambos para a linhagem U4-4. O enriquecimento da biomassa micelial com ferro e/ou zinco é uma alternativa ao desenvolvimento de novos alimentos ou suplementos alimentares fonte de ferro e zinco de origem não-animal.

Iron and zinc mycelial bioaccumulation in Agaricus subrufescens strains / Bioacumulação micelial de ferro e zinco em linhagens de Agaricus subrufescens

Agaricus subrufescens, a basidiomycete native to Brazil, is worldwide cultivated due to its medicinal properties. This fungus is capable of bioaccumulating metals in the mycelial biomass when cultured in the presence of them; however, this capacity is little explored for functional food production. This study aimed to evaluate the amount of iron or zinc bioaccumulated in the vegetative mycelium of sixteen strains of A. subrufescens. Mycelia were grown in malt extract agar added with 50 mg/L of iron or with 7.5 mg/L of zinc. The metal bioaccumulation in the mycelial biomass was strain-dependent. In general, metal can inhibit or stimulate the mycelial growth ranging from -81 to +78% for iron and from -86 to +100% for zinc. The highest bioaccumulated iron and zinc concentrations in the mycelial biomass was 2,595.65 mg/kg and 1,655.83 mg/kg, respectively and occurred in the U4-4 strain. The supplementation of mycelial biomass using iron or zinc is an alternative to develop food supplements, that can be used both in the human and animal diet and in the prevention of diseases.(AU)

Agaricus subrufescens, basidiomiceto nativo do Brasil, é cultivado mundialmente devido aos seus aspectos medicinais. Este fungo tem capacidade de bioacumulação de metais na biomassa micelial, no entanto, esta propriedade é pouco explorada para a produção de alimentos funcionais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade de ferro ou zinco bioacumulada no micélio vegetativo de diversas linhagens de Agaricus subrufescens. Foram utilizadas 16 linhagens de A. subrufescens da coleção de culturas da Universidade Paranaense. O crescimento da biomassa micelial e a bioacumulação de ferro e zinco foram avaliados em micélio crescido em ágar extrato de malte adicionado de 50 mg L-1 de ferro ou 7,5 mg L-1 de zinco. A bioacumulação dos metais na biomassa micelial foi linhagem dependente. De forma geral, os metais podem inibir ou estimular o crescimento com variação entre de -81 a +78% para o ferro e de -86 a +100% para o zinco. A maior concentração de ferro na biomassa foi para o ferro de 2595,65 mg kg-1 e para o zinco de 1655,83 mg kg-1, ambos para a linhagem U4-4. O enriquecimento da biomassa micelial com ferro e/ou zinco é uma alternativa ao desenvolvimento de novos alimentos ou suplementos alimentares fonte de ferro e zinco de origem não-animal.(AU)

Antimicrobial activity of Agaricus brasiliensis on Plasmopara viticola and its effect on the induction of resistance to the control of downy mildew on Isabel Precoce / Atividade antimicrobiana de Agaricus brasiliensis sobre Plasmopara viticola e seu efeito na indução de resistência para o controle de míldio em videiras Isabel Precoce

Agaricus brasiliensis include bioactive compounds that can act as antibiotics, bacteriostatic, fungistatic and nematostatic substances. In this sense, this study aimed to evaluate the effect of a single application of aqueous mycelial suspension (AMS) of A. brasiliensis in control of downy mildew (Plasmopara viticola) and resistance induction in 'Isabel Precoce' grapevines under greenhouse conditions. Treatments consisted of three doses of 1%, 5%, 10%, 15% and 20% AMS A. brasiliensis, as well as treatment with acibenzolar-S-methyl (ASM). The variables analyzed were: sporangiospore germination, disease severity, represented by the area under the disease progress curve (AUDPC), catalase enzyme activity, peroxidase and polyphenol. The 10%, 15% and 20% doses of AMS caused approximately 80% reduction in germination of P. viticola sporangiospores. The treatments did not show significant effects in reducing both the AUDPC of mildew and polyphenol oxidase enzyme activity. The A. brasiliensis aqueous mycelial suspension showed a fungitoxic effect on the germination of sporangiopores; however, it was not enough to reduce the severity of mildew in the 'Isabel Precoce' grapevines, even when acting on the catalase and peroxidase enzymes. Thus, experiments should be performed to verify the viability of the reproductive structures of the pathogen externalized in the vines when treated with A. brasiliensis AMS.(AU)

Agaricus brasiliensis possui compostos bioativos que apresentam atividade antimicrobiana e induz mecanismos de defesa em plantas contra patógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis no controle do míldio (Plasmopara viticola) e indução de resistência em videiras Isabel Precoce. Os tratamentos foram: 0, 1, 5, 10, 15 e 20% da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis, além do tratamento com acibenzolar-S-metil. As variáveis analisadas foram: germinação de esporangiósporos; severidade da doença, representada pela área abaixo da curva de progresso da doença; atividade da enzima catalase; peroxidase e polifenoloxidase. As doses 10, 15 e 20% de suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis proporcionaram redução de aproximadamente 80% na germinação dos esporangiósporos de P. viticola. Os tratamentos não apresentaram efeitos significativos na redução da área abaixo da curva de progresso da doença do míldio e na atividade da enzima polifenoloxidase. A dose de 10% da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis reduziu a atividade de catalase e induziu a atividade da peroxidase. A suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis apresentou efeito fungitóxico na germinação de esporangióporos, entretanto não foi suficiente para reduzir a severidade do míldio da videira Isabel Precoce, mesmo atuando na atividade das enzimas catalase e peroxidase. Assim, experimentos deverão ser realizados para verificar a viabilidade das estruturas reprodutivas do patógeno exteriorizadas nas videiras quando tratadas com suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis.(AU)

Antimicrobial activity of Agaricus brasiliensis on Plasmopara viticola and its effect on the induction of resistance to the control of downy mildew on Isabel Precoce / Atividade antimicrobiana de Agaricus brasiliensis sobre Plasmopara viticola e seu efeito na indução de resistência para o controle de míldio em videiras Isabel Precoce

Agaricus brasiliensis include bioactive compounds that can act as antibiotics, bacteriostatic, fungistatic and nematostatic substances. In this sense, this study aimed to evaluate the effect of a single application of aqueous mycelial suspension (AMS) of A. brasiliensis in control of downy mildew (Plasmopara viticola) and resistance induction in 'Isabel Precoce' grapevines under greenhouse conditions. Treatments consisted of three doses of 1%, 5%, 10%, 15% and 20% AMS A. brasiliensis, as well as treatment with acibenzolar-S-methyl (ASM). The variables analyzed were: sporangiospore germination, disease severity, represented by the area under the disease progress curve (AUDPC), catalase enzyme activity, peroxidase and polyphenol. The 10%, 15% and 20% doses of AMS caused approximately 80% reduction in germination of P. viticola sporangiospores. The treatments did not show significant effects in reducing both the AUDPC of mildew and polyphenol oxidase enzyme activity. The A. brasiliensis aqueous mycelial suspension showed a fungitoxic effect on the germination of sporangiopores; however, it was not enough to reduce the severity of mildew in the 'Isabel Precoce' grapevines, even when acting on the catalase and peroxidase enzymes. Thus, experiments should be performed to verify the viability of the reproductive structures of the pathogen externalized in the vines when treated with A. brasiliensis AMS.(AU)

Agaricus brasiliensis possui compostos bioativos que apresentam atividade antimicrobiana e induz mecanismos de defesa em plantas contra patógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis no controle do míldio (Plasmopara viticola) e indução de resistência em videiras Isabel Precoce. Os tratamentos foram: 0, 1, 5, 10, 15 e 20% da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis, além do tratamento com acibenzolar-S-metil. As variáveis analisadas foram: germinação de esporangiósporos; severidade da doença, representada pela área abaixo da curva de progresso da doença; atividade da enzima catalase; peroxidase e polifenoloxidase. As doses 10, 15 e 20% de suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis proporcionaram redução de aproximadamente 80% na germinação dos esporangiósporos de P. viticola. Os tratamentos não apresentaram efeitos significativos na redução da área abaixo da curva de progresso da doença do míldio e na atividade da enzima polifenoloxidase. A dose de 10% da suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis reduziu a atividade de catalase e induziu a atividade da peroxidase. A suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis apresentou efeito fungitóxico na germinação de esporangióporos, entretanto não foi suficiente para reduzir a severidade do míldio da videira Isabel Precoce, mesmo atuando na atividade das enzimas catalase e peroxidase. Assim, experimentos deverão ser realizados para verificar a viabilidade das estruturas reprodutivas do patógeno exteriorizadas nas videiras quando tratadas com suspensão miceliada aquosa de A. brasiliensis.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Abstract Background Agaricus brasiliensis is a medicinal mushroom with immunomodulatory and antitumor activities attributed to the -glucans presented in the polysaccharide fraction of its fruiting body. Since -glucans enhance cellular immunoresponsiveness, in this study we aimed to evaluate the effect of an acid-treated polysaccharide-rich fraction (ATF) of A. brasiliensis on the ability of human monocytes to adhere/phagocyte C. albicans yeast cells, their expression of pattern recognition receptors and their ability to produce cytokines. Methods Adhesion/phagocytosis of FITC-labeled C. albicans was evaluated by flow cytometry. Cells were incubated with specific fluorochrome-labeled antibodies for TLR2 and 4, GR and MR and also evaluated by flow cytometry. Monocytes were cultured with ATF, and culture supernatants were collected for analysis of in vitro cytokine production by ELISA (TNF-, IL-1, IL-12 and IL-10). Results ATF significantly increased the adherence/phagocytosis of C. albicans by monocytes and this was associated with enhanced expression of TLR2 and TLR4, while no effect was observed on GR or MR. Moreover, expression of TLR4 and TLR2 was associated with higher levels of in vitro production of TNF- and IL-1, respectively. Production of IL-10 was also increased by ATF treatment, but we found no association between its production and the expression of Toll-like receptors. Conclusion Our results provided us with evidence that A. brasiliensis polysaccharides affect human monocytes probably through the modulation of Toll-like receptors.

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Agaricus brasiliensis é um cogumelo medicinal com atividades imunomoduladoras e antitumorais atribuídas aos ß-glucanos presentes na fração polissacarídica de seu corpo de frutificação. Uma vez que os ß-glucanos aumentam a imunorresponsividade celular, neste estudo objetivamos avaliar o efeito de uma fração rica em polissacarídeos tratados com ácido (ATF) de A. brasiliensis sobre a capacidade de monócitos humanos de aderir / fagocitar células de levedura C. albicans . expressão de receptores de reconhecimento de padrões e sua capacidade de produzir citocinas. Métodos: A adesão / fagocitose de C. albicans marcada com FITC foi avaliada por citometria de fluxo. As células foram incubadas com anticorpos marcados com fluorocromo específicos para TLR2 e 4, ßGR e MR e também avaliadas por citometria de fluxo. Os monócitos foram cultivados com ATF, e os sobrenadantes da cultura foram coletados para análise da produção de citocinas in vitro por ELISA (TNF-α, IL-1ß, IL-12 e IL-10). Resultados: ATF aumentou significativamente a aderência / fagocitose de C. albicans por monócitos e isso foi associado com expressão aumentada de TLR2 e TLR4, enquanto nenhum efeito foi observado em ßGR ou MR. Além disso, a expressão de TLR4 e TLR2 foi associada a níveis mais elevados de produção in vitro de TNF-α e IL-1, respectivamente. A produção de IL-10 também foi aumentada pelo tratamento com ATF, mas não encontramos associação entre sua produção e a expressão de receptores Toll-like. Conclusão: Nossos resultados nos forneceram evidências de que polissacarídeos de A. brasiliensis afetam monócitos humanos provavelmente através da modulação de receptores Toll-like.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Agaricus brasiliensis é um cogumelo medicinal com atividades imunomoduladoras e antitumorais atribuídas aos ß-glucanos presentes na fração polissacarídica de seu corpo de frutificação. Uma vez que os ß-glucanos aumentam a imunorresponsividade celular, neste estudo objetivamos avaliar o efeito de uma fração rica em polissacarídeos tratados com ácido (ATF) de A. brasiliensis sobre a capacidade de monócitos humanos de aderir / fagocitar células de levedura C. albicans . expressão de receptores de reconhecimento de padrões e sua capacidade de produzir citocinas. Métodos: A adesão / fagocitose de C. albicans marcada com FITC foi avaliada por citometria de fluxo. As células foram incubadas com anticorpos marcados com fluorocromo específicos para TLR2 e 4, ßGR e MR e também avaliadas por citometria de fluxo. Os monócitos foram cultivados com ATF, e os sobrenadantes da cultura foram coletados para análise da produção de citocinas in vitro por ELISA (TNF-α, IL-1ß, IL-12 e IL-10). Resultados: ATF aumentou significativamente a aderência / fagocitose de C. albicans por monócitos e isso foi associado com expressão aumentada de TLR2 e TLR4, enquanto nenhum efeito foi observado em ßGR ou MR. Além disso, a expressão de TLR4 e TLR2 foi associada a níveis mais elevados de produção in vitro de TNF-α e IL-1, respectivamente. A produção de IL-10 também foi aumentada pelo tratamento com ATF, mas não encontramos associação entre sua produção e a expressão de receptores Toll-like. Conclusão: Nossos resultados nos forneceram evidências de que polissacarídeos de A. brasiliensis afetam monócitos humanos provavelmente através da modulação de receptores Toll-like.(AU)

The antioxidant potential of oral intake of flour produced from Agaricus brasiliensis mycelium in hamsters with hypercholesterolemia / Análise do potencial antioxidante do consumo oral da farinha produzida com micélio de Agaricus brasiliensis em hamsters hipercolesterolêmicos

The main function of antioxidant defense system is to inhibit or reduce the cells damage caused by reactive oxygen species. Some antioxidants occurring in the diet enhance the antioxidant defense of plasma. The antioxidant potential of oral intake of a flour produced with A. brasiliensis mycelium fermented on wheat grains was evaluated in plasma samples from male hypercholesterolemic Syrian Golden hamsters, were divided into four groups: P (standard diet), H (standard hypercholesterolemic diet), C (standard diet + 10 % of wheat flour containing mycelium of A. brasiliensis), and HC (standard diet hypercholesterolemic + 10 % wheat flour containing mycelium of A. brasiliensis). The animals were fed for 40 days and then sacrificed for collecting plasma. The antioxidant capacity analysis showed that the dietary intake of group C induced the most significant increase of antioxidants concentrations in plasmas (0.39 mg.mL-1, expressed in ascorbic acid). The HC group showed higher antioxidant capacity than the H group (p < 0.05), as it inhibited 20.2 % of crocin bleaching, while the H group inhibited 10.4 % only; however the HC group showed a similar antioxidant capacity of P group (16.64 %). It is suggested that the consumption of wheat flour containing mycelium of A. brasiliensis induced the antioxidant protection in animals plasma.(AU)

O sistema de defesa antioxidante inibe ou reduz os danos causados às células pelas espécies reativas de oxigênio. Alguns compostos antioxidantes presentes na dieta auxiliam na defesa antioxidante do plasma. O potencial antioxidante do consumo oral de farinha produzida com micélio de Agaricus brasiliensis fermentado sobre grãos de trigo foi analisado nos plasmas de hamsters Golden Syrian machos hipercolesterolêmicos, que foram divididos em quatro grupos: P (dieta padrão), H (dieta hipercolesterolêmica padrão), C (dieta padrão + 10 % de farinha de trigo contendo micélio de A. brasiliensis), e HC (dieta hipercolesterolêmica padrão + 10 % de farinha de trigo contendo micélio de A. brasiliensis). Os animais foram alimentados durante 40 dias e depois sacrificados para coletar materiais biológicos. A análise da capacidade antioxidante mostrou que a dieta do grupo C induziu maior aumento significativo da concentração de antioxidantes no plasma (0,39 mg.mL-1, expresso em ácido ascórbico). O grupo HC apresentou maior capacidade antioxidante do que grupo H (p < 0,05), pois inibiu 20,2 % do branqueamento da crocina. O grupo H inibiu 10,4 %, porém o grupo HC demonstrou capacidade antioxidante semelhante ao do grupo P (16,64 %). O consumo da farinha de trigo contendo micélio de A. brasiliensis estimulou a proteção antioxidante no plasma dos animais.(AU)

Bioacumulação de zinco em micélio de Agaricus subrufescens / Zinc bioaccumulation in Agaricus subrufescens mycelium / Bioacumulación de zinc en micelio de Agaricus subrufescens

Fungos basidiomicetos têm a capacidade de bioacumular metais pesados, no entanto existem poucos trabalhos sobre bioacumulação de zinco em micélio de Agaricussubrufescens. O objetivo deste trabalho foi avaliar a bioacumulação de zinco em micélio vegetativo de A. subrufescens cultivado em meio sólido e líquido. O fungo foi crescido em meio sólido ou em meio líquido a base de extrato de malte adicionado de ZnSO4 a fim de obter zero; 2,5; 5; 7,5; 10; 15 ou 20 ppm de zinco. Os meios foram inoculados e após 14 dias foi determinada a biomassa e a bioacumulação de zinco. A adição de zinco no meio de cultivo inibiu o crescimento micelial e induziu a bioacumulação na biomassa tanto no cultivo sólido como no líquido. Adições acima de 7,5 ppm de zinco inibiram totalmente o crescimento micelial. O fungo crescido em meio de cultivo líquido sofre maior inibição do crescimento com a adição de zinco e maior bioacumulação que no meio sólido.(AU)

Fungi basidiomycetes have the ability to bioaccumulate heavy metals, but there are few studies on zinc bioaccumulation in the mycelium of Agaricus subrufescens. The objective of this study is to evaluate the zinc bioaccumulation in the mycelium of A. subrufescens cultivated in solid and liquid culture media. Mycelium was grown on solid or liquid medium in malt extract base added with ZnSO4 to obtain zero, 2.5, 5, 7.5, 10, 15 or 20-ppm zinc. Mycelial biomass and zinc bioaccumulation were determined 14 days after inoculation in the culture media. Addition of zinc in culture medium inhibited mycelial growth and induced biomass bioaccumulation both in solid and in liquid culture. Additions higher than 7.5-ppm zinc completely inhibited mycelial growth in culture medium. Mycelial growth in liquid culture presented greater increase of growth inhibition with the addition of zinc and greater bioaccumulation than in solid medium.(AU)

Hongos basidiomicetos tienen la capacidad de bioacumular metales pesados, sin embargo hay pocos estudios sobre la bioacumulación de zinc en el micelio de Agaricus subrufescens. El objetivo de este estudio ha sido evaluar la bioacumulación de zinc en el micelio de A. subrufescens cultivado en medio sólido y líquido. El hongo ha crecido en medio sólido o líquido a base de extracto de malta agregado de ZnSO4 para obtener cero; 2.5, 5, 7.5, 10, 15 o 20 ppm de zinc. Los medios fueron inoculados y después de 14 días se determinó la biomasa y la bioacumulación de zinc. La adición de zinc en el medio del cultivo inhibió el crecimiento micelial y indujo la bioacumulación de la biomasa tanto en el cultivo sólido como en el líquido. Adiciones superiores a 7.5 ppm de zinc inhibieron completamente el crecimiento del micelio. El hongo crecido en medio de cultivo líquido sufre mayor inhibición del crecimiento con la adición de zinc y mayor bioacumulación que en el medio sólido.(AU)

Antioxidant activity of Agaricus brasiliensis basidiocarps on different maturation phases

Different maturation phases of basidiocarp could affect the bioactivity and concentration of some active substances. A. brasiliensis Wasser et al.(A. blazei Murrill) has shown antitumor activity that could be related to the antioxidant activity. However there is no information of the best basidiocarp maturation phase for extracting antioxidant substances in order to determine the moment of harvesting in mushroom cultivation. The objective of this work was to evaluate the antioxidant activity of A. brasiliensis strains on different basidiocarp maturation phases. The best condition for extraction of A. brasiliensis antioxidants is with methanol as solvent at 60 ºC for 60 min. Strains with closed basidiocarp have higher antioxidant activity than with opened basidiocarp. Antioxidant activity varies in each strain. It was concluded that A. brasiliensis is a natural source of antioxidant compounds. Also there is higher antioxidant activity in closed than opened caps and consequently higher functional activity. It reinforces the synergic action among different A. brasiliensis compounds as a functional food and the importance of further investigation for isolation and characterization of antioxidant substances of A. brasiliensis. It also determines the best harvest period in order to obtain the highest antioxidant activity from basidiocarp.

Production flush of Agaricus blazei on Brazilian casing layers

This study aimed to verify the biological efficiency and production flushes of Agaricus blazei strains on different casing layers during 90 cultivation days. Four casing layers were used: mixture of subsoil and charcoal (VCS), lime schist (LSC), São Paulo peat (SPP) and Santa Catarina peat (SCP); and two genetically distant A. blazei strains. The fungus was grown in composted substratum and, after total colonization, a pasteurized casing layer was added over the substratum, and fructification was induced. Mushrooms were picked up daily when the basidiocarp veil was stretched, but before the lamella were exposed. The biological efficiency (BE) was determined by the fresh basidiocarp mass divided by the substratum dry mass, expressed in percentage. The production flushes were also determined over time production. The BE and production flushes during 90 days were affected by the strains as well as by the casing layers. The ABL26 and LSC produced the best BE of 60.4%. Although VCS is the most used casing layer in Brazil, it is inferior to other casing layers, for all strains, throughout cultivation time. The strain, not the casing layer, is responsible for eventual variations of the average mushroom mass. In average, circa 50% of the mushroom production occurs around the first month, 30% in the second month, and 20% in third month. The casing layer water management depends on the casing layer type and the strain. Production flush responds better to water reposition, mainly with ABL26, and better porosity to LSC and SCP casing layers.

Viabilidade de agaricus blazei em diferentes condições de preservação / Viabilidad de agaricus blazei en diferentes condiciones de preservación / Viability of agaricus blazei under different preservation conditions

A técnica de transferências periódicas de fragmentos de micélio para novo meio de cultura é a mais utilizada para a preservação de Agaricus blazei. Entretanto, esta técnica apresenta maior risco de contaminação, degeneração genética e perda de caracteristicas biológicas. O desenvolvimento de técnicas de preservação que permitam a manutenção da viabilidade da espécie por mais tempo e a um menor custo é de interesse biotecnológico. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de A. blazei crescido em dois meios de cultivo e preservado à +4 ºC ou -20 ºC em diferentes recipientes de contenção. O fungo foi crescido em meio de ágar-extrato de malte ou ágar-grão de trigo moído e preservado à +4 ºC ou -20 ºC em diferentes recipientes de contenção, simples ou duplos, com adição de soluções aquosas de glicerol, sacarose, glicose, água ultrapura ou sem adição de crioprotetor. Após 1 ou 12 meses o micélio preservado foi transferido para ágar-extrato de malte para avaliação da viabilidade micelial. Os crioprotetores glicerol, sacarose e glicose, associados com o meio de cultura ágar-extrato de malte ou ágar-grão de trigo moído, em recipiente de contenção simples ou duplo são efetivos para preservação à +4 ºC por períodos curtos, um mês, mas não são efetivos para períodos longos, 12 meses. Os crioprotetores, meios de cultivo e recipientes de contenção simples ou duplos não são efetivos para criopreservação do fungo à -20 ºC. Os recipientes simples são tão eficientes quanto os recipientes duplos para evitar contaminações e preservar o fungo.(AU)

Continuous mycelial subculturing is frequently used for the preservation of Agaricus blazei. However, this technique has a higher risk of contamination, genetic degeneration and loss of biological characteristics. The development of preservation techniques that allow maintaining the viability of this species longer and at lower costs is of biotechnological interest. Thus, the objective of this study was to evaluate the viability of A. blazei grown in two culture media and preserved at +4 ºC or -20 ºC in different containment vessels. The fungus was grown on malt extract agar or grounded wheat grain agar culture medium and preserved at +4 ºC or -20 ºC in different containment vessels, single or double ones, with the addition of aqueous solutions of glycerol, saccharose, glucose, ultrapure water or without addition of cryoprotectant. After 1 or 12 months, the preserved mycelium was transferred to malt extract agar for assessment of mycelial viability. Glycerol, saccharose and glucose associated with malt extract agar or grounded wheat grain agar culture medium, in single or double containment vessels, are effective for preservation at +4 ºC for a short period, one month, but they are not effective for a longer period, 12 months. Cryoprotectants, culture media and single or double containment vessels are not effective for fungus cryopreservation at -20 ºC. Simple containment vessels are as efficient as double ones to prevent contamination and to preserve the fungus.(AU)

La técnica de transferencias periódicas de fragmentos de micelio para nuevo medio de cultura es la más utilizada para la preservación de Agaricus blazei. Sin embargo, esta técnica presenta mayor riesgo de contaminación, degeneraciones genéticas y pérdidas de características biológicas. El desarrollo de técnicas de preservación que permitan la manutención y viabilidad de la especie por más tiempo y con un costo más bajo es de interés biotecnológico. De esta manera, el objetivo de este estudio fue evaluar la viabilidad de A. blazei sembrado en dos medios de cultivo y preservados en +4 ºC o -20 ºC en diferentes recipientes de contención. El hongo se cultivó en medio de extracto de agar de malta o agar de grano de trigo molido y preservado en +4 ºC o -20 ºC en diferentes recipientes de contención simple o doble, con adición de soluciones acuosas de glicerol, sacarosa, glucosa, agua ultra pura o sin adición de crioprotector. Después de 1 o 12 meses, el micelio preservado fue transferido para extracto de agar de malta para evaluación de la viabilidad del micelio. Los crioprotectores glicerol, sacarosa y glucosa, asociados con el medio de cultura extracto de agar de malta o de agar de grano de trigo molido, en recipiente de contención simple o doble son eficaces para la preservación a +4 ºC por períodos cortos, un mes, pero no son eficaces por períodos largos, como 12 meses. Los crioprotectores medios de cultivo y recipientes de contención simples o dobles no son eficaces para la criopreservación del hongo a -20 ºC. Recipientes simples son tan eficaces como los dobles para evitar contaminaciones y preservar el hongo.(AU)

Nutritional Requirements for Growth of Agaricus brasiliensis / Requerimentos nutricionais para o crescimento micelial de Agaricus brasiliensis

The nutritional requirements of A. brasiliensis in culture media were assessed bysupplementing a basal medium (g L-1): (glucose, 10, KH2PO4, 1, MgSO4.7H2O, 0.5, [NH4]2SO4,1, pH 5.5) with CaCl2, trace elements (FeSO4.7H2O; MnCl2.4H2O; ZnSO4.7H2O;CuSO4.5H2O), casein, yeast extract, peptone, B-vitamins or amino acids. Evaluations were basedon the mycelial growth in solid or liquid culture (mm day-1 or mg day-1) and visual analysis of thecolony. The addition of CaCl2 and trace elements was very important for the major mycelialgrowth of the fungi. The addition of casein and inositol to the medium did not have a significanteffect on growth. The best growth result in solid medium was obtained with the basal mediumplus the addition of yeast extract and peptone. In relation to the other nutrient sources, themycelial growth in the presence of amino acids darkened the medium after two weeks. Theaddition of B-vitamins to the basal medium lead to slower mycelial growth; however, growthwas more visually dense when compared to other nutritional sources. B-vitamins addedseparately did not have the same result, suggesting that the fungus requires two or more vitaminsat the same time for better mycelial growth.(AU)

Os requerimentos nutricionais de A. brasiliensis foram avaliados, com asuplementação de um meio basal (g L-1): (glicose, 10, KH2PO4, 1, MgSO4.7H2O, 0.5,[NH4]2SO4, 1, pH 5.5) com CaCl2, micronutrientes (FeSO4.7H2O; MnCl2.4H2O;ZnSO4.7H2O; CuSO4.5H2O), caseína, extrato de levedura, peptona, vitaminas do complexo Bou aminoácidos. O crescimento micelial foi avaliado em meio sólido e líquido, considerandovelocidade de crescimento e produção de massa micelial (mm dia-1 ou mg dia-1) e análise visual dacolônia. A adição de CaCl2 e micronutrientes foi muito importante para o melhor crescimentomicelial do fungo, enquanto que a adição de caseina e inositol não apresentou efeito significativosobre o crescimento. O melhor crescimento em meio sólido foi obtido quando o meio basal foisuplementado com extrato de levedura e peptona. Quando o fungo foi cultivado no meio basalsuplementado com aminoácidos, observou-se um escurecimento do meio após duas semanas decultivo. A adição de vitaminas proporcionou um crescimento micelial mais lento no meio sólido,entretanto, mais denso em relação ao meio suplementado com outros nutrientes. Quando asvitaminas do complexo B foram adicionadas separadamente não se observou o mesmo resultado,o que sugere que o fungo requer duas ou mais vitaminas no meio para melhorar o crescimentomicelial.(AU)

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Antineoplasic activity of Agaricus brasiliensis basidiocarps on different maturation phases

The fungus Agaricus brasiliensis is a Basidiomycete studied because of its immunomodulation and/or antitumor substances. The objective of this study was to verify the Agaricus brasiliensis antineoplasic activity in vivo on different basidiocarp maturation phases on Sarcoma 180 cells implanted in mice. Sarcoma cells were implanted in mice and after seven days mice were divided in three groups. The first group was treated with saline solution, the second group was treated with closed basidiocarp extract solution and the third group was treated with opened basidiocarp extract solution. After 30 days of being daily orally treated with these three solutions all animals suffered euthanasia, and the splenic index, tumor mass and volume were determined. No significant differences of the tumor growth inhibition in function of the different basidiocarp maturation phases for the Agaricus brasiliensis strain were observed. The in vivo basidiocarp antineoplasic average activity was 89.22%.

Microbial diversity in a bagasse-based compost prepared for the production of Agaricus brasiliensis

Edible mushrooms are renowned for their nutritional and medicinal properties and are thus of considerable commercial importance. Mushroom production depends on the chemical composition of the basic substrates and additional supplements employed in the compost as well as on the method of composting. In order to minimise the cost of mushroom production, considerable interest has been shown in the use of agro-industrial residues in the preparation of alternative compost mixtures. However, the interaction of the natural microbiota present in agricultural residues during the composting process greatly influences the subsequent colonisation by the mushroom. The aim of the present study was to isolate and identify the microbiota present in a sugar cane bagasse and coast-cross straw compost prepared for the production of Agaricus brasilienses. Composting lasted for 14 days, during which time the substrates and additives were mixed every 2 days, and this was followed by a two-step steam pasteurisation (55 - 65ºC; 15 h each step). Bacteria, (mainly Bacillus and Paenibacillus spp. and members of the Enterobacteriaceae) were the predominant micro-organisms present throughout the composting process with an average population density of 3 x 10(8) CFU/g. Actinomycetes, and especially members of the genus Streptomyces, were well represented with a population density of 2 - 3 x 10(8) CFU/g. The filamentous fungi, however, exhibited much lower population densities and were less diverse than the other micro-organisms, although Aspergillus fumigatus was present during the whole composting process and after pasteurisation.

Os cogumelos comestíveis são apreciados pelas suas propriedades nutricionais e medicinais e, por essa razão, possuem alto valor econômico. A produção de cogumelos depende da composição química dos substratos básicos, dos suplementos utilizados e da preparação do composto no qual o fungo será cultivado. Considerando-se que os custos de produção precisam ser minimizados, os resíduos agroindustriais representam uma fonte alternativa e econômica para a preparação do composto. A interação da microbiota natural dos resíduos agrícolas durante o processo de compostagem influencia a subseqüente colonização do cogumelo. Visando-se a produção de A. brasiliensis, o presente trabalho objetivou isolar e identificar a microbiota presente no composto preparado a partir de bagaço de cana e capim coast-cross. O processo de compostagem durou 14 dias com reviragens da pilha a cada dois dias, o qual foi seguido de pasteurização (55 65 ºC) em duas fases por 15 h cada. As bactérias (principalmente Bacillus, Paenibacillus e espécies da família Enterobacteriaceae) foram os microrganismos predominantes durante todo o processo com uma densidade populacional média de 3.0 x 10(8) UFC/g. Os actinomicetos, principalmente os do gênero Streptomyces, estiveram bem representados, com uma densidade populacional de 2.0 a 3.0 x 10(8) UFC/g. Os fungos filamentosos foi a classe de microrganismos com menor densidade populacional e menor diversidade, embora a espécie Aspergillus fumigatus esteve presente durante todo o processo de compostagem e também após a pasteurização do composto.

Diferentes meios de cultivo e condições de luz no crescimento e massa miceliana de agaricus brasiliensis s. wasser et al

ABSTRACT The cultivation of edible fungi is gaining significance in Brazil, particularly in light of scientific research that has proved their medicinal activities and high nutritional value, coupled with the fact that they have become a source of alternative income for small and medium producers. For this study, two strains of Agaricus brasiliensis (ABL97/11 and ABL97/30) originating from the Module of Mushrooms of FCA/ UNESP, SP were seeded in different cultivation media, consisting of compost and the addition or not of dextrose, and incubated in the presence and absence of light, checking for alterations in the mycelial development. It was observed that the brightness does not influence the mycelium mass, while media with dextrose provided larger mycelium mass for the two strains. Compost agar dextrose medium (CDA) when incubated in the darkness provided larger growth for the two strains, and the strain ABL11/97 presented larger growth than the strain ABL30/97.

RESUMO O cultivo de cogumelos comestíveis vem tomando relevância no Brasil, principalmente depois de descobertas científicas que comprovaram atividades medicinais exercidas por eles e também pelo seu alto valor nutritivo e, ainda por estes tornarem-se uma fonte de renda alternativa para pequenos e médios produtores. Para realização deste trabalho foram utilizadas duas linhagens de Agaricus brasiliensis (ABL97/11 e ABL97/30), provenientes do Módulo de Cogumelos da FCA/ UNESP, SP, as quais foram repicadas para diferentes meios de cultivo, à base de composto e adição ou não de dextrose, e incubadas na presença e ausência de luz, visando alterações no desenvolvimento miceliano. Observou-se que a luminosidade não influencia na massa miceliana, muito embora meios com dextrose proporcionaram maior massa miceliana para as duas linhagens. O meio composto-dextrose-ágar (CDA), quando incubado no escuro, proporcionou maior crescimento para as duas linhagens, sendo que a linhagem ABL11/97 apresentou maior crescimento que a linhagem ABL30/97.

Avaliação sensorial de formulação de molho de tomate adicionado do cogumelo Agaricus brasiliensis / Sensory evaluation of formulation of tomato sauce added the mushroom Agaricus brasiliensis

O presente trabalho teve como objetivo desenvolver molho de tomate (Lycopersicon esculentum Mill) com adição do cogumelo Agaricus brasiliensis (ab) e avaliar a sua aceitação. Para isso, foram elaboradas 4 formulações de molho de tomate com Agaricus brasiliensis (Ab), variando a quantidade de cogumelo e do extrato líquido do mesmo. As formulações de molho diferiram nas proporções do cogumelo Agaricus brasiliensis (1,4g% e 3g%) e de extrato líquido de Agaricus brasiliensis (25mL) e conseqüente em relação ao molho sem cogumelo (1,29%), entretanto, os molhos com Agaricus brasiliensis com mais extrato líquido não diferiram significativamente. Os provadores perceberam diferença nos atributos aparência, sabor ácido e textura dos molhos de tomate com maior (3g%) e menor (0,7g% + extrato) adição de Agaricus brasiliensis. Conclui-se que o molho de tomate com Agaricus brasiliensis apresentou maior valor nutricional, sendo um subsídio à boa alternativa para justificar sua inclusão na alimentação.(AU)

The purpose of this study is to develop tomato sauce (Lycopersicon esculentum Mill) to which Agaricusbrasiliensis (ab) mushrooms are added. Four formulations of tomato sauce with Agaricus brasiliensiswere made using different amounts of mushroom and their liquid extract and assess its acceptance. For this,formulations were prepared 4 of tomato sauce with Agaricus brasiliensis (ab), varying the amount ofmushrooms and liquid extract of the same. The sauce formulations differ in the proportions of Agaricusbrasiliensis (1.4 g% and 3g%) and liquid extract of Agaricus brasiliensis (25mL) and the consequent compared to no mushroom sauce (1.29%), however, the sauces with Agaricus extract more liquid did not differ significantly. The tasters attributes perceived difference in appearance, acidic taste and texture of tomato sauces with higher (3g%) and 10- west (0.7% + g extract) addition of Agaricus brasiliensis. Concluded that the tomato sauce with Agaricus brasiliensis showed higher nutritional value, being a good alternative to the subsidy to justify their inclusion in the diet. (AU)