Cloning, expression and antifungal effect of the recombinant chitinase from Streptomyces sampsonii KJ4 / Clonagem, expressão e efeito antifúngico da quitinase recombinante de Streptomyces sampsonii KJ40

Streptomyces sampsonii is a kind of biocontrol bacterium with antifungal effects, and chitinase is one of the main antifungal substances. To improve and further study the structure and function of the chitinase gene of S. sampsonii, we amplified the target fragment by PCR, ligated the fragment to the expression vector pET-32a, introduced the resulting plasmid into Escherichia coli BL21 (DE3) and induced expression of the chitinase. Then, the recombinant chitinase was purified by is-labelled protein micro purification kit. A chitinase gene, Sschi61, was cloned from the genome and expressed in a prokaryote. The antifungal effect of the recombinant protein was also studied. Finally, the chitinase gene Sschi61 with a length of 1755 bp was obtained, and the expression of the 82 kDa recombinant chitinase was induced in E. coli by IPTG. The recombinant chitinase could inhibit the black spot pathogen of Eucommia ulmoides (Pestalotiopsis trachicarpicola). After the hyphae of the pathogen of black spot of Eucommia ulmoides (Pestalotiopsis trachicarpicola) were soaked with recombinant chitinase, the hyphae cells expanded, broke, and dissolved.

Streptomyces sampsonii é uma espécie de bactéria de biocontrole com efeitos antifúngicos, sendo a quitinase uma das principais substâncias desse tipo. Para melhorar e estudar mais a estrutura e função do gene da quitinase de S. sampsonii, amplificamos o fragmento alvo por PCR, ligamos o fragmento ao vetor de expressão pET-32a, introduzimos o plasmídeo resultante em Escherichia coli BL21 (DE3) e induzimos expressão da quitinase. Em seguida, a quitinase recombinante foi purificada pelo kit de micropurificação de proteína marcada. Um gene da quitinase, Sschi61, foi clonado do genoma e expresso em um procarioto. O efeito antifúngico da proteína recombinante também foi estudado. Finalmente, o gene da quitinase Sschi61 foi obtido, contando comprimento de 1755 pb, e a expressão da quitinase recombinante de 82 kDa foi induzida em E. coli por IPTG. A quitinase recombinante pode inibir o patógeno da mancha preta de Eucommia ulmoides (Pestalotiopsis trachicarpicola). Após as hifas do patógeno da mancha preta de Eucommia ulmoides (Pestalotiopsis trachicarpicola) serem embebidas com quitinase recombinante, as células das hifas se expandiram, quebraram e se dissolveram.

Biological control of Biomphalaria, the intermediate host of Schistosoma spp, a systematic review / Controle biológico de Biomphalaria, hospedeiro intermediário do Schistosoma spp, uma revisão sistemática

Schistosomiasis is an important vector-borne disease transmitted by an intermediate host: a freshwater mollusk. Control of these snail vectors is one of the strategies of the World Health Organization against the disease. The present study was based on a systematic review of published scientific papers concerning the biological control of snails (genus Biomphalaria), and identified the ongoing challenges and propose future perspectives. The review methodology was based on the PRISMA statement, the international databases Web of Science and Scopus for the period 1945-2021. In total, 47 papers were analyzed, published by authors from 14 different countries, the majority being from: France, Brazil, the United States, and Egypt. The most widely used strategy for biological control was predation by fish (12 studies). Fourteen papers were published in the most prolific decade 2010-2019; during which there was also a greater diversity of biological control agents in studies. In this context, we believed that one of the principal challenges of this approach is the successful simultaneous use of multiple types of biological control agent: predators, competitors, and/or microbial agents. This new approach may provide important insights for the development of new biological control agents or microbial-based products, with the potential to reduce the parasite load carried by schistosomiasis snail vector and control its transmission in a sustainable way.

A esquistossomose é uma importante doença transmitida por vetor, um hospedeiro intermediário: um molusco de água doce. O controle desses caramujos vetores é uma das estratégias da Organização Mundial da Saúde para controle da doença. O presente estudo foi baseado em uma revisão sistemática de artigos científicos publicados sobre o controle biológico de caramujos (gênero Biomphalaria), e teve como objetivo identificar os desafios atuais e propor perspectivas futuras. A metodologia de revisão foi baseada na declaração PRISMA, nas bases de dados internacionais, Web of Science e Scopus, entre 1945-2021. No total, foram analisados 47 artigos, publicados por autores de 14 países diferentes, sendo a maioria: França, Brasil, Estados Unidos e Egito. A estratégia mais utilizada para controle biológico foi a predação por peixes (12 estudos). Quatorze artigos foram publicados na década mais produtiva 2010-2019, durante a qual também houve uma maior diversidade de agentes de controle biológico em estudos. Neste contexto, acreditamos que um dos principais desafios desta abordagem é a utilização simultânea bem-sucedida de múltiplos tipos de agentes de controle biológico: predadores, concorrentes e/ou agentes microbianos. Esta nova abordagem fornece importantes subsídios para o desenvolvimento de novos agentes de controle biológico ou produtos de base microbiana, com o potencial de reduzir a carga parasitária transportada pelo vetor esquistossomose de caramujos e controlar sua transmissão de forma sustentável.

Biocontrol potential of actinobacteria against Pantoea ananatis, the causal agent of maize white spot disease / Potencial de biocontrole de actinobactérias contra Pantoea ananatis, agente causal da doença mancha branca do milho

Pantoea ananatis is the causal agent of maize white spot, a foliar disease responsible for significant maize yield reduction worldwide, especially in Brazil. In general, the maize foliar diseases control involves the adoption of resistant genotypes and pesticides application. However, the use of agrochemicals can significantly cause increase production costs, damage to human health and negative environmental impacts. In this sense, the use of biological control agents has been considered among the most promising eco-friendly technologies for sustainable agriculture. Actinobacteria, particularly of Streptomyces genus, has been widely recognized as agroindustrially important microorganism due to its potential in producing diverse range of secondary metabolites, including antibiotics and enzymes. Thus, the aim of this work is to characterize and to evaluate the potential of soil actinobacteria for P. ananatis control. We observed that 59 actinobacteria strains (85%) exhibited proteolytic or chitinolytic activity. Only the strains Streptomyces pseudovenezuelae ACSL 470, that also exhibited high proteolytic activity, S. novaecaesareae ACSL 432 and S. laculatispora ACP 35 demonstrated high or moderate antagonist activity in vitro against P. ananatis. Temporal analysis of metabolites produced by these strains growth in different liquid media indicated greater antibacterial activity at 72 h. In this condition, chromatographic and mass spectrometry analysis revealed that S. pseudovenezuelae ACSL 470 strain produced neomycin, an aminoglycoside antibiotic that displayed high bactericidal activity in vitro against P. ananatis. This is the first report of actinobacteria acting as potential microbial antagonists for P. ananatis control. Further studies are needed to determine the control efficacy of maize white spot disease by Streptomyces strains or their metabolites in greenhouse and field conditions.

Pantoea ananatis é o agente causal da mancha branca do milho, doença foliar responsável pela redução significativa da produtividade do milho em todo o mundo, especialmente no Brasil. Em geral, o controle de doenças foliares do milho envolve a adoção de genótipos resistentes e a aplicação de agrotóxicos. No entanto, o uso de agroquímicos pode causar aumento significativo dos custos de produção, danos à saúde humana e impactos ambientais negativos. Nesse sentido, o uso de agentes de controle biológico tem sido considerado uma das tecnologias ecologicamente corretas mais promissoras para a agricultura sustentável. Actinobactérias, particularmente do gênero Streptomyces, têm sido amplamente reconhecidas como microrganismos de importância agroindustrial devido ao seu potencial de produção de diversos metabólitos secundários, incluindo antibióticos e enzimas. Assim, o objetivo deste trabalho é caracterizar e avaliar o potencial de actinobactérias do solo para o controle de P. ananatis. Observamos que 59 cepas de actinobactérias (85%) apresentaram atividade proteolítica ou quitinolítica. Apenas as cepas Streptomyces pseudovenezuelae ACSL 470, que também exibiu alta atividade proteolítica, S. novaecaesareae ACSL 432 e S. laculatispora ACP 35 demonstraram alta ou moderada atividade antagonista in vitro contra P. ananatis. A análise temporal do crescimento dos metabólitos produzidos por essas cepas em diferentes meios líquidos indicou maior atividade antibacteriana em 72 h. Nesta condição, análises cromatográficas e de espectrometria de massa revelaram que a cepa S. pseudovenezuelae ACSL 470 produziu neomicina, um antibiótico aminoglicosídeo que apresentou alta atividade bactericida in vitro contra P. ananatis. Este é o primeiro relato de actinobactérias atuando como potenciais antagonistas microbianos para o controle de P. ananatis. Mais estudos são necessários para determinar a eficácia do controle da doença da mancha branca do milho por cepas de Streptomyces ou seus metabólitos em condições de casa de vegetação e campo.

Mycoviruses infecting Colletotrichum spp: a comprehensive review / Micoviroses em Colletotrichum spp: uma revisão abrangente

Colletotrichum is one of the most economically important fungal genera, which affects a wide range of hosts, specifically tropical and subtropical crops. Thus far, there have been several records of mycovirus infection in Colletotrichum spp., primarily by viruses of the Partitiviridae family. There have also been records of infections by mycoviruses of the Chrysoviridae family. Mycoviruses are (+)ssRNA and dsRNA genome viruses, which may or may not be enveloped. To date, no mycovirus with a DNA genome has been isolated from Colletotrichum spp. Typically, mycoviruses cause latent infections, although hypo- and hypervirulence have also been reported in Colletotrichum spp. In addition to its effects on pathogenic behavior, mycovirus infection can lead to important physiological changes, such as altered morphological characteristics, reduced vegetative growth, and suppressed conidia production. Therefore, research on mycoviruses infecting phytopathogenic fungi can help develop alternative methods to chemical control, which can cause irreversible damage to humans and the environment. From an agricultural perspective, mycoviruses can contribute to sustainable agriculture as biological control agents via changes in fungal physiology, ultimately resulting in the total loss of or reduction in the virulence of these pathogens.

Colletotrichum é um dos gêneros fúngicos mais importantes economicamente, afetando uma ampla gama de hospedeiros, especialmente em cultivos tropicais e subtropicais. Atualmente já existem diversos registros de infecção por micovírus em Colletotrichum spp., sendo a maioria dos já identificados classificados na família Partitiviridae. Ocorrem registros também de micovírus pertencentes à família Chrysoviridae. Compreendem vírus de genoma de (+)ssRNA e dsRNA que podem ser ou não envelopados. Ainda não foram identificados micovírus com genoma de DNA isolados de Colletotrichum. A infecção por micovírus pode ocorrer de forma latente, mas já foi observado em Colletotrichum spp. o fenômeno de hipo e hipervirulência. Além de influenciar no comportamento patogênico, a infecção pode causar mudanças fisiológicas importantes como alterações das características morfológicas, redução do crescimento vegetativo e redução na produção de conídios. O estudo com micovírus em fungos fitopatogênicos traz uma alternativa ao controle químico que é um método capaz de causar danos irreversíveis ao homem e o meio ambiente. Sob a perspectiva agrícola, os micovírus podem contribuir para agricultura sustentável como agentes de controle biológico. Isso porque obsevam-se mudanças importantes na fisiologia fúngica resultando na perda total ou redução da virulência desses patógenos.

Mycoviruses infecting Colletotrichum spp: a comprehensive review / Micoviroses em Colletotrichum spp: uma revisão abrangente

Colletotrichum is one of the most economically important fungal genera, which affects a wide range of hosts, specifically tropical and subtropical crops. Thus far, there have been several records of mycovirus infection in Colletotrichum spp., primarily by viruses of the Partitiviridae family. There have also been records of infections by mycoviruses of the Chrysoviridae family. Mycoviruses are (+)ssRNA and dsRNA genome viruses, which may or may not be enveloped. To date, no mycovirus with a DNA genome has been isolated from Colletotrichum spp. Typically, mycoviruses cause latent infections, although hypo- and hypervirulence have also been reported in Colletotrichum spp. In addition to its effects on pathogenic behavior, mycovirus infection can lead to important physiological changes, such as altered morphological characteristics, reduced vegetative growth, and suppressed conidia production. Therefore, research on mycoviruses infecting phytopathogenic fungi can help develop alternative methods to chemical control, which can cause irreversible damage to humans and the environment. From an agricultural perspective, mycoviruses can contribute to sustainable agriculture as biological control agents via changes in fungal physiology, ultimately resulting in the total loss of or reduction in the virulence of these pathogens.(AU)

Colletotrichum é um dos gêneros fúngicos mais importantes economicamente, afetando uma ampla gama de hospedeiros, especialmente em cultivos tropicais e subtropicais. Atualmente já existem diversos registros de infecção por micovírus em Colletotrichum spp., sendo a maioria dos já identificados classificados na família Partitiviridae. Ocorrem registros também de micovírus pertencentes à família Chrysoviridae. Compreendem vírus de genoma de (+)ssRNA e dsRNA que podem ser ou não envelopados. Ainda não foram identificados micovírus com genoma de DNA isolados de Colletotrichum. A infecção por micovírus pode ocorrer de forma latente, mas já foi observado em Colletotrichum spp. o fenômeno de hipo e hipervirulência. Além de influenciar no comportamento patogênico, a infecção pode causar mudanças fisiológicas importantes como alterações das características morfológicas, redução do crescimento vegetativo e redução na produção de conídios. O estudo com micovírus em fungos fitopatogênicos traz uma alternativa ao controle químico que é um método capaz de causar danos irreversíveis ao homem e o meio ambiente. Sob a perspectiva agrícola, os micovírus podem contribuir para agricultura sustentável como agentes de controle biológico. Isso porque obsevam-se mudanças importantes na fisiologia fúngica resultando na perda total ou redução da virulência desses patógenos.(AU)

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti / Identificação de espécies de Fusarium entomopatogênicas localmente isoladas do solo da Floresta de Changa Manga, Paquistão e avaliação de sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti

Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.

A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade [...].

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti / Identificação de espécies de Fusarium entomopatogênicas localmente isoladas do solo da Floresta de Changa Manga, Paquistão e avaliação de sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti

Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.(AU)

A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade [...].(AU)

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti

Abstract Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x 108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.

Resumo A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou-se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade larvicida do que F. proliferatum contra larvas de A. aegypti.

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti / Identificação de espécies de Fusarium entomopatogênicas localmente isoladas do solo da Floresta de Changa Manga, Paquistão e avaliação de sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti

Abstract Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x 108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.

Resumo A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou-se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade larvicida do que F. proliferatum contra larvas de A. aegypti.

Microorganisms from corn stigma with biocontrol potential of Fusarium verticillioides / Microrganismos do estigma do milho com potencial de biocontrole de Fusarium verticillioides

The mycotoxigenic fungus Fusarium verticillioides is the primary maize pathogen and causes the maize stalk and ear rot diseases with significant economic losses. Furthermore, the excessive use of fungicides to control F. verticillioides constitutes threats to the environment and human health. Thus, sustainable alternatives such as biological control are needed to minimize the hazards associated with the current method. Although much is known about the vulnerability of the maize silks as a gateway for several fungal pathogens invading the developing grains, studies on the chemical properties of silk extracts and their resident microbiota are scarce. This study isolated and characterized bacteria and fungi that colonize the maize stigma to assess new potential biocontrol agents. The samples were collected from maize fields in the Brazilian localities of Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR, and Goiânia-GO. One hundred sixty-seven microorganisms were isolated, 46% endophytic and 54% epiphytic. First, the antagonist activity was evaluated by the agar disc diffusion method performed in triplicate, and 83% of the isolates showed antagonist activity against F. verticillioides. Then, the 42 most efficient isolates were identified based on the partial sequencing of the bacterial 16S rRNA gene and fungi ITS region. The bacteria belong to the genera Bacillus (57.1%), Burkholderia (23.8%), Achromobacter (7.1%), Pseudomonas (2.4%), and Serratia (2.4%), while the fungi are Penicillium (2.4%), Candida (2.4), and Aspergillus (2.4%). The results showed that microorganisms from maize stigma might represent new promising agents for F. verticillioides control.

O fungo micotoxigênico Fusarium verticillioides é o principal patógeno do milho e causa doenças do colmo e da podridão da espiga com perdas econômicas significativas. Além disso, o uso excessivo de fungicidas no controle de F. verticillioides constitui uma ameaça ao meio ambiente e à saúde humana. Assim, alternativas sustentáveis, como o controle biológico, são necessárias para minimizar os riscos associados ao método atual. Este estudo isolou e caracterizou bactérias e fungos que colonizam o estigma do milho para avaliar novos agentes de biocontrole em potencial. As amostras foram coletadas em campos de milho nas localidades brasileiras de Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR e Goiânia-GO. Cento e sessenta e sete microrganismos foram isolados, 46% endofíticos e 54% epifíticos. O teste de antagonismo empregando a técnica de disco de difusão em meio sólido, mostrou que 83% dos isolados apresentaram atividade antagonista contra F. verticillioides. Em seguida, 42 isolados mais eficientes foram identificados a partir do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA bacteriano e da região ITS de fungos. Os isolados bacterianos pertencem ao gênero Bacillus (57,1%), Burkholderia (23,8%), Achromobacter (7,1%), Pseudomonas (2,4%) e Serratia (2,4%), enquanto os fungos são Penicillium (2,4%), Candida (2.4), e Aspergillus (2,4%). Os resultados mostraram que microrganismos do estigma do milho podem representar novos agentes promissores para o controle de F. verticillioides.

Can Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner replaces Trichogramma galloi Zucchi for Diatraea saccharalis (Fabricius) control?

Studies on aggressiveness of parasitoids, as assessed by their parasitism against pests, used in biological-control programs are highly important to select the most suitable species and/or strain to control insect pests. The present study investigated whether the egg parasitoid Trichogramma galloi Zucchi, an efficient control agent for sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius) in Brazil, could be replaced by Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, a parasitoid easier to mass-produce, since it has been found parasitizing D. saccharalis eggs in the warmest region of Brazil and Argentina. Three strains of the genus Trichogramma were compared: T. atopovirilia (ATP strain) reared on a factitious host Anagasta kuehniella (Zeller); T. atopovirilia isoline ATP-I, reared on D. saccharalis eggs for six generations; and T. galloi, reared on A. kuehniella eggs. We measured parasitism of each strain for 72 h and for the entire life span, parasitism rate per cluster of D. saccharalis eggs, number of parasitoids emerged (parasitism viability), and parasitoid life span. The results confirmed that T. galloi is the best species for D. saccharalis control, showing higher control potential, since parasitism and emergence rate were higher for this species. Although T. atopovirilia ATP-I performed reliably in all parameters, T. galloi exceeded and was the most indicated for mass-rearing in control programs for sugarcane borer.

Trichoderma: biological control efficiency and perspectives for the Brazilian Midwest states and Tocantins / Trichoderma: eficiência no controle biológico e perspectivas para os estados do Centro-Oeste brasileiro e Tocantins

Brazil is one of the world leaders in the agribusiness sector tending to directly influence a growing dependence on imported inputs, specifically synthetic agrochemicals. At the state level, in 2013, Tocantins stood out in first place in the ranking of agrochemical consumers, however, these products can cause several problems, such as poisoning to humans, environmental contamination, and increased resistance to phytopathogens. Biological control is an alternative to the use of agrochemicals towards eliminating pests naturally by using living organisms called Biological Control Agents (BCA). Currently, fungi of the Trichoderma genus are some of the most used organisms in biological pest control for their relevant characteristics that favor them in terms of survival in the environment, such as high capacity to adapt to ecological conditions, potential to colonize the rhizosphere of plants, mycoparasitism, production of volatile and non-volatile metabolites. In addition, it works on plant growth and productivity. In general, the use of Trichoderma favors the control of soil pathogens, such as Rhizoctonia, Pythium, Sclerotinia, and nematodes. Thus, this review aims to demonstrate the importance of using Trichoderma in biological control, as well as to present an overview and perspectives of research developed by respondents in the Brazilian Midwest region and Tocantins state.

O Brasil é um dos líderes mundiais no setor do agronegócio e essa liderança tende a impactar diretamente numa dependência crescente de insumos importados, especificamente, agroquímicos sintéticos. A nível de estado, em 2013, o Tocantins se destacava em primeiro lugar no ranking de consumidores de agroquímicos, contudo, esses produtos podem causar diversos problemas, como intoxicação ao homem, contaminação do ambiente e aumento da resistência de fitopatógenos. Um método alternativo ao uso de agroquímicos é o controle biológico, o qual busca a eliminação de pragas de forma natural, utilizando-se de organismos vivos chamados de Agentes de Controle Biológico (ACB). Atualmente, entre os organismos mais usados no controle biológico de pragas estão os fungos do gênero Trichoderma, isto, por possuir algumas características relevantes que os favorecem em termos de sobrevivência no ambiente, tais como: a alta capacidade de adaptação às condições ecológicas, potencial em colonizar a rizosfera das plantas, micoparasitismo, produção de metabólitos voláteis e não voláteis. Além disso, atua no crescimento e produtividade das plantas. Geralmente, o uso de Trichoderma favorece o controle de patógenos do solo, como: Rhizoctonia, Pythium, Sclerotinia e nematoides. Assim, a presente revisão visa demostrar a importância da utilização do Trichoderma no controle biológico, assim como apresentar um panorama e perspectivas das pesquisas desenvolvidas por pesquisados da região Centro-Oeste brasileiro e no estado do Tocantins.

Parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides / Capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após ingestão de pesticidas biológicos

Augmentative biological control (ABC) of insect pests is an environmentally sustainable alternative to synthetic insecticides. By performing BC, more than one control agent can be used for the same insect pest that is in different stages of its life cycle or for pests that simultaneously occur in the area. However, this relationship requires biosecurity for the control agents employed. The aim of this study was to evaluate the parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides. The entomopathogens, Baculovirus Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis (Bt) var. kurstaki, Bt var. aizawai, Beauveria bassiana, and Metarhizium anisopliae; the microbiological fungicide, Trichoderma harzianum, at concentrations recommended by the manufacturer; and a negative control (pure honey) were employed in this study. Further, forced ingestion was adopted, with the treatments mixed in honey and offered as food at two dilutions (one-part product: one-part honey and one-part product: nine parts honey). Each treatment consisted of 20 individual females for each parasitoid (T. pretiosum or T. remus). The following parameters were evaluated: female longevity, number of parasitized eggs, egg viability, and number of females and males to determine the sex ratio. For T. pretiosum, B. bassiana (1 × 1013 viable conidia 100 L H2O-1), and T. harzianum (5 × 1012 viable conidia 100 L H2O-1), the longevity of their females was reduced by the 1:1 mixture; however, this mixture did not interfere with other parameters and other biological pesticides compared to the respective controls of both dilutions. The biological pesticides did not negatively influence the parameters evaluated for T. remus. The tested products had low toxicity to the egg parasitoids, T. pretiosum and T. remus. Overall, more work is still required with parasitoids in other stages of development and with other exposure methods to confirm the selectivity of products for egg parasitoids to recommend its combined use in the field.(AU)

O controle biológico aumentativo (CBA) de insetos-praga é uma alternativa ambientalmente sustentável em relação aos inseticidas sintéticos. Com a utilização do CBA, mais de um agente de controle pode ser utilizado para um mesmo inseto-praga que se encontra em diferentes estágios do seu ciclo de vida ou para pragas que ocorrem simultaneamente na área. No entanto, essa relação necessita de biossegurança para os agentes de controle envolvidos. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após a ingestão de pesticidas biológicos. Os entomopatógenos Baculovírus Anticarsia gemmatalis nucleopoliedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis var. kurstaki, Bacillus thuringiensis var. aizawai, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, o fungicida microbiológico Trichoderma harzianum nas concentrações recomendadas pelos fabricantes e um controle negativo (mel puro) foram utilizados nos bioensaios. A metodologia empregada foi de ingestão forçada, com os tratamentos misturados ao mel e oferecidos como alimento em duas diluições diferentes (1 parte do produto:1 parte de mel e 1 parte do produto:9 partes de mel). Cada tratamento constou de 20 fêmeas individualizadas de cada parasitoide (T. pretiosum ou T. remus). Os parâmetros avaliados foram: longevidade das fêmeas, número de ovos parasitados, viabilidade dos ovos e número de fêmeas e machos para determinação da razão sexual. Para T. pretiosum, B. bassiana (1×1013 conídios viáveis 100L H2O-1) e T. harzianum (5×1012 conídios viáveis 100L H2O-1) reduziram a longevidade das fêmeas na mistura 1:1, porém não interferiram nos demais parâmetros avaliados, bem como os demais produtos microbiológicos comerciais avaliados, quando comparados às respectivas testemunhas de ambas as diluições. Os pesticidas biológicos não influenciaram negativamente nos parâmetros avaliados de T. remus. Os produtos testados apresentam baixa toxicidade aos parasitoides de ovos T. pretiosum e T. remus. Ainda há necessidade de mais trabalhos com outros estágios de desenvolvimento dos parasitoides e outros métodos de exposição para confirmar a seletividade dos produtos aos parasitoides de ovos, para recomendar o uso conjunto destes no campo.(AU)

Estudo de métodos naturais para redução de doenças fúngicas em sementes nativas da região Amazônica / Study of natural methods for reducing fungal diseases in native seeds in the Amazon region

Existe uma preocupação na produção de alimentos com a segurança sanitária desde o processo de cultivo até a sua expedição aos centros comerciais. Uma das maiores contaminações em sementes por suas características físicas e químicas, é a contaminação fúngica devida à acidez e umidade dos frutos. As doenças fúngicas entre elas, antracnose, vassoura de bruxa e podridão parda são consideradas importante doenças em pós colheita, ocorrendo, principalmente, sob condições de alta umidade relativa do ar e temperaturas elevadas (26ºC a 28ºC). Dentre as sementes da região Amazônica, destacam-se sementes de (cacau- Theobroma cacao L., pupunha- Bactris gasipaes, tucumã da Amazonas-Astrocaryum aculeatum), que apresentam problemas de contaminação fúngica durante o sistema de cultivo. Métodos de biocontroles com ação antimicrobiana: bactérias endofíticas, rizobactérias e fungo Trichoderma ssp, entre outros estão sendo estudados para a redução destas contaminações fúngicas em estudos in vitro e no campo. O objetivo deste trabalho é apresentar uma revisão bibliográfica sobre a utilização de métodos de biocontrole como uma alternativa promissora no manejo de doenças de plantas na fase de pós-colheita, com excelentes resultados em culturas de grande importância econômica. Assim novas alternativas ecologicamente sustentáveis demonstram a possibilidade de os produtos estudados serem utilizados no manejo da antracnose na pós-colheita.(AU)

There is a concern in food production with health security from cultivation process to its dispatch to redistribution centers. One of the biggest contaminations in seeds due to their physical and chemical characteristics, is the fungal contamination due to the acidity and humidity of the fruits. Fungal diseases including anthracnose, bruca's broom and brownrot are considered important diseases in post-harvest, occurring mainly under conditions of high relative humidity and high temperatures (26ºC to 28ºC). Among the seeds of the Amazon region, seeds of de (cacau- Theobroma cacao L., pupunha- Bactris gasipaes, tucumã da Amazonas- Astrocaryum aculeatum ), that present problems fungals contamination during in their growing cultures sistems. Biocontrol methods with antimicrobial action: endophytic bacteria, rhizobacteria and the fungus Trichoderma ssp, among others, are being studied to reduce these fungal contaminations in in vitro and field studies. The objective of this work is to present a bibliographic review on the use of biocontrol methods as an alternative that is promising in the management of plant diseases in the post-harvest phase, with excellent results in crops of great economic importance. Thus, new ecologically sustainable alternatives demonstrate the possibility of the studied products to be used in the management of anthracnose in the post-harvest period.(AU)

Reproductive alterations of Biomphalaria glabrata (Say, 1818) infected with Angiostrongylus cantonensis (Chen, 1935) and exposed to Euphorbia milii var. hislopii latex / Alterações na atividade reprodutiva de Biomphalaria glabrata (Say, 1818) infectada com Angiostrongylus cantonensis (Chen, 1935) e exposta ao látex de Euphorbia milii var. hislopii

The natural phytochemical latex of Euphorbia milii var. hislopii is one of the most promising natural molluscicides for the control of Biomphalaria glabrata, and has been widely studied under laboratory conditions for selective control of schistosomiasis transmission. However, the effect of this product on B. glabrata infected by other helminths had not yet been investigated. The present study reports evaluation of the effect of E. milii var. hislopii latex on the survival and reproductive activity of B. glabrata infected by Angiostrongylus cantonensis. For this purpose, the following groups were formed: control (C), exposed (E), infected (I) and infected and exposed for different time intervals (1 day - I+E-1D, 7 days - I+E-7D, 14 days - I+E-14D, 21 days - I+E-21D and 28 days - I+E-28D). The experimental infection was performed with L1 larvae of A. cantonensis and exposure to 0.08 mg/L (LC50) of E. milii latex for a period of 24 hours. We analyzed the effects of E. milii latex on the survival of snails during four weeks, reproductive parameters and possible histophysiopathological changes in the gonad and albumen gland of the snails. Regarding survival, there was reduction of more than 50% in the groups exposed to latex (E and I + E) compared to the control group. As for the number of ovigerous masses, eggs, and average number of hatched snails, significant increases were observed in the I+E-1D group at the 4th week compared to the control group and the other weeks in the same group. Angiostrongylus cantonensis larvae were observed in the gonad and albumen gland from day 21 and 28 of infection in groups I and I+E, respectively, with granuloma-like formation. At these observation periods and in these groups, an increase in galactogen was observed in the albumen gland, which influenced egg laying, suggesting the existence of a fecundity compensation mechanism phenomenon. It was possible to conclude that both stressors - A. cantonensis infection and exposure to E. milii latex - directly influenced the survival and reproductive parameters of B. glabrata.

O fitoquímico natural látex de Euphorbia milii var. hislopii é um dos mais promissores moluscicidas naturais para o controle de Biomphalaria glabrata, tendo sido amplamente estudado em condições laboratoriais como controle seletivo da transmissão da esquistossomose. No entanto, o efeito deste produto em B. glabrata infectada por outro helminto, ainda não tinha sido investigado. O presente trabalho tem por objetivo avaliar o efeito do látex de E. milii var. hislopii na sobrevivência e atividade reprodutiva de B. glabrata infectada por Angiostrongylus cantonensis. Para isso, foram formados os seguintes grupos: controle (C), exposto (E), infectado (I) e infectado e exposto em diferentes intervalos de tempo de infecção (1 dia - I+E-1D, 7 dias - I+E-7D, 14 dias - I+E-14D, 21 dias - I+E-21D e 28 dias - I+E-28D). A infecção experimental foi realizada com larvas L1 de A. cantonensis e a exposição com 0,08 mg/L (LC50) do látex de E. milii por um período de 24 horas. Foram analisados os efeitos do látex de E. milii quanto à sobrevivência dos moluscos ao longo de quatro semanas, aos parâmetros reprodutivos e as possíveis alterações histofisiopatológicas na gônada e na glândula de albúmen dos moluscos analisados. Em relação à sobrevivência foi possível observar redução de mais de 50% nos grupos expostos ao látex (E e I + E) em comparação ao grupo controle. Quanto ao número de massas ovígeras, ovos e número médio de moluscos eclodidos pode-se observar um aumento significativo no grupo I+E-1D na 4ª semana em comparação ao grupo controle e as demais semanas no mesmo grupo. Larvas de A. cantonensis foram observadas na glândula e na glândula de albúmen, a partir dos 21º dias e 28º dia de infecção nos grupos I e I+E, respectivamente, com a formação de granuloma-like. Nesses períodos de observação e nesses grupos pode-se observar na glândula de albúmen, um aumento do conteúdo de galactogênio, o que influenciou a postura dos ovos, sugerindo um fenômeno de compensação da fecundidade. Foi possível concluir que ambos agentes estressores, infecção por A. cantonensis e exposição ao látex de E. milii influenciou diretamente a sobrevivência e os parâmetros reprodutivos de B. glabrata.

Nitrogen-fixing Cyanothece sp. as a mixotroph and silver nanoparticle synthesizer: a multitasking exceptional cyanobacterium / Cyanothece sp. fixadora de nitrogênio como um sintetizador de nanopartículas mixotrófico e prata: uma cianobactéria excepcional multitarefa

To investigate the best carbon source for mixotrophic growth of Cyanothece sp. This cyanobacterium is also used as a source of biogenic silver nanoparticles. The study also investigates the antimicrobial activity of nanoparticles (both gold and silver) biosynthesized by this cyanobacterium. Those particles are tested solely and in combination as antimicrobial agents against two farm bacteria commonly found in Al Ahsa. Soil extract was prepared from pesticide-free soil whereas dextrose was prepared in 6 mM concentration and the cyanobacterial culture cell density was determined after two weeks. Cultures of Cyanothece sp. were incubated with silver nitrate until turning brown. The external solution of culture was analyzed using chemical analyses including UV- visible and FTIR to confirm nano silver formation. Previously-biosynthesized nano gold particles by Cyanothece sp. were used solely and in combination with newly biosynthesized nano silver particles for antimicrobial bioassay against the two farm bacterial pathogens. The best mixotrophic cyanobacterial growth was obtained for soil extract followed by dextrose which were significantly different from control. The synthesis of nanoparticles using this cyanobacterium was confirmed using UV-visible light spectrophotometry which detected the characteristic surface plasmon resonance peak in the range of 410-450 nm and the FTIR spectroscopy which showed the characteristic silver nanoparticles peak at 3.297 cm-1 which overlaps with -OH- in addition to the other functional groups associated with nano silver particles detected at 2,927, 1,631 and 1,383 cm−1. Silver nanoparticles showed the strong antimicrobial effect against both pathogens Staphylococcus aureus (MRSA) and Staphylococcus warneri with inhibition zone diameter 1.3 cm for both followed by the combination of silver and gold nanoparticles. Soil extract is a natural medium rich in all types of organic and inorganic nutrients which enhance algal mixotrophic growth. Biosynthesized silver nanoparticles showed the strongest antibacterial action against both pathogens most likely due to its ease of penetration, interaction with cellular components, generation of reactive oxygen species and induction of oxidative stress leading to bacterial death.

Investigar a melhor fonte de carbono para o crescimento mixotrófico de Cyanothece sp. Esta cianobactéria também é utilizada como fonte de nanopartículas de prata biogênicas. O estudo também investiga a atividade antimicrobiana de nanopartículas (ouro e prata) biossintetizadas por essa cianobactéria. Essas partículas são testadas isoladamente e em combinação como agentes antimicrobianos contra duas bactérias agrícolas comumente encontradas em Al Ahsa. O extrato do solo foi preparado a partir de solo livre de pesticidas, enquanto a dextrose foi preparada na concentração de 6 mM e a densidade celular da cultura de cianobactérias foi determinada após duas semanas. Culturas de Cyanothece sp. foram incubadas com nitrato de prata até ficarem marrons. A solução externa de cultura foi analisada usando análises químicas incluindo UV-visível e FTIR para confirmar a formação de nano prata. Nano partículas de ouro previamente biossintetizadas por Cyanothece sp. foram usados ​​apenas e em combinação com nano partículas de prata recém-biossintetizadas para bioensaio antimicrobiano contra os dois patógenos bacterianos da fazenda. O melhor crescimento de cianobactérias mixotrópicas foi obtido para o extrato de solo seguido pela dextrose que foram significativamente diferentes do controle. A síntese de nanopartículas usando esta cianobactéria foi confirmada por espectrofotometria de luz UV-visível que detectou o pico característico de ressonância plasmônica de superfície na faixa de 410-450 nm e a espectroscopia FTIR que mostrou as nanopartículas de prata características - pico em 3.297 cm-1 que se sobrepõe com -OH- além dos outros grupos funcionais associados a nanopartículas de prata detectadas em 2.927, 1.631 e 1.383 cm−1. As nanopartículas de prata mostraram forte efeito antimicrobiano contra ambos os patógenos (Staphylococcus aureus (MRSA) e Staphylococcus warneri com diâmetro de zona de inibição de 1,3 cm para ambos, seguido pela combinação de nanopartículas de prata e ouro. O extrato do solo é um meio natural rico em todos os tipos de nutrientes orgânicos e inorgânicos que favorecem o crescimento mixotrófico de algas. As nanopartículas de prata biossintetizadas mostraram a ação antibacteriana mais forte contra ambos os patógenos, provavelmente devido à sua facilidade de penetração, interação com componentes celulares, geração de espécies reativas de oxigênio e indução de estresse oxidativo levando à morte bacteriana.

Production of potato seed tubers under the effect of Trichoderma sp. and rhizobacteria in greenhouse conditions / Produção de tubérculos de batata-semente sob efeito de Trichoderma sp. e rizobactérias em casa de vegetação

Potato (Solanum tuberosum L.) is one of the main crops in the Andean region and due to environmental aspects, the use of biocontrol agents is considered a safe way to produce potato seed tubers.The objective of the study was to evaluate potato inoculation with Trichoderma sp. as a matrix and rhizobacteria Bacillus simplex and Azotobacter sp. on the growth of potato seedlings from in vitro culture, for the production of seed tubers in a greenhouse. The inoculation of microorganisms was carried out in pots, using five potato genotypes for processing. The inoculation treatments were: control, Trichoderma sp., Trichoderma sp. + Azotobacter sp., Trichoderma sp. + Bacillus simplex, Trichoderma sp. + B. simplex + Azotobacter sp. The potato genotypes were cv. Unica (CIP392797.22), cv. Bicentenaria, the advanced clones CIP 396311.1, CIP 399101.1, and the experimental clone UH-09 from the Universidad Nacional José Faustino Sánchez Carrión. A completely randomized design was used, under a factorial arrangement and comparisons between treatments were made at p<0.05. All inoculant treatments exceeded the control in number and weight of tubers per plant as well as in tuber size. Inoculations of Trichoderma sp. alone or with Azotobacter sp. increased plant height, number of leaves per plant and vegetative uniformity; inoculations with the Trichoderma sp. + B. simplex + Azotobacter sp. consortium, improved the dry weight of the foliage, number of shoots per plant and vegetative vigor. There were significant interactions between potato genotypes and inoculant treatments for plant uniformity, vegetative vigor, and the foliage's dry weight. Coinoculation with Trichoderma sp. and some bacterial strains promote the growth of in vitro potato seedlings, increasing the size and weight of the seed tubers and plant biomass, indicating an interrelation between fungi and bacteria that influence the production of potatoes in a greenhouse.(AU)

A batata (Solanum tuberosum L.) é uma das principais culturas da região andina e devido aos aspectos ambientais, o uso de agentes de biocontrole é considerado uma forma segura de produzir tubérculos de batata-semente. O objetivo do trabalho foi avaliar a inoculação de batata com Trichoderma sp. como matriz e rizobactérias Bacillus simplex e Azotobacter sp. sobre o crescimento de mudas de batata provenientes de cultivo in vitro, para produção de tubérculos-semente em casa de vegetação. A inoculação dos microrganismos foi realizada em vasos, utilizando-se cinco genótipos de batata para processamento. Os tratamentos de inoculação foram: testemunha, Trichoderma sp., Trichoderma sp. + Azotobacter sp., Trichoderma sp. + B.simplex, Trichoderma sp. + B.simplex + Azotobacter sp. Os genótipos de batata foram cv. Única (CIP392797.22), cv. Bicentenaria, os clones avançados CIP396311.1, CIP399101.1, e o clone experimental UH-9 da Universidade Nacional José Faustino Sánchez Carrión. O delineamento foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial e as comparações entre os tratamentos foram feitas com p<0,05. Todos os tratamentos com inoculantes excederam o controle em número e peso de tubérculos por planta, bem como em tamanho de tubérculo. Inoculações de Trichoderma sp. sozinho ou com Azotobactersp. aumento da altura das plantas, número de folhas por planta e uniformidade vegetativa; inoculações com o Trichoderma sp. + B.simplex + Azotobacter sp. consorcio, melhorou a massa seca da folhagem, número de brotações por planta e vigor vegetativo. Houve interações significativas entre genótipos de batata e tratamentos inoculantes para uniformidade e vigor vegetativo, e para a massa seca da folhagem. Coinoculação com Trichoderma sp. e algumas cepas bacterianas promovem o crescimento de mudas de batata in vitro, aumentando o tamanho e o peso dos tubérculos-semente e da biomassa vegetal, indicando que existe inter-relação entre fungos e bactérias que influenciam a produção de batata em casa de vegetação.(AU)

Sequence analysis of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) region of rDNA for identifying Trichogramma species and evaluating genetic diversity / Análise de sequência do rDNA da região espaçadora do transcrito interno 2 (ITS2) para identificar espécies de Trichogramma e avaliar a diversidade genética

Species of Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammtidae) are frequently used as biological control agents against Lepidoptera, but practical application of these egg endoparasitoids are complicated because of their complex taxonomy. This study aimed to compare sequences of internal transcribed spacer regions of ribosomal DNA (ITS2-rDNA) of Trichogramma accessions with those deposited in GenBank in order to access the reliability of the ITS2 as a barcode for discriminating species and evaluating the genetic diversity. ITS2-rDNA sequences obtained from seventeen specimens of Trichogramma confirmed previous identifications based on morphological characteristics. Multiple sequence alignment revealed the existence of highly conserved regions in ITS2 sequences while the neighbour-joining dendrogram indicated that the specimens formed three clusters comprising T. manicobai and T. marandobai (group I), T. galloi (group II) and T. pretiosum (group III). The ITS2 marker was shown to be a powerful DNA barcode for discriminating Trichogramma species and could be used to complement the morphological approach.(AU)

Espécies de Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) são freqüentemente usadas como agentes de controle biológico contra Lepidoptera, esses endoparasitóides de ovos apresentam taxonomia complexa, o que dificulta sua aplicação prática. Este estudo teve como objetivo comparar seqüências de regiões espaçadoras internas transcritas de DNA ribossômico (ITS2-rDNA) de acessos de Trichogramma com aquelas depositadas no GenBank, a fim de avaliar a confiabilidade do ITS2 barcode para discriminar espécies e avaliar a diversidade genética. As seqüências de ITS2-rDNA obtidas de dezessete espécimes de Trichogramma confirmaram identidades anteriores com base em características morfológicas. O alinhamento de múltiplas sequências revelou a existência de regiões altamente conservadas nas sequências ITS2, enquanto o dendrograma indicou que os espécimes formavam três grupos compreendendo T. manicobai e T. marandobai (grupo I), T. galloi (grupo II) e T. pretiosum (grupo III). O marcador ITS2 mostrou ser um poderoso DNA barcode para discriminar espécies de Trichogramma podendo ser usado como complemento da abordagem morfológica.(AU)

First report of Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) damaging Physalis peruviana (L) in Brazil / Primeiro relato de Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) causando dano em Physalis peruviana (L) no Brasil

Increased production of the Cape gooseberry (Physalis peruviana L.) in Brazil has given rise to interest in identifying the phytophagous species that might damage this crop to inform preventive control and integrated pest management strategies. In this study, we report the occurrence and describe the damage that larvae and adults of Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) cause in P. peruviana. The number of L. bilineata individuals, both larvae and adults, significantly affected the total consumption of P. peruviana leaves. We also report, for the first time, three natural enemies, including a fungus, a fly, and an ant, which are associated with this pest in Brazil and may play a role in biological control strategies.

Fisális, Physalis peruviana L., é uma cultura em expansão no Brasil, dessa forma a identificação de espécies fitófagas que causam danos nesta cultura é importante para desenvolver controle preventivo e estratégias para o Manejo Integrado de Pragas. Neste estudo, relatamos a ocorrência de Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) no cultivo de P. peruviana e descrevemos os danos causados por suas larvas e adultos. Observou-se que o número de indivíduos de L. bilineata, tanto larvas como adultos, influenciaram significativamente o consumo total de folhas de P. peruviana. Além disso, relatamos pela primeira vez a presença de três inimigos naturais, incluindo um fungo, uma mosca e uma formiga, associados a esta praga no Brasil que poderiam ser utilizados como agentes de controle biológico.

First report of Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) damaging Physalis peruviana (L) in Brazil / Primeiro relato de Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) causando dano em Physalis peruviana (L) no Brasil

Increased production of the Cape gooseberry (Physalis peruviana L.) in Brazil has given rise to interest in identifying the phytophagous species that might damage this crop to inform preventive control and integrated pest management strategies. In this study, we report the occurrence and describe the damage that larvae and adults of Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) cause in P. peruviana. The number of L. bilineata individuals, both larvae and adults, significantly affected the total consumption of P. peruviana leaves. We also report, for the first time, three natural enemies, including a fungus, a fly, and an ant, which are associated with this pest in Brazil and may play a role in biological control strategies.(AU)

Fisális, Physalis peruviana L., é uma cultura em expansão no Brasil, dessa forma a identificação de espécies fitófagas que causam danos nesta cultura é importante para desenvolver controle preventivo e estratégias para o Manejo Integrado de Pragas. Neste estudo, relatamos a ocorrência de Lema bilineata Germar (Coleoptera: Chrysomelidae) no cultivo de P. peruviana e descrevemos os danos causados por suas larvas e adultos. Observou-se que o número de indivíduos de L. bilineata, tanto larvas como adultos, influenciaram significativamente o consumo total de folhas de P. peruviana. Além disso, relatamos pela primeira vez a presença de três inimigos naturais, incluindo um fungo, uma mosca e uma formiga, associados a esta praga no Brasil que poderiam ser utilizados como agentes de controle biológico.(AU)