Detection of Leishmania infantum amastigotes in neutrophil from peripheral blood in a naturally infected dog / Detecção de formas amastigotas de Leishmania infantum em neutrófilos do sangue periférico de cão naturalmente infectado

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease of high lethality caused by Leishmania infantum in the Americas. In the infected dog, the amastigotes are scarce in blood, especially in the late phase of the disease. This study aimed to report a rare case of L. infantum amastigotes found in neutrophils from peripheral blood of a naturally infected dog in terminal phase of CVL, also describing its clinical status before and after treatment with miltefosine 2%. The dog, which presented as polysymptomatic and with classical signs and symptoms of CVL was submitted to the following tests: Dual Path Platform (DPP) rapid test, ELISA and parasitological examination of peripheral blood. Hematological and biochemical parameters were obtained before and after treatment. All diagnostic tests were positive for CVL. The identification of L. infantum amastigotes inside neutrophils from peripheral blood was confirmed through microscopy, and the species was confirmed by molecular analysis. At the end of the treatment, peripheral parasitemia was not detected, and improvements were observed in clinical and laboratorial parameters. Finally, this atypical finding can be used as example to raise discussions about the real immunological role of neutrophils in late phases of CVL and its clinical/therapeutic implications.(AU)

A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença zoonótica de alta letalidade causada por Leishmania infantum nas Américas. No cão infectado, as formas amastigotas são escassas no sangue, principalmente na fase tardia da doença. Este estudo teve como objetivo relatar um caso raro de amastigotas de L. infantum encontradas em neutrófilos do sangue periférico de um cão naturalmente infectado e terminal da LVC, descrevendo também seu estado clínico antes e após o tratamento com miltefosina a 2%. O cão, que se apresentou como polissintomático e com sinais e sintomas clássicos da LVC foi submetido aos seguintes testes: teste rápido Dual Path Platform (DPP), ELISA e exame parasitológico de sangue periférico. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos foram obtidos antes e após o tratamento. Todos os testes diagnósticos foram positivos para LVC. A identificação de formas amastigotas de L. infantum, dentro de neutrófilos do sangue periférico foi confirmada por microscopia, e a espécie foi confirmada por análise molecular. Ao final do tratamento, não foi detectada parasitemia periférica, observando-se melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais. Por fim, esse achado atípico pode ser usado como exemplo para levantar discussões sobre o real papel imunológico dos neutrófilos nas fases tardias da LVC e suas implicações clínicas/terapêuticas.(AU)

Detection of Leishmania infantum amastigotes in neutrophil from peripheral blood in a naturally infected dog / Detecção de formas amastigotas de Leishmania infantum em neutrófilos do sangue periférico de cão naturalmente infectado

Abstract Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease of high lethality caused by Leishmania infantum in the Americas. In the infected dog, the amastigotes are scarce in blood, especially in the late phase of the disease. This study aimed to report a rare case of L. infantum amastigotes found in neutrophils from peripheral blood of a naturally infected dog in terminal phase of CVL, also describing its clinical status before and after treatment with miltefosine 2%. The dog, which presented as polysymptomatic and with classical signs and symptoms of CVL was submitted to the following tests: Dual Path Platform (DPP) rapid test, ELISA and parasitological examination of peripheral blood. Hematological and biochemical parameters were obtained before and after treatment. All diagnostic tests were positive for CVL. The identification of L. infantum amastigotes inside neutrophils from peripheral blood was confirmed through microscopy, and the species was confirmed by molecular analysis. At the end of the treatment, peripheral parasitemia was not detected, and improvements were observed in clinical and laboratorial parameters. Finally, this atypical finding can be used as example to raise discussions about the real immunological role of neutrophils in late phases of CVL and its clinical/therapeutic implications.

Resumo A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença zoonótica de alta letalidade causada por Leishmania infantum nas Américas. No cão infectado, as formas amastigotas são escassas no sangue, principalmente na fase tardia da doença. Este estudo teve como objetivo relatar um caso raro de amastigotas de L. infantum encontradas em neutrófilos do sangue periférico de um cão naturalmente infectado e terminal da LVC, descrevendo também seu estado clínico antes e após o tratamento com miltefosina a 2%. O cão, que se apresentou como polissintomático e com sinais e sintomas clássicos da LVC foi submetido aos seguintes testes: teste rápido Dual Path Platform (DPP), ELISA e exame parasitológico de sangue periférico. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos foram obtidos antes e após o tratamento. Todos os testes diagnósticos foram positivos para LVC. A identificação de formas amastigotas de L. infantum, dentro de neutrófilos do sangue periférico foi confirmada por microscopia, e a espécie foi confirmada por análise molecular. Ao final do tratamento, não foi detectada parasitemia periférica, observando-se melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais. Por fim, esse achado atípico pode ser usado como exemplo para levantar discussões sobre o real papel imunológico dos neutrófilos nas fases tardias da LVC e suas implicações clínicas/terapêuticas.

Análises anatomopatológica e imuno- histoquímica do baço e linfonodo de cães soropositivos para leishmaniose em testes sorológicos / Anatomomopathological and immunohistochemical analyses of the spleen and lymph node of dogs seropositives for leishmaniasis in serological tests

A leishmaniose canina (CanL) é uma zoonose causada pelo protozoário da espécie Leishmania infantum. O baço e os linfonodos sofrem alterações morfológicas durante o CanL. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo anatomopatológico e imuno-histoquímico desses órgãos em cães reativos para leishmaniose aos testes de Imunoensaio Cromatográfico “Dual Path Platform” (DPP®) e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Vinte e sete cães foram avaliados ao exame anatomopatológico, com 92,6% exibindo alterações à avaliação macroscópica, especialmente esplenomegalia e linfadenomegalia. Todos os cães apresentaram alterações no baço não relacionadas à carga parasitária, sendo a esplenite granulomatosa a alteração mais grave. Hiperplasia cortical e paracortical difusa e hiperplasia e hipertrofia dos cordões medulares foram observadas nos linfonodos. Formas amastigotas de Leishmania spp. foram encontradas no baço e linfonodo às avaliações histopatológica e imuno-histoquímica, com boa concordância entre os métodos (k = 0,55, p = 0,00124), mas não foi observada diferença na intensidade parasitária entre esses órgãos à imuno-histoquímica (p = 0,23). Conclui-se que baço e linfonodo de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA apresentam alterações histomorfológicas decorrentes da doença, independente da carga parasitária, assim como esses órgãos apresentam carga parasitária semelhante ao método imuno-histoquímico.

Canine leishmaniasis (CanL) is a zoonosis caused by the protozoan of the species Leishmania infantum. The spleen and lymph nodes undergo morphological changes during CanL. This research aimed to perform an anatomopathological and immunohistochemical study of these organs in dogs reactive to leishmaniasis in the Dual-path Platform chromatographic immunoassay (DPP®) and Enzyme Immunoabsorption Assay (ELISA). Twenty-seven dogs were evaluated for anatomopathological examination with 92.6% showing changes at gross evaluation, specially splenomegaly and lymphadenomegaly. All dogs showed changes in the spleen unrelated to the parasitic load, with granulomatous splenitis being the most severe change. Diffuse cortical and paracortical hyperplasia, and hyperplasia and hypertrophy of the medullary cords were observed in the lymph node. Amastigote forms of Leishmania spp. were found in the spleen and lymph node at histopathological and immunohistochemical evaluations, with good agreement between these evaluations (k = 0.55, p = 0.00124), but no difference was observed in the parasitic intensity of these organs at immunohistochemistry (p = 0.23). It was concluded that spleen and lymph node from dogs reactive to leishmaniasis on the DPP® and ELISA tests show histomorphological changes resulting from the disease, independent to the parasitic load, as well as these organs show similar parasitic load at immunohistochemical test.

Anatomomopathological and immunohistochemical analyses of the spleen and lymph node of dogs seropositives for leishmaniasis in serological tests / Análises anatomopatológica e imuno-histoquímica do baço e linfonodo de cães soropositivos para leishmaniose em testes sorológicos

Canine leishmaniasis (CanL) is a zoonosis caused by the protozoan of the species Leishmania infantum. The spleen and lymph nodes undergo morphological changes during CanL. This research aimed to perform an anatomopathological and immunohistochemical study of these organs in dogs reactive to leishmaniasis in the Dual-path Platform chromatographic immunoassay (DPP®) and Enzyme Immunoabsorption Assay (ELISA). Twenty-seven dogs were evaluated for anatomopathological examination with 92.6% showing changes at gross evaluation, specially splenomegaly and lymphadenomegaly. All dogs showed changes in the spleen unrelated to the parasitic load, with granulomatous splenitis being the most severe change. Diffuse cortical and paracortical hyperplasia, and hyperplasia and hypertrophy of the medullary cords were observed in the lymph node. Amastigote forms of Leishmania spp. were found in the spleen and lymph node at histopathological and immunohistochemical evaluations, with good agreement between these evaluations (k = 0.55, p = 0.00124), but no difference was observed in the parasitic intensity of these organs at immunohistochemistry (p = 0.23). It was concluded that spleen and lymph node from dogs reactive to leishmaniasis on the DPP® and ELISA tests show histomorphological changes resulting from the disease, independent to the parasitic load, as well as these organs show similar parasitic load at immunohistochemical test.

A leishmaniose canina (CanL) é uma zoonose causada pelo protozoário da espécie Leishmania infantum. O baço e os linfonodos sofrem alterações morfológicas durante o CanL. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo anatomopatológico e imuno-histoquímico desses órgãos em cães reativos para leishmaniose aos testes de Imunoensaio Cromatográfico "Dual Path Platform" (DPP®) e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Vinte e sete cães foram avaliados ao exame anatomopatológico, com 92,6% exibindo alterações à avaliação macroscópica, especialmente esplenomegalia e linfadenomegalia. Todos os cães apresentaram alterações no baço não relacionadas à carga parasitária, sendo a esplenite granulomatosa a alteração mais grave. Hiperplasia cortical e paracortical difusa e hiperplasia e hipertrofia dos cordões medulares foram observadas nos linfonodos. Formas amastigotas de Leishmania spp. foram encontradas no baço e linfonodo às avaliações histopatológica e imuno-histoquímica, com boa concordância entre os métodos (k = 0,55, p = 0,00124), mas não foi observada diferença na intensidade parasitária entre esses órgãos à imuno-histoquímica (p = 0,23). Conclui-se que baço e linfonodo de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA apresentam alterações histomorfológicas decorrentes da doença, independente da carga parasitária, assim como esses órgãos apresentam carga parasitária semelhante ao método imuno-histoquímico.

Leishmania sp em nódulos subcutâneos no cão / Leishmania sp in dog subcutaneous nodules

Canine visceral leishmaniasis (LVC) is a disease caused by protozoans of the genus Leishmania, patients affected can present a diversity of clinical symptoms, where the main are: slimming, alopecia, Onychogryphosis and dermatitis. However unconventional signs may be linked to this disease. In this sense the purpose of this work is to report a case of LVC with unconventional signs of the disease. The occurs with a Yorkshire dog that was attended with complaint of pruritus and formation of nodules in the flank region, initially the clinical suspicion was of allergic reaction with fungal dermatitis. After the completion of the complementary exams (Cytopathological, blood count, ALT dosages, creatinine and skin scraping for direct examination) was diagnosed LVC from the observation of Amastigota in Cytopathological. With this result we emphasize the attention to the clinical demonstrations in LVC and the importance of complementary exams such as cytology to quick and accurate diagnostics.(AU)

Leishmania sp em nódulos subcutâneos no cão / Leishmania sp in dog subcutaneous nodules

Canine visceral leishmaniasis (LVC) is a disease caused by protozoans of the genus Leishmania, patients affected can present a diversity of clinical symptoms, where the main are: slimming, alopecia, Onychogryphosis and dermatitis. However unconventional signs may be linked to this disease. In this sense the purpose of this work is to report a case of LVC with unconventional signs of the disease. The occurs with a Yorkshire dog that was attended with complaint of pruritus and formation of nodules in the flank region, initially the clinical suspicion was of allergic reaction with fungal dermatitis. After the completion of the complementary exams (Cytopathological, blood count, ALT dosages, creatinine and skin scraping for direct examination) was diagnosed LVC from the observation of Amastigota in Cytopathological. With this result we emphasize the attention to the clinical demonstrations in LVC and the importance of complementary exams such as cytology to quick and accurate diagnostics.

Are Aedes aegypti mosquitoes potential vectors for leishmaniasis? ­ Case report / Mosquitos Aedes aegypti são vetores potenciais de leishmaniose? ­ Relato de caso

In Brazil dipters of the Lutzomyia genus are the main vectors of leishmaniasis for humans and animals. However, other hematophagous insects such as ticks, fleas, and horse flies may also be considered potential vectors of this protozoon. This paper, regarding an endemic area for visceral leishmaniasis, is the the first description of the Leishmania spp. presence in Aedes aegypti mosquitoes. Two A. aegypti mosquitoes were captured: one of them was feeding on a polysymptomatic dog with leishmaniasis, confirmed by parasitic demonstration and positive PCR for Leishmania spp., and the other was collected in the environment where the dog was isolated. The mosquito engorged with dog's blood was crushed between two microscopic slides and the other one was processed by the polymerase chain reaction assay (PCR) searching for the presence of Leishmania spp. DNA. Amastigote forms of Leishmania sp, were observed in the smear prepared from one mosquito by microscopic examination, as well as other protozoa's flagellated forms. In the other insect it was observed Leishmania DNA amplification. This observation reinforces the role of dogs as sources of infection of Leishmania spp. even to other potential vector species.(AU)

No Brasil, os dípteros do gênero Lutzomyia são os principais vetores da leishmaniose para humanos e animais. No entanto, tem sido constatado que outras espécies de invertebrados hematófagos, como carrapatos, pulgas e mutucas, também podem ser vetores desse protozoário. Este trabalho, realizado em uma área endêmica de leishmaniose visceral, é a primeira descrição da presença de Leishmania spp. em mosquitos da espécie A. aegypti. Dois mosquitos A. aegypti foram capturados no local onde estava isolado um cão polissintomático acometido por leishmaniose visceral, confirmada pela demonstração do parasita em biópsias de órgãos e por resultado positivo na prova de PCR para Leishmania spp. Um dos mosquitos estava sugando o sangue do cão e o outro estava livre no ambiente. O mosquito ingurgitado com o sangue do animal foi esmagado entre duas lâminas de microscopia e o outro foi processado por meio da reação em cadeia pela polimerase (PCR) aplicada à pesquisa do ADN de Leishmania spp. Ao exame microscópico do esfregaço preparado com o mosquito que estava parasitando o cão foram observadas formas amastigotas de Leishmania spp., bem como formas flageladas de outra espécie de protozoário. No outro inseto foi detectada amplificação de ADN do gênero Leishmania. Esta constatação reforça o papel dos cães como fontes de infecção de Leishmania spp. até mesmo para outras espécies de vetores potenciais.(AU)

Are Aedes aegypti mosquitoes potential vectors for leishmaniasis? ­ Case report / Mosquitos Aedes aegypti são vetores potenciais de leishmaniose? ­ Relato de caso

In Brazil dipters of the Lutzomyia genus are the main vectors of leishmaniasis for humans and animals. However, other hematophagous insects such as ticks, fleas, and horse flies may also be considered potential vectors of this protozoon. This paper, regarding an endemic area for visceral leishmaniasis, is the the first description of the Leishmania spp. presence in Aedes aegypti mosquitoes. Two A. aegypti mosquitoes were captured: one of them was feeding on a polysymptomatic dog with leishmaniasis, confirmed by parasitic demonstration and positive PCR for Leishmania spp., and the other was collected in the environment where the dog was isolated. The mosquito engorged with dog's blood was crushed between two microscopic slides and the other one was processed by the polymerase chain reaction assay (PCR) searching for the presence of Leishmania spp. DNA. Amastigote forms of Leishmania sp, were observed in the smear prepared from one mosquito by microscopic examination, as well as other protozoa's flagellated forms. In the other insect it was observed Leishmania DNA amplification. This observation reinforces the role of dogs as sources of infection of Leishmania spp. even to other potential vector species.(AU)

No Brasil, os dípteros do gênero Lutzomyia são os principais vetores da leishmaniose para humanos e animais. No entanto, tem sido constatado que outras espécies de invertebrados hematófagos, como carrapatos, pulgas e mutucas, também podem ser vetores desse protozoário. Este trabalho, realizado em uma área endêmica de leishmaniose visceral, é a primeira descrição da presença de Leishmania spp. em mosquitos da espécie A. aegypti. Dois mosquitos A. aegypti foram capturados no local onde estava isolado um cão polissintomático acometido por leishmaniose visceral, confirmada pela demonstração do parasita em biópsias de órgãos e por resultado positivo na prova de PCR para Leishmania spp. Um dos mosquitos estava sugando o sangue do cão e o outro estava livre no ambiente. O mosquito ingurgitado com o sangue do animal foi esmagado entre duas lâminas de microscopia e o outro foi processado por meio da reação em cadeia pela polimerase (PCR) aplicada à pesquisa do ADN de Leishmania spp. Ao exame microscópico do esfregaço preparado com o mosquito que estava parasitando o cão foram observadas formas amastigotas de Leishmania spp., bem como formas flageladas de outra espécie de protozoário. No outro inseto foi detectada amplificação de ADN do gênero Leishmania. Esta constatação reforça o papel dos cães como fontes de infecção de Leishmania spp. até mesmo para outras espécies de vetores potenciais.(AU)

Sensibilidade parasitológica de diferentes locais de colheita para o diagnóstico de leishmaniose em cães / Sensitivity parasitological of different places of harvest for the diagnosis of leishmaniose in dogs / Sensibilidad parasitológica de diferentes sitios de recogida para diagnóstico de leishmaniosis en perros

A leishmaniose é uma zoonose de grande importância para a saúde pública. São grandes os estudos para que se conheçam diferentes técnicas para diagnóstico e que estes testes tenham alta sensibilidade. Este estudo teve como objetivo comparar a sensibilidade do teste parasitológico frente a diferentes locais de colheita de material biológico. As amostras colhidas do linfonodo e medula óssea se mostraram igualmente os mais sensíveis, na ordem de 44% dos casos. Estes valores elevaram-se ao realizar a pesquisa do parasito simultaneamente em duas técnicas.(AU)

Leishmaniasis is a zoonosis of great importance to public health. They are great studies to get to know different techniques for diagnosis and these tests have high sensitivity. This study aimed to compare the sensitivity of parasitological testing against different biological material collection sites. Samples taken from the lymph node and bone marrow also showed the most sensitive in the order of 44% of the cases. These figures amounted to perform the search of the parasite simultaneously in both techniques.(AU)

La leishmaniosis es una zoonosis de gran importancia para la salud pública. Son grandes los estudios para que se conozcan diferentes técnicas de diagnóstico y que estas pruebas tengan alta sensibilidad. Este estudio tuvo como objetivo comparar la sensibilidad de prueba parasitológica frente a diferentes sitios de recolección de material biológico. Las muestras tomadas de los ganglios linfáticos y médula ósea se demostraron, igualmente, los más sensibles, en el orden de 44% de los casos. Estas cifras se elevaron al realizar la investigación del parásito de forma simultánea en dos técnicas.(AU)

Sensibilidade parasitológica de diferentes locais de colheita para o diagnóstico de leishmaniose em cães / Sensitivity parasitological of different places of harvest for the diagnosis of leishmaniose in dogs / Sensibilidad parasitológica de diferentes sitios de recogida para diagnóstico de leishmaniosis en perros

A leishmaniose é uma zoonose de grande importância para a saúde pública. São grandes os estudos para que se conheçam diferentes técnicas para diagnóstico e que estes testes tenham alta sensibilidade. Este estudo teve como objetivo comparar a sensibilidade do teste parasitológico frente a diferentes locais de colheita de material biológico. As amostras colhidas do linfonodo e medula óssea se mostraram igualmente os mais sensíveis, na ordem de 44% dos casos. Estes valores elevaram-se ao realizar a pesquisa do parasito simultaneamente em duas técnicas.

Leishmaniasis is a zoonosis of great importance to public health. They are great studies to get to know different techniques for diagnosis and these tests have high sensitivity. This study aimed to compare the sensitivity of parasitological testing against different biological material collection sites. Samples taken from the lymph node and bone marrow also showed the most sensitive in the order of 44% of the cases. These figures amounted to perform the search of the parasite simultaneously in both techniques.

La leishmaniosis es una zoonosis de gran importancia para la salud pública. Son grandes los estudios para que se conozcan diferentes técnicas de diagnóstico y que estas pruebas tengan alta sensibilidad. Este estudio tuvo como objetivo comparar la sensibilidad de prueba parasitológica frente a diferentes sitios de recolección de material biológico. Las muestras tomadas de los ganglios linfáticos y médula ósea se demostraron, igualmente, los más sensibles, en el orden de 44% de los casos. Estas cifras se elevaron al realizar la investigación del parásito de forma simultánea en dos técnicas.

AVALIAÇÃO DO EFEITO ANTI-LEISHMANIA DE DERIVADOS MESOIÔNICOS DE 1, 3, 4 TIADIAZÓLIO SOBRE L. AMAZONENSIS IN VITRO.

As leishmanioses são um conjunto de doenças negligenciadas, causadas pelo protozoário do gênero Leishmania, que afetam milhões de pessoas anualmente no mundo. Além do homem, a doença acomete também os cães, sendo esses o principal reservatório doméstico da doença. Em humanos essa doença apresenta um amplo espectro clínico, e no cão causa manifestações viscero-cutâneas. Os fármacos utilizados no tratamento possuem uma alta toxicidade, gerando diversos efeitos colaterais, e têm elevado custo de produção. Além disso, em países endêmicos, têm ocorrido o aparecimento de cepas resistentes. Por esses motivos, torna-se necessário a busca por novas moléculas bioativas. Os sais mesoiônicos são uma subclasse do grupo betaína amplamente estudada desde a década de 50, e exibem extensa atividade biológica Nosso trabalho tem por objetivo analisar os efeitos citotóxicos dos compostos mesoiônicos 4 fenil-5-(X - fenil) -1,3,4-tiadiazólio-2-fenilamina (X= 4 Cl; 3,4 diCl e 3,4 diF) sobre a Leishmania amazonensis in vitro. Para avaliar o efeito anti-promastigotas, promastigotas de L.. amazonensis foram incubadas com diferentes concentrações dos sais mesoiônicos por até 72 horas. Nossos resultados demonstram que os sais mesoiônicos MI-3,4 diCl, MI-4Cl e MI-3,4 diF foram tóxicos, tendo valores de IC50/48 h de 14,3, 40,1 e 61,8 µM, respectivamente. O efeito anti-amastigota foi avaliado em macrófagos infectados e nossos resultados demonstram que os compostos clorados possuem efeito tóxico contra as amastigotas com IC50/24 h de 33 µM (MI-4Cl) e 43 µM (MI-3,4diCl). Nenhum dos compostos mesoiônicos testados apresentam toxicidade para célula hospedeira até a concentração testada de 200 µM. A produção de óxido nítrico (NO) em macrófagos estimulados ou não com LPS na presença dos sais demonstrou que somente o composto MI-3,4 diCl reduziu os níveis de NO em até 2x. A análise do perfil lipídico de promastigotas tratadas com os sais mesoiônicos não mostrou alteração dos lipídios neutros. A avaliação do potencial de membrana mitocondrial, mostrou que somente o composto MI-4Cl foi capaz de reduzir o potencial de membrana mitocondrial em 50%. Portanto, os resultados sugerem que os sais mesoiônicos MI-4Cl e MI-3,4diCl apresentam um potencial efeito anti-Leishmania.

EVALUATION OF THE LEISHMANICIDE EFFECT OF 1, 3, 4 THIADIAZOLIUM MESOIONIC DERIVATIVES ON Leishmania amazonensis IN VITRO.

Clinical and histopathological features of myocarditis in dogs with visceral leishmaniasis / Aspectos clínicos e histopatológicos da miocardite em cães com leishmaniose visceral

Visceral leishmaniasis (VL) is a cosmopolitan parasitic zoonosis that can promote myocarditis and heart rate changes in canine and human hosts. Thus, histopathological aspects of the myocardium and clinical, hematological, biochemical, radiological and electrocardiographic data were evaluated in a group of 36 dogs naturally infected with VL (VLG) and compared to data from 15 non-infected dogs (CG=Control Group). A prevalence of asymptomatic dogs was present in the CG (100%) and polysymptomatic dogs in the VLG (66%). In addition, two dogs in the VLG demonstrated systolic murmurs in the mitral valve region: one with a II/VI intensity and the other with a III/VI intensity. The mean values of RBC, hemoglobin and hematocrit were lower in dogs in VLG and were associated with higher values of total protein, total leukocytes, neutrophils, creatine kinase overall (CK) and the CK-MB fraction (CK-MB). The absence of radiographic changes was accompanied by a predominance of respiratory sinus arrhythmia associated with episodes of migratory pacemaker and sinus arrest in dogs in VLG (75%), sinus rhythm in dogs in CG (60%) and decreased P wave amplitude in VLG electrocardiography. Mononuclear cell infiltration was detected in the myocardium of 77,8% of dogs in GVL and classified primarily as mild multifocal lymphohistioplasmacytic. Amastigotes were detected in only one dog, which did not allow the association between myocarditis and parasitism, although the myocardial lesions that were found constitute irrefutable evidence of myocarditis in the VLG dogs, accompanied by lenient electrocardiographic changes compared to CG(AU)

A leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose parasitária cosmopolita capaz de promover miocardite e alterações no ritmo cardíaco em cães e seres humanos. Dessa forma, os aspectos clínicos, hematimétricos, bioquímicos, radiográficos, eletrocardiográficos e histopatológicos do miocárdio foram avaliados em 36 cães naturalmente infectados com LV (GLV) e comparados a 15 cães não infectados (GC). Houve predomínio de cães assintomáticos no GC (100%) e polissintomáticos no GLV (66%). Dois cães do GLV apresentaram sopro sistólico de intensidade II/VI e III/VI, em região de foco mitral. Os valores médios de hemácia, hemoglobina e hematócrito foram inferiores nos cães do GLV, associados a maiores valores de proteína total, leucócitos totais, neutrófilos, creatinina quinase total (CK) e fração MB (CK-MB). Ausência de alterações radiográficas foi acompanhada de predomínio de arritmia sinusal respiratória associada a episódios de marcapasso migratório e sinus arrest nos cães do GLV (75%), ritmo sinusal nos cães do GC (60%) e diminuição da amplitude da onda P no GLV à eletrocardiografia. Infiltrado inflamatório mononuclear foi detectado no miocárdio de 77,8% dos cães do GLV, classificados, em sua maioria, como linfoistioplasmocitário multifocal leve. A forma amastigota foi detectada em apenas um cão, não permitindo a associação entre a miocardite e a parasitose, ainda que as lesões miocárdicas encontradas constituam prova irrefutável da miocardite nos cães do GLV, acompanhadas por alterações eletrocardiográficas brandas em comparação ao GC(AU)

Comparison of the sensitivity of the parasitological test in lymph node, bone marrow and mucosa conjunctival for diagnosis leishmaniasis in dogs / Comparação da sensibilidade do teste parasito lógico em linfonodo, medula óssea e mucosa conjuntival para o diagnóstico de leishmaniose em cães

Leishmaniasis is a zoonosis of great importance to public health. In Mato Grosso do Sul to have steady increase in cases of dogs infected with the disease. It is of great importance to know the sensitivity of parasitological testing to assist in choosing the veterinary clinic. This study aims to compare the sensitivity of parasitological testing of lymph node puncture, bone marrow and conjunctival swab. Among all the techniques, lymph node aspiration proved to be the most sensitive method (44% of cases) for the diagnosis of leishmaniasis in dogs.

A leishmaniose é uma zoonose de grande importância para a saúde pública. Em Mato Grosso do Sul há um crescente aumento nos casos de cães infectados com a doença. Diante deste fato, é de grande importância que se conheça a sensibilidade de testes parasitológicos para auxiliar na escolha do clínico veterinário. Este trabalho tem como objetivo comparar a sensibilidade dos testes parasitológicos de punção de linfonodo, medula óssea e swab conjuntival. Dentre todas as técnicas, a aspiração de linfonodo demonstrou ser a técnica mais sensível (44% dos casos) para o diagnóstico de leishmaniose em cães.

EPIDEMIOLOGIA DA LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA EM PARAUAPEBAS, PARÁ, BRASIL.

A Leishmaniose Visceral (LV) ou calazar é uma zoonose causada por protozoários intracelulares da família Trypanosomatidae, gênero Leishmania. No estado do Pará foram notificados 580 casos confirmados de LVH no ano de 2017 e de acordo com os dados do último quinquênio, a LV é um agravo que se distribui em 117, dos 144 municípios do estado, sendo que 19 destes municípios são classificados como de transmissão intensa. Para tanto objetivou-se determinar características epidemiológicas da leishmaniose visceral canina no município de Parauapebas-PA localizado na região sudeste do estado. Para compor a amostra os cães foram incluídos por conveniência, admitindo-se animais de qualquer raça, sexo, porte ou local de moradia, com idade igual ou superior a 4 meses. As coletadas foram realizadas in loco por meio de visitas domiciliares ou quando o animal era levado até o ponto de coleta do bairro durante ação promovida pela secretaria municipal de saúde do município para o controle da LV. As amostras de soro de 389 cães foram analisadas por meio do teste de imunocromatografico. O Aspirado de linfonodo foi coletado por punção, corado em panótico rápido e analisado em microscopia óptica. Uma ficha de investigação foi preenchida para cada animal e as variáveis utilizadas para testar associações. Em 41 bairros do município de Parauapebas foram diagnosticados cães positivos para Leishmaniose visceral em pelo menos um teste utilizado. A soroprevalência encontrada foi de 32,6 % (28,1 37,4) considerando a positividade nos dois testes simultaneamente. Apresentaram-se como fatores associados como a soropositividade para LV, animais sem raça definida (OR= 3,119, P = 0,000), livre acesso a rua (OR= 1,956, P = 0,019), permanência fora da residência das 18 às 22 horas (OR= 3,129, P= 0,001), dermatite generalizada (OR= 4,711, P= 0,000), dermatite periocular (OR= 6,518, P= 0,006), esplenomegalia (OR= 7,347, P= 0,042), hepatomegalia (OR= 8,812, P= 0,019) linfoadenomegalia (OR= 3,796, P= 0,002) e onicogrifose (OR= 5,718, P= 0,013). A LVC está distribuída de forma ampla no município de Parauapebas, com prevalência alta confirmada por exame parasitológico direto. A soroprevalência da doença é muito alta entre os cães, utilizando o teste rápido, sendo recomendado a realização de um teste confirmatório para considerar a positividade. Os resultados obtidos no estudo indicam que é possível que ocorra aumento na incidência da LV em humanos no município de Parauapebas, caso não sejam adotadas medidas de controle eficazes.

The Visceral Leishmaniasis (VL) or calaza is a zoonosis caused by protozoa intracellulars from Trypanosomatidae, description Leishmania. In Pará state it was infromad 580 cases of human visceral leishmaniasis in 2017 and occording to the last quiquennial dates, the VL is a harn that is presente in 117 of 144 cities in Pará state and 19 from this cities are cosedered of intnse transmission. The fore the purpose of this research was determinate apidemiologic character of CVL in Parauapebas, located in southeast region from the state. To compound the sample, the dogs were included for convenience, admiting animals from any race, gender, size or live place, age iqual or superior 4 month. The samples were realized in loco by domiciliar visits or when the aniaml was took to the data collection places in a neighborhood were the city hall promoted on action by Helth Sevice Departamento of city to the control VL. The serum sample of 389 dogs were analyzed by immunochromatographic (DPP®) test. The lymph nodes aspirate was colected of puncture, colored in Panótico® and analyzede in optic microscopy. A sheet of enviromental question was filled out fro each animal and the variable used to test the combination. In 41 neighborhood of Parauapebas city was diagnosticed positive dogs to VL in at least a realized test. The sorophrevalence found it was 32,6% (28,1 37,4) considering the positive in both test concurrenthy. Introduced like associetted factos to soropositivity of VL, animals with no breed definition (OR= 3,119, P= 0,000) free access to the streets (OR= 1,956, P= 0,019), stay out of residence among 6:00 p.m to 10:OO p.m (OR= 3,129, P= 0,001), dermatites generalized (OR= 4,711, P= 0,000), periocular dermatitis (OR= 6,518, P= P= 0,006), splenomegaly (OR= 7,347, P= 0,042), hapatomegaly (OR= 8,812, P= 0,019), lymphadenomegaly (OR= 3,796, P= 0,002) and onychogryphosis (OR= 5,718, P= 0,013). The CVL is distributed in a large way in Parauapebas city, with high predominance confirmed by straight parasitologic exams. The desiase sorophrevalence is really high among the dogs, using the fast test, its recommended to do a confirmatory test to consider the positive. The result got in the studies indicate that is possible that occur a raise in the incidence of VL in Humans in Parauapebas city, if it doesnt have.

Comparison of the sensitivity of the parasitological test in lymph node, bone marrow and mucosa conjunctival for diagnosis leishmaniasis in dogs / Comparação da sensibilidade do teste parasito lógico em linfonodo, medula óssea e mucosa conjuntival para o diagnóstico de leishmaniose em cães

Leishmaniasis is a zoonosis of great importance to public health. In Mato Grosso do Sul to have steady increase in cases of dogs infected with the disease. It is of great importance to know the sensitivity of parasitological testing to assist in choosing the veterinary clinic. This study aims to compare the sensitivity of parasitological testing of lymph node puncture, bone marrow and conjunctival swab. Among all the techniques, lymph node aspiration proved to be the most sensitive method (44% of cases) for the diagnosis of leishmaniasis in dogs.(AU)

A leishmaniose é uma zoonose de grande importância para a saúde pública. Em Mato Grosso do Sul há um crescente aumento nos casos de cães infectados com a doença. Diante deste fato, é de grande importância que se conheça a sensibilidade de testes parasitológicos para auxiliar na escolha do clínico veterinário. Este trabalho tem como objetivo comparar a sensibilidade dos testes parasitológicos de punção de linfonodo, medula óssea e swab conjuntival. Dentre todas as técnicas, a aspiração de linfonodo demonstrou ser a técnica mais sensível (44% dos casos) para o diagnóstico de leishmaniose em cães.(AU)

Diagnóstico molecular de leishmaniose visceral canina como ferramenta epidemiológica / molecular diagnostic of visceral canine leishmaniasis as a epidemiological tool

  A leishmaniose é uma zoonose causada por um protozoário do gênero Leishmania, cuja forma amastigota é encontrada nos hospedeiros vertebrados e a promastigota habita o aparelho digestivo do vetor da doença. No Brasil, o principal vetor é a Lutzomiya longipalpis, sendo o cão doméstico o reservatório mais importante da doença e o homem o hospedeiro acidental (DEANE & DEANE, 1955). Três formas clínicas são conhecidas, a leishmaniose cutânea, mucocutânea e visceral (LAINSON & SHAW, 1987). As leishmanioses estão presentes nos quatro continentes, exceto Austrália, acometendo cerca de dois milhões de pessoas por ano, com 500 mil casos da forma visceral (OMS, 2004). Visto a importância do cão no ciclo da doença e a relevância das leishmanioses no âmbito da saúde pública, este estudo objetivou avaliar a ocorrência dessa enfermidade em municípios da região de Bauru, São Paulo, considerada, até o momento, endêmica para leishmaniose visceral canina. Foram utilizadas amostras de sangue total, recebidas pelo Laboratório

Copaifera reticulata E SEU COMPOSTO MAJORITÁRIO -CARIOFILENO: EFEITO ANTIPROLIFERATIVO IN VITRO SOBRE Leishmania infantum, TOXICIDADE E MODELAGEM COMPUTACIONAL

A Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença de impacto social causada pelo protozoário Leishmania infantum ou L. donovani. O tratamento da doença consiste no uso de drogas altamente tóxicas com efeitos colaterais graves. Copaifera reticulata e seu composto majoritário -cariofileno destacam-se como promissores na luta contra algumas doenças. Entre as enzimas envolvidas na defesa do parasita intracelular, triparedoxina-I (TXN-I) é um alvo valioso para o planejamento de novas drogas. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação do óleo resina de C. reticulata e -cariofileno sobre promastigotas e amastigotas axênicas de L. infantum determinando a concentração inibitória sobre 50% dos protozoários (IC50), assim como avaliar a toxicidade aguda em camundongos explorando de forma computacional o mecanismo de ação do -cariofileno. Adicionalmente, foi realizada análise in silico utilizando a proteína triparedoxina-I de L. infantum (LiTXN-I) para melhor caracterizar o mecanismo de ação do -cariofileno, além de sua toxicidade, farmacoinformática, caracterização do LiTXN-I como preditor da estrutura proteica (PSP), validação do modelo 3D e docking molecular. A CI50 do óleo resina de C. reticulata foi de 5,9 g/mL sobre promastigotas e de 2,19 g/mL sobre amastigotas axênicas, enquanto -cariofileno obteve CI50 de 2,2 g/mL sobre promastigotas e de 2,18 g/mL sobre amastigotas axênicas. Estudos de toxicidade in vivo demonstraram que a DL50 foi de 5g, semelhante ao observado in silico. Este composto está em conformidade com a regra de Lipinski e foi sugerido como forte candidato para uso no tratamento de LV. Os resultados da absorção, metabolização, distribuição e excreção (ADME) do -cariofileno demonstraram propriedades aceitáveis na farmacocinetica. A caracterização da TXN-I indicou que está envolvida em duas reações de LiTXN-I (KEGG 1.8.1.8 e KEGG - R03914) e na interação com 10 proteínas essenciais das reações enzimáticas do parasito. Na modelagem molecular do LiTXN-I, o modelo utilizado foi L. major (LmTXN-I) (PDB: 3s9f) devido a maior cobertura no alinhamento. O acoplamento molecular do -cariofileno com LiTXN-I alcançou a energia de G: -6,44 kcal/mol-1 e as constantes de inibição Ki de 19,17 M. Foi observado que as energias exercidas no complexo droga/proteína foram interações favoráveis do tipo hidrofóbico e de van der Waals, com 5 resíduos correspondentes. O óleo resina de Copaiba e -cariofileno alcançaram desempenho in vitro satisfatório sobre L. infantum e um perfil tóxico seguro. Na modelagem computacional, -cariofileno mostrou ser um forte candidato a fármaco contra L. infantum evidenciando uma atração seletiva pela enzima LiTXN-I.

Visceral leishmaniasis is a disease of social impact caused by the protozoan Leishmania infantum or L. donovani. The treatment of the disease consists in the use of highly toxic drugs with serious side effects. Copaifera reticulata and its major composite, - caryophyllene stands out as promising in the fight against some diseases. Among the enzymes involved in the defense of the intracellular parasite, tryparedoxin-I (TXN-I) is a valuable target for drugs. The objective of this study was to evaluate the action of the resin oil of C. reticulata and -caryophyllene on promastigotes and axenic amastigotes of L. infantum, determining the inhibitory concentration on 50% of the protozoa (IC50), as well as to evaluate the acute toxicity in mice, exploring in a computational way the mechanism of -caryophyllene action. The aim of this study was to determine the viability of C. reticulata resin oil and -caryophyllene on 50% parasites (IC50) and to evaluate the acute toxicity in mice and computationally evaluate the mechanism of action of -caryophyllene to combat the parasite. Additionally, in silico analysis was performed using tryparedoxin protein from L. infantum (LiTXN-I) to better characterize the mechanism of action of -caryophyllene, besides its toxicity, pharmacoinformatics, characterization of LiTXN-I as a predictor of protein structure (PSP), 3D model validation and molecular docking. The IC50 of the resin oil of C. reticulata was 5.9 g/mL on promastigotes and 2.19 g/mL on axenic amastigotes, whereas - caryophyllene obtained IC50 of 2.2 g/mL on promastigotes and 2,18g/mL on axenic amastigotes. In vivo toxicity studies demonstrated that the LD50 was 5g, similar to that observed in silico. This compound is in compliance with the Lipinski rule and has been suggested as a strong candidate for use in the treatment of VL. The results of absorption, metabolism, distribution and excretion (ADME) of -caryophyllene showed acceptable properties in pharmacokinetic. The characterization of TXN-I indicated that it is involved in two reactions of LiTXN-I (KEGG 1.8.1.8 and KEGG-R03914) and in the interaction with 10 essential proteins of the enzymatic reactions of the parasite. In the molecular modeling of LiTXN-I, the model used was L. major (LmTXN-I) (PDB: 3s9f) due to the greater coverage in the alignment. The molecular coupling of -caryophyllene with LiTXN-I reached energy of G: -6.44 kcal/ mol-1 and the inhibition constants Ki of 19.17M. It was observed that the energies exerted on the drug/protein complex were favorable interactions of the hydrophobic and van der Waals type, with 5 corresponding residues.The resin oil of C. reticulata and -caryophyllene achieved satisfactory in vitro performance on L. infantum and a safe toxic profile. In computational modeling, - caryophyllene showed to be a strong drug candidate against L. infantum evidencing a selective attraction by the enzyme LiTXN-I.

Proteoma Quantitativo para Identificação de Potenciais Fatores de Virulência em Leishmania infantum

Leishmania infantum é o protozoário responsável pela Leishmaniose Visceral nas Américas e na Europa, uma doença grave, podendo ser fatal se não tratada. Os casos humanos variam de infecção subclínica, com um número indeterminado de assintomáticos em áreas endêmicas, a um quadro crescente e de alta letalidade em crianças. Em cães infectados, menos de 50% apresentam sinais clínicos da doença, no entanto, alguns sucumbem em poucos meses após a infecção. Essa ampla diversidade clínica em humanos e em caninos sugere que fatores tanto do hospedeiro quanto do parasito podem estar envolvidos na variabilidade da doença. Assim, devido a sua importância e diversidade clínico-epidemiológica em nosso país, o estudo de fatores de virulência em L. infantum se mostra bastante promissor para o entendimento da relação parasito-hospedeiro. Em um estudo anterior foi caracterizada a virulência de duas cepas (BH46 e BH400) de L. infantum, e foi observado uma maior virulência e infectividade da cepa BH400. Além disso, através da análise proteômica da forma promastigota, um total de 63 spots foram identificados correspondendo a 36 proteínas das quais, 16 já haviam sido previamente associados à virulência de Leishmania spp. Dando continuidade a essa linha de pesquisa, no presente estudo incluímos as formas amastigotas axênicas e esplênicas com o objetivo comparar a abundância diferencial de proteínas entre as cepas BH46 e BH400. Para isso, foram utilizadas duas técnicas de proteômica quantitativa: marcação por fluoróforo (DIGE) e marcação por isóbaros (TMT), seguidas de identificação por Espectrometria de Massas. Foram identificadas um total de 414 proteínas únicas que apresentaram diferença de abundância, sendo 68,4% encontradas na técnica TMT, 19% no DIGE e 12,6% em ambas as técnicas. Na forma Promastigota, foi observado um total de 270 proteínas com diferença de abundância entre as cepas. Também foram encontradas 302 e 293 proteínas diferencialmente abundantes entre as cepas nas formas Amastigota Axênica e em Amastigota Esplênica, respectivamente. Na cepa BH400, foi observado 117 proteínas com aumento de abundância em Amastigota Esplênica, enquanto 79 proteínas apresentavam diminuição. Por outro lado, em Amastigota Axênica foi observado uma maior quantidade de proteínas com abundância diminuída (178) enquanto 66 proteínas apresentaram aumento de abundância. Em Promastigota de BH400 a quantidade de proteínas com abundância aumentada (114) e diminuída (115) foi similar. A predição de interação entre as proteínas identificadas em cada forma apontou as proteínas relacionadas com tradução e proteínas de resposta ao estresse oxidativo como importantes redes. Dentre todas as proteínas com diferença de abundância, foi observado que na forma Amastigotas Axênicas, nenhum processo biológico estava enriquecido, mas simultaneamente nas formas Promastigota e Amastigota Esplênica da cepa 400 (mais virulenta) estavam enriquecidos os processos metabólicos: Celular, de Ácido Carboxílico, de Substância Orgânica, e Processo de Resposta ao Estresse. Além desses, nas formas promastigotas de 400, estavam também enriquecidos os Processos Metabólico Primário e de Biossíntese Celular. Por outro lado, simultaneamente nas formas promastigotas e amastigotas esplênicas da cepa BH46 foi observado enriquecimento do processo de biossíntese de compostos nitrogenados, enquanto nas formas amastigotas esplênicas dessa cepa estavam enriquecidos também os processos de biossíntese celular, expressão gênica e tradução. Foi observado que 14 proteínas estavam simultaneamente aumentadas em pelo menos duas formas evolutivas da cepa 400, sendo 8 delas em promastigota e amastigota esplênica, 5 em promastigota e amastigota axênica e 1 nas formas amastigotas (axênica e esplênica). Da mesma forma, 20 proteínas estavam com abundância diminuída simultaneamente em duas formas da cepa 400, sendo, 6 em promastigota e amastigota esplênica, 2 em promastigota e amastigota axênica e 12 nas formas amastigotas (axênica e esplênica). Por fim, foi observado uma maior semelhança entre a abundância das proteínas em Promastigota e Amastigota Axênica do que em Amastigota Esplênica, independente da cepa. Os resultados alcançados contribuem para o avanço no conhecimento da biologia de L. infantum, e muitas das proteínas identificadas são promissoras para o melhor entendimento da relação parasito-hospedeiro nessa espécie, principalmente no estudo de fatores de virulência.

Leishmania infantum is the protozoan responsible for Visceral Leishmaniasis in Americas and Europe, a serious disease that can be fatal if untreated. Human cases range from subclinical infection, with an undetermined number of asymptomatic in endemic areas, to a growing and highly lethal in children. In infected dogs, less than 50% have clinical signs of the disease, however, some succumb within a few months after infection. This clinical signs diversity in humans and canines suggests that both host and parasite factors may be involved in disease variability. Thus, due to its importance and clinical-epidemiological diversity in our country, the study of virulence factors in L. infantum is very promising for the understanding of the parasite-host relationship. In a previous study the virulence of two strains (BH46 and BH400) of L. infantum was characterized, and a higher virulence and infectivity of strain BH400 was observed. In addition, through proteomic analysis of the promastigote form, a total of 63 spots were identified corresponding to 36 proteins of which 16 had previously been associated with the virulence of Leishmania spp. Continuing this line of research, in the present study we included the axenic and splenic amastigote forms of both strains with the objective of comparing the differential abundance of proteins between strains BH46 and BH400. Two quantitative proteomics techniques were used: fluorescent labeling (DIGE) and isobaric labeling (TMT) followed by identification by mass spectrometer. A total of 414 unique proteins that showed differences on abundance were identified, being 68.4% found in the TMT technique, 19.1% in DIGE and 12.6% in both techniques. In Promastigote form, a total of 270 proteins with a difference of abundance between the strains were observed. We also found 302 and 293 differential abundant proteins among the strains in the Axenic Amastigote and in the Splenic Amastigote, respectively. In the BH400 strain, 117 proteins with increased abundance were observed in Splenic Amastigote, while 79 proteins showed decrease. On the other hand, in Axenic Amastigote was observed a greater amount of proteins with abundance diminished (178) while 66 proteins presented increase of abundance. In Promastigote of BH400 the amount of proteins with increased (114) and decreased (115) abundance was similar. The interaction prediction of the proteins identified in each form, demonstrate translation-related proteins and response to oxidative stress-related proteins, as important networks. Among all proteins with a difference of abundance, it was observed that in Axenic Amastigotes form, none biological process was enriched, but simultaneously in the Promastigota and Splenic Amastigote forms of BH400 strain (more virulent) were enriched the metabolic processes: Cellular, Carboxylic Acid, of Organic Substance, and Response to Stress. Furthemore, in the promastigote form of BH400, the Primary Metabolic and Cell Biosynthesis Processes were also enriched. On the other hand, in promastigotes and splenic amastigotes forms of the BH46 strain, the enrichment of the biosynthesis process of nitrogenous compounds was observed, whereas in amastigote forms, the cellular biosynthesis process, gene expression and translation were enriched. It was observed that 14 proteins were simultaneously increased in at least two evolutionary forms of BH400 strain, 8 in promastigote and splenic amastigote, 5 in promastigotes and axenic amastigotes and 1 in amastigotes (axenic and splenic) forms. Also, 20 proteins were simultaneously decreased in two evolutive forms of BH400, 6 of them in promastigote and splenic amastigote, 2 in axenic amastigote and promastigote and 12 in both amastigote forms (axenic and splenic). Finally, a greater similarity between the abundance of the proteins in Promastigote and Axenic Amastigote was observed than in Splenic Amastigote, independently of the strain. The results obtained contribute to the advances in the knowledge of the biology of L. infantum, and many of the identified proteins are promising for a better understanding of the parasite-host relationship in this species, especially in virulence factors study.

Avaliação da biópsia de medula óssea esternal e ilíaca no diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Evaluation of sternal and iliac crist bone marrow biopsy in diagnosis of canine Visceral Leishmaniosis

No Brasil, o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) tem sido realizado por meio de métodos parasitológicos, sorológicos e moleculares. Apesar de o diagnóstico parasitológico ser um método de confirmação, a realização da biópsia de medula óssea em cães, comumente tem sido realizada na crista ilíaca. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biópsia de medula óssea esternal (BME) e ilíaca (BMI) no diagnóstico da LVC. Foram utilizados vinte e oito animais com infecção natural por Leishmania infantum com e sem sinais clínicos de LVC e sorologicamente positivos. Os resultados mostraram não haver diferença significativa (P > 0,05) entre o local da biópsia quanto à detecção do parasito, no entanto recomenda-se a biópsia esternal pela sua simplicidade e praticidade no diagnóstico da LVC.

In Brazil, Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) diagnosis has been made by parasitological, serological, and molecular methods. Although the parasitological diagnosis is the confirmatory method, the bone marrow biopsy has been carried out the biopsy of the iliac crist. The goal of this research was to evaluate the sternal (SMB) and iliac (IMB) bone marrow biopsy to diagnosis of CVL. A total of twenty eight animals naturally infected with Leishmania infantum (symptomatic and asymptomatic) and serologically positive were utilized. The results showed no statistical difference (P > 0.05) between the local of biopsy. The findings support the sternal biopsies use because is a simple and pratical method to CVL diagnosis.

Avaliação da biópsia de medula óssea esternal e ilíaca no diagnóstico da leishmaniose visceral canina / Evaluation of sternal and iliac crist bone marrow biopsy in diagnosis of canine Visceral Leishmaniosis

No Brasil, o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) tem sido realizado por meio de métodos parasitológicos, sorológicos e moleculares. Apesar de o diagnóstico parasitológico ser um método de confirmação, a realização da biópsia de medula óssea em cães, comumente tem sido realizada na crista ilíaca. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biópsia de medula óssea esternal (BME) e ilíaca (BMI) no diagnóstico da LVC. Foram utilizados vinte e oito animais com infecção natural por Leishmania infantum com e sem sinais clínicos de LVC e sorologicamente positivos. Os resultados mostraram não haver diferença significativa (P > 0,05) entre o local da biópsia quanto à detecção do parasito, no entanto recomenda-se a biópsia esternal pela sua simplicidade e praticidade no diagnóstico da LVC. (AU)

In Brazil, Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) diagnosis has been made by parasitological, serological, and molecular methods. Although the parasitological diagnosis is the confirmatory method, the bone marrow biopsy has been carried out the biopsy of the iliac crist. The goal of this research was to evaluate the sternal (SMB) and iliac (IMB) bone marrow biopsy to diagnosis of CVL. A total of twenty eight animals naturally infected with Leishmania infantum (symptomatic and asymptomatic) and serologically positive were utilized. The results showed no statistical difference (P > 0.05) between the local of biopsy. The findings support the sternal biopsies use because is a simple and pratical method to CVL diagnosis.(AU)