Volatile compounds from soybeans under multiple on herbivores infestations attract the predatory mite Neoseiulus californicus (Acari: Phytoseiidae) / Compostos voláteis da soja sob infestação múltipla de herbívoros atraem o ácaro predador Neoseiulus californicus (Acari: Phytoseiidae)

Plant-induced resistance can be an important component of soybean mites biological control programs. This work evaluates the preference of predatory mite Neoseiulus californicus (Acari: Phytoseiidae) to soybean plants under single and multiple herbivory conditions by two-spotted spider mite Tetranychus urticae (Acari: Tetranychidae), and velvetbean caterpillar Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae). Using a Y olfactometer, the following scenarios were evaluated: soybean with no infestation and soybean infested with A. gemmatalis; soybean infested with T. urticae and A. gemmatalis, and soybean infested with T. urticae and with both T. urticae and A. gemmatalis. Volatile compounds released by plants were analyzed and identified by a Trace GC Ultra gas chromatograph coupled to a mass spectrometer with a solid phase micro-extraction ion-trap. The predatory mite N. californicus preferred soybean plants infested with T. urticae compared to those infested with A. gemmatalis. Multiple infestation did not interfere with its preference to T. urticae. Multiple herbivory of T. urticae and A. gemmatalis modified the chemical profile of volatile compounds emitted by soybean plants. However, it did not interfere with the search behavior of N. californicus. Out of the 29 identified compounds only five promoted predatory mite response. Thus, regardless of single or multiple herbivory by T. urticae with or without A. gemmatalis, the indirect induced resistance mechanisms operate similarly. As such, this mechanism contributes to an increase in the encounter rate between predator and prey for N. Californicus and T. urticae, and the efficacy of biological control of mites on soybean.

A resistência induzida por plantas pode ser um importante componente dos programas de controle biológico de ácaros da soja. Este trabalho avalia a preferência do ácaro predador Neoseiulus californicus (Acari: Phytoseiidae) às plantas de soja sob condições de herbivoria simples e múltipla pelo ácaro-rajado Tetranychus urticae (Acari: Tetranychidae) e pela lagarta-da-soja Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae). Utilizando o olfatômetro Y, foram avaliados os seguintes cenários: soja sem infestação e soja infestada com A. gemmatalis; soja infestada com T. urticae e A. gemmatalis, e soja infestada com T. urticae e com T. urticae e A. gemmatalis. Os compostos voláteis liberados pelas plantas foram analisados ​​e identificados por um cromatógrafo gasoso Trace GC Ultra acoplado a um espectrômetro de massas com uma armadilha de íons de microextração em fase sólida. O ácaro predador N. californicus preferiu plantas de soja infestadas com T. urticae em relação àquelas infestadas com A. gemmatalis. A infestação múltipla não interferiu na preferência por T. urticae. A herbivoria múltipla de T. urticae e A. gemmatalis modificou o perfil químico de compostos voláteis emitidos por plantas de soja. No entanto, não interferiu no comportamento de busca de N. californicus. Dos 29 compostos identificados apenas cinco promoveram resposta de ácaros predadores. Assim, independentemente da herbivoria simples ou múltipla por T. urticae com ou sem A. gemmatalis, os mecanismos de resistência induzida indiretamente operam de forma semelhante. Assim, esse mecanismo biológico contribui para o aumento da taxa de encontro entre predador e presa para N. Californicus e T. urticae, e para a eficácia do controle de ácaros em soja.

Comparative susceptibility of Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) and Chrysodeixis includens (Walker) (Lepidoptera: Noctuidae) to insecticides / Suscetibilidade comparativa de Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) e Chrysodeixis includens (Walker) (Lepidoptera: Noctuidae) a inseticidas

Chrysodeixis includens (Walker) and Anticarsia gemmatalis Hübner are important soybean defoliators. The chemical control of A. gemmatalis has been easier and more effective than that of C. includens. It is hypothesized that C. includens is natural tolerant to insecticides. This study quantified and compare the susceptibility of C. includens and A. gemmatalis to the insecticides flubendiamide, methomyl, and spinetoram. A susceptible population of each species, maintained under laboratory conditions without insecticides selection pressure for more than 17 generations, was used. Ingestion bioassays using five to eight concentrations of each insecticide applied on the artificial diet surface were used to estimate the LC50 and LC99 (LC = Lethal Concentration). The tolerance ratio (TR) was calculated by dividing the LC50 or LC99 of the most tolerant species by the respective value of the most susceptible species. Chrysodeixis includens was more tolerant to all insecticides tested than A. gemmatalis, with TR50 values of 45.9-, 10.0- and 2.6-fold for methomyl, flubendiamide, and spinetoram. These findings indicated that the risk of evolution of resistance may be higher for C. includens than A. gemmatalis due to differential survival when exposed to the same dose of insecticide applied in soybean fields. Therefore, to improve the control of both species, integrated pest management (IPM) and insect resistance management (IRM) strategies should be considered to avoid control failures in field conditions.

Chrysodeixis includens (Walker) e Anticarsia gemmatalis Hübner são importantes desfolhadoras da cultura da soja. O controle químico de A. gemmatalis tem sido mais fácil e eficaz quando comparado a C. includens, sendo uma hipótese para isso a maior tolerância natural de C. includens aos inseticidas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi quantificar e comparar a suscetibilidade de C. includens e A. gemmatalis aos inseticidas flubendiamida, metomil e espinetoram. Nos bioensaios foram utilizadas uma população suscetível de referência de cada espécie, mantidas em laboratório sem pressão de seleção por inseticidas a mais de 17 gerações. O método de bioensaio foi o de ingestão com aplicação de cinco a oito concentrações de cada inseticida na superfície da dieta artificial para estimativa da CL50 e CL99 (CL = Concentrações Letais). A razão de tolerância (RT) foi calculada pela divisão da CL50 ou CL99 da espécie mais tolerante pelo respectivo valor da espécie mais suscetível. Chrysodeixis includens foi mais tolerante aos inseticidas testados do que A. gemmatalis. A tolerância diferencial pode indicar o risco de evolução da resistência, nesse caso maior para C. includens a metomil e flubendiamida, porque apresentaram maiores valores de RT50 (45,9 e 10,0 vezes respectivamente) do que para espinetoram (RT50 2,6 vezes). Para evitar fracassos no controle é importante adotar as premissas do Manejo Integrado de Pragas (MIP) e do Manejo da Resistência de Insetos (MRI).

Mixture compatibility of Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) with pesticides used in soybean / Compatibilidade da mistura de nucleopoliedrovírus de Anticarsia gemmatalis baculovírus (AgMNPV) com agrotóxicos utilizados na soja

Anticarsia gemmatalis (Hübner: 1818) (Lepidoptera: Erebidae) is one of the main pests that affect soybean crops, causing defoliation. In the vegetative stages, defoliation occurs together with weeds, and in the reproductive stages with pathogens. In this sense, to maintain plant health, it is necessary to carry out the combined use of pesticides. Thus, this research determined the compatibility of the entomopathogenic virus AgMNPV with the main herbicides and fungicides used in soy at different times of the mixture. The artificial diet was immersed in the solutions of the pesticides and their mixtures and supplied to A. gemmatalis caterpillars, immediately and after one and two hours of mixing. The evaluation was performed by quantifying the number of dead caterpillars by mixing the AgMNPV virus with herbicides and fungicides, even after two hours of mixing if compatible. The observed scenarios showed a compatibility of the virus with the herbicides and fungicides, with mortality rates between 70 to 99% for A. gemmatalis.

Anticarsia gemmatalis (Hübner: 1818) (Lepidoptera: Erebidae) é uma das principais pragas que acometem a cultura da soja, causando desfolha. Nos estágios vegetativos a desfolha ocorre juntamente com ervas daninhas, e no reprodutivo com patógenos. Nesse sentido, para manter a fitossanidade, é necessário realizar a utilização combinada de pesticidas. Assim, o objetivo do presente trabalho foi determinar a compatibilidade do vírus entomopatogênico AgMNPV com os principais herbicidas e fungicidas utilizados na soja em diferentes tempos de mistura. A dieta artificial foi imersa nas soluções dos pesticidas e suas misturas e fornecida às lagartas de A. gemmatalis, imediatamente e após uma e duas horas de mistura. A avaliação foi realizada quantificando o número de lagartas mortas. A mistura do vírus AgMNPV com herbicidas e fungicidas, mesmo após duas horas de mistura se mostrou compatível. Os cenários observados mostram a compatibilidade do vírus com os herbicidas e fungicidas, com percentuais de mortalidade entre 70 a 99% para A. gemmatalis.

Parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides / Capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após ingestão de pesticidas biológicos

Augmentative biological control (ABC) of insect pests is an environmentally sustainable alternative to synthetic insecticides. By performing BC, more than one control agent can be used for the same insect pest that is in different stages of its life cycle or for pests that simultaneously occur in the area. However, this relationship requires biosecurity for the control agents employed. The aim of this study was to evaluate the parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides. The entomopathogens, Baculovirus Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis (Bt) var. kurstaki, Bt var. aizawai, Beauveria bassiana, and Metarhizium anisopliae; the microbiological fungicide, Trichoderma harzianum, at concentrations recommended by the manufacturer; and a negative control (pure honey) were employed in this study. Further, forced ingestion was adopted, with the treatments mixed in honey and offered as food at two dilutions (one-part product: one-part honey and one-part product: nine parts honey). Each treatment consisted of 20 individual females for each parasitoid (T. pretiosum or T. remus). The following parameters were evaluated: female longevity, number of parasitized eggs, egg viability, and number of females and males to determine the sex ratio. For T. pretiosum, B. bassiana (1 × 1013 viable conidia 100 L H2O-1), and T. harzianum (5 × 1012 viable conidia 100 L H2O-1), the longevity of their females was reduced by the 1:1 mixture; however, this mixture did not interfere with other parameters and other biological pesticides compared to the respective controls of both dilutions. The biological pesticides did not negatively influence the parameters evaluated for T. remus. The tested products had low toxicity to the egg parasitoids, T. pretiosum and T. remus. Overall, more work is still required with parasitoids in other stages of development and with other exposure methods to confirm the selectivity of products for egg parasitoids to recommend its combined use in the field.(AU)

O controle biológico aumentativo (CBA) de insetos-praga é uma alternativa ambientalmente sustentável em relação aos inseticidas sintéticos. Com a utilização do CBA, mais de um agente de controle pode ser utilizado para um mesmo inseto-praga que se encontra em diferentes estágios do seu ciclo de vida ou para pragas que ocorrem simultaneamente na área. No entanto, essa relação necessita de biossegurança para os agentes de controle envolvidos. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após a ingestão de pesticidas biológicos. Os entomopatógenos Baculovírus Anticarsia gemmatalis nucleopoliedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis var. kurstaki, Bacillus thuringiensis var. aizawai, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, o fungicida microbiológico Trichoderma harzianum nas concentrações recomendadas pelos fabricantes e um controle negativo (mel puro) foram utilizados nos bioensaios. A metodologia empregada foi de ingestão forçada, com os tratamentos misturados ao mel e oferecidos como alimento em duas diluições diferentes (1 parte do produto:1 parte de mel e 1 parte do produto:9 partes de mel). Cada tratamento constou de 20 fêmeas individualizadas de cada parasitoide (T. pretiosum ou T. remus). Os parâmetros avaliados foram: longevidade das fêmeas, número de ovos parasitados, viabilidade dos ovos e número de fêmeas e machos para determinação da razão sexual. Para T. pretiosum, B. bassiana (1×1013 conídios viáveis 100L H2O-1) e T. harzianum (5×1012 conídios viáveis 100L H2O-1) reduziram a longevidade das fêmeas na mistura 1:1, porém não interferiram nos demais parâmetros avaliados, bem como os demais produtos microbiológicos comerciais avaliados, quando comparados às respectivas testemunhas de ambas as diluições. Os pesticidas biológicos não influenciaram negativamente nos parâmetros avaliados de T. remus. Os produtos testados apresentam baixa toxicidade aos parasitoides de ovos T. pretiosum e T. remus. Ainda há necessidade de mais trabalhos com outros estágios de desenvolvimento dos parasitoides e outros métodos de exposição para confirmar a seletividade dos produtos aos parasitoides de ovos, para recomendar o uso conjunto destes no campo.(AU)

Identification and recombinant expression of an antimicrobial peptide (cecropin B-like) from soybean pest Anticarsia gemmatalis

Insects can be found in numerous diverse environments, being exposed to pathogenic organisms like fungi and bacteria. Once these pathogens cross insect physical barriers, the innate immune system operates through cellular and humoral responses. Antimicrobial peptides are small molecules produced by immune signaling cascades that develop an important and generalist role in insect defenses against a variety of microorganisms. In the present work, a cecropin B-like peptide (AgCecropB) sequence was identified in the velvetbean caterpillar Anticarsia gemmatalis and cloned in a bacterial plasmid vector for further heterologous expression and antimicrobial tests. Methods AgCecropB sequence (without the signal peptide) was cloned in the plasmid vector pET-M30-MBP and expressed in the Escherichia coli BL21(DE3) expression host. Expression was induced with IPTG and a recombinant peptide was purified using two affinity chromatography steps with Histrap column. The purified peptide was submitted to high-resolution mass spectrometry (HRMS) and structural analyses. Antimicrobial tests were performed using gram-positive (Bacillus thuringiensis) and gram-negative (Burkholderia kururiensis and E. coli) bacteria. Results AgCecropB was expressed in E. coli BL21 (DE3) at 28°C with IPTG 0.5 mM. The recombinant peptide was purified and enriched after purification steps. HRMS confirmed AgCrecropB molecular mass (4.6 kDa) and circular dichroism assay showed α-helix structure in the presence of SDS. AgCrecropB inhibited almost 50% of gram-positive B. thuringiensis bacteria growth. Conclusions The first cecropin B-like peptide was described in A. gemmatalis and a recombinant peptide was expressed using a bacterial platform. Data confirmed tertiary structure as predicted for the cecropin peptide family. AgCecropB was capable to inhibit B. thuringiensis growth in vitro.(AU)

Identification and recombinant expression of an antimicrobial peptide (cecropin B-like) from soybean pest Anticarsia gemmatalis

Insects can be found in numerous diverse environments, being exposed to pathogenic organisms like fungi and bacteria. Once these pathogens cross insect physical barriers, the innate immune system operates through cellular and humoral responses. Antimicrobial peptides are small molecules produced by immune signaling cascades that develop an important and generalist role in insect defenses against a variety of microorganisms. In the present work, a cecropin B-like peptide (AgCecropB) sequence was identified in the velvetbean caterpillar Anticarsia gemmatalis and cloned in a bacterial plasmid vector for further heterologous expression and antimicrobial tests. Methods AgCecropB sequence (without the signal peptide) was cloned in the plasmid vector pET-M30-MBP and expressed in the Escherichia coli BL21(DE3) expression host. Expression was induced with IPTG and a recombinant peptide was purified using two affinity chromatography steps with Histrap column. The purified peptide was submitted to high-resolution mass spectrometry (HRMS) and structural analyses. Antimicrobial tests were performed using gram-positive (Bacillus thuringiensis) and gram-negative (Burkholderia kururiensis and E. coli) bacteria. Results AgCecropB was expressed in E. coli BL21 (DE3) at 28°C with IPTG 0.5 mM. The recombinant peptide was purified and enriched after purification steps. HRMS confirmed AgCrecropB molecular mass (4.6 kDa) and circular dichroism assay showed α-helix structure in the presence of SDS. AgCrecropB inhibited almost 50% of gram-positive B. thuringiensis bacteria growth. Conclusions The first cecropin B-like peptide was described in A. gemmatalis and a recombinant peptide was expressed using a bacterial platform. Data confirmed tertiary structure as predicted for the cecropin peptide family. AgCecropB was capable to inhibit B. thuringiensis growth in vitro.(AU)

The sex ratio of the koinobiont parasitoid Microcharops anticarsiae Gupta remains female-biased on young larvae of velvetbean in the laboratory environment

The natural parasitic behavior of parasitoidsshould be known by those in charge of planning strategies for the biological control of pests; therefore, the aim of the present study was to determine the larval instar of Anticarsia gemmatalisHübner parasitized by Microcharops anticarsiaeGupta in the field and the implication of such parasitic behavior in the sex ratio in the laboratory environment. The length of each larval instar of A. gemmatalisparasitized by M. anticarsiaein the field was determined, and the egg-to-pupa period of the parasitoid and its larval instar lengths were plotted in Gantt charts. According to the chart, A. gemmatalis was parasitized at the first (15%) and second (85%) larval instars in the field, but the length of the first, second and third larval instars of this species was not affected by the parasitism by M. anticarsiaein the field; however, its fourth larval instar was extended and the fifth one was shortened in 2015 but not affected in 2016. The sex ratio of A. gemmatalislarvae parasitized byM. anticarsiaein the field was female-biased, and the sex ratio of early parasitized larvae (3-day old) in the laboratory environment was also female-biased for three cultivated generations. The ‘generation’ factor has affected the egg-to-pupa, pupal and egg-to-adult periods of M. anticarsiae, since females pupated earlier than males in the egg-to-pupa period. Based on the results, M. anticarsiaemostly parasitized the second larval instar of A. gemmatalisin the field, and parasitism in 3-day old larvae in the laboratory environment produced female-biased sex ratio in M. anticarsiae, regardless of the generation.

Owlet moths (Lepidoptera: Noctuoidea) associated with Bt and non- Bt soybean in the brazilian savanna / Noctuóides (Lepidoptera: Noctuoidea) associados a soja Bt e não-Bt no Cerrado brasileiro

The use of GMO expressing Bt toxin in soybean production has increased significantly in the last years in Brazil in order to manage the damage caused by lepidopteran pests. In this study, we compared the richness and abundance of owlet moths (Noctuoidea) associated with Bt and non-Bt soybean. We determined the temporal variations as a function of phenology, and correlated the population variations of the most common species with meteorological variables. The research was conducted at the experimental area of Embrapa Cerrados. The collection method used was differentiated being suppressive and absolute. A total of 13 species were collected, of which eight occurred on Bt soybeans. The most representative taxa were Chrysodeixis includens (72.87%), Anticarsia gemmatalis (18.17%) and Spodoptera spp (5.22%). The number of larvae belonging to species targeted by the Bt technology was 10 times lower on Bt than on non-Bt soybeans. Utetheisa ornatrix and Elaphria deltoides were recorded on soybean for the first time, observing larvae of both species in non-Bt soybean and those of U. ornatrix also in Bt soybean. Only A. gemmatalis larvae correlated (p 0.05) negatively with precipitation. This study provided field information on the abundance and species richness of owlet moths on non-Bt soybeans, associated with the effects of Bt soybean. When considering the different levels of infestation between cultivars as a criterion, larvae monitoring is of substantial importance in order to develop the lost control program.(AU)

O uso de OGM que expressam toxina Bt na produção de soja tem aumentado significativamente nos últimos anos no Brasil e são utilizados para conter os danos causados pelos lepidópteros pragas. Neste estudo comparamos a riqueza e a abundância de Noctuoides (Noctuoidea) associados à soja Bt e não-Bt. Determinamos as variações temporais em função da fenologia e correlacionamos às variações populacionais das espécies mais comuns com variáveis meteorológicas. A pesquisa foi conduzida na área experimental da Embrapa Cerrados. O método de coleta utilizado foi diferenciado sendo supressivo e absoluto. Um total de 13 espécies foram coletadas, das quais oito ocorreram em soja Bt. Os taxa mais representativos foram Chrysodeixis includens, Anticarsia gemmatalis e Spodoptera spp. O número de larvas pertencentes às espécies alvo da tecnologia Bt foram 10 vezes menores na soja Bt do que em soja não-Bt . Utetheisa ornatrix e Elaphria deltoides foram registradas na soja pela primeira vez, observando-se larvas de ambas espécies na soja não-Bt e as de U. ornatrix também na soja Bt. Somente as larvas de A. gemmatalis se correlacionaram (p 0,05) negativamente com a precipitação. Este estudo forneceu informações em campo sobre a abundância e riqueza de espécies na soja não- Bt, associada aos efeitos da soja Bt. A importância do monitoramento das lagartas é substancial, a fim de tomar a melhor decisão de controle, considerando-se os diferentes níveis de infestação entre cultivares como critério.(AU)

Aplicação foliar de silício na produtividade e sanidade de cultivares de soja / Foliar spraying with silicon in the yield and health of soybean cultivars

A soja é uma das principais espécies agrícolas cultivadas no Brasil, porém, pode ter a produtividade reduzida pela incidência de pragas e doenças. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de silício em diferentes estádios fenológicos da soja na severidade da ferrugem asiática (FAS), população de lagartas desfolhadoras e produtividade. O experimento foi conduzido no município de Chapadão do Sul, MS, durante a safra 2012/2013, em blocos casualizados, com cinco repetições e em esquema fatorial (2x5). Os fatores foram: duas cultivares de soja (Anta 82 RR e CD 2737 RR) e cinco tratamentos para o manejo da FAS (T1- testemunha negativa; T2- silicato de alumínio em R1 + R4; T3- silicato de alumínio em V5 + R1 + R4; T4- silicato de alumínio em V5 + R1 + R4 + R5.1; e T5- testemunha positiva: trifloxistrobina + protioconazol em R1 + R4). A severidade da FAS foi estimada periodicamente para o cálculo da área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD) e a desfolha e a produtividade foram avaliadas ao final do ciclo da cultura. O monitoramento da população de lagartas desfolhadoras foi realizado semanalmente por meio de pano de batida. A aplicação de silicato de alumínio reduziu a severidade da FAS e a AACPD em relação à testemunha, porém os valores foram significativamente maiores que os observados para a testemunha positiva. Houve incremento da produtividade de grãos quando foram realizadas três e quatro aplicações de silicato de alumínio e não se verificou redução do nível populacional de lagartas desfolhadoras.

Soybean is one of the main agricultural species cultivated in Brazil, but it may have reduced yield due to the incidence of pests and diseases. This study aimed to evaluate the effect of silicon spray at different soybean phenological stages on the severity of Asian rust (AR), the soybean caterpillar population, and the yield of soybean. The experiment was conducted in the 2012/2013 crop season through a randomized complete block with five replications and factorial scheme (2x5). The factors were two soybean cultivars (Anta 82 RR and CD 2737 RR) and five treatments for AR management (T1- negative control; T2- aluminum silicate in R1 + R4; T3- aluminum silicate in V5 + R1 + R4; T4- aluminum silicate in V5 + R1 + R4 + R5.1; and T5- positive control: trifloxystrobin + prothioconazole in R1 + R4). Defoliation, disease severity, area under the disease progress curve (AUDPC) and yield were evaluated. Soybean caterpillar population was monitored weekly using a beating sheet. Sprays of aluminum silicate reduced the severity of AR and AUDPC in relation to the control, but it was less effective than the positive control. Grain yield increased when three and four aluminum silicate sprays were performed, and the population level of soybean caterpillars was not reduced by silicon.

Aplicação foliar de silício na produtividade e sanidade de cultivares de soja / Foliar spraying with silicon in the yield and health of soybean cultivars

A soja é uma das principais espécies agrícolas cultivadas no Brasil, porém, pode ter a produtividade reduzida pela incidência de pragas e doenças. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de silício em diferentes estádios fenológicos da soja na severidade da ferrugem asiática (FAS), população de lagartas desfolhadoras e produtividade. O experimento foi conduzido no município de Chapadão do Sul, MS, durante a safra 2012/2013, em blocos casualizados, com cinco repetições e em esquema fatorial (2x5). Os fatores foram: duas cultivares de soja (Anta 82 RR e CD 2737 RR) e cinco tratamentos para o manejo da FAS (T1- testemunha negativa; T2- silicato de alumínio em R1 + R4; T3- silicato de alumínio em V5 + R1 + R4; T4- silicato de alumínio em V5 + R1 + R4 + R5.1; e T5- testemunha positiva: trifloxistrobina + protioconazol em R1 + R4). A severidade da FAS foi estimada periodicamente para o cálculo da área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD) e a desfolha e a produtividade foram avaliadas ao final do ciclo da cultura. O monitoramento da população de lagartas desfolhadoras foi realizado semanalmente por meio de pano de batida. A aplicação de silicato de alumínio reduziu a severidade da FAS e a AACPD em relação à testemunha, porém os valores foram significativamente maiores que os observados para a testemunha positiva. Houve incremento da produtividade de grãos quando foram realizadas três e quatro aplicações de silicato de alumínio e não se verificou redução do nível populacional de lagartas desfolhadoras.(AU)

Soybean is one of the main agricultural species cultivated in Brazil, but it may have reduced yield due to the incidence of pests and diseases. This study aimed to evaluate the effect of silicon spray at different soybean phenological stages on the severity of Asian rust (AR), the soybean caterpillar population, and the yield of soybean. The experiment was conducted in the 2012/2013 crop season through a randomized complete block with five replications and factorial scheme (2x5). The factors were two soybean cultivars (Anta 82 RR and CD 2737 RR) and five treatments for AR management (T1- negative control; T2- aluminum silicate in R1 + R4; T3- aluminum silicate in V5 + R1 + R4; T4- aluminum silicate in V5 + R1 + R4 + R5.1; and T5- positive control: trifloxystrobin + prothioconazole in R1 + R4). Defoliation, disease severity, area under the disease progress curve (AUDPC) and yield were evaluated. Soybean caterpillar population was monitored weekly using a beating sheet. Sprays of aluminum silicate reduced the severity of AR and AUDPC in relation to the control, but it was less effective than the positive control. Grain yield increased when three and four aluminum silicate sprays were performed, and the population level of soybean caterpillars was not reduced by silicon.(AU)

Owlet moths (Lepidoptera: Noctuoidea) associated with Bt and non- Bt soybean in the brazilian savanna

Abstract The use of GMO expressing Bt toxin in soybean production has increased significantly in the last years in Brazil in order to manage the damage caused by lepidopteran pests. In this study, we compared the richness and abundance of owlet moths (Noctuoidea) associated with Bt and non-Bt soybean. We determined the temporal variations as a function of phenology, and correlated the population variations of the most common species with meteorological variables. The research was conducted at the experimental area of Embrapa Cerrados. The collection method used was differentiated being suppressive and absolute. A total of 13 species were collected, of which eight occurred on Bt soybeans. The most representative taxa were Chrysodeixis includens (72.87%), Anticarsia gemmatalis (18.17%) and Spodoptera spp (5.22%). The number of larvae belonging to species targeted by the Bt technology was 10 times lower on Bt than on non-Bt soybeans. Utetheisa ornatrix and Elaphria deltoides were recorded on soybean for the first time, observing larvae of both species in non-Bt soybean and those of U. ornatrix also in Bt soybean. Only A. gemmatalis larvae correlated (p 0.05) negatively with precipitation. This study provided field information on the abundance and species richness of owlet moths on non-Bt soybeans, associated with the effects of Bt soybean. When considering the different levels of infestation between cultivars as a criterion, larvae monitoring is of substantial importance in order to develop the lost control program.

Resumo O uso de OGM que expressam toxina Bt na produção de soja tem aumentado significativamente nos últimos anos no Brasil e são utilizados para conter os danos causados pelos lepidópteros pragas. Neste estudo comparamos a riqueza e a abundância de Noctuoides (Noctuoidea) associados à soja Bt e não-Bt. Determinamos as variações temporais em função da fenologia e correlacionamos às variações populacionais das espécies mais comuns com variáveis meteorológicas. A pesquisa foi conduzida na área experimental da Embrapa Cerrados. O método de coleta utilizado foi diferenciado sendo supressivo e absoluto. Um total de 13 espécies foram coletadas, das quais oito ocorreram em soja Bt. Os taxa mais representativos foram Chrysodeixis includens, Anticarsia gemmatalis e Spodoptera spp. O número de larvas pertencentes às espécies alvo da tecnologia Bt foram 10 vezes menores na soja Bt do que em soja não-Bt . Utetheisa ornatrix e Elaphria deltoides foram registradas na soja pela primeira vez, observando-se larvas de ambas espécies na soja não-Bt e as de U. ornatrix também na soja Bt. Somente as larvas de A. gemmatalis se correlacionaram (p 0,05) negativamente com a precipitação. Este estudo forneceu informações em campo sobre a abundância e riqueza de espécies na soja não- Bt, associada aos efeitos da soja Bt. A importância do monitoramento das lagartas é substancial, a fim de tomar a melhor decisão de controle, considerando-se os diferentes níveis de infestação entre cultivares como critério.

Owlet moths (Lepidoptera: Noctuoidea) associated with Bt and non- Bt soybean in the brazilian savanna

Abstract The use of GMO expressing Bt toxin in soybean production has increased significantly in the last years in Brazil in order to manage the damage caused by lepidopteran pests. In this study, we compared the richness and abundance of owlet moths (Noctuoidea) associated with Bt and non-Bt soybean. We determined the temporal variations as a function of phenology, and correlated the population variations of the most common species with meteorological variables. The research was conducted at the experimental area of Embrapa Cerrados. The collection method used was differentiated being suppressive and absolute. A total of 13 species were collected, of which eight occurred on Bt soybeans. The most representative taxa were Chrysodeixis includens (72.87%), Anticarsia gemmatalis (18.17%) and Spodoptera spp (5.22%). The number of larvae belonging to species targeted by the Bt technology was 10 times lower on Bt than on non-Bt soybeans. Utetheisa ornatrix and Elaphria deltoides were recorded on soybean for the first time, observing larvae of both species in non-Bt soybean and those of U. ornatrix also in Bt soybean. Only A. gemmatalis larvae correlated (p 0.05) negatively with precipitation. This study provided field information on the abundance and species richness of owlet moths on non-Bt soybeans, associated with the effects of Bt soybean. When considering the different levels of infestation between cultivars as a criterion, larvae monitoring is of substantial importance in order to develop the lost control program.

Resumo O uso de OGM que expressam toxina Bt na produção de soja tem aumentado significativamente nos últimos anos no Brasil e são utilizados para conter os danos causados pelos lepidópteros pragas. Neste estudo comparamos a riqueza e a abundância de Noctuoides (Noctuoidea) associados à soja Bt e não-Bt. Determinamos as variações temporais em função da fenologia e correlacionamos às variações populacionais das espécies mais comuns com variáveis meteorológicas. A pesquisa foi conduzida na área experimental da Embrapa Cerrados. O método de coleta utilizado foi diferenciado sendo supressivo e absoluto. Um total de 13 espécies foram coletadas, das quais oito ocorreram em soja Bt. Os taxa mais representativos foram Chrysodeixis includens, Anticarsia gemmatalis e Spodoptera spp. O número de larvas pertencentes às espécies alvo da tecnologia Bt foram 10 vezes menores na soja Bt do que em soja não-Bt . Utetheisa ornatrix e Elaphria deltoides foram registradas na soja pela primeira vez, observando-se larvas de ambas espécies na soja não-Bt e as de U. ornatrix também na soja Bt. Somente as larvas de A. gemmatalis se correlacionaram (p 0,05) negativamente com a precipitação. Este estudo forneceu informações em campo sobre a abundância e riqueza de espécies na soja não- Bt, associada aos efeitos da soja Bt. A importância do monitoramento das lagartas é substancial, a fim de tomar a melhor decisão de controle, considerando-se os diferentes níveis de infestação entre cultivares como critério.

Activity of plant aqueous extracts on Bacillus thuringiensis and their interactions on Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebinae) / Atividade de extratos vegetais aquosos sobre Bacillus thuringiensis e a interação destes sobre Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebinae)

The association of plant extracts and B. thuringiensis may be important in situations that control of different insects species is required and/or control of insects in various development stages. However, extracts may have different effects on B. thuringiensis, compromising their mode of action. Thus, the objective of this study was to evaluate the activity of aqueous plant extracts on Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki (Btk) and their interactions on Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebinae). Cherry plant extracts (Eugenia uniflora), pepper (Capsicum baccatum), trumpet (Brugmansia suaveolens) and grape japan (Hovenia dulcis), were used at 5% concentrations. For compatibility studies, the extracts were mixed with Thuricide® (Btk) and the parameters evaluated were Colony Formation Units (CFU mL-1) for spores and, the A. gemmatalis mortality for crystals. The cherry extracts, pepper, and japan grape completely inhibited the CFU ml-1 of Btk and the cherry extract alone negatively affected the toxicity of Btk crystals, with significantly lower mortality of A. gemmatalis (20.40%) than that observed in the control with only Btk (79.44%). In the association between cherry, pepper, and grape japan extracts with B. thuringiensis, the extracts exhibited a negative effect in the formation of CFU. The cherry extract demonstrated a negative effect on crystals action.(AU)

A associação de extratos vegetais e B. thuringiensis pode ser importante em situações que em que se necessite controlar diferentes espécies de insetos-praga e ou insetos em diferentes fases de desenvolvimento. No entanto, os extratos podem apresentar diferentes efeitos sobre B. thuringiensis, comprometendo o seu modo de ação. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de extratos vegetais aquosos sobre Bacillus thuringiensis subesp. kurstaki (Btk) e a interação destes sobre Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebinae). Foram utilizados extratos vegetais aquosos de pitanga (Eugenia uniflora), pimenta (Capsicum baccatum), trombeta (Brugmansia suaveolens) e uva-do-japão (Hovenia dulcis), na concentração de 5%. Para estudar a comaptiilidade a B. thuringiensis, os extratos foram misturados com Thuricide® (Btk) e, os parâmetros avaliados foram unidades formadoras de colônia (UFC mL-1) para esporos e, para cristais, a mortalidade de A. gemmatalis. Os extratos de pitanga, pimenta e uva-do-japão inibiram totalmente a formação de UFC mL-1 de Btk e, apenas o extrato de pitanga afetou negativamente a toxicidade dos cristais de Btk, com redução significativa da mortalidade de A. gemmatalis (20,40%), em relação à testemunha Btk (79,44%). Na associação entre os extratos de pitanga, pimenta e uva-do-japão com B. thuringiensis estes interferem negativamente na formação de UFC e o extrato de pitanga apresenta efeito negativo para a ação dos cristais.(AU)

Bacillus thuringiensis Berliner e Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) sob ação de extratos vegetais / Bacillus thuringiensis Berliner and Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) under the action of plant extracts

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de extratos vegetais aquosos de jambolão, Syzygium cumini (L.) Skeels (Myrtaceae), mamona, Ricinus communis (L.) (Euphorbiaceae), uva-do-japão, Hovenia dulcis (Thumberg) (Rhamnaceae) e urucum (Bixa orellana (L.) (Bixaceae), na concentração de 10%, sobre Bacillus thuringiensis subesp. kurstaki(Btk) e sobre Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebidae) e a associação destes sobre A. gemmatalis, em condições de laboratório. Os tratamentos constaram dos extratos aquosos e Btk isoladamente e a mistura de cada extrato com Btk. Estes foram incubados em agitador horizontal (30 ± 2°C, 150 rpm por 2 h) e, em seguida, aplicados sobre cubos de dieta artificial para A. gemmatalis, em placas de Petri. Como testemunha utilizou-se água destilada esterilizada. Cada tratamento constou de 4 placas de Petri (repetição), com 25 lagartas de segundo ínstar cada. Estas foram acondicionadas em câmara climatizada (27 ± 2°C umidade relativa 70 ± 10% e fotofase 14 h), avaliando-se a mortalidade após 24, 48 e 72 h. Também foram avaliados o percentual de empupamento e o peso das pupas dos insetos sobreviventes. Nenhum dos extratos apresentou efeito inseticida para A. gemmatalis e efeito negativo para os cristais de Btk. A mortalidade acumulada causada pelos extratos de uva-do-japão, jambolão, urucum e mamona foram, respectivamente, de 54,73; 46,09; 47,19 e 65,73%; diferindo significativamente da testemunha (95,74%). O peso médio das pupas não diferiu significativamente entre os tratamentos. A associação dos extratos de uva-do-japão, colorau e mamona com Btk provocou mortalidade acumulada de 100% em A. gemmatalis.(AU)

This study aimed to evaluate the effect of aqueous plant extracts of jambolan, Syzygium cumini (L.) Skeels (Myrtaceae), castor bean, Ricinus communis (L.) (Euphorbiaceae), grape japan, Hovenia dulcis (Thumberg) (Rhamnaceae) and urucum, Bixa orellana (L.) (Bixaceae) at a concentration of 10% on Bacillus thuringiensis subsp kurstaki(Btk) and on Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebidae), and the association of these on A. gemmatalis. The treatments consisted of aqueous extracts and Btk alone and the mixture of extract with Btk. These were incubated in a horizontal shaker (30 ± 2°C, 150 rpm for 2 h) and then applied to artificial diet cubes for A. gemmatalis in Petri dishes. As a control it was used sterile distilled water. Each treatment consisted of 4 Petri dishes (repetition) with 25 second instar larvae each. The disches were placed in a climatic chamber (27 ± 2°C, relative humidity 70 ± 10% and 14 h photoperiod), assessing the mortality after 24, 48 and 72 h. The percentage pupal and pupae weight of surviving insect were also assessed. None of the extracts showed insecticidal eff for A. gemmatalis and negative eff for crystals Btk. The cumulative mortality caused by extracts of grape japan, jambolan, urucum and castor bean were respectively 54.73; 46.09; 47.19 and 65.73%, diff significantly from the control (95.74%). The average weight of pupae did not diff significantly among treatments. The association of extracts of grape japan, urucun and castor bean with Btk caused 100% cumulative mortality in A. gemmatalis.(AU)

Bacillus thuringiensis Berliner e Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) sob ação de extratos vegetais / Bacillus thuringiensis Berliner and Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Erebidae) under the action of plant extracts

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de extratos vegetais aquosos de jambolão, Syzygium cumini (L.) Skeels (Myrtaceae), mamona, Ricinus communis (L.) (Euphorbiaceae), uva-do-japão, Hovenia dulcis (Thumberg) (Rhamnaceae) e urucum (Bixa orellana (L.) (Bixaceae), na concentração de 10%, sobre Bacillus thuringiensis subesp. kurstaki(Btk) e sobre Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebidae) e a associação destes sobre A. gemmatalis, em condições de laboratório. Os tratamentos constaram dos extratos aquosos e Btk isoladamente e a mistura de cada extrato com Btk. Estes foram incubados em agitador horizontal (30 ± 2°C, 150 rpm por 2 h) e, em seguida, aplicados sobre cubos de dieta artificial para A. gemmatalis, em placas de Petri. Como testemunha utilizou-se água destilada esterilizada. Cada tratamento constou de 4 placas de Petri (repetição), com 25 lagartas de segundo ínstar cada. Estas foram acondicionadas em câmara climatizada (27 ± 2°C umidade relativa 70 ± 10% e fotofase 14 h), avaliando-se a mortalidade após 24, 48 e 72 h. Também foram avaliados o percentual de empupamento e o peso das pupas dos insetos sobreviventes. Nenhum dos extratos apresentou efeito inseticida para A. gemmatalis e efeito negativo para os cristais de Btk. A mortalidade acumulada causada pelos extratos de uva-do-japão, jambolão, urucum e mamona foram, respectivamente, de 54,73; 46,09; 47,19 e 65,73%; diferindo significativamente da testemunha (95,74%). O peso médio das pupas não diferiu significativamente entre os tratamentos. A associação dos extratos de uva-do-japão, colorau e mamona com Btk provocou mortalidade acumulada de 100% em A. gemmatalis.(AU)

This study aimed to evaluate the effect of aqueous plant extracts of jambolan, Syzygium cumini (L.) Skeels (Myrtaceae), castor bean, Ricinus communis (L.) (Euphorbiaceae), grape japan, Hovenia dulcis (Thumberg) (Rhamnaceae) and urucum, Bixa orellana (L.) (Bixaceae) at a concentration of 10% on Bacillus thuringiensis subsp kurstaki(Btk) and on Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Erebidae), and the association of these on A. gemmatalis. The treatments consisted of aqueous extracts and Btk alone and the mixture of extract with Btk. These were incubated in a horizontal shaker (30 ± 2°C, 150 rpm for 2 h) and then applied to artificial diet cubes for A. gemmatalis in Petri dishes. As a control it was used sterile distilled water. Each treatment consisted of 4 Petri dishes (repetition) with 25 second instar larvae each. The disches were placed in a climatic chamber (27 ± 2°C, relative humidity 70 ± 10% and 14 h photoperiod), assessing the mortality after 24, 48 and 72 h. The percentage pupal and pupae weight of surviving insect were also assessed. None of the extracts showed insecticidal eff for A. gemmatalis and negative eff for crystals Btk. The cumulative mortality caused by extracts of grape japan, jambolan, urucum and castor bean were respectively 54.73; 46.09; 47.19 and 65.73%, diff significantly from the control (95.74%). The average weight of pupae did not diff significantly among treatments. The association of extracts of grape japan, urucun and castor bean with Btk caused 100% cumulative mortality in A. gemmatalis.(AU)

Precipitação artificial após aplicação do inseticida clorantraniliprole associado com adjuvante em plantas de soja / Artificial precipitation after spray of clorantraniliprole insecticide associated with adjuvant application in soybean plants

O controle de insetos-praga com inseticidas é um recurso importante para manutenção das altas produtividades na cultura da soja. Porém, pouco se conhece sobre o desempenho de novos inseticidas, tais como, clorantraniliprole em condições adversas, como é o caso das precipitações pluviométricas após a pulverização agrícola. A ação dos adjuvantes associados aos inseticidas é outro fator relacionado à melhora da sua eficiência. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de quatro períodos de precipitação artificial após a pulverização do inseticida clorantraniliprole (2g de ingrediente ativo ha-1), misturado com diferentes adjuvantes, visando ao o controle de lagartas na cultura da soja. O experimento foi executado com o uso de duas cultivares (blocos) e seis vasos (2 plantas/vaso) por tratamento fatorial (5x5). O fator adjuvante foi constituído por uma testemunha (sem adjuvante) e quatro adjuvantes (Assist(r) - 0,5% do volume de calda, Naturo'il(r) - 0,5%, Nitro LL(r) - 6,6% (10L ha-1) e Silwet L-77(r) - 0,1%). O fator precipitação artificial (20mm) foi composto por uma testemunha (sem precipitação) e quatro tempos (1, 120, 240 e 360 minutos) após a pulverização de clorantraniliprole com adjuvantes. Os resultados sugerem que a precipitação de 20 mm, um minuto após a aplicação de clorantraniliprole, reduz a mortalidade de Anticarsia gemmatalis, e que as precipitações após 240 minutos da aplicação de clorantraniliprole não interferem na mortalidade de A. gemmatalis em soja. Os adjuvantes Assist(r) e Naturo'il(r) associados ao inseticida clorantraniliprole aumentam a mortalidade de A. gemmatalis na cultura da soja.(AU)

The insecticide use on insect pest control is an important tool to keep high yields on soybeans. However, little is known about the behavior of the insecticide in adverse conditions, such as spraying followed by precipitation. The use of adjuvants associated with insecticides is another factor that can be related to improvement of its efficiency. This study aimed to evaluate the effects of the influence of four precipitation periods after the pulverization of the insecticide clorantraniliprole (2g of the active ingredient ha-1). A mixed of different adjuvants on the control of caterpillars on soybeans were evaluated. The assay was performed using two cultivars in six pots (2 plants/pots) for a factor scheme of 5x5. The factor adjuvants consisted of one untreated (without adjuvants) and four adjuvants (Assist(r) - 0,5%, Naturo'il(r) - 0,5%, Nitro LL(r) - L ha-1 and Silwet L-77(r) - 0,1% ). The factor artificial precipitation (20mm) consisted of one untreated (without precipitation) and four precipitation intervals (1, 120, 240 and 360 minutes) after the application of clorantraniliprole with adjuvants. The results showed that the precipitation of 20mm, 1 minute after the clorantraniliprole pulverization, reduces the Anticarsia gemmatalis mortality, and that the precipitation 240 min after the pulverization does not interfere in the mortality of A. gemmatalis on soybeans. The adjuvants Assist(r) and Naturo'il(r) associated to the insecticide clorantraniliprole increases the A. gemmatalis mortality on soybeans.(AU)

Análise da atividade anti-apoptótica do gene US3 de alfaherpesvírus bovino tipo 5 em baculovírus

O Alphaherpesvirus bovino tipo 5 (BoHV-5) é um dos principais agentes responsáveis pela meningoencefalite em bovinos no Brasil, causando perdas econômicas significativas. Sabe-se que outros vírus da família Herpesviridae, como o Alphaherpesvirus bovino tipo 1, o Alphaherpesvirus suíno tipo 1 e o Alphaherpesvirus humano tipo 1 e 2, codificam genes homólogos ao BoHV-5, com reconhecida ação no controle da apoptose. O objetivo deste trabalho foi expressar o gene BoHV-5 US3 em um sistema de expressão baseado em baculovírus para a produção da proteína serina/treonina quinase e avaliar sua atividade no controle da apoptose in vitro. Um baculovírus recombinante derivado do Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) contendo o gene US3 e uma deleção no gene p35 anti-apoptótico de baculovírus foi construído usando o sistema Bac-to-BacTM. Este baculovírus recombinante foi utilizado para avaliar a atividade anti-apoptótica do gene US3 em células de inseto comparando-o com outros dois recombinantes de AcMNPV. Um vírus contendo uma cópia funcional do gene anti-apoptótico p35 de AcMNPV e outro AcMNPV p35 knockout com o gene iap-3anti-apoptótico do vírus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV). Descobrimos que o nível de caspase (indicador de apoptose) foi maior nas células de inseto infectadas com o vírus recombinante contendo o gene US3 do que nas células infectadas com os recombinantes AcMNPV com os genes p35 e iap-3.Além disso, o gene iap-3AgMNPV foi capaz de substituir eficientemente o gene p35 no controle da apoptose durante a infecção de células de insetos pelo recombinante AcMNPV contendo o gene iap-3. Estes resultados indicam que o gene da proteína quinase BoHV-5 US3 não é capaz de bloquear a apoptose em células de inseto induzidas pela infecção de um AcMNPV p35 knockout

Bovine alphaherpesvirus type 5 (BoHV-5) is one of the main agents responsible for meningoencephalitis in bovines in Brazil, causing significant economic losses. It is known that other viruses of the Herpesviridae family such as Bovine alphaherpesvirus type 1, Swine alphaherpesvirus type 1 and the Human alphaherpesvirus types 1 and 2 encode genes homologous to BoHV-5, with recognized action in the control of apoptosis. The objective of this work was to express the BoHV-5 US3 gene in a baculovirus based expression system for the production of the serine/threonine kinase protein and to evaluate its activity in the control of apoptosis in vitro. A recombinant baculovirus derived from the Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) containing the US3 gene and a deletion in the baculovirus anti-apoptotic gene p35 gene was constructed using the Bac-to-BacTMsystem. This recombinant baculovirus was used to evaluate the anti-apoptotic activity of the US3 gene in insect cells comparing with two other AcMNPV recombinants. One containing a functional copy of the AcMNPV anti-apoptotic p35 gene and an AcMNPV p35 knockout virus with the anti-apoptotic iap-3 gene from Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV). We found that the caspase level (indicator of apoptosis) was higher in insect cells infected with the US3-contanining recombinant virus than in cells infected with the AcMNPV recombinants containing the p35 and iap-3 genes. Moreover, the AgMNPV iap-3 gene was able to efficiently substitute the p35 gene in the control of apoptosis during infection of insect cellsby the AcMNPV recombinant containing the iap-3 gene. These results indicate that the BoHV-5 US3 protein kinase gene is not able to block apoptosis in insect cells induced by the infection of a p35 knockout AcMNPV.

Persistência do baculovírus anticarsia após diferentes regimes pluviométricos / Velvet-bean nucleopolyhedrovirus persistence after different rainfall intensities

A persistência do vírus da lagarta-da-soja AgMNPV, produzido de forma bruta (maceração de lagartas) e liofilizada (produto comercial), foi avaliada após a aplicação em plantas de soja seguida de diferentes regimes pluviométricos (0; 10; 20; 30mm) na intensidade de 30mm.hora-1. Essas precipitações foram simuladas com microaspersores, em casa-de-vegetação. Após a simulação, a soja foi oferecida às lagartas zero, três, seis e nove dias após a aplicação (DAP). As plantas, durante esse período, foram mantidas em casa-de-vegetação, protegidas da chuva. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em condições controladas (UR 70±10%, 25±2°C, fotofase de 14h), em esquema fatorial 4 (intensidades de precipitações pluviométricas) x 2 (formulações de vírus, bruta e liofilizada) com quatro repetições, com 30 lagartas cada. Os resultados comprovam que precipitações até 30mm, em 60 minutos, não reduzem a mortalidade das lagartas, causada por AgMNPV em ambas as formas de produção, quando a oferta das folhas às lagartas ocorre no mesmo dia da aplicação. As formas de preparo do AgMNPV influenciaram na persistência do vírus aos seis DAP. Nesta avaliação, a taxa de mortalidade foi superior a 90%, quando o produto bruto foi aplicado e inferior a 50% para o produto liofilizado. Esses resultados indicam que a eficiência de AgMNPV não é afetada por chuvas de até 30mm em uma hora, para ambas as formas de preparo do AgMNPV. Entretanto, ao longo dos dias, o método de preparo bruto apresenta-se mais eficiente, devido à maior persistência sobre a área foliar da soja após a lavagem pela água.(AU)

The persistence of the velvet-bean nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) produced raw (macerated caterpillars) and lyophilized (commercial product) was evaluated after spraying in soybean plants followed by different simulated rainfall rates (0; 10; 20; 30mm) at 30mm hour-1 rate. Rainfall was simulated in greenhouse through micro sprinkler irrigation. After simulated rainfall, soybean leaves were offered to caterpillar in laboratory conditions at zero, three, six and nine days after spraying (DAS). Soybean plants were kept in greenhouse protected from rainfall. Trial was carried out in complete randomized design, under controlled conditions (RH 70%±10%, 25±2°C, 14h photophase) in a factorial 4 (rainfall rates) x2 (formulations, raw and lyophilized) with four replicates of 30 caterpillars. Results indicate that rainfall rates up to 30mm, in 60 minutes, do not decrease caterpillar mortality caused by AgMNPV regarding to both tested baculovirus formulations, raw and lyophilized virus, when leaves were offered to caterpillars at zero DAS. However, virus production (raw or lyophilized) impacted its persistence. Six DAS, mortality rate was higher than 90% when the virus was applied raw and lower than 50% when it was applied lyophilized. These results suggest that both raw and lyophilized AgMNPV efficacy is not impaired by 30-mm rainfalls at 30mm hour-1 rate. However, raw virus was more efficient in a long term evaluation since it had longer persistence on soybean leaves after being water washed.(AU)

Purification of a membrane-bound trypsin-like enzyme from the gut of the velvetbean caterpillar (Anticarsia gemmatalis Hübner) - doi: 10.4025/actascibiolsci.v34i3.9239

Disruption of protein digestion in insects by specific endoprotease inhibitors is being regarded as an alternative to conventional insecticides for pest control. To optimize the effectiveness of this strategy, the understanding of the endoprotease diversity of the target insect is crucial. In this sense, a membrane-bound trypsin-like enzyme from the gut of Anticarsia gemmatalis fifth-instar larvae was purified. Non-soluble fraction of the gut extract was solubilized with 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate (CHAPS) and subjected to a p-aminobenzamidine affinity chromatography followed by anion-exchange chromatography. The yield of the purified enzyme was 11% with a purification factor of 143 and a final specific activity of 18.6 µM min.-1 mg-1 protein using N--benzoyl-L- Arg-p-nitroanilide (L-BApNA) as substrate. The purified sample showed a single band with proteolytic activity active and apparent molecular mass of 25 kDa on SDS-PAGE. Molecular mass determined by MALDI-TOF mass spectrometry was 28,632 ± 26 Da. Although the low recovery and the difficulties in purifying large enzyme amounts limited its further characterization, the results contribute for the understanding of the proteases present on A. gemmatalis gut, which are potential targets for natural or specifically designed protease inhibitors.

Two new Brazilian isolates of Bacillus thuringiensis toxic to Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae)

Bacillus thuringiensis is a bacterium used for biopesticides production and pest-resistant plants due to the synthesis of protein crystals by cry genes, which are effective in controlling several insect orders such as Lepidoptera. This work aimed at the evaluation and characterisation of two new B. thuringiensis isolates active against A. gemmatalis (Hübner 1818) larvae, which is the soybean major pest. The results showed that Bt117-4 isolate amplified fragments corresponding to cry2 and cry9 genes, and synthesised protein fragments equivalent to 130, 90 and 45 kDa. The Bt3146-4 isolate amplified DNA fragments corresponding to cry9 gene and synthesised protein fragments of 70, 58 and 38 kDa. Transmission electron microscopy revealed the presence of protein crystals in both isolates. CL50 with Cry purified proteins from Bt117-4 and Bt3146-4, corresponded to 0.195 and 0.191 µg larvae-1, respectively. The two B. thuringiensis isolates selected in this study were effective to control velvetbean caterpillar at laboratory conditions. Field tests should be carried on to develop new biopesticides formulation as well for cry genes resource for Anticarsia gemmatalis resistant transgenic plants.

Bacillus thuringiensis é uma bactéria utilizada na produção de biopesticidas e de plantas resistentes às pragas por causa da síntese de cristais proteicos pelos genes cry, os quais são eficazes no controle de diversas ordens de insetos, como os lepidópteros. O presente trabalho objetivou a avaliação e a caracterização de dois novos isolados de B. thuringiensis ativos contra lagartas de A. gemmatalis (Hübner 1818), que é a principal praga da cultura da soja. Os resultados obtidos revelaram que o isolado Bt117-4 amplificou fragmentos correspondentes aos genes cry2 e cry9, sendo que os fragmentos proteicos sintetizados foram equivalentes a 130, 90 e 45 kDa. O isolado Bt3146-4 amplificou fragmentos de DNA que correspondem ao gene cry9 e sintetizou fragmentos proteicos de 70, 58, e 38 kDa. Os dados de microscopia eletrônica de transmissão revelam a presença de cristais proteicos em ambos os isolados. A CL50, com proteínas Cry purificadas de Bt117-4 e Bt3146-4, correspondeu a 0,195 e 0,191 µg lagarta-1, respectivamente. Os dois isolados de B. thuringiensis selecionados neste trabalho mostraram-se eficientes no controle da lagarta-da-soja em laboratório, sendo recomendada sua avaliação a campo para posterior aplicação na formulação de biopesticidas ou como fonte de genes cry para a obtenção de plantas geneticamente modificadas resistentes à Anticarsia gemmatalis.