Isoliquiritigenin regulates the circ_0002860/miR-431-5p/RAB9A axis to function as a tumor inhibitor in melanoma

Background: Isoliquiritigenin (ISL) presents antitumor effects against melanoma cells. It is known that various circular RNAs (circRNAs) are involved in the development of melanoma. Therefore, the present study aims to investigate the molecular mechanisms of ISL and circ_0002860. Methods: Circ_0002860, microRNA-431-5p (miR-431-5p) and member RAS oncogene family (RAB9A) were detected through reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) assay. Cell viability was examined via cell counting kit-8 assay. The proliferation ability was assessed using colony formation assay. Cell apoptosis and cell cycle were determined by flow cytometry. Transwell assay was used for detection of migration and invasion. Western blot was conducted for protein analysis. Target binding was confirmed via dual-luciferase reporter assay and RNA immunoprecipitation (RIP) assay. In vivo research was performed through xenograft tumor assay. Results: Circ_0002860 was downregulated by ISL in melanoma cells. ISL-induced inhibitory effects on cell proliferation, cell cycle progression, migration and invasion were alleviated by circ_0002860 overexpression. MiR-431-5p was a target of circ_0002860. Circ_0002860 eliminated the ISL-induced tumor inhibition via sponging miR-431-5p in melanoma cells. Circ_0002860 elevated the RAB9A level by targeting miR-431-5p. The function of ISL was related to miR-431-5p/RAB9A axis in melanoma progression. Tumor growth was reduced by ISL in vivo through downregulating circ_0002860 to regulate miR-431-5p and RAB9A levels. Conclusion: The current data indicates that ISL suppressed cell malignant progression of melanoma via targeting the circ_0002860/miR-431-5p/RAB9A pathway.(AU)

Mitigation of cisplatin induced nephrotoxicity by casticin in male albino rats / Mitigação da nefrotoxicidade induzida pela cisplatina pela casticina em ratos albinos machos

Cisplatin (CP) is a commonly used, powerful antineoplastic drug, having numerous side effects. Casticin (CAS) is considered as a free radical scavenger and a potent antioxidant. The present research was planned to assess the curative potential of CAS on CP persuaded renal injury in male albino rats. Twenty four male albino rats were distributed into four equal groups. Group-1 was considered as a control group. Animals of Group-2 were injected with 5mg/kg of CP intraperitoneally. Group-3 was co-treated with CAS (50mg/kg) orally and injection of CP (5mg/kg). Group-4 was treated with CAS (50mg/kg) orally throughout the experiment. CP administration substantially reduced the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutathione S-transferase (GST), glutathione reductase (GSR), glutathione (GSH) content while increased thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and hydrogen peroxide (H2O2) levels. Urea, urinary creatinine, urobilinogen, urinary proteins, kidney injury molecule-1 (KIM-1), and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) levels were substantially increased. In contrast, albumin and creatinine clearance was significantly reduced in CP treated group. The results demonstrated that CP significantly increased the inflammation indicators including nuclear factor kappa-B (NF-κB), tumor necrosis factor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6) levels and cyclooxygenase-2 (COX-2) activity and histopathological damages. However, the administration of CAS displayed a palliative effect against CP-generated renal toxicity and recovered all parameters by bringing them to a normal level. These results revealed that the CAS is an effective compound having the curative potential to counter the CP-induced renal damage.

A cisplatina (CP) é uma droga antineoplásica poderosa, comumente usada, com vários efeitos colaterais. Casticin (CAS) é considerado um eliminador de radicais livres e um potente antioxidante. A presente pesquisa foi planejada para avaliar o potencial curativo da CAS em lesão renal induzida por PC em ratos albinos machos. Vinte e quatro ratos albinos machos foram distribuídos em quatro grupos iguais. O Grupo 1 foi considerado grupo controle. Os animais do Grupo 2 foram injetados com 5 mg / kg de PB por via intraperitoneal. O Grupo 3 foi cotratado com CAS (50 mg / kg) por via oral e injeção de CP (5 mg / kg). O Grupo 4 foi tratado com CAS (50 mg / kg) por via oral durante todo o experimento. A administração de CP reduziu substancialmente as atividades de catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutationa S-transferase (GST), glutationa redutase (GSR), glutationa (GSH), enquanto aumentou as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2). Os níveis de ureia, creatinina urinária, urobilinogênio, proteínas urinárias, molécula 1 de lesão renal (KIM-1) e lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) aumentaram substancialmente. Em contraste, a albumina e a depuração da creatinina foram significativamente reduzidas no grupo tratado com PC. Os resultados demonstraram que a CP aumentou significativamente os indicadores de inflamação, incluindo fator nuclear kappa-B (NF-κB), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β), interleucina-6 (IL-6) níveis e atividade da ciclooxigenase-2 (COX-2) e danos histopatológicos. No entanto, a administração de CAS apresentou um efeito paliativo contra a toxicidade renal gerada por CP e recuperou todos os parâmetros, trazendo-os a um nível normal. Estes resultados revelaram que o CAS é um composto eficaz com potencial curativo para combater o dano renal induzido por CP.

Mitigation of cisplatin induced nephrotoxicity by casticin in male albino rats / Mitigação da nefrotoxicidade induzida pela cisplatina pela casticina em ratos albinos machos

Cisplatin (CP) is a commonly used, powerful antineoplastic drug, having numerous side effects. Casticin (CAS) is considered as a free radical scavenger and a potent antioxidant. The present research was planned to assess the curative potential of CAS on CP persuaded renal injury in male albino rats. Twenty four male albino rats were distributed into four equal groups. Group-1 was considered as a control group. Animals of Group-2 were injected with 5mg/kg of CP intraperitoneally. Group-3 was co-treated with CAS (50mg/kg) orally and injection of CP (5mg/kg). Group-4 was treated with CAS (50mg/kg) orally throughout the experiment. CP administration substantially reduced the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutathione S-transferase (GST), glutathione reductase (GSR), glutathione (GSH) content while increased thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and hydrogen peroxide (H2O2) levels. Urea, urinary creatinine, urobilinogen, urinary proteins, kidney injury molecule-1 (KIM-1), and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) levels were substantially increased. In contrast, albumin and creatinine clearance was significantly reduced in CP treated group. The results demonstrated that CP significantly increased the inflammation indicators including nuclear factor kappa-B (NF-κB), tumor necrosis factor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6) levels and cyclooxygenase-2 (COX-2) activity and histopathological damages. However, the administration of CAS displayed a palliative effect against CP-generated renal toxicity and recovered all parameters by bringing them to a normal level. These results revealed that the CAS is an effective compound having the curative potential to counter the CP-induced renal damage.(AU)

A cisplatina (CP) é uma droga antineoplásica poderosa, comumente usada, com vários efeitos colaterais. Casticin (CAS) é considerado um eliminador de radicais livres e um potente antioxidante. A presente pesquisa foi planejada para avaliar o potencial curativo da CAS em lesão renal induzida por PC em ratos albinos machos. Vinte e quatro ratos albinos machos foram distribuídos em quatro grupos iguais. O Grupo 1 foi considerado grupo controle. Os animais do Grupo 2 foram injetados com 5 mg / kg de PB por via intraperitoneal. O Grupo 3 foi cotratado com CAS (50 mg / kg) por via oral e injeção de CP (5 mg / kg). O Grupo 4 foi tratado com CAS (50 mg / kg) por via oral durante todo o experimento. A administração de CP reduziu substancialmente as atividades de catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutationa S-transferase (GST), glutationa redutase (GSR), glutationa (GSH), enquanto aumentou as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2). Os níveis de ureia, creatinina urinária, urobilinogênio, proteínas urinárias, molécula 1 de lesão renal (KIM-1) e lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) aumentaram substancialmente. Em contraste, a albumina e a depuração da creatinina foram significativamente reduzidas no grupo tratado com PC. Os resultados demonstraram que a CP aumentou significativamente os indicadores de inflamação, incluindo fator nuclear kappa-B (NF-κB), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β), interleucina-6 (IL-6) níveis e atividade da ciclooxigenase-2 (COX-2) e danos histopatológicos. No entanto, a administração de CAS apresentou um efeito paliativo contra a toxicidade renal gerada por CP e recuperou todos os parâmetros, trazendo-os a um nível normal. Estes resultados revelaram que o CAS é um composto eficaz com potencial curativo para combater o dano renal induzido por CP.(AU)

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts / Propriedades bioativas de extratos de folhas e frutos de Persea lingue Ness (Lauraceae)

Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts / Propriedades bioativas de extratos de folhas e frutos de Persea lingue Ness (Lauraceae)

Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.(AU)

Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.(AU)

Potential use of bacterial pigments as anticancer drugs and female reproductive toxicity: a review / Uso potencial de pigmentos bacterianos como drogas anticâncer e toxicidade reprodutiva feminina: uma revisão

Natural bioactive compounds obtained from microorganisms, have awakened particular interest in the industry nowadays. This attention comes when natural resources depletion is pronounced, and the acquisition of both new plant origin resources and bioactive products, represents a challenge for the next generations. In this sense, prospecting for large-scale production and use of bacterial pigments is a necessary strategy for the development of novel products. A wide variety of properties have been attributed to these substances and, among them, their therapeutic potential against important diseases, such as cancer. There is consensus that available chemotherapy protocols are known to detrimentally affect cancer patients fertility. Hence, considerable part of the deleterious effects of chemotherapy is related to the drugs cytotoxicity, which, in addition to cancer cells, also affect normal cells. Therefore, the intrinsic properties of bacterial pigments associated with low cytotoxicity and relevant cell selectivity, certified them as potential anticancer drugs. However, little information is available about reproductive toxicity of these new and promising compounds. Thus, the present review aims to address the main bacterial pigments, their potential uses as anticancer drugs and their possible toxic effects, especially on the female gonad.

Os compostos bioativos naturais obtidos de microrganismos têm despertado especial interesse da indústria nos últimos anos. Esta atenção ocorre em um momento em que o esgotamento de recursos naturais é pronunciado, e a aquisição de novos insumos e produtos bioativos de origem vegetal representa um desafio para as próximas gerações. Neste sentido, a prospecção para a produção e uso em larga escala dos pigmentos bacterianos tem representado uma importante estratégia para o desenvolvimento de novos produtos. Uma grande variedade de propriedades foi atribuída a estas substâncias, entre elas, o potencial terapêutico contra doenças importantes, como o câncer. Existe um consenso de que os protocolos quimioterápicos disponíveis são conhecidos por afetarem negativamente a fertilidade de pacientes com câncer. Grande parte dos efeitos deletérios da quimioterapia está relacionado à citotoxicidade das drogas usadas para este fim, que além das células cancerosas, afetam as células normais. Nesse sentido, as propriedades naturais atribuídas aos pigmentos bacterianos associadas à baixa citotoxicidade e relevante seletividade, os qualificaram como potenciais drogas anticâncer. No entanto, pouco se tem de informação a respeito da toxicidade reprodutiva destes novos e promissores compostos. Dessa forma, a presente revisão tem o objetivo de abordar os principais pigmentos bacterianos, suas utilizações potenciais como drogas anticâncer, bem como os seus possíveis efeitos tóxicos, sobretudo, sobre a gônada feminina.

Recycled pequi (Caryocar brasiliense, Camb) shell ethanolic extract induces apoptosis in canine osteosarcoma cell / Extrato etanólico de cascas recicladas de pequi (Caryocar brasiliense, Camb) induz apoptose em células de osteossarcoma canino

Osteosarcoma is a mesenchymal cancer associated with high mortality in dogs and in humans. The biodiversity-rich Cerrado, the predominant biome in the Midwest region of Brazil, is native to locally appreciated fruits such as pequi (Caryocar brasiliense, Camb). Although this plant has been frequently used in folk medicine, the pharmacological properties of pequi fruit shells have not been fully evaluated. Thus, this study aimed to determine the cytotoxic activity of ethanol extract of recycled pequi shells on canine osteosarcoma cells in vitro. Cells were cultured and treated with final extract concentrations of 0, 0.029 µg/µL, 0.29 µg/µL, and 2.91 µg/µL for 24, 48, or 72 hours. Cell viability assay using trypan blue exclusion method and tetrazolium reduction method, cell survival assay, and double labeling with annexin V and propidium iodide were performed in the treated osteosarcoma cells. These allowed the determination of IC50, survival fraction, and type of cell death, respectively. Pequi shell ethanol extract at a concentration of 2.91 µg/µL showed the greatest inhibition of osteosarcoma cell growth in vitro, resulting in a 71.80% decrease in growth compared to the control. The mean IC50 was 155.2 µg/mL at 72 hours. The calculated survival fractions showed that cell growth at 72 hours was 3.33% lower in cells treated with 2.91 µg/µL extract. Results from the double labeling experiment suggest that apoptosis was the predominant type of cell death in cells treated with 2.91 µg/µL extract. These results demonstrate that ethanol extract of recycled pequi shells promotes apoptosis in canine osteosarcoma cells.

O osteossarcoma é uma neoplasia mesenquimal associada à alta mortalidade em cães e humanos. O pequi (Caryocar brasiliense, Camb.) é nativo do Cerrado, bioma rico em biodiversidade predominante na região Centro-Oeste do Brasil. Embora esta planta seja frequentemente utilizada na medicina popular, as propriedades farmacológicas da casca do pequi ainda são pouco conhecidas. Este estudo teve como objetivo determinar a atividade citotóxica do extrato etanólico de cascas de pequi recicladas em células de osteossarcoma canino. As células foram cultivadas e tratadas com concentrações finais de extrato de zero, 0,029 µg/µL, 0,29 µg/µL e 2,91 µg/µL por 24, 48 ou 72 horas. As células foram submetidas a ensaio de viabilidade celular pelos métodos de exclusão de azul de tripano da redução de tetrazólio para determinar a IC50, ao ensaio de sobrevivência celular para calcular a fração de sobrevivência e à dupla marcação com anexina V e iodeto de propídio para determinar o tipo de morte celular. O extrato etanólico de casca de pequi na concentração de 2,91 µg/µL apresentou a maior inibição do crescimento de células de osteossarcoma, com redução de 71,80% no crescimento em relação ao controle. A IC50 média foi de 155,2 µg/mL em 72 horas. O crescimento celular em 72 horas foi 3,33% menor nas células tratadas com 2,91 µg/µL de extrato. A apoptose foi o tipo predominante de morte celular em células tratadas com 2,91 µg/µL de extrato. Esses resultados demonstram que o extrato etanólico de cascas de pequi recicladas promove apoptose em células de osteossarcoma canino.

Mastocitoma cutâneo em uma cadela / Cutaneous mast cell tumor in a bitch

Background: The diagnostic of neoplasia in dogs has risen significantly in the last years and this fact is mostly attributed to the longer life expectancy of these animals, which contributes to a greater chance of exposure to carcinogenic agents. In between the diverse tumors that could compromise skin, the mastocytoma is the third most commonly diagnosed neoplasia. It is characterized by being a form of neoplasia with round cells, these being the mast cells. The objective of the present study consisted in relating a case of cutaneous mastocytoma in a 7-year-old bitch mixed-breed treated at the Veterinary Medical Teaching Hospital of the University of Uberaba (UNIUBE) - Uberaba, MG, Brazil. Case: The bitch initially presented a localized nodule external to the right ear pinna with cytology test suggesting a mastocytoma. The nodule was surgically removed and, posteriorly, an histopatholgy was not requested. After 5 months since the emergence of the nodule and a month after its surgical resection, the tutor noticed the presence of a new growth in the ipsilateral cervical region to the previous nodule. At this moment, the responsible veterinarian decided to refer the animal to an oncologist. During the appointment with the oncologist, alterations such as hyporexia and anemia were related, and the presence of a nodule in the right cervical region measuring 4.5 to 4 cm of diameter was verified. Material for cytologic evaluation of the neoplasia was collected and again the result suggested a mastocytoma. The new tumor was also surgically removed but was then referred to histopathological evaluation for diagnostic confirmation, grading and evaluation of surgical margins. The tumor was classified as an infiltrative subcutaneous mastocytoma presenting, additionally, compromised surgical margins. After its excision, the association with a chemotherapy treatment using a protocol of Vimblastina 2 mg/m², i.v. in unique dosage per section, associated with Predinisona 1 mg/kg, v.o, SID was indicated. Each section was realized with an interval of 7 days in between. Only 2 chemotherapy sessions took place. Because of the worsening of the clinical condition associated with a very weakened animal the veterinarian opted for the euthanasia of the animal. Discussion: The diagnostic of mastocytoma must be realized through the association of cytology and histopathology, in case histopathological evaluation is needed to confirm the obtained cytology result, to grade the tumor and to evaluate the compromising of surgical margins. In this sense, it was observed that the bitch was submitted only to cytology diagnostic when it presented the nodule in the ear pavilion. Yet, at the second approach realized by the oncologist, it was possible to realize adequate diagnose methods. However, the animal was not submitted to clinical staging of the mastocytoma due to the non-authorization of the exam by the tutor. Such measure is very important, as it reflects directly in the treatment and prognostic of the animal. Thus, image exams such as abdominal ultrasonography and chest X-ray should have been realized, as well as cytological and histopathological evaluation of the regional lymph nodes, in order to search for metastasis points in these places. As the data suggests, the importance of clinical staging of animals affected by this neoplasia and the importance of cytological evaluation associated with histopathology for a correct diagnosis, prognosis and mastocytoma treatment is noted. It is emphasized that many times veterinarians face impediment related to requesting all necessary exams coming from tutors, which compromises treatment success.

Avaliação morfológica e morfométrica do útero de camundongos fêmeas após uso de extrato de graviola / Morphological and morphometric evaluation of femal e mice uterus after using soursop extract

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

Foeniculum vulgare (fennel) and Cymbopogon winterianus (citronella) essential oils to replace a growth promoter in the diet of European quails / Óleos essenciais de Foeniculum vulgare (erva doce) e Cymbopogon winterianus (citronela) em substituição a um promotor de crescimento na dieta de codornas europeias

The objective of this study was to evaluate the replacement of a growth-promoting antibiotic by fennel (Foeniculum vulgare) and citronella (Cymbopogon winterianus) essential oils in the quail diet on performance variables (weight gain, feed intake, feed conversion), as well as the carcass and cut yield. To do so, 240 one-day-old male and female European quails were distributed in a completely randomized design with four treatments, five replications and 12 animals per experimental unit. The treatments consisted of: PC ­ positive control diet without fennel or citronella essential oils and with the growth promoter (zinc bacitracin); NC ­ negative control diet without essential oils and without growth promoter; CEO - Diet with +0.078% citronella essential oil without the growth promoter; and FEO - Diet with +0.078% fennel essential oil without the growth promoter. The experiment lasted 42 days, in which the performance variables were analyzed in three periods (1-14 days; 14-21 days; and 22-42 days) and the carcass and cut yield in two periods (at 21 and 42 days). The observed data were submitted to analysis of variance and the comparison of means was performed using the Tukey's test at 5% significance. The presence of essential oils positively influenced (P<0.05) the performance variables and the carcass and cuts yield in all analyzed periods. The use of fennel and citronella essential oils to replace zinc bacitracin in the diet of European quails improves performance and the carcass and cut yield.(AU)

Objetivou-se avaliar a substituição de um antibiótico promotor de crescimento por óleos essenciais de erva-doce (Foeniculum vulgare) e citronela (Cymbopogon winterianus) na dieta de codornas sobre o desempenho, rendimento de carcaça e cortes. Para isso, foram utilizadas 240 codornas europeias machos e fêmeas de um dia de idade distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso com quatro tratamentos, cinco repetições e 12 animais por unidade experimental. Os tratamentos consistiram em: CP- Dieta sem os óleos essenciais de erva-doce ou citronela e com o promotor de crescimento (bacitracina de zinco); CN- Dieta sem os óleos essenciais e sem o promotor de crescimento; OC- Dieta com + 0,078% de óleo essencial de citronela sem o promotor de crescimento; OED- Dieta com + 0,078% de óleo essencial de erva-doce sem o promotor de crescimento. O experimento teve duração de 42 dias, no qual as variáveis de desempenho foram analisadas em três períodos (1-14 dias; 14-21 dias e 22-42 dias) e o rendimento de carcaça e cortes em dois períodos (aos 21 e 42 dias). Os dados observados foram submetidos à análise de variância e a comparação das médias foi realizada pelo teste de Tukey a 5%. A presença dos óleos essenciais influenciou positivamente (P<0,05) as variáveis de desempenho e o rendimento de carcaça e cortes em todos os períodos analisados. A utilização de óleos essenciais de erva-doce e citronela em substituição a bacitracina de zinco na dieta de codornas europeias melhora o desempenho e o rendimento de carcaça e cortes.(AU)

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L-asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G ­ 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G ­ 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Cytotoxicity of extracts and compounds isolated from Croton echioides in animal tumor cell (HTC) / Citotoxicidade de extratos e compostos isolados de Croton echioides em célula tumoral animal (HTC)

The search for compounds with anticancer effects is of paramount importance today due to the high incidence of the disease. The Euphorbiaceae family is known for having compounds with therapeutic properties, one of its genera being Croton. It has several species, which contain compounds already known for their biological activities, presenting anti-inflammatory, antimicrobial and anticancer properties. Thus, the cytotoxicity/antiproliferative activity of semi-purified fractions and compounds isolated from Croton echioides in liver tumor cells of Rattus norvegicus (HTC) was evaluated by the MTT test. The semi-purified fractions showed cytotoxicity at concentrations above 200 µg/mL, at 24, 48 and 72 hours, reaching cell viability of 24.78% [400 µg/mL] at 24 hours, 12.79% [500 µg/mL] at 48 hours and 10.57% [300 µg/mL] at 72 hours. For the isolated compounds, lupeol had a cytotoxic effect in all concentrations (1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 and 100 µg/mL) and tested times (24, 48 and 72 hours), reaching minimum viability of 4.37% [100 µg/mL], within 72 hours. The clerodan diterpenes CEH-1 and CEH-4 also showed antiproliferative activity, with minimum viability of 36.19% [100 µg/mL] over 72 hours and 21.33% [100 µg/mL] over 48 hours, respectively. However, the clerodan diterpenes CEH-2 and CEH-3 did not shows a cytotoxic effect for HTC cells. Thus, there is a cytotoxic/antiproliferative potential of C. echioides against tumor cells, with targeted to mitochondrial enzymes, associated with cell proliferation, indicating that this species deserves prominence in the search for new molecules for the treatment of cancer.

A busca por compostos com efeitos anticâncer é de suma importância nos dias atuais devido à alta incidência desta doença. A família Euphorbiaceae é conhecida por possuir compostos com propriedades terapêuticas, sendo um de seus gêneros o Croton. Este possui diversas espécies, que contêm compostos já conhecidos por suas atividades biológicas, apresentando propriedades anti-inflamatórias, antimicrobianas e anticancerígenas. Assim, a citotoxicidade/atividade antiproliferativa de frações semipurificadas e compostos isolados de Croton echioides em células tumorais hepáticas de Rattus norvegicus (HTC) foi avaliada pelo teste MTT. As frações semipurificadas apresentaram citotoxicidade em concentrações acima de 200 µg/mL, em 24, 48 e 72 horas, atingindo viabilidade celular de 24,78% [400 µg/mL] em 24 horas, 12,79% [500 µg/mL] em 48 horas e 10,57% [300 µg/mL] às 72 horas. Para os compostos isolados, o lupeol teve efeito citotóxico em todas as concentrações (1, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 80 e 100 µg/mL) e tempos testados (24, 48 e 72 horas), atingindo a viabilidade mínima de 4,37% [100 µg/mL], em 72 horas. Os diterpenos clerodan CEH-1 e CEH-4 também apresentaram atividade antiproliferativa, com viabilidade mínima de 36,19% [100 µg/mL] em 72 horas e 21,33% [100 µg/mL] em 48 horas, respectivamente. No entanto, os diterpenos clerodanos CEH-2 e CEH-3 não apresentaram efeito citotóxico para células HTC. Assim, existe um potencial citotóxico/antiproliferativo de C. echioides contra células tumorais, com enzimas direcionadas a enzimas mitocondriais, associadas à proliferação celular, indicando que esta espécie merece destaque na busca de novas moléculas para o tratamento do câncer.

Plasmocitoma extramedular oral em felino doméstico / Oral extramedullary plasmocytoma in domestic cat

Plasmocitomas são geralmente incomuns em cães, representando cerca de 3% das neoplasias, e, em gatos, esse número é ainda menor, sendo consideradas raras e observadas em aproximadamente 1% dos casos. Objetiva-se com este trabalho apresentar um relato de caso de uma doença muito pouco relatada na oncologia veterinária, o plasmocitoma extramedular oral em felinos domésticos. A metodologia empregada para a construção deste trabalho deu-se por meio de: consulta a referências bibliográficas; observação e acompanhamento dos processos realizados no âmbito hospitalar, além da consulta ao prontuário médico do paciente. Embora muito descrita na literatura a utilização da cirurgia de mandibulectomia ou maxilectomia na terapia de plasmocitomas orais em cães, são escassos os relatos do emprego da técnica em gatos. Porém, é certo afirmar que a eletroquimioterapia, associada à quimioterapia antineoplásica adjuvante, promoveu uma ótima sobrevida (407 dias), sem comprometimento na qualidade de vida do paciente, mostrando que, mesmo com um tratamento menos invasivo e conservador, foi possível cuidar do paciente de maneira efetiva. Uma grande dificuldade, durante todo o processo, foi a falta de relatos científicos específicos para o plasmocitoma oral em felinos. As neoplasias orais em felinos e, principalmente, as originadas por plasmócitos precisam ser mais estudadas e relatadas, promovendo maior conhecimento técnico e científico a todos os profissionais da área.

Plasmocytomas are generally uncommon in dogs, representing about 3% of neoplasms, and in cats, this number is even lower, being considered rare and observed in approximately 1% of cases. The aim of this work is to present a case report of a disease that is rarely reported in veterinary oncology: oral extramedullary plasmacytoma in domestic cats. The methodology used for the construction of this work was given through: consultation of bibliographic references; observation and monitoring of processes performed in the hospital, in addition to consulting the patient's medical record. Although the use of mandibulectomy or maxillectomy surgery to treat oral plasmacytomas in dogs is widely described in the literature, there are few reports on the use of the technique in cats. However, it is true to say that electrochemotherapy, associated with adjuvant antineoplastic chemotherapy, promoted an excellent survival (407 days), without compromising the patient's quality of life, showing that even with a less invasive and conservative treatment it was possible to care for the patient in a way effective. A major difficulty throughout the process was the lack of specific scientific reports for oral plasmacytoma in felines. Oral neoplasms in felines and mainly those originating from plasmocytes need to be further studied and reported, promoting greater technical and scientific knowledge to all professionals in the field.

Aspectos clínicos, laboratoriais e tratamento da leucemia mieloide crônica em cão: relato de caso / Clinical aspects, hematological changes and treatments of chronic myeloid leukemia in dog: case report

O objetivo deste relato é apresentar o caso clínico de uma cadela, sem raça definida, com cinco anos de idade, diagnosticada com leucemia mieloide crônica (LMC). As leucemias são neoplasias malignas que se originam de células precursoras da medula óssea e as consequências podem ser trombocitopenia, anemia, leucocitose persistente e presença de células neoplásicas no sangue. O tratamento de escolha envolve o uso de inibidores de tirosina quinase, porém este não pode ser usado neste caso. Dessa forma a cadela recebeu diferentes protocolos quimioterápicos que incluíram inicialmente hidroxiureia, citarabina, doxorrubicina e prednisona. Devido a remissão parcial dos sinais clínicos e a resposta terapêutica pouco duradoura a essas medicações o protocolo foi alterado para quimioterapia metronômica com clorambucil. O uso desses quimioterápicos não foram eficazes em reduzir a leucocitose e controlar a anemia e trombocitopenia da paciente, devido a ocorrência do surgimento de células imaturas no sangue e resistência aos quimioterápicos. Na ausência da crise e da possibilidade do uso dos inibidores de tirosina quinase, a hidroxiureia permanece sendo o quimioterápico de eleição. O animal apresentou sobrevida de 210 dias, devido a leucocitose e anemia severas pouco responsivas ao protocolo terapêutico utilizado e o surgimento no hemograma de precursores neutrofilicos que ocorreu 46 dias após ao início do tratamento com hidroxiureia.

The aim of this report is to present the clinical case of a five-year-old mixed breed female dog diagnosed with chronic myeloid leukemia (CML). Leukemias are malignant neoplasms that originate from bone marrow precursor cells and the consequences can be thrombocytopenia, anemia, persistent leukocytosis and the presence of neoplastic cells in the blood. The treatment of choice involves the use of tyrosine kinase inhibitors, but it cannot be used in this case. Thus, the dog received different chemotherapy protocols that initially included hydroxyurea, cytarabine, doxorubicin and prednisone. Due to the partial remission of clinical signs and the short-term therapeutic response to these medications, the protocol was changed to metronomic chemotherapy with chlorambucil. The use of these chemotherapeutic agents was not effective in reducing leukocytosis and controlling the patient's anemia and thrombocytopenia, due to the occurrence of immature cells in the blood and resistance to chemotherapeutic agents. In the absence of the crisis and the possibility of using tyrosine kinase inhibitors, hydroxyurea remains the chemotherapy of choice. The animal had a 210-day survival, due to severe leukocytosis and anemia, which were not responsive to the therapeutic protocol used and the appearance in the blood count of neutrophilic precursors that occurred 46 days after the beginning of hydroxyurea treatment.

Effects of an antibiotic and two phytogenic substances (cinnamaldehyde and 1, 8-cineole) on yolk fatty acid profile and storage period-associated egg lipid peroxidation level

This study was aimed at determining the effects of two phytogenic antioxidants, namely, cinnamaldehyde and 1,8-cineole, and an antibiotic added to laying hen feed on the fatty acid profile of egg yolk and the weight loss and lipid peroxidation levels of eggs stored for different periods. Ninety-six 48-week-old Bovans White hens were randomly assigned to four groups, each with four replicates of six hens per replicate. The four groups were provided with the following feeds: maize and soybean-based laying hen feed, basal ration (control group); basal ration added 500 mg/kg of an antibiotic; basal ration added 100 mg/kg of cinnamaldehyde; and basal ration added 100 mg/kg of 1,8-cineole. At the end of an eight-week feeding schedule, 48 eggs, including 12 from each group, were used for yolk fatty acid analysis. In total, 240 eggs, including 48 eggs for each of the five different storage periods tested (1, 14, 28, 42, and 56 days), were collected for the detection of egg weight loss and yolk malondialdehyde (MDA) levels. The feed supplements cinnamaldehyde and 1,8-cineole were determined to have significantly reduced lipid peroxidation in the yolk of eggs stored for 14, 28, 42, and 56 days, when compared with the results of the control group and antibiotic-treated group. Furthermore, dietary cinnamaldehyde supplementation was determined to have decreased the yolk level of myristic acid, a saturated fatty acid, and to have increased the yolk level of oleic acid, the major unsaturated fatty acid found in egg yolk (46.28%) in comparison with the levels measured in the other three groups. Cinnamaldehyde and 1,8-cineole were determined to extend the shelf life of eggs by providing protection against free oxygen radicals. Cinnamaldehyde could be used as an alternative feed supplement to enrich the yolk fatty acid profile in unsaturated fatty acids.(AU)

Cytotoxic and anticancer properties of the Malaysian mangrove pit viper (Trimeresurus purpureomaculatus) venom and its disintegrin (purpureomaculin)

The Asiatic pit vipers from the Trimeresurus complex are medically important venomous snakes. These pit vipers are often associated with snakebite that leads to fatal coagulopathy and tissue necrosis. The cytotoxic venoms of Trimeresurus spp.; however, hold great potential for the development of peptide-based anticancer drugs. Methods: This study investigated the cytotoxic effect of the venom from Trimeresurus purpureomaculatus, the mangrove pit viper (also known as shore pit viper) which is native in Malaysia, across a panel of human cancer cell lines from breast, lung, colon and prostate as well as the corresponding normal cell lines of each tissue. Results: The venom exhibited dose-dependent cytotoxic activities on all cell lines tested, with median inhibition concentrations (IC50) ranging from 0.42 to 6.98 µg/mL. The venom has a high selectivity index (SI = 14.54) on breast cancer cell line (MCF7), indicating that it is significantly more cytotoxic toward the cancer than to normal cell lines. Furthermore, the venom was fractionated using C18 reversed-phase high-performance liquid chromatography and the anticancer effect of each protein fraction was examined. Fraction 1 that contains a hydrophilic low molecular weight (approximately 7.5 kDa) protein was found to be the most cytotoxic and selective toward the breast cancer cell line (MCF7). The protein was identified using liquid chromatography-tandem mass spectrometry as a venom disintegrin, termed purpureomaculin in this study. Conclusion: Taken together, the findings revealed the potent and selective cytotoxicity of a disintegrin protein isolated from the Malaysian T. purpureomaculatus venom and suggested its anticancer potential in drug discovery.(AU)

Anticancer potential of nanogold conjugated toxin GNP-NN-32 from Naja naja venom

Background: Cancer is the second most common fatal disease in the world, behind cardiovascular disorders in the first place. It accounts for around 0.3 million deaths per year in India due to the lack of proper diagnostic facilities, prevention and treatment. Current therapeutic methods do not provide adequate protection and affect normal cells along with cancerous ones. Thus, there is a need for some alternative therapeutic strategy, preferably from natural products, which have been traditionally used for treatment of various diseases in the country. Methods: In this study, we have conjugated purified NN-32 toxin from Naja naja venom with gold nanoparticles and its anticancer potential was evaluated against human breast cancer cell lines. UV-Vis spectroscopy, dynamic light scattering, transmission electron microscopy, atomic force microscopy and zeta potential analysis were the techniques used for characterization of GNP-NN-32. Results: GNP-NN-32 showed dose- and time-dependent cytotoxicity against breast cancer cell lines (MCF-7 and MDA-MB-231). NN-32 and GNP-NN-32 induced apoptosis in both breast cancer cell lines. The results of CFSE cell proliferation study revealed that NN-32 and GNP-NN-32 arrested cell division in both MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines resulting in inhibition of proliferation of these cancer cells. Conclusion: GNP-NN-32 showed an anticancer potential against human breast cancer cell lines. Analysis of detailed chemical characterization along with its cytotoxic property might help to perceive a new dimension of the anti-cancer potential of GNP-NN-32 that will enhance its biomedical function in near future.(AU)

Hepatoprotective and antineoplastic potencial of red propolis produced by the bees Apis mellifera in the semiarid of Rio Grande do Norte, Brazil / Potencial hepatoprotetor e antineoplásico da própolis vermelha produzida pela abelha Apis mellifera no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

The objective of this study was to evaluate the hepatoprotective effect of the honey bee Apis mellifera ethanolic extract of the red propolis, obtained in four municipalities of the Rio Grande do Norte semi-arid region, through an in vitro evaluation of the antineoplastic potential in human hepatic carcinoma (HepG2) and normal cell lines (L929), and from the comet assay in hepatic cell lines (ZF-L hepatocytes) to evaluate the genoprotective potential of the extract. The hepatoprotective effect was also evaluated in vivo by the induction of chronic experimental hepatic lesions in rodents (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769), Wistar line, by intraperitoneal administration of thioacetamide (TAA) at the dose of 0.2g/kg. The animals were distributed in the following experimental groups: G1 (control), G2 (treated with 500mg/kg ethanolic extract of propolis), G3 (treated with 500mg/kg of ethanolic extract and TAA) and G4 (treated with TAA). All rats were submitted to serum biochemical, macroscopic, histological and stereological biochemical exams of the liver. It was verified the genoprotective effect of red propolis since the mean damages promoted to DNA in cells tested with the extract were significantly lower than the mean of the positive control damage (hydrogen peroxide). The red propolis extract did not present cytotoxic activity to the tumor cells of human liver cancer, as well as to normal ones. The absence of cytotoxicity in normal cells may indicate safety in the use of the propolis extract. The results of the serum biochemical evaluation showed that the serum levels of the aminotransferase enzymes (AST) did not differ significantly between G1, G2 and G3 when compared to each other. G4 showed significant increase in levels compared to the other groups, indicating that the administration of the extract did not cause liver toxicity, as well as exerted hepatoprotective effect against the hepatic damage induced by TAA...(AU)

Este estudo objetivou avaliar o efeito hepatoprotetor do extrato etanólico da própolis vermelha da abelha Apis mellifera, obtido em quatro municípios do semiárido do Rio Grande do Norte, mediante avaliação in vitro do potencial antineoplásico em linhagens de células de carcinoma hepático humano (HepG2) e em linhagens de células normais (L929), além do ensaio cometa em linhagens de células hepáticas (hepatócitos ZF-L) para avaliar o potencial genoprotetor do extrato. O efeito hepatoprotetor também foi avaliado in vivo através da indução de lesões hepática experimental crônica em roedores da espécie Rattus norvegicus (Berkenhout, 1769), linhagem Wistar, pela administração intraperitoneal de tioacetamida (TAA) na dose de 0,2g/kg. Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos experimentais: G1 (controle), G2 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico da própolis), G3 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico e TAA) e G4 (tratados com TAA). Todos os ratos foram submetidos aos exames bioquímico sérico, anatomopatológico macroscópico, histológico e esteriológico do fígado. Foi constatado o efeito genoprotetor da própolis vermelha uma vez que as médias dos danos promovidos ao DNA em células testadas com o extrato foram significativamente inferiores à média dos danos do controle positivo (peróxido de hidrogênio). O extrato da própolis vermelha não apresentou atividade citotóxica para células tumorais de câncer de fígado humano, bem como para normais. A ausência de citotoxicidade em células normais, tal como constatado, pode indicar segurança no uso do extrato da própolis. Os resultados da avaliação bioquímica sérica demonstraram que os níveis séricos das enzimas aminotransferase (AST) não diferiram significativamente entre G1, G2 e G3, quando comparadas entre si. No G4 houve aumento significativo dos níveis em relação aos demais grupos, indicando que a administração do extrato não causou toxicidade hepática, bem como exerceu efeito...(AU)

Hepatoprotective and antineoplastic potencial of red propolis produced by the bees Apis mellifera in the semiarid of Rio Grande do Norte, Brazil / Potencial hepatoprotetor e antineoplásico da própolis vermelha produzida pela abelha Apis mellifera no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

The objective of this study was to evaluate the hepatoprotective effect of the honey bee Apis mellifera ethanolic extract of the red propolis, obtained in four municipalities of the Rio Grande do Norte semi-arid region, through an in vitro evaluation of the antineoplastic potential in human hepatic carcinoma (HepG2) and normal cell lines (L929), and from the comet assay in hepatic cell lines (ZF-L hepatocytes) to evaluate the genoprotective potential of the extract. The hepatoprotective effect was also evaluated in vivo by the induction of chronic experimental hepatic lesions in rodents (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769), Wistar line, by intraperitoneal administration of thioacetamide (TAA) at the dose of 0.2g/kg. The animals were distributed in the following experimental groups: G1 (control), G2 (treated with 500mg/kg ethanolic extract of propolis), G3 (treated with 500mg/kg of ethanolic extract and TAA) and G4 (treated with TAA). All rats were submitted to serum biochemical, macroscopic, histological and stereological biochemical exams of the liver. It was verified the genoprotective effect of red propolis since the mean damages promoted to DNA in cells tested with the extract were significantly lower than the mean of the positive control damage (hydrogen peroxide). The red propolis extract did not present cytotoxic activity to the tumor cells of human liver cancer, as well as to normal ones. The absence of cytotoxicity in normal cells may indicate safety in the use of the propolis extract. The results of the serum biochemical evaluation showed that the serum levels of the aminotransferase enzymes (AST) did not differ significantly between G1, G2 and G3 when compared to each other. G4 showed significant increase in levels compared to the other groups, indicating that the administration of the extract did not cause liver toxicity, as well as exerted hepatoprotective effect against the hepatic damage induced by TAA. The G3 and G4 animals developed cirrhosis, but in G3 the livers were characterized by the presence of small regenerative nodules and level with the surface of the organ, whereas in G4 the livers showed large regenerative nodules. The livers of the G1 and G2 animals presented normal histological appearance, whereas the livers of the G3 animals showed regenerative nodules surrounded by thin septa of connective tissue, and in G4 the regenerative nodules were surrounded by thick septa fibrous connective tissue. The analysis of the hepatic tissues by means of stereology showed that there was no statistical difference between the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagens in G1 and G2. In G3 the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagen did not differ significantly from the other groups. It was concluded that the ethanolic extract of the red propolis exerted a hepatoprotective effect, because it promoted in vitro reduction of the damage to the DNA of liver cells, antineoplastic activity in human hepatocellular carcinoma cell line (HepG2) and did not exert cytotoxic effect in normal cells or was able to reduce liver enzyme activity and the severity of cirrhosis induced by TAA in vivo.(AU)

Este estudo objetivou avaliar o efeito hepatoprotetor do extrato etanólico da própolis vermelha da abelha Apis mellifera, obtido em quatro municípios do semiárido do Rio Grande do Norte, mediante avaliação in vitro do potencial antineoplásico em linhagens de células de carcinoma hepático humano (HepG2) e em linhagens de células normais (L929), além do ensaio cometa em linhagens de células hepáticas (hepatócitos ZF-L) para avaliar o potencial genoprotetor do extrato. O efeito hepatoprotetor também foi avaliado in vivo através da indução de lesões hepática experimental crônica em roedores da espécie Rattus norvegicus (Berkenhout, 1769), linhagem Wistar, pela administração intraperitoneal de tioacetamida (TAA) na dose de 0,2g/kg. Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos experimentais: G1 (controle), G2 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico da própolis), G3 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico e TAA) e G4 (tratados com TAA). Todos os ratos foram submetidos aos exames bioquímico sérico, anatomopatológico macroscópico, histológico e esteriológico do fígado. Foi constatado o efeito genoprotetor da própolis vermelha uma vez que as médias dos danos promovidos ao DNA em células testadas com o extrato foram significativamente inferiores à média dos danos do controle positivo (peróxido de hidrogênio). O extrato da própolis vermelha não apresentou atividade citotóxica para células tumorais de câncer de fígado humano, bem como para normais. A ausência de citotoxicidade em células normais, tal como constatado, pode indicar segurança no uso do extrato da própolis. Os resultados da avaliação bioquímica sérica demonstraram que os níveis séricos das enzimas aminotransferase (AST) não diferiram significativamente entre G1, G2 e G3, quando comparadas entre si. No G4 houve aumento significativo dos níveis em relação aos demais grupos, indicando que a administração do extrato não causou toxicidade hepática, bem como exerceu efeito hepatoprotetor frente ao dano hepático induzido pela TAA. Os animais dos G3 e G4 desenvolveram cirrose, porém no G3 os fígados caracterizaram-se pela presença de pequenos nódulos regenerativos e nivelados com a superfície do órgão, enquanto que no G4 os fígados apresentaram grandes nódulos regenerativos. Os fígados dos animais G1 e G2 apresentaram aspecto histológico normal, enquanto que os fígados dos animais do G3 apresentaram nódulos regenerativos circundados por finos septos de tecido conjuntivo, e nos do G4 os nódulos regenerativos foram circundados por espessos septos de tecido conjuntivo fibroso. A análise dos tecidos hepáticos por meio de estereologia mostrou que não houve diferença estatística entre o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágenos nos G1 e G2. No G3 o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágeno não diferiu significativamente dos demais grupos. Concluiu-se que o extrato etanólico da própolis vermelha exerceu efeito genoprotetor, por promover in vitro redução do dano ao DNA de células hepáticas, atividade antineoplásica em linhagem celular de carcinoma hepatocelular humano (HepG2) e não exerceu efeito citotóxico em células normais ou efeito hepatoprotetor in vivo com diminuição da gravidade da cirrose induzida por TAA.(AU)

Antitumoral effects of Amblyomma sculptum Berlese saliva in neuroblastoma cell lines involve cytoskeletal deconstruction and cell cycle arrest / Efeito antitumoral da saliva do carrapato Amblyomma sculptum Berlese em células de neuroblastoma envolve desconstrução do citoesqueleto e parada do ciclo celular

The antitumor properties of ticks salivary gland extracts or recombinant proteins have been reported recently, but little is known about the antitumor properties of the secreted components of saliva. The goal of this study was to investigate the in vitro effect of the saliva of the hard tick Amblyomma sculptum on neuroblastoma cell lines. SK-N-SK, SH-SY5Y, Be(2)-M17, IMR-32, and CHLA-20 cells were susceptible to saliva, with 80% reduction in their viability compared to untreated controls, as demonstrated by the methylene blue assay. Further investigation using CHLA-20 revealed apoptosis, with approximately 30% of annexin-V positive cells, and G0/G1-phase accumulation (>60%) after treatment with saliva. Mitochondrial membrane potential (m) was slightly, but significantly (p 0.05), reduced and the actin cytoskeleton was disarranged, as indicated by fluorescent microscopy. The viability of human fibroblast (HFF-1 cells) used as a non-tumoral control decreased by approximately 40%. However, no alterations in cell cycle progression, morphology, and m were observed in these cells. The present work provides new perspectives for the characterization of the molecules present in saliva and their antitumor properties.(AU)

As propriedades antitumorais de extratos de glândulas salivares de carrapatos ou proteínas recombinantes foram relatadas recentemente, mas pouco se sabe sobre as propriedades antitumorais dos componentes secretados da saliva. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito in vitro da saliva bruta do carrapato duro Amblyomma sculptum sobre as linhagens celulares de neuroblastoma. Células SK-N-SK, SH-SY5Y, Be(2)-M17, IMR-32 e CHLA-20 foram suscetíveis à saliva, com redução de 80% na sua viabilidade em comparação com controles não tratados, como demonstrado pelo ensaio de Azul de Metileno. Investigações posteriores utilizando CHLA-20 revelaram apoptose, com aproximadamente 30% de células positivas para anexina-V, e G0/G1 (> 60%) após tratamento com saliva. O potencial de membrana mitocondrial (m) foi reduzido significativamente (p 0,05), e o citoesqueleto de actina foi desestruturado, como indicado pela microscopia de fluorescência. A viabilidade do fibroblasto humano (células HFF-1), usado como controle não tumoral, diminuiu em aproximadamente 40%. No entanto, não foram observadas alterações na progressão do ciclo celular, morfologia e m nestas células. O presente trabalho fornece novas perspectivas para a caracterização das moléculas presentes na saliva e suas propriedades antitumorais.(AU)