Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly

Abstract Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be disease causing, with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Resumo Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser causador de doenças, com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly / Novo mapeamento de mutações patogênicas do gene ASPM em famílias consanguíneas com microcefalia primária do Paquistão

Abstract Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be "disease causing," with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Resumo Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser "causador de doenças", com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly / Novo mapeamento de mutações patogênicas do gene ASPM em famílias consanguíneas com microcefalia primária do Paquistão

Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be "disease causing", with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser "causador de doenças", com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly / Novo mapeamento de mutações patogênicas do gene ASPM em famílias consanguíneas com microcefalia primária do Paquistão

Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be "disease causing", with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.(AU)

Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser "causador de doenças", com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.(AU)

Danger under wheels: mammal roadkills in the threaten lowland Atlantic Forest in southeast Brazil / Perigo sob rodas: atropelamentos de mamíferos na ameaçada Mata Atlântica de baixada no sudeste do Brasil

Understanding the ecological impacts of roads on mammals requires periodic monitoring of roads, and identification of both temporal and spatial distribution of roadkills (i.e., roadkill hotspots). The main aim of the study was to identify the most roadkilled mammals and evaluate the temporal and spatial distribution of roadkills in the RJ-122, a highway that crosses the threaten lowland Atlantic Forest in the state of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Between October 2017 and January 2020, an intense monitoring study was conducted, with the carcasses of the roadkilled mammals being collected three times a week. Overall, we recorded 295 roadkilled mammals belonging to 22 species, resulting in 11 roadkills per month for the RJ-122 highway. The black-eared opossum, Didelphis aurita (N=149, 51%) stood out as the most roadkilled mammal, followed by porcupine, Coendou spinosus (N= 24, 8%), crab-eating fox, Cerdocyon thous (N= 23, 8), nine-banded armadillo, Dasypus novemcinctus (N= 23, 8%), and white-tufted marmoset, Callithrix jacchus (N= 20, 7%). Roadkills on the RJ-122 varied throughout the year, being more frequent in the rainy season (N=180) than in the dry season (N=115), and were concentrated in two hotspots, indicating some critical points with high roadkill frequency. Hotspots were associated with areas with dense natural vegetation, which can function as forest corridors in this fragmented landscape. Based on our results, several mitigation measures are recommended for the RJ-122 highway.(AU)

Compreender os impactos ecológicos das estradas sobre a fauna de mamíferos requer o monitoramento periódico das estradas e a identificação da distribuição temporal e espacial dos atropelamentos (ou seja, hotspots de atropelamentos). O objetivo principal do estudo foi identificar os mamíferos mais atropelados e avaliar a distribuição temporal e espacial dos atropelamentos na RJ-122, uma rodovia que atravessa a ameaçada Mata Atlântica de baixada no estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Entre outubro de 2017 e janeiro de 2020, foi realizado um intenso estudo de monitoramento, com a coleta três vezes por semana das carcaças dos mamíferos atropelados. Ao todo, registramos 295 mamíferos atropelados pertencentes a 22 espécies, resultando em 11 atropelamentos por mês para a rodovia RJ-122. O gambá-de-orelha-preta, Didelphis aurita (N=149, 51%) destacou-se como o mamífero mais atropelado, seguido pelo ouriço-cacheiro, Coendou spinosus (N= 24, 8%), cachorro-do-mato, Cerdocyon thous (N= 23, 8%), tatu-galinha, Dasypus novemcinctus (N= 23, 8%) e sagui-de-tufo-branco, Callithrix jacchus (N= 20, 7%). Os atropelamentos na RJ-122 variaram ao longo do ano, sendo mais frequentes na estação chuvosa (N=180) do que na estação seca (N=115), e se concentraram em duas áreas, indicando alguns pontos críticos com alta frequência de atropelamentos. Os hotspots foram associados a áreas com vegetação natural densa, que podem funcionar como corredores florestais nesta paisagem fragmentada. Com base em nossos resultados, várias medidas de mitigação são recomendadas para a rodovia RJ-122.(AU)

Acoustic analysis of vocalization and the behavioral response associated to sound production of the nine banded armadillo Dasypus novemcinctus (Mammalia, Cingulata, Dasypodidae) in an agonistic context

Although communication capabilities are displayed by many vertebrate groups, some repertoires are poorly known, such as the case of xenarthrans, particularly armadillos, for which vocalization as a source of communicating to others remains poorly understood and relies on punctual reports of sounds. Here we provide the first description of a behavioral response associated with sound emission of two subjects of Dasypus novemcinctus. Both audio and visual registration was performed to subsequent analyses of expressed behaviors and emitted calls, which accounted for 76 vocalizations from a total of eight video recordings randomly collected from 2017 to 2019. Sound is acoustically characterized by both inhale and exhale phases composed of two vocal units, and no harmonic structure was observed. Once the subjects have always produced these vocalizations while cornered and exhibiting defensive behavior against another subject/human disturbance, these vocalizations were termed as distress. Subjects produced a hiss-purr-like sound while trying to avoid contact with another by bowing or lowering their bodies, humping, or even moving elsewhere when sound production ceased. This shows that the sound repertoire of armadillos is still to be unveiled and seems to be much more complex than previously thought.(AU)

First records of Brazilian three-banded armadillo (Tolypeutes tricinctus, Mammalia, Cingulata, Chlamyphoridae) predation by jaguar (Panthera onca, Mammalia, Carnivora, Felidae)

Abstract The jaguar Panthera onca and the Brazilian three-banded armadillo Tolypeutes tricinctus are two threatened mammals that coexist in the Caatinga dry forests and the Cerrado savannas of Brazil. Yet, to the best of our knowledge, interactions between these species have not been reported in the literature. Here, we present the first records of P. onca predation on T. tricinctus from two different areas in the Caatinga in northeastern Brazil. We showed that P. onca can pierce the hard carapace of T. tricinctus, which may be possible due to its distinctly strong bite and associated predation behavior. We argue that P. onca may be the most adapted non-human predator to feed on T. tricinctus, and that the smaller body sizes of P. onca individuals in the Caatinga may increase their likelihood to feed on smaller prey, including T. tricinctus. Thus, the originality of our records is probably more related to insufficient research in the areas where these species coexist than to the rarity of this interaction.

First records of Brazilian three-banded armadillo (Tolypeutes tricinctus, Mammalia, Cingulata, Chlamyphoridae) predation by jaguar (Panthera onca, Mammalia, Carnivora, Felidae)

Abstract The jaguar Panthera onca and the Brazilian three-banded armadillo Tolypeutes tricinctus are two threatened mammals that coexist in the Caatinga dry forests and the Cerrado savannas of Brazil. Yet, to the best of our knowledge, interactions between these species have not been reported in the literature. Here, we present the first records of P. onca predation on T. tricinctus from two different areas in the Caatinga in northeastern Brazil. We showed that P. onca can pierce the hard carapace of T. tricinctus, which may be possible due to its distinctly strong bite and associated predation behavior. We argue that P. onca may be the most adapted non-human predator to feed on T. tricinctus, and that the smaller body sizes of P. onca individuals in the Caatinga may increase their likelihood to feed on smaller prey, including T. tricinctus. Thus, the originality of our records is probably more related to insufficient research in the areas where these species coexist than to the rarity of this interaction.

Histopathology and microscopic morphology of protozoan and metazoan parasites of free ranging armadillos in Brazil / Histopatologia e morfologia microscópica de parasitos protozoários e metazoários de tatus de vida livre no Brasil

This study assessed microscopic morphology of protozoan and metazoan parasites, as well as parasite-associated histopathologic changes in five Brazilian free-ranging armadillos. Three armadillos had intra sarcolemmal cysts of Sarcocystis sp. in skeletal muscles without microscopic changes. One Dasypus novemcinctus was found parasitized with a nematode morphologically compatible with an oxyurid in the small intestine. One Dasypus sp. had neutrophilic enteritis associated with adult and larval stages of Strongyloides sp. and one D. novemcinctus had multiple embryonated eggs free in the lumen of the small intestine with mild neutrophilic enteritis. These findings represent a contribution for expanding our knowledge on parasitic diseases of armadillos.(AU)

Este estudo avaliou a morfologia microscópica de parasitos protozoários e metazoários, bem como lesões associadas ao parasitismo em cinco tatus de vida livre no Brasil. Três tatus tinham cistos de Sarcocystis sp. Intra-sarcolemal em músculos esqueléticos sem alterações microscópicas. Um Dasypus novemcinctus estava parasitado com um nematodo morfologicamente compatível com oxiurideo no intestino delgado. Um Dasypus sp. apresentou enterite neutrofílica associada com estágios larvais de Strongyloides sp. e um D. novemcinctus apresentou múltiplos ovos embrionados livres no lúmen do intestino delgado, associado a enterite neutrofílica discreta. Estes achados representam uma contribuição para a expansão do conhecimento sobre doenças parasitárias de tatus.(AU)

Histopathology and microscopic morphology of protozoan and metazoan parasites of free ranging armadillos in Brazil / Histopatologia e morfologia microscópica de parasitos protozoários e metazoários de tatus de vida livre no Brasil

This study assessed microscopic morphology of protozoan and metazoan parasites, as well as parasite-associated histopathologic changes in five Brazilian free-ranging armadillos. Three armadillos had intra sarcolemmal cysts of Sarcocystis sp. in skeletal muscles without microscopic changes. One Dasypus novemcinctus was found parasitized with a nematode morphologically compatible with an oxyurid in the small intestine. One Dasypus sp. had neutrophilic enteritis associated with adult and larval stages of Strongyloides sp. and one D. novemcinctus had multiple embryonated eggs free in the lumen of the small intestine with mild neutrophilic enteritis. These findings represent a contribution for expanding our knowledge on parasitic diseases of armadillos.(AU)

Este estudo avaliou a morfologia microscópica de parasitos protozoários e metazoários, bem como lesões associadas ao parasitismo em cinco tatus de vida livre no Brasil. Três tatus tinham cistos de Sarcocystis sp. Intra-sarcolemal em músculos esqueléticos sem alterações microscópicas. Um Dasypus novemcinctus estava parasitado com um nematodo morfologicamente compatível com oxiurideo no intestino delgado. Um Dasypus sp. apresentou enterite neutrofílica associada com estágios larvais de Strongyloides sp. e um D. novemcinctus apresentou múltiplos ovos embrionados livres no lúmen do intestino delgado, associado a enterite neutrofílica discreta. Estes achados representam uma contribuição para a expansão do conhecimento sobre doenças parasitárias de tatus.(AU)

First records of Brazilian three-banded armadillo (Tolypeutes tricinctus,Mammalia, Cingulata, Chlamyphoridae) predation by jaguar (Panthera onca,Mammalia, Carnivora, Felidae)

The jaguar Panthera onca and the Brazilian three-banded armadillo Tolypeutes tricinctus are two threatened mammals that coexist in the Caatinga dry forests and the Cerrado savannas of Brazil. Yet, to the best of our knowledge, interactions between these species have not been reported in the literature. Here, we present the first records of P. onca predation on T. tricinctus from two different areas in the Caatinga in northeastern Brazil. We showed that P. onca can pierce the hard carapace of T. tricinctus, which may be possible due to its distinctly strong bite and associated predation behavior. We argue that P. oncamay be the most adapted non-human predator to feed on T. tricinctus, and that the smaller body sizes of P. onca individuals in the Caatinga may increase their likelihood to feed on smaller prey, including T. tricinctus. Thus, the originality of our records is probably more related to insufficient research in the areas where these species coexist than to the rarity of this interaction.(AU)

Desenvolvimento corporal de um filhote de tatu verdadeiro Dasypus novemcinctus(Linnaeus, 1758) nascido sob cuidados humanos / Body development of a young armadillo Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) born under human care / Desarrollo corporal de una cría de armadillo Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) nacido bajo cuidados humanos

O objetivo deste trabalho foi acompanhar o crescimento de um filhote macho de Dasypus novemcinctus nascido em 10 de outubro de 2017 no Instituto “Lauro de Souza Lima”. Entre 15 dias e 200 dias de vida, foram realizadas pesagens e medições do animal a cada 15 dias. Entre 230 e 390 dias de vida, foram realizadas mais três pesagens e medições. Avaliou-se o ganho de peso e o crescimento do filhote. O filhote apresentou um desenvolvimento corporal linear e um ganho de peso adequado, em todo o período avaliado, exceto pelo período mais frio do ano, considerando os cuidados básicos e alimentação oferecidos, correspondendo às expectativas de crescimento da espécie.(AU)

This work aimed to follow the growth of a male Dasypus novemcinctus born October 10, 2017 at the "Lauro de Souza Lima" Institute. Between 15 days and 200 days of life, the animal was weighed and measured fortnightly. Between 230 and 390 days of life, three more weighing and measurements were performed. The pup presented a linear body development and an adequate weight gain, throughout the evaluated period, except for the coldest period of the year, considering the basic care and feeding offered, corresponding to the growth expectations of the species.(AU)

El objetivo de este trabajo fue acompañar el desarrollo corporal de una cría macho de Dasypus novencinctus nacido el 10 de octubre de 2017 en el Instituto "Lauro de Souza Lima". Entre 15 días y 200 días de vida, se realizaron pesajes y mediciones del animal cada 15 días. Entre 230 y 390 días de vida, se realizaron otros tres pesajes y mediciones. Se evaluaron ganancia de peso y crecimiento del armadillo. La cría del armadillo presentó un desarrollo corporal lineal y una ganancia de peso adecuada, en todo el período evaluado, excepto por el período más frío del año, considerando los cuidados básicos y alimentación ofrecidos, correspondiendo a las expectativas de crecimiento de la especie.(AU)

Desenvolvimento corporal de um filhote de tatu verdadeiro Dasypus novemcinctus(Linnaeus, 1758) nascido sob cuidados humanos / Body development of a young armadillo Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) born under human care / Desarrollo corporal de una cría de armadillo Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) nacido bajo cuidados humanos

O objetivo deste trabalho foi acompanhar o crescimento de um filhote macho de Dasypus novemcinctus nascido em 10 de outubro de 2017 no Instituto “Lauro de Souza Lima”. Entre 15 dias e 200 dias de vida, foram realizadas pesagens e medições do animal a cada 15 dias. Entre 230 e 390 dias de vida, foram realizadas mais três pesagens e medições. Avaliou-se o ganho de peso e o crescimento do filhote. O filhote apresentou um desenvolvimento corporal linear e um ganho de peso adequado, em todo o período avaliado, exceto pelo período mais frio do ano, considerando os cuidados básicos e alimentação oferecidos, correspondendo às expectativas de crescimento da espécie.

This work aimed to follow the growth of a male Dasypus novemcinctus born October 10, 2017 at the "Lauro de Souza Lima" Institute. Between 15 days and 200 days of life, the animal was weighed and measured fortnightly. Between 230 and 390 days of life, three more weighing and measurements were performed. The pup presented a linear body development and an adequate weight gain, throughout the evaluated period, except for the coldest period of the year, considering the basic care and feeding offered, corresponding to the growth expectations of the species.

El objetivo de este trabajo fue acompañar el desarrollo corporal de una cría macho de Dasypus novencinctus nacido el 10 de octubre de 2017 en el Instituto "Lauro de Souza Lima". Entre 15 días y 200 días de vida, se realizaron pesajes y mediciones del animal cada 15 días. Entre 230 y 390 días de vida, se realizaron otros tres pesajes y mediciones. Se evaluaron ganancia de peso y crecimiento del armadillo. La cría del armadillo presentó un desarrollo corporal lineal y una ganancia de peso adecuada, en todo el período evaluado, excepto por el período más frío del año, considerando los cuidados básicos y alimentación ofrecidos, correspondiendo a las expectativas de crecimiento de la especie.

Primeira descrição de pseudoparasitismo por esporocistos de Monocystis sp. em tatu-galinha, Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) - relato de caso / First description of pseudoparasitism by sporocysts of Monocystis sp. in nine banded armadillo, Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) - case report

O presente artigo é um relato sobre uma fêmea de D. novemcinctus que foi capturada de forma imprevista, durante um projeto de avaliação sanitária de animais silvestres sinantrópicos do município de Toledo/PR (autorização Sisbio/Ibama n. 55109-1). Durante a avaliação física, amostras de fezes foram coletadas após defecação espontânea e encaminhadas para análise. O material foi submetido aos métodos de flutuação simples em solução hipersaturada de cloreto de sódio e centrífugo-flutuação em sacarose. Na leitura das lâminas obtidas pelo método de centrífugo-flutuação em sacarose, foram observadas estruturas com comprimento de aproximadamente 10µm, forma bicônica e um tampão em cada extremidade, compatíveis com esporocistos de Monocystis sp. Protozoários do filo Apicomplexa, os Monocystis sp., são geralmente parasitas de anelídeos, como as minhocas. Esse organismo é comumente correlato a pseudoparasitismo em vários animais, porém não foram encontrados relatos de pseudoparasitismo desse agente em tatus-galinhas, logo essa é a primeira descrição de Monocystis sp. em espécime de D. novemcinctus.(AU)

The present article is an account of a female of D. novemcinctus which was captured during a sanitary evaluation project of synanthropic wild animals of the municipality of Toledo/PR (license SISBIO/ICMBIO n°. 55109-1). During a physical evaluation, samples of feces were collected, after spontaneous defecation, and sent for analysis. The material was subjected to simple flotation methods in hypersaturated sodium chloride solution and centrifugal-flotation solutions in sucrose. In a test reading by the centrifugal-flotation method in sucrose, structures with approximately 10µm, biconical shape and one plate at each end were observed, compatible with sporocysts of Monocystis sp. Protozoa of the phylum Apicomplexa, like Monocystis sp., it is common parasitic annelids, such as worms. This organism is a correlate of pseudoparasitism in several animals but was not found to describe this product as an agent in nine banded armadillos, so this is a first description of Monocystis sp. in specimen of D. novemcinctus.(AU)

Primeira descrição de pseudoparasitismo por esporocistos de Monocystis sp. em tatu-galinha, Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) - relato de caso / First description of pseudoparasitism by sporocysts of Monocystis sp. in nine banded armadillo, Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) - case report

O presente artigo é um relato sobre uma fêmea de D. novemcinctus que foi capturada de forma imprevista, durante um projeto de avaliação sanitária de animais silvestres sinantrópicos do município de Toledo/PR (autorização Sisbio/Ibama n. 55109-1). Durante a avaliação física, amostras de fezes foram coletadas após defecação espontânea e encaminhadas para análise. O material foi submetido aos métodos de flutuação simples em solução hipersaturada de cloreto de sódio e centrífugo-flutuação em sacarose. Na leitura das lâminas obtidas pelo método de centrífugo-flutuação em sacarose, foram observadas estruturas com comprimento de aproximadamente 10µm, forma bicônica e um tampão em cada extremidade, compatíveis com esporocistos de Monocystis sp. Protozoários do filo Apicomplexa, os Monocystis sp., são geralmente parasitas de anelídeos, como as minhocas. Esse organismo é comumente correlato a pseudoparasitismo em vários animais, porém não foram encontrados relatos de pseudoparasitismo desse agente em tatus-galinhas, logo essa é a primeira descrição de Monocystis sp. em espécime de D. novemcinctus.(AU)

The present article is an account of a female of D. novemcinctus which was captured during a sanitary evaluation project of synanthropic wild animals of the municipality of Toledo/PR (license SISBIO/ICMBIO n°. 55109-1). During a physical evaluation, samples of feces were collected, after spontaneous defecation, and sent for analysis. The material was subjected to simple flotation methods in hypersaturated sodium chloride solution and centrifugal-flotation solutions in sucrose. In a test reading by the centrifugal-flotation method in sucrose, structures with approximately 10µm, biconical shape and one plate at each end were observed, compatible with sporocysts of Monocystis sp. Protozoa of the phylum Apicomplexa, like Monocystis sp., it is common parasitic annelids, such as worms. This organism is a correlate of pseudoparasitism in several animals but was not found to describe this product as an agent in nine banded armadillos, so this is a first description of Monocystis sp. in specimen of D. novemcinctus.(AU)

Diversity of medium and large neotropical mammals in an area ofmixed rain forest / Diversidade de mamíferos neotropicais de médio e grande porte em área de floresta ombrófila mista

Medium and large mammals (> 1 kg) were studied using camera traps with active sensors in a Conservation Unit located in an area of Mixed Rain Forest or Araucaria Forest (Atlantic Forest at altitude) in the South of Brazil, as a method for investigating the area’s conservation status and enabling comparison with other types of environments in which these mammals occur in the Neotropical region. From June 2005 to December 2010, a sampling effort of 10,844 trap-days yielded records of 21 species. A minimum sampling effort of 3000 trap-days was necessary to obtain records of all of these species. The species with the greatest frequency of photocaptures was Dasyprocta azarae (agouti), followed by Leopardus pardalis (ocelot), Leopardus guttulus (southern oncilla or little spotted cat) and Dasypus novemcinctus (nine-banded armadillo). The species with the lowest numbers of records were Pecari tajacu (collared peccary) and Chrysocyon brachyurus (maned wolf). Although the Conservation Unit studied has small physical dimensions, the diversity of species of medium and large mammals was comparable with what has been observed in other types of forests, in particular because there are still effective biological corridors in the area.

Mamíferos de médio e grande porte (> 1 kg) foram estudados com emprego de armadilhas fotográficas com sensores ativos em unidade de conservação em área de floresta ombrófila mista ou floresta com araucárias (Floresta Atlântica de altitude) no sul do Brasil com objetivo de averiguar o status de conservação e permitir a comparação entre diferentes áreas na região Neotropical. No período de junho de 2005 a dezembro de 2010, com esforço amostral de 10.844 armadilhas-dia, 21 espécies foram registradas. O esforço amostral mínimo de 3.000 armadilhas-dia foi necessário para detectar todas estas espécies. A espécie com a maior frequência de foto-capturas foi Dasyprocta azarae (cutia), seguida por Leopardus pardalis (jaguatirica), Leopardus guttulus (gato-do-mato-pequeno-do-sul) e Dasypus novemcinctus (tatu-galinha). As espécies com o menor número de registros foram Pecari tajacu (cateto) e Chrysocyon brachyurus (lobo-guará). Apesar das pequenas dimensões da unidade de conservação estudada, a diversidade de espécies de mamíferos de médio e grande porte foi comparável ao observado em outros tipos de florestas, especialmente devido à presença de corredores ecológicos na região.

Diversity of medium and large neotropical mammals in an area ofmixed rain forest / Diversidade de mamíferos neotropicais de médio e grande porte em área de floresta ombrófila mista

Medium and large mammals (> 1 kg) were studied using camera traps with active sensors in a Conservation Unit located in an area of Mixed Rain Forest or Araucaria Forest (Atlantic Forest at altitude) in the South of Brazil, as a method for investigating the areas conservation status and enabling comparison with other types of environments in which these mammals occur in the Neotropical region. From June 2005 to December 2010, a sampling effort of 10,844 trap-days yielded records of 21 species. A minimum sampling effort of 3000 trap-days was necessary to obtain records of all of these species. The species with the greatest frequency of photocaptures was Dasyprocta azarae (agouti), followed by Leopardus pardalis (ocelot), Leopardus guttulus (southern oncilla or little spotted cat) and Dasypus novemcinctus (nine-banded armadillo). The species with the lowest numbers of records were Pecari tajacu (collared peccary) and Chrysocyon brachyurus (maned wolf). Although the Conservation Unit studied has small physical dimensions, the diversity of species of medium and large mammals was comparable with what has been observed in other types of forests, in particular because there are still effective biological corridors in the area.(AU)

Mamíferos de médio e grande porte (> 1 kg) foram estudados com emprego de armadilhas fotográficas com sensores ativos em unidade de conservação em área de floresta ombrófila mista ou floresta com araucárias (Floresta Atlântica de altitude) no sul do Brasil com objetivo de averiguar o status de conservação e permitir a comparação entre diferentes áreas na região Neotropical. No período de junho de 2005 a dezembro de 2010, com esforço amostral de 10.844 armadilhas-dia, 21 espécies foram registradas. O esforço amostral mínimo de 3.000 armadilhas-dia foi necessário para detectar todas estas espécies. A espécie com a maior frequência de foto-capturas foi Dasyprocta azarae (cutia), seguida por Leopardus pardalis (jaguatirica), Leopardus guttulus (gato-do-mato-pequeno-do-sul) e Dasypus novemcinctus (tatu-galinha). As espécies com o menor número de registros foram Pecari tajacu (cateto) e Chrysocyon brachyurus (lobo-guará). Apesar das pequenas dimensões da unidade de conservação estudada, a diversidade de espécies de mamíferos de médio e grande porte foi comparável ao observado em outros tipos de florestas, especialmente devido à presença de corredores ecológicos na região.(AU)

Susceptibility of targets to the vampire bat Desmodus rotundus are proportional to their abundance in Atlantic Forest fragments?

ABSTRACT Desmodus rotundus (É. Geoffroy, 1810) feeds preferably on mammal blood, including livestock animals, such as bovine cattle. In spite of using native preys in the wild, records of this feeding activity are scarce. In the present study, we investigated the foraging activity of D. rotundus based on video footage from camera traps in Atlantic Forest fragments in southern Goiás State, Brazil. Out of 23 mammal species recorded in the study area, four had interactions with Desmodus rotundus (Priodontes maximus, Tapirus terrestris, Mazama americana and Pecari tajacu). The records were obtained from early night to sunrise. There was a correlation between abundance of potential preys and the choice of the target by D. rotundus. Most of the bat-prey interaction occurred on the edge of fragments. The present study records for the first time the potential use of the collared peccary (P. tajacu) and the giant armadillo (P. maximus) in the diet of D. rotundus.

RESUMO Desmodus rotundus (É. Geoffroy, 1810) se alimenta preferencialmente de sangue de mamíferos, incluindo animais de criação como gado bovino. Apesar de utilizarem presas nativas na natureza os registros desta atividade alimentar são escassos. Neste estudo investigamos atividade de forrageio desta espécie baseado em filmagens de armadilhas fotográficas em fragmentos de Mata Atlântica no sul de Goiás. Das 23 espécies de mamíferos registradas na área de estudo, quatro possuíram interações com Desmodus rotundus (Priodontes maximus, Tapirus terrestris, Mazama americana e Pecari tajacu). Os registros foram obtidos desde o início da noite até o crepúsculo matutino. Houve correlação entre abundância de potenciais presas e a escolha do alvo por D. rotundus. A maior parte da interação morcego-presa ocorreu na borda dos fragmentos. Este trabalho registra pela primeira vez a potencial utilização de catetos (P. tajacu) e do tatu-canastra (P. maximus) na dieta de D. rotundus.

Carcinoma mamário com metástase pulmonar em tatu-peba (Eupharactus sexcinctus) / Breast carcinoma with pulmonary metastasis in armadillo (Eupharactus sexcinctus)

Background: Breast neoplasms are among the most common neoplastic conditions affecting domestic animals and are considered the most common type of cancer affecting women, bitches, and cats. However, there are few reports on breast neoplasms in wild animals, and there is no record of their occurrence in armadillos worldwide. Breast neoplasms are hormone-dependent neoplasms that often cause lymph node and pulmonary metastases. The diagnosis is based on the patients history, complete physical examination, and complementary tests. Here we report a case of mammary neoplasia with pulmonary metastasis in an armadillo (Euphractus sexcinctus).Case: A senile female armadillo was referred to us for treatment with a history of hyporexia and nodules in both breasts. Ultrasonographic examination revealed a hypoechogenic nodular lesion with a cross-section of approximately 1.3 × 1.4 cm and well-defined borders. The lesion had a circumscribed aspect in the left mammary gland. In the right mammary gland, there was a heterogeneous lesion with cystic formations and anechoic content. Cytopathological examination of the nodules was performed by fine needle aspiration cytology and revealed the presence of epithelial cells with ovoid and aberrant nuclei, anisocariasis, binucleation, coarse chromatin, and a high nucleus to cytoplasm ratio suggestive of carcinoma. The animal had a lean body score due to hyporexia that had evolved to anorexia and was undergoing supportive treatment. Nevertheless, the animal died two months after the cytologic diagnosis. A necropsy was performed. Cutting of the breast nodules revealed a hardened pale yellow material. The animal had pronounced pleural effusion, hemorrhage, and numerous pale yellow nodules of various sizes with firm consistency throughout the lung parenchyma. It also had hepatomegaly and splenomegaly.[...](AU)

Carcinoma mamário com metástase pulmonar em tatu-peba (Eupharactus sexcinctus) / Breast carcinoma with pulmonary metastasis in armadillo (Eupharactus sexcinctus)

Background: Breast neoplasms are among the most common neoplastic conditions affecting domestic animals and are considered the most common type of cancer affecting women, bitches, and cats. However, there are few reports on breast neoplasms in wild animals, and there is no record of their occurrence in armadillos worldwide. Breast neoplasms are hormone-dependent neoplasms that often cause lymph node and pulmonary metastases. The diagnosis is based on the patient’s history, complete physical examination, and complementary tests. Here we report a case of mammary neoplasia with pulmonary metastasis in an armadillo (Euphractus sexcinctus).Case: A senile female armadillo was referred to us for treatment with a history of hyporexia and nodules in both breasts. Ultrasonographic examination revealed a hypoechogenic nodular lesion with a cross-section of approximately 1.3 × 1.4 cm and well-defined borders. The lesion had a circumscribed aspect in the left mammary gland. In the right mammary gland, there was a heterogeneous lesion with cystic formations and anechoic content. Cytopathological examination of the nodules was performed by fine needle aspiration cytology and revealed the presence of epithelial cells with ovoid and aberrant nuclei, anisocariasis, binucleation, coarse chromatin, and a high nucleus to cytoplasm ratio suggestive of carcinoma. The animal had a lean body score due to hyporexia that had evolved to anorexia and was undergoing supportive treatment. Nevertheless, the animal died two months after the cytologic diagnosis. A necropsy was performed. Cutting of the breast nodules revealed a hardened pale yellow material. The animal had pronounced pleural effusion, hemorrhage, and numerous pale yellow nodules of various sizes with firm consistency throughout the lung parenchyma. It also had hepatomegaly and splenomegaly.[...]