Cranioplasty using autologous fasciae latae graft for nasal bone fracture repair in a dog

Background: In facial reconstruction, several kinds of grafts can be used, like bone grafting, cutaneous grafting, biological membranes, fasciae latae, biomaterials, and others. The advantage of using fasciae latae in the tissue reparation is the need of little blood supply, making it a viable option in the restoration of biological functions. The objective of this study was to describe the case of a female poodle, 12-year-old, and with subcutaneous emphysema due to fracture of the nasal bone, submitted to cranioplasty using fasciae latae. Case: It was attended a 12-year-old female poodle due to a traumatic brain injury. At physical examination, the animal had presented facial swelling and respiratory distress with inspiratory effort. Additionally, were verified subcutaneous emphysema and a depression in the nasal plane region with crepitus on palpation. Radiographic examinations revealed nasal bone and maxilla fractures. The animal was submitted to cranioplasty for nasal bone fracture repair. To access the nasal bone and frontal sinus was performed an incision in the dorsal midline from the level of medial orbital rim to the nasal plane. The subcutaneous tissue was divulsioned to allow the exposure of the nasal bone fracture, whose small fragments prevented the internal fixation. The bone defect was then repaired using free autologous fasciae latae of 2 cm wide x 3 cm long, sutured to the periosteum. Subcutaneous emphysema gradually decreased until its resolution at three days postoperatively. The surgical wound had complete healing at 10 days after surgery without concomitant complications. Discussion: The choice of the reconstructive technique is based on the operative planning and the surgeons experience. In the present case we opted for the autologous fasciae latae graft since its ready availability and lesser predisposition to immunogenic sensibilization and rejection.[…](AU)

Cranioplasty using autologous fasciae latae graft for nasal bone fracture repair in a dog

Background: In facial reconstruction, several kinds of grafts can be used, like bone grafting, cutaneous grafting, biological membranes, fasciae latae, biomaterials, and others. The advantage of using fasciae latae in the tissue reparation is the need of little blood supply, making it a viable option in the restoration of biological functions. The objective of this study was to describe the case of a female poodle, 12-year-old, and with subcutaneous emphysema due to fracture of the nasal bone, submitted to cranioplasty using fasciae latae. Case: It was attended a 12-year-old female poodle due to a traumatic brain injury. At physical examination, the animal had presented facial swelling and respiratory distress with inspiratory effort. Additionally, were verified subcutaneous emphysema and a depression in the nasal plane region with crepitus on palpation. Radiographic examinations revealed nasal bone and maxilla fractures. The animal was submitted to cranioplasty for nasal bone fracture repair. To access the nasal bone and frontal sinus was performed an incision in the dorsal midline from the level of medial orbital rim to the nasal plane. The subcutaneous tissue was divulsioned to allow the exposure of the nasal bone fracture, whose small fragments prevented the internal fixation. The bone defect was then repaired using free autologous fasciae latae of 2 cm wide x 3 cm long, sutured to the periosteum. Subcutaneous emphysema gradually decreased until its resolution at three days postoperatively. The surgical wound had complete healing at 10 days after surgery without concomitant complications. Discussion: The choice of the reconstructive technique is based on the operative planning and the surgeon’s experience. In the present case we opted for the autologous fasciae latae graft since its ready availability and lesser predisposition to immunogenic sensibilization and rejection.[…]

Comparison among bone marrow mesenchymal stem and mononuclear cells to promote functional recovery after spinal cord injury in rabbits

Purpose: To investigate the efficacy of allogeneic mesenchymal stem-cells and autologous mononuclear cells to promote sensorimotor recovery and tissue rescue. Methods: Female rabbits were submitted to the epidural balloon inflation method and the intravenous cells administrations were made after 8 hours or seven days after injury induction. Sensorimotor evaluation of the hindlimbs was performed, and the euthanasia was made thirty days after the treatment. Spinal cords were stained with hematoxylin and eosin. Results: Both therapies given 8 hours after the injury promoted the sensorimotor recovery after a week. Only the group treated after a week with mononuclear cells showed no significant recovery at post-injury day 14. In the days 21 and 28, all treatments promoted significant recovery. Histopathological analysis showed no difference among the experimental groups. Our results showed that both bone marrow-derived cell types promoted significant sensorimotor recovery after injury, and the treatment made at least a week after injury is efficient. Conclusion: The possibilities of therapy with bone marrow-derived cells are large, increasing the therapeutic arsenal for the treatment of spinal cord injury.(AU)

Glial scar-modulation as therapeutic tool in spinal cord injury in animal models

Purpose: Spinal Cord injury represents, in veterinary medicine, most of the neurological attendances and may result in permanent disability, death or euthanasia. Due to inflammation resulting from trauma, it originates the glial scar, which is a cell interaction complex system. Its function is to preserve the healthy circuits, however, it creates a physical and molecular barrier that prevents cell migration and restricts the neuroregeneration ability. Methods: This review aims to present innovations in the scene of treatment of spinal cord injury, approaching cell therapy, administration of enzyme, anti-inflammatory, and other active principles capable of modulating the inflammatory response, resulting in glial scar reduction and subsequent functional improvement of animals. Results: Some innovative therapies as cell therapy, administration of enzymes, immunosuppressant or other drugs cause the modulation of inflammatory response proved to be a promising tool for the reduction of gliosis. Conclusion: Those tools promise to reduce gliosis and promote locomotor recovery in animals with spinal cord injury.(AU)

Cystopexy with prepubic catheter in the treatment of recurrent bladder retroflexion in perineal hernia in a dog - case report / Cistopexia por sondagem pré-púbica no tratamento de retroflexão vesical redicivante em hérnia perineal em cão - Relato de caso

This paper aims to disclose the technique of cystopexy through cystostomy with introduction of foley catheter in the treatment of chronic recurrent perineal hernia with bladder content. Recurrence of perineal hernia is still challenge for surgeons and techniques to prevent or treat this complication should be disseminated. Thus, the realization of cystopexy aims to minimize relapse cases of retroflexion of the organ, considered an emergency situation. In this clinical case, was obtained the cystopexy after conducting cystostomy and introduction of foley catheter through the abdominal wall in a dog with a history of chronic perineal hernia with bladder retroflexion and recurrence after hernia repair with perineal affixing of the pelvic diaphragm muscles. The probe was maintained for eight days to provide adhesion of the urinary bladder with the retroumbilical ventral abdominal wall, allowing satisfactory recovery of the patient. Although some similar techniques have been described, the application of this method was not found in the literature as an adjunct to correction of perineal hernia method.

Este trabalho tem o intuito de divulgar a técnica de cistopexia por meio de cistostomia com introdução de sonda de foley no tratamento de hérnia perineal crônica recidivante com conteúdo vesical. Recidivas da herniação perineal são ainda desafio ao cirurgião e técnicas que previnam ou tratem tal complicação devem ser difundidas. Deste modo, a realização da cistopexia tem por objetivo minimizar os casos de recidiva da retroflexão do órgão, situação considerada de urgência. No presente caso clínico, obteve-se a cistopexia após a realização de cistostomia e introdução de sonda de foley através da parede abdominal em cão com histórico de hérnia perineal crônica com retroflexão de bexiga e recidiva após herniorrafia perinal com aposição dos músculos do diafragma pélvico. A sonda foi mantida por oito dias proporcionando a adesão da vesícula urinária à parede abdominal retro-umbilical ventral, permitindo satisfatória recuperação do paciente. Embora algumas técnicas similares já tenham sido descritas, a aplicação do referido método não foi encontrado na literatura como método adjuvante à correção de hérnia perineal.

Cystopexy with prepubic catheter in the treatment of recurrent bladder retroflexion in perineal hernia in a dog - case report / Cistopexia por sondagem pré-púbica no tratamento de retroflexão vesical redicivante em hérnia perineal em cão - Relato de caso

This paper aims to disclose the technique of cystopexy through cystostomy with introduction of foley catheter in the treatment of chronic recurrent perineal hernia with bladder content. Recurrence of perineal hernia is still challenge for surgeons and techniques to prevent or treat this complication should be disseminated. Thus, the realization of cystopexy aims to minimize relapse cases of retroflexion of the organ, considered an emergency situation. In this clinical case, was obtained the cystopexy after conducting cystostomy and introduction of foley catheter through the abdominal wall in a dog with a history of chronic perineal hernia with bladder retroflexion and recurrence after hernia repair with perineal affixing of the pelvic diaphragm muscles. The probe was maintained for eight days to provide adhesion of the urinary bladder with the retroumbilical ventral abdominal wall, allowing satisfactory recovery of the patient. Although some similar techniques have been described, the application of this method was not found in the literature as an adjunct to correction of perineal hernia method.(AU)

Este trabalho tem o intuito de divulgar a técnica de cistopexia por meio de cistostomia com introdução de sonda de foley no tratamento de hérnia perineal crônica recidivante com conteúdo vesical. Recidivas da herniação perineal são ainda desafio ao cirurgião e técnicas que previnam ou tratem tal complicação devem ser difundidas. Deste modo, a realização da cistopexia tem por objetivo minimizar os casos de recidiva da retroflexão do órgão, situação considerada de urgência. No presente caso clínico, obteve-se a cistopexia após a realização de cistostomia e introdução de sonda de foley através da parede abdominal em cão com histórico de hérnia perineal crônica com retroflexão de bexiga e recidiva após herniorrafia perinal com aposição dos músculos do diafragma pélvico. A sonda foi mantida por oito dias proporcionando a adesão da vesícula urinária à parede abdominal retro-umbilical ventral, permitindo satisfatória recuperação do paciente. Embora algumas técnicas similares já tenham sido descritas, a aplicação do referido método não foi encontrado na literatura como método adjuvante à correção de hérnia perineal.(AU)

AVALIAÇÃO IN VITRO DA CITOTOXICIDADE E DOS FATORES ANGIOGÊNICOS DE NANOCOMPÓSITOS DE MATRIZ DE FOSFATO DE CÁLCIO PARA USO EM REPARAÇÃO ÓSSEA

Biomateriais para reparo ósseo são compostos naturais ou sintéticos utilizados na clínica médica e odontológica, que auxiliam e estimulam a reparação óssea. Devem apresentar biocompatibilidade, biofuncionalidade, ausência de toxicidade e propriedades mecânicas adequadas pós-implantação. As biocerâmicas nanoestruturadas de fosfato de cálcio e os nanocompósitos com matriz de fosfatos de cálcio tem se destacado na área de biomateriais de reconstituição óssea pela sua semelhança química e cristalográfica com a apatita óssea do esqueleto humano, reforçando sua importância na ortopedia, odontologia e regeneração do tecido ósseo. Apresentam características microestruturais, nanoestruturais, microporosidade interconectada e área superficial de grãos diferenciadas dos biomateriais convencionais. Independente do biomaterial desenvolvido, o primeiro nível de testes, dentro da avaliação de biocompatibilidade é a determinação da citotoxicidade in vitro. Outro fator essencial na reparação de tecido ósseo lesado é a adequada vascularização da região. Alguns biomateriais apresentam a habilidade de estimular a secreção de fatores angiogênicos, como o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e o fator de crescimento fibroblástico básico (FGF-2). O objetivo deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade de biomateriais cerâmicos de fosfato de cálcio e nanocompósitos de matriz de fosfato de cálcio em células de linhagem Vero, investigar seus efeitos na expressão de fatores angiogênicos e a interação célula-material em cultura de fibroblastos bovinos. Foram testados os seguintes biomateriais: hidroxiapatita (HA) (1100°C/2h); e os nanocompósitos HA/SiO2 5% (1100°C/2h); HA/ZrO2 5% (1100°C/2h) e HA/MgO 1% (1100°C/2h). Nos resultados de viabilidade celular obtidos por meio do ensaio colorimétrico MTT e curva de crescimento constatou-se que os biomateriais testados se mostraram biocompatíveis. A análise da interação célula-material feita por microscopia eletrônica de varredura mostrou a adesão dos fibroblastos na superfície dos biomateriais testados, reforçando sua característica de biocompatibilidade. Os nanocompósitos HA/SiO2 5% e HA/ZrO2 5% induziram a expressão de VEGF e FGF-2 após o cultivo dos fibroblastos com o extrato desses biomateriais por 72 horas, o que sugere seu potencial para utilização como estimuladores da angiogênese em reparo ósseo.

Biomaterials for bone repair are natural or synthetic compounds used in medical and dental clinics, which aid and stimulate bone reparation. They must have biocompatibility, biofunctionality, absence of toxicity and adequate post-implantation mechanical properties. The nanostructured calcium phosphate bioceramics and the calcium phosphate matrix nanocomposites have been prominent in the biomaterials area of bone reconstitution due to their chemical and crystallographic similarity to the human skeletal bone apatite, reinforcing their importance in orthopedics, dentistry and bone tissue regeneration. They have microstructural, nanostructural, interconnected microporosity and grain surface area differentiated from conventional biomaterials. Regardless of the biomaterial developed the first level of tests within the biocompatibility assessment is the determination of in vitro cytotoxicity. Another essential factor in the repair of damaged bone tissue is the adequate vascularization of the region. Some biomaterials have the ability to stimulate the secretion of angiogenic factors, such as vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (FGF-2). The aim of this work was to evaluate the cytotoxicity of calcium phosphate ceramics and calcium phosphate matrix nanocomposites in Vero cells, investigate their effects on the expression of angiogenic factors and the cellmaterial interaction in bovine fibroblasts culture. The following biomaterials were tested: hydroxyapatite (HA) (1100 °C/2h); the nanocomposites HA/SiO2 5% (1100°C/2h); HA/ZrO2 5% (1100 ° C/2h) and HA/MgO 1% (1100 °C/2h). In the cell viability results obtained by means of the MTT colorimetric assay and growth curve it was verified that the tested biomaterials were biocompatible. The analysis of the cellmaterial interaction made by scanning electron microscopy showed fibroblasts adhesion on the surface of the tested biomaterials reinforcing its characteristic of biocompatibility. The nanocomposites HA/SiO2 5% and HA/ZrO2 5% induced the expression of VEGF and FGF-2 after fibroblast culture with the extract of these biomaterials for 72 hours, suggesting its potential for use as angiogenesis stimulators in bone repair.

Avaliação morfológica e por imagem radiográfica da matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada e metilmetacrilato, preservados em glicerina para reparação de falhas ósseas em tíbias de coelhos / Morphological evaluation and radiographic image of fragmented heterolog mineralized bone matrix and methylmethacrylate preserved in glycerin to repair osseous defects in tibias of rabbits

Os traumas que resultam em fraturas ósseas, principalmente as cominutivas, têm uma importância muito grande na rotina clínico-cirúrgica veterinária e humana. Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária medial da tíbia esquerda de 12 coelhos, a qual foi preenchida com implante constituído de matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada e metilmetacrilato, preservados em glicerina (98%) para a sua reconstrução. Foi realizada avaliação morfológica e radiológica aos 30, 60, 90 e 120 dias e observou-se a incorporação do implante ao leito receptor, em 100% dos casos, mostrando ser biologicamente compatível, pois promoveu a reparação das falhas ósseas, sem sinais de infecção, migração e/ou rejeição, sendo uma opção de substituto para preencher defeitos ósseos.(AU)

The traumas that result in bone fractures, especially comminuted, have high importance in veterinary and human surgical routine. A 6mm of segmental defect was performed at the medial metaphyseal region of the left tibia of 12 rabbits and an association of fragmented heterologue mineralized bone matrix and methylmethacrylate conserved in glycerin (98%) was used as a graft to fill the bone defect. To evaluate the procedure morphological and radiological exams were performed after 30, 60, 90 and 120 days. There was gradual integration of the bone graft in the receptor bed in 100% of the cases showing that the material is biologically compatible as it promotes bone defect reparation without signs of infection, migration and/or rejection and can be considered one more option to be used as a substitute to fill bone defects.(AU)

Tomografia computadorizada da matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada e metilmetacrilato na reparação de falhas ósseas segmentares produzidas em tíbia de coelhos / Computed tomography to evaluate the association of fragmented heterolog cortical bone and methylmethacrylate to repare segmental bone defect produced in tibia of rabbits

Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária medial da tíbia de 12 coelhos, seguida de preenchimento desta por matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada conservada em glicerina (98%) e metilmetacrilato autoclavado, bem como avaliação por meio da tomografia computadorizada de feixe cônico (cone beam) aos 30, 60 e 90 dias. Houve incorporação gradativa do implante no leito receptor em relação ao tempo em 100% dos casos, o que mostra ser este biologicamente compatível, ao promover reparação da falha óssea, sem sinais de infecção, migração e/ou rejeição, caracterizando-se, assim, como nova opção de substituto ósseo para preenchimento de falhas ósseas.(AU)

A 6mm segmental defect was performed on the metaphyseal region of the tibia of 12 rabbits and the autoclaved fragmented heterolog cortical bone conserved in glycerin (98%) and methylmethacrylate was used as a bone graft for the reconstruction. The graft was placed in the receptor bed and its integration was evaluated by computed tomography after 30, 60 and 90 days. There was gradual bone graft incorporation in the receptor bed during the time in 100% of the cases. Fragmented cortical bone heterograft and methylmethacrylate was biologically compatible and promotes bone defect reparation without signs of infection, migration and or rejection, featuring a new option of osseous substitute to fill in bone defects.(AU)

aracterização de células mesenquimais estromais da medula óssea de coelhos associadas a hidroxiapatita e fibroína de seda na reparação óssea de coelhos

Terapias com células indiferenciadas são uma promissora ferramenta para aprimorar a reparação de diversos tecidos e órgãos. Muitos benefícios já foram demonstrados in vitro, entretanto, esforços têm sido dedicados para manter as células aplicadas in vivo no sítio em que se deseja a reparação, e, nesse contexto, biomateriais têm sido desenvolvidos. Assim, o objetivo do presente trabalho foi disponibilizar um método completo para obtenção, expansão e caracterização de células mesenquimais estromais (CME) oriundas da medula óssea de coelhos e avaliar o potencial de reparação óssea destas células quando utilizadas em associação com um novo biomaterial composto de hidroxiapatita e fibroína de seda (HAP/FS). Células mononucleares da medula óssea (CMMO) do úmero e fêmur de coelhos foram obtidas e, para avaliar sua taxa de proliferação, três meios de cultura diferentes foram testados. As CMMO também foram cultivadas em meios de indução osteogênico, condrogênico e adipogênico para comprovar a sua multipotencialidade. Em seguida, o biomaterial proposto foi caracterizado por difração de raios-x e microscopia eletronica de varredura, e seus efeitos na viabilidade celular e na ativação de leucócitos foram investigados. Finalmente, foi avaliada a habilidade deste biomaterial em atuar como um carreador de CME e o efeito da associação das CME ao biomaterial na reparação de defeitos ósseos na calvaria de coelhos também foi investigado. Os resultados mostraram que as técnicas aqui apresentadas fornecem um método completo para obtenção, expansão e caracterização de CME da medula óssea de coelhos de forma adequada e que a utilização destas células em associação com o compósito de HAP/SF teve um efeito benéfico na reparação dos defeitos em calvaria de coelhos.

Therapies based on undifferentiated cells has been shown to be a promising tool to improve the repair of various tissues and organs. Many benefits have been demonstrated in vitro already, however, efforts have been addressed to maintain the cells applied in vivo at the site where the reparation is desired, and, in this context, biomaterials have been developed. Therefore, the aim of this study was to provide a full method to harvest, expand and characterize mesenchymal stromal cells (MSCs) from rabbits bone marrow and to assess the bone repair potential of these cells when applied in combination to a new biomaterial composed of hydroxyapatite and silk fibroin (HAP/SF). Bone marrow mononuclear cells (BMMCs) were harvested from rabbits humerus and femur and their proliferation rate were tested using three different culture media. BMMCs were also cultured in osteogenic, chondrogenic and adipogenic media to prove their multipotentiality. Next, the biomaterial proposed was characterized by x-ray diffraction and scanning electron microscopy, and its effects on cell viability and leukocytes activation were assessed. Finally, the biomaterial ability to act as MSCs carrier was evaluated, and its effect, in combination with the proposed biomaterial, on the repair of bone defects in rabbits calvaria was also investigated. The results showed that the techniques presented here provide a full method for successful isolation, expansion and characterization of MSCs from rabbits bone marrow and the utilization of these cells combined to the HAP/SF composite have had a benefic effect on the defects repair in calvaria of rabbits.

Plasma rico em plaquetas associado ou não ao osso esponjoso autógeno no reparo de falhas ósseas experimentais / Platelet rich plasma associated or not to autogenous bone graft on the reparation of experimental bone defects in the rabbits cranium

O presente estudo avaliou a influência do plasma autógeno rico em plaquetas (PRP), associado ou não ao autoenxerto esponjoso (EOE), na reparação de falhas ósseas criadas no crânio de coelhos. A falha I foi preenchida com o PRP; a falha II com 3mg de EOE; a falha III com EOE associado ao PRP e a falha IV não foi preenchida, servindo como controle. Após as cirurgias, os animais foram separados em três grupos e eutanasiados aos 30, 60 e 90 dias. Na avaliação mesoscópica, independentemente do período de observação, o preenchimento ósseo, na falha controle e naquelas tratadas com PRP, iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Já nas falhas tratadas com EOE e com enxerto associado ao PRP, foi notado também crescimento ósseo na porção central das falhas. Na análise radiográfica, foi observada maior radiopacidade no interior das falhas tratadas com EOE e com enxerto associado ao PRP, em todos os tempos. Microscopicamente, aos 30 dias, na falha tratada com EOE associado ao PRP, os fragmentos ósseos do enxerto estavam indistintos do tecido ósseo neoformado, presente em toda a borda do defeito, associado à moderada quantidade de tecido conjuntivo fibroso muito vascularizado e celularizado. Esse tecido apresentou material amorfo, eosinofílico e extracelular, junto a um processo inflamatório, constituído por linfócitos e, em menor número, por macrófagos e células gigantes multinucleadas, que podem ter influenciado negativamente a formação óssea precoce. Aos 60 e 90 dias, apenas focos ocasionais de inflamação linfocitária foram observados. O comportamento dos dois tratamentos, PRP associado ou não ao EOE, em relação a preenchimento ósseo, foi semelhante ao final do período de observação; o enxerto, utilizado de forma isolada, determinou precocidade de reparação óssea e a tromboplastina, utilizada para formação do gel de plaquetas, incitou uma reação semelhante a do tipo corpo estranho, que atuou negativamente...(AU)

The present study evaluated autogenous platelet rich plasma's (PRP) influence on the reparation process of four bone defects made on rabbit's skull, associated or not to autogenous bone graft (EOE). Defect I received PRP only; defect II received 3mg of EOE only; defect III received EOE associated to PRP; defect IV was left to heal naturally, serving as control. After each surgery the animals were randomly divided into three groups that were euthanized at 30, 60 and 90 days. In the mesoscopic evaluation bone ingrowth started from the defect's borders to the center and from the bottom to the surface for all observation times on the control (VI) and PRP only (I) groups. In the groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) new bone was observed in the center of the defects. Radiographic analysis showed greater central radiopacity for groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) at all observation times. Microscopically in the group treated with EOE associated to PRP (III) at 30 days the graft was indistinguishable from new bone present on the border of the defect, associated to a moderate quantity of a very vascularized and cellular fibrous connective tissue. This tissue showed an extracelular eosinophilic amorphous foamy material, associated to an inflammatory process constituted by lymphocytes and in less number by macrophages and multinucleated giant cells that may have negatively influenced early bone formation. At 60 and 90 days occasional spots of lymphocytic inflammation were observed. Both treatments, PRP associated or not to EOE, were similar for the bone ingrowth at the final time of observation; the graft used alone determined early bone reparation and thromboplastine used for the platelet gel formation incited a foreign body-like reaction that acted negatively on the initial reparation.(AU)

Aspecto radiológico de heteroenxerto ósseo cortical fragmentado na reparação de falhas ósseas em coelhos / Radiologic aspects of fragmented cortical bone heterograft in bone defect repair in rabbits

Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária da tíbia de 12 coelhos,sendo utilizado enxerto ósseo cotical heterólogo fragmentado conservado em glicerina (98 por cento), para a sua reconstrução. O enxerto foi depositado no leito receptor e a integração deste foi avaliada radiologicamente por 20, 40 e 60 dias. Houve incorporação gradativa, em relação ao tempo, do enxerto no leito receptor, em 100 por cento dos casos. O uso de heteroenxerto ósseo cortical fragmentado e conservado em glicerina a 98 por cento promove a reparação das falhas ósseas, sem sinais de infecção ou rejeição, podendo ser utilizado como substituto ósseo na medicina veterinária [...](AU)

It was realized a 6mm of segmental defect at the metaphyseal region of the tibia of 12 rabbits and fragmented heterolog cortical bone graft conserved in glycerin (98 percent) was used to the reconstruction. The graft was placed in the receptor bed and its integration was evaluated by radiological exam after 20, 40, and 60 days. There was gradative graft incorporation, by the time, in the receptor bed, in 100 percent of the cases. The use of fragmented cortical bone heterograf conserved in glycerin 98 percent promotes bone defect reparation without signs of infection and can be used like osseous substitute in the veterinary medicine [...](AU)

Proteínas morfogenéticas ósseas associadas a osso esponjoso autógeno na reparação de falhas experimentais na calota craniana de coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Bone morphogenetic proteins associated with autogenous bone graft in the reparation of calvarial experimental defects of rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Foi avaliada a reparação óssea após implantação de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP) em diferentes concentrações e períodos de observação, carreadas por auto-enxerto ósseo esponjoso (EOE), em falhas ósseas, produzidas na região fronto-parietal do crânio de 20 coelhas. A falha I não foi preenchida, a II foi completamente preenchida com 3mg de EOE e as falhas III, IV, V e VI foram preenchidas com EOE associado a 0,5; 1; 2 e 5mg de BMP, respectivamente. Nas avaliações mesoscópicas, post mortem, verificou-se que, independentemente do período de tratamento, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Na falha I manifestou-se o menor preenchimento ósseo quando comparada com as demais falhas, em todos os períodos, e nas que receberam 2mg de BMP exibiu-se a melhor cobertura óssea. Microscopicamente, verificou-se que, aos sete dias, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas e do fundo da lesão, com mobilização e diferenciação de células provenientes do periósteo e das meninges, respectivamente e, nas avaliações subseqüentes, a atividade osteoblástica originou-se, também, de "ilhas de ossificação" semelhantes a centros de ossificação, localizadas no centro da falha. A formação trabecular aumentou, proporcionalmente, com a concentração utilizada de BMP, e a aposição e organização óssea aumentaram com o tempo de observação. Verificou-se também a presença de tecido cartilaginoso. A BMP associada ao EOE contribuiu para a formação de novo tecido ósseo, promovendo maior mobilização, diferenciação e organização celular, e abreviou o tempo de formação óssea, sugerindo processo de ossificação endocondral. Os melhores resultados foram observados com a associação de 2mg de BMP a 3mg de enxerto, e a adição de BMP, mesmo em menor quantidade, determinou precocidade de formação óssea. A maior quantidade de BMP não determinou maior preenchimento ósseo(AU)

Aspects of bone repair were evaluated after implantation of bone morphogenetic proteins (BMP) in different concentrations. They were carried by autogenous bone graft in defects created on skulls of 20 adult, young female rabbits, randomizedly divided into five experimental groups and were observed at five times. After exposure of skull bones, six bone defects on the fronto-parietal region of each animal were performed. The defect I was not filled, the II was completed filled with 3mg of autogenous bone graft and the defects III, IV, V, and VI were filled with autogenous bone graft associated with 0.5; 1; 2 and 5mg of BMP, respectively. In the post-mortem mesoscopic evaluations, it was observed that, independently of the treatment period of the defects, the bony filling began from the borders to the center, and from the botton to the surface of the lessions. The bony filling of the defect I was the smallest when compared with the others defects, in all the observation moments. It was also verified that until 2mg the higher the concentration of BMP used, better was the bone cover. Microscopically, it was verified in the first evaluations, on the seventh day, that the bony growth started from the borders and from the bottom of the lesion, with mobilization and differentiation of cells deriving from the periosteum and the meninges, respectively. In the subsequent evaluations, the osteoblastic activity also derived from "ossification islands" to ossification centers, located in the center of the flaw. The trabecular formation increased proportionally with the concentration of BMP used, and the apposition and bony organization increased proportionally with the time of observation. The presence of cartilaginous tissue was verified in all the flaws. In conclusion, the use the higher concentration of BMP did not determinate the better new bone formation. The association of BMP with autogenous bone graft contributed to the formation of new bony...(AU)

Avaliação radiográfica, densitométrica e histológica do uso de perfurações ósseas para o estímulo de consolidação de fraturas do terço distal do rádio de cães / Radiographic, densitometric and histological evaluation of the use of bone perforations on fracture consolidation of distal third of radius from dogs

Objetivando estimular o processo de formação do calo ósseo do terço distal do rádio de cães de pequeno porte, foram utilizados 24 animais srd, adultos, de ambos os sexos. Os cães, separados em dois grupos experimentais de 12 animais denominados de controle e tratado foram divididos em 4 momentos (m1= 15 dias, m2= 30 dias, m3= 45 dias e m4= 60 dias), e submetidos a fraturas cirúrgicas. no grupo tratado, foram realizadas perfurações ósseas nos bordos do foco da fratura, no sentido crânio-caudal e médio-lateral. No final de cada momento, os animais controles e tratados foram avaliados radiograficamente, histologicamente e a densidade mineral óssea (dmo) determinada no local da fratura. Na avaliação radiográfica do grupo tratado com 15 e 30 dias foi verificado o processo de reparação óssea mais intenso do que no grupo controle. Nos momentos m3 e m4, não se observaram diferenças no processo de reparação entre os dois grupos. Os valores da dmo foram maiores nos animais tratados. o estudo histológico revelou aos 15 e 30 dias, hiperplasia de condrócitos, e inicio de ossificação endocondral nos membros perfurados; o grupo controle mostrou tecido conjuntivo de sustentação e irúcio de hiperplasia de condrócitos. Nos m3 e m4 do grupo tratado, se verificaram formação e remodelação de calo periosteal em fases mais avançadas quando comparados ao grupo controle. conclui-se que o uso de perfurações melhora o suprimento de fluxo sangüíneo e a ativação de células osteogênicas no local de fratura, estimulando o início do processo de consolidação da fratura.(AU)

To stimulate the bone callus development process from distal third of radius, 24 adult mongrel dogs used were from both sexes. These dogs were separated in two experimental groups of 12 animals each, named control and treated, divided in 4 moments (M1=15 days; M2=30 days; M3=45 days; M4=60 days), who underwent were performed surgical fractures. In treated group, it was performed bone perforations on proximal and distal edges, craniolateral and mediolateral to the fracture site. At the end of each moment, control and treated animals were evaluated by radiography, histology, and bone mineral densitometry (BMD) was determined on fracture site. According to the radiographic data of treated dogs, it was verified on days 15 and 30 more intense bone regeneration than control group. During M3 and M4, it wasn't detected any difference in bone reparation process between control and treated groups. In densitometric study, BMD values were greater in treated animaIs than in control dogs. Histological studies revealed at 15 and 30 days chondrocyte hyperplasia and initial endochondral ossification on drilled limbs; control group showed sustainment connective tissue and initial chondrocyte hiperplasia. At M3 and M4 of the treated group, were verified development and remodeling of periosteal callus in more advanced phases when comparing with limbs from control group. It can be concluded that using perforations enhances blood flow supply and activation of osteogenic cells on fracture site, stimulating the beginning of fracture consolidation process.(AU)

Aspectos radiográficos e densitométricos na consolidação de fraturas tratadas por proteínas morfogenéticas ósseas em rádio de coelhos / Radiographic and densitometric aspects of the fracture healing treated with bone morphogenetic proteins in rabbit radius

Avaliou-se, por meio de exames radiográficos e densitométricos, a influência de um biomaterial desenvolvido pela indústria brasileira, no processo de reparação de fraturas diafisárias instáveis do rádio. Foram utilizados 15 coelhos Norfolk, machos, idade entre cinco e seis meses e peso corpóreo médio de 3,5kg. Induziu-se fratura transversa na porção média da diáfise de ambos os rádios direito, por meio de serra giratória. Ao redor das extremidades fraturadas do rádio direito (tratado) aplicou-se BMPs adsorvidas à hidroxiapatita e aglutinante de colágeno em grânulos, ambos de origem bovina. O rádio esquerdo não recebeu tratamento, sendo considerado controle. Realizaram-se estudos radiográficos e de densitometria óptica por imagens radiográficas no pós-operatório imediato e aos 30, 60 e 90 dias de pós-operatório. Somente no 30º dia de pós-operatório ocorreu maior porcentagem de restabelecimento cortical na fratura tratada com biomaterial. Pela análise estatística não se verificou diferença nos exames densitométricos quer entre momentos ou entre membros. Foi possível concluir que apenas no exame radiográfico ao 30 dias de pós-operatório detectou-se efeito positivo do biomaterial.(AU)

The aim of this study was to evaluate by radiographic and densitometric examinations the influence of a biomaterial developed by the Brazilian industry in the reparation process of unstable diaphyseal fracture of the radius. Fifteen Norfolk rabbits, males, age between five and six months, and average body weight of 3.5 kg were used. A transversal fracture was induced in the middle portion of the radial diaphysis of both forelimbs using a circular saw. The association of BMPs adsorbed to the hydroxiapatite and agglutinant of collagen in granules, both of bovine origin, were used around the fracture extremities of the right radius (treated). The left radius did not receive any treatment, and it was considered as control. Radiographic evaluation and optic densitometry by radiographic examinations were realized at immediate postoperative, and at 30, 60 and 90 days postoperative. Only at 30 days postoperative occurred higher percentage of cortical reestablishment of the fracture treated with biomaterial. By statistical analysis was not observed any difference in densitometric examinations in the different evaluation moments or between forelimbs. It was possible to conclude that only radiographic examination on day-30 postoperative was observed positive effect of the biomaterial. (AU)

Potencial osteoindutor da matriz óssea homóloga desmineralizada de coelho

In order to evaluate osteoinduction of the homologous demineralized bone matrix (DBM), 1 cm radial fragments were demineralized in HCL 0.6 N solution for 24 hours, preserved in 70% ethanol solution and implanted in the abdominal musculature of 12 adult rabbits. The animals were sacrificed at 2, 4 and 6 post-operative weeks. After euthanasia, macroscopic, miroscopic and tetracycline fluorescence exams were performed. At four weeks, the implants already presented calcification signs. Microscopically, there was mature bone and medulary canal with hematopoietic cells, at six weeks. There was no evidence of rejection, or fluorescence at two and four weeks; at six weeks, there was difuse and concentric bands fluorescence. DBM in HCL 0.6 N solution and preserved in ethanol 70% solution maintains its osteoinductive property and remains sterile.

O trabalho objetivou avaliar o potencial osteoindutor da matriz óssea homóloga (MOD) desmineralizada em ácido clorídrico. Em doze coelhos adultos, foi realizada uma incisão sagital mediana na pele abdominal, de aproximadamente 5 cm, e a divulsão do tecido subcutâneo, permitindo que três fragmentos de MOD, com 1 cm de comprimento, fossem implantados em "bolsas" confeccionadas cirurgicamente no músculo reto abdominal. A MOD foi preparada a partir de rádios de coelhos sacrificados por superdosagem anestésica e estocada em etanol 70%, em temperatura ambiente, por, no mínimo, 15 dias, até o momento do uso. Para permitir análise prévia às enxertias, fragmentos de MOD preservados em etanol 70% e fixados em formol a 10% tamponado foram submetidos à rotina histológica. Quatro coelhos foram sacrificados a cada duas, quatro e seis semanas de pós-operatório. A rotina histológica foi realizada, também, em dois dos enxertos implantados em cada animal, em cortes longitudinais e transversais, corados por H&E e no fragmento restante a deposição de osso novo foi evidenciada pela fluorescência da tetraciclina administrada aos animais. Os resultados da pesquisa permitiram concluir que o ácido clorídrico 0,6 N promoveu desmineralização eficaz e manteve o potencial indutor da matriz óssea; a imersão da matriz óssea desmineralizada em etanol 70% propiciou a esterilização dos enxertos homólogos e não inibiu o potencial osteoindutor; e também que, a MOD, devido a fatores indutores inerentes que atuam sobre as células dos tecidos adjacentes, promoveu quimiotaxia, mitose e diferenciação celular.

Potencial osteoindutor da matriz óssea homóloga desmineralizada de coelho

In order to evaluate osteoinduction of the homologous demineralized bone matrix (DBM), 1 cm radial fragments were demineralized in HCL 0.6 N solution for 24 hours, preserved in 70% ethanol solution and implanted in the abdominal musculature of 12 adult rabbits. The animals were sacrificed at 2, 4 and 6 post-operative weeks. After euthanasia, macroscopic, miroscopic and tetracycline fluorescence exams were performed. At four weeks, the implants already presented calcification signs. Microscopically, there was mature bone and medulary canal with hematopoietic cells, at six weeks. There was no evidence of rejection, or fluorescence at two and four weeks; at six weeks, there was difuse and concentric bands fluorescence. DBM in HCL 0.6 N solution and preserved in ethanol 70% solution maintains its osteoinductive property and remains sterile.

O trabalho objetivou avaliar o potencial osteoindutor da matriz óssea homóloga (MOD) desmineralizada em ácido clorídrico. Em doze coelhos adultos, foi realizada uma incisão sagital mediana na pele abdominal, de aproximadamente 5 cm, e a divulsão do tecido subcutâneo, permitindo que três fragmentos de MOD, com 1 cm de comprimento, fossem implantados em "bolsas" confeccionadas cirurgicamente no músculo reto abdominal. A MOD foi preparada a partir de rádios de coelhos sacrificados por superdosagem anestésica e estocada em etanol 70%, em temperatura ambiente, por, no mínimo, 15 dias, até o momento do uso. Para permitir análise prévia às enxertias, fragmentos de MOD preservados em etanol 70% e fixados em formol a 10% tamponado foram submetidos à rotina histológica. Quatro coelhos foram sacrificados a cada duas, quatro e seis semanas de pós-operatório. A rotina histológica foi realizada, também, em dois dos enxertos implantados em cada animal, em cortes longitudinais e transversais, corados por H&E e no fragmento restante a deposição de osso novo foi evidenciada pela fluorescência da tetraciclina administrada aos animais. Os resultados da pesquisa permitiram concluir que o ácido clorídrico 0,6 N promoveu desmineralização eficaz e manteve o potencial indutor da matriz óssea; a imersão da matriz óssea desmineralizada em etanol 70% propiciou a esterilização dos enxertos homólogos e não inibiu o potencial osteoindutor; e também que, a MOD, devido a fatores indutores inerentes que atuam sobre as células dos tecidos adjacentes, promoveu quimiotaxia, mitose e diferenciação celular.

O efeito das proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) associadas a osso esponjoso autógeno na reparação de falhas experimentais na calota craniana de coelho (Oryctolagus cuniculus) / The effect of the Bone morphogenetic protein (BMPs) associated with cancelous autogenous bone graft in the reparation of calvarial experimental rabbits defects (Oryctolagus cuniculus)

As proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) são promotores de crescimento capazes de induzir a formação de osso e cartilagem, promovendo a quimiotaxia e diferenciação de células mesenquimais para o local onde foram implantadas, mas para uma efetiva osteocondução necessitam de uma substância carreadora. Quando implantadas em tecidos animais, as BMPs se ligam a receptores específicos existentes na superfície das células osteoinduzidas, ativam as proteínas citoplasmáticas SMAD (mothers against decapentaplegic proteins) e, no núcleo da célula receptora, passam a regular a transcrição de genes relacionados com calcificação e formação óssea. No presente estudo, foram avaliados os aspectos clínico-cirúrgicos, macroscópicos, radiográficos e microscópicos da reparação óssea, após implantação de BMPs em diferentes concentrações, carreadas por enxerto ósseo esponjoso, em falhas criadas no crânio de 20 coelhas adultas-jovens, separadas aleatoriamente em cinco grupos experimentais, que corresponderam a cinco períodos de observação (7, 15, 21, 35 e 60 dias). Após a exposição dos ossos do crânio, foram realizadas seis falhas ósseas na região fronto-parietal de cada animal. A falha I não foi preenchida, a II foi completamente preenchida com aproximadamente 3,0 mg de autoenxerto ósseo esponjoso e as falhas III, IV, V e VI foram preenchida com o autoenxerto associado a 0,5; 1,0; 2,0 e 5,0 mg de BMPs, respectivamente. Não foram observadas complicações clínicas após a cirurgia. Nas avaliações macroscópicas, postmortem, verificou-se que independentemente do período de tratamento das falhas, o preenchimento ósseo iniciava-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. O preenchimento ósseo das falhas I foi o menor encontrado quando comparado com as demais falhas, em todos os períodos de observação. Constatou-se também que até os valores de 2,0 mg, quanto maior a concentração de BMPs utilizada, maior foi a cobertura óssea. A avaliação radiográfica não permitiu a classificação do grau de preenchimento ósseo e por meio de análises estatísticas, foi comprovado que há diferenças significativas entre os tratamentos. Microscopicamente verificou-se nas primeiras avaliações, aos sete dias, que o preenchimento ósseo iniciava-se a partir das bordas e do fundo da lesão, com mobilização e diferenciação de células provenientes do periósteo e das meninges, respectivamente e, nas avaliações subseqüentes, a atividade osteoblástica provinha também de ilhas de ossificação, semelhantes a centros de ossificação, localizadas no centro da falha. A formação trabecular aumentou proporcionalmente com a concentração utilizada de BMPs e a aposição e organização óssea aumentaram proporcionalmente com o tempo de observação. Em quase todas as falhas foi verificada a presença de tecido cartilaginoso. A melhor relação de quantidade de autoenxerto ósseo esponjoso e BMPs foi de 3,0 mg e 2,0 mg, respectivamente e a associação desta proteína com esse enxerto contribuiu para a formação de novo tecido ósseo, promovendo maior mobilização, diferenciação e organização celular e, abreviou o tempo de formação óssea, sugerindo processo de ossificação endocondral. Os trabalhos apresentados como parte integrante desta tese estão seguindo as normas de publicação do Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Minas Gerais, indexada ao ISI, AGRIS, BIOSIS, CAB, CAS, MEDLARS, Referatvnyi Zhumal, Bibliografia Brasileira de Medicina Veterinária e Zootecnia e LILACS. ISSN 01020935

The bone morphogenetic proteins (BMPs) are growth promoters capable of inducing the formation of bone and cartilage, promoting quimiotaxy and differentiation of mesenchymal cells in the place where they were implanted, but for an effective osteoconduction they need a carrier substance. When implanted in animal tissues, the BMPs link to specific receptors located in the surface of the osteoinduced cells, they activate the SMAD cytoplasmatic proteins (mothers against decapentaplegic proteins) and, in the nucleus of the receiver cell, they begin to regulate the transcription of genes related with calcification and bone formation. In the present study, aspects of clinical-surgical, macroscopic and radioscopic of the bone repair were evaluated after the implantation of the BMPs in different concentrations, carried by autogenous bone graft, in defects created on skulls of 20 adult-young female rabbits, randomizedly separated on five experimental groups that correspond to five periods of observations (7, 15, 21, 35 and 60 days). After the exposure of bones skull, six bone defects were performed on the fronto-parietal region of each animal. The defect I wasnt filled, the II was completed filled with approximately 3,0 mg of autogenous bone graft and the defects III, IV, V and VI were filled with autogenous bone graft associed with 0,5; 1,0; 2,0 and 5,0 mg of BMPs respectively. There wasnt clinical complications after the surgery. In the macroscopic evaluations, post-mortem, it was observed that independently of the treatment period of the defects, the bony filling began starting from the borders to the center and from the bottom to the surface of the flaws. The bony filling of defect I was the smallest found when compared with the others defects, in all the observation periods. It was also verified that until 2,0 mg the bigger the concentration of BMPs used, better was bone cover. The radiographic assessment did not permit the classification of the grade of bone filling and through the statistic analyses, it was comproved that there are significant differences between the treatments. It was verified microscopically in the first evaluations, at the seventh day, that the bone growth started from the borders and from the bottom of the lesion, with mobilization and differentiation of cells deriving from the periosteum and of the meninges, respectively, and in the subsequent evaluations, the osteoblastic activity also derived from "ossification islands" to ossification centers, located in the center of the flaw. The trabecular formation increased proportionally with the concentration of BMPs used, and the apposition and bone organization increased proportionally with the time of observation. The presence of cartilaginous tissue was verified in almost all the flaws. The best relation of quantities of autogenous bone graft and BMPS were 3,0 mg and 2,0 mg, respectively, and the association of this protein with this graft contributed to the formation of new bone tissue, promoting larger mobilization, differentiation and cellular organization. It also abbreviated the time of bone formation, suggesting an endochondral ossification process

Influência das proteínas morfogenéticas ósseas adsorvidas à hidroxiapatita e aglutinantes do colágeno bovino na consolidação da fratura do rádio em coelhos

O propósito do estudo foi avaliar a influência de única aplicação da combinação de proteínas morfogenéticas do osso (BMPs) com colágeno liofilizado de origem bovina, no processo de reparação de fraturas instáveis do rádio. Utilizaram-se 15 coelhos, da raça Norfolk, com idade média de cinco meses e peso corpóreo médio de 3,5 kg. Foi induzida fratura transversa na porção média da diáfise de ambos os rádios. No foco de fratura do rádio direito aplicou-se a associação de BMPs adsorvidas à hidroxiapatita e aglutinante de colágeno bovino em grânulos, ao passo que no foco de fratura do rádio esquerdo, considerado controle, nada foi utilizado. Efetuou-se exames radiográficos e densitometria óptica por imagens radiográficas dos focos de fratura ao término do procedimento cirúrgico e aos 30, 60 e 90 dias de pós-operatório. Os exames histológicos, de cada cinco animais, foram realizados aos 30, 60 e 90 dias após a indução da fratura. Na avaliação radiográfica, no 30° dia de pós-cirúrgico, houve melhor restabelecimento cortical das fraturas tratadas com BMPs; no entanto, no 60° e 90° dia de pós-operatório, não foram observadas diferenças entre os membros. Na análise densitométrica não foram detectadas diferenças estatísticas. Pela análise histológica a via de reparação das fratura foi semelhante entre os membros tratados e controles, contudo o conjunto de BMPs acelerou a maturação do calo ósseo apenas aos 30 dias de pós-cirúrgico. Foi possível concluir que o tipo de BMP utilizada interferiu positivamente na evolução da consolidação de fratura. Palavras-chave: BMP; Biomaterial; Colágeno; Fratura; Coelho; Bovino

The objective of this study was to evaluate the influence of an only administration of a combination of bone morphogenetic proteins (BMPs) with lyophilized collagen from bovines in the reparation of unstable fractures of the radius. Fifteen (15) Norfolk rabbits, average age of five months and average weight of 3.5kg, were used. A transversal fracture was induced in the middle portion of the diaphysis of both radius. In the focus of the right radius fracture, the association of BMPs adsorbed to the hydroxyapatite and agglutinant of bovine collagen in granules was applied; whereas in the focus of the left radius fracture, considered control, nothing was used. Radiographic exams and optical densitometry through radiographic images of the fracture focuses were performed immediately and 30, 60 and 90 days post-operatively. The histological exams of each animal were accomplished on the 30th, 60th and 90th days after the induction of the fracture. In the radiographic evaluation, on the 30th day after surgery, there was better cortical re-establishment of the fractures treated with BMPs; however, on the 60th and 90th day after surgery, differences were not observed between the limbs. No statistical differences could not be detected in the densitometric analysis either. In the histological analysis, the reparation process of the fractures was similar between the treated and the control; however the pool of BMPs accelerated the maturation of the bone callus on the 30th day after surgery. Therefore, it is possible to conclude that the type of BMP used in this study interfered positively in the evolution of fracture consolidation. KEY WORDS: BMP; Biomaterial; Collagen; Fracture; Rabbit; Bovine