Circulation of Major Respiratory Pathogens in Backyard Poultry and their Association with Clinical Disease and Biosecurity

Raising backyard birds is a common practice in Brazil, mainly in the countryside or suburban areas. However, the level of respiratory pathogens in these animals is unknown. We sampled two hundred chickens from 19 backyard flocks near commercial poultry farms and performed ELISA to Infectious Bronchitis Virus, avian Metapneumovirus, Mycoplasma synoviae and Mycoplasma gallisepticum. We evaluated the association between the predictive ability of ELISA and Hemagglutination-inhibition (HI)by comparing results from eight flocks positive to Mycoplasma gallisepticum on ELISA. Besides, we assessed essential biosecurity measures in the properties (multiple species birds, rodent control, hygienic conditions, and water quality for the bird`s consumption). We could access the vaccination program only on four properties; in three of them, the birds were supposedly vaccinated for IBV. Overall the properties had a poor score for the biosecurity measures, and the seroprevalence in backyard poultry flocks for IBV, a MPV, MS, and MG were respectively 87.5% (14/16), 89.5% (17/19), 100 (19/19) and MG 84.21% (16/19). We found low specificity and predictive value between ELISA and HI in MG analysis and a positive correlation between the presence of clinical symptoms and mean MG titers. Backyard chicken are pathogens reservoirs and pose a risk for the commercial poultry farms in the region, and further efforts of the governmental entities and private sector of poultry production should consider these information to avoid future economic losses.(AU)

Circulation of Major Respiratory Pathogens in Backyard Poultry and their Association with Clinical Disease and Biosecurity

Raising backyard birds is a common practice in Brazil, mainly in the countryside or suburban areas. However, the level of respiratory pathogens in these animals is unknown. We sampled two hundred chickens from 19 backyard flocks near commercial poultry farms and performed ELISA to Infectious Bronchitis Virus, avian Metapneumovirus, Mycoplasma synoviae and Mycoplasma gallisepticum. We evaluated the association between the predictive ability of ELISA and Hemagglutination-inhibition (HI)by comparing results from eight flocks positive to Mycoplasma gallisepticum on ELISA. Besides, we assessed essential biosecurity measures in the properties (multiple species birds, rodent control, hygienic conditions, and water quality for the bird`s consumption). We could access the vaccination program only on four properties; in three of them, the birds were supposedly vaccinated for IBV. Overall the properties had a poor score for the biosecurity measures, and the seroprevalence in backyard poultry flocks for IBV, a MPV, MS, and MG were respectively 87.5% (14/16), 89.5% (17/19), 100 (19/19) and MG 84.21% (16/19). We found low specificity and predictive value between ELISA and HI in MG analysis and a positive correlation between the presence of clinical symptoms and mean MG titers. Backyard chicken are pathogens reservoirs and pose a risk for the commercial poultry farms in the region, and further efforts of the governmental entities and private sector of poultry production should consider these information to avoid future economic losses.

Construction and characterization of a recombinant vaccine encoding the nucleocapsid protein gene of avian infectious bronchitis virus / Construção e caracterização de uma vacina recombinante codificando o gene da proteina do nucleocapsideo do virus da bronquite infecciosa das galinhas

A vacinação é a forma mais utilizada para prevenir a bronquite infecciosa causada pelo vírus da bronquite infecciosa das galinhas (IBV). Contudo, as vacinas convencionais são incapazes de diferenciar aves infectadas de vacinadas. No presente trabalho foi construído, caracterizado, e avaliado como candidato vacinal, um adenovírus recombinante expressando o gene N do IBV. O gene N foi clonado em um adenovírus humano tipo 5 defectivo e transfectado para as células HEK-293A para gerar rAd5_N. Após o vetor ser obtido como esperado e a confirmação da expressão da proteína N em HEK-293ª, foi realizada inoculação pela via oculo-nasal na dose de 10 7 TCID 50 /0,1mL para imunização de galinhas livres de patógenos específicos (SPF). A resposta imunológica do Ad5_N e a proteção contra o desafio ao IBV foram avaliadas e comparadas com uma vacina viva comercial. Não foram detectados anticorpos anti-IBV em aves vacinadas com o Ad5_N. A vacina comercial induziu anticorpos detectáveis a partir do 7º dia pós-vacinal. Em aves vacinadas com o Ad5_N não houve aumento na expressão de IFNγ. Neste estudo, o rAd5_N obtido não conferiu proteção contra desafio com IBV-M41. Os resultados indicam a necessidade de avaliar adenovírus recombinantes expressando outros genes do IBV.(AU)

Construction and characterization of a recombinant vaccine encoding the nucleocapsid protein gene of avian infectious bronchitis virus / Construção e caracterização de uma vacina recombinante codificando o gene da proteina do nucleocapsideo do virus da bronquite infecciosa das galinhas

A vacinação é a forma mais utilizada para prevenir a bronquite infecciosa causada pelo vírus da bronquite infecciosa das galinhas (IBV). Contudo, as vacinas convencionais são incapazes de diferenciar aves infectadas de vacinadas. No presente trabalho foi construído, caracterizado, e avaliado como candidato vacinal, um adenovírus recombinante expressando o gene N do IBV. O gene N foi clonado em um adenovírus humano tipo 5 defectivo e transfectado para as células HEK-293A para gerar rAd5_N. Após o vetor ser obtido como esperado e a confirmação da expressão da proteína N em HEK-293ª, foi realizada inoculação pela via oculo-nasal na dose de 10 7 TCID 50 /0,1mL para imunização de galinhas livres de patógenos específicos (SPF). A resposta imunológica do Ad5_N e a proteção contra o desafio ao IBV foram avaliadas e comparadas com uma vacina viva comercial. Não foram detectados anticorpos anti-IBV em aves vacinadas com o Ad5_N. A vacina comercial induziu anticorpos detectáveis a partir do 7º dia pós-vacinal. Em aves vacinadas com o Ad5_N não houve aumento na expressão de IFNγ. Neste estudo, o rAd5_N obtido não conferiu proteção contra desafio com IBV-M41. Os resultados indicam a necessidade de avaliar adenovírus recombinantes expressando outros genes do IBV.(AU)

Fatores de risco associados com a presença de infecções virais em aves domésticas na região Sul do Rio Grande do Sul, Brasil / Risk factors associated with the presence of viral diseases in domestic poultry in the Southern region of Rio Grande do Sul, Brazil

Background: The introduction of any infectious agent into an industrial or subsistence farm worries agribusiness owners in Brazilbecause it reduces product quality and increases treatment costs, although most diseases are untreatable, thus causing economic losseswith morbidity and mortality. Therefore, an epidemiological survey of viral diseases associated with poultry was developed by performing a detailed description of the risk factors that may be related to existing diseases using domestic poultry sample data recordedin the Regional Diagnostic Laboratory (LRD) of College of Veterinary Medicine of the Federal University of Pelotas (UFPel), RioGrande do Sul, Brazil, from 2000 to 2016.Materials, Methods & Results: Epidemiological and clinical-pathological data were collected and then compared with disease databy multivariate analysis using statistical EpiInfo version 6.04 and Microsoft Office Excel 2010 software. The frequencies and 95%confidence intervals (CI), association measures (odds ratio=OR and relative risk=RR), Chi-square test, and the results consideredsignificant with a value of P ≤ 0.05 were described. A total of 410 samples of domestic poultry were tested, and the results showed66 (16.1%) viral diseases. The following conditions were the most commonly found diseases in this study: Mareks disease (42.4%),Infectious bursal disease (31.8%), Avian leukosis (16.6%), Avian pox (7.5%) and Avian infectious bronchitis (1.5%). In this articlewe discuss the most frequent viral diseases: Mareks disease (DM) and Gumboro disease. It was also possible to conclude that birdswith Mareks disease presented higher odds of developing nerve, tegumentary and locomotors signs (P ≤ 0.05). As well as, morelikely to present tumoriform lesions in the liver, spleen, kidneys and heart P ≤ 0.05, as well as lesions in the proventriculus, musclelesions and in the sciatic nerve P ≤ 0.05. Laying poultry...(AU)

Fatores de risco associados com a presença de infecções virais em aves domésticas na região Sul do Rio Grande do Sul, Brasil / Risk factors associated with the presence of viral diseases in domestic poultry in the Southern region of Rio Grande do Sul, Brazil

Background: The introduction of any infectious agent into an industrial or subsistence farm worries agribusiness owners in Brazilbecause it reduces product quality and increases treatment costs, although most diseases are untreatable, thus causing economic losseswith morbidity and mortality. Therefore, an epidemiological survey of viral diseases associated with poultry was developed by performing a detailed description of the risk factors that may be related to existing diseases using domestic poultry sample data recordedin the Regional Diagnostic Laboratory (LRD) of College of Veterinary Medicine of the Federal University of Pelotas (UFPel), RioGrande do Sul, Brazil, from 2000 to 2016.Materials, Methods & Results: Epidemiological and clinical-pathological data were collected and then compared with disease databy multivariate analysis using statistical EpiInfo version 6.04 and Microsoft Office Excel 2010 software. The frequencies and 95%confidence intervals (CI), association measures (odds ratio=OR and relative risk=RR), Chi-square test, and the results consideredsignificant with a value of P ≤ 0.05 were described. A total of 410 samples of domestic poultry were tested, and the results showed66 (16.1%) viral diseases. The following conditions were the most commonly found diseases in this study: Marek’s disease (42.4%),Infectious bursal disease (31.8%), Avian leukosis (16.6%), Avian pox (7.5%) and Avian infectious bronchitis (1.5%). In this articlewe discuss the most frequent viral diseases: Marek’s disease (DM) and Gumboro disease. It was also possible to conclude that birdswith Marek’s disease presented higher odds of developing nerve, tegumentary and locomotors signs (P ≤ 0.05). As well as, morelikely to present tumoriform lesions in the liver, spleen, kidneys and heart P ≤ 0.05, as well as lesions in the proventriculus, musclelesions and in the sciatic nerve P ≤ 0.05. Laying poultry...

Isolation and genetic stability of an infectious bronchitis virus strain (IBV) / Isolamento e estabilidade genética de uma cepa do vírus da bronquite infecciosa (IBV)

O vírus da bronquite infecciosa (IBV) é um importante patógeno respiratório presente na avicultura comercial e tem provocado grandes perdas econômicas em todo o mundo. A vacinação é realizada pela indústria produtora de aves, mas continuam surgindo novos sorotipos e variações antigênicas, dificultando o controle de IBV. Nós realizamos uma caracterização molecular de uma cepa de IBV obtida diretamente de tecidos e comparamos com a mesma cepa que havia sido passada três vezes em ovo embrionado. Nós mostramos uma variação significante na sequência viral depois de ter sido isolada em ovo embrionado.(AU)

Isolation and genetic stability of an infectious bronchitis virus strain (IBV) / Isolamento e estabilidade genética de uma cepa do vírus da bronquite infecciosa (IBV)

O vírus da bronquite infecciosa (IBV) é um importante patógeno respiratório presente na avicultura comercial e tem provocado grandes perdas econômicas em todo o mundo. A vacinação é realizada pela indústria produtora de aves, mas continuam surgindo novos sorotipos e variações antigênicas, dificultando o controle de IBV. Nós realizamos uma caracterização molecular de uma cepa de IBV obtida diretamente de tecidos e comparamos com a mesma cepa que havia sido passada três vezes em ovo embrionado. Nós mostramos uma variação significante na sequência viral depois de ter sido isolada em ovo embrionado.(AU)

Caracterização anatomopatológica e bacteriológica em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose sob Serviço de Inspeção Federal

ABSTRACT: Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohens test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.

RESUMO: A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.

Caracterização anatomopatológica e bacteriológica em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose sob Serviço de Inspeção Federal / Pathological and bacteriological characterization on broilers totally condemned due to colibacillosis under the control of the Federal Inspection Service

A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.(AU)

Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohen's test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.(AU)

Caracterização anatomopatológica e bacteriológica em frangos de corte condenados totalmente por colibacilose sob Serviço de Inspeção Federal / Pathological and bacteriological characterization on broilers totally condemned due to colibacillosis under the control of the Federal Inspection Service

A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.(AU)

Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohen's test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.(AU)

Co-evolução de Coronavirus Aviário (AvCoV) e hospedeiros aviários com base em utilização de códons

O Coronavirus aviário (AvCoV) é o agente causal da bronquite infecciosa das galinhas, uma doença que ocasiona grandes perdas econômicas na indústria avícola, que também pode ter como hospedeiro outras espécies de aves domésticas e selvagens. O AvCoV tem uma distribuição mundial e uma ampla variabilidade genética que resulta em distintas linhagens, levando a doença respiratória, entérica, reprodutiva ou renal. A co-evolução do sistema Coronavirus/ hospedeiro é amplamente conhecida em termos de receptores, transmissão, patogenia, resposta imune, genética de populações e filogenia, mas os estudos baseados na utilização de códons são escassos. Para o presente trabalho, foram obtidas do Genbank 57 sequencias de genoma completo do AvCoV de diferentes regiões do mundo que representar os diferentes genótipos e subtipos; os genomas foram divididos por regiões codificantes e genes para serem analisados e utilizadas para gerar indicadores do uso de códons como uso relativo de códons sinônimos, construções filogenéticas, índice de adaptação codônica e o número efetivo de códons. Os resultados obtidos mostraram que, considerando A. cygnoides, A. platyrhynchus e F. peregrinus, linhagens de AvCoV possuem um alto fitness no uso de códons nos mRNAs de renina, proteína da zona pelúcida e surfactante pulmonar respetivamente, além de não terem sido encontrados padrões de segregação na utilização de códons, sendo a força dominante sobre a evolução do AvCoV a seleção natural. O AvCoV apresentou um uso de códons pouco enviesado (Nc >45) e foi evidenciado que, com base no uso de códons, o AvCoV poderia se replicar com sucesso nos diferentes hospedeiros deste estudo.

Avian Coronavirus (AvCoV) is the causative agent of infectious bronchitis in chickens, this disease causes great economic losses in the poultry industry, which can also host other species of domestic and wild birds. AvCoV has a worldwide distribution and a wide genetic variability that results in different strains, leading to respiratory, enteric, renal or reproductive disease. The co-evolution of the coronavirus/host system is widely known in terms of receptors, transmission, pathogenesis, immune response, population genetics and phylogeny, but studies based on the use of codons are few. For the present work, 57 complete Genome sequences from AvCoV from different regions of the world that represent the different genotypes and subtypes were obtained from Genbank; the genomes were divided by coding regions and genes to be analyzed and used to generate codon usage indicators such as relative use of synonymous codons, phylogenetic constructions, codon adaptation index and the effective number of codons. The results obtained showed that, considering A. cygnoides, A. platyrhynchus and F. peregrinus, AvCoV strains have a high fitness in the use of codons in renin mRNAs, pellucid zone protein and pulmonary surfactant, respectively, in addition to not having been found segregation patterns in the use of codons, the dominant force on the evolution of AvCoV being natural selection. AvCoV showed a slightly codon usage bias (Nc> 45) and it was shown that, based on the use of codons, AvCoV could successfully replicate in the different hosts of this study.

Prebiotic and antimicrobials on performance, carcass characteristics, and antibody production in broilers / Prebiótico e antimicrobianos sobre o desempenho, características de carcaça e produção de anticorpos em frangos de corte

To evaluate the effect of supplementation with mannan oligosaccharides, avilamycin and halquinol, alone or in combination, on the performance, carcass characteristics and antibody production in broilers (1-49 days old), male broiler chicks (n=1440; Cobb 500; one day old) were housed and distributed into a completely randomized design into six treatments (eight replicates; 30 animals per pen). To produce the experimental diets, three types of performance enhancer additives were used. Halquinol (HAL), avilamycin (AVI) and mannan oligosaccharides (MOS) were included (alone or in combination) in the basal diet (instead of corn starch). Effects of diet were observed on results of animal performance in the period 1-21 and 1-42 days old. Broilers fed with a diet without growth promoter showed lower weight gain in relation to those fed with diets with antimicrobials, MOS or a combination of them. In the period 1-49 days old, feed conversion increased in broilers fed with rations without promoter. At the end of the experimental period no influence of diets was observed on the carcass yield and cuts, and titles of specific antibodies to avian infectious bronchitis. The use of MOS and/or antimicrobials (AVI or HAL), alone or in combination, improves feed conversion of broilers reared until 49 days of age.(AU)

Para avaliar o efeito da suplementação com mananoligossacarídeo, avilamicina e halquinol, isoladamente ou combinados, sobre o desempenho, características de carcaça e produção de anticorpos em frangos de corte (1-49 dias de idade), pintos machos de corte (n=1440; linhagem Cobb 500; idade: um dia) foram alojados e distribuídos em delineamento experimental inteiramente casualizado com seis tratamentos (oito repetições; 30 animais por unidade experimental). Para compor as rações experimentais, três tipos de aditivos melhoradores de desempenho foram usados. Halquinol (HAL), avilamicina (AVI) e mananoligossacarídeo (MOS) foram incluídos (isoladamente ou em associação) na ração basal (em substituição ao amido de milho). Foi observado efeito das rações sobre os resultados de desempenho dos animais no período 1-21 e 1-42 dias de idade. As aves alimentadas com ração sem melhorador de desempenho apresentaram menor ganho de peso em relação àquelas que consumiram rações com antimicrobianos, MOS ou uma combinação deles. No período 1-49 dias de idade, a conversão alimentar aumentou nas aves alimentadas sem melhorador de desempenho. No final do período experimental, não foi observado efeito das rações sobre o rendimento de carcaça e cortes e títulos de anticorpos específicos contra bronquite infecciosa aviária. A utilização de mananoligossacarídeo e/ou antimicrobianos (avilamicina e halquinol), isoladamente ou combinados, melhora a conversão alimentar de frangos de corte criados até 49 dias de idade.(AU)

Bronquite infecciosa das galinhas

A bronquite infecciosa das galinhas(BIG) é doença aguda altamente contagiosa de frangos e galinhas (Gallusgallus domesticus). A BIG é considerada atualmente uma das doenças que mais causa prejuízos à avicultura industrial de galinhas e frangos no Brasil e no mundo. Há grande impacto econômico,por causar aumento da mortalidade, perdas em desempenho produtivo, queda quantitativa e qualitativa na produção de ovos, infertilidade, facilitação de infecções oportunistas, que exigem ouso de antibióticos, e aumento na condenação de carcaças de frangos de corte no abatedouro [2,5]. É importante desta carque, em codornas domésticas (Coturnix japonicae Coturnix coturnix),a bronquite é causada por um adenovírus(Aviadenovirus), sem qualquer relação com a etiologia de BIG.

Bronquite infecciosa das galinhas

A bronquite infecciosa das galinhas(BIG) é doença aguda altamente contagiosa de frangos e galinhas (Gallusgallus domesticus). A BIG é considerada atualmente uma das doenças que mais causa prejuízos à avicultura industrial de galinhas e frangos no Brasil e no mundo. Há grande impacto econômico,por causar aumento da mortalidade, perdas em desempenho produtivo, queda quantitativa e qualitativa na produção de ovos, infertilidade, facilitação de infecções oportunistas, que exigem ouso de antibióticos, e aumento na condenação de carcaças de frangos de corte no abatedouro [2,5]. É importante desta carque, em codornas domésticas (Coturnix japonicae Coturnix coturnix),a bronquite é causada por um adenovírus(Aviadenovirus), sem qualquer relação com a etiologia de BIG.

Influência na resposta sorológica de aves vacinadas contra Bronquite Infecciosa das Galinhas por Mycoplasma Synoviae em aves de produção

Especialmente nos últimos anos a avicultura brasileira tem alcançado índices elevados de crescimento, tornando-se o terceiro principal produtor mundial de carne de frango e líder de exportações, atingindo 142 países. Fatores como saúde e bem-estar animal, qualidade e preço contribuíram para aperfeiçoar a produtividade no setor. Diante disso, a preocupação com a sanidade dos animais é um dos grandes desafios do mercado, sendo que o controle da Bronquite Infecciosa das galinhas (BI) e a erradicação do Mycoplasma synoviae (Ms) em granjas de reprodução são questões de enorme relevância sanitária. A BI, causada por um coronavírus, o Vírus da Bronquite Infecciosa (IBV), trata-se de uma doença viral aguda e altamente contagiosa. Já a micoplasmose, causada pela menor bactéria existente, o Ms, possui uma grande capacidade de disseminação no lote de matrizes sendo que, uma vez positivo, o lote permanece com esse status até o fim da sua vida. Ambas as doenças apresentam sinais clínicos semelhantes afetando a parte respiratória, tornando-se secundária uma à outra. Assim sendo, é importante avaliar se as aves que apresentavam sintomas sugestivos à IBV e que já eram sabidamente positivas para Ms, estavam realmente protegidas através da vacinação. No presente estudo foram avaliados os títulos vacinais de Bronquite Infecciosa a fim de verificarmos a existência de interferência na resposta sorológica frente ao IBV pela positividade de Ms. Para isso, foram verificados os resultados de 326 amostras de soro coletadas no período de 2014 à 2018, em lotes de matrizes de uma agroindústria do Oeste catarinense. Para avaliar o efeito da presença de Ms sobre o titulo médio de bronquite foi aplicado o teste t para comparação de dados não pareados. Através da presente análise verificou-se que não houve interferência de Ms nos títulos de anticorpos frente ao vírus da Bronquite Infecciosa (IBV).

Especially in recent years, Brazilian poultry has achieved high growth rates, becoming the third major worldwide producer of chicken meat and leader in exports, reaching 142 countries. Factors such as animal health and welfare, quality and price have contributed to improving productivity in the sector. Given this, the concern with the health of animals is one of the main challenges of the market, and the control of Infectious Bronchitis of chickens (IB) and the eradication of Mycoplasma synoviae (Ms) in breeding farms are issues of enormous animal health relevance. IB, caused by a coronavirus, the Infectious Bronchitis Virus (IBV), is an acute and highly contagious viral disease. Mycoplasmosis, on the other hand, is caused by the smallest existing bacteria, Mycoplasma synoviae (Ms), has great capacity for dissemination in the breeding flock, and once the flock is positive, it remains with this status until the end of its life. Both diseases show similar clinical signs affecting the respiratory part, becoming secondary to each other. Therefore, it is important to assess whether birds that had symptoms suggestive of IBV and that were already known to be positive for Ms, were actually protected through vaccination. In the present study the vaccine titers of Infectious Bronchitis were evaluated in order to verify the existence of interference in the serological response against IBV by the positivity of Ms. For this, the results of 326 serum samples collected in the period from 2014 to 2018 in batches of matrices of an agribusiness in the West of Santa Catarina were verified. To evaluate the effect of the presence of Ms on the mean titer of bronchitis, the t test was applied in order to compare unpaired data. Through the present analysis it was verified there were no interference of Ms in the antibody titers against the Infectious Bronchitis virus (IBV).

Imunidade induzida pela uso combinado de vacina atenuada (estirpe massachusetts) e vacina inativada experimental (variante br-i) contra o desafio com estirpe variante brasileira do vírus da bronquite infecciosa aviária

Há atualmente no Brasil, uma predominância de infecções causadas por estirpes do VBI classificadas no genótipo variante (BR-I), que revelam diferenças marcantes de antigenicidade com relação à estirpe vacinal Massachusetts, rotineiramente usada em nosso país. Isso resulta em uma baixa imunidade-cruzada e consequentemente em um menor nível de proteção contra isolados desse genótipo. O propósito deste trabalho foi testar uma vacina inativada contendo uma estirpe variante do VBI pertencente ao genótipo BR-I, e avaliar o estado de proteção induzido por esta vacina em combinação com a vacina atenuada Massachusetts em aves desafiadas com estirpe homóloga. Foram testadas aves SPF distribuídas em três grupos: grupo A (aves vacinadas ao 1º dia de idade com vacina atenuada comercial, revacinadas com 14 dias de idade com vacina inativada experimental e desafiadas aos 35 dias de idade); grupo B (aves não vacinadas e desafiadas aos 35 dias de idade); grupo C (controle). As aves de cada grupo foram sacrificadas aos 3, 7 e 11 dias pós-infecção, para colheita de amostras de traquéia, rins, soro e lágrima, e posteriormente avaliação histopatológica e das respostas imunes humoral(RIH) pelo ELISA e celular(RIC) pela expressão de genes de RIC. Os resultados deste estudo demonstraram que esse esquema imunoprofilático induziu aumentos significativos nos níveis de anticorpos lacrimais e séricos do i

Nanopartículas de quitosana para encapsular o vírus da bronquite infecciosa aviária (vbi)

Em busca de adjuvantes de nova geração para uso na formulação de vacinas contra patógenos virais, o trabalho teve como objetivo preparar nanopartículas de quitosana para encapsular o VBI. Foi utilizado uma suspensão da estirpe H120 atenuada do VBI em líquido córion-alantóide (LCA) para a formulação das nanopartículas por meio da técnica de gelificação iônica. Foram testadas diferentes concentrações de quitosana, ácido acético e tripolifosfato de sódio (TPP) e em diferentes condições de pH. Para o preparo das nanopartículas, um volume da suspensão viral em LCA foi adicionado a 10 volumes da solução de quitosana previamente preparada e, a essa mistura depois de agitada, foram adicionados 5 volumes de TPP, deixando-se essa mistura sob agitação por mais 10 minutos. As nanopartículas foram separadas por duas centrifugações seguidas, sendo armazenado o sobrenadante enquanto que o precipitado, contendo as nanopartcículas foi ressuspendido em PBS. O tamanho das nanopartículas foi medido no aparelho Zetasizer e a eficiência do encapsulamento foi avaliada pela dosagem de proteína presente no sobrenandante através da técnica de Bradford e pela detecção do RNA genômico viral por RT-PCR. Os resultados demonstraram que as concentrações de quitosana e TPP e o pH influenciaram na geração das nanopartículas, sendo que a melhor formulação foi obtida com a quitosana a 0,2%, o TPP a 0,2% e em p

Nanopartículas de quitosana para encapsular o vírus da bronquite infecciosa aviária (vbi)

Em busca de adjuvantes de nova geração para uso na formulação de vacinas contra patógenos virais, o trabalho teve como objetivo preparar nanopartículas de quitosana para encapsular o VBI. Foi utilizado uma suspensão da estirpe H120 atenuada do VBI em líquido córion-alantóide (LCA) para a formulação das nanopartículas por meio da técnica de gelificação iônica. Foram testadas diferentes concentrações de quitosana, ácido acético e tripolifosfato de sódio (TPP) e em diferentes condições de pH. Para o preparo das nanopartículas, um volume da suspensão viral em LCA foi adicionado a 10 volumes da solução de quitosana previamente preparada e, a essa mistura depois de agitada, foram adicionados 5 volumes de TPP, deixando-se essa mistura sob agitação por mais 10 minutos. As nanopartículas foram separadas por duas centrifugações seguidas, sendo armazenado o sobrenadante enquanto que o precipitado, contendo as nanopartcículas foi ressuspendido em PBS. O tamanho das nanopartículas foi medido no aparelho Zetasizer e a eficiência do encapsulamento foi avaliada pela dosagem de proteína presente no sobrenandante através da técnica de Bradford e pela detecção do RNA genômico viral por RT-PCR. Os resultados demonstraram que as concentrações de quitosana e TPP e o pH influenciaram na geração das nanopartículas, sendo que a melhor formulação foi obtida com a quitosana a 0,2%, o TPP a 0,2% e em p

Increased expression of Interleukin-6 related to nephritis in chickens challenged with an Avian infectious bronchitis virus variant / Aumento da expressão de Interleucina-6 relacionada com nefrite in galinhas desafiadas com uma variante do vírus da bronquite infecciosa

A Brazilian field isolate (IBV/Brazil/PR05) of avian infectious bronchitis virus (IBV), associated with development of nephritis in chickens, was previously genotyped as IBV variant after S1 gene sequencing. The aim of this study was to evaluate the levels of IL-6 in kidneys and trachea of birds vaccinated and challenged with IBV/Brazil/PR05 strain, correlating these results with scores of microscopic lesions, specific IBV antigen detection and viral load. The up-regulation of IL-6 and the increased levels of viral load on renal and tracheal samples were significantly correlated with scores of microscopic lesions. Reduced levels of viral load were detected in kidneys of birds previously vaccinated and challenged, compared to non-vaccinated challenged group, although markedly microscopic lesions were observed for both groups. The expression of IL-6, present both in the kidney and in the tracheas, was dependent on the load of the virus present in the tissue, and the development of lesions was related with IL-6 present in the tissues. These data suggest that variant IBV/Brazil/PR05 can induce the expression of proinflammatory cytokines in a manner correlated with viral load and increased IL-6 is involved in the tissue with the influx of inflammatory cells and subsequent nephritis. This may contribute with a model to the development of immunosuppressive agents of IL-6 to prevent acute inflammatory processes against infection with IBV and perhaps other coronaviruses, as well as contribute to the understanding of the immunopathogenesis of IBV nephropatogenic strains.(AU)

Uma estirpe variante do vírus da bronquite infecciosa (VBI) associada com o desenvolvimento de nefrite em galinhas, foi isolado e identificado como variante por análise do gene S1. A estirpe IBV/Brazil/PR05 foi testada quanto à sua capacidade de induzir a expressão de interleucina-6 (IL-6) nos tecidos renais e traqueais. Galinhas vacinadas com a estirpe Massachusetts H120 e não vacinadas foram desafiadas com a estirpe IBV/Brazil/PR05. Cinco dias após a infecção, traquéias e rins foram coletados para análise por RT-qPCR, imunohistoquímica e histopatologia. Foi determinada a expressão relativa de IL-6 e da carga viral. A expressão de IL-6 e carga viral foram correlacionadas com o desenvolvimento de nefrite e lesão traqueal. A expressão de IL-6 foi maior quando houve aumento da carga viral na traqueia e nos rins. A carga viral presente nos rins foi inferior quando as aves foram vacinadas, entretanto foi observada nefrite acentuada. Houve alta correlação entre o desenvolvimento de nefrite e o nível de expressão de IL-6, bem como a expressão de IL-6 e a carga viral. A expressão de IL-6, presente tanto nos rins e nas traqueias, foi relacionada a carga viral presente nestes tecidos, e o desenvolvimento das lesões foi relacionado com a expressão de IL-6. Estes dados sugerem que a variante IBV/Brazil/PR05 pode induzir a expressão de citocinas pró-inflamatórias de forma correlacionada com a carga viral, e o aumento de IL-6 está envolvido com o influxo de células inflamatórias no tecido, o que evolui para o desenvolvimento de nefrite. Isto pode contribuir como um modelo para o desenvolvimento de agentes imunossupressores da IL-6 para evitar processos inflamatórios agudos contra infecção com o VBI e talvez outros coronavírus, bem como contribuir para o entendimento da imunopatogênese das estirpes nefropatogênicas deste vírus.(AU)