Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens

Abstract The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

Resumo O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.(AU)

O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.(AU)

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

Abstract The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

Resumo O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Determination of ptaquiloside in cow's milk by HPLC-UV / Determinação de ptaquilosídeo no leite de vacas por CLAE-UV

Ferns of the genus Pteridium are known to be responsible for cases of poisoning in cattle. The commonly found species of Pteridium in Brazil are P. arachnoideum and P. caudatum. The toxic principle of these ferns is ptaquiloside, a norsesquiterpene glucoside, which is a known carcinogen. Ptaquiloside can be secreted in the milk of cows grazing on bracken ferns, thereby posing a potential health risk for the milk consumers. The objective of the present study was to develop an analytical methodology using high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet (UV) detection to determine the concentrations of ptaquiloside in cow´s milk. HPLC-UV method, based on the conversion of ptaquiloside into pterosin B and its subsequent extraction using dichloromethane, was successfully developed for estimating concentrations of ptaquiloside in milk samples. However, the presence of ptaquiloside was not detected in milk samples obtained from cows with a history of bovine enzootic hematuria resulting from grazing on P. arachnoideum infested pastures in Brazil.(AU)

Samambaias do gênero Pteridium são reconhecidas como responsáveis por casos de intoxicação em bovinos. As espécies de Pteridium comumente encontradas no Brasil são P. arachnoideum e P. caudatum. O princípio tóxico dessas plantas é o ptaquilosídeo, um glicosídeos norsesquiterpênico, que é um conhecido carcinógeno. O ptaquilosídeo pode ser excretado no leite de vacas que consomem a samambaia, o que representa um potencial risco para quem o consuma. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma metodologia analítica utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta (UV) para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite bovino. Foi desenvolvida com sucesso uma metodologia analítica utilizando CLAE-UV para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite, baseada na conversão deste composto em pterosina B e posterior extração utilizando diclorometano. Entretanto, não foi detectada a presença de ptaquilosídeo nas amostras de leite de propriedades com histórico de hematúria enzoótica bovina e que possuíam P. arachnoideum na pastagem.(AU)

Determination of ptaquiloside in cow's milk by HPLC-UV / Determinação de ptaquilosídeo no leite de vacas por CLAE-UV

Ferns of the genus Pteridium are known to be responsible for cases of poisoning in cattle. The commonly found species of Pteridium in Brazil are P. arachnoideum and P. caudatum. The toxic principle of these ferns is ptaquiloside, a norsesquiterpene glucoside, which is a known carcinogen. Ptaquiloside can be secreted in the milk of cows grazing on bracken ferns, thereby posing a potential health risk for the milk consumers. The objective of the present study was to develop an analytical methodology using high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet (UV) detection to determine the concentrations of ptaquiloside in cow´s milk. HPLC-UV method, based on the conversion of ptaquiloside into pterosin B and its subsequent extraction using dichloromethane, was successfully developed for estimating concentrations of ptaquiloside in milk samples. However, the presence of ptaquiloside was not detected in milk samples obtained from cows with a history of bovine enzootic hematuria resulting from grazing on P. arachnoideum infested pastures in Brazil.

Samambaias do gênero Pteridium são reconhecidas como responsáveis por casos de intoxicação em bovinos. As espécies de Pteridium comumente encontradas no Brasil são P. arachnoideum e P. caudatum. O princípio tóxico dessas plantas é o ptaquilosídeo, um glicosídeos norsesquiterpênico, que é um conhecido carcinógeno. O ptaquilosídeo pode ser excretado no leite de vacas que consomem a samambaia, o que representa um potencial risco para quem o consuma. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma metodologia analítica utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta (UV) para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite bovino. Foi desenvolvida com sucesso uma metodologia analítica utilizando CLAE-UV para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite, baseada na conversão deste composto em pterosina B e posterior extração utilizando diclorometano. Entretanto, não foi detectada a presença de ptaquilosídeo nas amostras de leite de propriedades com histórico de hematúria enzoótica bovina e que possuíam P. arachnoideum na pastagem.

In-house validation for multi-residue analysis of tetracycline in cow milk by HPLC with UV detection / Validação intralaboratorial para análise múltipla dos resíduos de tetraciclina em leite bovino por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção UV

The indiscriminate use of antibiotics in dairy cattle without complying with the waiting period results in residual contamination, whose effective control in produced milk requires validated methods toensure analytical results. The aim of this study was to optimize and validate the HPLC-UV/VIS method at 365 nm for analyzingthe tetracycline in pasteurized cow milk in accordance with the European Community (2002/657/EC). Spiked milk with analytes (oxytetracycline, tetracycline, doxycycline, and chlortetracycline) was submitted to deproteinization and cleaning by a C18 solid-phase column and analyzed by HPLC using a gradient system with 0.01 mol L?1 oxalic acid-acetonitrile-triethylamine (90:9.9:0.1) and acetonitrile on a reverse phase (C18) column. Accuracy and precision were assessed by adding analytes to levels of 0.5, 1, and 1.5 times the permissible maximum limit allowed in Brazil. The method presented selectivity with a decision limit (CC?) and detection capability (CC?) ranging from 114.2 to 143.7 and from 129.3 to 188.7 µg kg?1, respectively. The recovery of tetracyclines was higher than 82.5% with a precision of 7.1%, demonstrating theefficiency in determining tetracycline residues in cow milk.

O uso indiscriminado de antibiótico em gado leiteiro, sem cumprimento do período de carência, resulta em contaminação residual, cujo controle efetivo no leite produzido requer métodos validados que garantam os resultados analíticos. O estudo visou otimizar e validar o método de CLAE-UV/VIS a 365 nm para análise de tetraciclina em leite bovino pasteurizado em conformidade com a Comunidade Europeia (2002/657/EC). O leite fortificado com analitos (oxitetraciclina, tetraciclina, doxiciclina e clortetraciclina) foi submetido à extração por desproteinização e limpeza por coluna de fase sólida C18 e submetido à análise por CLAE empregando sistema gradiente com 0,01 mol L-1 de ácido oxálico-acetonitrila-trietilamina (90:9,9:0,1) e acetonitrila, em coluna de fase reversa (C18). A exatidão e precisão foram avaliadas adicionando o analitos em níveis de 0,5, 1 e 1,5 vezes o limite máximo permitido no Brasil. O método apresentou seletividade com limite de decisão (CC?) e capacidade de detecção (CC?) variando de 114,2 a 143,7 e 129,3 a 188,7 µg kg-1, respectivamente. A recuperação de tetraciclinas foi superior a 82,5% e a precisão de 7,1%, demonstrando eficiência para a determinação de resíduos de tetraciclina em leite bovino.

In-house validation for multi-residue analysis of tetracycline in cow milk by HPLC with UV detection / Validação intralaboratorial para análise múltipla dos resíduos de tetraciclina em leite bovino por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção UV

The indiscriminate use of antibiotics in dairy cattle without complying with the waiting period results in residual contamination, whose effective control in produced milk requires validated methods toensure analytical results. The aim of this study was to optimize and validate the HPLC-UV/VIS method at 365 nm for analyzingthe tetracycline in pasteurized cow milk in accordance with the European Community (2002/657/EC). Spiked milk with analytes (oxytetracycline, tetracycline, doxycycline, and chlortetracycline) was submitted to deproteinization and cleaning by a C18 solid-phase column and analyzed by HPLC using a gradient system with 0.01 mol L?1 oxalic acid-acetonitrile-triethylamine (90:9.9:0.1) and acetonitrile on a reverse phase (C18) column. Accuracy and precision were assessed by adding analytes to levels of 0.5, 1, and 1.5 times the permissible maximum limit allowed in Brazil. The method presented selectivity with a decision limit (CC?) and detection capability (CC?) ranging from 114.2 to 143.7 and from 129.3 to 188.7 µg kg?1, respectively. The recovery of tetracyclines was higher than 82.5% with a precision of 7.1%, demonstrating theefficiency in determining tetracycline residues in cow milk.(AU)

O uso indiscriminado de antibiótico em gado leiteiro, sem cumprimento do período de carência, resulta em contaminação residual, cujo controle efetivo no leite produzido requer métodos validados que garantam os resultados analíticos. O estudo visou otimizar e validar o método de CLAE-UV/VIS a 365 nm para análise de tetraciclina em leite bovino pasteurizado em conformidade com a Comunidade Europeia (2002/657/EC). O leite fortificado com analitos (oxitetraciclina, tetraciclina, doxiciclina e clortetraciclina) foi submetido à extração por desproteinização e limpeza por coluna de fase sólida C18 e submetido à análise por CLAE empregando sistema gradiente com 0,01 mol L-1 de ácido oxálico-acetonitrila-trietilamina (90:9,9:0,1) e acetonitrila, em coluna de fase reversa (C18). A exatidão e precisão foram avaliadas adicionando o analitos em níveis de 0,5, 1 e 1,5 vezes o limite máximo permitido no Brasil. O método apresentou seletividade com limite de decisão (CC?) e capacidade de detecção (CC?) variando de 114,2 a 143,7 e 129,3 a 188,7 µg kg-1, respectivamente. A recuperação de tetraciclinas foi superior a 82,5% e a precisão de 7,1%, demonstrando eficiência para a determinação de resíduos de tetraciclina em leite bovino.(AU)

Avaliação da qualidade interna de ovos de consumo pela pesquisa do teor de aminas bioativas / Evaluation of the internal quality of commercial eggs by searching of the bioactive levels

Com o objetivo de avaliar a qualidade dos ovos de consumo pela pesquisa dos níveis de aminas bioativas, foram coletados, pelos serviços de inspeção oficiais, 224 amostras de ovos provenientes de cinco regiões distintas do estado de Minas Gerais, durante o período de um ano. As aminas biogênicas (putrescina, cadaverina, feniletilamina, histamina e tiramina) e as poliaminas (espermidina e espermina) foram pesquisadas por cromatografia líquida de alta eficiência e detecção ultravioleta (CLAE/UV) após derivação pré-coluna com cloreto de dansila. Os resultados demonstraram que a putrescina estava presente, em baixas concentrações, em todas as amostras de gema e de albúmen. As demais aminas também foram detectadas, porém em menor frequência, e a espermina somente foi encontrada em uma amostra de albúmen. Foi concluído que os ovos de consumo produzidos no estado de Minas Gerais não são uma fonte considerável de poliaminas, importantes para o crescimento e a proliferação celular, e os baixos teores de aminas biogênicas, formadas pela descarboxilação de aminoácidos por enzimas bacterianas, não representam riscos à saúde do consumidor, o que indica que o ovo apresenta boa qualidade, tomando por base o critério de aminas bioativas.(AU)

In order to evaluate the quality of commercial eggs by searching the bioactive amine levels, 224 samples of eggs from the five regions of Minas Gerais State were collected during one year by the official inspection service. The biogenic amines (putrescine, cadaverine, phenylethylamine, histamine and tyramine) and the polyamines (spermidine and spermine) were determined by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC/UV) and pre-column derivatization with dansyl chloride. The results demonstrated the presence of putrescine in all samples of yolk and albumen, but in low concentrations. The other amines were also detected, however, with a lower frequency, and spermine was found only in one sample of albumen. It was concluded that the commercial eggs produced in Minas Gerais State are not a considerable source of polyamines, important for growth and cell proliferation; and low levels of biogenic amine, formed by decarboxylation of amino acids by bacterial enzymes, do not represent risks to consumer health, indicating that it has good quality, based on the bioactive amine criterion.(AU)

Validation of an HPLC-UV method for the identification and quantification of bioactive amines in chicken meat / Validação de metodologia por HPLC/UV para identificação e quantificação de aminas bioativas em carne de frango de corte

A high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) method was validated for the study of bioactive amines in chicken meat. A gradient elution system with an ultraviolet detector was used after extraction with trichloroacetic acid and pre-column derivatization with dansyl chloride. Putrescine, cadaverine, histamine, tyramine, spermidine, and spermine standards were used for the evaluation of the following performance parameters: selectivity, linearity, precision, recovery, limits of detection, limits of quantification and ruggedness. The results indicated excellent selectivity, separation of all amines, a coefficient of determination greater than 0.99 and recovery from 92.25 to 102.25% at the concentration of 47.2mg.kg-1, with a limit of detection at 0.3mg.kg-1 and a limit of quantification at 0.9mg.kg-1 for all amines, with the exception of histamine, which exhibited the limit of quantification, of 1mg.kg-1. In conclusion, the performance parameters demonstrated adequacy of the method for the detection and quantification of bioactive amines in chicken meat.(AU)

Um método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para pesquisa de aminas bioativas em carne de frango foi validado. Foi utilizado um sistema de gradiente de eluição com detector ultravioleta, após extração com ácido tricloroacético e derivação pré-coluna com cloreto de dansila. Os padrões de putrescina, cadaverina, histamina, tiramina, espermidina e espermina foram utilizados para avaliação dos seguintes parâmetros de desempenho: seletividade, linearidade, precisão, recuperação, limites de detecção, limites de quantificação e robustez. Os resultados mostraram excelente seletividade e separação de todas as aminas, coeficiente de determinação superior a 0,99, recuperação entre 92,25 e 105,25% na concentração 47,2mg.kg-1, limites de detecção de 0,3mg.kg-1 e limite de quantificação de 0,9mg.kg-1 para todas as aminas, com exceção da histamina, que apresentou o limite de quantificação mais alto, de 1mg.kg-1. Foi concluído que os parâmetros de desempenho demonstraram adequação do método para detecção e quantificação de aminas bioativas em carne de frango.(AU)

Validation of an HPLC-UV method for the identification and quantification of bioactive amines in chicken meat / Validação de metodologia por HPLC-UV para identificação e quantificação de aminas bioativas em carne de frango de corte

A high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) method was validated for the study of bioactive amines in chicken meat. A gradient elution system with an ultraviolet detector was used after extraction with trichloroacetic acid and pre-column derivatization with dansyl chloride. Putrescine, cadaverine, histamine, tyramine, spermidine, and spermine standards were used for the evaluation of the following performance parameters: selectivity, linearity, precision, recovery, limits of detection, limits of quantification and ruggedness. The results indicated excellent selectivity, separation of all amines, a coefficient of determination greater than 0.99 and recovery from 92.25 to 102.25% at the concentration of 47.2mg.kg-1, with a limit of detection at 0.3mg.kg-1 and a limit of quantification at 0.9mg.kg-1 for all amines, with the exception of histamine, which exhibited the limit of quantification, of 1mg.kg-1. In conclusion, the performance parameters demonstrated adequacy of the method for the detection and quantification of bioactive amines in chicken meat.(AU)

Um método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para pesquisa de aminas bioativas em carne de frango foi validado. Foi utilizado um sistema de gradiente de eluição com detector ultravioleta, após extração com ácido tricloroacético e derivação pré-coluna com cloreto de dansila. Os padrões de putrescina, cadaverina, histamina, tiramina, espermidina e espermina foram utilizados para avaliação dos seguintes parâmetros de desempenho: seletividade, linearidade, precisão, recuperação, limites de detecção, limites de quantificação e robustez. Os resultados mostraram excelente seletividade e separação de todas as aminas, coeficiente de determinação superior a 0,99, recuperação entre 92,25 e 105,25% na concentração 47,2mg.kg-1, limites de detecção de 0,3mg.kg-1 e limite de quantificação de 0,9mg.kg-1 para todas as aminas, com exceção da histamina, que apresentou o limite de quantificação mais alto, de 1mg.kg-1. Foi concluído que os parâmetros de desempenho demonstraram adequação do método para detecção e quantificação de aminas bioativas em carne de frango.(AU)

Aminas bioativas e qualidade da carne de frangos de corte / Bioactive amines and meat quality of broiler chickens

Com o objetivo de avaliar a qualidade da carne de frangos de corte mediante pesquisa dos níveis de aminas bioativas, foram coletadas, pelos serviços de inspeção oficiais, 160 amostras de carcaças provenientes de cinco regiões distintas do estado de Minas Gerais, durante o período de um ano. As poliaminas (espermidina e espermina) e as aminas biogênicas (putrescina, cadaverina, histamina, tiramina) foram pesquisadas por cromatografia líquida de alta eficiência e detecção ultravioleta (CLAE/UV). Os resultados encontrados demonstraram a presença das poliaminas, espermidina e espermina, em todas as amostras, em concentrações médias de 3,56mg/100g e 5,72mg/100g, respectivamente. Em todas as amostras foram detectadas, em concentrações muito baixas, as aminas putrescina, cadaverina, histamina e tiramina. Foi concluído que a carne de frangos de corte produzida no estado de Minas Gerais é uma fonte de poliaminas, importantes para o crescimento e a proliferação celular, e que os baixos teores de aminas biogênicas encontrados não representam riscos à saúde do consumidor, indicando que esse tipo de carne apresenta boa qualidade, tomando por base o critério de aminas bioativas(AU)

In order to evaluate the meat quality of broiler chickens by searching the bioactive amines level, 160 samples of carcass from the five regions of the Minas Gerais State, were collected during one year by the official inspection service. The poliamines (spermidine and spermine) and the biogenic amines (putrescine, cadaverine, histamine and tyramine) were determined by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC/UV). The results demonstrated the presence of polyamines spermidine and spermine in all samples, at mean concentrations of 3.56mg/100g and 5.72mg/100g, respectively. The biogenic amines putrescine, cadaverine, histamine and tyramine were also found, but in low concentrations. It was concluded that the chicken broiler meat produced in Minas Gerais state is a source of polyamines, important for growth and cell proliferation; and that the biogenic amine levels found were low, and do not represent risks to consumer health, indicating that it has good quality, based on the criterion of bioactive amine(AU)

Validation of a practical method for determination of amoxicillin contents in natural waters by means of HPLC-UV and its application in the environmental quality / Validação de um método prático para determinação de níveis de amoxicilina em águas naturais por CLAE-UV e sua aplicação na qualidade ambiental

Amoxicillin is a synthetic penicillin used in the hospital, residential and veterinary surroundings. The indiscriminate use of such medication may cause social and environmental damages. This study aims at determining the amoxicillin contents in water of two rivers located in State of Bahia, the Água Fria and Verruga rivers. An analytical method was developed, optimized and validated for determining the amoxicillin residue, by using the high performance liquid chromatography coupled with UV-Visible detector (HPLC-UV). The study was performed according to the chromatographic parameters validation. Considering that the maximum acceptable values of amoxicillin for drinking water were nonexistent, the found results might be considered as an indicator of contamination by this substance. The occurrence of this antibiotic in the two rivers analyzed in this study indicated a heavy contamination in the urban areas where the increased surface water runoffs occur; and their concentrations were higher than 11 mg.L-1. The validation parameters indicated that the method showed the capacity for detecting low values of quantification limits (2.7 mg.L-1) and of detection (0.7 mg.L-1), good precision (DSR 7 %) and accuracy (96.75 %), thus it turned to be an important tool for assessing amoxicillin contents.(AU)

A amoxicilina é penicilina sintética de uso em ambiente hospitalar, residencial e veterinário. O uso indiscriminado deste medicamento pode acarretar prejuízos sociais e ambientais. O presente trabalho determinou os níveis de amoxicilina em dois rios localizados no sudoeste do estado da Bahia, rios Água Fria e Verruga. Uma metodologia analítica foi desenvolvida, otimizada e validada para efetuar a determinação de resíduos de amoxicilina, empregando-se a cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao detector UV-visível (CLAE-UV). A avaliação do mérito do método foi baseada nos parâmetros cromatográficos de validação: linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão, exatidão e seletividade. Devido à inexistência de valores máximos de amoxicilina aceitáveis para a água de consumo, os resultados obtidos podem constituir um indicativo dos níveis de contaminação dos recursos hídricos por este medicamento. As maiores concentrações, superiores a 11 mg.L-1 deste antibiótico, foram detectadas nas zonas onde recebem aportes dos deflúvios urbanos. Os parâmetros de validação demonstraram que o método apresentou capacidade de detecção de baixos valores dos limites de quantificação (2,7 mg.L-1) e de detecção (0,7 mg.L-1), boa precisão (DPR 7 %) e exatidão (96,75 %), constituindo-se em uma importante ferramenta na avaliação de teores de amoxicilina.(AU)

Method for simultaneously determining the Rifampin, Isoniazid, Pyrazinamide and Ethambutol in the combined fixed-dose tablets / Determinação simultânea de Rifampicina, Isoniazida, Pirazinamida e Etambutol em comprimidos com doses fixas combinadas

Tablets containing isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin are used for tuberculosis treatment, and theyare freely distributed by the Brazilian National Health System. The official analytical methods for testing those substances in fixed-dose combined tablet are described in the United States Pharmacopeia and theInternational Pharmacopoeia. None of these official compendiums refers to the methodologies forconducting the simultaneous analysis of these four drugs. This study aimedatdeveloping an analytical methodology to determine simultaneously allof four drugs in tablets for tuberculosis treatment, bymeans ofhigh performance liquid chromatography with ultraviolet-visible detector. The developed method used a chromatographic column with octadecylsilane stationary phase (250 mm x 4.6 mm x 5 m particle size). The mobile phase was aqueous (85 % ammonium formate buffer pH 5, 15 % methanol and 250 mg CuSO4.5H2O), and organic phase (methanol, 0.1 % triethylamine and 0.2 % formic acid). The flow was 1.0 mL/min, at a wavelength of 265 nm or, when the equipment allowed, a wavelength of 265 nm for isoniazid, pyrazinamide and ethambutol and 335 nm for rifampicin. The developed methodology showed satisfactory results regarding the precision parameter, with relative standard deviation lower than 2.0 % for the studied drugs.(AU)

Os comprimidos utilizados no tratamento da tuberculose possuem quatro fármacos associados, isoniazida, pirazinamida, etambutol e rifampicina, e são distribuídos gratuitamente pelo Sistema Único de Saúde. Os métodos analíticos oficiais para analisar este medicamento estão especificados na Farmacopeia Americana 36a edição e na Farmacopeia Internacional 4a edição. Porém, estes compêndios oficiais não possuem monografias para análise simultânea dos quatro fármacos. O objetivo deste estudo foi desenvolver uma metodologia para determinar simultaneamente os princípios ativos em comprimidos dose fixa combinada, utilizando-se cromatografia a líquido de alta eficiência com detector de ultravioleta-visível, pois é de grande importância para o controle da qualidade do medicamento. O método desenvolvido utilizou coluna cromatográfica C18 (250 x 4,6) mm e 5 m, fase móvel constituída de fase aquosa (85 % tampão formiato de amônio 0,3 mol/L pH 5, 15 % metanol e 0,005 mol/L de Cu2+ ou 250 mg/L de CuSO4.5H2O) e fase orgânica (metanol, 0,1 % de trietilamina e 0,2 % de ácido fórmico). O fluxo foi de 1,0 mL/min e comprimento de ondade 265 nm para isoniazida, pirazinamida e o etambutol e de 335 nm para rifampicina. Este método apresentou desvio padrão relativo inferior a 2,0 % na precisão e linearidade para os quatro fármacos estudados.(AU)

ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E ANTIOXIDANTE DE SOLANUM AMERICANUM E SOLANUM CORYMBIFLORUM COM POTENCIAL USO EM ENFERMIDADES DE REBANHOS LEITEIROS

A mastite é uma inflamação da glândula mamária que tem como causa principal infecções bacterianas. É a doença que mais utiliza antimicrobianos no sistema de produção, comprometendo a sustentabilidade e gerando problemas de saúde pública. Seguindo o conhecimento tradicional de povos nativos, que utilizam solanáceas para tratamento de mastite, o objetivo desse estudo foi realizar uma pesquisa bio-guiada sobre a atividade antimicrobiana e antioxidante a partir da elaboração de extratos: aquoso (AQU), metanólico (MET) e alcaloídico (ALK), das espécies de Solanum americanum (SA) e Solanum corymbiflorum (SC). Os extratos foram utilizados em ensaio de microdiluição em caldo e coloração com cristal violeta, para avaliar a multiplicação bacteriana e a formação do biofilme de Staphylococcus aureus e Escherichia coli, e à reação com o radical DPPH, para avaliar a capacidade antioxidante. Os dados de absorbância foram obtidos por densidade ótica e submetidos à análise de variância (ANOVA). As médias foram comparadas pelos testes de Dunnett e Tukey, adotando um nível de significância de P<0.05. Seguindo a pesquisa bio-guiada, os extratos que apresentaram atividade biológica foram submetidos à caracterização química através de cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e espectrometria de massas (EM) de alta resolução. O extrato AQU de SA estimulou a multiplicação de S. aureus e E. coli. O extrato MET de SC estimulou a formação do biofilme para S. aureus, mas reduziu essa capacidade em relação à E. coli. O extrato ALK de ambas as espécies inibiu a formação de biofilme de S. aureus. Com base na comparação de dados quanto à massa exata, via de fragmentação e ao espectro UV, foi possível indicar a presença do alcaloide N-trans-feruloiltiramina (m/z 314.1382) no extrato ALK de SA. Todos os extratos de SA e o extrato MET de SC à 250 g/mL apresentaram mais de 50% de atividade antioxidante. Os resultados obtidos nestes ensaios in vitro podem estar relacionados ao conhecimento tradicional que utiliza folhas de SC no tratamento e redução dos sintomas da mastite. O presente estudo evidenciou a inibição da formação do biofilme de S. aureus e a ação antioxidante como potenciais modos de atuação dos compostos ativos.

Mastitis is a mammary gland inflammation caused mainly by bacterial infections. It is the disease that most uses antimicrobials in the production system, compromising sustainability and generating public health problems, such as the development of resistant strains. Following the traditional knowledge of native tribes, who use solanaceous to treat mastitis, the aim of this study was to conduct a bio-guided research on antimicrobial and antioxidant activity based on elaboration of extracts: aqueous (AQU), methanolic (MET), and alkaloid (ALK), from the species Solanum americanum (SA) and Solanum corymbiflorum (SC). The extracts were used in a broth microdilution assay and stained with violet crystal, to evaluate the bacterial growth and biofilm formation of Staphylococcus aureus and Escherichia coli, and to the reaction with the radical DPPH, to evaluate the antioxidant capacity. The absorbance data were obtained by optical density and subjected to statistical analysis (ANOVA). The means compared by the Dunnett and Tukey tests, adopting a significance level of P<0.05. Following bio-guided research, extracts that showed biological activity were subjected to chemical characterization through thin layer chromatography (TLC), high-performance liquid chromatography (HPLC), and high-resolution mass spectrometry (HRMS). AQU extract of SA stimulated the growth of S. aureus and E. coli. MET extract of SC stimulated biofilm formation for S. aureus but reduced this ability for E. coli. The ALK extract from both species inhibited biofilm formation S. aureus. Based on the data comparison of exact mass, fragmentation pathway and UV spectrum, it was possible to indicate the presence of the alkaloid N-trans-feruloyltyramine (m/z 314.1382) in the ALK extract of SA. All the extracts of SA and the MET extract of SC at 250 g/mL showed more than 50% of antioxidant activity. The results obtained in these in vitro tests may be related to the traditional knowledge that uses SC leaves in the treatment and reduction of mastitis symptoms. The present study showed the inhibition of the biofilm formation of S. aureus and the antioxidant action as potential modes of action of the active compounds.

VALIDAÇÃO DE MÉTODO BIOANALÍTICO PARA AVALIAÇÃO DA INFLUÊNCIA DA IVERMECTINA E CICLOFOSFOMIDA NA FARMACOCINÉTICA (PK) DA CARBOPLATINA ENSAIO PRÉ-CLÍNICO

A utilização de diversas modalidades de quimioterapia constitui uma potente arma frente à terapêutica das neoplasias mamárias das cadelas e, para isso, é necessário o conhecimento da farmacocinética das drogas antineoplásicas, com o intuito de obter máxima eficiência do protocolo e redução dos efeitos adversos. Objetivou-se validar o método de análise da carboplatina em plasma de cão e rato e avaliar a influência da ivermectina e da ciclofosfamida na farmacocinética da carboplatina em ratas hígidas (teste piloto pré-clínico). Foram estudadas 24 ratas Wistars, divididas em três grupos experimentais: G1- animais tratados apenas com carboplatina na dose de 50mg/kg (n=8), G2 - animais tratados com carboplatina precedida de aplicação de ivermectina na dose de 400l/kg (n=8) e G3 - animais tratados com carboplatina associado a ciclofosfamida em regime metronômico na dose de 12,5mg/m² (n=8). Foi colhido sangue de todos os animais nos tempos 0, 5, 15, 30, 45, 60, 120 e 240 minutos após a administração da carboplatina. Após as colheitas todas as ratas sofreram eutanásia, encaminhadas para o Setor de Patologia e submetidas a necropsia. Foram colhidos fragmentos de rins, intestino, fígado e pulmão. As amostras de sangue foram centrifugadas para obtenção do plasma destinado a análise da farmacocinética utilizando método CLAE-UV (cromatografia líquida de alta eficiência). O método analítico foi linear, robusto e reprodutível, teve validação total em cadelas e parcial em ratas, sendo este estudo um piloto para avaliação da farmacocinética em cadelas com carcinomas mamários. Não houve influência da ivermectina nem da ciclofosfamida na farmacocinética da carboplatina em ratas, na dose de 50mg/kg por via endovenosa e em regime de dose única. Contudo, foi observada discreta tendência no aumento da meia vida e da área sobre a curva no grupo tratado com ciclofosfamida quando comparado ao grupo piloto (carboplatina), o que pode ser notado também na redução do Clearance da droga no mesmo grupo. A análise histopatológica revelou apenas discretas alterações circulatórias e degenerativas focais no parênquima renal e hepático das ratas tratadas. Desta forma, conclui-se que a associação da carboplatina com a ivermectina é segura, tem ação sinérgica e a dose pode ser mantida sem riscos para o paciente. Entretanto, na associação da carboplatina com a ciclofosfamida, sugere-se uma leve redução da dose da carboplatina, buscando-se evitar a potencialização dos seus efeitos pela presença da ciclofosfamida.

The use of different forms of chemotherapy is a therapeutic potential of anti-neoplastic drugs, in order to obtain maximum protocol efficiency and reduce adverse consequences. The objective is to validate the carboplatin analysis method in rat plasma and to evaluate the influence of cyclophosphamide on the pharmacokinetics of carboplatin in healthy rats (preclinical pilot test). We studied 24 Wistars rats, divided into three experimental groups: G1 - animals treated with carboplatin alone (n = 8), G2 - animals treated with carboplatin preceded by application of ivermectin and G3 - animals treated with carboplatin combined with a metronomic cyclophosphamide (n = 8). Blood was collected from all animals at times 0, 5, 15, 30, 45, 60, 120 and 240 minutes after carboplatin administration. After being harvested as rats, they were euthanized, sent to the Pathology Sector and submitted to necropsy. Fragments of kidneys, intestine, liver and lung were collected. As blood samples were centrifuged to obtain plasma for analysis of pharmacokinetics under the CLAE-UV (high performance liquid chromatography) method. The analytical method was linear, robust and reproducible, presenting validation in cadavers and partial in rats, being this a pilot study to evaluate the pharmacokinetics in female dog with mammary carcinomas. The dose of 50 mg / kg intravenously and on a single dose regimen is not altered. However, a trend in life and part increase in the cyclophosphamide group was observed when it was in the pilot group (carboplatin), which can also be seen in the reduction of drug clearance in the group. A common and discrete histopathological analysis of the circulatory and degenerative functions not renal and hepatic parenchyma of the treated rats. Thus, the association of carboplatin with an ivermectin is safe, synergistic and a dose can be performed without risk to the patient. However, in the association of carboplatin with cyclophosphamide, it is suggested to reduce the dose of carboplatin, seeking to potentiate the efficacy of its reactions by cyclophosphamide.

Determinação de aminas biogênicas em diferentes tipos de queijos por cromatografia líquida de alta eficiência / Determination of biogenic amines in different types of cheese by high-performance liquid chromatography

As aminas biogênicas (cadaverina, espermidina, histamina, putrescina e tiramina) foram determinadas e quantificadas em quatro diferentes tipos de queijos utilizando-se a técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Para realizar o estudo, foram adquiridas 10 amostras de cada tipo de queijo gouda, minas frescal, mozarela e prato no mercado varejista do Rio de Janeiro. As 40 amostras passaram pelas etapas de extração e derivatização das aminas biogênicas, as quais foram detectadas e quantificadas por CLAE-UV. Para avaliar as diferenças entre os queijos, foram aplicados a análise de variância A nova e o teste de Tukey. Dentre os queijos estudados, o minas frescal apresentou os mais baixos teores de aminas biogênicas (24,26 mg.kg-1), e os teores mais elevados (489,15 mg.kg-1) foram detectados no gouda. Das aminas biogênicas analisadas, a tiramina foi a que demonstrou concentrações mais elevadas (623,60mg.kg-1), e a espermidina, as menores concentrações (0,80 mg.kg-1). Considerando-se os quatro tipos de queijos estudados, o gouda parece ser o que requer maiores cuidados com relação ao monitoramento da presença de aminas biogênicas. A metodologia mostrou-se eficaz para efetuar a detecção e a quantificação das aminas biogênicas nos queijos estudados. (AU)

This study aimed at detecting and quantifying biogenic amines (cadaverine, spermidine, histamine, putrescine and tyramine) in four different types of cheese using high-performance liquid chromatography (HPLC). For this study, ten samples of gouda, minas, mozzarella and prato, four types of cheese, were purchased in retail markets of Rio de Janeiro. Biogenic amines were previously extracted and derivatizated; then, these amines were detected and quantified by HPLC-UV. For assessing differences among the analyzed cheeses, data were submitted to Anova and Tukeys test. Minas cheese showed the lowest amount of amine (24.26 mg.kg-1), and the highest contents (489.15 mg.kg-1) were found in gouda. As for the investigated biogenic amines, tyramine showed the highest concentrations (623.60 mg.kg-1), and spermidine was found at the lowest concentration (0.80 mg.kg-1) in all four types of cheese. This study indicates that gouda seems to demand a much more careful monitoring of biogenic amines in the analyzed cheese samples. Also, the methodology was effective for detecting and quantifying biogenic amines in all studied cheese samples.(AU)

DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE MÉTODOS PARA CARACTERIZAÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE MARBOFLOXACINO EM FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA DE USO ANIMAL

As fluoroquinolonas são fármacos antibióticos de primeira escolha no tratamento de infecções de diversos tipos de infeções sejam elas de origem cutânea, intestinal, genitourinária ou respiratórias. Esses fármacos são empregados tanto na medicina humana como na animal, por possuírem amplo espectro de ação e dificilmente desenvolvem resistência bacteriana. No emprego destes fármacos em medicina veterinária, vários princípios ativos tem sido desenvolvidos, porem estudos de controle de qualidade sejam das matérias-primas como de formulações tem sido pouco explorados. Um exemplo de fármaco da classe de uso animal que apresenta poucos relatos na literatura, mas que se encontra disponível no mercado é o Marbofloxacino, uma fluoroquinolona de segunda geração, utilizada somente em medicina veterinária. O presente estudo realizado teve como objetivo o desenvolvimeto e validação de métodos analíticos para determinação de Marbofloxacino em comprimidos palatáveis de uso animal. Dois métodos foram desenvolvidos e validados, sendo um por Espectrofotometria UV e o outro por CLAE, bem como a caracterização da matéria-prima por CCD, IV, UV e técnica termoanalíticas de TG/DTG e DSC. Os Resultados para a validação por Espectrofotometria UV foram: curva de calibração de 5,0 a 15,0 g/mL com coeficiente correlação de 0,9990, repetibilidade com teor de 101,60 % e desvio padrão relativo inferior a 1%, e a média das recuperações de 101,53 ± 0,4, robustez dentro da faixa de 90-110% e variação menor que 2% e limites de detecção e quantificação de 0,033 e 0,625 respectivamente. Já os resultados da validação por CLAE foram: curva de 2,0 a 18,0 g/mL com valor de correlação de 0,9991, repetibilidade com teor de 104,40% desvio padrão relativo inferior a 1%, a média das recuperações foi de 98,74 ± 0,55, robustez também dentro da faixa preconizada e limites de detecção e quantificação de 0,81 e 0,25 respectivamente. Com os resultados obtidos em ambos os métodos, e a realização da análise estatística conclui-se que os métodos desenvolvidos são válidos com significância estatística e podem ser empregados no Controle de Qualidade de Marbofloxacino nesta forma farmacêutica.

Fluoroquinolones are the first choice of antibiotics drugs in the treatment of the various kinds of infections, will they have cutaneous, intestinal, genitourinary or respiratory origin. These drugs are used in human and animals medicine, because they possess a large spectrum of action and hardly develop bacterial resistance. The use of these drugs, in veterinary medicine, it has been developed several active principles, however quality control studies such as raw materials or formulations has been little explored. It is an example of an animal drug class use that has few reports in the literature, but which is available on the market is Marbofloxacino, a fluoroquinolone of second generation, currently used, only in veterinary medicine. This study aimed to the development and validation of analytical methods for determination of Marbofloxacino in palatable tablets of animal use. Two methods were developed and validated, one was by UV spectrophotometry and the other by HPLC, as well as the characterization of the raw material by CCD, IV, UV and thermoanalytical technique TG / DTG and DSC. The results for the validation by UV spectrophotometry were: calibration curve from 5,0 to 15,0 g / ml with correlation coefficient of 0.9990, repeatability with 101.60% content and relative standard deviation less than 1%, and the average recoveries of 101.53 ± 0.4, ruggedness in the range of 90-110% and the variation less than 2% and limits of detection and quantification of 0.033 and 0.625 respectively. The HPLC validation results were: curve of 2,0 to 18,0 ug / ml with 0.9991 correlation value, standard deviation of 104,40% content, relative standard deviation less than 1%, the average recovery was 98,74 ± 0.55, robustness was also within the recommended range and limits of detection and quantification of 0.81 and 0.25 respectively. With the results obtained by both methods, and statistical analysis it is concluded that the developed methods are valid with statistical significance and can be used in Marbofloxacino Quality Control in this dosage form.

Intoxicação em cães e gatos: diagnóstico toxicológico empregando cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta pressão com detecção ultravioleta em amostras estomacais

The pesticides and rodenticides are responsible for several human and animal intoxications. Preliminary data suggest that the illegal use of these compounds to poison small animals is a common practice in the central region of the Rio Grande do Sul state. The Laboratory of Toxicology received samples, of cases in which the main suspected cause of death is poisoning by pesticides or exogenous rodenticides (licit and illicit). The aim of this study was show the survey of small animals poisoned and analyzed by LATOX during the period of 2004 to 2008 identifying the xenobiotics by optimized analytical methods, including screening by thin-layer chromatography (TLC) and a possible confirmation by high performance liquid chromatography - ultraviolet detection (HPLC-UV). In this period 68 samples were analyzed from small poisoned animals. The biological samples analyzed were stomach and stomach content and the TLC permitted carbamates, warfarin and stricnine identification. This proved to be an efficient and adequate technique for this purpose, relatively fast, inexpensive and with low matrix interference. The screening by HPLC for N-methyl carbamates was also realized: aldicarb, carbaryl, carbofuran and propoxur. The analysis showed that the main toxic agent found was aldicarb (chumbinho), responsible for 39.7% of poisoning (27 cases), followed by stricnine (6 cases), warfarin (3 cases) and sodium monofluoracetate (1 case). Thus, the 'chumbinho' was the main agent involved in dogs and cats poisoning in the central region of the state, during the analyzed period. The analytical methods TLC and HPLC can be used efficiently in laboratorial routine for identification and confirmation of xenobiotics involved in these poisonings.

Agrotóxicos e raticidas são responsáveis por inúmeras intoxicações humanas e animais. Dados preliminares sugerem que o uso ilegal desses compostos com a finalidade de intoxicação fatal em pequenos animais é uma prática comum na região central do Estado do Rio Grande do Sul. O Laboratório de Toxicologia (LATOX) recebe amostras de casos em que a principal suspeita é a intoxicação por agrotóxicos ou raticidas (lícitos e ilícitos). O presente estudo teve como objetivo apresentar um levantamento das intoxicações de pequenos animais, analisadas pelo LATOX no período de 2004 a 2008, sendo identificados os xenobióticos por meio de métodos analíticos otimizados pelo laboratório, incluindo screening por cromatografia em camada delgada (CCD) e possível confirmação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV). No período, foram analisadas 68 amostras oriundas de intoxicações em cães e gatos. As amostras biológicas analisadas foram o estômago e o conteúdo estomacal, das quais a CCD permitiu a identificação de carbamatos, warfarina e estricnina. Esta mostrou ser uma técnica qualitativa eficiente e adequada para esse propósito, além de ser relativamente rápida, de baixo custo e de sofrer pouca interferência de componentes da matriz. Também foi realizado um screening toxicológico por CLAE-UV para os carbamatos n-metilados: aldicarb, carbaril, carbofuran e propoxur. O resultado das análises indicou que o principal agente tóxico encontrado foi o aldicarb (chumbinho), responsável por 39,7% das intoxicações (27 casos), seguido por estricnina (seis casos), warfarina (três casos) e monofluoracetato de sódio (um caso). Sendo assim, o "chumbinho" foi o principal agente envolvido em intoxicações de cães e gatos na região central do Estado no período avaliado, e os métodos analíticos CCD e CLAE-UV podem ser utilizados de forma eficiente na rotina laboratorial para identificação e confirmação dos xenobióticos mais envolvidos nessas intoxicações.

Intoxicação em cães e gatos: diagnóstico toxicológico empregando cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta pressão com detecção ultravioleta em amostras estomacais

The pesticides and rodenticides are responsible for several human and animal intoxications. Preliminary data suggest that the illegal use of these compounds to poison small animals is a common practice in the central region of the Rio Grande do Sul state. The Laboratory of Toxicology received samples, of cases in which the main suspected cause of death is poisoning by pesticides or exogenous rodenticides (licit and illicit). The aim of this study was show the survey of small animals poisoned and analyzed by LATOX during the period of 2004 to 2008 identifying the xenobiotics by optimized analytical methods, including screening by thin-layer chromatography (TLC) and a possible confirmation by high performance liquid chromatography - ultraviolet detection (HPLC-UV). In this period 68 samples were analyzed from small poisoned animals. The biological samples analyzed were stomach and stomach content and the TLC permitted carbamates, warfarin and stricnine identification. This proved to be an efficient and adequate technique for this purpose, relatively fast, inexpensive and with low matrix interference. The screening by HPLC for N-methyl carbamates was also realized: aldicarb, carbaryl, carbofuran and propoxur. The analysis showed that the main toxic agent found was aldicarb (chumbinho), responsible for 39.7% of poisoning (27 cases), followed by stricnine (6 cases), warfarin (3 cases) and sodium monofluoracetate (1 case). Thus, the 'chumbinho' was the main agent involved in dogs and cats poisoning in the central region of the state, during the analyzed period. The analytical methods TLC and HPLC can be used efficiently in laboratorial routine for identification and confirmation of xenobiotics involved in these poisonings.

Agrotóxicos e raticidas são responsáveis por inúmeras intoxicações humanas e animais. Dados preliminares sugerem que o uso ilegal desses compostos com a finalidade de intoxicação fatal em pequenos animais é uma prática comum na região central do Estado do Rio Grande do Sul. O Laboratório de Toxicologia (LATOX) recebe amostras de casos em que a principal suspeita é a intoxicação por agrotóxicos ou raticidas (lícitos e ilícitos). O presente estudo teve como objetivo apresentar um levantamento das intoxicações de pequenos animais, analisadas pelo LATOX no período de 2004 a 2008, sendo identificados os xenobióticos por meio de métodos analíticos otimizados pelo laboratório, incluindo screening por cromatografia em camada delgada (CCD) e possível confirmação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV). No período, foram analisadas 68 amostras oriundas de intoxicações em cães e gatos. As amostras biológicas analisadas foram o estômago e o conteúdo estomacal, das quais a CCD permitiu a identificação de carbamatos, warfarina e estricnina. Esta mostrou ser uma técnica qualitativa eficiente e adequada para esse propósito, além de ser relativamente rápida, de baixo custo e de sofrer pouca interferência de componentes da matriz. Também foi realizado um screening toxicológico por CLAE-UV para os carbamatos n-metilados: aldicarb, carbaril, carbofuran e propoxur. O resultado das análises indicou que o principal agente tóxico encontrado foi o aldicarb (chumbinho), responsável por 39,7% das intoxicações (27 casos), seguido por estricnina (seis casos), warfarina (três casos) e monofluoracetato de sódio (um caso). Sendo assim, o "chumbinho" foi o principal agente envolvido em intoxicações de cães e gatos na região central do Estado no período avaliado, e os métodos analíticos CCD e CLAE-UV podem ser utilizados de forma eficiente na rotina laboratorial para identificação e confirmação dos xenobióticos mais envolvidos nessas intoxicações.