Molecular characterization of carnivore protoparvovirus strains circulating in cats in Turkey / Caracterização molecular de cepas de protoparvovírus carnívoros circulantes em gatos na Turquia

Cats are susceptible to feline panleukopenia virus (FPV) and canine parvovirus type 2 (CPV-2). Therefore, coinfection and superinfection with multiple parvovirus strains may occur, resulting in high heterogeneity and recombination. Considering the importance of cats as a potential source of genetic diversity for parvoviruses, we investigated the frequency of parvovirus infection in cats using their blood and fecal samples and performed molecular characterization of parvovirus strains circulating in cat populations. Accordingly, the fecal and blood samples of 60 cats with gastroenteritis symptoms were collected from Turkey's Burdur, Isparta, and Izmit provinces. Of these 15 fecal samples tested as parvovirus-positive by PCR, 14 were confirmed to have been infected with true FPV strains by sequencing analysis. Through the phylogeny analysis, those were located in the FPV cluster, closely related to CPV-2, and one was discriminated in the CPV-2b cluster. Additionally, sequence analysis of the VP2 gene of CPV and FPV revealed that the FPV strains detected in Turkey and the vaccine strains were highly related to each other, with a nucleotide identity of 97.7- 100%. Furthermore, 13 variable positions were detected in VP2 of the field and reference FPV strains. Three synonymous mutations were determined in the VP2 gene. Some amino acid mutations in the VP2 protein-affected sites were considered responsible for the virus's biological and antigenic properties. The partial sequence analysis of the VP2 gene revealed that four FPV strains detected in Turkey have a single nucleotide change from T to G at the amino acid position 384 between the nucleotides 3939-3941, which was reported for the first time. Therefore, these four isolates formed a different branch in the phylogenetic tree. The results suggest that both FPV and CPV-2b strains are circulating in domestic cats in Turkey and cats should be considered as potential sources of new parvovirus variants for cats, dogs and other animals.

Os gatos são suscetíveis ao vírus da panleucopenia felina (FPV) e ao parvovírus canino tipo 2 (CPV-2). Portanto, coinfecção e superinfecção com múltiplas cepas de parvovírus podem ocorrer, resultando em alta heterogeneidade e recombinação. Considerando a importância dos gatos como uma fonte potencial de diversidade genética para parvovírus, investigamos a frequência da infecção por parvovírus em gatos usando suas amostras de sangue e fezes e realizamos a caracterização molecular de cepas de parvovírus circulantes nas populações de gatos. Amostras fecais e de sangue de 60 gatos com sinais de gastroenterite foram coletadas nas províncias de Burdur, Isparta e Izmit, na Turquia. Destas, 15 amostras fecais testaram positivas para parvovírus por PCR e 14 foram confirmadas como infectadas com cepas verdadeiras de FPV por análise de sequenciamento. Através da análise filogenética, aqueles foram localizados no agrupamento FPV que está intimamente relacionado com o CPV-2, e um foi discriminado no agrupamento CPV-2b. Além disso, a análise da sequência do gene VP2 de CPV e FPV revelou que as cepas de FPV detectadas na Turquia e as cepas vacinais eram altamente relacionadas entre si, com uma identidade de nucleotídeos de 97,7-100%. Além disso, 13 posições variáveis foram detectadas em VP2 das cepas de campo e FPV de referência. Três mutações sinônimas foram determinadas no gene VP2. Algumas mutações de aminoácidos nos locais afetados pela proteína VP2 foram consideradas responsáveis pelas propriedades biológicas e antigênicas do vírus. A análise da sequência parcial do gene VP2 revelou que quatro cepas de FPV detectadas na Turquia têm uma única mudança de nucleotídeo de T para G na posição do aminoácido 384 entre os nucleotídeos 3939-3941, o que foi relatado pela primeira vez. Portanto, esses quatro isolados formaram um ramo diferente na árvore filogenética. Os resultados sugerem que ambas as cepas FPV e CPV-2b estão circulando em gatos domésticos na Turquia e os gatos devem ser considerados como fontes potenciais de novas variantes de parvovírus para gatos, cães e outros animais.

Serum calprotectin levels in dogs with diarrhea

Background: Diarrhea induced by infectious factors may lead to significant health problems in dogs. Canine parvovirus(CPV), canine coronavirus (CCV), canine distemper virus (CDV), Giardia spp., Escherichia coli (E. coli), and Salmonella spp. are the important infectious agents that may induce diarrhea in dogs. The present study aimed to investigatethe effect of CPV, CCV, CDV, Giardia spp., E. coli, and Salmonella spp. infections on the change in serum calprotectin(Calp) concentration.Materials, Methods & Results: A total of 30 dogs were enrolled in the study. The study dogs were divided into 3 groups.Healthy animals as confirmed by clinical examination and animals negative for the specified pathogens were placed inGroup 1. Animals infected by one or more agents, including CPV, CCV, CDV, and Giardia spp., but negative for E. coli orSalmonella spp. were placed in Group 2. Finally, animals positive for E. coli or Salmonella spp. and infected or not infectedby one or more agents, including CPV, CCV, CDV, and Giardia spp., were placed in Group 3. Stool samples and rectaland conjunctival swab samples were collected to investigate the etiologic agents that induced diarrhea. Blood samples werecollected through vena cephalica antebrachii for hematological and biochemical examinations. The samples were obtainedvia routine clinical examinations at the Prof. Dr. Servet Sekin outpatient clinic at Dicle University Veterinary Faculty. CPV,CCV, CDV, and Giardia spp. diagnoses were made based on immunochromatographic test kits. The bacteriological analysisof stool samples was used to diagnose E. coli and Salmonella spp. infection...

Serum calprotectin levels in dogs with diarrhea

Background: Diarrhea induced by infectious factors may lead to significant health problems in dogs. Canine parvovirus(CPV), canine coronavirus (CCV), canine distemper virus (CDV), Giardia spp., Escherichia coli (E. coli), and Salmonella spp. are the important infectious agents that may induce diarrhea in dogs. The present study aimed to investigatethe effect of CPV, CCV, CDV, Giardia spp., E. coli, and Salmonella spp. infections on the change in serum calprotectin(Calp) concentration.Materials, Methods & Results: A total of 30 dogs were enrolled in the study. The study dogs were divided into 3 groups.Healthy animals as confirmed by clinical examination and animals negative for the specified pathogens were placed inGroup 1. Animals infected by one or more agents, including CPV, CCV, CDV, and Giardia spp., but negative for E. coli orSalmonella spp. were placed in Group 2. Finally, animals positive for E. coli or Salmonella spp. and infected or not infectedby one or more agents, including CPV, CCV, CDV, and Giardia spp., were placed in Group 3. Stool samples and rectaland conjunctival swab samples were collected to investigate the etiologic agents that induced diarrhea. Blood samples werecollected through vena cephalica antebrachii for hematological and biochemical examinations. The samples were obtainedvia routine clinical examinations at the Prof. Dr. Servet Sekin outpatient clinic at Dicle University Veterinary Faculty. CPV,CCV, CDV, and Giardia spp. diagnoses were made based on immunochromatographic test kits. The bacteriological analysisof stool samples was used to diagnose E. coli and Salmonella spp. infection...(AU)

Prognostic values of physical and hematological parameters of dogs naturally infected with parvovirus PVC-2: retrospective study of 103 cases / [Valores prognósticos de parâmetros físicos e hematológicos de cães naturalmente infectados pelo parvovírus PVC-2: estudo retrospectivo de 103 casos]

Canine parvovirosis is a high mortality disease with acute clinical picture. However, there are few available resources to help stablish prognosis accurately. This study aimed to determine the prognostic threshold values for vital and hematological parameters of dogs naturally infected by the Carnivore protoparvovirus 1 (CPV). A retrospective study of 103 canine parvovirosis cases was carried out. Twenty seven percent of these (28/103) died, 96% (27/28) of which within the first four days of hospitalization. Deceased animals had significantly higher median values for heart (HR) and respiratory (f) rates, as well as significantly lower systolic blood pressure (SBP) than survivors. Severely leukopenic animals (<1,000 cells/µL), had a significantly higher mortality rate (68%, n=13) compared to that of other patients (P<0.0007). Animals with at least two of the following findings: severe hypotension (SBP< 90mmHg), tachycardia (HR > 150 bpm) and leukopenia, represented 34% (34/101) of the cases and had a survival rate of 29% (10/34), while animals with at most one of these parameters represented 66% (67/101) and had a survival rate of 94% (63/67). The presence of two or three abnormal parameters was significantly related to the higher death risk among dogs with parvovirosis (P<0.0001).(AU)

A parvovirose canina é uma doença de alta mortalidade e de quadro clínico agudo. No entanto, existem poucos recursos para se estabelecer prognóstico de maneira precisa. Este estudo objetivou analisar os valores prognósticos de parâmetros físicos e hematológicos de cães naturalmente infectados pelo Carnivore protoparvovirus 1 (CPV). Um estudo retrospectivo de 103 casos de parvovirose canina foi realizado. Desses, 27% dos animais (28/103) foram a óbito, sendo 96% (27/28) com ocorrência nos primeiros quatro dias de internamento. Os cães que foram a óbito apresentaram medianas das frequências cardíaca (FC) e respiratória (f) significativamente maiores e pressão arterial sistólica (PAS) consideravelmente menor que a dos sobreviventes. Entre os animais mais intensamente leucopênicos (<1.000 células/(L), a taxa de mortalidade (68%, n=13) foi expressivamente maior que a dos demais pacientes (P<0,0007). Os animais com hipotensão grave (PAS<90mmHg), taquicardia (FC>150bpm) e leucopenia intensa (leucometria<1.000 células/µL), ou duas dessas alterações clínicas, representaram 34% (34/101) dos casos e tiveram taxa de sobrevida de 29% (10/34), enquanto os animais com, no máximo, um desses parâmetros alterados representaram 66% (67/101) dos animais, com taxa de sobrevida de 94% (63/67). A presença de dois ou três parâmetros alterados esteve significativamente relacionada ao maior risco de óbito de cães com parvovirose (P<0,0001).(AU)

Human adenovirus, mesophilic bacteria and fungi in puppies’ food marketed in bulk in southern Brazil

Background: The Brazilian domestic canine population are the second largest in the world and their feeding means 0.4%of the Brazilian gross domestic product. For maintaining the quality of the food, the companies use worldwide standardsfor technical prevention and control of contaminants and biological conservation. The packaging is part of this process,since it provides a barrier between food and environment. However, in Brazil, packagings are often opened in retail storesfor bulk marketing. The objectives of this work were to develop a methodology to detect viruses in foods and to analyzethe bacterial and fungal contamination in puppies’ food sold in bulk in Ivoti and Estância Velha, cities in Southern Brazil.Materials, Methods & Results: Twenty samples collected between September and October 2016 were analyzed for mostprobable number of coliforms, Salmonella sp., mesophilic aerobic bacteria and yeast/mold following the regulation of theBrazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply guidelines. They were also tested for Human MastadenovirusC (HAdV), Canine Mastadenovirus A (CAdV), and Carnivore Protoparvovirus 1 (CPV) genomes. Viral analysis wereperformed by polymerase chain reaction (PCR) detection. During the collection of the samples hygienic-sanitary conditions, storage of feeds, animals’ access, dog grooming, and veterinary care were considered to evaluate the conditions ofeach store. A pilot study was carried out using one food sample marketed in bulk and one sample from the original package(closed package) and testing them for bacterial and fungal contamination for standardizing viral detection. Ten grams offood from the original package were mixed with 90 mL of Eagles’ Minimal Essential Medium (E-MEM) in 100 mL sterilebottles. These bottles were kept in room temperature and shaken for 60 min. Subsequently, aliquots were obtained by sequentially diluting the sample (10-2 to 10-4)...

Human adenovirus, mesophilic bacteria and fungi in puppies food marketed in bulk in southern Brazil

Background: The Brazilian domestic canine population are the second largest in the world and their feeding means 0.4%of the Brazilian gross domestic product. For maintaining the quality of the food, the companies use worldwide standardsfor technical prevention and control of contaminants and biological conservation. The packaging is part of this process,since it provides a barrier between food and environment. However, in Brazil, packagings are often opened in retail storesfor bulk marketing. The objectives of this work were to develop a methodology to detect viruses in foods and to analyzethe bacterial and fungal contamination in puppies food sold in bulk in Ivoti and Estância Velha, cities in Southern Brazil.Materials, Methods & Results: Twenty samples collected between September and October 2016 were analyzed for mostprobable number of coliforms, Salmonella sp., mesophilic aerobic bacteria and yeast/mold following the regulation of theBrazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply guidelines. They were also tested for Human MastadenovirusC (HAdV), Canine Mastadenovirus A (CAdV), and Carnivore Protoparvovirus 1 (CPV) genomes. Viral analysis wereperformed by polymerase chain reaction (PCR) detection. During the collection of the samples hygienic-sanitary conditions, storage of feeds, animals access, dog grooming, and veterinary care were considered to evaluate the conditions ofeach store. A pilot study was carried out using one food sample marketed in bulk and one sample from the original package(closed package) and testing them for bacterial and fungal contamination for standardizing viral detection. Ten grams offood from the original package were mixed with 90 mL of Eagles Minimal Essential Medium (E-MEM) in 100 mL sterilebottles. These bottles were kept in room temperature and shaken for 60 min. Subsequently, aliquots were obtained by sequentially diluting the sample (10-2 to 10-4)...(AU)

Epidemiological, clinical and pathological features of canine parvovirus 2c infection in dogs from southern Brazil

ABSTRACT: Canine parvovirus type 2c (CPV-2c) emerged in Europe in the early 2000s and rapidly spread out worldwide. Clinical and molecular data have demonstrated its circulation in Brazilian dogs, yet detailed descriptions of cases are still lacking. This article describes the epidemiological, clinical and pathological features of 24 cases of CPV-2c-associated disease in dogs submitted to veterinary clinics and laboratory diagnosis in southern Brazil (2014-2016). Most affected dogs presented signs/lesions suggestive of parvovirus enteritis: diarrhea, vomiting, hyperemia and hemorrhage of the serous membrane of the small intestine, diffuse segmental granulation, atrophy of the villi, necrosis and fusion of crypts, squamous metaplasia and epithelial syncytia. A number of cases presented features divergent from the classical presentations, including a wide variation in the color of feces (reddish and/or yellowish, light-brownish, orange-brown and brownish), involvement of adults (4/24) and vaccinated dogs (12/24), extensive involvement of the small intestine (8/20) and the presence of pulmonary edema (7/24) and convulsions (3/24). Feces and intestinal fragments submitted to PCR for the CPV-2 VP2 gene and to virus isolation in cell culture yielded positive results in 100% and 58.3% (14/24) of the cases, respectively. Nucleotide sequencing revealed a high nucleotide identity in VP2 (99.4 to 100%) and a consistent mutation at amino acid 426 (asparagine to glutamic acid), considered a signature of CPV-2c. These results confirm the involvement of CPV-2c in the described cases and demonstrate the importance of CPV-2c infection among Brazilian dogs, calling attention of veterinarians to correctly diagnose the disease, mainly considering the frequent atypical presentations.

RESUMO: O parvovírus canino tipo 2c (CPV-2c) surgiu na Europa no início do ano 2000 e rapidamente se espalhou pelas populações de cães ao redor do mundo. Dados clínicos e moleculares demonstraram a sua circulação em cães brasileiros, porém descrições detalhadas desses casos ainda são escassas. Este artigo descreve os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de 24 casos de doença gastroentérica associada com a infecção pelo CPV-2c em cães atendidos em clínicas veterinárias e submetidos ao diagnóstico laboratorial no Sul do Brasil (2014-2016). A maioria dos cães afetados apresentaram sinais e/ou lesões sugestivas de enterite por parvovírus: diarreia, vômitos, hiperemia e hemorragia na membrana serosa do intestino delgado, granulação segmentar difusa, atrofia das vilosidades, necrose e fusão de criptas, metaplasia escamosa e sincícios epiteliais. Alguns casos apresentaram características divergentes das apresentações clássicas, incluindo uma grande variação na cor das fezes (avermelhada e/ou amarelada, marrom-claro, marrom-alaranjada ou amarronzada), a participação dos adultos (4/24) e cães vacinados (12/24), um amplo envolvimento do intestino delgado (8/20), a presença de edema pulmonar (7/24) e convulsões (3/24). As fezes e fragmentos intestinais foram submetidos ao teste de PCR para o gene VP2 do CPV-2, e ao isolamento do vírus em cultura de células produziram resultados positivos em 100% e 58,3% (14/24) dos casos, respectivamente. O sequenciamento dos nucleótidos revelou uma alta identidade de nucleótidos na VP2 (99,4-100%) e uma mutação no aminoácido 426 (asparagina para ácido glutâmico), considerada uma assinatura de CPV-2c. Estes resultados confirmam o envolvimento do CPV-2c nos casos descritos e demonstra a importância da infecção pelo CPV-2c entre os cães do Brasil, chamando a atenção de veterinários para diagnosticar corretamente a doença, principalmente considerando-se as apresentações atípicas frequentes.

Epidemiological, clinical and pathological features of canine parvovirus 2c infection in dogs from southern Brazil / Aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos da infecção pelo parvovirus canino 2c em cães do Sul do Brasil

Canine parvovirus type 2c (CPV-2c) emerged in Europe in the early 2000's and rapidly spread out worldwide. Clinical and molecular data have demonstrated its circulation in Brazilian dogs, yet detailed descriptions of cases are still lacking. This article describes the epidemiological, clinical and pathological features of 24 cases of CPV-2c-associated disease in dogs submitted to veterinary clinics and laboratory diagnosis in southern Brazil (2014-2016). Most affected dogs presented signs/lesions suggestive of parvovirus enteritis: diarrhea, vomiting, hyperemia and hemorrhage of the serous membrane of the small intestine, diffuse segmental granulation, atrophy of the villi, necrosis and fusion of crypts, squamous metaplasia and epithelial syncytia. A number of cases presented features divergent from the classical presentations, including a wide variation in the color of feces (reddish and/or yellowish, light-brownish, orange-brown and brownish), involvement of adults (4/24) and vaccinated dogs (12/24), extensive involvement of the small intestine (8/20) and the presence of pulmonary edema (7/24) and convulsions (3/24). Feces and intestinal fragments submitted to PCR for the CPV-2 VP2 gene and to virus isolation in cell culture yielded positive results in 100% and 58.3% (14/24) of the cases, respectively. Nucleotide sequencing revealed a high nucleotide identity in VP2 (99.4 to 100%) and a consistent mutation at amino acid 426 (asparagine to glutamic acid), considered a signature of CPV-2c. These results confirm the involvement of CPV-2c in the described cases and demonstrate the importance of CPV-2c infection among Brazilian dogs, calling attention of veterinarians to correctly diagnose the disease, mainly considering the frequent atypical presentations.(AU)

O parvovírus canino tipo 2c (CPV-2c) surgiu na Europa no início do ano 2000 e rapidamente se espalhou pelas populações de cães ao redor do mundo. Dados clínicos e moleculares demonstraram a sua circulação em cães brasileiros, porém descrições detalhadas desses casos ainda são escassas. Este artigo descreve os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de 24 casos de doença gastroentérica associada com a infecção pelo CPV-2c em cães atendidos em clínicas veterinárias e submetidos ao diagnóstico laboratorial no Sul do Brasil (2014-2016). A maioria dos cães afetados apresentaram sinais e/ou lesões sugestivas de enterite por parvovírus: diarreia, vômitos, hiperemia e hemorragia na membrana serosa do intestino delgado, granulação segmentar difusa, atrofia das vilosidades, necrose e fusão de criptas, metaplasia escamosa e sincícios epiteliais. Alguns casos apresentaram características divergentes das apresentações clássicas, incluindo uma grande variação na cor das fezes (avermelhada e/ou amarelada, marrom-claro, marrom-alaranjada ou amarronzada), a participação dos adultos (4/24) e cães vacinados (12/24), um amplo envolvimento do intestino delgado (8/20), a presença de edema pulmonar (7/24) e convulsões (3/24). As fezes e fragmentos intestinais foram submetidos ao teste de PCR para o gene VP2 do CPV-2, e ao isolamento do vírus em cultura de células produziram resultados positivos em 100% e 58,3% (14/24) dos casos, respectivamente. O sequenciamento dos nucleótidos revelou uma alta identidade de nucleótidos na VP2 (99,4-100%) e uma mutação no aminoácido 426 (asparagina para ácido glutâmico), considerada uma assinatura de CPV-2c. Estes resultados confirmam o envolvimento do CPV-2c nos casos descritos e demonstra a importância da infecção pelo CPV-2c entre os cães do Brasil, chamando a atenção de veterinários para diagnosticar corretamente a doença, principalmente considerando-se as apresentações atípicas frequentes.(AU)

Epidemiological, clinical and pathological features of canine parvovirus 2c infection in dogs from southern Brazil / Aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos da infecção pelo parvovirus canino 2c em cães do Sul do Brasil

Canine parvovirus type 2c (CPV-2c) emerged in Europe in the early 2000's and rapidly spread out worldwide. Clinical and molecular data have demonstrated its circulation in Brazilian dogs, yet detailed descriptions of cases are still lacking. This article describes the epidemiological, clinical and pathological features of 24 cases of CPV-2c-associated disease in dogs submitted to veterinary clinics and laboratory diagnosis in southern Brazil (2014-2016). Most affected dogs presented signs/lesions suggestive of parvovirus enteritis: diarrhea, vomiting, hyperemia and hemorrhage of the serous membrane of the small intestine, diffuse segmental granulation, atrophy of the villi, necrosis and fusion of crypts, squamous metaplasia and epithelial syncytia. A number of cases presented features divergent from the classical presentations, including a wide variation in the color of feces (reddish and/or yellowish, light-brownish, orange-brown and brownish), involvement of adults (4/24) and vaccinated dogs (12/24), extensive involvement of the small intestine (8/20) and the presence of pulmonary edema (7/24) and convulsions (3/24). Feces and intestinal fragments submitted to PCR for the CPV-2 VP2 gene and to virus isolation in cell culture yielded positive results in 100% and 58.3% (14/24) of the cases, respectively. Nucleotide sequencing revealed a high nucleotide identity in VP2 (99.4 to 100%) and a consistent mutation at amino acid 426 (asparagine to glutamic acid), considered a signature of CPV-2c. These results confirm the involvement of CPV-2c in the described cases and demonstrate the importance of CPV-2c infection among Brazilian dogs, calling attention of veterinarians to correctly diagnose the disease, mainly considering the frequent atypical presentations.(AU)

O parvovírus canino tipo 2c (CPV-2c) surgiu na Europa no início do ano 2000 e rapidamente se espalhou pelas populações de cães ao redor do mundo. Dados clínicos e moleculares demonstraram a sua circulação em cães brasileiros, porém descrições detalhadas desses casos ainda são escassas. Este artigo descreve os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de 24 casos de doença gastroentérica associada com a infecção pelo CPV-2c em cães atendidos em clínicas veterinárias e submetidos ao diagnóstico laboratorial no Sul do Brasil (2014-2016). A maioria dos cães afetados apresentaram sinais e/ou lesões sugestivas de enterite por parvovírus: diarreia, vômitos, hiperemia e hemorragia na membrana serosa do intestino delgado, granulação segmentar difusa, atrofia das vilosidades, necrose e fusão de criptas, metaplasia escamosa e sincícios epiteliais. Alguns casos apresentaram características divergentes das apresentações clássicas, incluindo uma grande variação na cor das fezes (avermelhada e/ou amarelada, marrom-claro, marrom-alaranjada ou amarronzada), a participação dos adultos (4/24) e cães vacinados (12/24), um amplo envolvimento do intestino delgado (8/20), a presença de edema pulmonar (7/24) e convulsões (3/24). As fezes e fragmentos intestinais foram submetidos ao teste de PCR para o gene VP2 do CPV-2, e ao isolamento do vírus em cultura de células produziram resultados positivos em 100% e 58,3% (14/24) dos casos, respectivamente. O sequenciamento dos nucleótidos revelou uma alta identidade de nucleótidos na VP2 (99,4-100%) e uma mutação no aminoácido 426 (asparagina para ácido glutâmico), considerada uma assinatura de CPV-2c. Estes resultados confirmam o envolvimento do CPV-2c nos casos descritos e demonstra a importância da infecção pelo CPV-2c entre os cães do Brasil, chamando a atenção de veterinários para diagnosticar corretamente a doença, principalmente considerando-se as apresentações atípicas frequentes.(AU)

Identification of enteric viruses circulating in a dog population with low vaccine coverage

Although the use of vaccines has controlled enteric diseases in dogs in many developed countries, vaccine coverage is still under optimal situation in Brazil. There is a large population of nonimmunized dogs and few studies about the identification of the viruses associated with diarrhea. To address this situation, stool samples from 325 dogs were analyzed by polymerase chain reaction for the detection of common enteric viruses such as Canine adenovirus (CAdV), Canine coronavirus (CCoV), Canine distemper virus (CDV), Canine rotavirus (CRV) and Carnivorous protoparvovirus 1 (canine parvovirus 2; CPV-2). At least one of these species was detected in 56.6% (184/325) of the samples. The viruses detected most frequently in either diarrheic or nondiarrheic dog feces were CPV-2 (54.3% of the positive samples), CDV (45.1%) and CCoV (30.4%), followed by CRV (8.2%) and CAdV (4.9%). Only one agent was detected in the majority of the positive samples (63%), but co-infections were present in 37% of the positive samples and mainly included CDV and CPV-2. The data presented herein can improve the clinical knowledge in regions with low vaccine coverage and highlight the need to improve the methods used to control these infectious diseases in domestic dogs.(AU)

Lontra longicaudis infected with canine parvovirus and parasitized by Dioctophyma renale / Lontra longicaudis de vida livre infectada por parvovirus canino e parasitada por Dioctophyma renale

This study describes a case of parvovirus infection in a river otter (Lontra longicaudis) assisted at the Wildlife Rehabilitation Center and Wildlife Screening Center, Federal University of Pelotas (UFPel), Rio Grande do Sul state, Brazil. Clinical signs included apathy, dark and fetid diarrhea, and crusted lesions on the palmar pads of the fore and hind limbs. The animal died after undergoing support treatment with antibiotics, anti-inflammatory, and fluid therapy. At necropsy, the intestines were reddened and edematous and the right kidney was diminished by one third of its normal size and covered with whitish, spongy material. A female Dioctophyma renale was found free in the abdominal cavity. Histologically, dilatation of the intestinal crypts and fusion and blunting of the intestinal villi were observed. In addition, moderate, multifocal lymphocytic enteritis with lymphoid depletion in Peyer's patches and mesenteric lymph nodes were present. Immunohistochemistry with anti-canine parvovirus monoclonal antibody (anti-CPV) was strongly positive in the bone marrow cells and enterocytes of the intestinal crypts, confirming the diagnosis of parvovirus infection. The peritoneum on the right kidney was expanded with a cuboidal cell border, forming multiple papillary projections associated with eggs of D. renale and severe inflammatory infiltrate (giant cells, macrophages, lymphocytes, eosinophils, and plasma cells). Areas of necrosis and mineralization were also observed. Due to fragmentation and degradation of its natural habitat, the otter approached the urban area and was contaminated with the virus, which is hosted and disseminated by domestic animals. Infection with D. renale can be associated with the large population of parasitized domestic animals, which eliminate the helminth eggs through urine, contaminating the environment where the parasite intermediate and paratenic hosts co-inhabit. The diseases of these animals can be a decline factor of wild populations that inhabit the region and are an alert to spillover risk.(AU)

Descreve-se um caso de parvovirose em uma lontra (Lontra longicaudis) enviada ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre e Centro de Triagem de Animais Silvestres da Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. O animal estava debilitado, apático, apresentava diarreia escura e fétida e lesões crostosas nos coxins palmares dos membros torácicos e pélvicos, morrendo após tratamento de suporte com antibiótico, anti-inflamatório e fluidoterapia. Na necropsia os intestinos estavam edematosos e avermelhados e o rim direito estava recoberto de material brancacento e esponjoso, com comprometimento de cerca de um terço do órgão. Foi observado, também, um exemplar de Dioctophyma renale, fêmea, livre na cavidade abdominal. Histologicamente havia fusionamento das vilosidades, dilatação das criptas intestinais com enterite linfocítica moderada multifocal e depleção linfoide nos linfonodos mesentéricos. Na técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo monoclonal anti-Parvovírus canino (Anti-CPV) houve marcação positiva nos enterócitos da base das vilosidades intestinais e na medula óssea, confirmando o diagnóstico de parvovirose. O peritônio sobre o rim direito estava espessado e revestido por células cuboides, formando múltiplas projeções papilares, nas quais observava-se acentuado infiltrado de células gigantes, macrófagos, linfócitos, eosinófilos e plasmócitos. Entre as projeções papilares havia ovos de Dioctophyma renale, áreas de necrose, calcificação e células gigantes. Conclui-se que a lontra, em função da fragmentação e degradação de seu habitat natural, aproximou-se do centro urbano e contaminou-se com o vírus, o qual é mantido e disseminado por animais domésticos. Por sua vez, a infecção por D. renale pode estar relacionada com a presença de animais domésticos parasitados, os quais eliminam ovos do helminto através da urina contaminando o ambiente, onde coabitam hospedeiros intermediários e paratênicos do parasito. As doenças desses animais podem ser um fator de declínio das populações de animais silvestres e alerta para o risco de spill-over na região.(AU)

Lontra longicaudis infected with canine parvovirus and parasitized by Dioctophyma renale / Lontra longicaudis de vida livre infectada por parvovirus canino e parasitada por Dioctophyma renale

This study describes a case of parvovirus infection in a river otter (Lontra longicaudis) assisted at the Wildlife Rehabilitation Center and Wildlife Screening Center, Federal University of Pelotas (UFPel), Rio Grande do Sul state, Brazil. Clinical signs included apathy, dark and fetid diarrhea, and crusted lesions on the palmar pads of the fore and hind limbs. The animal died after undergoing support treatment with antibiotics, anti-inflammatory, and fluid therapy. At necropsy, the intestines were reddened and edematous and the right kidney was diminished by one third of its normal size and covered with whitish, spongy material. A female Dioctophyma renale was found free in the abdominal cavity. Histologically, dilatation of the intestinal crypts and fusion and blunting of the intestinal villi were observed. In addition, moderate, multifocal lymphocytic enteritis with lymphoid depletion in Peyer's patches and mesenteric lymph nodes were present. Immunohistochemistry with anti-canine parvovirus monoclonal antibody (anti-CPV) was strongly positive in the bone marrow cells and enterocytes of the intestinal crypts, confirming the diagnosis of parvovirus infection. The peritoneum on the right kidney was expanded with a cuboidal cell border, forming multiple papillary projections associated with eggs of D. renale and severe inflammatory infiltrate (giant cells, macrophages, lymphocytes, eosinophils, and plasma cells). Areas of necrosis and mineralization were also observed. Due to fragmentation and degradation of its natural habitat, the otter approached the urban area and was contaminated with the virus, which is hosted and disseminated by domestic animals. Infection with D. renale can be associated with the large population of parasitized domestic animals, which eliminate the helminth eggs through urine, contaminating the environment where the parasite intermediate and paratenic hosts co-inhabit. The diseases of these animals can be a decline factor of wild populations that inhabit the region and are an alert to spillover risk.(AU)

Descreve-se um caso de parvovirose em uma lontra (Lontra longicaudis) enviada ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre e Centro de Triagem de Animais Silvestres da Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. O animal estava debilitado, apático, apresentava diarreia escura e fétida e lesões crostosas nos coxins palmares dos membros torácicos e pélvicos, morrendo após tratamento de suporte com antibiótico, anti-inflamatório e fluidoterapia. Na necropsia os intestinos estavam edematosos e avermelhados e o rim direito estava recoberto de material brancacento e esponjoso, com comprometimento de cerca de um terço do órgão. Foi observado, também, um exemplar de Dioctophyma renale, fêmea, livre na cavidade abdominal. Histologicamente havia fusionamento das vilosidades, dilatação das criptas intestinais com enterite linfocítica moderada multifocal e depleção linfoide nos linfonodos mesentéricos. Na técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo monoclonal anti-Parvovírus canino (Anti-CPV) houve marcação positiva nos enterócitos da base das vilosidades intestinais e na medula óssea, confirmando o diagnóstico de parvovirose. O peritônio sobre o rim direito estava espessado e revestido por células cuboides, formando múltiplas projeções papilares, nas quais observava-se acentuado infiltrado de células gigantes, macrófagos, linfócitos, eosinófilos e plasmócitos. Entre as projeções papilares havia ovos de Dioctophyma renale, áreas de necrose, calcificação e células gigantes. Conclui-se que a lontra, em função da fragmentação e degradação de seu habitat natural, aproximou-se do centro urbano e contaminou-se com o vírus, o qual é mantido e disseminado por animais domésticos. Por sua vez, a infecção por D. renale pode estar relacionada com a presença de animais domésticos parasitados, os quais eliminam ovos do helminto através da urina contaminando o ambiente, onde coabitam hospedeiros intermediários e paratênicos do parasito. As doenças desses animais podem ser um fator de declínio das populações de animais silvestres e alerta para o risco de spill-over na região.(AU)

DISTRIBUIÇÃO DO PARVOVÍRUS CANINO NOS TECIDOS E CARACTERIZAÇÃO DO SUBTIPO CIRCULANTE EM MINAS GERAIS

O Parvovírus canino tipo 2 (CPV-2) é responsável por quadros de gastroenterite hemorrágica em cães e, mais raramente, de miocardite não supurativa em filhotes caninos. O diagnóstico em animais necropsiados é realizado principalmente pelas lesões intestinais, porém, quando há alterações pós-mortais ou lesões intestinais inespecíficas, a imuno-histoquímica (IHQ) tem sido utilizada para detectar o vírus em outros tecidos. Três variantes antigênicas do CPV-2; CPV-2a, CPV-2b e CPV- 2c foram identificadas em vários países por meio de testes moleculares, podendo estar associadas a diferentes quadros epidemiológicos e gravidade de lesões. Desta forma, o objetivo deste estudo é descrever a distribuição do Parvovírus canino nos tecidos por meio da marcação IHQ e caracterizar o(s) subtipo(s) circulante(s) em Minas Gerais por análises moleculares e sequenciamento. Dez cães com lesões macroscópicas sugestivas de parvovirose canina e cinco cães controles negativos foram necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Lavras no período de 2020-2021. Tecidos destes cães foram submetidos à análise histológica, imuno-histoquímica e molecular. Na necropsia as lesões mais frequentes foram serosa do intestino delgado hiperêmica e granular, mucosa avermelhada e enrugada, placas de Peyer evidentes, linfonodos mesentéricos e retrofaríngeos aumentados de tamanho e avermelhados. Microscopicamente as principais lesões foram necrose de criptas (9/10) e descamação das células epiteliais para a luz (8/10), atrofia e fusão das vilosidades intestinais (7/10), necrose e rarefação de celulas linfoides, sendo mais acentuadas em tonsilas palatinas (6/10) e linfonodos retrofarígeos (6/10). Os tecidos com maior positividade na IHQ para o CPV-2 foram língua (88,89%); tonsila, linfonodos retrofaríngeos (77,78), íleo (70%) e medula óssea (57,14%). Todos os dez cães foram positivos para CPV-2, na reação em cadeia pela polimerase (PCR). O sequenciamento revelou uma alta identidade de nucleotídeos na VP2 e uma mutação no aminoácido 426 (ácido aspártico), caracterizando a ocorrência do subtipo CPV-2b. Os controles negativos não tiveram marcação IHQ e foram negativos na PCR para CPV-2. Este estudo contribui para o melhor conhecimento da distribuição do Parvovírus canino nos tecidos, sendo língua, tonsila, linfonodo retrofaríngeo, íleo e medula óssea os tecidos que tiveram o maior número de imunomarcações, sendo, desta forma, indicados para o diagnóstico IHQ da parvovirose canina. Os resultados também demonstram que o subtipo CPV-2b circula na população canina de Minas Gerais.

The canine Parvovirus type 2 (CPV-2) is responsible for hemorrhagic gastroenteritis in dogs and, more rarely, non-suppurative myocarditis in puppies. The diagnosis in necropsied dogs is mainly made by intestinal lesions, but when there are intestinal post-mortem alterations or nonspecific lesions, immunohistochemistry (IHC) has been used to detect the virus in other tissues. Three antigenic variants of CPV-2; CPV-2a, CPV-2b and CPV-2c, have been identified in many countries by molecular testing and may be associated with different epidemiological pictures and severity of lesions. Thus, the aim of this study is to describe the distribution of canine parvovirus in tissues by IHC and to characterize the circulating strain(s) in Minas Gerais by molecular analysis and sequencing. Ten dogs with gross lesions suggestive of canine parvovirosis and five negative controls were necropsied at the Veterinary Pathology Sector of the Federal University of Lavras in the 2020-2021 period. Tissues from these dogs were submitted to histological, immunohistochemical, and molecular analysis. The most frequent gross lesions were hyperemic small intestinal serosa, reddish and rough mucosa, with evident Peyer's patches, increased and reddish retropharyngeal and mesenteric lymph nodes. Microscopically, atrophy and fusion of the intestinal villi (7/10), dilated crypts (5/10), necrosis (9/10), and desquamation of epithelial cells into the lumen (8/10) were visualized. Lymphoid necrosis and cellular rarefaction were more pronounced in tonsils (6/10) and retropharyngeal lymph nodes (6/10). The tissues more often positive on IHC for CPV-2 were tongue (88,89%); tonsil, retropharyngeal lymph nodes (77,78%); ileum (70%) and bone marrow (57,14%). All ten dogs were positive for CPV-2 in the polymerase chain reaction (PCR). Nucleotide sequencing reveaed a high nucleotide identity to VP2 and a consistent mutation at amino acid 426 (aspartic acid), characterizing the occurrence of the CPV-2b subtype. Negative controls were negative by IHC and PCR tests for CPV-2. This study contributed to a better knowledge of canine Parvovirus distribution in tissues, being tongue, tonsil, retropharyngeal lymph node, ileum and bone marrow the tissues with the highest frequency of immunolabeling, therefore for IHQ diagnosis of canine parvovirus infection. The results also demonstrate that the CPV-2b subtype circulates in the canine population of Minas Gerais.

Viral type characterization and clinical aspects of canine parvovirus in naturally infected dogs in São Paulo State, Brazil / Caracterização viral e aspectos clínicos de parvovirose em cães naturalmente infectados no Estado de São Paulo

Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70's new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.(AU)

Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.(AU)

Viral type characterization and clinical aspects of canine parvovirus in naturally infected dogs in São Paulo State, Brazil / Caracterização viral e aspectos clínicos de parvovirose em cães naturalmente infectados no Estado de São Paulo

Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70s new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.(AU)

Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.(AU)

Serological and molecular investigation of viral agents in freeliving jaguars of the Pantanal wetlands, state of Mato Grosso, Brazil / Investigação sorológica e molecular de agentes virais em onças-pintadas de vida livre no Pantanal de Mato Grosso, Brasil

This study investigates the exposure of free-living jaguars from two federal protected areas in the Pantanal of Mato Grosso, Brazil, to a variety viral agents. These viral agents, particularly causing zoonotic diseases, were analyzed using serological and molecular methods. None of the jaguars was positive by RT-PCR for the molecular detection of avian influenza and West Nile Fever (WNF). Only one animal was serologically positive for Eastern Equine Encephalitis (EEE) by virus neutralization test in VERO cell cultures, representing the first reported case of jaguar exposure to EEE virus. However, all the animals were negative for Western Equine Encephalitis (WEE) virus and Venezuelan Equine Encephalitis (VEE) virus. Eleven jaguars were tested by two tests for the detection of antibodies against rabies virus (Simplified Fluorescent Inhibition Microtest ­ SFIMT and Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test ­ RFFIT), resulting in five positive animals, two animals in each test and one in both serological tests. Furthermore, three out of 14 samples subjected to the neutralization test were positive for antibodies against canine distemper virus (CDV), and 15 out of 17 samples subjected to the hemagglutination-inhibition test (HI) were positive for antibodies against canine parvovirus (CPV). In view of the findings of this study, it is unlikely that the viruses examined here represent a threat to the jaguar populations in this region.(AU)

Este estudo investigou a exposição de onças-pintadas de vida livre a agentes virais selecionados em duas unidades de conservação federais no Pantanal de Mato Grosso, Brasil. Para a análise desses agentes virais, a maioria de caráter zoonótico, foram utilizados métodos sorológicos e moleculares. Nenhuma das onze onças-pintadas examinadas foi positiva na técnica de real-time RT-PCR para a detecção molecular dos agentes da Influenza aviária e Febre do Nilo Ocidental (WNF). Somente um animal foi positivo sorologicamente para a o vírus da Encefalite Equina do Leste (EEE) pela Microtécnica de vírus neutralização em culturas de células VERO, sendo este o primeiro relato da exposição de onças-pintadas. Todos os animais examinados s foram negativos para o vírus da Encefalite Equina do Oeste (WEE) e Venezuelana (VEE). Amostras de soro colhidas de 11 onças-pintadas foram submetidas a adois testes distintos para a detecção de anticorpos contra o vírus da raiva (Teste Rápido de Inibição de Foco de Fluorescência ­ RFFIT e Microteste Simplificado de Inibição da Fluorescência - SFIMT), resultando em cinco animais positivos, dos quase dois positivos para cada teste e um positivo quando submetido aos dois testes sorológicos. Além disso, três das 14 amostras submetidas a técnica de soroneutralização foram positivas para a pesquisa de anticorpos contra o vírus da cinomose (CDV) e 15 amostras positivas das 17 analisadas para a pesquisa de anticorpos contra o parvovírus canino (CPV) foram identificadas pela técnica de Inibição da Hemaglutinação (HI). De acordo com os resultados deste estudo, é pouco provável que os agentes virais aqui analisados representem ameaça à população de onçaspintadas nesta região.(AU)

Serological and molecular investigation of viral agents in free-living jaguars of the Pantanal wetlands, state of Mato Grosso, Brazil / Investigação sorológica e molecular de agentes virais em onças-pintadas de vida livre no Pantanal de Mato Grosso, Brasil

This study investigates the exposure of free-living jaguars from two federal protected areas in the Pantanal of Mato Grosso, Brazil, to a variety viral agents. These viral agents, particularly causing zoonotic diseases, were analyzed using serological and molecular methods. None of the jaguars was positive by RT-PCR for the molecular detection of avian influenza and West Nile Fever (WNF). Only one animal was serologically positive for Eastern Equine Encephalitis (EEE) by virus neutralization test in VERO cell cultures, representing the first reported case of jaguar exposure to EEE virus. However, all the animals were negative for Western Equine Encephalitis (WEE) virus and Venezuelan Equine Encephalitis (VEE) virus. Eleven jaguars were tested by two tests for the detection of antibodies against rabies virus (Simplified Fluorescent Inhibition Microtest SFIMT and Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test RFFIT), resulting in five positive animals, two animals in each test and one in both serological tests. Furthermore, three out of 14 samples subjected to the neutralization test were positive for antibodies against canine distemper virus (CDV), and 15 out of 17 samples subjected to the hemagglutination-inhibition test (HI) were positive for antibodies against canine parvovirus (CPV). In view of the findings of this study, it is unlikely that the viruses examined here represent a threat to the jaguar populations in this region.(AU)

Este estudo investigou a exposição de onças-pintadas de vida livre a agentes virais selecionados em duas unidades de conservação federais no Pantanal de Mato Grosso, Brasil. Para a análise desses agentes virais, a maioria de caráter zoonótico, foram utilizados métodos sorológicos e moleculares. Nenhuma das onze onças-pintadas examinadas foi positiva na técnica de real-time RT-PCR para a detecção molecular dos agentes da Influenza aviária e Febre do Nilo Ocidental (WNF). Somente um animal foi positivo sorologicamente para a o vírus da Encefalite Equina do Leste (EEE) pela Microtécnica de vírus neutralização em culturas de células VERO, sendo este o primeiro relato da exposição de onças-pintadas. Todos os animais examinados s foram negativos para o vírus da Encefalite Equina do Oeste (WEE) e Venezuelana (VEE). Amostras de soro colhidas de 11 onças-pintadas foram submetidas a adois testes distintos para a detecção de anticorpos contra o vírus da raiva (Teste Rápido de Inibição de Foco de Fluorescência RFFIT e Microteste Simplificado de Inibição da Fluorescência - SFIMT), resultando em cinco animais positivos, dos quase dois positivos para cada teste e um positivo quando submetido aos dois testes sorológicos. Além disso, três das 14 amostras submetidas a técnica de soroneutralização foram positivas para a pesquisa de anticorpos contra o vírus da cinomose (CDV) e 15 amostras positivas das 17 analisadas para a pesquisa de anticorpos contra o parvovírus canino (CPV) foram identificadas pela técnica de Inibição da Hemaglutinação (HI). De acordo com os resultados deste estudo, é pouco provável que os agentes virais aqui analisados representem ameaça à população de onças pintadas nesta região.(AU)

Análise molecular de Carnivore protoparvirus 1 proveniente de cepas vacinais e cepas selvagens de carnívoros domésticos

Causador da parvovirose canina, enfermidade altamente contagiosa e prevalente na população canina mundial, Canine parvovirus 2 (CPV-2) é uma das quatro cepas pertencentes à espécie Carnivore protoparvovirus 1. CPV-2 foi descrito pela primeira vez nos anos 70 e, desde então, mutações em resíduos de aminoácidos da principal proteína antigênica VP2, vêm sendo reportadas. Tais alterações resultaram no estabelecimento das variantes antigênicas CPV-2a, CPV-2b e CPV-2c. Recentemente, CPV-2-like, new CPV-2a e new CPV-2b vêm sendo relatadas. Uma vez que a taxa de mutações genéticas de CPV-2 é expressiva, e que alterações em resíduos de aminoácidos em VP2 geram variantes com diferentes propriedades biológicas e antigênicas associadas ao escape do vírus do sistema imunológico, não se pode descartar a hipótese de que as variantes não sejam geradoras de resposta imune cruzada entre si. Dessa maneira, se faz necessário estudos moleculares a fim de verificar possíveis discrepâncias genéticas entre cepas e variantes selvagens e vacinais de CPV-2. Portanto, este estudo teve como objetivo realizar a análise molecular de variantes do CPV-2 infectando carnívoros domésticos na Zona da Mata e Região Metropolitana de Minas Gerais e de cepas do CPV-2 presentes em sete marcas de vacinas comercializadas no Brasil. As amostras analisadas foram caracterizadas como CPV-2b (16/17) e CPV-2-like (1/17). Duas vacinas comerciais apresentaram diferenças notáveis frente as cepas obtidas neste trabalho, com alterações não sinônimas em resíduos de aminoácidos: Asp413Asn, Lys570Glu e Lys575Arg, em Vac7 e Tyr573Phe, em Vac3, sendo 575 e 573 posições pertencentes à regiões de epítopos.

Causative of canine parvovirosis, a highly contagious and prevalent disease in the canine population worldwide, Canine parvovirus 2 (CPV-2) is one of four strains belonging to the species Carnivore protoparvovirus 1. CPV-2 was first described in the 1970s and since then, mutations in amino acid residues of the main antigenic protein VP2 have been reported. Such alterations resulted in the establishment of the antigenic variants CPV-2a, CPV-2b and CPV-2c. Recently, CPV-2-like, new CPV-2a and new CPV-2b have been reported. CPV-2 possesses a high mutation rate, and changes in amino acid residues in VP2 generate variants with different biological and antigenic properties associated with virus escape from the immune system. Thus, the hypothesis that variants do not generate a cross-immune response may be investigated. Hence, molecular studies are needed to verify possible genetic discrepancies between CPV-2 from wild and vaccine strains. Therefore, this study aimed to perform the molecular analysis of CPV-2 variants infecting domestic carnivores in the Zona da Mata and Metropolitan Region of Minas Gerais and CPV-2 strains present in seven brands of vaccines marketed in Brazil. The analyzed samples were characterized as CPV-2b (16/17) and CPV-2-like (1/17). Two (2/7) commercial vaccines showed notable differences against the strains obtained in this study, with non-synonymous mutations in amino acid residues: Asp413asn, Lys570Glu, and Lys575Arg, in Vac7 and Tyr573Phe, in Vac3. Importantly, 575 and 573 positions belong to epitope regions.

EFEITO DO EXTRATO AQUOSO DE PRÓPOLIS MARROM SOBRE A PRODUÇÃO DE IFN- APÓS IMUNIZAÇÃO CONTRA PARVOVÍRUS CANINO (CPV) E CORONAVÍRUS CANINO (CCoV)

The purpose of this study was to evaluate the imunnostimulatory adjuvant capacity of water extract from brown propolis (WEBP) when added to a vaccine against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV), regarding the production of IFN-. Mice were vaccinated with CPV and CCoV (3.0 x 106 TCID50) with or without 400 µg/dose of WEBP. Thirty days after the third dose, splenocytes were cultured to measure the expression levels of IFN- mRNA in the immunized animals. Increased levels of IFN- mRNA expression for CCoV were evidenced by RT-PCR, in the splenocytes of mice inoculated with the vaccine containing 400 g/dose of WEBP, demonstrating the ability of propolis to stimulate cellular immune responses against the antigens of this virus. In contrast, the levels of IFN- to CPV were not influenced by the presence of WEBP.

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade adjuvante imunoestimulatória do extrato aquoso de própolis marrom (EAPM) quando associado a uma vacina contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV), com relação à produção de IFN-. Camundongos foram vacinados com CPV e CCoV (3,0x106 TCDI50) em associação ou não com 400 g/dose de EAPM. Trinta dias após a terceira dose foi realizado cultivo de esplenócitos para mensuração dos níveis de expressão de mRNA para IFN- nos animais imunizados. O aumento nos níveis de expressão de mRNA para IFN- para CCoV nos esplenócitos dos camundongos inoculados com a vacina contendo 400 g/dose de EAPM foi evidenciado por RT-PCR, demonstrando a capacidade da própolis em estimular a resposta imune celular contra os antígenos desse vírus. Ao contrário, os níveis de IFN- para CPV não sofreram influência da presença do EAPM.

CARACTERIZAÇÃO GENÉTICA DE Canis familiaris Papillomavirus EM CÃES DOMICILIADOS NA REGIÃO AMAZÔNICA BRASILEIRA

O papilomavírus canino (CPV) pertence à família Papillomaviridae, possui cerca de 55 a 60 nm de diâmetro, sem envelope lipoproteico, com formato icosaédrico. Seus vírions são compostos por um DNA de fita dupla circular, com aproximadamente 8000 pares de base. Atualmente foram identificados 23 tipos de CPV em todo o mundo. Ele acomete a espécie Canis lupus familiaris, normalmente acomete animais de todas as idades resultando, normalmente, no desenvolvimento de hiperplasias em tecido mucoso e cutâneo, com neoformações benignas ou malignas em seus hospedeiros naturais. O objetivo do presente estudo foi realizar a caracterização genética de Canis familiaris papillomavirus em lesões papilomatosas de cães domiciliados na região amazônica brasileira. Foram coletadas 28 amostras de papilomas de cães domiciliados nos municípios de Rio Branco Acre e Porto Velho Rondônia, e encaminhadas para a realização do exame histopatológico e PCR. As amostras positivas na PCR foram purificadas e sequenciadas. No exame histopatológico, quatro amostras apresentaram características sugestivas de papiloma escamoso. Na PCR, 11 amostras foram positivas para PV e o sequenciamento demonstrou identidade com o gênero Lambdapapillomavirus. Os resultados obtidos neste trabalho contribuem para futuros estudos epidemiológicos e sobre avariabilidade genética do CPV e mostra a importância de estudos em locais carentes de pesquisas e que podem abrigar tipos desconhecidos de CPV e sua prevalência.

The canine papillomavirus (CPV) belongs to the family Papillomaviridae, is about 55 to 60 nm in diameter, without a lipoprotein envelope, with an icosahedral shape. Their virions are composed of circular double-stranded DNA, with approximately 8000 base pairs. Currently, 23 types of CPV have been identified worldwide. It affects the species Canis lupus familiaris, usually affecting animals of all ages, resulting in the development of hyperplasias in mucous and skin tissue, with benign or malignant neoformations in their natural hosts. The objective of the present study was to carry out the genetic characterization of Canis familiaris papillomavirus in papillomatous lesions of dogs domiciled in the Brazilian Amazon region. 28 samples of papillomas from dogs domiciled in the municipalities of Rio Branco, Acre and Porto Velho, Rondônia were collected and sent for histopathological examination and PCR. PCR positive samples were purified and sequenced. On histopathological examination, four samples showed characteristics suggestive of squamous papilloma. In PCR, 11 samples were positive for PV and the sequencing demonstrated identity with the genus Lambdapapillomavirus. The results obtained in this work contribute to future epidemiological studies and on the genetic damage of CPV and show the importance of studies in places that lack research and that may harbor unknown types of CPV and its prevalence.