Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer

Abstract Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

Alterations in APC, BECN1, and TP53 gene expression levels in colon cancer cells caused by monosodium glutamate

Abstract Colorectal cancer (CRC) is a disease with high incidence worldwide. As of 2018, it is the second leading cause of cancer deaths in the world. In Saudi Arabia, the incidence of this disease has been increasing in the younger population. Both genetic and lifestyle factors may have contributed to its increased incidence and pathogenesis. Monosodium glutamate (MSG) is a food flavor enhancer that can be found in many commercial foods, and it can sometimes be used as a substitute to table salt. MSG has been investigated for its possible genotoxicity, yielding controversial results. In the present study, the effect of MSG on cell viability and its effect on expression of APC, BECN1, and TP53 genes in SW620 and SW480 colon cancer cell lines were studied. TP53 is a tumor suppressor gene that functions in modifying DNA errors and/or inducing apoptosis of damaged cells, and both APC and BECN1 genes are involved in CRC and are of importance in cellular growth and metastasis. Cancer cell viability was analyzed using MTT assay, and the results showed a significant increase in the number of viable cells after 24 h of treatment with MSG with different concentrations (0.5, 1.0, 10, 50, and 100mM). Moreover, gene expression results showed a significant increase in the expression levels of APC and BECN1 under specified conditions in both cell lines; conversely, TP53 showed a significant decrease in expression in SW620 cells. Thus, it can be concluded that MSG possibly confers a pro-proliferative effect on CRC cells.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é uma doença com alta incidência mundial. Desde 2018, é a segunda principal causa de mortes por câncer no mundo. Na Arábia Saudita, a incidência dessa doença vem aumentando na população mais jovem. Tanto fatores genéticos quanto de estilo de vida podem ter contribuído para o aumento da sua incidência e patogênese. O glutamato monossódico (MSG) é um intensificador de sabor de alimentos que pode ser encontrado em muitos alimentos comerciais e às vezes pode ser usado como um substituto do sal de cozinha. O MSG tem sido investigado por sua possível genotoxicidade, produzindo resultados controversos. Neste estudo, foram estudados o efeito do MSG na viabilidade celular e seu efeito na expressão dos genes APC, BECN1 e TP53 em linhas de células de câncer de cólon SW620 e SW480. TP53 é um gene supressor de tumor que atua modificando erros de DNA e/ou induzindo apoptose de células danificadas, estando os genes APC e BECN1 envolvidos no CRC e sendo importantes no crescimento celular e metástase. A viabilidade das células cancerosas foi analisada por meio do ensaio MTT, e os resultados mostraram um aumento significativo no número de células viáveis após 24 h de tratamento com MSG em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 10; 50 e 100mM). Além disso, os resultados da expressão gênica mostraram um aumento significativo nos níveis de expressão de APC e BECN1 sob condições especificadas em ambas as linhagens celulares. Por outro lado, TP53 mostrou uma diminuição significativa na expressão em células SW620. Assim, pode-se concluir que, possivelmente, o MSG confere um efeito pró-proliferativo às células CRC.

Alterations in APC, BECN1, and TP53 gene expression levels in colon cancer cells caused by monosodium glutamate / Alterações nos níveis de expressão gênica APC, BECN1 e TP53 em células de câncer de cólon causadas por glutamato monossódico

Colorectal cancer (CRC) is a disease with high incidence worldwide. As of 2018, it is the second leading cause of cancer deaths in the world. In Saudi Arabia, the incidence of this disease has been increasing in the younger population. Both genetic and lifestyle factors may have contributed to its increased incidence and pathogenesis. Monosodium glutamate (MSG) is a food flavor enhancer that can be found in many commercial foods, and it can sometimes be used as a substitute to table salt. MSG has been investigated for its possible genotoxicity, yielding controversial results. In the present study, the effect of MSG on cell viability and its effect on expression of APC, BECN1, and TP53 genes in SW620 and SW480 colon cancer cell lines were studied. TP53 is a tumor suppressor gene that functions in modifying DNA errors and/or inducing apoptosis of damaged cells, and both APC and BECN1 genes are involved in CRC and are of importance in cellular growth and metastasis. Cancer cell viability was analyzed using MTT assay, and the results showed a significant increase in the number of viable cells after 24h of treatment with MSG with different concentrations (0.5, 1.0, 10, 50, and 100mM). Moreover, gene expression results showed a significant increase in the expression levels of APC and BECN1 under specified conditions in both cell lines; conversely, TP53 showed a significant decrease in expression in SW620 cells. Thus, it can be concluded that MSG possibly confers a pro-proliferative effect on CRC cells.

O câncer colorretal (CCR) é uma doença com alta incidência mundial. Desde 2018, é a segunda principal causa de mortes por câncer no mundo. Na Arábia Saudita, a incidência dessa doença vem aumentando na população mais jovem. Tanto fatores genéticos quanto de estilo de vida podem ter contribuído para o aumento da sua incidência e patogênese. O glutamato monossódico (MSG) é um intensificador de sabor de alimentos que pode ser encontrado em muitos alimentos comerciais e às vezes pode ser usado como um substituto do sal de cozinha. O MSG tem sido investigado por sua possível genotoxicidade, produzindo resultados controversos. Neste estudo, foram estudados o efeito do MSG na viabilidade celular e seu efeito na expressão dos genes APC, BECN1 e TP53 em linhas de células de câncer de cólon SW620 e SW480. TP53 é um gene supressor de tumor que atua modificando erros de DNA e/ou induzindo apoptose de células danificadas, estando os genes APC e BECN1 envolvidos no CRC e sendo importantes no crescimento celular e metástase. A viabilidade das células cancerosas foi analisada por meio do ensaio MTT, e os resultados mostraram um aumento significativo no número de células viáveis após 24 h de tratamento com MSG em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 10; 50 e 100mM). Além disso, os resultados da expressão gênica mostraram um aumento significativo nos níveis de expressão de APC e BECN1 sob condições especificadas em ambas as linhagens celulares. Por outro lado, TP53 mostrou uma diminuição significativa na expressão em células SW620. Assim, pode-se concluir que, possivelmente, o MSG confere um efeito pró-proliferativo às células CRC.

Alterations in APC, BECN1, and TP53 gene expression levels in colon cancer cells caused by monosodium glutamate / Alterações nos níveis de expressão gênica APC, BECN1 e TP53 em células de câncer de cólon causadas por glutamato monossódico

Colorectal cancer (CRC) is a disease with high incidence worldwide. As of 2018, it is the second leading cause of cancer deaths in the world. In Saudi Arabia, the incidence of this disease has been increasing in the younger population. Both genetic and lifestyle factors may have contributed to its increased incidence and pathogenesis. Monosodium glutamate (MSG) is a food flavor enhancer that can be found in many commercial foods, and it can sometimes be used as a substitute to table salt. MSG has been investigated for its possible genotoxicity, yielding controversial results. In the present study, the effect of MSG on cell viability and its effect on expression of APC, BECN1, and TP53 genes in SW620 and SW480 colon cancer cell lines were studied. TP53 is a tumor suppressor gene that functions in modifying DNA errors and/or inducing apoptosis of damaged cells, and both APC and BECN1 genes are involved in CRC and are of importance in cellular growth and metastasis. Cancer cell viability was analyzed using MTT assay, and the results showed a significant increase in the number of viable cells after 24h of treatment with MSG with different concentrations (0.5, 1.0, 10, 50, and 100mM). Moreover, gene expression results showed a significant increase in the expression levels of APC and BECN1 under specified conditions in both cell lines; conversely, TP53 showed a significant decrease in expression in SW620 cells. Thus, it can be concluded that MSG possibly confers a pro-proliferative effect on CRC cells.(AU)

O câncer colorretal (CCR) é uma doença com alta incidência mundial. Desde 2018, é a segunda principal causa de mortes por câncer no mundo. Na Arábia Saudita, a incidência dessa doença vem aumentando na população mais jovem. Tanto fatores genéticos quanto de estilo de vida podem ter contribuído para o aumento da sua incidência e patogênese. O glutamato monossódico (MSG) é um intensificador de sabor de alimentos que pode ser encontrado em muitos alimentos comerciais e às vezes pode ser usado como um substituto do sal de cozinha. O MSG tem sido investigado por sua possível genotoxicidade, produzindo resultados controversos. Neste estudo, foram estudados o efeito do MSG na viabilidade celular e seu efeito na expressão dos genes APC, BECN1 e TP53 em linhas de células de câncer de cólon SW620 e SW480. TP53 é um gene supressor de tumor que atua modificando erros de DNA e/ou induzindo apoptose de células danificadas, estando os genes APC e BECN1 envolvidos no CRC e sendo importantes no crescimento celular e metástase. A viabilidade das células cancerosas foi analisada por meio do ensaio MTT, e os resultados mostraram um aumento significativo no número de células viáveis após 24 h de tratamento com MSG em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 10; 50 e 100mM). Além disso, os resultados da expressão gênica mostraram um aumento significativo nos níveis de expressão de APC e BECN1 sob condições especificadas em ambas as linhagens celulares. Por outro lado, TP53 mostrou uma diminuição significativa na expressão em células SW620. Assim, pode-se concluir que, possivelmente, o MSG confere um efeito pró-proliferativo às células CRC.(AU)

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Abstract Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.(AU)

O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.(AU)

Cincumol prevents malignant phenotype of colorectal cancer cell line HCT116 via inhibiting PI3K/AKT signaling in vitro

Purpose: Colorectal cancer (CRC) is a common human cancer along with higher incidence and mortality, and this study aimed to identify the effect of cincumol on CRC and its potential mechanisms. Methods: CRC cell line HCT116 was used as the material. Cell proliferation was evaluated by CCK-8 assay, and cell migration was detected by scratch test and Transwell assay. TUNEL staining assay was used to evaluate cell apoptosis. The expression of target genes was detected by qualitative real-time polymerase chain reaction and western blot assays. Results: Cincumol significantly reduced the proliferative and migratory rate and enhanced apoptotic rate of HCT116 cells. Meanwhile, the elevated levels of RBUsuh, Nicd and Tace was also observed in cincumol-treated HCT116 cells. Moreover, our findings revealed that additional cincumol inhibited the expression of p-PI3K and p-AKT, suggesting the inhibition of PI3K/AKT signaling might be involved in the protective role of cincumol on the malignant phenotypes of CRC cells in vitro. Conclusions: Cincumol inhibited the malignant phenotypes of CRC cells in vitro through inactivating PI3K/AKT signaling, suggesting that cincumol might be a potential anti-CRC agent.

Effects of anthropogenic disturbance in the survival of the sand lizard, Liolaemus occipitalis (Squamata: Liolaemidae) / Efeitos do distúrbio antropogênico na sobrevivência do lagarto da areia, Liolaemus occipitalis (Squamata: Liolaemidae)

Habitat fragmentation is one of the sources of the global threat to wildlife populations. During the last four decades, urban development in Brazil's southern coastline has seen considerable growth, fragmenting the habitat of the sand lizard Liolaemus occipitalis Boulenger, 1885, thus threatening it with extinction. In order to assess the influence of urban development on this species, we used tagging and recapture data to study two populations in Brazil's southern coastline, one in a conserved area rarely subjected to disturbance and the other in an area undergoing different kinds of anthropogenic disturbance. We explored the consequences of this change in the natural landscape by comparing estimates of survival and abundance with Robust Design Model, and the body condition of individuals in both populations with analysis of covariance and variance. Survival of individuals were lower in the disturbed population than in the conserved population. The abundance of this lizard species was similar between populations. The body condition of females was higher in the disturbed area than in the conserved area, while males were similar among populations, but longer (SVL). This study shows how anthropic impacts can affect a population of lizards and the importance of maintaining protected areas and their interconnection to preserve Liolaemus occipitalis.(AU)

A fragmentação do habitat é uma das fontes de ameaça global às populações de vida selvagem. Durante as últimas quatro décadas, o desenvolvimento urbano do litoral sul do Brasil teve um crescimento considerável, fragmentando o habitat da lagartixa-da-praia lagarto-da-areia Liolaemus occipitalis Boulenger, 1885, ameaçando-o de extinção. Para avaliar a influência do desenvolvimento urbano sobre esta espécie, usamos dados de marcação e recaptura para estudar duas populações, uma em uma área conservada raramente sujeita a perturbações, e a outra em uma área submetida a diferentes tipos de perturbações antrópicas. Exploramos as consequências dessa mudança na paisagem natural comparando estimativas de sobrevivência e abundância com Modelo Robusto de Pollock, e condição corporal dos indivíduos com análises de covariância e variância, em ambas as populações situadas no litoral sul do Brasil. A abundância da espécie foi semelhante nas duas áreas, mas a sobrevivência dos indivíduos foi menor na população perturbada do que na conservada. A condição corporal das fêmeas foi maior na área perturbada, enquanto que o CRC dos machos foi maior na área conservada. Este estudo mostra como impactos antrópicos podem afetar uma população de lagartos e a importância da manutenção de áreas protegidas e sua interconexão para a preservação de Liolaemus occipitalis.(AU)

Comparação de métodos de sexagem em filhotes de serpentes da espécie Python brongersmai / Comparing methods of sex identification in Python brongersmai snakelets

Com a ascensão de animais exóticos no mercado pet, observou-se a necessidade de maiores estudos nesta área. Este estudo teve como objetivo comparar diferentes métodos de sexagem em filhotes de serpentes da espécie Python brongersmai (Bloody Python), sendo utilizados 14 filhotes com aproximadamente 1 ano e 9 meses de vida, oriundos do Criadouro Comercial de Fauna Silvestre e Exótica ­ CCF, autorização de manejo N° 414064, localizado no município de Cornélio Procópio ­ PR. Foi utilizado a introdução da probe metálica de sexagem para contagem de escamas, mensurações do Comprimento Rostro-Cloacal (CRC), Comprimento Pós-Cloacal (CPC), Comprimento Total (CT); avaliação ultrassonográfica dos órgãos reprodutivos e perfil genético (DNA), indicando a fidedignidade de cada um. Observou-se uma eficácia de 100% na determinação do sexo através das amostras de DNA, enquanto a sexagem a partir da contagem de escamas via probe metálica e o dimorfismo sexual por mensurações corporais permitiram apenas uma classificação sexual prévia, sofrendo variações quando comparadas, mostrando-se como métodos inconclusivos. Já a ultrassonografia não foi eficaz para o processo de sexagem em serpentes filhotes de até aproximadamente 1 ano e 9 meses de idade da espécie Python brongersmai.(AU)

With the increment of exotic animal's trade in the pet business, the necessity of more studies in this area was observed. This study aimed at comparing different methods of sex identification in Python brongersmai snakelets (Bloody Python), using 14 baby snakes aged 1 year and 9 months approximately, from commercial breeding of wild and exotic fauna, situated in Cornélio Procópio ­ PR. Methods used were the probing technique introduction, measurement of snout-vent length, post-vent length, total length; ultrasound evaluation of reproductive organs and genetic profile exam (DNA samples), denoting the veracity of each one. A 100% efficacy was observed in the study of sexual determination through DNA samples, while the other methods were shown to be inconclusive, whilst the sexing scale count via the probing technique introduction and sexual dimorphism by bodily measurements permitted only a previous sexual classification, suffering variations when compared, showing to be inconclusive methods. The ultrasound evaluation was not efficient for the sexing process in snakelets aged approximately 1 year and 9 months in Python brongersmai.(AU)

Decision making process in simultaneous laparoscopic resection of colorectal cancer and liver metastases: review of literature

Purpose: The benefits of laparoscopic approaches to treat colorectal cancer (CRC) and colorectal liver metastases (CRLM) separately are well established. However, there is no consensus about the optimal timing to approach the primary tumor and CRLM, whether simultaneously or staged. The objective of this review with practical reports is to discuss technical aspects required for patient selection to perform simultaneous laparoscopic approaches for CRC and CRLM. Methods: Literature review of oncological factors associated with patient selection for surgical treatment of CRLM and the use of laparoscopy in those cases, and report of technical aspects for simultaneous CRC and CRLM approaches. Results: Simultaneous laparoscopic resection has been successful in many series of selected patients, although it seems to be safer to perform minor and major liver resection with non-extended colorectal resections, and to avoid two high-risk procedures at the same time. Conclusions: Simultaneous CRC and CRLM resections seem to be safe when patients are carefully selected, also considering the risk of recurrence concerning oncologic outcomes. The pre-planning of simultaneous resection is mandatory to plan trocar positioning, procedure sequencing, and patient position.(AU)

Avaliação termográfica do desenvolvimento mamário de búfalas e sua regulação endócrina em distintos estágios fisiológicos / Thermographic evaluation of the mammary development of buffaloes and their endocrine regulation in different physiological stages

O conhecimento do desenvolvimento mamário de um rebanho leiteiro é fundamental, pois relaciona-se à eficiência produtiva. Objetivou-se avaliar a associação dos parâmetros térmicos mamários com concentrações hormonais de búfalas em distintos estágios fisiológicos. Foram utilizadas 24 búfalas mestiças Murrah, em quatro grupos (n= 6): grupo 1 (bezerras), grupo 2 (novilhas), grupo 3 (gestantes) e grupo 4 (lactantes). A cada 28 dias, durante 4 meses, realizaram-se exames de termografia digital por infravermelho para verificar temperatura superficial dos corpos mamários craniais (CMCr) e caudais (CMC), das cisternas craniais (CGMCr) e caudais (CGMC) e tetas craniais (TGMCr) e caudais (TGMC). Foi aferida temperatura retal (TR) e colhido sangue para mensuração das concentrações plasmáticas do fator semelhante a insulina tipo-I, insulina (INS), hormônio do crescimento (GH), progesterona (P4) e estradiol. Grupos 1 e 2 apresentaram correlação de TR com CGMCr. No grupo 3, TR correlacionou-se com TGMCr, TGMC e concentrações plasmáticas de P4. No grupo 4, houve correlação de TR com CGMC, TGMCr e concentrações plasmáticas de INS e GH, e de TGMC com concentrações plasmáticas de GH. Nos quatro grupos, CGMCr correlacionou-se com CMCr e TGMCr, semelhantemente ao observado na porção caudal. Variações térmicas mamárias refletiram alterações fisiológicas aguardadas nos períodos avaliados.(AU)

The knowledge of the mammary development of a dairy herd is key, since it is related to its productive efficiency. The objective of this study was to evaluate the association of mammary thermal parameters with hormonal concentrations of buffaloes at different physiological stages. Twenty-four Murrah crossbred buffaloes were used in four groups (n= 6): group 1 (calves), group 2 (heifers), group 3 (pregnant animals) and group 4 (lactating animals). Every 28 days, for 4 months, infrared digital thermography was performed to check the surface temperature of cranial (CrCM) and caudal (CCM) corpus mammae, cranial (CrC) and caudal (CC) cisterns and cranial (CrT) and caudal teats (CT). Rectal temperature (RT) was measured and blood was collected to measure plasma concentrations of insulin-like factor I, insulin (INS), growth hormone (GH), progesterone (P4) and estradiol. Groups 1 and 2 presented correlation of RT with CrC. In group 3, RT correlated with CrT, CT and plasma P4 concentrations. In group 4, there was correlation of RT with CC, CrT and plasma concentrations of INS and GH, and CT with plasma GH concentrations. In all four groups, CrC correlated with CrCM and CrT, similar to that observed in the caudal portion. The thermal changes in the mammary glands reflected the expected physiological changes in the evaluated periods.(AU)

Avaliação termográfica do desenvolvimento mamário de búfalas e sua regulação endócrina em distintos estágios fisiológicos / Thermographic evaluation of the mammary development of buffaloes and their endocrine regulation in different physiological stages

O conhecimento do desenvolvimento mamário de um rebanho leiteiro é fundamental, pois relaciona-se à eficiência produtiva. Objetivou-se avaliar a associação dos parâmetros térmicos mamários com concentrações hormonais de búfalas em distintos estágios fisiológicos. Foram utilizadas 24 búfalas mestiças Murrah, em quatro grupos (n= 6): grupo 1 (bezerras), grupo 2 (novilhas), grupo 3 (gestantes) e grupo 4 (lactantes). A cada 28 dias, durante 4 meses, realizaram-se exames de termografia digital por infravermelho para verificar temperatura superficial dos corpos mamários craniais (CMCr) e caudais (CMC), das cisternas craniais (CGMCr) e caudais (CGMC) e tetas craniais (TGMCr) e caudais (TGMC). Foi aferida temperatura retal (TR) e colhido sangue para mensuração das concentrações plasmáticas do fator semelhante a insulina tipo-I, insulina (INS), hormônio do crescimento (GH), progesterona (P4) e estradiol. Grupos 1 e 2 apresentaram correlação de TR com CGMCr. No grupo 3, TR correlacionou-se com TGMCr, TGMC e concentrações plasmáticas de P4. No grupo 4, houve correlação de TR com CGMC, TGMCr e concentrações plasmáticas de INS e GH, e de TGMC com concentrações plasmáticas de GH. Nos quatro grupos, CGMCr correlacionou-se com CMCr e TGMCr, semelhantemente ao observado na porção caudal. Variações térmicas mamárias refletiram alterações fisiológicas aguardadas nos períodos avaliados.(AU)

The knowledge of the mammary development of a dairy herd is key, since it is related to its productive efficiency. The objective of this study was to evaluate the association of mammary thermal parameters with hormonal concentrations of buffaloes at different physiological stages. Twenty-four Murrah crossbred buffaloes were used in four groups (n= 6): group 1 (calves), group 2 (heifers), group 3 (pregnant animals) and group 4 (lactating animals). Every 28 days, for 4 months, infrared digital thermography was performed to check the surface temperature of cranial (CrCM) and caudal (CCM) corpus mammae, cranial (CrC) and caudal (CC) cisterns and cranial (CrT) and caudal teats (CT). Rectal temperature (RT) was measured and blood was collected to measure plasma concentrations of insulin-like factor I, insulin (INS), growth hormone (GH), progesterone (P4) and estradiol. Groups 1 and 2 presented correlation of RT with CrC. In group 3, RT correlated with CrT, CT and plasma P4 concentrations. In group 4, there was correlation of RT with CC, CrT and plasma concentrations of INS and GH, and CT with plasma GH concentrations. In all four groups, CrC correlated with CrCM and CrT, similar to that observed in the caudal portion. The thermal changes in the mammary glands reflected the expected physiological changes in the evaluated periods.(AU)

Serological under expression of microRNA-21, microRNA-34a and microRNA-126 in colorectal cancer

PURPOSE: This paper describes the ability of miRNA value predict oncological outcomes in CRC patients and correlates to clinical and pathologic variables. METHODS: We prospectively analyzed the serological expression of microRNA-21, microRNA-34a, and microRNA-126 in 37 stage II - IV CRC patients and correlate to seven fit counterparts. Serological microRNAs were extracted using the miRNeasy Mini Kit(r) (Qiagen, Hilden, Germany). Quantification of microRNAs was performed using TaqMan Master Mix(r) reagent (Applied Biosystems, USA). RESULTS: We obtained serological underexpression microRNA-21, microRNA-34a, and microRNA-126 in CRC group. However, miRNAs serological values do not impact prognosis. Furthermore, miRNAs was not influenced by CEA values, TNM staging, and histological subtype. CONCLUSION: Despite lower expression of miR-21, miR-34a and miR-126 in the CRC group, no association with poor prognosis was found.(AU)

Parasitos e ecotoxicologia de Leptodactylus macrosternum Miranda-Ribeiro, 1926 (Anura: Leptodactylidae) em áreas com diferenças de uso do solo no domínio morfoclimático das Caatingas: aspectos taxonômicos, ecológicos e histopatológicos

Este estudo objetivou conhecer os aspectos taxonômicos e ecológicos dos parasitos e a ecotoxicologia de Leptodactylus macrosternum no domínio morfoclimático das Caatingas, além de descrever os achados histopatológicos associados aos parasitos e/ou ao ambiente. Os animais eram provenientes de duas áreas agricultáveis (agricultura convencional e orgânica) e uma área pouco alterada de Caatinga stricto sensu, do município de Petrolina, Pernambuco. Após a captura, os animais foram pesados e mensurados o comprimento rostro-cloacal (CRC) e submetidos à coleta de ácaros e amostras de sangue para confecção de esfregaços sanguíneos para pesquisa de hemoparasitos, além de teste de micronúcleo e outras alterações nucleares. Em seguida, os animais foram eutanasiados para a coleta de helmintos e fragmentos de tecidos para histopatologia. Amostras de fígado e músculo foram submetidas à técnica de Espectrometria de Emissão Óptica por Plasma Acoplado Indutivamente (ICP OES) para quantificação dos minerais. No total, foram coletados 135 anuros fêmeas e machos, adultos e imaturos, cujo peso (massa corpórea) e CRC variaram de 1,6 a 94,2 g (58,1±18,1 g) e 26,8 a 99,1 mm (24,0±20,6 mm), respectivamente. A comunidade de parasitos de L. macrosternum esteve composta pelo ácaro Hannemania sp., seis morfotipos de hemoparasitos e 18 espécies de helmintos (12 espécies de helmintos em hospedeiros de área de agricultura convencional, 12 para Caatinga stricto sensu e 11 para agricultura orgânica). Dentre os helmintos, duas novas espécies de nematoides foram descritas. Do total de anuros coletados, 90,4% (122/135) estavam parasitados por pelo menos uma espécie de helminto, enquanto 78,5% (106/135) estavam infestados por Hannemania sp. Do total de 104 anuros que tiveram o sangue avaliado, 60% (62/104) estavam parasitados por pelo menos um morfotipo de hemoparasito. Nas três áreas de coleta, foram encontradas alterações citotóxicas (blebbed, notched, broto e binucleado) e genotóxicas (micronúcleo). Para o perfil mineral foram quantificados 11 elementos: Alumínio (Al), Cádmio (Cd), Cobalto (Co), Cromo (Cr), Cobre (Cu), Ferro (Fe), Manganês (Mn), Molibdênio (Mo), Níquel (Ni), Chumbo (Pb) e Zinco (Zn). Entre os minerais, Al, Fe e Zn foram os elementos encontrados em maior quantidade nos tecidos hepático e muscular. A área ocupada por melanomacrófagos hepáticos foi influenciada pelo peso (massa corpórea), CRC e índice hepatossomático. A comunidade de parasitos de L. macrosternum reflete sua posição na cadeia trófica e o consequente papel ecológico diversificado nos diferentes ciclos de vida de seus parasitos. Os resultados obtidos reforçam o papel dos anuros e seus parasitos como bioindicadores da qualidade do ambiente e a grande diversidade de espécies ainda oculta no domínio morfoclimático das Caatingas, com a descrição de duas espécies novas de parasitos, além da importância da implementação de medidas que visem a conservação tanto de L. macrosternum quanto deste domínio.

This study aimed to understand the taxonomic and ecological aspects of the parasites and the ecotoxicology of Leptodactylus macrosternum in the Caatinga biome, in addition to describing the histopathological findings associated with the parasites and/or the environment. The animals were collected in two arable areas (conventional and organic agriculture) and a little altered area of Caatinga stricto sensu, in the municipality of Petrolina, Pernambuco. After capture, the animals were weighed and snout-vent length (SVL) was measured, and mites and blood samples were collected to make blood smears for hemoparasites research and micronucleus test and other nuclear alterations. Then, the animals were euthanized to collect helminth and tissue fragments for histopathology. Liver and muscle samples were submitted to the Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry (ICP OES) technique for mineral quantification. In total, 135 adult and immature female and male frogs were collected, whose weight and SVL ranged from 1.6 to 94.2 g (58.1±18.1 g) and 26.8 to 99.1 mm (24 .0±20.6 mm), respectively. The L. macrosternum parasite community was composed of a mite Hannemania sp., six hemoparasites morphotypes and 18 helminth species (12 helminth species in conventional agricultural area hosts, 12 for Caatinga stricto sensu and 11 for agriculture organic). Among the helminth, two new species of nematodes were described. Of the total number of anurans collected, 90.4% (122/135) were parasitized by at least one species of helminth, while 78.5% (106/135) were infested by Hannemania sp. Of the total of 104 anurans that had their blood evaluated, 60% (62/104) were parasitized by at least one hemoparasite morphotype. In the three sampling areas, cytotoxic (blebbed, notched, bud and binucleate) and genotoxic (micronucleus) alterations were found. For the mineral profile, 11 elements were quantified: Aluminum (Al), Cadmium (Cd), Cobalt (Co), Chromium (Cr), Copper (Cu), Iron (Fe), Manganese (Mn), Molybdenum (Mo), Nickel (Ni), Lead (Pb) and Zinc (Zn). Among the minerals, Al, Fe and Zn were the elements found in greater quantity in liver and muscle. The melanomacrophage area was influenced by weight, SVLand hepatosomatic index. The L. macrosternum parasite community reflects its position in the food chain and the consequent diversified ecological role in the different life cycles of its parasites. The results obtained reinforce the role of anurans and their parasites as bioindicators of environmental quality and the great diversity of species still hidden in the morphoclimatic domain of the Caatingas with the description of two new species of parasites, in addition to the importance of implementing measures aimed at the conservation of both L. macrosternum and this domain.

REVEALING THE GENOTYPE X ENVIRONMENT INTERACTION EFFECT FOR SEXUAL PRECOCITY ON THE CLASSIFICATION OF YOUNG ZEBU BULLS

Em países de grande extensão territorial, a produção de bovinos de corte é realizada em ambientes diversos, com climas e sistemas de produção distintos. Nesta situação, a existência de interação genótipo x ambiente é esperada, especialmente para características reprodutivas, que sofrem maior influência ambiental, uma vez os filhos de determinados touros podem não ser os melhores em todos os ambientes, ou seu desempenho pode não ser superior em sistemas de criação diferentes dos quais foram selecionados. Porém, em geral, os programas de melhoramento genético não consideram o efeito da interação genótipo x ambiente, o que pode causar viés nas estimativas dos valores genéticos. Em bovinos, a característica mais utilizada como critério de seleção para precocidade sexual é o perímetro escrotal, por ser facilmente obtida e por estar correlacionada com características seminais nos machos e reprodutivas de fêmeas. Entretanto, o perímetro escrotal também está correlacionado com as características de crescimento. Assim, para que o perímetro escrotal reflita apenas precocidade sexual, é necessário ajustá-lo para as características de crescimento. Na literatura, os estudos que avaliaram o efeito da interação genótipo x ambiente para o perímetro escrotal não consideraram o ajuste para o crescimento, o que pode resultar em escolhas equivocadas quanto ao melhor touro para cada propriedade. Assim, o objetivo dessa tese de doutorado foi identificar o efeito da interação genótipo x ambiente sobre a classificação de touros jovens para perímetro escrotal ajustado para idade, peso, altura, e escores visuais de conformação, precocidade e musculatura, através da análise de normas de reação. Para isso, foram utilizados dados de rebanhos comerciais de bovinos Nelore pertencentes à base de dados do grupo Aliança Nelore. A caracterização do ambiente foi realizada pela padronização das soluções dos grupos contemporâneos, obtidas através do Modelo Animal, no qual o peso ao sobreano foi utilizado como variável dependente. Em seguida, as normas de reação foram determinadas através do Modelo de Regressão Aleatória linear, considerando-se as variâncias ambientais heterogêneas. Posteriormente, estimou-se a correlação genética entre o intercepto e o coeficiente de inclinação da curva de norma de reação e a correlação de Spearman entre a classificação dos touros quanto ao valor genético estimado para os ambientes extremos e médio. Observou-se aumento nas variâncias genéticas aditivas e ambientais para todos os perímetros escrotais ajustados conforme o ambiente tornou-se menos restritivo, exceto quando o ajuste do perímetro escrotal considerou o peso ao sobreano. O coeficiente de herdabilidade foi maior com a melhoria do gradiente ambiental para todas as características estudadas. A correlação de ranking mostrou mudança no posicionamento dos touros quando classificados pelo valor genético estimado, principalmente quando o ranqueamento em ambientes extremos foi comparado. Por essa razão, recomenda-se considerar o efeito da interação genótipo x ambiente nos modelos de avaliação genética de reprodutores, quando o critério de seleção for o perímetro escrotal ajustado para crescimento. Assim, a escolha dos reprodutores será mais assertiva. Durante o doutorado foi possível participar do Programa Doutorado Sanduíche no Exterior, da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), na Universidade de Queensland, na Austrália, e desenvolver o trabalho apresentado no último capítulo desta tese. O objetivo deste trabalho foi identificar o efeito da interação genótipo x ambiente sobre o perímetro escrotal medido aos 6 meses, 12 meses, 18 meses e 24 meses, utilizando as matrizes de parentesco baseadas no pedigree e em informações genômicas, em bovinos Brahman. Para tanto, foi utilizado o banco de dados de rebanhos experimentais pertencentes ao Cooperative Research Centre for Beef Genetic Technologies (Beef CRC). O ambiente foi caracterizado pela padronização das soluções dos grupos contemporâneos obtidos pela análise do Modelo Animal utilizando a matriz de relacionamento genômica, com o peso corporal, medido nas idades em que o perímetro escrotal foi avaliado, como variável dependente. Em seguida, as normas de reação foram determinadas através do Modelo de Regressão Aleatória utilizando a matriz de parentesco baseada apenas no pedigree ou a matriz de parentesco genômica. Posteriormente, foi estimada a correlação de Spearman entre a classificação dos touros quanto ao valor genético estimado para os ambientes extremos e o ambiente mediano, de forma a avaliar a existência ou não de mudança no ranqueamento dos animais. Com o aumento do gradiente ambiental, a variância ambiental para as medidas tomadas aos 12 meses e 18 meses diminuiu, enquanto que, para o perímetro escrotal mensurado aos 6 meses e 24 meses, houve aumento dessa estimativa. Já para a variância genética aditiva e para herdabilidade, conforme o ambiente se tornou mais favorável, tais estimativas aumentaram para as medidas avaliadas aos 12 meses e 18 meses e diminuíram para o perímetro escrotal tomados aos 6 meses e 24 meses. Entretanto, a alteração na variância dos valores genéticos estimados em ambientes extremos pelas normas de reação não foi suficiente para alterar significativamente o ranqueamento, conforme resultados próximos à unidade em todas as correlações de Spearman procedidas. Em relação às medidas de 12 meses e 18 meses, consideradas mais acuradas para identificar precocidade sexual em bovinos da raça Brahman devido à proximidade da idade à puberdade, a existência de interação genótipo x ambiente não foi observada. Para essas idades, não foi observado mudança no ranqueamento dos animais e a variação foi pouco significativa entre as estimativas dos valores genéticos dos touros nos ambientes extremos. Já para o perímetro escrotal medido aos 6 meses e 24 meses, é possível afirmar que existe interação genótipo x ambiente, devido à diferença entre os valores genéticos dos animais avaliados nos ambientes extremos.

In countries with a large territorial extension, beef cattle are raised in different environments, with distinct climates and production systems. In this situation, the existence of genotype x environment interaction is expected, especially for reproductive traits, which suffer greater environmental influence, since the offspring of certain bulls may not be the best in all environments, or their performance may not be superior in raising systems different from those in which they were selected. However, in general, breeding programs do not consider the effect of genotype x environment interaction, which may cause bias in the estimate of breeding values. In beef cattle, the most used trait as selection criterion for sexual precocity is the scrotal circumference, because it is easily obtained and it is correlated with seminal traits in males and reproductive traits in females. But the scrotal circumference is also correlated with growth traits. So, to scrotal circumference reflect only sexual precocity, the adjustment for such characteristics is necessary. Studies evaluating genotype x environment interaction effect for scrotal circumference seems to not consider these adjustments, which can lead to wrong choices of the most adequate sires for each property. Thus, the aim of this thesis was to identify the effect of the genotype x environment interaction on the classification of young bulls for scrotal circumference adjusted for age, weight, height, and the visual scores conformation, precocity and muscularity, through the analysis of reaction norms. Data from commercial Nellore cattle herds belonging to the Aliança Nelore group were used. The environment characterization was performed by standardizing the solutions of the contemporary groups, obtained through the Animal Model, where body weight was used as dependent variable. Then, the reaction norms were determined through a linear Random Regression Model, considering the heterogeneous environmental variances. After that, was estimated the genetic correlation between the intercept and the slope coefficient of the reaction norm curve and the Spearman correlation between the classification of bulls regarding the estimated genetic value for extreme and average environments. There was an increase in the additive and environmental genetic variances for all adjusted scrotal circumferences as the environment became less restrictive, except when the scrotal circumference was adjusted for body weight. The heritability coefficient was higher as the environmental gradient improved for all traits studied. The rank correlation showed a change in the positioning of bulls when ranked by the estimated genetic value, especially when comparing the ranking in extreme environments. For this reason, it is recommended to consider the effect of the genotype x environment interaction in the genetic evaluation of bulls, when the selection criterion is the scrotal circumference adjusted for growth. Thus, the choice of sires will be more assertive. During the doctorate, it was possible to participate in the Doctoral Exchange Program, of the Coordination for the Improvement of Higher Education Personnel (CAPES), at The University of Queensland, Australia, and develop the study presented in the last chapter of this thesis. The aim of this study was to identify the effect of the genotype x environment interaction on scrotal circumference measured at 6 months, 12 months, 18 months and 24 months, using pedigree-based and genomic-based kinship matrices in Brahman cattle. An experimental dataset belonging to the Cooperative Research Centre for Beef Genetic Technologies (Beef CRC) was used. The environment was characterized by standardizing the contemporary group solutions obtained by Animal Model analysis using the genomic relationship matrix, with weight measured at the evaluated ages as the dependent variable. Then, the reaction norms were determined through the Random Regression Model using the pedigree-based kinship matrix or the genomic kinship matrix. Subsequently, Spearman's correlation was estimated between the ranking of the bulls regarding the genetic value estimated for the extreme environments and the median environment in order to evaluate the existence or not of re-ranking of the animals. With the increase in the environmental gradient, the environmental variance for the measurements taken at 12 months and 18 months decreased, while for the scrotal circumference measured at 6 months and 24 months, there was an increase in this estimate. For the additive genetic variance and heritability, as the environment became more favorable, such estimates increased for the measures evaluated at 12 months and 18 months and decreased for the scrotal circumference taken at 6 months and 24 months. However, the change in variance of genetic values estimated in extreme environments by the reaction norms was not enough to significantly alter the ranking, according to results close to unity in all Spearmans correlations performed. Regarding the measurements at 12 months and 18 months, considered more accurate to identify sexual precocity in Brahman cattle due to the proximity of the age at puberty, the existence of genotype x environment interaction was not observed. For these ages, there was no change in the ranking of animals and the variation was not very significant between the estimates of genetic values of bulls in extreme environments. For the scrotal circumference measured at 6 months and 24 months, it is possible to state that there is a genotype x environment interaction, due to the difference between the genetic values of the animals evaluated in the extreme environments.

Avaliação seminalde Bothrops jararaca provenientes da natureza do Estado de São Paulo

O sucesso reprodutivo em animais de cativeiro por meio da eficiência de biotecnologias aplicadas é essencial nos programas de conservação. Assim, a coleta e a avaliação do sêmen são os principais passos para qualquer programa de reprodução assistida, pois permite a seleção dos melhores machos reprodutores, bem como a preservação do material genético. A Bothrops jararaca é uma serpente peçonhenta e seu veneno é utilizado para a produção de soro e investigações farmacológicas no Instituto Butantan. Assim, estudos que visam ao conhecimento das etapas da reprodução em cativeiro são essenciais para sua manutenção ex situ. Dessa forma, foram avaliados os parâmetros seminais do ciclo espermático de B. jararaca. O procedimento foi realizado em trinta (n=30) machos de Bothrops jararaca pertencentes ao biotério do Laboratório Especial de Ecologia e Evolução, no Instituto Butantan. A avaliação do sêmen e a coleta de dados biométricos foram realizadas trimestralmente para estabelecer parâmetros sazonais. Os animais foram avaliados ao longo de todas as estações do ano, no período de 2017 a 2019. Os machos amostrados apresentaram a média no comprimento rostro-cloacal (CRC) 77,65 ± 1,14 (cm) e 123,09 ± 20,04 (g) de massa. O sêmen de B. jararaca apresenta coloração esbranquiçada, consistência espessa. O volume médio obtido foi de 3,08±1,12(L), com médias de 57% para motilidade, 3,34 para vigor espermático e 1,01x109sptz/mL para concentração. Morfologicamente, o espermatozoide segue o padrão filiforme descrito em outros répteis escamados, com cabeça alongada e levemente curvada, além de apresentar patologias descritas para outras espécies. Os resultados indicaram que não houve relação significativa entre o CRC e a massa e os parâmetros seminais. Quanto a avaliação sazonal dos parâmetros seminais, o vigor espermático (p=0,03) e a concentração (p=0,01) tiveram uma variação significativa entre as estações climáticas e esses resultados são relevantes para a aplicação de biotecnologias para a reprodução e inseminação artificial, que podem ser replicados em outras espécies de serpentes.

Reproductive success in captive animals through the efficiency of applied biotechnologies is essential in conservation programs. Thus, semen collection and evaluation are the main steps for any assisted reproduction program, as it allows the selection of the best breeding males, as well as the preservation of genetic material. Bothrops jararaca is a venomous snake and its venom is used for the production of serum and pharmacological investigations at the Butantan Institute. Thus, studies aimed at understanding the stages of reproduction in captivity are essential for their ex situ maintenance. Thus, the seminal parameters of the B. jararaca sperm cycle were evaluated. The procedure was performed on thirty (n = 30) males of Bothrops jararaca belonging to the vivarium of the Special Laboratory of Ecology and Evolution, at the Butantan Institute. Semen evaluation and biometric data collection were performed quarterly to establish seasonal parameters in the period from 2017 to 2019. The males sampled showed the mean cloacal rostrum length (CRC) 77.65 ± 1.14 (cm) and 123.09 ± 20, 04 (g) of dough. The semen of B. jararaca has a whitish color, thick consistency. The average volume obtained was 3.08 ± 1.12 (L), with averages of 57% for motility, 3.34 for sperm vigor and 1.01x109sptz / mL for concentration, respectively. Morphologically, the sperm follows the filiform pattern described in other scaled reptiles, with an elongated and slightly curved head, in addition to presenting some pathologies described for other species. The results indicated that there was no significant variation between the CRC and the mass in relation to the seminal parameters, vivarium, but in the analysis of variance, applied to correlate the seminal parameters of Bothrops jararaca with its seasonality, the sperm vigor (p=0,01) and the concentration (p=0,03) had a significant variation during the climatic seasons and these results are relevant for the application of biotechnologies for reproduction and insemination artificial, which can be replicated in other species of snakes.

DENSIDADE DE ESTOCAGEM DE Pangasius hypophthalmus (Sauvage, 1878) CRIADO EM SISTEMA RACEWAY

O ajuste da densidade de estocagem para peixes com potencial para piscicultura, caracteriza o início das atividades de desenvolvimento de pacotes tecnológicos, que poderão auxiliar na criação de novas espécies. Objetivou-se avaliar o efeito da densidade de estocagem em sistema raceway sobre os parâmetros produtivos e fisiológicos do Pangasius hypophthalmus durante o período de engorda. Setecentos peixes com peso inicial de 527,91 ± 73,40g, foram distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, constituído de cinco tratamentos e quatro repetições. Os peixes foram alojados em 20 caixas de polietileno com volume de 500 litros de água, que corresponderam aos cinco tratamentos distintos de 30, 50, 70, 90 e 110 peixes/m3, representando quantidades de 15, 25, 35, 45 e 55 peixes por unidade experimental. A alimentação dos peixes foi realizada duas vezes ao dia, com ração comercial extrusada para onívoros, contendo 32% de proteína bruta (PB) e granulometria de 4 a 6 mm. O período experimental teve duração de 90 dias. O desempenho produtivo foi avaliado pelas variáveis de ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar e taxa de sobrevivência. A temperatura, oxigênio dissolvido, pH, nitrito, amônia total e não ionizada, foram as variáveis limnológicas avaliadas. Quanto aos rendimentos corporais e índices biométricos avaliou-se rendimento de filé, rendimento de peixe eviscerado, proporção de cabeça, índices hepatossomático e de gordura visceral, peso do bloco de vísceras, peso relativo do intestino e relação comprimento corporal/comprimento do intestino. A bioquímica sanguínea foi avaliada através das concentrações de glicose, cloreto, lactato, proteína total, colesterol total, triglicérides, HDL, LDL e VLDL. Foi realizado hemograma completo. Os dados foram submetidos à Análise de variância, teste de comparação entre médias e aplicação de modelos regressivos polinomiais ao nível de significância p < 0,05. As análises estatísticas foram feitas utilizando-se o programa computacional R. A conversão alimentar e taxa de sobrevivência não foram influenciadas pela densidade de criação. Efeito quadrático crescente foi obtido para peso final dos peixes (PF), enquanto as variáveis de desempenho para ganho de peso médio (GPM), consumo de ração por caixa/peixe (CRC/CRP), biomassa final (BF) e ganho de biomassa (GB) apresentaram efeito linear crescente. As variáveis limnológicas de temperatura (T °C), potencial hidrogeniônico (pH) e oxigênio dissolvido (OD), não foram alteradas pelo adensamento, ao contrário dos níveis de nitrito (NO2-), amônia total (NH4+ + NH3) e amônia não ionizada (NH3), que apresentaram efeito linear crescente por influência significativa da densidade de produção. O peso do bloco de vísceras (PBV) apresentou resultado significativo com efeito linear crescente em que o peso das vísceras, aumentou conforme houve aumento da densidade de estocagem. Não foram observados efeitos significativos das densidades sobre rendimentos corporais, perfil bioquímico sérico e hematologia. Conclui-se que para o cultivo do P. hypophthalmus em sistema intensivo e condições climáticas tropicais, densidades de estocagem acima de 87 peixes/m3, proporciona melhor desenvolvimento dos peixes no período de engorda de 90 dias.

The adjustment of stocking density for fish with potential for fish farming, characterizes the beginning of technological package development activities, which can help in the creation of new species. The objective of this study was to evaluate the effect of stocking density on the productive and physiological parameters of the Pangasius hypophthalmus during the production period. 700 fish with initial weight of 527.91 ± 73, 40g were distributed in a completely randomized design, consisting of five treatments and four replications. The fish were housed in 20 polyethylene boxes with a volume of 500 liters of water, which corresponded to the five treatments of 30, 50, 70, 90 and 110 fish/m3, representing 15, 25, 35, 45 and 55 fish per experimental unit. Feeding was performed twice a day, seven days a week, with commercial feed extruded to omnivorous, containing 32% of crude protein (CP) and granulometry of 4 to 6 mm. The experimental period lasted 90 days. The Growth performance was evaluated by the variables of body weight gain, feed intake, feed conversion ratio and survival rate. The temperature, dissolved oxygen, pH, nitrite, total and non-ionized ammonia were the limnological variables evaluated. As for carcass yields and biometric index, fillet yield, eviscerated fish yield, head proportion, hepatosomatic index and visceral fat index, weight of the block of viscera, relative weight of the intestine and relation body length/intestine length. Blood biochemistry was evaluated through the concentrations of glucose, chloride, lactate, total protein, total cholesterol, triglycerides, HDL, LDL and VLDL. Complete cell blood count was performed. The data were subjected to analysis of variance, test of comparison between means and application of regression models to the significance level of P< 0.05. Statistical analyses were performed using the computational program R. Feed conversion ratio and survival rate were not influenced by the rearing density. It was observed quadratic effect of stocking densitiy on fish final weight (FW) and linear effect on body weight gain (BWG), feed intake (FI), final biomass (FB) and biomass gain (BG). The limnological variables of temperature (T °C), hydrogenionic potential (pH) and dissolved oxygen (DO) were not affected by the stocking density, unlike nitrite (NO2-) levels, total ammonia (NH4+ + NH3) and non-ionized ammonia (NH3), which presented Increasing linear effect by influence of stocking density. The weight of the no edible compounds increased as the stocking density increased. The carcass yield, serum biochemical profile and hematology were not influenced by stocking density. It is concluded that for the cultivation of P. Hypophthalmus in intensive system and tropical climatic conditions, stocking densities above 87 fish/m3, provides better fish development in the fating period of 90 days.

Acetylcholine produces contraction mediated by cyclooxigenase pathway in arterial vessels in the marine fish (Isacia conceptionis) / Função vascular nas artérias do peixe marinos Isacia conceptionis

Preliminary studies showed that dorsal artery contraction mediated by acetylcholine (ACh) is blocked with indomethacin in intertidal fish (G. laevifrons). Our objective was to characterize the cholinergic pathway in several artery vessels of the I. conceptionis. Afferent and efferent branchial, dorsal and mesenteric arteries were dissected of 6 juvenile specimens, isometric tension studies were done using doses response curves (DRC) for Ach (10–13 to 10–3 M), and cholinergic pathways were obtained by blocking with atropine or indomethacin. CRC to ACh showed a pattern of high sensitivity only in efferente branchial artery and low sensibility in all vessels. Furthermore, these contractions were blocked in the presence of atropine and indomethacin in all vessels. Our results corroborate previous results observed in intertidal species that contraction induced by acetylcholine is mediated by receptors that activate a cyclooxygenase contraction pathway.(AU)

Estudos preliminares mostraram que a contração da artéria dorsal mediada por acetilcolina (ACh) é bloqueada com indometacina em peixes marinhos (G. laevifrons). Nosso objetivo foi caracterizar a via colinérgica em várias artérias de I. conceptionis. Artérias aferentes e eferentes branquiais, dorsais e mesentéricas foram dissecadas de 6 espécimes juvenis. Os estudos de tensão isométrica foram feitos utilizando-se a curva dose - resposta (CDR) para Ach (10–13 a 10–3M), e identificaram-se as vias colinérgicas, bloqueando com atropina e indometacina. CRC para ACh mostrou um padrão de alta sensibilidade na artéria eferentes branquiais e baixa sensibilidade em todos os vasos sanguineos. Essas contrações foram bloqueadas na presença de atropina e indometacina em todas as artérias avaliadas. Nossos resultados confirmam que a contração induzida por acetilcolina é mediada por receptores muscarínicos que ativam ciclo-oxigenase.(AU)

Reproductive biology of Ameerega trivittata (Anura: Dendrobatidae) in an area of terra firme forest in eastern Amazonia / Biologia reprodutiva de Ameerega trivittata (Anura: Dendrobatidae) em uma área de terra firme na Amazônia Oriental

The reproductive success of tropical amphibians is influenced by factors such as body size and the characteristics of breeding sites. Data on reproductive biology are important for the understanding of population dynamics and the maintenance of species. The objectives of the present study were to examine the abundance of Ameerega trivittata, analyze the use of microhabitats by calling males and the snout-vent length (SVL) of breeding males and females, the number of tadpoles carried by the males and mature oocytes in the females, as well as the relationship between the SVL of the female and both the number and mean size of the mature oocytes found in the ovaries. Three field trips were conducted between January and September, 2009. A total of 31 plots, with a mean area of 2.3 ha, were surveyed, resulting in records of 235 individuals, with a mean density of 3.26 individuals per hectare. Overall, 66.1% of the individuals sighted were located in the leaf litter, while 17.4% were perched on decaying tree trunks on the forest floor, 15.7% on the aerial roots of Cecropia trees, and 0.8% on lianas. Males were observed transporting a mean of 10.8 tadpoles on their backs. A significant correlation was found between the size of the females and the mean diameter of the oocytes. New data were collected on the size of oocytes and no pattern was found in the type of perches used by calling males of the different Ameerega species.

O sucesso reprodutivo das espécies de anfíbios tropicais sofre influência de fatores como local de reprodução e tamanho do corpo dos reprodutores. Informações sobre a biologia reprodutiva são importantes para entender a dinâmica populacional e a manutenção das espécies. Os objetivos deste estudo foram de verificar a abundância, o uso de microhabitat por machos, o comprimento rostro-cloacal (CRC) de machos e fêmeas em atividade reprodutiva, a quantidade de girinos transportados por machos e o número de oócitos maduros por fêmea, e relacionar o número de oócitos maduros e o tamanho médio dos oócitos maduros com o CRC da fêmea. Um total de 31 parcelas foi vistoriado, tamanho médio de 2,3 ha, e um registro de 235 indivíduos, média de 3,26 por hectare. Sessenta e seis por cento dos indivíduos avistados estavam na serapilheira, 17,4% sobre troncos em decomposição no chão da floresta, 15,7% sobre raízes aéreas de Cecropia sp. e 0,8% sobre cipó. Foram observados machos transportando girinos no dorso, a média de girinos transportados foi de 10,80 por macho. A quantidade média de oócitos maduros no ovário das fêmeas foi de 20,17. Houve correlação significativa entre o diâmetro médio dos oócitos e CRC. Neste estudo obtivemos dados novos relacionados ao tamanho médio de oócitos em fêmeas ativamente reprodutivas e observamos que o tipo de sítio de vocalização usado por machos varia entre as espécies do gênero Ameerega.