MELANOGÊNESE E SENSIBILIDADE DE CEPAS DO COMPLEXO DE ESPÉCIES Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii IN VITRO: UMA MODULACÃO COM INIBIDORES DA BOMBA DE PRÓTONS, CATECOLAMINAS E PARAQUAT

Cryptococcus spp. são agentes etiológicos da criptococose. Para estabelecer a infecção, essas leveduras expressam fatores de virulência como a melanina e o biofilme. Esta tese foi dividida em três objetivos: 1. Avaliar os efeitos dos inibidores da bomba de prótons (IBPs) sobre o crescimento e a produção de melanina de Cryptococcus spp.; 2. Investigar a produção de melanina pelo complexo de espécies C. neoformans/C. gattii na presença de diferentes precursores da melanogênese, avaliando o efeito da melanização na sensibilidade antifúngica; 3. Avaliar a atividade de paraquat (PQ) contra Cryptococcus spp. nas formas planctônica e biofilme, bem como o efeito protetor de agentes antioxidantes sobre essa atividade. Buscou-se avaliar ainda a cinética da produção de melanina diante o PQ. As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de IBPs foram determinadas por microdiluição. O efeito dos IBPs na produção de melanina foi avaliado na presença de sulfato de cobre ou glutationa. Foram utilizados como substratos para a melanogênese, a epinefrina, norepinefrina, dopamina, ácido cafeico e L-dopa, sendo em seguida avaliada a sensibilidade in vitro. A atividade da anfotericina B em cepas melanizadas foi investigada no ensaio de time kill. A sensibilidade ao PQ foi avaliada e, em seguida, as cepas expostas ao PQ foram cultivadas em meio com ou sem ácido ascórbico (AA) e glutationa (GSH). Ademais, a produção de melanina foi avaliada na presença de L-dopa + PQ. Os IBPs mostraram CIMs variando de 125-1000 g/mL e redução da melanização em células de Cryptococcus. O sulfato de cobre e a glutationa restauraram a melanogênese das cepas na presença de IBPs. Adicionalmente, a presença de IBPs diminuiu a toxicidade do sulfato de cobre (1 mM). As cepas produziram melanina, em escalas diferenciada, de acordo com o substrato testado. As células melanizadas foram mais tolerantes à anfotericina B. No tocante ao efeito do PQ, observou-se CIM variando de 8-256 g/mL e uma inibição na formação do biofilme. O efeito inibitório planctônico foi restaurado por AA e GSH. Além disso, L-dopa + PQ alterou a cinética da produção de melanina. Em conclusão, observou-se que IBPs inibem o crescimento planctônico e a melanogênese em Cryptococcus spp., sendo este último efeito dependente da quelação do cobre ou inibição do transporte de cobre ATPase. Ademais, os dados em conjunto, evidenciaram que a melanina contribui para a maior resiliência de Cryptococcus spp. a drogas antifúngicas, como a anfotericina B, e agentes agressores ambientais, como o paraquat.

Cryptococcus spp. are etiological agents of cryptococcosis. To establish infection, these yeasts produce virulence factors such as melanin and biofilm. This thesis was divided into three aims: 1. Evaluate the effects of proton pump inhibitors (PPIs) on growth and melanin production by Cryptococcus spp.; 2. Investigate the production of melanin by the C. neoformans/C. gattii species complex in the presence of different precursors of melanogenesis, evaluating the effect of melanization on antifungal susceptibility. 3. Evaluate the activity of paraquat (PQ) against Cryptococcus spp. in planktonic and biofilm forms, as well as the protective role of antioxidant agents against PQ. We also sought to evaluate the kinetics of melanin production in the presence of PQ. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of PPIs were determined by microdilution. The effect of PPIs on melanin production was evaluated in the presence of copper sulfate or glutathione. As substrates for melanogenesis, epinephrine, norepinephrine, dopamine, caffeic acid and L-dopa were used, then, in vitro susceptibility was evaluated. Amphotericin B activity against melanized strains was investigated by the time kill assay. The susceptibility to PQ was evaluated and the strains exposed to the PQ were cultivated in medium with or without ascorbic acid (AA) and glutathione (GSH). Furthermore, melanin production was evaluated in the presence of L-dopa + PQ. PPIs showed MICs ranging from 125-1000 g/mL and reduced melanization of Cryptococcus cells. Copper sulfate and glutathione restored the melanogenesis of the strains in the presence of PPIs. Additionally, the presence of PPIs decreased copper sulphate toxicity (1 mM). The strains produced melanin, at different levels, according to the tested substrate. Melanized cells were more tolerant to amphotericin B. Regarding the effect of PQ, MICs ranged from 8-256 g/mL and biofilm formation was inhibited. The inhibitory effect of PQ was hampered by AA and GSH. Furthermore, L-dopa + PQ altered the kinetics of melanin production. In conclusion, it was observed that PPIs inhibit planktonic growth and melanogenesis of Cryptococcus spp., with the latter being dependent on copper chelation or inhibition of copper ATPase transport. Furthermore, altogether, the data showed that melanin contributes to reduced susceptibility of Cryptococcus spp. to the antifungal drug amphotericin B, and the environmental aggressor paraquat.

Noradrenaline and dobutamine effects on the volume expansion with normal saline in rabbits subjected to hemorrhage

PURPOSE: To evaluate the effects of dobutamine (DB), noradrenaline (NA), and their combination (NADB), on volume retention in rabbits submitted to hemorrhage. METHODS: Thirty six rabbits were randomly divided into 6 groups: SHAM, Control, Saline, DB, NA, DB+NA. All the animals, except for SHAM, were subjected to hemorrhage of 25% of the calculated blood volume. Control animals were replaced with their own blood. The other groups received NSS 3 times the volume withdrawn. The intravascular retention, hematocrit, diuresis, central venous pressure, mean arterial pressure, NGAL, dry-to-wet lung weight ratio (DTWR) and the lung and kidney histology were analyzed. RESULTS: Replacement with NSS and NA, DB or NA+DB did not produce differences in the intravascular retention. After hemorrhage, the animals presented a significant decrease in the MAP and CVP, which were maintained until volume replacement. Regarding NGAL, dry-to-wet-lung-weight ratio, lung and kidney histology, there were no statistical differences between the groups. CONCLUSION: The use of noradrenaline, dobutamine or their combination did not increase the intravascular retention of volume after normal saline infusion.(AU)

Eletrocardiografia em onças-pardas (Puma concolor) anestesiadas com sevoflurano ou isoflurano / Electrocardiography in pumas (Puma concolor) anesthetized with sevoflurane or isoflurane

O objetivo deste trabalho foi descrever os achados eletrocardiográficos de 11 onças- pardas (Puma concolor). Os animais foram sedados com 0,15mg/kg de detomidina associado a 5mg/kg de cetamina e mantidos anestesiados com sevoflurano (GSEVO, n=6) ou isoflurano (GISO, n=5). A frequência cardíaca foi de 95 ± 13bpm. As alterações observadas nos animais no GSEVO foram: atrial standtill com condução ventricular, episódios isolados de contração ventricular prematura, bloqueio atrioventricular de primeiro grau, diminuição da amplitude do complexo QRS, onda S profunda e aumento da amplitude da onda T. No grupo GISO, observou-se bloqueio de ramo direito do feixe de His, bloqueio atrioventricular de primeiro grau e aumento da amplitude da onda T. Arritmias não puderam ser associadas ao uso dos anestésicos inalatórios devido à não sensibilização do miocárdio às catecolaminas. Achados como o BAV de primeiro grau pode ter ocorrido devido ao uso de agonistas alfa-2 adrenérgicos. Este estudo aumentou o conhecimento sobre as alterações eletrocardiográficas em onças-pardas anestesiadas, entretanto mais estudos são necessários para correlacionar estes achados ao uso de agentes anestésicos.(AU)

The aim of this study was to describe electrocardiographic findings in pumas (Puma concolor). The animals were sedated with 0.15mg/kg of detomidine plus 5mg/kg of ketamine and anesthetized with sevoflurane (GSEVO, n=6), or isoflurane (GISO, n=5). The heart rate was 95 ± 13bpm. The changes observed on GSEVO animals were: atrial standstill with ventricular conduction, isolated episodes of ventricular premature contraction, atrioventricular blockage of first degree, reduction of the amplitude of the QRS complexes, deep S wave, and increase of the amplitude of the T wave. In the GISO group a right bundle branch block of the His bundle, atrioventricular blockage of first degree and of the amplitude of the T wave. Arrhythmias couldn´t be related to the use of inhalant anesthesia due to the lack of myocardial awareness to catecholamines. Findings such as atrioventricular block in first degree may have occurred due to the use of alfa-2 adrenergic agonists. This study improved the knowledge about electrocardiographic alterations in anesthetized pumas, however further studies are required to correlate these findings to the use of anesthetic agents.(AU)

Eletrocardiografia em onças-pardas (Puma concolor) anestesiadas com sevoflurano ou isoflurano / Electrocardiography in pumas (puma concolor) anesthetized with sevoflurane or isoflurane

O objetivo deste trabalho foi descrever os achados eletrocardiográficos de 11 onças- pardas (Puma concolor). Os animais foram sedados com 0,15mg/kg de detomidina associado a 5mg/kg de cetamina e mantidos anestesiados com sevoflurano (GSEVO, n=6) ou isoflurano (GISO, n=5). A frequência cardíaca foi de 95 ± 13bpm. As alterações observadas nos animais no GSEVO foram: atrial standtill com condução ventricular, episódios isolados de contração ventricular prematura, bloqueio atrioventricular de primeiro grau, diminuição da amplitude do complexo QRS, onda S profunda e aumento da amplitude da onda T. No grupo GISO, observou-se bloqueio de ramo direito do feixe de His, bloqueio atrioventricular de primeiro grau e aumento da amplitude da onda T. Arritmias não puderam ser associadas ao uso dos anestésicos inalatórios devido à não sensibilização do miocárdio às catecolaminas. Achados como o BAV de primeiro grau pode ter ocorrido devido ao uso de agonistas alfa-2 adrenérgicos. Este estudo aumentou o conhecimento sobre as alterações eletrocardiográficas em onças-pardas anestesiadas, entretanto mais estudos são necessários para correlacionar estes achados ao uso de agentes anestésicos.(AU)

The aim of this study was to describe electrocardiographic findings in pumas (Puma concolor). The animals were sedated with 0.15mg/kg of detomidine plus 5mg/kg of ketamine and anesthetized with sevoflurane (GSEVO, n=6), or isoflurane (GISO, n=5). The heart rate was 95 ± 13bpm. The changes observed on GSEVO animals were: atrial standstill with ventricular conduction, isolated episodes of ventricular premature contraction, atrioventricular blockage of first degree, reduction of the amplitude of the QRS complexes, deep S wave, and increase of the amplitude of the T wave. In the GISO group a right bundle branch block of the His bundle, atrioventricular blockage of first degree and of the amplitude of the T wave. Arrhythmias couldn´t be related to the use of inhalant anesthesia due to the lack of myocardial awareness to catecholamines. Findings such as atrioventricular block in first degree may have occurred due to the use of alfa-2 adrenergic agonists. This study improved the knowledge about electrocardiographic alterations in anesthetized pumas, however further studies are required to correlate these findings to the use of anesthetic agents.(AU)

AVALIAÇÃO DO EFEITO DO PROPRANOLOL COMO BLOQUEADOR SIMPÁTICO EM CADELAS COM NEOPLASIAS MAMÁRIAS

O uso de betabloqueadores tem mostrado implicações significativas na terapia de neoplasias através do bloqueio de adrenoreceptores em tecidos tumorais. O sistema nervoso autônomo simpático apresenta um perfil pró-inflamatório e por estímulo das catecolaminas ocorre à ativação de macrófagos teciduais com liberação de citocinas inflamatórias. Estudos recentes sugerem que estímulos inflamatórios crônicos podem acelerar a progressão do câncer, fato este relacionado à ativação do sistema beta adrenérgico. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do emprego do propranolol sobre a evolução macroscópica dos nódulos mamários assim como a monitoração da função cardíaca. O estudo foi prospectivo, randomizado e longitudinal. Para tanto, 06 cadelas portadoras de tumores de mama (G1) receberam cloridrato de propranolol (0.2 mg/kg/BID, VO, 30 dias) e, outras 08 cadelas também com neoplasia mamária (G0) receberam apenas medicação placebo (BID, VO, 30 dias). Foram realizados exames ecocardiográfico, eletrocardiográficos convencional e Holter, paquimetria tumoral e exame histopatológico. A análise estatística foi baseada em um estudo experimental, cujos resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) com medidas repetidas no tempo e em seguida Teste de Tukey. O uso do fármaco mostrou segurança sobre os parâmetros cardíacos avaliados e controle sobre o crescimento tumoral quando comparado com o grupo placebo.

The use of beta-blockers has shown significant implications in the therapy of neoplasias through the blockade of adrenoreceptors in tumor tissues. The autonomic sympathetic nervous system presents a pro-inflammatory profile and by stimulating the catecholamines occurs to the activation of tissue macrophages with the release of inflammatory cytokines. Recent studies suggest that chronic inflammatory stimuli may accelerate the progression of cancer, a fact related to activation of the beta adrenergic system. Thus, the objective of the present study was to evaluate the influence of the use of propranolol on the macroscopic evolution of the mammary nodes as well as the monitoring of the cardiac function. The study was prospective, randomized, and longitudinal. For this, 06 bitches bearing breast tumors (G1) received propranolol hydrochloride (0.2 mg / kg / BID, VO, 30 days) and another 08 female mammary glanders (G0) received only placebo medication (BID, VO , 30 days). Echocardiographic, conventional electrocardiographic and Holter tests, tumor pachymetry and histopathological examination were performed. The statistical analysis was based on an experimental study, whose results were submitted to analysis of variance (ANOVA) with measures repeated in time and then Tukey's test. The use of the drug showed safety over the evaluated cardiac parameters and control over tumor growth when compared to the placebo group.

Effects of catecholamines on volemic replacement with saline solution and the impact on heart rate variability in rabbits subjected to hemorrhage. A study by spectral analysis

Twenty four rabbits subjected to hemorrhage (with a 25% loss of blood volume) and were randomly divided into four experimental groups: 1) HEMO Group underwent replacement with their own blood in an equal volume; 2) SS Group underwent replacement with saline solution (SS) in a volume that corresponded to three times the removed blood volume; 3) ISP Group underwent replacement with SS and isoprenaline; 4) FNL Group underwent replacement with SS and phenylephrine. Spectral Analysis of the heart rate and heart rate variability were performed from the recorded data. Hematocrit was measured throughout the experiment.RESULTS:Replacement with SS and an α- or β-agonist did not produce differences in the intravascular retention compared to replacement with SS alone. An analysis of HRV showed that the FNL group maintained the LF/HF ratio better than ISP and SS.CONCLUSIONS:No difference in vascular retention when α- or β- agonists were added to SS during post-hemorrhagic recovery. The animals in the FNL group maintained the integrity of the autonomic response within normal physiological standards during hemorrhagic stress.(AU)

Agonistas beta-adrenérgicos como aditivo para bovinos de corte / Beta-adrenergic agonists as additive in beef cattle

Os receptores de agonistas beta-adrenérgicos (β-AA) estão presentes em praticamente todos os tipos de células de mamíferos e são estimulados pelas catecolaminas (adrenalina e noradrenalina) produzidas pelo próprio organismo. Os agonistas β-AA são substâncias sintéticas com estrutura similar a estas aminas. Quando fornecidos na ração alteram a composição corporal dos animais, afetando a repartição dos nutrientes em favor da deposição proteica e diminuindo a lipogênese. Apesar dos mecanismos de ação não serem completamente entendidos, estes podem causar alterações morfofisiológicas, tais como o aumento do fluxo sanguíneo, a diminuição do nível plasmático de insulina, a diminuição da lipogênese e a hipertrofia muscular principalmente nas fibras do tipo II. Observam-se também alterações na motilidade do trato gastrointestinal e secreções, além da influência direta sobre as bactérias do rúmen, podendo alterar a digestibilidade da dieta. Os agonistas β-AA liberados em alguns países para utilização em bovinos de corte são o Cloridrato de Ractopamina e o Cloridrato de Zilpaterol. De acordo com dados de literatura, a inclusão destes aditivos na dieta de bovinos confinados tem sido relacionada com aumento na eficiência alimentar e ganho de peso diário, e igual ou menor consumo de ração. Nas características de carcaça tem sido observado aumento no peso das carcaças, e aumento da área de olho de lombo, porém com possibilidade de diminuição da espessura de gordura subcutânea e de marmoreio. Avaliações em painel sensorial da carne de animais consumindo agonistas β-AA mostraram diminuição na maciez, com igual ou menor suculência. Os agonistas β-AA melhoram o desempenho e as características de carcaça, porém mais estudos são necessários para comprovar se possuem influência negativa nas características organolépticas da carne.

The agonists receptor beta-adrenergic (β-AA) are present in virtually all types of mammalian cells and are stimulated by catecholamines (epinephrine and norepinephrine) produced by the organism itself. The β-AA agonists are synthetic substances with similar structure to these amines. When provided in the diet they alter the body composition of animals, affecting the distribution of nutrients toward to protein deposition, and decreasing lipogenesis. Although the mechanisms of action are not fully understood, these may cause morphological and physiological changes such as increased blood flow decrease in plasma insulin, decreased lipogenesis, and muscle hypertrophy mainly in type II fibers. We also observed changes in motility and secretions grastointestinal tract, beyond the direct influence on the rumen bacteria, altering the digestibility of the diet. The β-AA agonists released in some countries for use in beef cattle are ractopamine hydrochloride and zilpaterol hydrochloride. According to literature data, the inclusion of these additives in the diet of feedlot cattle has been associated with an increase in feed efficiency with the increase in daily weight gain and with equal or lower feed intake. Carcass characteristics improvement was verified in carcass weight, and increased loin eye area, but with the possibility to decrease the subcutaneous fat thickness and marbling. Reviews in sensory panel of meat from animals consuming β-AA agonists showed decreased tenderness and juiciness. Thus β-AA improve performance and carcass characteristics, but more studies are needed to confirm whether they have negative influence on the organoleptic characteristics of the meat.

Agonistas beta-adrenérgicos como aditivo para bovinos de corte / Beta-adrenergic agonists as additive in beef cattle

Os receptores de agonistas beta-adrenérgicos (β-AA) estão presentes em praticamente todos os tipos de células de mamíferos e são estimulados pelas catecolaminas (adrenalina e noradrenalina) produzidas pelo próprio organismo. Os agonistas β-AA são substâncias sintéticas com estrutura similar a estas aminas. Quando fornecidos na ração alteram a composição corporal dos animais, afetando a repartição dos nutrientes em favor da deposição proteica e diminuindo a lipogênese. Apesar dos mecanismos de ação não serem completamente entendidos, estes podem causar alterações morfofisiológicas, tais como o aumento do fluxo sanguíneo, a diminuição do nível plasmático de insulina, a diminuição da lipogênese e a hipertrofia muscular principalmente nas fibras do tipo II. Observam-se também alterações na motilidade do trato gastrointestinal e secreções, além da influência direta sobre as bactérias do rúmen, podendo alterar a digestibilidade da dieta. Os agonistas β-AA liberados em alguns países para utilização em bovinos de corte são o Cloridrato de Ractopamina e o Cloridrato de Zilpaterol. De acordo com dados de literatura, a inclusão destes aditivos na dieta de bovinos confinados tem sido relacionada com aumento na eficiência alimentar e ganho de peso diário, e igual ou menor consumo de ração. Nas características de carcaça tem sido observado aumento no peso das carcaças, e aumento da área de olho de lombo, porém com possibilidade de diminuição da espessura de gordura subcutânea e de marmoreio. Avaliações em painel sensorial da carne de animais consumindo agonistas β-AA mostraram diminuição na maciez, com igual ou menor suculência. Os agonistas β-AA melhoram o desempenho e as características de carcaça, porém mais estudos são necessários para comprovar se possuem influência negativa nas características organolépticas da carne.(AU)

The agonists receptor beta-adrenergic (β-AA) are present in virtually all types of mammalian cells and are stimulated by catecholamines (epinephrine and norepinephrine) produced by the organism itself. The β-AA agonists are synthetic substances with similar structure to these amines. When provided in the diet they alter the body composition of animals, affecting the distribution of nutrients toward to protein deposition, and decreasing lipogenesis. Although the mechanisms of action are not fully understood, these may cause morphological and physiological changes such as increased blood flow decrease in plasma insulin, decreased lipogenesis, and muscle hypertrophy mainly in type II fibers. We also observed changes in motility and secretions grastointestinal tract, beyond the direct influence on the rumen bacteria, altering the digestibility of the diet. The β-AA agonists released in some countries for use in beef cattle are ractopamine hydrochloride and zilpaterol hydrochloride. According to literature data, the inclusion of these additives in the diet of feedlot cattle has been associated with an increase in feed efficiency with the increase in daily weight gain and with equal or lower feed intake. Carcass characteristics improvement was verified in carcass weight, and increased loin eye area, but with the possibility to decrease the subcutaneous fat thickness and marbling. Reviews in sensory panel of meat from animals consuming β-AA agonists showed decreased tenderness and juiciness. Thus β-AA improve performance and carcass characteristics, but more studies are needed to confirm whether they have negative influence on the organoleptic characteristics of the meat.(AU)

Desempenho respiratório na transição feto-neonatal de cães nascidos em eutocia vaginal ou cesariana eletiva

Resumo: O sucesso da adaptação imediata para a vida extrauterina depende da apropriada função pulmonar. Em neonatologia humana, é estabelecido que a cesariana eletiva aumenta o risco de angústia respiratória, como resultado da reduzida remoção do fluido pulmonar. Neste contexto, este estudo objetivou avaliar a influência da condição obstétrica no desempenho respiratório dos recém-nascidos caninos no período de transição, em especial os fatores que determinam a remoção do fluido pulmonar. Para tal, foram selecionadas 20 fêmeas caninas e 37 neonatos, os quais constituíram dois grupos, de acordo com a condição obstétrica: Eutocia Vaginal (n=10 parturientes; n= 17 neonatos) e Cesariana Eletiva (n= 10 parturientes; n= 20 neonatos). A avaliação materna consistiu na dosagem sérica de cortisol e catecolaminas (adrenalina e noradrenalina) em momentos pontuais no pré, intra e pós-parto. Os neonatos foram avaliados por meio do escore de vitalidade neonatal, bem como avaliação das frequências cardíaca e respiratória, aferição da temperatura corpórea e peso corporal, avaliação hemogasométrica venosa, dosagem sérica de cortisol e catecolaminas, lactatemia, glicemia, oximetria de pulso e avaliação radiográfica pulmonar em momentos pontuais no decorrer das primeiras 24 horas de vida. Adicionalmente, foi avaliado a composição eletrolítica e a concentração de cortisol no líquido amniótico de cada filhote. O parto vaginal determinou menor estresse materno, porém, maior concentração de cortisol no líquido amniótico e soro sanguíneo dos filhotes, contribuindo para melhor adaptação cardiorrespiratória e metabólica. Por outro lado, a cesariana eletiva resultou em maior estresse materno, contrariamente ao perfil hormonal dos filhotes e retardou a remoção do fluido pulmonar, resultando em hipoxemia mais severa, além de dificultar a resposta compensatória ao desequilíbrio ácido-básico sanguíneo e termorregulação. Em conclusão, a condição obstétrica impõe diferenças na adaptação pulmonar, interferindo no desempenho respiratório de cães no período de transição feto-neonatal. cortisol, noradrenalina, periparto, aparelho respiratório, neonatologia

Abstract: The success of immediate adaptation to extrauterine life depends on appropriate lung function. In human neonatology, it is established that elective cesarean section increases the risk of respiratory distress as a result of reduced pulmonary fluid reabsortion. In this context, this study aimed to evaluate the influence of the obstetric condition on the respiratory performance of canine neonates in the transition period, specially the factors that determine the removal of the pulmonary fluid. For this purpose, 20 canine females and 37 neonates were selected, according to the obstetric condition: Vaginal Eutocia (n = 10 bitches, n = 17 neonates) and Elective Cesarian Section (n = 10 bitches, n = 20 neonates). Maternal evaluations were performed to evaluate serum cortisol and catecholamines (adrenaline and noradrenaline) levels at punctual moments in pre, intra and postpartum. Neonates were evaluated for the neonatal vitality score, as well as evaluation of heart and respiratory rates, body temperature and body weight, venous hemogasometric evaluation, serum cortisol and catecholamines, blood lactate, blood glucose, pulse oximetry and radiographic evaluation during the first 24 hours of life. Additionally, the electrolyte composition and cortisol concentration in the amniotic fluid of each puppy was evaluated. The vaginal delivery determined lower maternal stress, however, a higher cortisol concentration in the amniotic fluid and neonatal blood serum, contributing to a better cardiorespiratory and metabolic adaptation. On the other hand, elective cesarean section resulted in higher maternal stress contrary to the neonatal hormonal profile and delayed the removal of the pulmonary fluid, resulting in more severe hypoxemia, besides a less efficient compensatory response to acid-base imbalance and thermoregulation. In conclusion, the obstetric condition imposes differences in pulmonary adaptation, interfering in the respiratory performance of dogs in the transition from fetal to neonatal life. cortisol, noradrenaline, peripartum, respiratory system, neonatology.

Estresse social e imunidade de tilápia-do-Nilo Oreochromis niloticus

A intensificação da aquicultura expõe os peixes à diversas situações estressantes. O estresse compreende situações ameaçadoras à homeostase do organismo, que reage por meio do sistema nervoso central, promovendo a liberação de catecolaminas e cortisol com consequente aumento do aporte energético e cardiorespiratório, preparando o animal para enfrentar a situação. A cronicidade da condição de estresse tem impacto negativo no sistema imune de peixes, diminuindo sua capacidade de defesa e aumentando a susceptibilidade à doenças. Uma condição estressante comum nas pisciculturas é o estresse social, que pode causar alterações no comportamento, crescimento e na resistência à doenças. As interações sociais envolvem disputas dos indíviduos por um recurso limitado e de interesse comum, como alimento, parceiros ou local para reprodução. Neste tipo de interação, os animais brigam até estabelecerem uma hierarquia de dominância. Os estudos da influência das interações sociais na imunidade de peixes são escassos. Neste contexto, este estudo avaliou os efeitos do estresse social no sistema imune inato de machos de tilápia-do-Nilo, Oreochromis niloticus. Os indicadores avaliados foram: indicadores de estresse (glicose, cortisol e RBC), indicadores imunológicos (ARL, lisozima e complemento) e indicadores e comportamento (ataques e exibições). Os resultados mostraram aumento da atividade da lisozima nos animais dominantes em grupos heterogêneos desafiados com bactéria. Foram observadas redução do número de eritrócitos e da diminuição da atividade respiratória de leucócitos nos peixes subordinados.

Aquaculture intensification exposes fish to stressful situations. Stress includes situations threatening the animal homeostasis, which reacts through the central nervous system, releasing catecholamines and cortisol with a consequent increase in the energy and cardiorespiratory supply, preparing the animal to face the situation. The chronicity of the stress condition has a negative impact on the immune system of fish, decreasing its defense capacity and increasing the susceptibility to diseases. A common stressful condition in fish farms is social stress, which can cause changes in behavior, growth and resistance to disease. Social interactions involve disputes by individuals for a limited resource and common interest, such as food, partners or place for reproduction. In this type of interaction, animals fight until they establish a hierarchy of dominance. Studies of the influence of social interactions on fish immunity are scarce. In this context, this study evaluated the effects of social stress on the innate immune system of males of Nile tilapia, Oreochromis niloticus. The indicators evaluated were: indicators of stress (glucose, cortisol and RBC), immunological indicators (ARL, lysozyme and complement) and indicators and behavior (attacks and displays). The results showed increased lysozyme activity in dominant animals in heterogeneous groups challenged with bacteria. Reduced numbers of erythrocytes and decreased respiratory activity of leukocytes were observed in the subordinate fish.

Pancreatic islets isolated from 2 adrenergic receptor knockout mice show reduced insulin secretion in response to nutrients / Ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos com deleção do receptor adrenérgico 2 apresenta reduzida secreção de insulina em resposta a nutrientes

Activation of 2 adrenergic receptors by catecholamine or catecholamine-mimetic substances may enhance insulin secretion. We herein investigated KCl- and nutrient-stimulated insulin secretion in pancreatic islets isolated from 2 knockout (2KO) mice. 2KO mice showed reduced body weight, fasting hypoglycaemia associate to a similar fasting insulinemia compared to control. 2KO mice also showed reduced glucose tolerance despite the higher sensitivity to insulin. Glucose-induced insulin secretion was impaired in pancreatic islets isolated from 2KO mice. Leucine-induced (20mM) insulin secretion was diminished in pancreatic islets isolated from 2KO mice when compared to control one. The depolarizing effect of KCl on insulin secretion was also impaired in pancreatic islets from 2KO mice. These results suggested a possible role of 2 adrenergic receptors on nutrient-induced insulin secretion.(AU)

A ativação dos receptores 2-adrenérgicos por catecolaminas ou miméticos a catecolaminas podem aumentar a secreção de insulina. Nós investigamos a secreção de insulina estimulada por nutrients e KCl em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos com deleção dos receptores 2-adrenérgicos (2KO). Camudongos 2KO apresentaram reduzido peso corporal, hipoglicemia de jejum associada a semelhante concentração de insulina plasmática de jejum comparada ao grupo controle. Camundongos 2KO apesar de apresentarem aumento da sensibilidade a insulina também apresentaram reduzida tolerância a glicose. A secreção de insulina induzida com glicose foi alterada em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos 2KO. Secreção de insulina induzida por leucina (20mM) foi diminuída em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos 2KO quando comparado ao controle. O efeito despolarizante do KCl sobre a secreção de insulina também foi alterado em ilhotas pancreáticas de camundongos 2KO. Estes resultados sugerem um possível papel dos receptores 2- adrenérgicos na secreção de insulina induzida por nutrientes.(AU)

Feocromocitoma maligno em cão: relato de caso / Malignant pheochromocytoma in a dog: case report / Feocromocitoma maligno en perro: relato de caso

O feocromocitoma é um tumor secretor de catecolaminas de difícil diagnóstico, pois as manifestações clínicas nem sempre estão presentes, já que a secreção de epinefrina e norepinefrina ocorre de maneira episódica. O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um cão maltês macho, de nove anos de idade, assintomático, que apresentava uma massa adrenal identificada ao acaso durante um exame ultrassonográfico. Foi indicado o tratamento cirúrgico, que no entanto não foi realizado inicialmente. Após oito meses, o animal apresentou trombo neoplásico em veia cava caudal, sendo submetido a adrenalectomia e trombectomia. A análise histopatológica revelou um feocromocitoma maligno e trombo neoplásico. Ressaltase aqui a importância do diagnóstico e do tratamento cirúrgico dos tumores adrenais, mesmo quando identificados ao acaso em animais assintomáticos. Atualmente, cinco anos após o tratamento cirúrgico, o paciente encontra-se estável, saudável e sem recidiva ou evidências de metástase do tumor.

Pheochromocytoma is a catecholamine secreting tumor that may be difficull to diagnose because clinical signs are not always present due to the episodic secretion of epinephrine and norepinephrine. We report a case of pheochromocytoma in an asymptomatic 9-year-old intact male maltese, The adrenal mass was an incidental finding during an abdominal ultrasonographic exam. Surgical treatment was declined by the owner. Eight months laler the animal was presented with neoplastic thrombus in the caudal vena cava, and was submitted to adrenalectomy with venotomy and thrombectomy. The histopathological exam confirmed the diagnosis malignant pheochromocytoma and neoplastic thrombus. The importance of diagnosis and surgical treatment of adrenal tumors, including cases of incidental finding in asymptomatic animais is emphasized here. Currently, five years after surgery, the dog is stable, healthy and without recurrence or evidences of tumor metastasis.

El feocromocitoma es un tumor secretor de catecolaminas de difícil diagnóstico debido a que pocas veces presenta signos clínicos, dado que la secreción de epinefrina y norepinefrina no son constantes. El objetivo de este trabajo fue relatar el caso de un perro Maltés macho de nueve años, asintomático, que presentaba una masa adrenal encontrada casualmente durante un examen ecográfico. Se indicó el tratamiento quirúrgico, pero no fue realizado en forma inmediata. Ocho meses después, el paciente presentó un trombo neoplásico en vena cava caudal, por lo que se realizó una adrenalectomía y trombectomía. En el examen histopatológico fue diagnosticado un feocromocitoma maligno y presencia de trombo neoplásico. Destacamos la importancia del diagnóstico y del tratamiento quirúrgico de los tumores adrenales, aún cuando se los identifica en forma casual en animales asintomáticos. Actualmente, cinco años después de la cirugía, el paciente se encuentra estable, sin alteraciones clínicas ni evidencias de metástasis del tumor.

Feocromocitoma maligno em cão: relato de caso / Malignant pheochromocytoma in a dog: case report / Feocromocitoma maligno en perro: relato de caso

O feocromocitoma é um tumor secretor de catecolaminas de difícil diagnóstico, pois as manifestações clínicas nem sempre estão presentes, já que a secreção de epinefrina e norepinefrina ocorre de maneira episódica. O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um cão maltês macho, de nove anos de idade, assintomático, que apresentava uma massa adrenal identificada ao acaso durante um exame ultrassonográfico. Foi indicado o tratamento cirúrgico, que no entanto não foi realizado inicialmente. Após oito meses, o animal apresentou trombo neoplásico em veia cava caudal, sendo submetido a adrenalectomia e trombectomia. A análise histopatológica revelou um feocromocitoma maligno e trombo neoplásico. Ressaltase aqui a importância do diagnóstico e do tratamento cirúrgico dos tumores adrenais, mesmo quando identificados ao acaso em animais assintomáticos. Atualmente, cinco anos após o tratamento cirúrgico, o paciente encontra-se estável, saudável e sem recidiva ou evidências de metástase do tumor.(AU)

Pheochromocytoma is a catecholamine secreting tumor that may be difficull to diagnose because clinical signs are not always present due to the episodic secretion of epinephrine and norepinephrine. We report a case of pheochromocytoma in an asymptomatic 9-year-old intact male maltese, The adrenal mass was an incidental finding during an abdominal ultrasonographic exam. Surgical treatment was declined by the owner. Eight months laler the animal was presented with neoplastic thrombus in the caudal vena cava, and was submitted to adrenalectomy with venotomy and thrombectomy. The histopathological exam confirmed the diagnosis malignant pheochromocytoma and neoplastic thrombus. The importance of diagnosis and surgical treatment of adrenal tumors, including cases of incidental finding in asymptomatic animais is emphasized here. Currently, five years after surgery, the dog is stable, healthy and without recurrence or evidences of tumor metastasis.(AU)

El feocromocitoma es un tumor secretor de catecolaminas de difícil diagnóstico debido a que pocas veces presenta signos clínicos, dado que la secreción de epinefrina y norepinefrina no son constantes. El objetivo de este trabajo fue relatar el caso de un perro Maltés macho de nueve años, asintomático, que presentaba una masa adrenal encontrada casualmente durante un examen ecográfico. Se indicó el tratamiento quirúrgico, pero no fue realizado en forma inmediata. Ocho meses después, el paciente presentó un trombo neoplásico en vena cava caudal, por lo que se realizó una adrenalectomía y trombectomía. En el examen histopatológico fue diagnosticado un feocromocitoma maligno y presencia de trombo neoplásico. Destacamos la importancia del diagnóstico y del tratamiento quirúrgico de los tumores adrenales, aún cuando se los identifica en forma casual en animales asintomáticos. Actualmente, cinco años después de la cirugía, el paciente se encuentra estable, sin alteraciones clínicas ni evidencias de metástasis del tumor.(AU)

NOREPINEFRINA, DOPAMINA OU DOBUTAMINA EM CÃES SUBMETIDOS A HIPOTENSÃO

RONCHI, S.J. Norepinefrina, dopamina ou dobutamina em cães submetidos a hipotensão. 2018, 65p. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Lages, 2018. A hipotensão arterial é uma das principais intercorrências trans-operatórias, podendo ser a causa de diversas complicações pós-operatórias. Objetivou-se avaliar os efeitos hemodinâmicos, metabólicos e hemogasométricos da dopamina, dobutamina ou norepinefrina em dose baixa, média ou alta, para reestabelecer a pressão arterial em cães hipotensos. Utilizaram-se 18 cães, machos provenientes da rotina hospitalar. No dia do estudo os animais receberam pela via intramuscular acepromazina (0,03 mg/kg) e morfina (0,4 mg/kg). Em seguida foram induzidos com propofol (4 mg/kg), intubados e conectados ao sistema circular valvular, sendo FiO2 ajustada para 40% e o isoflurano para 1 CAM, avaliando-se após 10 minutos o MABASL. A hipotensão foi induzida com o aumento da vaporização do isoflurano, (PAM 50 mmHg) e avaliado o momento HIPO. Neste momento foram alocados aleatoriamente em 3 grupos distintos, com as respectivas doses iniciais: GNOR (norepinefrina 0,05 g/kg/min); GDOP(dopamina 2,5g/kg/min) e GDOB (dobutamina 2,5g/kg/min). Após 15 minutos do início das infusões, era avaliado o momento BAIXA, com isto as doses eram aumentadas em 100% ao momento anterior, avaliando a dose MÉDIA e subsequente aumentava-se 100% a dose caracterizando o momento ALTA. A FC foi maior em todas as doses no GDOB em relação ao seu basal, sendo maior também quando comparada ao GNOR e GDOP nas doses médias e altas. A PAM foi menor nos momentos das doses baixas, médias e altas do GDOP e GDOB quando comparado ao seu basal. No GNOR ela foi 15% menor somente no momento da dose baixa. O IC no GDOB foi maior em 77%, 185% e 243% nos momentos da dose baixa, média e alta, respectivamente, quando comparado ao momento basal. Além disto, o IC foi maior no GDOB quando comparado aos demais em todos os momentos após o inicio do tratamento. O IS foi maior em todos os momentos do GDOB quando comparado ao seu basal, sendo maior no GDOB em relação ao GDOP no momento da dose baixa e média. O DO2 foi maior em todos os momentos do GDOB quando comparado ao seu basal, assim como quando comparado entre os demais grupos. O IRVS foi menor no GDOB em relação ao seu basal em todos os momentos assim como entre os demais grupos. Concluimos que o único fármaco capaz de restabelecer a PAM foi a norepinefrina em doses médias e altas.

RONCHI, S.J. Norepinefrine, dopamine or dobutamine in dogs submitted to hypotension. 2018, 65p. Dissertation (Master in Animal Science) - University of the State of Santa Catarina. Graduate Program in Animal Science, Lages, 2018. Hypotension is one of the main trans-operative complications and may be the cause of several postoperative complications. The aim of this study was to evaluate the hemodynamic, metabolic and hemogasometric effects of dopamine, dobutamine or norepinephrine at low, medium or high doses to restore blood pressure in hypotensive dogs. We used 18 dogs, males from the hospital routine. On the day of the study, the animals received acepromazine (0.03 mg / kg) and morphine (0.4 mg / kg) intramuscularly. Then, they were induced with propofol (4 mg / kg), intubated and connected to the circular valvular system, with FiO2 adjusted to 40% and isoflurane to 1 MAC, and the MABASL was evaluated after 10 minutes. Hypotension was induced with increased vaporization of isoflurane (PAM 50 mmHg) and the HIPO momentum was evaluated. At this time they were randomly assigned to 3 different groups, with the respective initial doses: GNOR (norepinephrine 0.05 g / kg / min); GDOP (dopamine 2.5g / kg / min) and GDOB (dobutamine 2.5g / kg / min). After 15 minutes of initiation of the infusions, the LOWER moment was evaluated, in which the doses were increased by 100% to the previous moment, evaluating the MEDIUM dose and subsequent increase by 100% the dose characterizing the HIGH moment. HR was higher at all doses in GDOB than in baseline, being higher also when compared to GNOR and GDOP at medium and high doses. The MAP was lower in times of low, medium and high dose in GDOP and GDOB compared to baseline. In GNOR it was 15% lower only at the low dose. The CI in the GDOB was higher in 77%, 185% and 243% in the moments of the low, medium and high dose, respectively, when compared to the baseline. In addition, the CI was higher in the GDOB when compared to the others at all moments after the start of treatment. SI was higher at all times of GDOB when compared to baseline, being higher in GDOB compared to GDOP at the low and medium doses. The DO2 was higher at all GDOB moments when compared to its baseline, as compared to the other groups. The IRVS was lower in the GDOB compared to its baseline at all times as well as among the other groups. We concluded that the only drug capable of reestablishing MAP was norepinephrine at medium and high doses.

INFLUÊNCIA DAS CATECOLAMINAS NOREPINEFRINA E EPINEFRINA NA FORMAÇÃO DE BIOFILME EM ISOLADOS DE Salmonella ENTERITIDIS

A sanidade das aves, a inocuidade dos alimentos e a tecnologia de produção são grandes atributos do sistema de produção da cadeia avícola brasileira. No intenso processo de criação das aves, o aumento da excreção de patógenos como Salmonella, tem sido relacionado com o estresse associado à interação social, à manipulação e ao transporte das aves até a linha de abate. Situações de estresse ocasionam a liberação de hormônios como as catecolaminas (epinefrina e norepinefrina) que podem interferir na microbiota pela sinalização das bactérias do trato gastrointestinal. A epinefrina e a norepinefrina produzidas pelos animais utilizam a mesma via de sinalização bacteriana denominados de Auto-indutores Tipo 3. Esses auto-indutores regulam uma gama de atividades como a simbiose, a virulência, a competência, a conjugação, a motilidade, a esporulação e formação de biofilmes. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito das catecolaminas epinefrina e norepinefrina como indutores na formação de biofilmes em 30 isolados de Salmonella Enteritidis provenientes de produtos avícolas e de produtos envolvidos em surtos de salmonelose em humanos e também avaliar a presença dos genes associados na formação de biofilme csgD, adrA e fimA. As cepas de Salmonella Enteritidis utilizadas foram isoladas de pintos de um dia, carne de frango, suabe de arrasto e surtos de salmonelose. Foram testadas duas concentrações de epinefrina e norepinefrina (50µM e 100µM) e duas temperaturas de incubação: 12°C (temperatura da sala de cortes) e a 25°C (temperatura ambiente). O ensaio de formação de biofilme foi feito em placas de poliestireno pela metodologia de coloração de cristal violeta. Dentre os resultados encontrados, cepas incubadas a 25°C apresentaram maior formação de biofilme quando comparadas àquelas incubadas a 12°C. A norepinefrina na concentração de 100 µM estimulou a formação de biofilme por cepas de Salmonella Enteritidis quando incubadas a temperatura de 12°C. Não houve interferência das catecolaminas (epinefrina e norepinefrina) nos ensaios de formação de biofilme a temperatura de 25°C nas concentrações utilizadas e todas as cepas avaliadas no presente trabalho apresentaram os três genes (csgD, adrA e fimA) associados a formação de biofilme pesquisados.

Poultry health, food safety and food production technology are major attributes from the Brazilian poultry chain. Stress associated with poultry transport or mixing has long been correlated with enhanced faecal excretion of diarrheal zoonotic pathogens in animals such as Salmonella enterica. Stress situations release hormones (such catecholamines - epinephrine and norepinephrine) that can influence the microbiota by signaling the bacteria from the gastrointestinal tract, so they are able to initiate the multiplication process and the production of virulence factors as part of the process infectious diseases. Epinephrine and norepinephrine produced by the animals use the same pathway of the bacteria, called Auto Inducer Type 3. These auto-inducers regulate a range of activities such as symbiosis, virulence, competence, conjugation, motility, sporulation and biofilm formation. The Salmonella ability to makes complexes associated to surfaces, called biofilms, contributes to its persistence and resistance in both host and non-host environments and is especially important in environments used in food processing. The present paper evaluated the influence of catecholamines epinephrine and norepinephrine on the biofilm formation about 30 samples of Salmonella Enteritidis from poultry products and products involved in salmonellosis outbreaks and to evaluate the presence of associated genes in the biofilm formation (csgD, adrA and fimA). The strains of Salmonella Enteritidis used were isolated from day-old chicks, chicken meat, drag swabs and salmonellosis outbreaks. Two epinephrine and norepinephrine concentrations were used (50M and 100M) and two incubation temperatures were analyzed: 12°C (required by the Brazilian sanitary service in cutting rooms of broiler processing plants) and 25°C (room temperature).The biofilm assay was done on polystyrene plates by violet crystal staining methodology. Samples incubated at 25°C produced higher biofilm formation them samples incubated at 12°C. The norepinephrine concentration of 100 M has stimulated the biofilm formation of Salmonella Enteritidis strains when incubated at 12°C. At 25°C, there was no catecholamine (epinephrine and norepinephrine) influence in the biofilm assay in the concentrations used. All the samples evaluated in the present study were positive for the genes csgD, adrA and fimA associated with biofilm formation investigated.

Contenção de hemorragia ocular com esponja de celulose após exenteração em canino

Introdução: Exenteração é a remoção da conjuntiva, periórbita, músculos e bulbo ocular, sendo indicada em casos de comprometimento de todas estruturas da órbita. Para tal, as pálpebras são suturadas e incisadas em torno das suas margens, sendo o plano de dissecação externo aos músculos oculares. Hemorragias são as complicações pós-operatórias mais comuns neste tipo de cirurgia, indicando-se para seu controle o uso de compressas frias, bandagens compressivas ou ambas, bem como a sedação do paciente. Hemorragias causam sistemicamente diminuição da pressão arterial, devido à redução do volume sanguíneo; vasoconstrição generalizada, devido à secreção de catecolaminas; e, aumento da frequência cardíaca; a consequência mais grave é o choque, caracterizado por insufi ciência circulatória persistente na microcirculação corporal, que rapidamente leva o paciente ao óbito. Objetivou-se descrever um caso de hemorragia ativa tardia em canino, seis dias após exenteração manejada de forma alternativa.Relato de Caso: Foi atendido um poodle, macho, de nove anos, com miíase ocular após perfuração do mesmo. O paciente foi internado e tratado diariamente com solução fi siológica e açúcar na cavidade orbital, além de cefalexina devido a leucocitose por neutrofi lia com desvio a esquerda constatada no hemograma. Após sete dias, com a infecção controlada, realizou-se exenteração para remoção dos debr

Ractopamina na dieta da carpa húngara (Cyprnus carpio) criada em tanques-rede / Ractopamin in the diet of Hungarian Carp reared in net cages

Avaliou-se a utilização da ractopamina como promotor de crescimento para carpa húngara em experimento com 56 dias de duração, realizado em 12 tanques-rede de pequeno volume, utilizando-se 360 peixes com peso inicial de 18,64±1,25g. Foram testadas três quantidades de ractopamina, 7, 14 e 21ppm/kg, mais a dieta controle. Avaliaram-se o peso médio, o comprimento total, a altura, a taxa de crescimento específico e o fator de condição. Foram também analisadas a composição corporal, a deposição tecidual e a glicose plasmática dos peixes. Não foi observado efeito significativo da adição de ractopamina sobre as características de desempenho. Observou-se maior concentração de glicose, 61,67mg/dL, nos peixes alimentados sem a adição de ractopamina na dieta. A adição de ractopamina na dieta proporcionou maior quantidade de gordura corporal nos peixes e não afetou a quantidade de proteína. Conclui-se que a adição de ractopamina na dieta não é eficiente para juvenis de carpa húngara.(AU)

The use of ractopamine as a growth promoter for hungarian carp was evaluated in an experiment with a duration of 56 days, accomplished in 12 net cages of lower volume using 360 fish with initial weight of 18.64±1.25g. Three amounts of ractopamine, 7, 14 and 21ppm/kg, plus control diet were tested. The mean weight, total length, height, specific growth rate and condition factor were evaluated. Body composition, tissue deposition and fish plasmatic glucose were also analyzed. No significant effect of ractopamine addition was observed on the characteristics evaluated. A higher glucose concentration of 61.67mg/dL was observed in fish fed without the addition of ractopamine to the diet. The ractopamine inclusion in diets promotes higher body fat levels in fish and does not affect the amount of protein. The conclusion is that the addition of ractopamine in the diet is not efficient for hungarian carp juveniles.(AU)

Papel dos adrenoceptores em células dendríticas derivadas de monócitos humanos

O sistema nervoso simpático (SNS) inerva a maioria dos órgãos linfoides e durante situações de estresse, por meio da liberação da noradrenalina de seus ramos eferentes, emitem sinais capazes de modular as repostas imunes. Nossa hipótese foi de que esta via poderia alterar a função de células dendríticas (DCs) derivadas de monócitos humanos, uma vez que receptores adrenérgicos já foram demonstrados em DCs murinas e pelo fato de que as estas células são chave na iniciação de respostas imunes adaptativas, bem como indutoras de tolerância. Desta forma, DCs diferenciadas a partir de monócitos sanguíneos provenientes de doadores saudáveis tratadas com ligantes adrenérgicos foram analisadas quanto a expressão de marcadores de membrana, atividade fagocítica, apresentação antigênica em ensaio de reação mista de linfócitos, expressão gênica de marcadores de diferenciação e ativação, bem como produção de citocinas. Os resultados revelaram que as DCs apresentam transcritos apenas para o adrenoceptor 2, e esta expressão é similar à de macrófagos, mas inferior a de linfócitos. A análise dos marcadores fenotípicos de membrana, atividade fagocítica, apresentação antigênica e produção de citocinas não mostraram alterações nas células tratadas com agonistas adrenérgicos. No entanto, o tratamento com ligantes adrenérgicos foi capaz de alterar a expressão dos genes CD40, CD80, CD83, CXCL1, TGFB1, FCGR3A, CCR7 e CCL5 em DCs e macrófagos estimulados com LPS ou TNF-. Embora os efeitos dos ligantes adrenérgicos não tenham sido fortemente evidenciados nos testes realizados, os resultados sugerem que pequenas alterações podem ser provocadas pela ligação das catecolaminas em DCs, sugerindo que estas possam ser moduladas pelo SNS, modificando as respostas imunes

The sympathetic nervous system (SNS) innervates most of the lymphoid organs and during stress situations, by releasing norepinephrine from its efferent branches, emit signals capable of modulating immune responses. Our hypothesis was that this pathway could alter the function of human monocyte-derived dendritic cells (DCs), since adrenergic receptors have already been demonstrated in murine DCs, and by the fact that these cells are key in initiating adaptive immune responses as well as tolerance inducers. Thus, differentiated DCs from blood monocytes from healthy donors treated with adrenergic ligands were analyzed for expression of membrane markers, phagocytic activity, antigenic presentation in a mixed lymphocyte reaction assay, gene expression of differentiation and activation markers and cytokine production. The results revealed that DCs present transcripts only for the 2 adrenoceptor, and this expression is similar to that observed in macrophages, but lower than what it is found in lymphocytes. The analysis of phenotypic membrane markers, phagocytic activity, antigenic presentation and cytokine production did not revealed any changes in the cells treated with adrenergic agonists. However, treatment with the adrenergic ligands was able to alter the expression of CD40, CD80, CD83, CXCL1, TGFB1, FCGR3A, CCR7 and CCL5 genes in DCs and macrophages stimulated with LPS or TNF-. Although the effects of adrenergic ligands have not been strongly demonstrated in the tests performed, the results suggest that small changes can be caused by the binding of catecholamines in DCs, suggesting that they can be modulated by the SNS, modifying immune responses.

EFEITOS DE DIFERENTES ANESTÉSICOS SOBRE O BEM ESTAR DE CARPA CAPIM (Ctenopharyngodon idella)

No Brasil, aproximadamente quatro milhões de pessoas estão envolvidas direta ou indiretamente com a aquicultura, a qual contribui como fonte de renda e produção de alimento. Na última década, o consumo per capita de pescado no mundo elevou-se em mais de 100%, ressaltando a preocupação quanto ao bem-estar e redução do estresse desses animais por parte do consumidor de proteína animal, dos pesquisadores, dos desenvolvedores de tecnologias ou dos produtores. É sabido que o estresse nos peixes desencadeia respostas neuroendócrinas, gerando respostas primárias, secundárias e/ou terciárias, o que libera catecolaminas e cortisol, prejudicial para o desenvolvimento, imunidade e reprodução. Na última década, houve certo avanço em relação à anestesia aplicada aos teleósteos, destacando-se o aumento do número de estudos relacionados ao uso de anestésicos e suas respostas neuro-fisiológicas. Entretanto, as diferenças entre respostas específicas para cada espécie, qualidade e padrões da água, dentre outros fatores, dificultam a pesquisa e o uso prático dos anestésicos nos peixes, e embora hajam estes limitantes, o uso de determinados anestésicos se justifica durante o manejo, transporte ou qualquer outra forma de manipulação, a fim de minimizar o estresse, evitar traumas, morbidades ou até mesmo a morte dos animais. A carpa capim é um peixe nativo da Ásia oriental e foi amplamente distribuída ao redor do mundo como controlador biológico dado seu alto consumo de macrófitas aquáticas, tornando-se desta forma importante espécie de cultivo também no Brasil. Embora seja muito utilizada como modelo experimental por ser um animal de fácil adaptação, não há protocolos anestésicos definidos para a espécie. Desta forma, o estudo dos efeitos de anestésicos sobre essa espécie é relevante tanto sob o aspecto científico, de bem-estar, como de de produção. O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito do eugenol, benzocaína e gelo sobre o bem estar de carpas capim adultas (Ctenopharyngodon idella) durante processos sedativos, anestésicos e/ou eutanásicos. Foram utilizados 60 peixes adultos com peso médio de 743,0 (± 6,2) g. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado e os animais foram divididos em oito grupos, conforme o tratamento aos quais foram submetidos, sendo: grupo testemunha (GT), controle (CO), etanol 1,75 ml.L-1 (ET), gelo (GE), eugenol 50 mg.L-1 (E50), eugenol 250 mg.L-1 (E250), benzocaína 100 mg.L-1 (B100) e benzocaína 300 mg.L-1 (B300). Todos os animais passaram por um período de aclimatação de sete dias no sistema de recirculação. Os animais de um mesmo aquário foram capturados simultaneamente e submetidos individualmente aos respectivos desafios nas câmaras de anestesia. Os estágios anestésicos foram subdivididos em 0, 1, 2, 3 e 4 e o tempo para alcançar cada estágio foi medido. Posteriormente foi realizada coleta do sangue para análises bioquímicas e em seguida, os animais foram eutanasiados por secção medular, biometrados e parte do fígado coletado para análise de glicogênio hepático. Observamos que os peixes do tratamento GE demoraram mais tempo para alcançar os estágios 1 e 2 (69s e 316s) quando comparados aos outros tratamentos (B100 31s e 58s; E50 25s e 55s; B300 17s e 35s; E250 19s e 40s respectivamente). Houve diferença estatística entre os grupos (p<0,01) quanto ao tempo exigido para atingir os estágios anestésicos 3 e 4, contudo, GE foi o que requereu tempo mais longo (394s e 461s). Comparativamente, animais tratados com as menores doses dos anestésicos benzocaína e eugenol demandaram tempo mais longo para alcançar os estágios anestésicos 3 e 4 (E50 = 81s e 132s; B100 = 77s e 105s) do que nas concentrações mais elevadas (E250 = 43s e 62s; B300 = 42s e 57s). Como agentes sedativos e anestésicos, a benzocaína na concentração de 300 mg.L-1 proporcionou a resposta mais rápida, seguida do eugenol 250 mg.L-1. Como agentes eutanásicos a benzocaína e o eugenol se mostraram eficazes. Em relação ao bem estar, o grupo B100 apresentou as concentrações mais altas para as análises de glicose (141,8 ± 5,3 mg.dL-1) e cortisol (187,2 ± 6,3 ng.mL-1) (p<0,05). Embora a benzocaína na concentração 100 mg.L-1 seja amplamente utilizada como anestésico em peixes, nosso estudo demonstrou esta como agente estressor para carpas capim adultas.

In Brazil, approximately four million people are directly or indirectly involved in aquaculture, which contributes as a source of income and food production. In the last decade, there has been an increase in the per capita consumption of fish in the world by more than 100%, generating concern on the welfare and stress reduction of these animals, part by the animal protein consumer, the researchers, technology developers and producers. It is known that stress in fish triggers neuroendocrine responses, thus generating primary, secondary and / or tertiary responses, which releases catecholamines and cortisol, detrimental to the development, immunity and reproduction. In the last decade, there has been some progress in relation to anesthesia applied to teleosts, especially the increase in the number of studies related to the use of anesthetics and their neurophysiological responses. However, the differences between species-specific responses, water quality and patterns, among other factors, make it difficult to research and use anesthetics in fish. Although there are these limitations, the use of certain anesthetics is justified during handling, transportation or any other form of manipulation in order to minimize stress, avoid trauma, morbidities or even death of the animals. Grass carp (Ctenopharyngodon idella), native to East Asia, has been widely distributed around the world as a biological controller, given its high consumption of aquatic macrophytes, becoming an important crop species in Brazil. Although, it is widely used as an experimental model because it is an easily adapted animal, there are no anesthetic protocols defined for the species. Thus, the study of the effects of anesthetics on this species is relevant under the scientific, welfare and production aspects. The aim of this study was to evaluate the effect of eugenol, benzocaine and water ice on welfare during sedative, anesthetic and/or euthanasic processes in adult grass carps. Sixty adult fish were used, with a mean weight of 743.0 (± 6.2) g. The experimental design was randomized and the animals were divided into eight groups, according to the treatment to which they were submitted: witness group (WG), control (CO), ethanol 1.75 ml.L-1 (ET), water ice (WI) eugenol 50 mg.L-1 (E50), eugenol 250 mg.L-1 (E250), benzocaine 100 mg.L-1 (B100) and benzocaine 300 mg.L-1 (B300). All animals underwent a seven-day acclimation period in the recirculation system. The animals from the same aquarium were captured simultaneously and individually submitted to the respective challenges in anesthesia chambers. The anesthetic stages were subdivided into 0, 1, 2, 3 and 4 and the time to reach each stage was measured. Blood samples were collected for biochemical analysis and then the animals were euthanized by the medullary section. They were biometrically and had part of the liver collected for hepatic glycogen analysis. We observed that WI group (p <0.01) took longer to reach stages 1 and 2 (69s and 316s) when compared to the other treatments (B100 - 31s and 58s, E50 - 25s and 55s, B300 - 17s and 35s, E250s 19s and 40s respectively). There was a statistical difference between the groups (p <0.01) regarding the time required to reach the anesthetic stages 3 and 4, however, WI required the longest time (394s and 461s). Comparatively, animals treated with lower doses of benzocaine and eugenol anesthetics required longer time to reach anesthetic stages 3 and 4 (E50 = 81s and 132s; B100 = 77s and 105s) than in the higher concentrations (E250 = 43s and 62s; B300 = 42s and 57s). As sedatives and anesthetics, benzocaine at the concentration of 300 mg.L-1 provided the fastest response, followed by eugenol 250 mg.L-1. As euthanasic agents, benzocaine and eugenol were effective. In relation to welfare, B100 group had the highest concentrations for glucose (141.8 ± 5.3 mg.dL-1) and cortisol (187.2 ± 6.3 ng.mL-1) (p<0.05). Although benzocaine at 100 mg.L-1 concentration is widely used as an anesthetic in fish, our study demonstrated this as a stressor agent for adult grass carps.

Influence of acepromazine on the cardiovascular actions of dobutamine in isoflurane-anesthetized horses

The influence of acepromazine (ACP) on the effectiveness of dobutamine (DBT) in increasing blood pressure during isoflurane (ISO) anesthesia was evaluated in six horses. On separate occasions, the horses were randomly assigned to receive NaCl 0.9% (Control), ACP 0.025mg kg-1 and ACP 0.05mg kg-1. The experimental treatment was administered prior to induction of anesthesia. Maintenance of anesthesia was performed under conditions of normocapnia with ISO in oxygen. Dobutamine was administered at progressively increasing infusion rates until mean arterial pressure (MAP) reached 70mmHg or until a maximum infusion rate of 5.0µg kg-1 min-1. Compared with baseline, DBT increased heart rate, systolic, diastolic and mean blood pressures in all treatments. However, these variables did not differ among treatments. The target MAP (70mmHg) was not reached in 2/6, 2/5 and 0/6 horses in the Control, ACP0.025 and ACP0.05 treatments, respectively. The mean dose of DBT to achieve target MAP was 3.5±1.8, 3.7±1.6 and 2.7±1.4µg kg-1 min-1 in the Control, ACP0.025 and ACP0.05 treatments, respectively (P>0.05). Under the conditions of this study, premedication with ACP does not interfere with the effectiveness of DBT in increasing blood pressure in horses anesthetized with ISO.

A influência da acepromazina (ACP) sobre a capacidade da dobutamina (DBT) em elevar a pressão arterial durante a anestesia com isofluorano (ISO) foi avaliada em seis equinos. Em ocasiões diferentes, os animais receberam aleatoriamente NaCl 0,9% (Controle), ACP 0,025mg kg-1 e ACP 0,05mg kg-1. O tratamento experimental foi administrado previamente à indução da anestesia. A manutenção da anestesia foi realizada em condições de normocapnia com ISO em oxigênio. A administração de DBT foi iniciada em doses progressivamente crescentes até que o valor de pressão arterial média (PAM) atingisse 70mmHg ou até a dose máxima de 5,0µg kg-1 min-1. Comparado ao basal, a administração da DBT resultou em elevação na frequência cardíaca e pressões arteriais sistólica, diastólica e média em todos os tratamentos. Porém, não houve diferença entre os tratamentos nessas variáveis. A PAM alvo (70mmHg) não foi atingida em 2/6, 2/5 e 0/6 animais dos tratamentos Controle, ACP0.025 e ACP0.05, respectivamente. A dose média de DBT para a PAM alvo foi de 3,5±1,8; 3,7±1,6 e 2,7±1,4µg kg-1 min-1 no Controle, ACP0.025 e ACP0.05, respectivamente (P>0,05). Nas condições deste estudo, o pré-tratamento com ACP não interfere na eficácia da DBT em elevar a pressão arterial de cavalos anestesiados com ISO.