Platelet rich plasma associated with heterologous fresh and thawed chondrocytes on osteochondral lesions of rabbits / Associação de plasma rico em plaquetas e condrócitos heterólogos frescos e descongelados em lesão osteocondral de coelhos

Chondrocytes obtained from stifle joint of New Zealand White rabbits were cultivated. Half of cells were maintained in culture for later implantation and the others frozen during six months to evaluate viability. A circular osteochondral defect was created in the right stifle of other twenty seven rabbits. The control group (CG) received no treatment. The thawed (TH) and fresh (FH) heterologous groups received, respectively, an implant of cultivated thawed or fresh heterologous chondrocytes associated with platelet rich plasma (PRP). The CG group showed greatest pain and lameness compared to the other groups seven days after the implantation. Microscopically, at 45 and 90 days, the TH and FH groups showed filling with cartilaginous tissue containing chondrocytes surrounded by a dense matrix of glycosaminoglycans. In the CG group, healing occurred with vascularized fibrous connective tissue without integration to the subchondral bone. Cryopreserved heterologous chondrocytes were viable for implantation and healing of osteochondral lesions; the association with PRP allows the fixation of cells in the lesion and offers growth factors which accelerates repair with tissue similar to articular hyaline cartilage.(AU)

Cultivaram-se condrócitos obtidos da articulação do joelho de coelhos. Metade das células foi mantida em cultura para posterior implantação, e a outra metade foi congelada durante seis meses com a finalidade de avaliar a viabilidade. Criou-se um defeito circular osteocondral no joelho direito de outros vinte e sete coelhos. O grupo controle (GC) não recebeu tratamento. Os grupos descongelado (TH) e fresco (FH) receberam, respectivamente, implantes heterólogos de condrócitos cultivados descongelados e frescos, associados com PRP. O grupo GC apresentou maior dor e claudicação em comparação com os outros grupos aos sete dias após o implante. Microscopicamente, aos 45 e 90 dias, os grupos TH e FH mostraram preenchimento da falha com tecido cartilaginoso contendo condrócitos circundados por uma matriz densa de glicosaminoglicanos. Nesse período, no grupo CG, a cura ocorreu com tecido conjuntivo fibroso vascularizado e sem integração com o osso subcondral. Condrócitos heterólogos criopreservados foram viáveis para implantação e tratamento de lesões osteocondrais; a associação com o PRP permitiu a fixação de células na lesão e ofereceu fatores de crescimento que aceleraram a reparação com o tecido semelhante à cartilagem hialina articular.(AU)

Implante de condrócitos homólogos em defeitos osteocondrais de cães: padronização da técnica e avaliação histopatológica / Homologous articular chondrocytes implantation in osteochondral defects of dogs: technique and histopathological evaluation standardization

Padronizou-se a metodologia para cultura de condrócitos em cães e avaliou-se seu implante em lesões osteocondrais, utilizando-se a membrana biossintética de celulose (MBC) como revestimento. Dez cães, adultos e clinicamente sadios, foram submetidos à artrotomia das articulações fêmoro-tíbio-patelares. Defeitos de 4mm de diâmetro e profundidade foram induzidos no sulco troclear de ambos os membros. MBC foi aplicada na base e na superfície das lesões. Os defeitos do membro direito foram preenchidos com condrócitos homólogos cultivados formando o grupo-tratado (GT); os do membro esquerdo, sem implante celular, foram designados grupo-controle (GC). A evolução pós-operatória foi analisada com especial interesse nos processos de reparação da lesão, por meio de histomorfometria e imuno-histoquímica para colágeno tipo II e sulfato de condroitina. A cultura de condrócitos homólogos apresentou alta densidade e taxa de viabilidade. Observou-se integridade do tecido neoformado com a cartilagem adjacente na avaliação histológica, em ambos os grupos. Na imuno-histoquímica, verificou-se predomínio de colágeno tipo II no GT. Morfometricamente, não houve diferença significativa entre o tecido fibroso e o fibrocartilaginoso entre os grupos. A cultura de condrócitos homólogos de cães foi exequível. O tecido neoformado apresentou qualidade discretamente superior associado ao implante homólogo de condrócitos, contudo não promoveu reparação por cartilagem hialina.(AU)

The aim of the study is to standardize the methodology to achieve canine chondrocytes culture, and evaluate its implant on osteochondral defects made in the femoral trochlear sulcus of dogs, using the cellulose biosynthetic membrane (CBM) as coating. Ten healthy adult dogs without locomotor disorders were used. All animals were submitted to arthrotomy of stifle joints and defects of four millimeters in diameter x four millimeters deep were done in the femoral trochlear sulcus of both limbs. CBM were applied in the lesion base and surface of all limbs. In the treated group (TG), defects of the right limb were filled with cultivated homologous chondrocytes, and in control group (CG), defects of the left limb were left without cellular implant. Postoperative follow up was done by histomorphometry and Collagen type II and anti-chondroitin sulfate immunohistochemistry. The homologous chondrocytes culture showed high density and viability rate. Upon immunohistochemistry the predominance of type II collagen in extracellular matrix of TG was verified. However, no significant statistical difference was observed between the groups upon histomorphometry analysis of fibrous and fibrocartilaginous tissues. Canine homologous chondrocytes culture was practicable. Neoformed tissue showed slightly higher quality in TG, but without promoting repair by the hyaline cartilage.(AU)

A terapia celular no reparo de lesões osteocondrais / Cellular therapy on osteochondral injuries repair

A cartilagem hialina articular é um tecido conjuntivo responsivo a cargas que apresenta baixa celu¬laridade e elevada concentração de água em sua matriz. Como não possui vascularização, a nutrição desse tecido é feita a partir de substâncias encontradas no líquido sinovial. As lesões da cartilagem articular apresentam baixa capacidade regenerativa devido à ausência de vascularização e à incapa¬cidade dos condrócitos em migrar para as áreas centrais da lesão. O uso de implante de condrócitos expandidos em laboratório e, mais recentemente, o uso de células tronco mesenquimais, constituem técnicas de terapia celular que permitem a formação de um tecido com características morfológicas e biomecânicas semelhantes à cartilagem hialina articular capaz de conduzir à melhora clínica do paciente. O objetivo deste trabalho é revisar a fisiopatologia da reparação da cartilagem hialina e fa¬miliarizar o cirurgião veterinário com as recentes técnicas de terapia celular utilizadas no tratamento das lesões osteocondrais(AU)

The hyaline articular cartilage is a load-bearing connective tissue with low quantity of cells and an elevated concentration of water inside the matrix. Due to absence of vascularization, the nutrition in this tissue is made by substances from synovial liquid. The articular cartilage injuries possess a low regenerative capacity due to the absence of vascularization and the incapacity of chondrocytes to migrate until the middle of lesion. The use of chondrocytes implantation expanded in laboratory, and more recently, the use of mesenchymal stem cells, constitutes cellular therapy techniques that allow tissue formation with morphological and biomechanical characteristics similar to hyaline cartilage capable to lead the clinical improvement of the patient. The aim of this review is to describe the phy¬siopathology of hyaline cartilage repair and give information to veterinary surgeon about the early techniques of cell therapy used in the treatment of osteochondral injury(AU)

A terapia celular no reparo de lesões osteocondrais / Cellular therapy on osteochondral injuries repair

A cartilagem hialina articular é um tecido conjuntivo responsivo a cargas que apresenta baixa celu¬laridade e elevada concentração de água em sua matriz. Como não possui vascularização, a nutrição desse tecido é feita a partir de substâncias encontradas no líquido sinovial. As lesões da cartilagem articular apresentam baixa capacidade regenerativa devido à ausência de vascularização e à incapa¬cidade dos condrócitos em migrar para as áreas centrais da lesão. O uso de implante de condrócitos expandidos em laboratório e, mais recentemente, o uso de células tronco mesenquimais, constituem técnicas de terapia celular que permitem a formação de um tecido com características morfológicas e biomecânicas semelhantes à cartilagem hialina articular capaz de conduzir à melhora clínica do paciente. O objetivo deste trabalho é revisar a fisiopatologia da reparação da cartilagem hialina e fa¬miliarizar o cirurgião veterinário com as recentes técnicas de terapia celular utilizadas no tratamento das lesões osteocondrais

The hyaline articular cartilage is a load-bearing connective tissue with low quantity of cells and an elevated concentration of water inside the matrix. Due to absence of vascularization, the nutrition in this tissue is made by substances from synovial liquid. The articular cartilage injuries possess a low regenerative capacity due to the absence of vascularization and the incapacity of chondrocytes to migrate until the middle of lesion. The use of chondrocytes implantation expanded in laboratory, and more recently, the use of mesenchymal stem cells, constitutes cellular therapy techniques that allow tissue formation with morphological and biomechanical characteristics similar to hyaline cartilage capable to lead the clinical improvement of the patient. The aim of this review is to describe the phy¬siopathology of hyaline cartilage repair and give information to veterinary surgeon about the early techniques of cell therapy used in the treatment of osteochondral injury