Range of factors in the reduction of hyperhydricity associated with in vitro shoots of Salvia santolinifolia Bioss

Abstract Hyperhydricity is a serious physiological disorder and affects In vitro propagation of many plants and as well of Salvia santolinifolia. The donor material to initiate the in vitro culture was the callus taken from the in vitro shoots produced on Murashig and Skoogs (MS) medium at 4.0 mg/l BA. This callus formed numerous hyperhydric shoots on culturing upon the medium of the same composition. The aim was to systematically evaluate the effect of cytokinins (Benzyladnine (BA) and N6-(-2-isopentenyl) adenine (2iP), culture vessels magnitude, medium solidification, source of nitrogen and calcium chloride for the alleviation of hyperhydricity. In the tissue cultures of S. santolinifolia BA and 2iP induced severe hyperhydricity, when other factors i.e. culture vessels magnitude and a suitable concentration of agar, ammonium nitrate (NH4NO3), potassium nitrate (KNO3) & calcium chloride (CaCl2.2H2O) were not optimized. After 30 days culture, we observed 83.82% hyperhydric shoots at increased level (1.5 mg/l 2iP) and 81.59% at decreased levels (1.0 mg/l 2iP). On the other hand, hyperhydricity percentage at decreased (0.4%) and at increased (0.8%) levels of agar were 72.37% and 39.08%, respectively. MS medium modification with NH4NO3 (412 mg/l), KNO3 (475 mg/l) and CaCl2.2H2O (880 mg/l) was found the best medium to reduced hyperhydricity (23.6%).

Resumo A hiperidricidade é um distúrbio fisiológico sério e afeta a propagação in vitro de muitas plantas e também da Salvia santolinifolia. O material doador para iniciar a cultura in vitro foi o calo retirado dos brotos in vitro produzidos em meio Murashig e Skoogs (MS) a 4,0 mg / l BA. Esse calo formou numerosos rebentos hiperídricos em cultura no meio da mesma composição. O objetivo foi avaliar sistematicamente o efeito das citocininas (Benziladnina (BA) e N6 - (- 2-isopentenil) adenina (2iP), magnitude dos vasos de cultura, solidificação do meio, fonte de nitrogênio e cloreto de cálcio para o alívio da hiperidricidade. culturas de tecidos de S. santolinifolia BA e 2iP induziram hiperidricidade severa, quando outros fatores, como magnitude dos vasos de cultura e uma concentração adequada de ágar, nitrato de amônio (NH4NO3), nitrato de potássio (KNO3) e cloreto de cálcio (CaCl2.2H2O), não foram otimizados. Após 30 dias de cultura, observamos 83,82% de brotos hiperídricos em níveis aumentados (1,5 mg / l 2iP) e 81,59% em níveis reduzidos (1,0 mg / l 2iP). Por outro lado, a porcentagem de hiperidricidade diminuiu (0,4%) e em níveis aumentados (0,8%) de ágar foram 72,37% e 39,08%, respectivamente. A modificação do meio MS com NH4NO3 (412 mg / l), KNO3 (475 mg / l) e CaCl2.2H2O (880 mg / l) foi encontrada melhor hiperidricidade média a reduzida (23,6%).

Range of factors in the reduction of hyperhydricity associated with in vitro shoots of Salvia santolinifolia Bioss / Gama de fatores na redução da hiperidricidade associada a brotos in vitro de Salvia santolinifolia Bioss

Abstract Hyperhydricity is a serious physiological disorder and affects In vitro propagation of many plants and as well of Salvia santolinifolia. The donor material to initiate the in vitro culture was the callus taken from the in vitro shoots produced on Murashig and Skoogs (MS) medium at 4.0 mg/l BA. This callus formed numerous hyperhydric shoots on culturing upon the medium of the same composition. The aim was to systematically evaluate the effect of cytokinins (Benzyladnine (BA) and N6-(-2-isopentenyl) adenine (2iP), culture vessels magnitude, medium solidification, source of nitrogen and calcium chloride for the alleviation of hyperhydricity. In the tissue cultures of S. santolinifolia BA and 2iP induced severe hyperhydricity, when other factors i.e. culture vessels magnitude and a suitable concentration of agar, ammonium nitrate (NH4NO3), potassium nitrate (KNO3) & calcium chloride (CaCl2.2H2O) were not optimized. After 30 days' culture, we observed 83.82% hyperhydric shoots at increased level (1.5 mg/l 2iP) and 81.59% at decreased levels (1.0 mg/l 2iP). On the other hand, hyperhydricity percentage at decreased (0.4%) and at increased (0.8%) levels of agar were 72.37% and 39.08%, respectively. MS medium modification with NH4NO3 (412 mg/l), KNO3 (475 mg/l) and CaCl2.2H2O (880 mg/l) was found the best medium to reduced hyperhydricity (23.6%).

Resumo A hiperidricidade é um distúrbio fisiológico sério e afeta a propagação in vitro de muitas plantas e também da Salvia santolinifolia. O material doador para iniciar a cultura in vitro foi o calo retirado dos brotos in vitro produzidos em meio Murashig e Skoogs (MS) a 4,0 mg / l BA. Esse calo formou numerosos rebentos hiperídricos em cultura no meio da mesma composição. O objetivo foi avaliar sistematicamente o efeito das citocininas (Benziladnina (BA) e N6 - (- 2-isopentenil) adenina (2iP), magnitude dos vasos de cultura, solidificação do meio, fonte de nitrogênio e cloreto de cálcio para o alívio da hiperidricidade. culturas de tecidos de S. santolinifolia BA e 2iP induziram hiperidricidade severa, quando outros fatores, como magnitude dos vasos de cultura e uma concentração adequada de ágar, nitrato de amônio (NH4NO3), nitrato de potássio (KNO3) e cloreto de cálcio (CaCl2.2H2O), não foram otimizados. Após 30 dias de cultura, observamos 83,82% de brotos hiperídricos em níveis aumentados (1,5 mg / l 2iP) e 81,59% em níveis reduzidos (1,0 mg / l 2iP). Por outro lado, a porcentagem de hiperidricidade diminuiu (0,4%) e em níveis aumentados (0,8%) de ágar foram 72,37% e 39,08%, respectivamente. A modificação do meio MS com NH4NO3 (412 mg / l), KNO3 (475 mg / l) e CaCl2.2H2O (880 mg / l) foi encontrada melhor hiperidricidade média a reduzida (23,6%).

Range of factors in the reduction of hyperhydricity associated with in vitro shoots of Salvia santolinifolia Bioss / Gama de fatores na redução da hiperidricidade associada a brotos in vitro de Salvia santolinifolia Bioss

Hyperhydricity is a serious physiological disorder and affects In vitro propagation of many plants and as well of Salvia santolinifolia. The donor material to initiate the in vitro culture was the callus taken from the in vitro shoots produced on Murashig and Skoogs (MS) medium at 4.0 mg/l BA. This callus formed numerous hyperhydric shoots on culturing upon the medium of the same composition. The aim was to systematically evaluate the effect of cytokinins (Benzyladnine (BA) and N6-(-2-isopentenyl) adenine (2iP), culture vessels magnitude, medium solidification, source of nitrogen and calcium chloride for the alleviation of hyperhydricity. In the tissue cultures of S. santolinifolia BA and 2iP induced severe hyperhydricity, when other factors i.e. culture vessels magnitude and a suitable concentration of agar, ammonium nitrate (NH4NO3), potassium nitrate (KNO3) & calcium chloride (CaCl2.2H2O) were not optimized. After 30 days' culture, we observed 83.82% hyperhydric shoots at increased level (1.5 mg/l 2iP) and 81.59% at decreased levels (1.0 mg/l 2iP). On the other hand, hyperhydricity percentage at decreased (0.4%) and at increased (0.8%) levels of agar were 72.37% and 39.08%, respectively. MS medium modification with NH4NO3 (412 mg/l), KNO3 (475 mg/l) and CaCl2.2H2O (880 mg/l) was found the best medium to reduced hyperhydricity (23.6%).

A hiperidricidade é um distúrbio fisiológico sério e afeta a propagação in vitro de muitas plantas e também da Salvia santolinifolia. O material doador para iniciar a cultura in vitro foi o calo retirado dos brotos in vitro produzidos em meio Murashig e Skoogs (MS) a 4,0 mg / l BA. Esse calo formou numerosos rebentos hiperídricos em cultura no meio da mesma composição. O objetivo foi avaliar sistematicamente o efeito das citocininas (Benziladnina (BA) e N6 - (- 2-isopentenil) adenina (2iP), magnitude dos vasos de cultura, solidificação do meio, fonte de nitrogênio e cloreto de cálcio para o alívio da hiperidricidade. culturas de tecidos de S. santolinifolia BA e 2iP induziram hiperidricidade severa, quando outros fatores, como magnitude dos vasos de cultura e uma concentração adequada de ágar, nitrato de amônio (NH4NO3), nitrato de potássio (KNO3) e cloreto de cálcio (CaCl2.2H2O), não foram otimizados. Após 30 dias de cultura, observamos 83,82% de brotos hiperídricos em níveis aumentados (1,5 mg / l 2iP) e 81,59% em níveis reduzidos (1,0 mg / l 2iP). Por outro lado, a porcentagem de hiperidricidade diminuiu (0,4%) e em níveis aumentados (0,8%) de ágar foram 72,37% e 39,08%, respectivamente. A modificação do meio MS com NH4NO3 (412 mg / l), KNO3 (475 mg / l) e CaCl2.2H2O (880 mg / l) foi encontrada melhor hiperidricidade média a reduzida (23,6%).

Range of factors in the reduction of hyperhydricity associated with in vitro shoots of Salvia santolinifolia Bioss / Gama de fatores na redução da hiperidricidade associada a brotos in vitro de Salvia santolinifolia Bioss

Hyperhydricity is a serious physiological disorder and affects In vitro propagation of many plants and as well of Salvia santolinifolia. The donor material to initiate the in vitro culture was the callus taken from the in vitro shoots produced on Murashig and Skoogs (MS) medium at 4.0 mg/l BA. This callus formed numerous hyperhydric shoots on culturing upon the medium of the same composition. The aim was to systematically evaluate the effect of cytokinins (Benzyladnine (BA) and N6-(-2-isopentenyl) adenine (2iP), culture vessels magnitude, medium solidification, source of nitrogen and calcium chloride for the alleviation of hyperhydricity. In the tissue cultures of S. santolinifolia BA and 2iP induced severe hyperhydricity, when other factors i.e. culture vessels magnitude and a suitable concentration of agar, ammonium nitrate (NH4NO3), potassium nitrate (KNO3) & calcium chloride (CaCl2.2H2O) were not optimized. After 30 days' culture, we observed 83.82% hyperhydric shoots at increased level (1.5 mg/l 2iP) and 81.59% at decreased levels (1.0 mg/l 2iP). On the other hand, hyperhydricity percentage at decreased (0.4%) and at increased (0.8%) levels of agar were 72.37% and 39.08%, respectively. MS medium modification with NH4NO3 (412 mg/l), KNO3 (475 mg/l) and CaCl2.2H2O (880 mg/l) was found the best medium to reduced hyperhydricity (23.6%).(AU)

A hiperidricidade é um distúrbio fisiológico sério e afeta a propagação in vitro de muitas plantas e também da Salvia santolinifolia. O material doador para iniciar a cultura in vitro foi o calo retirado dos brotos in vitro produzidos em meio Murashig e Skoogs (MS) a 4,0 mg / l BA. Esse calo formou numerosos rebentos hiperídricos em cultura no meio da mesma composição. O objetivo foi avaliar sistematicamente o efeito das citocininas (Benziladnina (BA) e N6 - (- 2-isopentenil) adenina (2iP), magnitude dos vasos de cultura, solidificação do meio, fonte de nitrogênio e cloreto de cálcio para o alívio da hiperidricidade. culturas de tecidos de S. santolinifolia BA e 2iP induziram hiperidricidade severa, quando outros fatores, como magnitude dos vasos de cultura e uma concentração adequada de ágar, nitrato de amônio (NH4NO3), nitrato de potássio (KNO3) e cloreto de cálcio (CaCl2.2H2O), não foram otimizados. Após 30 dias de cultura, observamos 83,82% de brotos hiperídricos em níveis aumentados (1,5 mg / l 2iP) e 81,59% em níveis reduzidos (1,0 mg / l 2iP). Por outro lado, a porcentagem de hiperidricidade diminuiu (0,4%) e em níveis aumentados (0,8%) de ágar foram 72,37% e 39,08%, respectivamente. A modificação do meio MS com NH4NO3 (412 mg / l), KNO3 (475 mg / l) e CaCl2.2H2O (880 mg / l) foi encontrada melhor hiperidricidade média a reduzida (23,6%).(AU)

Micropropagation of Stevia rebaudiana plants / Micropropagação de plantas de Stevia rebaudiana

The aim of the study was to develop optimum composition of plant growth regulators in media for the propagation and rooting of shoots of stevia (Stevia rebaudiana Bertoni) in in vitro cultures. Single-node shoot fragments obtained from plants propagated on MS medium were placed onto media supplemented with: BAP, 2iP and KIN at concentrations: 0.5, 1, 2 and 5 mg∙dm-3, whereas at the rooting stage with addition of: IAA, IBA and NAA at concentrations 1, 2, 4 and 8 mg∙dm-3. The highest number of shoots and leaves was reported for plants propagated on MS medium enriched with 0.5 mg∙dm-3 BAP. The greatest number of the longest roots was developed by stevia on the MS medium enriched with 1 mg∙dm-3 IAA.(AU)

O objetivo do estudo foi desenvolver uma composição ótima de reguladores de crescimento em meios para a propagação e enraizamento de brotos de estévia (Stevia rebaudiana Bertoni) em culturas in vitro. Fragmentos de parte aérea obtidos de plantas propagadas em meio MS foram colocados em meio suplementado com: BAP, 2iP e KIN nas concentrações: 0.5, 1, 2 e 5 mg∙dm-3, enquanto no estádio de enraizamento com adição de: IAA, IBA e ANA nas concentrações 1, 2, 4 e 8 mg∙dm-3.O maior número de brotações e folhas foi encontrado para plantas propagadas em meio MS enriquecido com 0.5 mg∙dm-3 de BAP. O maior número de raízes mais longas foi desenvolvido por estévia no meio MS enriquecido com 1 mg∙dm-3 de IAA.(AU)

Vernonia condensata Baker: an alternative for large-scale seedling production / Uma alternativa para a produção de mudas de Vernonia condensata Baker em larga escala

The increasing use of Vernonia condensata Baker highlights the importance of developing strategies to reduce the impact of exploitation on nature reserves. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol to produce homogenous plants with high phytosanitary quality. Apical, nodal, and internodal segments of plants grown in the field were used for in vitro growth. The segments were disinfected in sodium hypochlorite solution (1.0 and 2.0%) for 15 and 30 minutes and then transferred to Petri dishes containing MS culture medium for 30 days. A completely randomized factorial experiment (3 x 2 x 2) with five replicates was designed. After this period, a completely randomized in vitro multiplication experiment was carried out with six treatments (BAP - 0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; 2.5 mg L-1) and six replicates. The shoots obtained in the best treatment were transferred to flasks with rooting medium (MS, MS/2 or MS/4). The experiment was completely randomized with 12 replicates. Microplants were acclimatized in polyethylene terephthalate (PET) bottles filled with autoclaved topsoil. Our results showed that 40.0% of the nodal segments (immersed in 1.0% sodium hypochlorite for 30 minutes) were adequately disinfected and survived. In the in vitro multiplication experiment, the 0.5 mg L-1 concentration of BAP yielded the highest number of shoots and the best vegetative growth. With regard to the assessed characteristics, MS/4 was the best rooting medium, with 100% survival during acclimatization. This study showed that V. condensata in vitro culture might produce 32,000 seedlings in 7 months.(AU)

A crescente utilização de Vernonia condensata Baker evidencia a importância de desenvolver estratégias que reduzam o extrativismo nos ambientes naturais. O estudo objetivou estabelecer protocolo de micropropagação produzindo plantas homogêneas e de alta qualidade fitossanitária. Foram utilizados, na etapa de estabelecimento in vitro, segmentos apicais, intermodais e nodais de plantas cultivadas no campo. Desinfestados em solução de hipoclorito de sódio (1,0 e 2,0%) no tempo de 15 e 30 minutos e em seguida introduzidos em placa de Petri, com meio de cultura MS, durante 30 dias. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado no esquema fatorial (3 x 2 x 2), com cinco repetições. Após este período, foi montado o experimento de multiplicação in vitro, em delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos (BAP - 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 mg L-1) e seis repetições. As brotações obtidas no melhor tratamento foram transferidas para frascos com meio de cultura de enraizamento (MS, MS/2 e MS/4). Esse experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado, com 12 repetições. A aclimatização foi realizada introduzindo as microplantas em garrafas do tipo PET contendo terra vegetal autoclavada. Os resultados mostraram que 40,0% dos segmentos nodais (imersos em 1,0% de hipoclorito de sódio, durante 30 minutos) foram desinfestados e sobreviveram. No experimento de multiplicação in vitro obteve-se a melhor resposta no número de brotos e no desenvolvimento vegetativo, na concentração de 0,5 mg L-1 de BAP. O meio de cultura de enraizamento que possibilitou a melhor resposta, nas características avaliadas, foi o MS/4. Durante a aclimatização obteve-se 100% de plantas sobreviventes, oriundas do meio MS/4. A realização desse trabalho permite estimar a obtenção de 32.000 mudas de V. condensata, após sete meses de cultivo in vitro.(AU)

Pollination and fruit set of 'Rocha' pears tree grown in Vacaria, RS, Brazil / Polinização e frutificação da pereira 'Rocha' em Vacaria, RS, Brasil

Representing only 10% of consumption, Brazilian pear production has been stagnating for more than 20 years, at around 20 thousand tons per year, the results of the low cultivated area due to low productivity and consequent low profitability. One of the main causes of the low production of pear orchards is a low fruit set, due to problems in the process of pollination and fertilization of flowers. The objective of this work is to evaluate the natural fruiting process of 'Rocha' pear, identifying the rate of open pollination, natural parthenocarpic and self-pollination, as well as to evaluate potential techniques to increase the fruit set of 'Rocha' pear, under the climatic conditions in Vacaria, RS. 'Rocha' pear trees grafted on the 'BA 29' quince rootstock with 'Packham's Triumph' pollinator cultivated in whole rows were used in the proportion of one row of pollinator for three of Rocha cultivar. The effect of controlled pollination with 'Packham's Triumph' and Pyrus calleryana pollen, the effect of the GA3, GA4+7 + BA, TDZ, AVG, plant growth regulators on the fruit set, productivity and fruit quality of 'Rocha' pears were studied. It was found that the self-pollination and natural parthenocarpy rates of 'Rocha' pear tree and the implanted arrangement do not provide commercially profitable production. The climatic conditions during the flowering, although not favorable, allow the fecundation and fruiting of 'Rocha' pear tree in the conditions of study. 20 mg L-1 sprays of TDZ increase fruit set and the productivity of 'Rocha' pear trees.

Representando apenas 10% do consumo, a produção brasileira de peras está estagnada a mais de 20 anos em torno de 20 mil toneladas anuais, decorrentes da baixa área cultivada em função das baixas produtividades e consequente baixa rentabilidade. Uma das principais causas de baixa produtividade de pomares de pereiras é a baixa frutificação efetiva, isto deve-se a problemas no processo de polinização e fecundação das flores. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de frutificação natural da pereira 'Rocha', identificando a taxa de polinização aberta, partenocárpica natural e autopolinização, bem como avaliar potenciais técnicas para aumento de frutificação da pereira 'Rocha', nas condições edafoclimáticas de Vacaria, RS. Foram utilizadas pereiras 'Rocha' enxertadas sobre o portaenxerto de marmeleiro 'BA 29' com cultivar polinizadora 'Packham's Triumph' disposta em filas inteiras, na proporção de uma fila da polinizadora para cada três da cultivar 'Rocha'. Avaliou-se a taxa de frutificação natural do pomar, de autofecundação e partenocarpia natural, o efeito da polinização controlada e polinização via água com pólen de 'Packham's Triumph' e Pyrus calleryana, o efeito dos fitorreguladores GA3, GA4+7 + BA, TDZ, AVG, sobre a frutificação efetiva, produtividade e qualidade de frutos da pereira 'Rocha'. Verificou-se que as taxas de autopolinização e partenocarpia natural da pereira 'Rocha', bem como o arranjo implantado não proporcionam produções comercialmente rentáveis. As condições climáticas durante a floração, embora não favoráveis, permitem a fecundação e frutificação da pereira 'Rocha' nas condições de estudo. A pulverização de 20 mg L-1 de TDZ aumenta a frutificação efetiva e a produtividade da pereira 'Rocha'.

Pollination and fruit set of 'Rocha' pears tree grown in Vacaria, RS, Brazil / Polinização e frutificação da pereira 'Rocha' em Vacaria, RS, Brasil

Representing only 10% of consumption, Brazilian pear production has been stagnating for more than 20 years, at around 20 thousand tons per year, the results of the low cultivated area due to low productivity and consequent low profitability. One of the main causes of the low production of pear orchards is a low fruit set, due to problems in the process of pollination and fertilization of flowers. The objective of this work is to evaluate the natural fruiting process of 'Rocha' pear, identifying the rate of open pollination, natural parthenocarpic and self-pollination, as well as to evaluate potential techniques to increase the fruit set of 'Rocha' pear, under the climatic conditions in Vacaria, RS. 'Rocha' pear trees grafted on the 'BA 29' quince rootstock with 'Packham's Triumph' pollinator cultivated in whole rows were used in the proportion of one row of pollinator for three of Rocha cultivar. The effect of controlled pollination with 'Packham's Triumph' and Pyrus calleryana pollen, the effect of the GA3, GA4+7 + BA, TDZ, AVG, plant growth regulators on the fruit set, productivity and fruit quality of 'Rocha' pears were studied. It was found that the self-pollination and natural parthenocarpy rates of 'Rocha' pear tree and the implanted arrangement do not provide commercially profitable production. The climatic conditions during the flowering, although not favorable, allow the fecundation and fruiting of 'Rocha' pear tree in the conditions of study. 20 mg L-1 sprays of TDZ increase fruit set and the productivity of 'Rocha' pear trees.(AU)

Representando apenas 10% do consumo, a produção brasileira de peras está estagnada a mais de 20 anos em torno de 20 mil toneladas anuais, decorrentes da baixa área cultivada em função das baixas produtividades e consequente baixa rentabilidade. Uma das principais causas de baixa produtividade de pomares de pereiras é a baixa frutificação efetiva, isto deve-se a problemas no processo de polinização e fecundação das flores. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de frutificação natural da pereira 'Rocha', identificando a taxa de polinização aberta, partenocárpica natural e autopolinização, bem como avaliar potenciais técnicas para aumento de frutificação da pereira 'Rocha', nas condições edafoclimáticas de Vacaria, RS. Foram utilizadas pereiras 'Rocha' enxertadas sobre o portaenxerto de marmeleiro 'BA 29' com cultivar polinizadora 'Packham's Triumph' disposta em filas inteiras, na proporção de uma fila da polinizadora para cada três da cultivar 'Rocha'. Avaliou-se a taxa de frutificação natural do pomar, de autofecundação e partenocarpia natural, o efeito da polinização controlada e polinização via água com pólen de 'Packham's Triumph' e Pyrus calleryana, o efeito dos fitorreguladores GA3, GA4+7 + BA, TDZ, AVG, sobre a frutificação efetiva, produtividade e qualidade de frutos da pereira 'Rocha'. Verificou-se que as taxas de autopolinização e partenocarpia natural da pereira 'Rocha', bem como o arranjo implantado não proporcionam produções comercialmente rentáveis. As condições climáticas durante a floração, embora não favoráveis, permitem a fecundação e frutificação da pereira 'Rocha' nas condições de estudo. A pulverização de 20 mg L-1 de TDZ aumenta a frutificação efetiva e a produtividade da pereira 'Rocha'.(AU)

Micropropagation of Agapanthus umbellatus var. minor by using two systems of multiplication / Micropropagação de Agapanthus umbellatus var. minor com dois sistemas de multiplicação

For conventional micropropagation methods, semisolidified medium (SM) is used; the use of this medium requires intense manipulation of the cultures and skilled labor. Systems that use liquid medium show equal or better efficiency of the multiplication process, besides reducing the cost for the elimination of agar. In this study, we evaluated the mass propagation of Agapanthus umbellatus var. minor two in vitro multiplication systems (SM system and temporary immersion system [SIT]). The plant material was grown in MS medium supplemented with 6-benzylaminopurine (6-BA; 0.0, 8.9, 17.8, and 35.6 ?M). The data obtained in this study demonstrate that the two systems used were efficient for the multiplication phase of this species. However, we recommend SIT in view of its reuse in the process of multiplication and rooting. Moreover, simple construction, low cost of the culture medium, and low cost of the bioreactors and the fact that agar is not required qualify this system as an efficient alternative for large-scale micropropagation of Agapanthus umbellatus var. minor. We recommend 17.8 ?M 6-BA for the SM system and 8.9 ?M 6-BA for SIT.

Na metodologia convencional de micropropagação utiliza-se meio nutritivo geleificado, o que acarreta intensa manipulação das culturas e envolve mão-de-obra especializada. Porém, há uma tendência em se utilizar biorreatores em meio líquido com igual ou até melhor eficiência do processo de multiplicação, além de diminuir o custo pela eliminação do ágar. O presente trabalho teve como objetivo comparar a eficiência do uso do meio geleificado (MG) e de biorreator de imersão temporária (BIT), visando a propagação em massa de Agapanthus umbellatus var. minor. O material vegetal cresceu em meio MS suplementado com diferentes concentrações de 6-BAP (0,0; 8,9; 17,8 e 35,6 ?M). As avaliações de crescimento e desenvolvimento aos 60 dias mostraram que ambos os sistemas foram eficientes na fase de multiplicação. No entanto, a imersão temporária pode ser recomendada, com vista à sua reutilização no processo de multiplicação e enraizamento. Além disso, sugere-se este sistema como uma alternativa eficiente para a micropropagação em larga escala desta espécie por sua simplicidade na construção, custo mais baixo do meio de cultura, por não utilizar ágar e pelo baixo custo dos biorreatores. Dentre as concentrações utilizadas nos sistemas, recomenda-se a concentração de 17,8 ?M de 6-BAP para o MG e 8,9 ?M de 6-BAP para o BIT.

Micropropagation of Agapanthus umbellatus var. minor by using two systems of multiplication / Micropropagação de Agapanthus umbellatus var. minor com dois sistemas de multiplicação

For conventional micropropagation methods, semisolidified medium (SM) is used; the use of this medium requires intense manipulation of the cultures and skilled labor. Systems that use liquid medium show equal or better efficiency of the multiplication process, besides reducing the cost for the elimination of agar. In this study, we evaluated the mass propagation of Agapanthus umbellatus var. minor two in vitro multiplication systems (SM system and temporary immersion system [SIT]). The plant material was grown in MS medium supplemented with 6-benzylaminopurine (6-BA; 0.0, 8.9, 17.8, and 35.6 ?M). The data obtained in this study demonstrate that the two systems used were efficient for the multiplication phase of this species. However, we recommend SIT in view of its reuse in the process of multiplication and rooting. Moreover, simple construction, low cost of the culture medium, and low cost of the bioreactors and the fact that agar is not required qualify this system as an efficient alternative for large-scale micropropagation of Agapanthus umbellatus var. minor. We recommend 17.8 ?M 6-BA for the SM system and 8.9 ?M 6-BA for SIT.(AU)

Na metodologia convencional de micropropagação utiliza-se meio nutritivo geleificado, o que acarreta intensa manipulação das culturas e envolve mão-de-obra especializada. Porém, há uma tendência em se utilizar biorreatores em meio líquido com igual ou até melhor eficiência do processo de multiplicação, além de diminuir o custo pela eliminação do ágar. O presente trabalho teve como objetivo comparar a eficiência do uso do meio geleificado (MG) e de biorreator de imersão temporária (BIT), visando a propagação em massa de Agapanthus umbellatus var. minor. O material vegetal cresceu em meio MS suplementado com diferentes concentrações de 6-BAP (0,0; 8,9; 17,8 e 35,6 ?M). As avaliações de crescimento e desenvolvimento aos 60 dias mostraram que ambos os sistemas foram eficientes na fase de multiplicação. No entanto, a imersão temporária pode ser recomendada, com vista à sua reutilização no processo de multiplicação e enraizamento. Além disso, sugere-se este sistema como uma alternativa eficiente para a micropropagação em larga escala desta espécie por sua simplicidade na construção, custo mais baixo do meio de cultura, por não utilizar ágar e pelo baixo custo dos biorreatores. Dentre as concentrações utilizadas nos sistemas, recomenda-se a concentração de 17,8 ?M de 6-BAP para o MG e 8,9 ?M de 6-BAP para o BIT.(AU)

Micropropagação de Croton antisyphiliticus Mart.

Croton antisyphiliticus Mart. ex M. Arg., popularly known as "pé-de-perdiz", is a native medicinal plant of Cerrado, whose root is used in the form of decoctions against infections of the male and female reproductive. The collection of the plant is carried through of extractives form and there are no studies regarding its conservation. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol of C. antisyphiliticus. The effect of different concentrations of cytokinins, the size of the container for the in vitro culture, co-cultivation and bud position in relation to the development of the explants, as well as the influence of AIB on in vitro rooting and acclimatization of explants were evaluated. The best development in vitro was obtained with apical explants co-cultivated on MS medium supplemented with BAP (1µM) in bottle type pot. Rooting was achieved on MS medium without growth regulators and acclimatization can be performed in Cerrado soil without the presence of shoots developed roots in vitro.

Croton antisyphiliticus Mart. ex M. Arg., conhecido popularmente como pé-de-perdiz, é uma planta medicinal nativa do Cerrado, cuja raiz é utilizada na forma de decoctos para combater infecções do aparelho reprodutor masculino e feminino. A coleta da planta é realizada de forma extrativista e não há trabalhos a respeito da sua conservação. O objeto do trabalho foi estabelecer um protocolo de micropropagação de Croton antisyphiliticus. Foram avaliados o efeito de diferentes concentrações das citocininas, o tamanho do recipiente para o cultivo in vitro, o co-cultivo e a posição da gema em relação ao desenvolvimento dos explantes, bem como a influência do AIB no enraizamento in vitro e a aclimatização dos explantes. O melhor desenvolvimento in vitro foi obtido com explantes do tipo gema apical, co-cultivadas em meio MS suplementado com BAP (1µM), em frasco tipo pote. O enraizamento foi obtido em meio MS sem regulador vegetal e a aclimatização pode ser realizada em solo do cerrado com brotações sem a presença de raízes desenvolvidas in vitro.

Micropropagação de Croton antisyphiliticus Mart

Croton antisyphiliticus Mart. ex M. Arg., popularly known as "pé-de-perdiz", is a native medicinal plant of Cerrado, whose root is used in the form of decoctions against infections of the male and female reproductive. The collection of the plant is carried through of extractives form and there are no studies regarding its conservation. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol of C. antisyphiliticus. The effect of different concentrations of cytokinins, the size of the container for the in vitro culture, co-cultivation and bud position in relation to the development of the explants, as well as the influence of AIB on in vitro rooting and acclimatization of explants were evaluated. The best development in vitro was obtained with apical explants co-cultivated on MS medium supplemented with BAP (1µM) in bottle type pot. Rooting was achieved on MS medium without growth regulators and acclimatization can be performed in Cerrado soil without the presence of shoots developed roots in vitro.

Croton antisyphiliticus Mart. ex M. Arg., conhecido popularmente como pé-de-perdiz, é uma planta medicinal nativa do Cerrado, cuja raiz é utilizada na forma de decoctos para combater infecções do aparelho reprodutor masculino e feminino. A coleta da planta é realizada de forma extrativista e não há trabalhos a respeito da sua conservação. O objeto do trabalho foi estabelecer um protocolo de micropropagação de Croton antisyphiliticus. Foram avaliados o efeito de diferentes concentrações das citocininas, o tamanho do recipiente para o cultivo in vitro, o co-cultivo e a posição da gema em relação ao desenvolvimento dos explantes, bem como a influência do AIB no enraizamento in vitro e a aclimatização dos explantes. O melhor desenvolvimento in vitro foi obtido com explantes do tipo gema apical, co-cultivadas em meio MS suplementado com BAP (1µM), em frasco tipo pote. O enraizamento foi obtido em meio MS sem regulador vegetal e a aclimatização pode ser realizada em solo do cerrado com brotações sem a presença de raízes desenvolvidas in vitro.

Regeneração in vitro via organogênese direta de Bauhinia cheilantha

Bauhinia cheilantha, known as "pata-de-vaca", is of great economic and ethnopharmacological importance in the semiarid Brazilian. Seeds are dormant which makes it difficult to obtain uniform plants in a short time before this, our study aimed to establish a micropropagation protocol for the species. Cotyledonary and nodal segments of seedlings grown in vitro were inoculated on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP), thidiazuron (TDZ) or kinetin (KN) to induce adventitious shoot regeneration. In the rooting phase, different concentrations of indole-3-butyric acid (IBA) and the activated charcoal were tested. The nodal segments showed organogenic capacity greater than the cotyledonary segment. The highest number of shoots (4.3 and 2.1) was obtained at 1.0mg L-1 TDZ and 1.5mg L-1 BAP, respectively. However, in the presence of TDZ was observed the smaller shoots.The use of 2.0mg L-1 IBA within activated charcoal (AC) promoted the highest percentage of rooting (about 60.0%) and number of adventitious roots (2.5). The rooted shoots were transferred to greenhouse and successfully acclimatized.

Bauhinia cheilantha, conhecida como "pata-de-vaca", possui grande relevância econômica e etnofarmacológica no semiárido brasileiro. Nas suas sementes constatou-se dormência, o que dificulta a obtenção de plantas uniformes e em curto período de tempo, diante disso, o presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo de micropropagação para a espécie. Os segmentos cotiledonar e nodal de plântulas emergidas in vitro foram inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP), thidiazuron (TDZ) ou cinetina (KIN) para induzir a regeneração de brotos adventícios. Na fase de enraizamento foram testadas diferentes concentrações de ácido indol-3-butírico (AIB) e de carvão ativado. Nos segmentos nodais houve maior capacidade organogênica do que no segmento cotiledonar. O maior número de brotos (4,3 e 2,1) foi obtido com 1,0mg L-1 de TDZ e 1,5mg L-1 de BAP, respectivamente. No entanto, na presença de TDZ foram observadas as menores brotações. A presença de 2,0mg L-1 de AIB com carvão ativado (CA) promoveu a maior porcentagem de enraizamento (cerca de 60,0%) e maior número de raízes adventícias (2,5). As brotações enraizadas foram transferidas para casa de vegetação e aclimatizadas com sucesso.

Regeneração in vitro via organogênese direta de Bauhinia cheilantha

Bauhinia cheilantha, known as "pata-de-vaca", is of great economic and ethnopharmacological importance in the semiarid Brazilian. Seeds are dormant which makes it difficult to obtain uniform plants in a short time before this, our study aimed to establish a micropropagation protocol for the species. Cotyledonary and nodal segments of seedlings grown in vitro were inoculated on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP), thidiazuron (TDZ) or kinetin (KN) to induce adventitious shoot regeneration. In the rooting phase, different concentrations of indole-3-butyric acid (IBA) and the activated charcoal were tested. The nodal segments showed organogenic capacity greater than the cotyledonary segment. The highest number of shoots (4.3 and 2.1) was obtained at 1.0mg L-1 TDZ and 1.5mg L-1 BAP, respectively. However, in the presence of TDZ was observed the smaller shoots.The use of 2.0mg L-1 IBA within activated charcoal (AC) promoted the highest percentage of rooting (about 60.0%) and number of adventitious roots (2.5). The rooted shoots were transferred to greenhouse and successfully acclimatized.

Bauhinia cheilantha, conhecida como "pata-de-vaca", possui grande relevância econômica e etnofarmacológica no semiárido brasileiro. Nas suas sementes constatou-se dormência, o que dificulta a obtenção de plantas uniformes e em curto período de tempo, diante disso, o presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo de micropropagação para a espécie. Os segmentos cotiledonar e nodal de plântulas emergidas in vitro foram inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP), thidiazuron (TDZ) ou cinetina (KIN) para induzir a regeneração de brotos adventícios. Na fase de enraizamento foram testadas diferentes concentrações de ácido indol-3-butírico (AIB) e de carvão ativado. Nos segmentos nodais houve maior capacidade organogênica do que no segmento cotiledonar. O maior número de brotos (4,3 e 2,1) foi obtido com 1,0mg L-1 de TDZ e 1,5mg L-1 de BAP, respectivamente. No entanto, na presença de TDZ foram observadas as menores brotações. A presença de 2,0mg L-1 de AIB com carvão ativado (CA) promoveu a maior porcentagem de enraizamento (cerca de 60,0%) e maior número de raízes adventícias (2,5). As brotações enraizadas foram transferidas para casa de vegetação e aclimatizadas com sucesso.

Promalin® (GA4+7 + 6BA) effect on yielding and development of apple fruits cv. Royal Gala / Efeito da Promalina® (GA4+7 + 6BA) na produção e desenvolvimento dos frutos da macieira cv. Royal Gala

This research evaluated the efficiency of Promalina® on fruit development, russeting incidence and yield of Royal Gala/M-9 apple. It was carried out at Estação Experimental de Fruticultura de Clima Temperado of Embrapa Uva e Vinho, in Vacaria, RS, Southern of Brazil, from August/2007 to February/2008. The experimental design was completely randomized in blocks, in factorial scheme 2 x 4 with 8 treatments, 5 replicates and 1 useful plant per plot. Two application times (1 - at full bloom and 2 - at petals fall) were combined with four concentrations of Promalina® (1 water (control); 2 0.5 ml L-1; 3 - 1.0 ml L-1 and 4 - 2.0 ml L-1). There was no influence of the application time and concentrations of Promalina® on Royal Gala apple production, fruits fresh mass and russeting incidence. Plants treated with Promalina® in petals fall produced fruits with largest length and diameter. Promalina® at 2.0 ml L-1 increased the fruit length and percentage of 65-70 mm diameter class. There was an increase in the C/D rate of the apples with Promalina® application.

O trabalho avaliou a eficiência da Promalina® no desenvolvimento dos frutos, incidência de russeting e produção da macieira Royal Gala/M-9, realizado na Estação Experimental de Fruticultura de Clima Temperado da Embrapa Uva e Vinho, em Vacaria, RS, de agosto de 2007 a fevereiro de 2008. Foi utilizado o delineamento experimental em blocos casualizados em um esquema fatorial 2 x 4, com oito tratamentos, cinco repetições e uma planta útil por parcela. Foram combinadas duas épocas de aplicação (1 - na plena floração e 2 - na queda das pétalas) com quatro concentrações de Promalina® (1 - água (testemunha); 2 - 0,5 ml L-1; 3 - 1,0 ml L-1; 4 - 2,0 ml L-1). Não houve influência da época de aplicação e das concentrações de Promalina® na produção da cv. Royal Gala, massa fresca dos frutos e incidência de russeting. Plantas tratadas com Promalina® na queda das pétalas produziram frutos com maior comprimento e diâmetro. A Promalina® a 2,0 ml L-1 de água aumentou o comprimento e a porcentagem de frutos da classe 65-70 mm de diâmetro. Houve aumento da relação C/D dos frutos com a aplicação de Promalina®.

Efeitos de citocininas sobre a anatomia foliar e o crescimento de Annona glabra L. durante o cultivo in vitro e ex vitro / Effects of cytokinins on the leaf anatomy and growth of Annona glabra L. during in vitro and ex vitro culture

O efeito de diferentes fontes de citocininas durante o cultivo in vitro de A. glabra sobre características anatômicas de folhas e crescimento das plantas foi avaliado neste trabalho. BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (cinetina) induziram aumento na espessura do mesofilo, enquanto que ZEA (zeatina) promoveu aumento na densidade e no índice estomático e no desenvolvimento do sistema vascular de folhas. A utilização de KIN e BAP proporcionou maior desenvolvimento e taxa de sobrevivência das plantas durante as fases de enraizamento e aclimatização.(AU)

The effect of different sources of cytokinins during the in vitro cultivation of A. glabra on anatomical characteristics of leaves and plant growth was evaluated in this work. BAP (6-benzilaminopurine) and KIN (kinetin) induced an increase in leaf mesophyll thickness, while the ZEA (zeatin) promoted an increase in density and stomatic index and development of leaves vascular system. The utilization of KIN and BAP improved higher plant development and survival rate during the acclimatization and rooting phases.(AU)

Organogênese do caquizeiro a partir de segmentos radiculares

The production of japanese persimmon (Diospyros kaki) plants by grafting on seedling rootstocks results on vegetative variability problems. The goal of this work was to develop a protocol for bud regeneration using buds obtained by indirect root organogenesis. Explants were obtained by root segments of embryos germinated from mature seeds. The breeds were isolated in vitro on MS½NO3 medium. Seeds were sterilized by immersion in 70% ethanol for 1 min following immersion in 2.5% sodium hypochlorite for 20 min. They were then washed four times with autoclaved water. In the first experimento, root segments of 2cm were isolated in MS½NO3 culture medium supplemented with 0.01µM indoleacetic acid and four cytokinins (zeatin, 6-benzylaminopurine, 2-isopentenyladenine and thidiazuron) at concentrations of 1 and 10µM each. The second experiment evaluated four periods in media contaning 10µM indolebutyric acid (0, 5, 10 and 15 days) for shoot rooting. The highest bud regeneration (1.2 buds/explant) was observed when a combination of 1µM zeatin and 0.01µM indoleacetic acid was used. The juvenile buds obtained showed natural potential for rooting, but additional experiments are needed to confirm the auxin effects.

A produção de mudas de caquizeiro (Diospyros kaki) pelo processo da enxertia sobre porta-enxertos provenientes de sementes, ocasiona problemas de desuniformidade vegetativa. O objetivo do trabalho foi contribuir para o desenvolvimento de um protocolo para a regeneração de brotações de caquizeiro do tipo café, a partir de raízes por organogênese indireta. Segmentos radiculares obtidos de embriões germinados in vitro foram isolados de sementes de frutos maduros em meio MS½NO3. As sementes receberam assepsia pela imersão em etanol 70% por um minuto, em solução de hipoclorito de sódio 2,5% por 20 minutos e quatro lavagens em água esterilizada. No primeiro experimento, os segmentos radiculares de 2cm foram isolados em meio de cultura MS½NO3 acrescido de 0,01µM de ácido indolacético e quatro tipos de citocininas nas concentrações 1 e 10µM: zeatina, 6-benzilaminopurina, 2-isopenteniladenina e thidiazuron. No segundo experimento, para o enraizamento das brotações, foram testados quatro períodos de permanência em meio com 10µM de ácido indolbutírico: 0, 5 10 e 15 dias. A maior regeneração de brotos (1,2 brotos por explante) ocorreu na combinação 1µM de zeatina com 0,01µM de ácido indolacético. As brotações juvenis obtidas possuem potencial natural para o enraizamento, sendo necessário novos estudos para confirmar o efeito da aplicação de auxinas.

Organogênese do caquizeiro a partir de segmentos radiculares

The production of japanese persimmon (Diospyros kaki) plants by grafting on seedling rootstocks results on vegetative variability problems. The goal of this work was to develop a protocol for bud regeneration using buds obtained by indirect root organogenesis. Explants were obtained by root segments of embryos germinated from mature seeds. The breeds were isolated in vitro on MS½NO3 medium. Seeds were sterilized by immersion in 70% ethanol for 1 min following immersion in 2.5% sodium hypochlorite for 20 min. They were then washed four times with autoclaved water. In the first experimento, root segments of 2cm were isolated in MS½NO3 culture medium supplemented with 0.01µM indoleacetic acid and four cytokinins (zeatin, 6-benzylaminopurine, 2-isopentenyladenine and thidiazuron) at concentrations of 1 and 10µM each. The second experiment evaluated four periods in media contaning 10µM indolebutyric acid (0, 5, 10 and 15 days) for shoot rooting. The highest bud regeneration (1.2 buds/explant) was observed when a combination of 1µM zeatin and 0.01µM indoleacetic acid was used. The juvenile buds obtained showed natural potential for rooting, but additional experiments are needed to confirm the auxin effects.

A produção de mudas de caquizeiro (Diospyros kaki) pelo processo da enxertia sobre porta-enxertos provenientes de sementes, ocasiona problemas de desuniformidade vegetativa. O objetivo do trabalho foi contribuir para o desenvolvimento de um protocolo para a regeneração de brotações de caquizeiro do tipo café, a partir de raízes por organogênese indireta. Segmentos radiculares obtidos de embriões germinados in vitro foram isolados de sementes de frutos maduros em meio MS½NO3. As sementes receberam assepsia pela imersão em etanol 70% por um minuto, em solução de hipoclorito de sódio 2,5% por 20 minutos e quatro lavagens em água esterilizada. No primeiro experimento, os segmentos radiculares de 2cm foram isolados em meio de cultura MS½NO3 acrescido de 0,01µM de ácido indolacético e quatro tipos de citocininas nas concentrações 1 e 10µM: zeatina, 6-benzilaminopurina, 2-isopenteniladenina e thidiazuron. No segundo experimento, para o enraizamento das brotações, foram testados quatro períodos de permanência em meio com 10µM de ácido indolbutírico: 0, 5 10 e 15 dias. A maior regeneração de brotos (1,2 brotos por explante) ocorreu na combinação 1µM de zeatina com 0,01µM de ácido indolacético. As brotações juvenis obtidas possuem potencial natural para o enraizamento, sendo necessário novos estudos para confirmar o efeito da aplicação de auxinas.

Indução de brotações em explantes de segmentos de folhas de plântulas de urucueiro em diferentes citocininas

Excised leaf explants of annatto (Bixa orellana L.) seedlings were cultivated on a Murashige & Skoog basal medium containing benzylaminopurine (BAP), kinetin (KN) and isopentenyl-adenine (2iP) individually or in combination, each at concentration of 0.5mg/l, with the purpose of evaluated the best cytokinins or cytokinins combination for shoot bud formation. After 60 days, regenerated shoots were transferred to half strenght MS medium without growth regulators. Best shoots were observed where KN and BAP were added in combination. Isolated KN was ineffective for shoot bud formation. The maximum average number of shoot buds per leaf explant was obtained on medium with BAP, KN and 2iP in combination and on medium supplied of isolated BAP.

Segmentos de folhas de plântulas de urucum (Bixa orellana L), foram cultivados in vitro, em um meio básico idealizado por Murashige & Skoog (1962), suplementado com 0,5mg/l dos reguladores do crescimento, benzilaminopurina (BAP), cinetina (KN) e isopentenil-adenina (2iP), isolados ou combinados entre si, com o objetivo de avaliar qual a melhor citocinina ou combinação destas para indução de brotações de boa qualidade visando à micropropagação. Após 60 dias de cultivo, as gemas obtidas foram transferidas para um meio MS modificado, contendo a metade da formulação de sais minerais, sem a suplementação de reguladores do crescimento. Gemas de melhor qualidade foram obtidas nos tratamentos onde a KN e o BAP estavam em combinação. A KN sozinha não foi eficiente na indução de brotações. O maior número de gemas por explante foi obtido com KN, BAP e 2iP e no tratamento com apenas BAP.

Indução de brotações em explantes de segmentos de folhas de plântulas de urucueiro em diferentes citocininas

Excised leaf explants of annatto (Bixa orellana L.) seedlings were cultivated on a Murashige & Skoog basal medium containing benzylaminopurine (BAP), kinetin (KN) and isopentenyl-adenine (2iP) individually or in combination, each at concentration of 0.5mg/l, with the purpose of evaluated the best cytokinins or cytokinins combination for shoot bud formation. After 60 days, regenerated shoots were transferred to half strenght MS medium without growth regulators. Best shoots were observed where KN and BAP were added in combination. Isolated KN was ineffective for shoot bud formation. The maximum average number of shoot buds per leaf explant was obtained on medium with BAP, KN and 2iP in combination and on medium supplied of isolated BAP.

Segmentos de folhas de plântulas de urucum (Bixa orellana L), foram cultivados in vitro, em um meio básico idealizado por Murashige & Skoog (1962), suplementado com 0,5mg/l dos reguladores do crescimento, benzilaminopurina (BAP), cinetina (KN) e isopentenil-adenina (2iP), isolados ou combinados entre si, com o objetivo de avaliar qual a melhor citocinina ou combinação destas para indução de brotações de boa qualidade visando à micropropagação. Após 60 dias de cultivo, as gemas obtidas foram transferidas para um meio MS modificado, contendo a metade da formulação de sais minerais, sem a suplementação de reguladores do crescimento. Gemas de melhor qualidade foram obtidas nos tratamentos onde a KN e o BAP estavam em combinação. A KN sozinha não foi eficiente na indução de brotações. O maior número de gemas por explante foi obtido com KN, BAP e 2iP e no tratamento com apenas BAP.