Analysis of the toxicological and pharmacokinetic profile of Kaempferol-3-O-ß-D-(6"-E-p-coumaryl) glucopyranoside - Tiliroside: in silico, in vitro and ex vivo assay / Análise do perfil toxicológico e farmacocinético de Kaempferol-3-O-ß-D- (6 "-E-p-cumaril) glucopiranosídeo - Tilirosídeo: ensaio in silico, in vitro e ex vivo

Abstract Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as "pitó". This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O-β-D-(6"-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.

Resumo O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como "pitó". Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O-β-D- (6 "-Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.

Analysis of the toxicological and pharmacokinetic profile of Kaempferol-3-O-β-D-(6"-E-p-coumaryl) glucopyranoside - Tiliroside: in silico, in vitro and ex vivo assay / Análise do perfil toxicológico e farmacocinético de Kaempferol-3-O-β D-(6"-E-p-cumaril) glucopiranosídeo - Tilirosídeo: ensaio in silico, in vitro e ex vivo

Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as "pitó". This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O-β-D-(6”-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.

O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como “pitó”. Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O-β-D- (6 ”-Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.

Analysis of the toxicological and pharmacokinetic profile of Kaempferol-3-O-β-D-(6"-E-p-coumaryl) glucopyranoside - Tiliroside: in silico, in vitro and ex vivo assay / Análise do perfil toxicológico e farmacocinético de Kaempferol-3-O-β D-(6"-E-p-cumaril) glucopiranosídeo - Tilirosídeo: ensaio in silico, in vitro e ex vivo

Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as "pitó". This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O-β-D-(6”-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.(AU)

O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como “pitó”. Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O-β-D- (6 ”-Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.(AU)

Diferentes análises de qualidade do hamburguer de pupunha sem glúten / Different quality analyses of gluten-free pupunha hamburger

No Brasil e no mundo é comum a oferta de produtos veganos com características complementares, seja para atender o público interessado em produtos naturais, sem aditivos e/ou orgânicos; ou por questões religiosas. A utilização da pupunha como base para a elaboração de hambúrgueres, com a substituição da farinha de trigo pela farinha de linhaça, mostrou um elevado potencial alimentício e socioeconômico de caráter regional. Diante isso, objetivou-se elaborar duas formulações de hambúrguer vegano de pupunha (f1 e f2) e realizar análises microbiológicas, físico-químicas e sensoriais, bem como avaliar o rendimento e o custo. As formulações apresentaram, nas análises físico-químicas, teores inferiores de proteínas (6,3 e 4,5% para f1 e f2, respectivamente) quando comparados com outros hambúrgueres de origem animal. Além disso, as formulações f1 e f2 apresentaram os seguintes teores, respectivamente: 58,6 e 58,5% para umidade, 13,4 e 11,5% para lipídios, 1,8 e 2,8% para cinzas, 18,6 e 21,8% para carboidratos e valor energético de 231,6 e 214,6 kcal. A análise sensorial demonstrou que a utilização de farinhas diferentes não interfere nas escolhas futuras dos consumidores. As formulações não apresentaram contaminação microbiológica, sendo ausente para salmonella (aus/25g), aeróbios mesófilos/g e escherichia coli/g, onde foram encontrados valores abaixo dos permitidos pela legislação. O estudo demonstrou um potencial produto alimentício para a indústria alimentícia, apresentando pouca perda de rendimento após cocção e oferecendo, também, uma opção mercadológica de baixo custo para três nichos: veganismo, doentes celíacos e produtos regionais.

In Brazil and in the world, it is common to offer vegan products with complementary characteristics, either to serve the public interested in natural products, without additives and/or organics, or for religious reasons. The use of peach palm as a basis for the elaboration of a hamburgers with the substitution of wheat flour for flaxseed flour showed a high food and socioeconomic potential with regional character. Thus, this study aimed to elaborate two formulations of pupunha vegan hamburger (f1 and f2) and perform microbiological, physical-chemical, and sensorial analyzes, as well as evaluate the yield and cost. The products showed, in the physical-chemical analyzes, lower protein contents (6.3 and 4.5% for f1 and f2, respectively) when compared to other hamburgers of animal origin. In addition, the formulations f1 and f2 presented the following levels, respectively: 58.6 and 58.5% for moisture, 13.4 and 11.5 for lipids 1.8 and 2.8 for ash,18.6 and 21.8% for carbohydrates, and energetic value of (231.6 and 214.6 Kcal. Sensory analysis showed that the use of different flours does not interfere with future consumer choices. The formulations showed no microbiological contamination, being absent of Salmonella (aus/25g), mesophilic Aerobes/g, and Escherichia coli/g, with values below those allowed by legislation. It demonstrated a potential food product for the food industry, presenting little loss of income after cooking, and also offering a low-cost marketing option for three niches: veganism, celiac patients, and regional products.

Cyp19 expression and sex change timing in captive-bred false clownfish / Expressão de Cyp19 e o período da mudança de sexo em peixes-palhaço falsos criados em cativeiro

The false clown anemonefish (Amphiprion ocellaris) is a protandrous hermaphrodite with a distinctive reproductive behavior. This study elucidates the genetic mechanisms and timing of sex changes in captive-bred A. ocellaris by examining the expression of key genes involved in this process, specifically cyp19a1a and cyp19a1b. Gonadal histological analyses and gene expression studies were conducted on subadult fish paired for 0, 1, 2, 3, 4, 5, and 16 months. Our findings reveal that alterations in cyp19 gene expression coincide with a pairing period starting after 3 months. Both cyp19a1a and cyp19a1b expression levels were significantly elevated in paired females compared with their male counterparts and unpaired controls. Histological investigations demonstrated that sex conversion to females occurred during the 3-month pairing period. This study highlights the crucial role of cyp19a1a and cyp19a1b in the sex change process of A. ocellaris and indicates that a minimum of 5 months of pairing is necessary for completing the sex change.

O peixe-palhaço falso (Amphiprion ocellaris) é um hermafrodita protândrico com um comportamento reprodutivo distintivo. Este estudo esclarece os mecanismos genéticos e o período das mudanças de sexo em A. ocellaris criados em cativeiro, examinando a expressão de genes-chave envolvidos nesse processo, especificamente cyp19a1a e cyp19a1b. Análises histológicas gonadais e estudos de expressão gênica foram conduzidos em peixes subadultos emparelhados por 0, 1, 2, 3, 4, 5 e 16 meses. Os resultados revelam que alterações na expressão do gene cyp19 coincidem com um período de emparelhamento a partir de 3 meses. Os níveis de expressão de cyp19a1a e cyp19a1b foram significativamente elevados em fêmeas emparelhadas em comparação com seus homólogos masculinos e controles não-emparelhados. Investigações histológicas demonstraram que a conversão sexual para fêmeas ocorreu durante o período de emparelhamento de 3 meses. Este estudo destaca o papel crucial de cyp19a1a e cyp19a1b no processo de mudança de sexo de A. ocellaris e indica que um mínimo de 5 meses de emparelhamento é necessário para concluir a mudança de sexo.

Óleos essenciais como suplementação na dieta de vacas leiteiras e a sua influência na composição do leite / Use of essential oils as supplementation in the diet of dairy cows at IFMG ­ campus Bambuí and its influence on milk production and composition / Uso de aceites esenciales como suplemento en la dieta de las vacas lecheras en IFMG - campus Bambuí y su influencia en la producción y composición de la leche

Este estudo teve como intuito apresentar pesquisas e dados relacionados à inclusão de óleos essenciais microencapsulados na dieta de vacas leiteiras, realizando, assim, levantamento de dados sobre a produtividade do leite e também sobre a sua composição e qualidade, efetuando comparações entre vacas suplementadas e não suplementadas. A pesquisa foi realizada no setor de bovinocultura leiteira do IFMG - Campus Bambuí, utilizando-se 40 vacas com diferentes graus de sangue e com variações entre 27 e 300 dias em lactação. As vacas foram mantidas em sistema semi-intensivo, pois tinham acesso aos piquetes rotacionados e recebiam suplementação de silagem de milho e concentrado antes de se iniciar as ordenhas. O trabalho baseia-se em uma comparação de antes e após o uso de óleos essenciais. Diante disso, o estudo teve duração total de 82 dias, com as coletas de dados diárias sobre o consumo alimentar das vacas, produtividade e coleta de amostras de leite destinadas à análise no LaQal (Laboratório de Análise de Qualidade de Água e Leite) do IFMG - Campus Bambuí. Os animais receberam 5 g/vaca/dia de óleos essenciais microepsulados, um produto comercial com os seguintes princípios ativos: carvacrol, cinamaldeido, eugenol, oleoresina e veículo. Os dados foram tabulados e transformados em valores nominais e percentuais para, a partir daí, serem construídos os gráficos com a finalidade de facilitar a interpretação dos resultados. Portanto, no presente trabalho, realizou-se uma análise exploratória dos dados de grau de sangue, produção de leite diária, composição do leite, contagem de células somáticas (CCS) e consumo alimentar de silagem de milho e concentrado. Ademais, o nível de significância adotado foi de 0,05% (valor-p=0,05). Utilizou-se o pacote dplyr, do programa estatístico R (R CORE TEAM, 2022), e, para análises, o teste-t de Student, utilizando-se a função t.test do pacote stats do programa estatístico R. Não foram obtidos resultados significantes sobre a produtividade do leite, nem sobre sua composição, CCS e consumo. Embora o produto comercial não tenha demonstrado influência sobre as análises realizadas, são necessários mais estudos para melhor conhecimento da sua ação e de seus beneficios para a produção animal.

This study aimed to present research and data related to the inclusion of microencapsulated essential oils in the diet of dairy cows, thus performing a survey of data on milk productivity and also on its composition and quality, making comparisons between supplemented and non-supplemented cows. The research was carried out the dairy cattle sector of the IFMG - Campus Bambuí, using 40 cows with different degrees of blood and with variations between 27 and 300 days in lactation. Cows were kept in a semi-intensive system, as they had access to rotated paddocks and received supplementation with corn silage and concentrate before starting milking. The work is based on a comparison of before and after the use of essential oils. Therefore, the study lasted a total of 82 days, with daily data collection on the cows' food consumption, productivity and collection of milk samples destined for analysis in the IFMG's LaQal (Laboratory for the Analysis of Water and Milk Quality) - Campus Bambui. The animals received 5 g/cow/day of microencapsulated essential oils, a commercial product with the following active ingredients: carvacrol, cinnamaldehyde, eugenol, oleoresin and vehicle. The data were tabulated and transformed into nominal values and percentages so that, from there, graphs could be constructed in order to facilitate the interpretation of the results. Therefore, in the present work, an exploratory analysis of blood grade data, daily milk production, milk composition, somatic cell count (SCC) and food consumption of corn silage and concentrate was carried out. Furthermore, the significance level adopted was 0.05% (p-value = 0.05). The dplyr package, from the R statistical program (R CORE TEAM, 2022), was used and, for analyses, Student's t-test, using the t.test function from the stats package of the R statistical program. significant results on milk productivity, nor on its composition, CCS and consumption. Although the commercial product has not shown influence on the analyzes carried out, further studies are needed to better understand its action and its benefits for animal production.

Este estudio tuvo como objetivo presentar investigaciones y datos relacionados con la inclusión de aceites esenciales microencapsulados en la dieta de las vacas lecheras, realizando así un levantamiento de datos sobre la productividad de la leche y también sobre su composición y calidad, haciendo comparaciones entre vacas suplementadas y no suplementadas. investigación se realizó en el sector de ganado lechero de la IFMG - Campus Bambuí, utilizando 40 vacas con diferentes grados de sangre y con variaciones entre 27 y 300 días en lactación. Las vacas se mantuvieron en un sistema semi-intensivo, ya que tenían acceso a potreros rotados y recibieron suplementación con ensilado de maíz y concentrado antes de iniciar el ordeño. El trabajo se basa en una comparación del antes y el después del uso de los aceites esenciales. Por lo tanto, el estudio duró un total de 82 días, con la recolección diaria de datos sobre el consumo de alimentos de las vacas, la productividad y la recolección de muestras de leche destinadas para análisis en el LaQal (Laboratorio de Análisis de Calidad de Agua y Leche) de la IFMG - Campus Bambuí. Los animales recibieron 5 g/vaca/día de aceites esenciales microencapsulados, producto comercial con los siguientes principios activos: carvacrol, cinamaldehído, eugenol, oleorresina y vehículo. Los datos fueron tabulados y transformados en valores nominales y porcentajes para que, a partir de ahí, se construyeran gráficas para facilitar la interpretación de los resultados. Por lo tanto, en el presente trabajo se realizó un análisis exploratorio de los datos de grado sanguíneo, producción diaria de leche, composición de la leche, conteo de células somáticas (RCS) y consumo alimentario de ensilado y concentrado de maíz. Además, el nivel de significancia adoptado fue de 0,05% (p-valor = 0,05). Se utilizó el paquete dplyr, del programa estadístico R (R CORE TEAM, 2022), y para los análisis, la prueba t de Student, utilizando la función t.test del paquete stats del programa estadístico R. No hubo resultados significativos en la productividad lechera, ni sobre su composición, CCS y consumo. Aunque el producto comercial no ha mostrado influencia en los análisis realizados, se necesitan más estudios para comprender mejor su acción y sus beneficios para la producción animal.

Effect of total hardness of water on juvenile mullets (Mugil liza) raised in fresh water / Efeito da dureza total em juvenis de tainha (Mugil liza) criados em água doce

The aim of this study was to evaluate the effects of three fresh-water samples with different hardness values (25, 250, and 750 mg L-1 CaCO3) and a control (sea water with salinity 15% and hardness 2500 ± 130.9 mg L-1 CaCO3) on Mugil liza (mullet) juveniles by conducting a long-term test (for 50 days). Zootechnical performance [weight gain (WG), feed conversion rate, specific growth rate, and survival (%)], stress indicator parameters (glucose), and physiological parameters in gill tissues were analyzed to determine the fresh-water hardness range that can allow the optimal survival, growth, and feed conversion for the species. Fish with a mean initial weight of 22 ± 2.84 g were maintained under constant conditions of temperature, pH, alkalinity, and ammonia concentration, and they were fed four times per day with a commercial diet. When evaluating zootechnical performance, only survival (%) was not significantly different among treatments. For the other variables­weight gain, feed conversion, and specific growth rate­the best results were found in the treatment with 15% salinity (control). Blood glucose levels in animals maintained at 15% salinity (control) were significantly lower than those observed in the other treatments. Histological analyses corroborated the zootechnical data, potentially indicating stress in fish maintained at very low and very high water hardness. In conclusion, for cultivating juvenile mullets in fresh water, the most suitable hardness value was 250 mg L-1 CaCO3, because the best final weight of fish was achieved in that condition.(AU)

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de três durezas diferentes de água doce (25, 250 e 750 mg.L-1 CaCO3) e controle (água do mar com salinidade 15 % e dureza 2500 ± 130,9 mg.L-1 CaCO3), em juvenis de tainha Mugil Liza , através de um teste de longo prazo (50 dias), avaliando o desempenho zootécnico (ganho de peso (GP), conversão alimentar (CA), taxa de crescimento específico (TCE) e sobrevivência (%)), parâmetros indicadores de estresse (glicose) e avaliação de parâme-tros fisiológicos nos tecidos das brânquias, a fim de determinar a faixa de dureza em água doce onde há melhor sobrevivência, crescimento e conversão alimentar dessa espécie. Os peixes com peso médio inicial de 22 ± 2,84g foram mantidos em condi-ções constantes de temperatura, pH, alcalinidade e amônia, e alimentados quatro vezes ao dia com dieta comercial. Ao avaliar o desempenho zootécnico apenas a sobrevivência (%) não foi significativamente diferente entre os tratamentos, porém, para as demais variáveis: ganho de peso (GP), conversão alimentar (CA) e taxa de crescimento específico (TCE) os melhores resul-tados foram encontrados no tratamento com salinidade 15 % (controle). A glicose no sangue dos animais mantidos a salini-dade 15 % (controle) foi significativamente menor em relação aos outros tratamentos. As análises histológicas corroboram os dados zootécnicos, indicando possivelmente stress nos peixes mantidos em durezas muito baixas e muito altas. Conclui-se que para cultivar juvenis de tainha em água doce, a dureza mais adequada é 250 mg.L-1 CaCO3, pois apresentou melhor peso final dentre as durezas avaliadas.(AU)

Genetic correlation between feed efficiency and carcass traits in Nellore cattle in Brazil / Correlação genética entre características de eficiência alimentar e de carcaça em bovinos da raça Nelore no Brasi

The aim was to estimate the genetic correlations between residual feed intake (RFI) and dry matter intake (DMI) with carcass finish (CF), rib eye area (REA), and marbling (MAR) of Nellore cattle. Data from 7,808 animals were considered. In addition, data from 2,261 females included in the complete database were also considered. Estimates of variance and covariance components, as well as heritabilities and genetic correlations were obtained by means of two-character analysis under animal model. Heritability estimates were found to be moderate for the RFI (0.22) and DMI (0.29) traits. It was observed that genetic correlation was close to zero for all traits, except between RFI and REA (-0.11). However, considering the female population, there was an increase in the estimated genetic correlation between RFI and DMI, although still a favorable genetic association of low magnitude (-0.30). There was also an increase in the genetic association of REA with RFI (-0.21). It can be concluded that the direct selection for RFI and DMI will not influence the CF, MAR, or REA of Nellore cattle. However, this selection may generate some favorable responses in MAR and REA in Nellore females.

Objetivou-se estimar as correlações genéticas entre consumo alimentar residual (CAR) e ingestão de matéria seca com acabamento de carcaça (ACAB), área de olho de lombo (AOL) e marmoreio (MAR) para bovinos da raça Nelore. Foram consideradas informações de 7.808 animais. Além disso foram consideradas informações de 2.261 animais fêmeas que compunham o banco de dados completo. As estimativas dos componentes de variâncias e covariâncias, bem como das herdabilidades e correlações genéticas foram obtidas por meio de análises bicaracterísticas sob modelo animal. Verificou-se que as estimativas de herdabilidade foram moderadas para as características de CAR (0,22) e IMS (0,29). Observou-se que as estimativas de correlação genética foram próximos a zero para todas as Características, exceto entre CAR e AOL (-0,11). No entanto, considerando a população de fêmeas, houve um aumento na estimativa de correlação genética com CAR e IMS, apesar de ainda ser uma associação genética favorável de baixa magnitude (-0,30). Também houve um aumento na associação genética da AOL com o CAR (-0,21). Conclui-se, assim, que a seleção direta para o CAR e IMS não influenciará no ACAB, MAR e AOL de bovinos da raça Nelore. No entanto, essa seleção poderá gerar alguma resposta favorável em MAR e AOL em fêmeas Nelore.

Phylogenetic classification of feline immunodeficiency virus

Background: The feline immunodeficiency virus (FIV) is responsible for a retroviral disease that affects domestic and wild cats worldwide, causing Feline Acquired Immunodeficiency Syndrome (FAIDS). FIV is a lentivirus from the family Retroviridae and its genome has 3 main structural genes: gag, pol and env. Phylogenetic studies have classified FIV into 7 subtypes according to the diversity among strains from the World, mainly in the env gene. Epidemiological analyses have demonstrated the high predominance of FIV-A and FIV-B. This in silico study aimed to perform a phylogenetic analysis to study FIV diversity worldwide. Materials, Methods & Results: A total of 60 whole genome sequences (WGS) and 122 FIV env gene sequences were included in 2 datasets, which were aligned using MAFFT version 7. Recombination among genomes and/or env genes was analyzed with RDP5 software. Phylogenetic analyses with both datasets were performed, after removing the recombinant sequences, by the W-IQ-TREE and constructed and edited by the FigTree. A total of 12 recombination events involving 19 WGS were detected. In addition, 27 recombination events involving 49 sequences were observed in the env gene. A high rate of recombinants was observed inter-subtypes (A/B and B/D) and intra-subtypes (A/A). All recombinants were removed from the subsequent phylogenetic analyses. Phylogenies demonstrated 6 distinct main clades, 5 from domestic cats (A, B, C, E, U) and 1 from wild cat sequences (W) in the WGS, as well as in the specific env gene analyses. Most clustered with subtype B sequences. In the WGS analysis, clade B had a prevalence of 65.9% Brazilian sequences (27/41) and 2.4% Japanese sequences (1/41). In the env gene analyses, clade B showed a prevalence of 43.8% of Brazilian sequences (32/73) and 20.5% of USA sequences (15/73). The results of both analyses also confirm the FIV-wide geographical distribution around the world. In the phylogenetic analyses carried out with WGS, sequences from China (1/41; 2.4%), Colombia (1/41; 2.4%) and the USA (1/41; 2.4%) were identified in clade A; sequence from Canada in clade C (1/41; 2.4%); sequence from Botswana belonged to clade E (1/41; 2.4%); sequences from Brazil clustered into clade U (2/41; 5% - data not yet published); and sequences belonging to the clade W were from Canada (1/41; 2.4%) and the USA (5/41; 12.3%). Specific env gene phylogenetic analyses showed sequences from Colombia (1/73; 1.4%), France (2/73; 2.7%), the Netherlands (3/73; 4.1%), Switzerland (2/73; 2.7%), USA (6/73; 8.3%), belonging to clade A; sequence from Canada belonging to clade C (1/73; 1.4%); sequences from Brazil belonging to clade U (2/73; 5% - data not yet published); and sequences belonging to clade W from the USA (6/73; 8.3%). Discussion: The results presented here demonstrate that FIV has a rapid viral evolution due to recombination and mutation events, more specifically in the env gene, which is highly variable. Currently, this retrovirus is classified into 7 subtypes (A, B, C, D, E, F and U-NZenv) according to their high genomic diversity. It also highlighted the importance of in silico sequence and phylogeny studies to demonstrate evolutionary processes. This was the first study to address the WGS FIV diversity with a phylogenetic approach.

Genetic diversity and molecular characterization of Cucumber mosaic cucumovirus (CMV) subgroup II infecting Spinach (Spinacia oleracea) and Pea (Pisum sativum) in Pothwar region of Pakistan / Diversidade genética e caracterização molecular do Cucumber mosaic cucumovirus (CMV) subgrupo II infectando espinafre (Spinacia oleracea) e ervilha (Pisum sativum) na região de Pothwar, Paquistão

Abstract Cucumber mosaic virus (CMV) is a tremendous threat to vegetables across the globe, including in Pakistan. The present work was conducted to investigate the genetic variability of CMV isolates infecting pea and spinach vegetables in the Pothwar region of Pakistan. Serological-based surveys during 2016-2017 revealed 31.70% overall CMV disease incidence from pea and spinach crops. Triple-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (TAS-ELISA) revealed that all the positive isolates belong to CMV subgroup II. Two selected cDNA from ELISA-positive samples representing each pea and spinach crops were PCR-amplified (ca.1100 bp) and sequenced corresponding to the CMV CP gene which shared 93.7% nucleotide identity with each other. Both the sequences of CMV pea (AAHAP) and spinach (AARS) isolates from Pakistan were submitted to GenBank as accession nos. MH119071 and MH119073, respectively. BLAST analysis revealed 93.4% sequence identity of AAHAP isolate with SpK (KC763473) from Iran while AARS isolate shared maximum identity (94.5%) with the strain 241 (AJ585519) from Australia and clustered with some reference isolates of CMV subgroup II from UK (Z12818) and USA (AF127976) in a Neighbour-joining phylogenetic reconstruction. A total of 59 polymorphic (segregating) sites (S) with nucleotide diversity (π) of 0.06218 was evident while no INDEL event was observed in Pakistani isolates. The evolutionary distance of Pakistani CMV isolates was recorded as 0.0657 with each other and 0.0574-0.2964 with other CMV isolates reported elsewhere in the world. A frequent gene flow (Fst = 0.30478 <0.33) was observed between Pakistani and earlier reported CMV isolates. In genetic differentiation analysis, the value of three permutation-based statistical tests viz; Z (84.3011), Snn (0.82456), and Ks* (4.04042) were non-significant. The statistical analysis revealed the values 2.02535, 0.01468, and 0.71862 of Tajima's D, Fu, & Li's F* and D* respectively, demonstrating that the CMV population is under balancing selection.

Resumo Cucumber mosaic cucumovirus (CMV) é uma tremenda ameaça aos vegetais em todo o mundo, inclusive no Paquistão. O presente trabalho foi conduzido para investigar a variabilidade genética de isolados de CMV infectando vegetais de ervilha e espinafre na região de Pothwar, Paquistão. Pesquisas com base em sorologia durante 2016-2017 revelaram 31,70% da incidência geral da doença por CMV em safras de ervilha e espinafre. O ensaio de imunoabsorção enzimática em sanduíche de anticorpo triplo (TAS-ELISA) revelou que todos os isolados positivos pertencem ao subgrupo II do CMV. Dois cDNA selecionados de amostras positivas para ELISA representando cada safra de ervilha e espinafre foram amplificados por PCR (ca.1100 pb) e sequenciados correspondendo ao gene CMV CP que compartilhou 93,7% de identidade de nucleotídeo um com o outro. Ambas as sequências de isolados de ervilha CMV (AAHAP) e espinafre (AARS) do Paquistão foram submetidas ao GenBank como nos de acesso. MH119071 e MH119073, respectivamente. A análise BLAST revelou 93,4% de identidade de sequência do isolado AAHAP com SpK (KC763473) do Irã, enquanto o isolado AARS compartilhou a identidade máxima (94,5%) com a cepa 241 (AJ585519) da Austrália e agrupada com alguns isolados de referência do subgrupo II de CMV do Reino Unido (Z12818) e EUA (AF127976) em uma reconstrução filogenética vizinha. Um total de 59 sítios polimórficos (segregantes) (S) com diversidade de nucleotídeos (π) de 0,06218 foi evidente, enquanto nenhum evento INDEL foi observado em isolados do Paquistão. A distância evolutiva de isolados de CMV do Paquistão foi registrada como 0,0657 entre si e 0,0574-0,2964 com outros isolados de CMV relatados em outras partes do mundo. Um fluxo gênico frequente (Fst = 0,30478 < 0,33) foi observado entre os isolados de CMV do Paquistão e relatados anteriormente. Na análise de diferenciação genética, os valores de três testes estatísticos baseados em permutação viz, Z (84,3011), Snn (0,82456) e Ks * (4,04042) não foram significativos. A análise estatística revelou os valores 2,02535, 0,01468 e 0,71862 de Tajima's D, Fu, & Li's F * e D * respectivamente, demonstrando que a população de CMV está sob seleção de balanceamento.

Bee pollen from different floral species of the caatinga biome: determination of nutritional parameters / Pólen apícola de diferentes fontes florais da caatinga: determinação de parâmetros nutricionais

The objective of this work was to characterize nutritional parameters of bee pollens from plant species occurring in a semiarid region, in Picos, state of Piaui, Brazil. Bee pollen samples were collected from the experimental apiary of the Study Group on Bees from the Semiarid Region of Piaui (GEASPI/UFPI) and subjected to melissopalynological analysis to determine their botanical origins, and bromatological analysis (crude protein, lipids, fibers, and ash) in the Laboratory of Animal Nutrition of the Department of Zootechnics of the Federal University of Piaui (UFPI), in Teresina, Piaui (DZO/UFPI/Teresina). Six plant species (Aspilia sp., Senna obtusifolia,Mimosa pudica L., Cupheaericoides, Croton sp., and Mimosa caesalpiniifolia) were predominant for bee pollen production in the study area. Therefore, the nutritional compositions of the pollen produced in the Caatinga area varied according to their botanical origin, as shown by the crude protein (20.75% to 38.18%), fiber (0.53% to 1.37%), lipid (0.49% to 4.7%), and total mineral (2.56 to 4.17%) contents. Bromatological parameters also varied according to the botanical origin of the pollens evaluated. The study region has considerable diversity of pollinator plant species that provide bee pollens with a wide spectrum of nutritional characteristics.(AU)

O objetivo do trabalho foi caracterizar, por meio de parâmetros nutricionais, amostras de pólen apícola pro-venientes de espécies vegetais ocorrentes em uma região semiárida, no município de Picos, Piauí. As amostras de pólen apícola foram coletadas do apiário experimental do Grupo de Estudos sobre Abelhas do Semiárido Piauiense (GEASPI/UFPI) e submetidas: 1. à análise melissopalinológica para a determinação das origens botânicas; e 2. às análises broma-tológicas (proteína bruta, lipídeos, fibras e cinzas) no Laboratório de Nutrição Animal do Departamento de Zootecnia (DZO/UFPI/Teresina). Constatou-se que existem seis espécies (Aspilia sp., Senna obtusifolia,Mimosa pudica L., Cupheaericoides, Croton sp. e Mimosa caesalpiniifolia) vegetais predominantes na produção de pólen apícola na área de estudo e assim, o pólen apícola produzido em uma área de Caatinga do município de Picos apresentou composição nutricional que variou de acordo com sua origem botânica: teor de proteína bruta (20,75 a 38,18%), a quantidade de fibras (0,53 a 1,37%), o teor de lipídeos (0,49 a 4,7%) e a quantidade de minerais totais (2,56 a 4,17%). Observou-se que os parâme-tros bromatológicos do pólen apícola variaram de acordo com a origem botânica do produto. Concluiu-se que a região apresenta considerável diversidade de espécies vegetais poliníferas que concedem ao pólen apícola um amplo espectro de características nutricionais.(AU)

Refrigeração de sêmen canino em meio diluente à base de água de coco (Cocos nucifera) natural / Canine semen refrigeration in a natural coconut water (Cocos nucifera)-based extender / Refrigeración de semen canino en un medio diluyente natural a base de agua de coco (Cocos nucifera)

A inseminação artificial em cadelas contribui para o melhoramento genético da espécie, previne algumas doenças sexualmente transmissíveis a partir da cópula e possibilita a reprodução de animais que não poderiam copular de forma natural, seja por motivos anatômicos, geográficos ou comportamentais. Todavia, nem sempre é possível utilizar o sêmen fresco, sendo assim necessário um diluente para resfriar e mantê-lo viável por determinado período. Diante disso, o objetivo com este trabalho foi analisar o sêmen canino diluído em água de coco e refrigerado, à 5 ºC em diferentes tempos. Foram utilizados cinco cães da raça Hounds do Brasil, realizando três colheitas de sêmen de cada animal, com intervalos de sete dias. Os ejaculados foram mantidos a temperatura de 37ºC e realizado análises macroscópicas (volume, cor, aspecto e odor) e microscópicas (motilidade, vigor, concentração e morfologia espermática). Em seguida, os ejaculados foram diluídos em água de coco natural a uma concentração de 200 milhões de espermatozoides/mL, e mantidos à temperatura de 5 °C, por até 72 horas. Nos intervalos de seis, doze, vinte e quatro, trinta e seis, quarenta e oito, e setenta e duas horas, as amostras foram avaliadas quanto a motilidade e vigor espermático. Os ejaculados frescos apresentaram em média volume de 6,2 mL, cor branca, aspecto aquoso a leitoso, odor "sui generis", motilidade espermática de 89,5 %, vigor espermático 4,3, concentração média de 418 x106espermatozoides/mL e 7,3% de alterações patológicas. Após o início do resfriamento à 5 ºC, os valores de motilidade e vigor diminuíram com o passar do tempo, sendo os menores valores encontrados após 48 e 72 horas. O diluente a água de coco in natura mostrou-se eficiente para refrigeração de sêmen canino, à 5 ºC, conservando-o por um período de até 36h após a colheita, conforme preconizado pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal.(AU)

improvement of the species, prevents some sexually transmitted diseases through copulation and allows the reproduction of animals that could not copulate naturally, either for anatomical, geographic or behavioral reasons. However, it is not always possible to use fresh semen, thus requiring a diluent to cool and keep it viable for a certain period. Therefore, the objective of this work was to analyze canine semen diluted in coconut water and refrigerated at 5 ºC at different times. Five Brazilian Hounds were used, performing three semen collections from each animal, with intervals of seven days. The ejaculates were kept at a temperature of 37 ºC and macroscopic (volume, color, appearance and odor) and microscopic (motility, vigor, concentration and sperm morphology) analyzes were performed. Then, the ejaculates were diluted in natural coconut water at a concentration of 200 million sperm/mL, and kept at a temperature of 5 °C for up to 72 hours. At intervals of six, twelve, twenty-four, thirty-six, forty-eight, and seventy-two hours, samples were evaluated for sperm motility and vigor. Fresh ejaculates had an average volume of 6.2 mL, white color, watery to milky appearance, "sui generis" odor, 89.5% sperm motility, 4.3 sperm vigor, average concentration of 418 x106 spermatozoa/mL and 7.3%pathological changes. After the beginning of cooling at 5 °C, the values of motility and vigor decreased over time, with the lowest values found after 48 and 72 hours. The in natura coconut water extender proved to be efficient for cooling canine semen at5 ºC, keeping it for a period of up to 36 hours after harvest, as recommended by the Brazilian College of Animal Reproduction.(AU)

Artificial insemination in bitches contributes to the genetic La inseminación artificial en perras contribuye a la mejora genética de la especie, previene algunas enfermedades de transmisión sexual a través de la cópula y permite la reproducción de animales que no podrían copular de forma natural, ya sea por razones anatómicas, geográficas o de comportamiento. Sin embargo, no siempre es posible utilizar semen fresco, por lo que se requiere un diluyente para enfriarlo y mantenerlo viable durante un cierto período. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue analizar semen canino diluido en agua de coco y refrigerado a 5 ºC en diferentes tiempos. Se utilizaron cinco sabuesos brasileños, realizándose tres colectas de semen de cada animal, con intervalos de siete días. Los eyaculados se mantuvieron a una temperatura de 37 ºC y se realizaron análisis macroscópicos (volumen, color, apariencia y olor) y microscópicos (motilidad, vigor, concentración y morfología espermática). Luego, los eyaculados se diluyeron en agua de coco natural a una concentración de 200 millones de espermatozoides/mL y se mantuvieron a una temperatura de 5 °C hasta por 72 horas. A intervalos de seis, doce, veinticuatro, treinta y seis, cuarenta y ocho y setenta y dos horas, se evaluó la motilidad y el vigor de los espermatozoides en las muestras. Los eyaculados frescos tuvieron un volumen promedio de 6,2 mL, color blanco, apariencia acuosa a lechosa, olor "sui generis", motilidad espermática de 89,5%, vigor espermático de 4,3, concentración promedio de 418 x106 espermatozoides/mL y cambios patológicos de 7,3%. Después del inicio del enfriamiento a 5 °C, los valores de motilidad y vigor disminuyeron con el tiempo, encontrándose los valores más bajos a las 48 y 72 horas. El diluyente de agua de coco in natura demostró ser eficaz para enfriar el semen canino a5 ºC, manteniéndolo por un período de hasta 36 horas después de la cosecha, según lo recomendado por el Colegio Brasileño de Reproducción Animal.(AU)

Relationship between vitamin D and physical activity: systematic review and meta-analysis / Relação entre vitamina D e atividade física: revisão sistemática e meta análise

Vitamin D plays an important role in immune function and inflammation and the physical activity demonstrate relationship near to syntheses of vitamin D, considering to necessary to factors immunologics, environmental and physical. We searched five databases through February 20, 2021. Two reviewers screened the studies, collected data, assessed the risk of bias, and ranked the evidence for each outcome across the studies, independently and in duplicate. The prespecified endpoints of interest were Cardiorespiratory Fitness; Sunlight Exposure; Body Mass Index (BMI). We only included data from peer-reviewed articles in our primary analyses. In our primary analysis, there was a positive trend between serum 25(OH)D <20 ng/ml and body mass index, this result should be interpreted with caution, considering confidence intervals (RR 1.10 95% CI 0.37 to 1.83. We identified 4 high quality evidence that vitamin D levels and high physical activity required a direct relationship considering (four trials with 2,253) ; RR 0. (RR 0.0; 95% CI -0.15 to 0.15) (RR 0.59; 95% CI 0.43 to 0.75. Although the evidence available so far, from observational studies of medium quality, can be seen as showing a trend towards an association between sufficient serum levels of 25(OH)D and physical activity, this relationship has been shown. have a stimulating effect on vitamin D synthesis, the relationship of low body mass index with sufficient vitamin D levels is not based on solid evidence. We await results from ongoing studies to determine this effectiveness.

A vitamina D desempenha um papel importante na função imunológica e na inflamação e a atividade física demonstra relação próxima à síntese de vitamina D, sendo necessária a fatores imunológicos, ambientais e físicos. Pesquisamos cinco bancos de dados até 20 de fevereiro de 2021. Dois revisores examinaram os estudos, coletaram dados, avaliaram o risco de viés e classificaram as evidências para cada resultado nos estudos, de forma independente e em duplicata. Os endpoints de interesse pré-especificados foram aptidão cardiorrespiratória; Exposição à luz solar; Índice de Massa Corporal (IMC). Incluímos apenas dados de artigos revisados ​​por pares em nossas análises primárias. Em nossa análise primária, houve uma tendência positiva entre 25(OH)D sérico <20 ng/ml e índice de massa corporal., esse resultado deve ser interpretado com cautela, considerando os intervalos de confiança (RR 1,10 IC 95% 0,37 a 1,83. Identificamos 4 evidências de alta qualidade de que níveis de vitamina D e atividade física alta exigiam uma relação direta considerando (quatro ensaios com 2.253) ; RR 0 . (RR 0,0; IC 95% -0,15 a 0,15) (RR 0,59; IC 95% 0,43 a 0,75. Embora as evidências disponíveis até agora, de estudos observacionais de qualidade média, possam ser vistas como uma tendência de associação entre níveis séricos suficientes de 25(OH)D e atividade física, essa relação foi demonstrada. têm um efeito estimulante na síntese de vitamina D, a relação de baixo índice de massa corporal com níveis suficientes de vitamina D não é baseada em evidências sólidas. Aguardamos resultados de estudos em andamento para determinar essa eficácia.

Phenotypic and molecular characterization of fluoroquinolone resistant Pseudomonas aeruginosa isolates in Palestine

Abstract Fluoroquinolones are important antimicrobial agents for the treatment of Pseudomonas infections. A total of 11 isolates of P. aeruginosa were collected from different clinical samples from different medical centers in the North West Bank-Palestine during 2017. In this study, resistance to fluoroquinolones and secretions of -lactamases were detected by phenotypic methods, while presence of -lactamase gene sequences and other virulence factors were detected by PCR technique. PCR product for gyrA, parC and parE genes were sequenced for further analyses. The phylogenetic analyses, population diversity indices and haplotypes determination were conducted using computer programs MEGA version 6, DnaSP 5.1001 and median-joining algorithm in the program Network 5, respectively. Results of this study showed that the MIC for ciprofloxacin and norfloxacin had a range of 32-256 µg/ml. In addition, all isolates carried either exoT or exoT and exoY genes, different -lactamase genes and 82% of these isolates harbored class 1 integrons. Analyses of the gyrA, parC and parE sequences were found to be polymorphic, had high haplotype diversity (0.945-0.982), low nucleotide diversity (0.01225-0.02001) and number of haplotypes were 9 for each gyrA and parE genes and 10 haplotypes for parC gene. The founder haplotypes being Hap-1 (18%), Hap-2 (27.3%) and Hap-6 (9.1%) for gyrA, parC and parE genes, respectively. Two of ParE haplotypes were detected as indel haplotypes. The Median-joining- (MJ) networks constructed from haplotypes of these genes showed a star-like expansion. The neutrality tests (Tajimas D test and Fus Fs test) for these genes showed negative values. Palestinian fluoroquinolone resistant P. aeruginosa strains showed high MIC level for fluoroquinolones, -lactamase producers, carried type III secretion exotoxin-encoding genes, most of them had integrase I gene and had high level of mutations in QRDR regions in gyrA, parC and parE genes. All these factors may play an important role in the invasiveness of these strains and make them difficult to treat. Isolation of these strains from different medical centers, indicate the need for a strict application of infection control measures in Medical centers in the North West Bank-Palestine that aim to reduce expense and damage caused by P. aeruginosa infections. Molecular analyses showed that Palestinian fluoroquinolone resistant P. aeruginosa haplotypes are not genetically differentiated; however, more mutations may exist in these strains.

Resumo Fluoroquinolonas são agentes antimicrobianos importantes para o tratamento de infecções por Pseudomonas. Um total de 11 bacilos isolados de P. aeruginosa foram coletados de diferentes amostras clínicas provenientes de diferentes centros médicos na Cisjordânia-Palestina durante o ano de 2017. Neste estudo, resistência a fluoroquinolonas e secreções de -lactamases foram detectadas por métodos fenotípicos, enquanto a presença de sequências do gene -lactamase e outros fatores de virulência foram detectados pela técnica de PCR (Proteína C-reativa). O produto de PCR para os genes gyrA, parC e parE foram sequenciados para análises posteriores. As análises filogenéticas, os índices de diversidade populacional e a determinação de haplótipos foram realizados utilizando os softwares MEGA versão 6, DnaSP 5.1001 e o algoritmo de junção de mediana do programa Network 5, respectivamente. Os resultados deste estudo mostraram que a MIC para ciprofloxacina e norfloxacina tinha um intervalo de 32-256 µg/ml. Além disso, todos os bacilos isolados carregavam genes exoT ou exoT e exoY, genes de -lactamase diferentes e 82% desses isolados continham integrons de classe 1. As análises das sequências gyrA, parC e parE foram consideradas polimórficas, com alta diversidade de haplótipos (0,945-0,982), baixa diversidade de nucleotídeos (0,01225-0,02001) e o número de haplótipos foi de 9 para cada gene de gyrA e parE e 10 haplótipos para o gene parC. Os haplótipos fundadores são Hap-1 (18%), Hap-2 (27,3%) e Hap-6 (9,1%) para os genes gyrA, parC e parE, respectivamente. Dois dos haplótipos parE foram detectados como haplótipos InDel. As redes Median-joining (MJ) construídas a partir de haplótipos desses genes mostraram uma expansão semelhante à de uma estrela. Os testes de neutralidade (teste D de Tajima e teste Fs de Fu) para esses genes apresentaram valores negativos. As cepas palestinas de P. aeruginosa resistentes a fluoroquinolonas mostraram alto nível de MIC para fluoroquinolonas, produtores de -lactamase, genes codificadores de exotoxina de secreção tipo III, a maioria deles tinha o gene integrase I e tinha alto nível de mutações nas regiões QRDR nos genes gyrA, parC e parE. Todos esses fatores podem desempenhar um papel importante na invasão dessas cepas e torná-las difíceis de tratar. O isolamento dessas cepas em diferentes centros médicos, indica a necessidade de uma aplicação estrita de medidas de controle de infecção em centros médicos da Cisjordânia-Palestina que visam reduzir despesas e danos causados por infecções por P. aeruginosa. As análises moleculares mostraram que os haplótipos de P. aeruginosa resistentes à fluoroquinolona palestina não são geneticamente diferenciados; no entanto, mais mutações podem existir nessas cepas.

Use of melatonin as an inhibitor of apoptotic process for cryopreservation of zebrafish (Danio rerio) embryos

Abstract This study investigated the use of melatonin to arrest the effects of apoptosis in vitrified zebrafish (D. rerio) embryos. Dechorionated embryos at 22-24 somite-stage were divided (n = 60/treatment) into a non-vitrified (Control Group, 0 M melatonin) and vitrified treatments with 0 M (T1), 1 µM (T2) and 1 mM of melatonin (T3). For vitrified treatments, a solution methanol/propylene glycol based was used and the embryos stored in -196 °C for a week. After thaw, survival rate, scanning electron microscopy, expression of anti (bcl-2) and pro-apoptotic (bax/caspase-3) genes, reactive oxygen species (ROS) formation and DNA fragmentation analyses were performed. No live embryos were obtained from vitrified treatments, observing a rapid degeneration immediately after thawing, with the vitelline layer rupture and leakage of its content, followed by breakdown of epithelial cells and melanisation of the tissue. Regarding the apoptotic process, T3 had the highest relative gene expression, for the three genes (P 0.05) furthermore, T2 had similar expression of pro-apoptotic genes to CG (P 0.05). ROS formation revealed that CG presented lower percentage of embryo surface area affected (3.80 ± 0.40%) (P 0.05), in contrast, no differences were found among the other groups. T1 was most significantly (P 0.05) damaged by DNA fragmentation. The vitrified groups with melatonin had similar damage levels of CG (P > 0.05). The inclusion of 1 µM of melatonin in the vitrifying solution, countered the effects of apoptotic process in post-thaw embryos, suggesting its utility in cryopreserving fish embryos.

Resumo Este estudo investigou o uso da melatonina para conter os efeitos da apoptose em embriões vitrificados de zebrafish (D. rerio). Embriões descorionados no estágio de 22-24 somitos foram divididos (n = 60 / tratamento) em tratamento não vitrificado (Grupo Controle, melatonina 0 M) e tratamentos vitrificados com 0 M (T1), 1 µM (T2) e 1 mM de melatonina (T3). Para os tratamentos vitrificados, utilizou-se uma solução à base de metanol/propilenoglicol e os embriões foram armazenados em -196 °C por uma semana. Após o descongelamento, foram realizadas análises de taxa de sobrevivência, microscopia eletrônica de varredura, expressão dos genes anti (bcl-2) e pró-apoptóticos (bax/caspase-3), formação de espécies reativas de oxigênio (EROS) e análises de fragmentação de DNA. Não foram obtidos embriões vivos a partir dos tratamentos vitrificados, observando uma rápida degeneração imediatamente após o descongelamento, com ruptura da camada vitelina e vazamento de seu conteúdo, seguida de quebra das células epiteliais e melanização do tecido. Em relação ao processo apoptótico. T3 apresentou expressão gênica relativa alta para os três genes (P 0,05), além disso, T2 apresentou expressão semelhante as dos genes pró-apoptóticos de GC (P 0,05). A formação de EROS revelou que GC apresentou menor percentual de área de superfície embrionária afetada (3,80 ± 0,40%) (P 0,05), ao contrário, não foram encontradas diferenças entre os outros grupos. T1 foi mais significativamente (P 0,05) danificado pela fragmentação do DNA. Os grupos vitrificados com melatonina apresentaram níveis de dano semelhantes ao do GC (P> 0,05). A inclusão de 1 µM de melatonina na solução de vitrificação, contrariou os efeitos do processo apoptótico em embriões pós-descongelamento, sugerindo sua utilidade na criopreservação de embriões de peixes.

Biochemical, microbiological and technological characteristics of type II sourdoughs produced with lactic acid bacteria single-strains / Características bioquímicas, microbiológicas e tecnológicas de sourdoughs tipo II produzidos com uma única cepa de bactéria ácido lática

The interplay between biochemical characteristics and the generation of volatile compounds in 11 type II sourdough fermented by single strains of lactic acid bacteria (LAB) was studied. Samples were collected at 0, 6, 9, 12, 15, 18 and 24h for analyses of microbial growth, pH, titratable acidity and CO2 production. During the first 12h, the LABs entered the stationary phase, and the formation of organic and carboxyl acids, alcohols, and esters were observed. Although acidity is an important characteristic of sourdough, in this work increasing the acetic acid content decreased yeast growth and the CO2 retention capacity of the doughs. The main carbohydrate consumed by autochthonous yeast was influenced by the LAB added (homo-or heterofermentative), as observed by correlation analysis. Maltose and glucose showed a strong and negative correlation with the yeast cell density in the dough fermented by homo and heterofermentative LAB, respectively. Moreover, LAB had an important effect on the aromatic profile, being the alcohols, aldehydes, alkanes, organics acids and esters mainly groups characterized. Altogether, 100 different volatile compounds were identified; however, each dough had a different volatile profile. This study shows, for the first time, the influence of a single strain of LAB on the characteristics of type II sourdough.(AU)

As características bioquímicas e a produção de compostos voláteis em 11 diferentes sourdough tipo II produzido com uma única cepa de bactérias do ácido láctico (BAL) em foi estudada. As amostras foram coletadas às 0, 6, 9, 12, 15, 18 e 24 h para análises de crescimento microbiano, pH, acidez titulável e produção de CO2. Durante as primeiras 12 h, as BAL entraram em fase estacionária, sendo observada a formação de ácidos orgânicos e carboxílicos, álcoois e ésteres. Embora a acidez seja uma característica importante do sourdough, neste trabalho o aumento do teor de ácido acético diminuiu o crescimento das leveduras e a capacidade de retenção de CO2 nas massas. Também foi observado que o principal carboidrato consumido pelas leveduras autóctones foi influenciado pela BAL adicionada (homo ou heterofermentativas), conforme observado pela análise de correlação. A maltose e a glicose apresentaram uma correlação forte e negativa com a densidade celular de levedura na massa fermentada por BAL homo e heterofermentativas, respectivamente. Além disso, a BAL teve efeito importante no perfil aromático, sendo os álcoois, aldeídos, alcanos, ácidos orgânicos e ésteres os principais compostos caracterizados. Ao todo, foram identificados 100 compostos voláteis diferentes; no entanto, cada massa apresentou um perfil volátil diferente. Este estudo mostra, pela primeira vez, a influência de uma única cepa de BAL nas características de sourdough tipo II.(AU)

Avaliação morfológica e morfométrica do útero de camundongos fêmeas após uso de extrato de graviola / Morphological and morphometric evaluation of femal e mice uterus after using soursop extract

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato de Annona muricata no útero de camundongos fêmeas por meio de análises macro e microscópicas. Vinte camundongos fêmeas foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: controle (solução salina), ciclofosfamida e extrato de folhas de graviola em duas concentrações diferentes (50 e 100mg/kg). Após sete dias de experimento, as fêmeas foram eutanasiadas e seus úteros coletados e submetidos a análise macroscópica, seguida de processamento histológico para análises morfológicas e morfométricas das camadas do útero e das glândulas endometriais. As características macroscópicas do útero foram mantidas em todos os grupos avaliados. Microscopicamente, não foram identificadas alterações patológicas nas células uterinas. No entanto, houve um aumento significativo na camada do miométrio após o tratamento com ciclofosfamida (p<0,05). O diâmetro interno das glândulas endometriais foi significativamente menor em ambos os grupos tratados com extrato de A. muricata quando comparados ao grupo controle (p<0,05), enquanto o diâmetro total das glândulas foi significativamente menor somente na maior concentração de extrato de A. muricata quando comparado ao grupo controle (p<0,05). A administração do extrato de folhas de A. muricata não causou alterações morfológicas ao útero. Desta forma, o extrato não apresentou toxicidade uterina nas condições avaliadas.

Use of melatonin as an inhibitor of apoptotic process for cryopreservation of zebrafish (Danio rerio) embryos / Uso da melatonina como inibidor do processo apoptotico para a criopreservação de embriões de zebrafish (Danio rerio)

This study investigated the use of melatonin to arrest the effects of apoptosis in vitrified zebrafish (D. rerio) embryos. Dechorionated embryos at 22-24 somite-stage were divided (n = 60/treatment) into a non-vitrified (Control Group, 0 M melatonin) and vitrified treatments with 0 M (T1), 1 µM (T2) and 1 mM of melatonin (T3). For vitrified treatments, a solution methanol/propylene glycol based was used and the embryos stored in -196 °C for a week. After thaw, survival rate, scanning electron microscopy, expression of anti (bcl-2) and pro-apoptotic (bax/caspase-3) genes, reactive oxygen species (ROS) formation and DNA fragmentation analyses were performed. No live embryos were obtained from vitrified treatments, observing a rapid degeneration immediately after thawing, with the vitelline layer rupture and leakage of its content, followed by breakdown of epithelial cells and melanisation of the tissue. Regarding the apoptotic process, T3 had the highest relative gene expression, for the three genes (P < 0.05) furthermore, T2 had similar expression of pro-apoptotic genes to CG (P < 0.05). ROS formation revealed that CG presented lower percentage of embryo surface area affected (3.80 ± 0.40%) (P < 0.05), in contrast, no differences were found among the other groups. T1 was most significantly (P < 0.05) damaged by DNA fragmentation. The vitrified groups with melatonin had similar damage levels of CG (P > 0.05). The inclusion of 1 µM of melatonin in the vitrifying solution, countered the effects of apoptotic process in post-thaw embryos, suggesting its utility in cryopreserving fish embryos.

Este estudo investigou o uso da melatonina para conter os efeitos da apoptose em embriões vitrificados de zebrafish (D. rerio). Embriões descorionados no estágio de 22-24 somitos foram divididos (n = 60 / tratamento) em tratamento não vitrificado (Grupo Controle, melatonina 0 M) e tratamentos vitrificados com 0 M (T1), 1 µM (T2) e 1 mM de melatonina (T3). Para os tratamentos vitrificados, utilizou-se uma solução à base de metanol/propilenoglicol e os embriões foram armazenados em -196 °C por uma semana. Após o descongelamento, foram realizadas análises de taxa de sobrevivência, microscopia eletrônica de varredura, expressão dos genes anti (bcl-2) e pró-apoptóticos (bax/caspase-3), formação de espécies reativas de oxigênio (EROS) e análises de fragmentação de DNA. Não foram obtidos embriões vivos a partir dos tratamentos vitrificados, observando uma rápida degeneração imediatamente após o descongelamento, com ruptura da camada vitelina e vazamento de seu conteúdo, seguida de quebra das células epiteliais e melanização do tecido. Em relação ao processo apoptótico. T3 apresentou expressão gênica relativa alta para os três genes (P <0,05), além disso, T2 apresentou expressão semelhante as dos genes pró-apoptóticos de GC (P <0,05). A formação de EROS revelou que GC apresentou menor percentual de área de superfície embrionária afetada (3,80 ± 0,40%) (P <0,05), ao contrário, não foram encontradas diferenças entre os outros grupos. T1 foi mais significativamente (P <0,05) danificado pela fragmentação do DNA. Os grupos vitrificados com melatonina apresentaram níveis de dano semelhantes ao do GC (P> 0,05). A inclusão de 1 µM de melatonina na solução de vitrificação, contrariou os efeitos do processo apoptótico em embriões pós-descongelamento, sugerindo sua utilidade na criopreservação de embriões de peixes.

Electrocardiographic, echocardiographic and heart biomarker parameters in sheep experimentally poisoned by Palicourea marcgravii (Rubiaceae) / Parâmetros eletrocardiográficos, ecocardiográficos e de biomarcadores cardíacos em ovinos intoxicados experimentalmente por Palicourea marcgravii (Rubiaceae)

The present study aimed to identify and describe cardiac alterations in sheep experimentally poisoned with Palicourea marcgravii through analysis of serum cardiac biomarkers (serum troponin I and creatine kinase - CK-MB) and electro and echocardiographic assessments to contribute to a better understanding of the poisoning pathophysiology. P. marcgravii is the main plant within a group of 22 species that cause sudden death in Brazil; its toxic principle is sodium monofluoroacetate. Eight healthy crossbreed male sheep, aged between five and twelve months, weighing 14 to 27kg, were evaluated. The animals received 1g kg-1 of P. marcgravii plants orally. The sheep were evaluated before administering the plant (T0) through electro and echocardiography and blood collection to assess cardiac biomarkers (CK-MB and cTnI). Collections and analyses were repeated every four hours until the animal's death. During the study, there was the presence of extravasation of serum troponin I carried out in a qualitative test, with positive values at time T4, and the serum CK-MB biomarker had a peak at T4 and slightly decreased at T8. The electro and echocardiographic examinations showed that the cause of death in these animals was due to acute heart failure characterized by arrhythmias, tachycardia/ventricular fibrillation, drop in cardiac output, left ventricular (LV) systolic dysfunction by the progressive decrease in the LV ejection fraction (EF), decrease in LV fractional shortening (FS), and decrease in aortic flow velocity and aortic flow gradient. This study seems to be the first to evaluate cardiac alterations in sheep poisoned by P. marcgravii through cardiac biomarkers and electro and echocardiographic exams.

O presente estudo objetivou identificar e descrever as alterações cardíacas de ovinos intoxicados experimentalmente por Palicourea marcgravii através das análises de biomarcadores cardíacos séricos (troponina I sérica e a creatinoquinase - MB) e das avaliações eletro e ecocardiográficas contribuindo para o melhor entendimento da fisiopatologia da intoxicação. Palicourea marcgravii é a principal planta dentro de um grupo de 22 espécies que causam "morte súbita" no Brasil e seu princípio tóxico é o monofluoracetato de sódio. Foram utilizados oito ovinos saudáveis machos, sem raça definida, com idades entre cinco e doze meses e peso de 14 a 27kg. Os animais receberam 1g/kg de Palicourea marcgravii por via oral. Os ovinos foram avaliados momentos antes da administração da planta (T0) através de eletro e ecocardiograma e coleta de sangue para avaliação dos biomarcadores cardíacos (CK-MB e cTnI). As análises e coletas foram repetidas a cada quatro horas até o óbito do animal. Durante o estudo observou-se extravasamento de troponina I sérica realizada em teste qualitativo, com valores positivos já em T4, assim como o biomarcador CK-MB sérico teve seu pico de aumento em T4 e em T8 houve uma leve redução. Aos exames eletro e ecocardiográfico foi possível determinar que a causa do óbito nestes animais ocorreu devido à insuficiência cardíaca aguda caracterizada por arritmias, taquicardia/fibrilação ventricular, queda no débito cardíaco, disfunção sistólica do ventrículo esquerdo (VE) pela diminuição progressiva da fração de ejeção (EF) do VE, diminuição na fração de encurtamento (FS) do VE, diminuição da velocidade do fluxo aórtico e do gradiente do fluxo aórtico. Este é o primeiro estudo que avalia as alterações cardiológicas de ovinos intoxicados por P. marcgravii através de biomarcadores cardíacos e exames eletro e ecocardiográficos.

Tertiary hospital sewage as reservoir of bacteria expressing MDR phenotype in Brazil / Esgoto de hospital terciário como reservatório de bactérias expressando o fenótipo MDR no Brasil

High doses of antibiotics used in hospitals can affect the microbial composition of sewers, selecting resistant bacteria. In this sense, we evaluated the antibiotic resistance profile and the multiresistant phenotype of bacteria isolated in sewage from a tertiary hospital in the interior São Paulo state, Brazil. For bacteria isolation, 10 µL of sewage samples were sown in selective culture media and the isolates were identified using VITEK-2 automatized system. The antibiotic sensitivity test was performed by disk diffusion. High percentages of resistance were found for amoxicillin, ampicillin, ceftazidime, clindamycin, vancomycin and the multidrug-resistant phenotype (MDR) was attributed to 60.7% of the isolates. Our results show bacteria classified as critical/high priority by WHO List of Priority Pathogens (Enterococcus and Staphylococcus aureus resistant to vancomycin and Enterobacteriaceae resistant to carbapenems) in hospital sewage. Therefore, the implementation of disinfection technologies for hospital sewage would reduce the bacterial load in the sewage that will reach urban wastewater treatment plants, minimizing superficial water contamination and bacterial resistance spread in the environment.

Altas doses de antibióticos utilizados em hospitais podem afetar a composição microbiana dos esgotos, selecionando bactérias resistentes. Nesse sentido, avaliamos o perfil de resistência a antibióticos e o fenótipo multirresistente de bactérias isoladas em esgoto de um hospital terciário no interior do estado de São Paulo, Brasil. Para o isolamento de bactérias, foram semeados 10 µL das amostras de esgoto em meios de cultura seletivos e os isolados foram identificados usando o sistema automatizado VITEK-2. O teste de sensibilidade aos antibióticos foi realizado por disco-difusão em ágar. Elevadas porcentagens de resistência foram encontradas para amoxicilina, ampicilina, ceftazidima, clindamicina, vancomicina e o fenótipo multirresistente (MDR) foi atribuído a 60,7% dos isolados. Nossos resultados mostram bactérias classificadas como prioridade crítica/alta pela Lista de Patógenos Prioritários da OMS (Enterococcus e Staphylococcus aureus resistentes à vancomicina e Enterobacteriaceae resistentes aos carbapenêmicos) no esgoto hospitalar. Sendo assim, implementação de tecnologias de desinfecção do esgoto hospitalar reduziriam a carga bacteriana no esgoto que chegará às estações de tratamento de esgoto urbanas, minimizando a contaminação dos ecossistemas hídricos receptores e a disseminação da resistência bacteriana no ambiente.