Resumo
Abstract The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.
Resumo O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.
Resumo
Abstract The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters' turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens' present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.
Resumo O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Characidae , Oócitos , Oogênese , Ovário , Testículo , GônadasResumo
The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.
O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.
Assuntos
Masculino , Feminino , Animais , Caraciformes/anatomia & histologia , Caraciformes/genética , Espermatogênese , OogêneseResumo
The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.(AU)
O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Caraciformes/anatomia & histologia , Caraciformes/genética , Oogênese , EspermatogêneseResumo
O período de transição das vacas leiteiras é marcado por diversas alterações fisiológicas, metabólicas e endócrinas. Essas alterações aumentam a susceptibilidade das vacas às infecções no pósparto o que compromete bem-estar, resultando em menor desempenho produtivo e reprodutivo, levando ao aumento dos custos relacionados ao tratamento das infecções e ao descarte de leite. Dentre as doenças que acometem as vacas leiteiras no período pós-parto destacam-se as patologias relacionadas ao trato reprodutivo (retenção de placenta, metrite, endometrite clínica e subclínica) ou em outros órgãos (mastite, claudicação, problemas digestivos e respiratórios), e os distúrbios metabólicos (cetose, hipocalcemia e deslocamento de abomaso). Embora o impacto negativo das doenças no pós-parto sobre a eficiência reprodutiva de vacas leiteiras já tenha sido demonstrado por diversos estudos, os mecanismos pelos quais os processos infecciosos e inflamatórios interferem direta e/ou indiretamente no funcionamento do trato reprodutivo das vacas leiteiras ainda não foram totalmente elucidados. Sabe-se que as respostas inflamatória e imunológica frente à infecção podem influenciar processos reprodutivos como a dinâmica folicular ovariana, a esteroidogênese, a competência ovocitária, a fertilização, o desenvolvimento embrionário e a manutenção da gestação. Portanto, a ocorrência de doenças no pós-parto é um obstáculo a eficiência reprodutiva, principalmente devido à alta incidência dessas infecções nas vacas de leite. Podese concluir que a prevenção é a melhor estratégia para combater os efeitos negativos da ocorrência das doenças do pós-parto na eficiência reprodutiva, pois mesmo após a cura clínica dessas patologias a eficiência reprodutiva não é reestabelecida, e seus efeitos persistem por toda a lactação.
The transition period of dairy cows is marked by several physiological, metabolic and endocrine changes. These changes increase the susceptibility of cows to postpartum infections, which compromises welfare, resulting in lower productive and reproductive performance, leading to increased costs related to the treatment of infections and milk disposal. Among the diseases that affect dairy cows in the postpartum period are pathologies related to the reproductive tract (retention of placenta, metritis, clinical and subclinical endometritis) or to other organs (mastitis, claudication, digestive, and respiratory problems), and metabolic disorders (ketosis, hypocalcemia and abomasal displacement). Although the negative impact of postpartum diseases on dairy cows reproductive efficiency has already been demonstrated by several studies, the mechanisms by which infectious and inflammatory processes directly and/or indirectly interfere in the reproductive tract of dairy cows have not yet been fully elucidated. It is known that inflammatory and immunological responses to infection can influence reproductive processes such as ovarian follicular dynamics, steroidogenesis, oocyte competence, fertilization, embryonic development, and maintenance of pregnancy. Therefore, the occurrence of postpartum diseases is an obstacle to reproductive efficiency, mainly due to the high incidence of these infections in dairy cows. It can be concluded that prevention is the best strategy to combat the negative effects of the occurrence of postpartum diseases on reproductive efficiency, because even after the clinical cure of these pathologies reproductive efficiency is not reestablished, and its effects persist throughout lactation.
Assuntos
Feminino , Animais , Bovinos , Endometrite/veterinária , Período Pós-Parto , Placenta Retida , Eficiência Biológica RelativaResumo
A fim de avaliar o efeito de diferentes doses da rbST sobre a dinâmica folicular, a produção e a maturação in vitro de oócitos, 20 vacas Sindi, divididas em três grupos, receberam um dispositivo de progesterona intravaginal, estradiol e PGF2α, além de 2mL de solução salina (grupo controle), 250 (grupo rbST 250) ou 500mg de rbST (grupo rbST 500). Cinco dias depois, realizou-se a ovum pick up, e os complexos cumulus-oócitos (CCOs) recuperados foram selecionados, classificados e maturados in vitro. Os dados de contagem foram comparados pelo procedimento glht (General Linear Hypothesis Test), e os dados em porcentagem foram submetidos ao qui-quadrado, no programa estatístico R, onde as diferenças foram consideradas significativas quando P<0,05. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos quanto à quantidade de folículos e à taxa de maturação. Os grupos rbST 250 e rbST 500 foram significativamente superiores (P<0,05) ao grupo controle em relação ao número de folículos grandes (0,42±0,20 vs. 0). O grupo rbST 500 apresentou maior (P<0,05) porcentagem de oócitos viáveis (91,52%) do que os grupos controle (67,85%) e rbST 250 (53,33%). A rbST aumenta o número de folículos grandes, e 500mg de rbST aumentam a porcentagem de oócitos viáveis em vacas Sindi.(AU)
In order to evaluate the effect of different doses of rbST on the follicular dynamics, production, and in vitro maturation of oocytes, 20 Sindhi cows were divided into three groups, receiving an intravaginal progesterone device, estradiol and PGF2α, and 2mL of solution saline (Control Group), 250 (rbST 250 Group) or 500mg rbST (rbST 500 Group). Five days later, the ovum pick up was performed, and the cumulus-oocyte (CCO) complexes recovered were selected, classified, and matured in vitro. The counting data were compared by the glht (General Linear Hypothesis Test) procedure, and the percentage data were submitted to Qui- square, in the statistical program R, where differences were considered significant when P< 0.05. There was no difference (P> 0.05) between the groups regarding follicle quantity and maturation rate. The rbST 250 and rbST 500 groups were significantly higher (P< 0.05) than the Control group in relation to the number of large follicles (0.42±0.20 versus 0). The rbST 500 group presented higher (P< 0.05) percentage of viable oocytes (91.52%) than the Control (67.85%) and rbST 250 (53.33%) groups. rbST increases the number of large follicles and 500mg rbST increases the percentage of viable oocytes in Sindhi cows.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Oócitos , Indução da Ovulação/veterinária , Hormônio do Crescimento/administração & dosagem , Técnicas de Maturação in Vitro de Oócitos/veterináriaResumo
A fim de avaliar o efeito de diferentes doses da rbST sobre a dinâmica folicular, a produção e a maturação in vitro de oócitos, 20 vacas Sindi, divididas em três grupos, receberam um dispositivo de progesterona intravaginal, estradiol e PGF2α, além de 2mL de solução salina (grupo controle), 250 (grupo rbST 250) ou 500mg de rbST (grupo rbST 500). Cinco dias depois, realizou-se a ovum pick up, e os complexos cumulus-oócitos (CCOs) recuperados foram selecionados, classificados e maturados in vitro. Os dados de contagem foram comparados pelo procedimento glht (General Linear Hypothesis Test), e os dados em porcentagem foram submetidos ao qui-quadrado, no programa estatístico R, onde as diferenças foram consideradas significativas quando P<0,05. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos quanto à quantidade de folículos e à taxa de maturação. Os grupos rbST 250 e rbST 500 foram significativamente superiores (P<0,05) ao grupo controle em relação ao número de folículos grandes (0,42±0,20 vs. 0). O grupo rbST 500 apresentou maior (P<0,05) porcentagem de oócitos viáveis (91,52%) do que os grupos controle (67,85%) e rbST 250 (53,33%). A rbST aumenta o número de folículos grandes, e 500mg de rbST aumentam a porcentagem de oócitos viáveis em vacas Sindi.(AU)
In order to evaluate the effect of different doses of rbST on the follicular dynamics, production, and in vitro maturation of oocytes, 20 Sindhi cows were divided into three groups, receiving an intravaginal progesterone device, estradiol and PGF2α, and 2mL of solution saline (Control Group), 250 (rbST 250 Group) or 500mg rbST (rbST 500 Group). Five days later, the ovum pick up was performed, and the cumulus-oocyte (CCO) complexes recovered were selected, classified, and matured in vitro. The counting data were compared by the glht (General Linear Hypothesis Test) procedure, and the percentage data were submitted to Qui- square, in the statistical program R, where differences were considered significant when P< 0.05. There was no difference (P> 0.05) between the groups regarding follicle quantity and maturation rate. The rbST 250 and rbST 500 groups were significantly higher (P< 0.05) than the Control group in relation to the number of large follicles (0.42±0.20 versus 0). The rbST 500 group presented higher (P< 0.05) percentage of viable oocytes (91.52%) than the Control (67.85%) and rbST 250 (53.33%) groups. rbST increases the number of large follicles and 500mg rbST increases the percentage of viable oocytes in Sindhi cows.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Oócitos , Indução da Ovulação/veterinária , Hormônio do Crescimento/administração & dosagem , Técnicas de Maturação in Vitro de Oócitos/veterináriaResumo
Os objetivos deste estudo foram relatar a dinâmica folicular ovariana e a concentração plasmática de progesterona durante ciclos estrais de duração irregular em cabras da raça Alpina. Vinte e nove cabras tiveram sua atividade ovariana monitorada diariamente por ultrassonografia transretal durante um, dois ou três períodos interovulatórios consecutivos. Amostras de sangue foram coletadas para análise da concentração plasmática de progesterona. Dos 47 ciclos avaliados, 28 (59,57%) foram de duração normal (17 a 25 dias), sete (14,89%) de curta duração (<17 dias) e 12 (25,53%) de longa duração (>25 dias). Os ciclos estrais de curta duração tiveram 6,14±0,69 dias e uma onda folicular que emergiu no dia 0,43±1,13. Os ciclos estrais de longa duração tiveram entre 26 e 79 dias, com duas a nove ondas foliculares. Os ciclos estrais de curta duração ocorreram durante a estação reprodutiva e foram associados à regressão prematura do corpo lúteo (CL). Os ciclos estrais de longa duração ocorreram na transição entre o anestro e a estação reprodutiva e foram associados principalmente à persistência do CL ou à fase folicular prolongada.(AU)
Assuntos
Animais , Fase Folicular , Progesterona/análise , Cabras/fisiologia , ReproduçãoResumo
Os objetivos deste estudo foram relatar a dinâmica folicular ovariana e a concentração plasmática de progesterona durante ciclos estrais de duração irregular em cabras da raça Alpina. Vinte e nove cabras tiveram sua atividade ovariana monitorada diariamente por ultrassonografia transretal durante um, dois ou três períodos interovulatórios consecutivos. Amostras de sangue foram coletadas para análise da concentração plasmática de progesterona. Dos 47 ciclos avaliados, 28 (59,57%) foram de duração normal (17 a 25 dias), sete (14,89%) de curta duração (<17 dias) e 12 (25,53%) de longa duração (>25 dias). Os ciclos estrais de curta duração tiveram 6,14±0,69 dias e uma onda folicular que emergiu no dia 0,43±1,13. Os ciclos estrais de longa duração tiveram entre 26 e 79 dias, com duas a nove ondas foliculares. Os ciclos estrais de curta duração ocorreram durante a estação reprodutiva e foram associados à regressão prematura do corpo lúteo (CL). Os ciclos estrais de longa duração ocorreram na transição entre o anestro e a estação reprodutiva e foram associados principalmente à persistência do CL ou à fase folicular prolongada.(AU)
Assuntos
Animais , Fase Folicular , Progesterona/análise , Cabras/fisiologia , ReproduçãoResumo
The aim of this study was to determine the pattern of follicular development in ewes following ablation of all follicles associated with ovarian superstimulatory treatment. After confirmation of reproductive cyclicity using ultrasonography and progesterone levels, five adult ewes of undetermined breed received a vaginal pessary containing 60mg of medroxyprogesterone, maintained for 10 days, with the application of 100ug cloprostenol on the fourth day. On the tenth day, 300UI equine chorionic gonadotropin (eCG) was applied together with 80mg FSH, and all visible follicles were aspirated by laparoscopic ovum pick-up (LOPU). Following LOPU, ovarian structures were assessed using sonography every 8 hours for a period of 64 hours, and the number and diameter of small (4.5mm) follicles were recorded. The average diameter of small follicles reduced from 5.6±1.5mm initially to 0.8±1.3mm by 56 hours. Population size of the medium-sized follicles during the observation period followed a parabolic distribution wherein the theoretical maximum size emerged at 34.6 hours with no difference at (P>0.05) 24 (4.6±1.5) and 48 hours (4.8±2.3). It was concluded that in ewes subjected to ovarian superstimulation immediately following LOPU, follicular development is characterized by a new wave of follicle growth with a predominance of medium-sized follicles (2.5-4.5mm) between 24 and 48 hours, and a theoretical population maximum occured at 34.6 hours.
O objetivo deste estudo foi determinar o padrão do desenvolvimento folicular em ovelhas após a ablação de todos os folículos, associado a tratamento superestimulatório ovariano. Após confirmação da ciclicidade reprodutiva por avaliação ultrassonográfica e dosagem de progesterona, cinco ovelhas adultas, sem raça definida, ao início do tratamento, receberam pessário vaginal contendo 60mg de acetato de medroxiprogesterona. Após quatro dias, foi administrado 100µg cloprostenol sódico e, no décimo dia, realizou-se a remoção do pessário e aspiração de todos os folículos ovarianos visíveis, guiada por laparoscopia, além da administração de 300UI eCG associada a 80mg FSH. Ao final do tratamento, a cada 8 horas, foi realizada avaliação ultrassonográfica das estruturas ovarianas por um período de 64 horas, onde o número e o diâmetro de folículos pequenos ( 4,5mm) foram contabilizados. O número de folículos pequenos, que inicialmente apresentava média 5,6±1,5, foi reduzido para 0,8±1,3 a partir de 56 horas, folículos grandes somente foram vistos a partir de 32 horas (0,2±0,4); a população de folículos médios, durante o período de observação, apresentou uma distribuição parabólica cujo vértice, considerado o ponto teórico de maior concentração, foi às 34,6 horas, não havendo diferença (P>0,05) nessa população de folículos, entre 24 e 48 horas (4,6±1,5 vs 4,8±2,3). Conclui-se que, em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana iniciada imediatamente após remoção de todos os folículos visíveis à laparoscopia, o desenvolvimento folicular é caracterizado pela emergência de nova onda de crescimento, com predomínio de folículos médios (2,5 a 4,5mm) entre 24 e 48 horas, sendo o ponto teórico de maior ocorrência às 34,6 horas.
Assuntos
Feminino , Animais , Folículo Ovariano/cirurgia , Folículo Ovariano/fisiologia , Indução da Ovulação/veterinária , Ovinos , Laparoscopia/veterinária , OvárioResumo
The aim of this study was to determine the pattern of follicular development in ewes following ablation of all follicles associated with ovarian superstimulatory treatment. After confirmation of reproductive cyclicity using ultrasonography and progesterone levels, five adult ewes of undetermined breed received a vaginal pessary containing 60mg of medroxyprogesterone, maintained for 10 days, with the application of 100ug cloprostenol on the fourth day. On the tenth day, 300UI equine chorionic gonadotropin (eCG) was applied together with 80mg FSH, and all visible follicles were aspirated by laparoscopic ovum pick-up (LOPU). Following LOPU, ovarian structures were assessed using sonography every 8 hours for a period of 64 hours, and the number and diameter of small (< 2.5mm), medium-sized (2.5-4.5mm), and large (>4.5mm) follicles were recorded. The average diameter of small follicles reduced from 5.6±1.5mm initially to 0.8±1.3mm by 56 hours. Population size of the medium-sized follicles during the observation period followed a parabolic distribution wherein the theoretical maximum size emerged at 34.6 hours with no difference at (P>0.05) 24 (4.6±1.5) and 48 hours (4.8±2.3). It was concluded that in ewes subjected to ovarian superstimulation immediately following LOPU, follicular development is characterized by a new wave of follicle growth with a predominance of medium-sized follicles (2.5-4.5mm) between 24 and 48 hours, and a theoretical population maximum occured at 34.6 hours.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar o padrão do desenvolvimento folicular em ovelhas após a ablação de todos os folículos, associado a tratamento superestimulatório ovariano. Após confirmação da ciclicidade reprodutiva por avaliação ultrassonográfica e dosagem de progesterona, cinco ovelhas adultas, sem raça definida, ao início do tratamento, receberam pessário vaginal contendo 60mg de acetato de medroxiprogesterona. Após quatro dias, foi administrado 100µg cloprostenol sódico e, no décimo dia, realizou-se a remoção do pessário e aspiração de todos os folículos ovarianos visíveis, guiada por laparoscopia, além da administração de 300UI eCG associada a 80mg FSH. Ao final do tratamento, a cada 8 horas, foi realizada avaliação ultrassonográfica das estruturas ovarianas por um período de 64 horas, onde o número e o diâmetro de folículos pequenos ( < 2,5mm), médios (2,5 a 4,5mm) e grandes (>4,5mm) foram contabilizados. O número de folículos pequenos, que inicialmente apresentava média 5,6±1,5, foi reduzido para 0,8±1,3 a partir de 56 horas, folículos grandes somente foram vistos a partir de 32 horas (0,2±0,4); a população de folículos médios, durante o período de observação, apresentou uma distribuição parabólica cujo vértice, considerado o ponto teórico de maior concentração, foi às 34,6 horas, não havendo diferença (P>0,05) nessa população de folículos, entre 24 e 48 horas (4,6±1,5 vs 4,8±2,3). Conclui-se que, em ovelhas submetidas à superestimulação ovariana iniciada imediatamente após remoção de todos os folículos visíveis à laparoscopia, o desenvolvimento folicular é caracterizado pela emergência de nova onda de crescimento, com predomínio de folículos médios (2,5 a 4,5mm) entre 24 e 48 horas, sendo o ponto teórico de maior ocorrência às 34,6 horas.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Folículo Ovariano/cirurgia , Folículo Ovariano/fisiologia , Indução da Ovulação/veterinária , Ovinos , Laparoscopia/veterinária , OvárioResumo
As biotecnias da reprodução vêm sendo utilizadas na Medicina Veterinária, a fim de melhorar o desempenho reprodutivo de animais sem padrão racial definido (SRD), aumentando a produtividade desses animais. Dentre essas biotecnias, a ultrassonografia modo B, associada ao Doppler, permite a avaliação da dinâmica do fluxo sanguíneo e a detecção da neovascularização; além de permitir o escaneamento pelo modo Doppler, para calcular índices de vascularidade da artéria ovariana, índice de resistividade (IR) e velocidade do pico sistólico (PSV). Assim, o objetivo do presente trabalho foi comparar dois protocolos de estimulação ovariana em caprinos SRD, dando enfoque na Dopplervelocimetria ovariana, a fim de verificar fluxo sanguíneo e dopplervelocimetria da artéria ovariana; bem como, observar a dinâmica folicular de cabras submetidas a dois diferentes protocolos hormonais.
Reproductive biotechnologies have been used in veterinary medicine to improve the productivity and reproductive performance in caprine. Among these biotechniques, the mode B ultrasonography associated with Doppler allows the evaluation of blood flow dynamics and the vascularization detection by the determination of vascularity index such as resistivity index (IR) and systolic peak velocity (PSV) of two hormonal ovarian stimulation protocols on follicular dynamics and Doppler velocitometry parameters of the ovarian artery in caprine.
Assuntos
Feminino , Animais , Cabras , Indução da Ovulação/métodos , Indução da Ovulação/veterinária , Ovário/fisiologia , Ultrassonografia Doppler/métodos , Ultrassonografia Doppler/veterináriaResumo
As biotecnias da reprodução vêm sendo utilizadas na Medicina Veterinária, a fim de melhorar o desempenho reprodutivo de animais sem padrão racial definido (SRD), aumentando a produtividade desses animais. Dentre essas biotecnias, a ultrassonografia modo B, associada ao Doppler, permite a avaliação da dinâmica do fluxo sanguíneo e a detecção da neovascularização; além de permitir o escaneamento pelo modo Doppler, para calcular índices de vascularidade da artéria ovariana, índice de resistividade (IR) e velocidade do pico sistólico (PSV). Assim, o objetivo do presente trabalho foi comparar dois protocolos de estimulação ovariana em caprinos SRD, dando enfoque na Dopplervelocimetria ovariana, a fim de verificar fluxo sanguíneo e dopplervelocimetria da artéria ovariana; bem como, observar a dinâmica folicular de cabras submetidas a dois diferentes protocolos hormonais.(AU)
Reproductive biotechnologies have been used in veterinary medicine to improve the productivity and reproductive performance in caprine. Among these biotechniques, the mode B ultrasonography associated with Doppler allows the evaluation of blood flow dynamics and the vascularization detection by the determination of vascularity index such as resistivity index (IR) and systolic peak velocity (PSV) of two hormonal ovarian stimulation protocols on follicular dynamics and Doppler velocitometry parameters of the ovarian artery in caprine.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Cabras , Ovário/fisiologia , Indução da Ovulação/métodos , Indução da Ovulação/veterinária , Ultrassonografia Doppler/métodos , Ultrassonografia Doppler/veterináriaResumo
Estudos foram desenvolvidos com o objetivo de validar um kit para dosagem de P4 em bovinos e avaliar o perfil de progesterona (P4) circulante e dinâmica ovariana após tratamento com progesterona injetável de longa ação (P4i) em vacas pós-parto. No primeiro estudo, foram realizados testes para validação de um kit comercial baseado em tecnologia quimioluminescente, Immulite 1000 Progesterone (LKPW1), para dosagem de P4 em bovinos. Para tal, curvas padrão foram produzidas a partir de amostras de plasma de garrotes castrados enriquecidas com concentrações conhecidas de P4, e a precisão, exatidão, efeito de anticoagulante e efeito residual foram avaliados. O método se mostrou exato para amostras com concentração de P4 entre 0.3 e 10.0 ng/mL e preciso para amostras entre 0,5 e 20,0 ng/mL. Além disso, os resultados fornecidos pelo kit são fidedignos às concentrações nas amostras, sejam elas soro ou plasma, não sendo necessária a análise de curvas padrão a cada ensaio. No segundo estudo, primíparas Nelore (n = 28) em anestro pós-parto foram aleatoriamente designadas a receber 1 mL de veículo oleoso (Con; n = 14) ou 1 mL de veículo com 150 mg de P4i (P4i; n = 14) no D0. A partir de então, durante 21 d, foram realizadas colheitas de sangue e ultrassonografia ovariana em todos os animais, além de observação da expressão de cio entre D8 e D15. De modo geral, nenhuma vaca expressou cio, permanecendo anovulatórias até o D20. No D1, vacas do grupo P4i tiveram um pico de P4 circulante (3,0 ng/mL), permanecendo acima de 0,5 ng/mL por 7 d, enquanto no grupo Con a P4 circulante se manteve abaixo de 0,2 ng/mL durante todo o estudo. Vacas do grupo P4i apresentaram maior diâmetro do folículo dominante durante o estudo (12,8 ± 0,5 vs. 10,6 ± 0,6 mm), maior intervalo entre ondas (9,4 ± 1,0 vs. 6,5 ± 0,7 d) e mais dias com folículos com capacidade ovulatória nos ovários em comparação ao grupo Con (12,5 ± 0,5 vs. 8,3 ± 1,3 d). Sendo assim, apesar de ineficiente na indução de ciclicidade em vacas pós-parto, o tratamento com P4i promoveu alterações na dinâmica ovariana e perfil circulante de P4 que podem servir de base para novos estudos e estratégias de uso. Além disso, o kit testado apresentou alto potencial para uso na quantificação de P4 circulante em bovinos. Contudo, ainda são necessários outros testes e análises de maior número de amostras para confirmar sua robustez.
Studies were conducted to validate a kit for measuring P4 in cattle and to evaluate the circulating progesterone (P4) profile and ovarian dynamics after treatment with long-acting injectable progesterone (P4i) in postpartum cows. In the first study, tests were conducted to validate a commercial kit based on chemiluminescent technology, Immulite 1000 Progesterone (LKPW1), to measure P4 in cattle. For this purpose, standard curves were generated from plasma samples of steers enriched with known concentrations of P4, and the precision, accuracy, anticoagulant effect, and residual effect were evaluated. The method proved to be accurate for samples with a P4 concentration between 0.3 and 10.0 ng/mL and precise for samples between 0.5 and 20.0 ng/mL. In addition, the results provided by the equipment are reliable to the concentrations in the samples, whether using serum or plasma, and it is not necessary to analyze standard curves for each assay. In the second study, Nelore primiparous (n = 28) in postpartum anestrus were randomly assigned to receive 1 mL of oily vehicle (Con; n = 14) or 1 mL of oily vehicle with 150 mg of P4i (P4i; n = 14) on D0. Thereafter, for 21 d, blood samples and ovarian ultrasonography were performed in all animals, in addition to observation of expression of estrus between D8 and D15. In general, no cow expressed estrus, remaining anovulatory until D20. On D1, cows in the P4i group had a peak of circulating P4 (3.0 ng/mL), remaining above 0.5 ng/mL for 7 d, while in the Con group, circulating P4 remained below 0.2 ng/mL throughout the study. Cows in the P4i group had a larger diameter of the dominant follicle during the study (12.8 ± 0.5 vs. 10.6 ± 0.6 mm), a longer interval between waves (9.4 ± 1.0 vs. 6.5 ± 0.7 d) and more days with follicles with ovulatory capacity in the ovaries compared to the Con group (12.5 ± 0.5 vs. 8.3 ± 1.3 d). Thus, despite being inefficient in inducing cyclicity in postpartum cows, treatment with P4i promoted changes in ovarian dynamics and circulating profile of P4 that could serve as a basis for further studies and use strategies. Furthermore, the tested kit showed high potential for use in the quantification of circulating P4 in cattle. However, further tests and analyses of a larger number of samples are needed to confirm its robustness.
Resumo
Este estudo teve como objetivo avaliar a dinâmica folicular de vacas da raça Gir no período pós-parto. Foram utilizadas 15 vacas recém-paridas amamentando, mantidas a pasto e recebendo água e mineralização à vontade. Os animais foram pesados semanalmente a partir do parto até a quinta semana pós-parto (medidas do PV Parto a PV5), além de ser avaliado o escore de condição corporal (ECC) da primeira semana à sexta semana pós-parto (ECC1 a ECC5). Durante todo o período experimental os animais foram monitorados visualmente, duas vezes ao dia, para possível manifestação de estro pós-parto. A involução uterina foi avaliada macroscopicamente por palpação transretal, classificando o posicionamento dos cornos uterinos. O estudo da dinâmica folicular ovariana pós-parto foi realizado por meio de ultrassonografia do quarto (4PP) ao quadragésimo dia pós-parto (40PP). Foram realizadas medições diárias registrando-se os diâmetros (mm) máximos do maior e segundo maior folículos presentes em cada ovário. As vacas foram divididas em três grupos experimentais: G1: vacas que apresentaram crescimentos foliculares esporádicos em intervalos irregulares, sem aparente perfil característico de ondas folicularese seus maiores folículos não ultrapassando diâmetros de 7mm (n=5); G2: vacas que apresentaram crescimentos foliculares regulares, com perfil característico de ondas foliculares e subordinação e com os seus maiores folículos de cada onda atingindo diâmetros de, no máximo, de 8 a 10mm (n=5); G3: vacas que apresentaram crescimentos foliculares regulares, com perfil característico de ondas foliculares e subordinação, tendo os seus maiores folículos de cada onda atingindo, pelo menos em uma onda folicular, diâmetros superiores a 10mm (n=5). Observou-se perda de peso (P<005) dos animaisdo G1, sendo o peso vivo no PV6 representando perda de 17% em relação ao PV Parto. Houve diminuição de ECC significativa nos animais dos grupos G1 e G2 no ECC6, em relação ao ECC1. O posicionamento uterino se tornou pélvico nos três grupos a partir de 17 dias pós-parto. Os animais dos grupos G2 e G3 tiveram maior número de ondas durante os 40 dias de avaliação e maior diâmetro de folículo no 4PP. Características da dinâmica folicular, diâmetro máximo do maior folículo (mm), comprimento de onda folicular (dias), duração do crescimento (dias), taxa de crescimento (mm/dia), persistência folicular (dias) e diâmetro do segundo maior folículo (mm) foram diferentes nos animais dos três grupos, sendo valores maiores para os animais do grupo G3, intermediários para G2 e menores para G1.
This study aimed to evaluate the follicular dynamics of Gir cows in the post partum period. Fifteen recently calved cows were used, which were breast feeding, kepton pasture, receiving water and mineralization. The animals were weekly weighed from the calve moment until the fifth week post partum, besides it was assessed the body condition score (ECC) from the first week to the sixt week post partum. During the experimental period, the animals were visually monitored twice a day for possible manifestation of post partum estrus. The uterine involution of the cows was evaluated macroscopically by transrectal palpation, classifying the position of the uterine horns. The study of post partum ovarian folicular dynamics was performed by ultrasonography from the fourth day (4PP) to the fortieth day post partum. Daily scores were done by recording the maximum diameters (mm) of the largest follicles and the second largest follicles presente in each ovary. The cows were divided in three groups: G1: five cows showed sporadic folicular grow that irregular intervals, with no apparent characteristic profile of folicular waves and their largest follicles not exceeded 7mm in diameter; G2: five cows showed regular folicular growth, folicular waves characteristic profile and the largest follicles reached between 8 to 10mm; G3: five cows showed regular folicular growth, folicular waves characteristic profile and the largest follicles reached, at least in one, more than 10mm. Significant weight loss was observed in G1, representing 17% of loss between PV 6 and PV Parto. Significant decrease in ECC of G1 animals and ECC6 of G2 animals in inrelation to ECC1. The uterine position became pelvic in the three groups after 17 days post partum. G2 and G3 had a greater number of waves during the 40 days of evaluation and a larger follicle diameter in the 4PP. Folicular dynamics features, such as maximum diameter of the largest follicle (mm), folicular wave (days), growth duration (days), growth rate (mm/day), folicular persistence (days), diameter of these conflargest follicle (mm) were higher in G3, intermediate for G2 and lower for G1.
Resumo
Este trabalho objetivou contribuir para o conhecimento da biologia reprodutiva de fêmeas de primatas não humanos (PNH). Foi realizada a morfofisiologia ovariana, identificando a localização in situ de componentes celulares envolvidos no processo de apoptose, antiapoptose, proliferação folicular e da expressão do hormônio anti-Mülleriano (AMH). Foram coletados ovários de seis fêmeas de Aotus nancymaae criadas em ambiente de cativeiro, e de seis fêmeas de Sapajus macrocephalus, de vida livre, nas três fases reprodutivas (luteal, folicular e gestacional), pertencentes à comunidade Nova Esperança localizado em Iquitos, na Amazônia peruana. As amostras foram conservadas em formol, e posteriormente em álcool 70%; submetidas ao processamento histológico, e cortes de 5µm de espessura foram corados em Hematoxilina-Eosina. Em seguida foram realizadas as etapas de aplicações da imunohistoquímica para Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH. Foi utilizado o programa BioEstat 5.0, para análise de variância da quantificação histológica folicular (Kruskal-Wallis) e da quantificação das células imunorreativas para Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH (KruskalWallis e Dunn). A associação entre as imunorreações apoptóticas, anti-apoptóticos, prolifarativas e hormonais foi determinada pela Análise das Coordenadas Principais (PCoA) do software R. Em A. nancymaae e S. macrocephalus, houve diferença significativa na quantificação entre os folículos primordiais e antrais pequenos, primordiais e antrais grandes, e primários e antrais grandes (Kruskal-Wallis, p<0,05), nas três fases reprodutivas. Os marcadores proteicos e hormonais variaram significativamente entre os tipos celulares para A. nancymaae (p=0.001) e S. macrocephalus (p=0.002). Em ambas as espécies foi observada imunorreação para Caspase-3-ativada no estroma e células foliculares de folículos primários, antrais pequenos, antrais grandes (células da granulosa, oócitos, células tecais), além do corpo lúteo, nas três fases reprodutivas. Foi observada ainda imunorreação para Bcl-2 em células da granulosa e oócitos de folículos pré-antrais e antrais; e imunorreação para PCNA em núcleos e citoplasmas de oócitos de folículos primordiais e primários, nas gônadas de fêmeas no estágio luteal, em folículos primordiais em fêmeas gestantes e em folículos primordiais normais e atrésicos de fêmeas no estágio folicular; e ainda, imunorreação para o AMH nas células da granulosa e oócitos de folículos antrais em maturação. Assim, as técnicas de imunomarcação para as proteínas Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH, foram imprescindíveis para determinar a análise da dinâmica ovariana, no sentido de propiciarem dados que sugerem avaliar se folículos estão em estado de atresia ou desenvolvimento e a produção hormonal atuando no processo da foliculogênese dessas espécies.
This work aims to contribute to the knowledge of the reproductive biology of female nonhuman primates (PNH). Therefore, research was carried out on ovarian morphophysiology, identifying the in situ location of cellular components involved in the process of apoptosis, anti-apoptosis and follicular proliferation, in addition to the expression of anti-Müllerian hormone (AMH). For this purpose, ovaries were collected from six females of Aotus nancymaae raised in captivity, and from six females of Sapajus macrocephalus, free-living, in the three reproductive stages (luteal, follicular and pregnant). The animals belonged to the Nova Esperança community located in Iquitos, in the Peruvian Amazon. The samples were preserved in formalin, and later in 70% alcohol; submitted to histological processing, and 5µm-thick sections were stained with Hematoxylin-Eosin. Then, the steps of application of immunohistochemistry for Caspase-3, Bcl-2, PCNA and AMH were carried out. The BioEstat 5.0 program was used for analysis of variance of the follicular histological quantification (Kruskal-Wallis) and the quantification of immunoreactive cells for Caspase-3, Bcl-3, PCNA and AMH (Kruskal-Wallis and Dunn). The association between apoptotic, anti-apoptotic, proliferative and hormonal immunoreactions was determined by the Principal Coordinate Analysis (PCoA) of the R software. In A. nancymaae and S. macrocephalus there was a significant difference in the quantification between primordial and small antral, primordial and large antral, and primary and large antral (Kruskal-Wallis, p<0.05), in the three reproductive stages. Protein and hormonal markers varied significantly between cell types of A. nancymaae (p=0.001) and S. macrocephalus (p=0.002). Immunoreaction to Caspase-3- activated was observed in the stroma and follicular cells of primary follicles, small antral, large antral (granulosa cells, oocytes, thecal cells), in addition to the corpus luteum, in the three reproductive phases. Immunoreaction to Bcl-2 was also observed in granulosa cells and oocytes from preantral and antral follicles; and PCNA immunoreaction in oocyte nuclei and cytoplasm of primordial and primary follicles, in the gonads of females in the luteal stage, in primordial follicles in pregnant females, and in normal and atresic primordial follicles of females in the follicular stage; and also, immunoreaction for AMH in granulosa cells and oocytes from maturing antral follicles. Thus, immunostaining techniques for Caspase-3, Bcl2, PCNA and AMH proteins were essential to determine the analysis of ovarian dynamics, in order to provide data that suggest evaluating whether follicles are in a state of atresia or development and the hormone production acting in the folliculogenesis process of these species.
Resumo
A eficiência da associação da indução do estro pelo programa de luz seguida da administração de cloprostenol e efeito macho foi estudada em cabras Saanen acíclicas submetidas ao programa de luz (16 h de luz e 8 h de escuridão) por 60 dias (D0-D60). Cabras multíparas e nulíparas foram alocadas em baias com (T1, n = 67 multíparas; T3, n = 41 nulíparas) ou sem (T2, n = 61 multíparas; T4, n = 34 nulíparas) bode vasectomizado (D120-D135 para multíparas e D120-171 para nulíparas). T1, T2 e T4 receberam duas doses de 120 µg de cloprostenol no D135 (manhã) e no D142 (tarde). A dinâmica folicular ovariana foi acompanhada de D0 a D176 em intervalos diferentes. A inseminação artificial foi realizada 10 a 24 h após o início do estro em T1 e T2, enquanto T3 foram cobertas por monta natural controlada. T1 (85,2%) e T3 (91,7%) apresentaram maior frequência (P<0,05) de corpos lúteos (CL) do que T2 (48,8%) e T4 (23,8%) na primeira dose de cloprostenol/efeito macho, mas não ocorreu no momento da 2ª dose de cloprostenol (P>0,05). A taxa de gestação ajustada em 30d diferiram (P<0,05) entre T1 vs. T2 (21,7 e 42,0%) e T3 vs. T4 (98,0 e 63,7%). T1 apresentou maior frequência de CL funcional quando comparado a T2 e T4 (96,9 vs. 66,7%) em D176. Em conclusão, a associação do programa de luz com o efeito macho mostrou-se uma alternativa viável para indução de estro sincronizado em cabras Saanen e a presença de machos foi capaz de eliminar o efeito da ordem de parto em cabritas nulíparas na contra-estação reprodutiva.
The efficiency of combining estrus induction by light program followed by cloprostenol administration and male effect was tested in acyclic Saanen goats were submitted to light program (16 h of light and 8 h of darkness) for 60 days (D0-D60). Multiparous and nulliparous goats were allocated in pains with (T1, n = 67 multiparous; T3, n = 41 nulliparous) or without (T2, n = 61 multiparous; T4, n = 34 nulliparous) vasectomized buck (D120-D135 to multiparous and D120-171 to nulliparous). T1, T2 and T4 received two doses of 120 µg of cloprostenol on D135 (morning) and D142 (afternoon). Ovarian follicular dynamics were recorded from D0 to D176 at different intervals. Artificial insemination was performed 10 to 24 h after estrous onset in T1 and T2 while T3 were hand-mated. T1 (85.2%) and T3 (91.7%) present more (P < 0.05) corpora lutea (CL) than T2 (48.8%) and T4 (23.8%) at the first cloprostenol dose/male effect but not at the time of the 2nd cloprostenol dose (P>0.05). The 30d adjusted gestation rates differed (P<0.05) between T1 vs. T2 (21.7 and 42.0%) and T3 vs. T4 (98.0 and 63.7%). T1 showed a higher frequency of functional CL when compared to T2 and T4 (96.9 vs. 66.7%) at D176. In conclusion, the association of light treatment with male effect proved to be a viable alternative for induction of synchronized estrus on Saanen goats and the male presence was able to eliminate the effect of parity on nulliparous goats at non-breeding season.
Resumo
Os mecanismos pelos quais ocorrem o desenvolvimento folicular e o estabelecimento da dominância ainda são apenas parcialmente compreendidos, constituindose como peçaschave para o completo entendimento não apenas da fisiologia reprodutiva, como também das patologias. O objetivo do estudo foi descrever, holisticamente, a expressão diferencial de genes nos estágios foliculares de prédesvio, desvio, pósdesvio e préovulatorio. Um total de 1805 genes foram diferencialmente expressos (DEGs). Desses DEGs, cento e cinco apresentaram intersecção nos diferentes estágios foliculares. A análise em conjunto da ontologia gênica (GO), enriquecimento em conjunto de genes (GSEA) e a interação de proteínaproteína (IPP), mostrou que os DEGs se associaram a respostas esteroidogênicas, proliferação celular e processos vasculares no folículo durante o estágio de desvio. No folículo pósdesvio e préovulatorio, esses processos mantiveram estreita relação com a resposta inflamatória; fenômeno que foi liderado, principalmente, por DEGs da família quinase. Moléculas como Fig, kitligante, FGFs e seus receptores, GDF9 e BMP15, IGFs, ativina, EGF, KGF, peptídeo intestinal vasoativo e angiotensinaII foram identificadas em vários estudos prévios e são relacionadas a numerosas atividades no contexto da dinâmica ovariana como a esteroidogênese, o crescimento e apoptose celular e a angiogênese. O nosso estudo complementou esses achados e mostrou a importância de DEGs que ainda não tinham sido descritos. Dentre esses DEGs, destacamse a ADM, NPR1, NPR3, CSF1R, RAGE. Em conclusão, os nossos resultados evidenciaram que a expressão do gene ADM, NPR1 e 3 é diferente entre o folículo desvio um e dois, regulando a vascularização e processos de desenvolvimento. Adicionalmente, a resposta inflamatória entre o folículo pósdesvio e o folículo préovulatorio foi caracterizada pela expressão de genes agrupados no termo ontológico de RAGE e família das quinases, respectivamente.
The mechanisms by which follicular development and the establishment of dominance occur are still partially understood, constituting key elements for a complete understanding not only of reproductive physiology but also of pathologies. The aim of the study was to describe, holistically, the differential expression of genes in the predeviation, deviation, postdeviation, and preovulatory follicular stages. A total of 1805 genes were differentially expressed (DEGs). One hundred and ive DEGs presented intersections in the different follicular stages. Together, gene ontology (GO),pooled gene enrichment (GSEA) and proteinprotein interaction (IPP) showed that DEGs were associated with steroidogenic responses, cell proliferation, and vascular processes in the follicle during the deviation. In the postdeviation and preovulatory follicles, these processes were closely related to the inlammatory response; a phenomenon that was led mainly by DEGs of the kinase family. Molecules such as Fig, kit ligand, FGFs, and their receptors, GDF9 and BMP15, IGFs, activin, EGF, KGF, vasoactive intestinal peptide, and angiotensinII were identiied in several previous studies and are related to numerous activities in the context of ovarian dynamics, notably steroidogenesis, follicle growth and apoptosis, and angiogenesis. Our study complemented these indings and showed the importance of DEGs that had not yet been described. Among these DEGs, were relevant ADM, NPR1, NPR3 and CSF1R. In conclusion, our results showed that the expression of the gene ADM, NPR1, and 3 is different between follicle deviation one and two, regulating vascularization and developmental processes. Additionally, the inlammatory response between the post deviation follicle and the preovulatory follicle was characterized by the expression of genes grouped in the ontological term of RAGE and kinase family, respectively.
Resumo
O desenvolvimento de protocolos hormonais para a manipulação do ciclo estral em bovinos tornou significativamente mais prática a aplicação das biotécnicas da reprodução. Porém, a eficácia de tais protocolos ainda pode ser melhorada, em especial com respeito a uma maior eficiência da sincronização de uma nova onda folicular e ovulação. O objetivo deste estudo foi comparar a dinâmica folicular em bovinos de corte submetidos a protocolos de sincronização da onda folicular e da ovulação pelo uso de um éster de estradiol (benzoato de estradiol, BE) ou pela ablação física de folículos ovarianos. Um total de 34 fêmeas nulíparas (Experimento 1) e 22 fêmeas multíparas (Experimento 2), hígidas e cíclicas da raça Brangus da Estação Experimental Agronômica da UFRGS, foram submetidas à avaliação dos tratos reprodutivos por palpação e ultrassonografia transretal. As fêmeas foram homogeneamente distribuídas em dois grupos experimentais por categoria (Experimentos 1 e 2): grupo BE (Benzoato de Estradiol, n= 17 novilhas e n=11 vacas), e grupo OPU (Ovum Pick-Up, n=17 novilhas e n=11 vacas). No Dia 0, o grupo BE recebeu 2 mg de benzoato de estradiol por via i.m., com a introdução de um inserto intravaginal de progesterona (P4), enquanto no grupo OPU, todos os folículos terciários 5 mm de diâmetro foram aspirados por via transvaginal guiada por ultrasonografia, seguido da introdução de um inserto de P4. Os insertos de P4 foram removidos das fêmeas dos grupos OPU e BE nos Dias 6 e 8, respectivamente, com a administração de 0,6 mg de cipionato de estradiol e 0,15 mg de D-cloprostenol via i.m. A dinâmica folicular foi acompanhada por ultrassonografia transretal a cada 24 h do Dia 0 até um dia após a retirada do inserto de P4, e a intervalos de 12 h até 96 h desde a retirada do inserto de P4, com a observação de sinais de estro. No Experimento 1 (nulíparas), houve diferença (P<0,05) em relação ao sucesso da indução de uma nova onda folicular, que foi de 71% (12/17) e 100% (17/17) para os grupos BE e OPU, respectivamente. Já no Experimento 2 (multíparas), não houve diferença na indução da onda, com a nova onda sendo induzida em 100% (22/22) das vacas em ambos os grupos. No grupo BE, a emergência de uma nova onda folicular ocorreu 3,8 ± 0,3 e 3,9 ± 0,2 dias nas novilhas e vacas, respectivamente, enquanto no grupo OPU, a emergência ocorreu 2,0 ± 0,1 dias e 1,5 ± 0,2 dias nas novilhas e vacas, respectivamente. Houve diferença (P<0,05) quanto à taxa de crescimento diário do futuro folículo dominante (FD) do recrutamento ao início do desvio e à remoção da P4 entre os grupos, sendo maior no grupo OPU do que no grupo BE das nulíparas (Experimento 1). No Experimento 2 (multíparas), o crescimento folicular foi semelhante do recrutamento ao início do desvio, mas diferente (P<0,05) do recrutamento à remoção da P4 entre os grupos, sendo maior no grupo OPU do que no grupo BE. Esta diferença na taxa de crescimento ocasionou também uma diferença entre os grupos (P<0,05) quanto ao diâmetro do FD ao desvio aparente, observado na ultrassonografia, no Experimento 1, e na remoção da P4 no Exprimento 2. No Experimento 1 (nulíparas), 84% (10/12) e 65% (11/17) das novilhas com indução de nova onda ovularam nos grupos BE e OPU, respectivamente. No Experimento 2 (multíparas), 82% (9/11) das fêmeas, tanto do grupo BE como da OPU, ovularam no final do experimento. Obteve-se uma taxa de ovulação final de 59% (10/17) e 65% (11/17) nas novilhas dos grupos BE e OPU, respectivamente (Experimento 1). Já no Experimento 2, observou-se uma taxa de ovulação final de 82% (9/11) nas fêmeas multíparas de ambos os grupos. Houve falhas na indução da nova onda folicular ovariana pelo método hormonal (BE) nas fêmeas bovinas nulíparas de corte, mas não nas fêmeas multíparas, o que consequentemente reduziu a eficiência do protocolo com BE nas novilhas em termos de taxa ovulatória final. Por sua vez, o método físico (OPU) foi eficaz em induzir uma nova onda folicular em ambos as categorias (nulíparas e multíparas). Porém a permanência ligeiramente mais prolongada (12 a 24h) do inserto intravaginal de P4 pode ter contribuído com a redução da taxa ovulatória final, em especial nas fêmeas nulíparas e no grupo de ablação folicular pela OPU.
The development of hormonal protocols for the manipulation of the estrous cycle in cattle has made the application of reproductive technologies significantly more practical. However, the effectiveness of such protocols can still be improved, especially with respect to a greater efficiency of the synchronization of a new follicular wave and ovulation. The aim of this study was to compare the follicular dynamics in beef cattle submitted to protocols for the synchronization of the follicular wave and ovulation using either an estrogen ester estradiol benzoate, BE) or the physical ablation of ovarian follicles. A total of 34 and 22 healthy and cyclic Brangus nulliparous (Experiment 1) and multiparous females (Experiment 2), respectively, from the UFRGS Agronomic Experimental Station beef cattle herd, were selected following the evaluation of the status of the reproductive tract by rectal palpation and transrectal ultrasonography. Females were homogeneously distributed into two experimental groups per animal category (Experiments 1 and 2): BE group (Estradiol Benzoate, n=17 heifers and n=11 cows), and OPU group (Ovum Pick-Up, n=17 heifers and n=11 cows). On Day 0, a 2-mg estradiol benzoate dose was given via im to the BE group, along with the insertion of an intravaginal progesterone (P4) device, whereas in the OPU group, all 5 mm tertiary follicles were aspirated transvaginally, guided by ultrasonography, followed by the insertion of a P4 device. On Days 6 and 8, the P4 devices were withdrawn from the females in the OPU and the BE groups, respectively, with the administration of 0.6 mg estradiol cypionate and 0.15 mg D-cloprostenol via i.m. Follicular dynamics were followed by transrectal ultrasonography every 24 h from Day 0 until one day after the removal of the P4 device, and at 12 h intervals up to 96 h after the P4 removal, along with estrus detection. In Experiment 1 (nulliparous), a difference (P<0.05) was observed in the success rate in inducing a new follicular wave, being 71% (12/17) and 100% (17/17) for the BE and OPU groups, respectively. In turn, no differences were seen in Experiment 2 (multiparous), with a new wave induced in 100% (22/22) of the females in both groups. In the BE group, the emergence of a new follicular wave occurred at 3.8 ± 0.3 and 3.9 ± 0.2 days in heifers and cows, respectively, whereas in the OPU group, the emergence occurred 2.0 ± 0.1 days and 1.5 ± 0.2 days in heifers and cows, respectively. A difference (P<0.05) was observed between groups in the daily growth rate of the future dominant follicle (DF) from recruitment to the beginning of deviation in Experiment 1 (heifers), and from recruitment to P4 removal in Experiment 2 (cows), being greater in the OPU group than in the BE group. In Experiment 2 (multiparous), follicular growth rate was similar from recruitment to the beginning of deviation, but different (P<0.05) from recruitment to P4 removal between groups, being greater in the OPU group than in the BE group. Such difference in growth rate also caused a difference between groups (P<0.05) regarding the diameter of the DF at the observed deviation, detected by ultrasonography, in Experiment 1, and at P4 removal in Experiment 2. In Experiment 1, 84% (10/12) and 64% (11/17) of the heifers displaying a new follicular wave in the BE and OPU groups, respectively, ovulated up to the end of the experiment, whereas in Experiment 2, 82% (9/11) of the females in both groups ovulated up to the end of the experiment. An overall ovulation rate of 59% (10/17) and 65% (11/17) was attained in heifers (Experiment 1) in the BE and OPU groups, respectively, whereas 82% (18/22) of the multiparous females ovulated in both groups (Experiment 2). Failures occurred in the induction of a new follicular wave under the hormonal treatment (BE) in nulliparous beef cattle, but not in multiparous females, which consequently reduced the efficiency of the protocol in heifers in terms of overall ovulatory rate. In turn, the follicular ablation by OPU was effective in inducing a new follicular wave in both animal categories (nulliparous and multiparous females). However, a reduction in the overall ovulatory rate may have been caused by a slightly longer time (12 to 24 h) of the P4 intravaginal device into some females, especially in nulliparous females and in the follicular ablation group by OPU.
Resumo
A ultrassonografia (USG) em modo B e Doppler são ferramentas úteis na avaliação ginecológica e andrológica dos animais e, em anos recentes vem se implementando o uso da USG Doppler (USGD) em pequenos ruminantes, na mensuração dos índices velocimétricos de vascularidade da artéria ovariana, na avaliação da vascularização do corpo lúteo e, na mensuração da área vascularizada dos ovários, esses dados podem fornecer informação em quanto á função dos ovários, qualidade oocitária e, resposta ou eficiência dos protocolos hormonais. O objetivo deste estudo será avaliar o fluxo sanguíneo intraovariano e a dinâmica folicular em cabras estimuladas com diferentes protocolos hormonais. As cabras (n=29) serão divididas em três grupos (PHA, PHB, PHC), e cada grupo será submetido a um protocolo hormonal de estimulação folicular, no PHA (n=10), o protocolo iniciará com a administração intramuscular de 0,075mg de Cloprostenol, 48h depois será feita a inserção intravaginal de um controlled internal drug release (CIDR) e, 48h depois da inserção do CIDR será administrada uma dose única de 60 mg de FSH e 300UI eCG. No PHB (n=8), o protocolo iniciará com a inserção de uma esponja intravaginal com Acetato de Medroxiprogesterona (MPA) mantida durante 10 dias, no dia 8 do protocolo será administrada 1ml de cloprostenol e, 36 horas antes da remoção da esponja será feita a administração de uma dose única de 80mg de FSH e 300UI de eCG. No PHC (n=11), o protocolo hormonal iniciará com a inserção de uma esponja intravaginal mantida durante 12 dias, no dia 12 será feita a injeção de 1ml de cloprostenol e 0,750ml de eCG e, 36 horas depois será feita a injeção de 1ml de GnRH. O fluxo sanguíneo do ovário será monitorado por USGD antes e depois da administração das gonadotrofinas (FSH e eCG). Antes e depois da aplicação das gonadotrofinas nos PHs, a dinâmica folicular foi monitorada por ultrassonografia em modo B em tempo real e a vascularização intraovariana foi verificada por ultrassonografia Doppler. A partir das imagens Doppler, a área foi quantificada e pontuações subjetivas da área vascularizada foram atribuídas. Em todos os PHs houve um aumento significativo (P < 0.001) no número de folículos totais. Para folículos > 3 mm e > 5 mm. PHB mostrou um aumento de +111% e +120% respectivamente. Em relação ao diâmetro folicular máximo, foi semelhante (P = 0.2877) após a administração de gonadotrofinas e apenas em PHB e PHC incrementos positivos deste parâmetro foram observados durante o período em exame (+ 19.8% vs. +18%). O protocol C mostrou, depois da aplicação hormonal, um aumento significativo (P = 0.0323) na área Doppler de vascularização intraovariana, um resultado que não foi confirmado pela análise das pontuações da escala arbitrária. Podemos concluir que todos os protocolos de estimulação hormonal analisados foram eficientes em caprinos na indução do crescimento folicular. No entanto, apenas na associação eCG + GnRH no protocolo hormonal usado em programas para IATFdemonstraram um aumento na área de vascularização intraovariana.
The B-mode and Doppler ultrasound are useful tools in the gynecological and andrological assessment of animals and, in recent years, the use of Doppler ultrasonography has been implemented in small ruminants, in measuring the velocimetric indexes of vascularity of the ovarian artery, in evaluating the corpus luteum vascularization and in measuring the vascularized area of the ovaries, these data can provide information on the ovaries function, oocyte quality and response or efficiency of hormonal protocols. The aim of this study will be to evaluate intraovarian blood flow and follicular dynamics in goats stimulated with different hormonal protocols. The goats (n=29) will be divided into three groups (PHA, PHB, PHC), and each group will be submitted to one hormonal protocol of follicular stimulation, in PHA (n=10), the protocol will start with the intramuscular administration of 0,075mg of Cloprostenol, 48h after will be performed the intravaginal insertion of a controlled internal drug release (CIDR) and, 48h after a single dose of FSH (60mg) and eCG (300UI). In PHB (n=8), the hormonal protocol will start with the insertion of an intravaginal sponge with Medroxyprogesterone Acetate (MPA) maintained during 10 days, on day 8 of the protocol will be administered 1ml of Cloprostenol and, 36h before removing the sponge, a single dose of FSH (80mg) and eCG (300UI) will be administered. In PHC (n=11), the hormonal protocol will start with the insertion of an intravaginal sponge maintained during 12 days, on the day 12 will be injected 1ml of Cloprostenol and 0,750ml of eCG and 36h later the injection of 1ml of GnRH. Ovarian blood flow will be monitored by ultrasound Doppler before and after administration of gonadotropins (FSH and eCG). Before and after application of gonadotropins in PHs, follicular dynamics were monitored by real-time B-mode ultrasonography and intraovarian vascularization was verified by Doppler ultrasonography. From the Doppler images, the area was quantified and subjective scores of the vascularized area were assigned. In all PHs there was a significant increase (P < 0.001) in the number of total follicles. For follicles > 3 mm and > 5 mm, PHB showed an increase of +111% and +120% respectively. Regarding the maximum follicular diameter, this was similar (P = 0.2877) after the administration of gonadotropins and only in PHB and PHC positive increments of this parameter were observed during the period under examination (+ 19.8% vs. +18%). Protocol C showed, after hormonal application, a significant increase (P = 0.0323) in the Doppler area of intraovarian vascularization, a result that was not confirmed by the analysis of the arbitrary scale scores. We can conclude that all hormone stimulation protocols analyzed were efficient in goats in inducing follicular growth. However, only the eCG + GnRH association in the hormonal protocol used for FTAI programs demonstrated an increase in the area of intraovarian vascularization.