Comparative analysis of PRNP 12-bp and 23-bp indels in healthy Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford, Holstein Friesian and Uruguayan Creole cattle / Análise comparativa de PRNP 12bp e 23bp indels em bovinos Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford, Holstein Friesian e Crioulo Uruguaio saudáveis

Bovine spongiform encephalopathy (BSE) is a transmissible progressive neurodegenerative disease characterized by the accumulation of a pathological isoform (PrpSC) of the cellular prion protein (PrpC) in the brain of cattle. Two insertion/deletion polymorphisms in the PRNP gene (23bp in the promoter and 12bp in intron 1) have been associated with resistance or susceptibility to the disease. The aim of this study was to analyze the distribution of these polymorphisms in 214 healthy bovines belonging to four different breed groups (Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford, Holstein Friesian and Uruguayan Creole cattle). DNA samples were amplified by end-point PCR. A high frequency of the alleles and haplotype associated with susceptibility to BSE (del12 and del23, and del12-del23, respectively) were found in the Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford and Holstein Friesian animals. At the same time, the Uruguayan Creole cattle presented a higher frequency of the alleles and haplotype associated with resistance to BSE (ins12 and ins23, and ins12-ins23, respectively). These data could indicate a greater genetic resistance of the Uruguayan Creole cattle to BSE compared to other analyzed breeds, reinforcing its value as a zoogenetic resource.

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB) é uma doença neurodegenerativa progressiva transmissível dos bovinos, caracterizada pelo acúmulo no cérebro de uma isoforma patológica (PrpSC) da proteína priônica celular (PrpC). Dois polimorfismos de inserção/deleção no gene PRNP (23bp no promotor e 12bp no íntron 1) foram associados à resistência ou suscetibilidade à doença. O objetivo deste trabalho foi analisar a distribuição desses polimorfismos em 214 bovinos sadios, pertencentes a quatro diferentes grupos raciais (Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford, Holstein Friesian e Crioulo Uruguaio). As amostras de DNA foram amplificadas por PCR de tempo final. Uma alta frequência dos alelos e haplótipos associados à suscetibilidade à BSE (del12 e del23 e del12-del23, respectivamente) foram encontrados nos animais Aberdeen Angus, Aberdeen Angus x Hereford e Holstein Friesian, enquanto o gado Crioulo Uruguaio apresentou maior frequência dos alelos e haplótipos associados à resistência à BSE (ins12 e ins23 e ins12-ins23, respectivamente). Esses dados podem indicar uma maior resistência genética do gado Crioulo Uruguaio à BSE em comparação com as outras raças analisadas, reforçando seu valor como recurso zoogenético.

Effect of Dietary Inclusion of Protected Sodium Butyrate on the Digestibility and Intestinal Histomorphometry of Commercial Laying Hens

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the effects of dietary inclusion of protected sodium butyrate (PSB) on the intestinal development and feed nutrient metabolizability of commercial laying hens. The birds started to receive the treatment rations at 58 weeks of age. At 76 weeks of age the laying hens were distributed in a randomized block design to four treatments (0, 105, 210 and 300 g t-1/PSB), six replicates, and two birds/replicate. The nitrogen balance (NB), ether extract balance (EEB), dry matter metabolizability coefficient, nitrogen, ether extract, ash, apparent metabolizable energy (AME), and AME corrected by nitrogen (AMEn) were evaluated. For assessment of intestinal development, we evaluated the duodenum, jejunum, ileum, cecum, and colorectal lengths, the relative intestine weight and villus height, crypt depth, and villus:crypt ratio of the duodenum, jejunum, and ileum. A decreasing linear effect was observed in the duodenum length, while an increasing linear effect was observed in the height of the duodenum and jejunum villi. A quadratic effect was found in the jejunum crypt depth. A linear increasing effect was found on the villus:crypt ratio of the duodenum and jejunum, and a quadratic effect was observed in the ileum. Quadratic and increasing linear effects were observed in the NB and EEB, respectively. Additionally, increasing linear effects were observed in the AME and AMEn. The dietary addition of 300 g t-1 of PSB improved intestinal development and energy metabolizability of the diet.

Antimicrobial potential of Jurema preta and umburana, native species of the Caatinga biome, on Staphylococcus isolated from small ruminants with mastitis / Potencial antimicrobiano de jurema preta e umburana, espécies nativas do bioma caatinga, frente a isolados de Staphylococcus provenientes de casos de mastite em pequenos ruminantes

Mastitis is responsible for both damage to animal health and economic losses to the industry. To identify effective treatments for this disease, products extracted from a variety of plants with antimicrobial potential have gained attention. The present study aimed to assess the in vitro antibacterial potential ofthe ethanolic extract of two plant species from the Caatinga biome against bacteria isolated from small ruminants with subclinical mastitis. The leaves of Mimosa tenuiflora and Commiphora leptophloeos were dried and processed to obtain crude ethanolic extracts and their phenolic composition was evaluated. In total, 33 Staphylococcus spp. isolates from the bacterial collection of the Laboratory of Food Quality Control of IF SERTÃO-PE were used for evaluation of biofilm production. Furthermore, an antimicrobial susceptibility test was conducted using the minimal bactericidal concentration (MBC) method against the two ethanolic extracts. The toxic potential was measured through a toxicity test with Artemia salina. The quantification of the phenolic compounds revealed that the ethanolic extracts of M. tenuiflora and C. leptophloeos possessed higher amounts of myricetin (43.2 and 294.9 mg in 10 g, respectively) in relation to the other compounds. A 39.4% positivity rate was observed in the nuc gene investigation. The biofilm production analysis revealed that 96.9% of the isolates produced biofilm, evidencing the evolution the microorganisms regarding the development of resistance mechanisms. The MBC results showed an inhibition range between 195.30 and 3125.00 µg mL-¹ and between 781.20 and 6250.00 µg mL-¹ for the extracts of M. tenuiflora and C. leptophloeos, respectively. The M. tenuiflora extract showed the highest activity, suppressing 100% of the bacterial isolates (n=26), whereas the extract of C. leptophloeos showed an inhibition percentage of 69.23%. The crude ethanolic extract (EEB) [...].

A mastite é responsável por danos à saúde animal e prejuízos financeiros ao produtor. Na busca por alternativas eficazes no controle da mastite, destacam-se os produtos naturais extraídos de diversas plantas que possuem ação antibacteriana. Neste contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o potencial antimicrobiano in vitro do extrato etanólico de duas espécies do bioma caatinga frente a bactérias isoladas de casos de mastite subclínica em pequenos ruminantes. As folhas de jurema preta e umburana de cambão foram secas e processadas para obtenção dos extratos etanólicos bruto para o estudo da composição fenólica. Foram utilizados 33 isolados de Staphylococcus spp. provenientes da bacterioteca do Laboratório de Controle de Qualidade de Alimentos do IF SERTÃO-PE. Com os isolados de Staphylococcus spp. realizou-se a análise de quantificação da produção de biofilme. Além disso, empregou-se o teste de sensibilidade antimicrobiana, utilizando-se a técnica da concentração bactericida mínima (CBM) frente aos dois extratos etanólicos. Para conhecer o potencial tóxico, utilizou-se o teste de toxicidade com Artemia salina. A análise de quantificação dos compostos fenólicos demonstrou que os extratos etanólicos de jurema preta e umburana de cambão apresentaram a miricetina em quantidades bastante elevadas, 43,2 e 294,9 mg em 10 g respectivamente, em relação aos demais compostos detectados. Na pesquisa do gene nuc, observou-se uma positividade de 39,4%.A análise da produção de biofilme revelou que 96,9% dos isolados apresentaram a capacidade de produção do biofilme, evidenciando a evolução destes micro-organismos quanto ao desenvolvimento de mecanismos de resistência. Os resultados referentes à concentração bactericida mínima indicaram uma faixa de inibição entre 195,30 [...].

Antimicrobial potential of Jurema preta and umburana, native species of the Caatinga biome, on Staphylococcus isolated from small ruminants with mastitis / Potencial antimicrobiano de jurema preta e umburana, espécies nativas do bioma caatinga, frente a isolados de Staphylococcus provenientes de casos de mastite em pequenos ruminantes

Mastitis is responsible for both damage to animal health and economic losses to the industry. To identify effective treatments for this disease, products extracted from a variety of plants with antimicrobial potential have gained attention. The present study aimed to assess the in vitro antibacterial potential ofthe ethanolic extract of two plant species from the Caatinga biome against bacteria isolated from small ruminants with subclinical mastitis. The leaves of Mimosa tenuiflora and Commiphora leptophloeos were dried and processed to obtain crude ethanolic extracts and their phenolic composition was evaluated. In total, 33 Staphylococcus spp. isolates from the bacterial collection of the Laboratory of Food Quality Control of IF SERTÃO-PE were used for evaluation of biofilm production. Furthermore, an antimicrobial susceptibility test was conducted using the minimal bactericidal concentration (MBC) method against the two ethanolic extracts. The toxic potential was measured through a toxicity test with Artemia salina. The quantification of the phenolic compounds revealed that the ethanolic extracts of M. tenuiflora and C. leptophloeos possessed higher amounts of myricetin (43.2 and 294.9 mg in 10 g, respectively) in relation to the other compounds. A 39.4% positivity rate was observed in the nuc gene investigation. The biofilm production analysis revealed that 96.9% of the isolates produced biofilm, evidencing the evolution the microorganisms regarding the development of resistance mechanisms. The MBC results showed an inhibition range between 195.30 and 3125.00 µg mL-¹ and between 781.20 and 6250.00 µg mL-¹ for the extracts of M. tenuiflora and C. leptophloeos, respectively. The M. tenuiflora extract showed the highest activity, suppressing 100% of the bacterial isolates (n=26), whereas the extract of C. leptophloeos showed an inhibition percentage of 69.23%. The crude ethanolic extract (EEB) [...].(AU)

A mastite é responsável por danos à saúde animal e prejuízos financeiros ao produtor. Na busca por alternativas eficazes no controle da mastite, destacam-se os produtos naturais extraídos de diversas plantas que possuem ação antibacteriana. Neste contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o potencial antimicrobiano in vitro do extrato etanólico de duas espécies do bioma caatinga frente a bactérias isoladas de casos de mastite subclínica em pequenos ruminantes. As folhas de jurema preta e umburana de cambão foram secas e processadas para obtenção dos extratos etanólicos bruto para o estudo da composição fenólica. Foram utilizados 33 isolados de Staphylococcus spp. provenientes da bacterioteca do Laboratório de Controle de Qualidade de Alimentos do IF SERTÃO-PE. Com os isolados de Staphylococcus spp. realizou-se a análise de quantificação da produção de biofilme. Além disso, empregou-se o teste de sensibilidade antimicrobiana, utilizando-se a técnica da concentração bactericida mínima (CBM) frente aos dois extratos etanólicos. Para conhecer o potencial tóxico, utilizou-se o teste de toxicidade com Artemia salina. A análise de quantificação dos compostos fenólicos demonstrou que os extratos etanólicos de jurema preta e umburana de cambão apresentaram a miricetina em quantidades bastante elevadas, 43,2 e 294,9 mg em 10 g respectivamente, em relação aos demais compostos detectados. Na pesquisa do gene nuc, observou-se uma positividade de 39,4%.A análise da produção de biofilme revelou que 96,9% dos isolados apresentaram a capacidade de produção do biofilme, evidenciando a evolução destes micro-organismos quanto ao desenvolvimento de mecanismos de resistência. Os resultados referentes à concentração bactericida mínima indicaram uma faixa de inibição entre 195,30 [...].(AU)

Traditional knowledge and uses of medicinal plants by the inhabitants of the islands of the São Francisco river, Brazil and preliminary analysis of Rhaphiodon echinus (Lamiaceae) / Conhecimento tradicional e usos de plantas medicinais por habitantes das ilhas do rio São Francisco, Brasil e análise preliminar de Rhaphiodon echinus (Lamiaceae)

This study aimed to carry out an ethnobotanical survey of medicinal plants used by inhabitants of the Rodeadouro Island, Jatoba Island and Massangano Island, located in The Submedium São Francisco River Valley. Also phytochemicals and preliminary pharmacological tests were performed to species most cited by the community. Ethnobotanical data were collected through observation visits and semi-structured interviews with 12 key informants. We calculated the relative importance (RI), the percentage of agreement related to the main uses (cAMU) and use value (UV). The aerial parts of Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer were used to obtain the lyophilizate (LYO-Re), crude ethanol extract (CEE-Re) and their hexanic (HEX-Re), chloroform (CLO-Re) and ethyl acetate (EA-Re) fractions. The microdilution technique was used for determining Minimum inhibitory concentration (MIC) for selected microorganisms. Already the spasmolytic effect was evaluated in isolated uterus fragments of Wistar rats, pre contracted with KCl 60 mM. We found 34 species cited, belonging to 22 families. The most plants were grown by locals. There were 51 different diseases, but the main indication was infectious and parasitic diseases. The species R. echinus was the most reported and it was indicated for urinary tract infection and dysmenorrhea. The screening revealed a higher prevalence of flavonoids, tannins, lignans and saponins in LYO-Re and AE-Re. Already terpene compounds were more present in HEX-Re and CLO-Re. The RE-Re fraction stood out with strong effect against E. coli and S. aureus while CEE-Re has moderate effect against gram-negative bacteria. The evaluation of the spasmolytic activity showed that LYO-Re, CEE-Re and HEX-Re fractions have similar activity, with partial effect and concentration-dependent response. This work brought about knowledge and use of medicinal plants by the riparian of the São Francisco River. It also revealed the importance of other methodologies for scientific evidence for the popular use of R. echinus.(AU)

Objetivou-se realizar um levantamento etnobotânico de plantas medicinais utilizadas nas ilhas do Massangano, Jatobá II e Rodeadouro, localizadas entre Petrolina-PE e Juazeiro-BA, no submédio do rio São Francisco e posterior investigação fitoquímica e farmacológica da espécie mais citada, conforme a indicação da comunidade. Realizaram-se visitas de observação nas ilhas e os dados etnobotânicos foram coletados por entrevistas semiestruturadas com 12 informantes-chave. Calculou-se a Importância Relativa (IR), a Porcentagem Corrigida de Concordância quanto ao Uso Principal (CUPc) e o Valor de Uso (VU). Utilizaram-se as partes aéreas da espécie mais citada para obtenção do extrato etanólico bruto (EEB-Re), suas frações hexânica (HEX-Re), clorofórmica (CLO-Re) e acetato de etila (AE-Re); o produto liofilizado (LIO-Re) e o óleo essencial (OE-Re). A técnica de microdiluição foi usada para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para microorganismos selecionados. A atividade espasmolítica foi avaliada em fragmentos isolados de útero de ratas Wistar pré-contraídos com KCl 60 mM. Foram relatadas 34 espécies, contidas em 22 famílias diferentes. A maioria das plantas era cultivada pelos moradores. Registraram-se 51 enfermidades diferentes, mas a principal indicação foi doenças parasitárias e infecciosas. A espécie Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer foi a mais citada, com principal indicação para tratar infecção do trato urinário e dismenorreia. O screening fitoquímico revelou prevalência de flavonoides, taninos, lignanas e saponinas em LIO-Re e AE-Re e compostos terpênicos em HEX-Re e CLO-Re. Os testes antibacterianos mostraram que AE-Re é mais atuante contra E. coli e S. aureus do que para P. aeruginosa. O EEB-Re tem efeito parcial contra bactérias gram-negativas e OE-Re possui moderada resposta para todos microorganismos testados. LIO-Re, EEB-Re e HEX-Re possuem atividade espasmolítica dependente da concentração, sem diferença significativa e sem relaxamento total. Este trabalho trouxe conhecimento sobre o uso de plantas medicinais pelos ribeirinhos do rio São Francisco e revela a importância de estudos mais aprofundados para a comprovação científica do uso popular da R. echinus.(AU)

Traditional knowledge and uses of medicinal plants by the inhabitants of the islands of the São Francisco river, Brazil and preliminary analysis of Rhaphiodon echinus (Lamiaceae)

Abstract This study aimed to carry out an ethnobotanical survey of medicinal plants used by inhabitants of the Rodeadouro Island, Jatoba Island and Massangano Island, located in The Submedium São Francisco River Valley. Also phytochemicals and preliminary pharmacological tests were performed to species most cited by the community. Ethnobotanical data were collected through observation visits and semi-structured interviews with 12 key informants. We calculated the relative importance (RI), the percentage of agreement related to the main uses (cAMU) and use value (UV). The aerial parts of Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer were used to obtain the lyophilizate (LYO-Re), crude ethanol extract (CEE-Re) and their hexanic (HEX-Re), chloroform (CLO-Re) and ethyl acetate (EA-Re) fractions. The microdilution technique was used for determining Minimum inhibitory concentration (MIC) for selected microorganisms. Already the spasmolytic effect was evaluated in isolated uterus fragments of Wistar rats, pre contracted with KCl 60 mM. We found 34 species cited, belonging to 22 families. The most plants were grown by locals. There were 51 different diseases, but the main indication was infectious and parasitic diseases. The species R. echinus was the most reported and it was indicated for urinary tract infection and dysmenorrhea. The screening revealed a higher prevalence of flavonoids, tannins, lignans and saponins in LYO-Re and AE-Re. Already terpene compounds were more present in HEX-Re and CLO-Re. The RE-Re fraction stood out with strong effect against E. coli and S. aureus while CEE-Re has moderate effect against gram-negative bacteria. The evaluation of the spasmolytic activity showed that LYO-Re, CEE-Re and HEX-Re fractions have similar activity, with partial effect and concentration-dependent response. This work brought about knowledge and use of medicinal plants by the riparian of the São Francisco River. It also revealed the importance of other methodologies for scientific evidence for the popular use of R. echinus.

Resumo Objetivou-se realizar um levantamento etnobotânico de plantas medicinais utilizadas nas ilhas do Massangano, Jatobá II e Rodeadouro, localizadas entre Petrolina-PE e Juazeiro-BA, no submédio do rio São Francisco e posterior investigação fitoquímica e farmacológica da espécie mais citada, conforme a indicação da comunidade. Realizaram-se visitas de observação nas ilhas e os dados etnobotânicos foram coletados por entrevistas semiestruturadas com 12 informantes-chave. Calculou-se a Importância Relativa (IR), a Porcentagem Corrigida de Concordância quanto ao Uso Principal (CUPc) e o Valor de Uso (VU). Utilizaram-se as partes aéreas da espécie mais citada para obtenção do extrato etanólico bruto (EEB-Re), suas frações hexânica (HEX-Re), clorofórmica (CLO-Re) e acetato de etila (AE-Re); o produto liofilizado (LIO-Re) e o óleo essencial (OE-Re). A técnica de microdiluição foi usada para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para microorganismos selecionados. A atividade espasmolítica foi avaliada em fragmentos isolados de útero de ratas Wistar pré-contraídos com KCl 60 mM. Foram relatadas 34 espécies, contidas em 22 famílias diferentes. A maioria das plantas era cultivada pelos moradores. Registraram-se 51 enfermidades diferentes, mas a principal indicação foi doenças parasitárias e infecciosas. A espécie Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer foi a mais citada, com principal indicação para tratar infecção do trato urinário e dismenorreia. O screening fitoquímico revelou prevalência de flavonoides, taninos, lignanas e saponinas em LIO-Re e AE-Re e compostos terpênicos em HEX-Re e CLO-Re. Os testes antibacterianos mostraram que AE-Re é mais atuante contra E. coli e S. aureus do que para P. aeruginosa. O EEB-Re tem efeito parcial contra bactérias gram-negativas e OE-Re possui moderada resposta para todos microorganismos testados. LIO-Re, EEB-Re e HEX-Re possuem atividade espasmolítica dependente da concentração, sem diferença significativa e sem relaxamento total. Este trabalho trouxe conhecimento sobre o uso de plantas medicinais pelos ribeirinhos do rio São Francisco e revela a importância de estudos mais aprofundados para a comprovação científica do uso popular da R. echinus.

Gross and histopathological pitfalls found in the examination of 3338 cattle brains submitted to the BSE surveillance program in Brazil / Ciladas macroscópicas e histopatológicas encontradas no exame de 3338 encéfalos de bovinos submetidos ao programa de vigilância da EEB no Brasil

This study stems from the findings during the gross and histopathological exam of 3,338 cattle brains as part of the bovine spongiform encephalopathy (BSE) active surveillance program of the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock, and Supply from 2001 to 2005. The work was carried out in the Veterinary Pathology Laboratory of the Federal University of Santa Maria which at the time (2001-2007) was the national reference laboratory for the diagnosis of BSE and other transmissible spongiform encephalopathies. Both gross and histopathological aspects are described. Several gross aspects were annotated: anatomic normal structures not commonly recognized (non-lesions), lesions of no clinical significance, postmortem changes and artifacts; all these can amount to important pitfalls that distract the pathologist during the routine gross examination of the central nervous system (CNS). Accordingly, equivalent pitfalls were described in the histological examination. Non-lesions observed were the pineal body, embryo remnants such as the external germinal layer of the cerebellum, subependymal plates, and clusters of neuroblasts in the basal ganglia; or circumventricular structures such as area postrema, subcomisural organ, and melanosis in the leptomeninges and vessel walls. Lesions with little or no clinical importance included age-related changes as lipofuscin, hemosiderin, mineralization and hyalinization of vessel walls within the brain and meninges. Corpora amylacea and corpora arenacea were detected respectively in astrocyte processes and the pineal body. Cytoplasmic neuronal vacuolization was observed in the red nucleus and habenular nucleus. Sarcocystis sp. without a correspondent inflammatory reaction was rarely observed. Included within findings with no clinical manifestation were axonal spheroids and perivascular mononuclear cuffings. Changes in the CNS due to killing, sampling and fixation methods can obscure or distract from the more critical lesions...(AU)

Os resultados deste estudo foram obtidos pelo exame macroscópico e histopatológico de 3.338 cérebros de bovinos examinados durante o programa de vigilância ativa da encefalopatia espongiforme bovina (BSE) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), de 2001 a 2005. O trabalho foi realizado no Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) que, de 2001 a 2007, foi o laboratório nacional de referência para o diagnóstico da BSE e de outras encefalopatias espongiformes transmissíveis. Macroscopicamente, foram descritas estruturas anatômicas normais (não-lesões), mas que são, com frequência, interpretadas como lesões; lesões sem significado clínico; alterações pós-mortais e artefatos. Esses achados podem confundir e desviar a atenção do patologista durante o exame de rotina do sistema nervoso central (SNC). Da mesma forma, estruturas equivalentes foram descritas no exame histológico. As não-lesões observadas foram corpo pineal, remanescentes embrionários, como a camada germinativa externa do cerebelo, placas subependimárias e aglomerados de neuroblastos nos gânglios da base; ou estruturas circunventriculares, como área de postrema, órgão subcomissural e melanose em leptomeninges e paredes dos vasos. Lesões com pouca ou nenhuma importância relacionadas ao envelhecimento incluíram lipofuscina, hemossiderina, mineralização, hialinização das paredes dos vasos do encéfalo e das meninges. Corpora amylacea foram detectados em processos astrocíticos e corpora arenacea, no corpo pineal. Adicionalmente, foi observada vacuolização no citoplasma de neurônios do núcleo vermelho e do núcleo habenular. Sarcocystis sp. sem reação inflamatória correspondente foi raramente observado. Incluídos nos achados sem manifestação clínica estavam esferóides axonais e manguitos mononucleares perivasculares. Alterações no SNC causadas pelo método de abate, amostragem e fixação podem simular ou obscurecer lesões mais importantes...(AU)

Gross and histopathological pitfalls found in the examination of 3338 cattle brains submitted to the BSE surveillance program in Brazil / Ciladas macroscópicas e histopatológicas encontradas no exame de 3338 encéfalos de bovinos submetidos ao programa de vigilância da EEB no Brasil

This study stems from the findings during the gross and histopathological exam of 3,338 cattle brains as part of the bovine spongiform encephalopathy (BSE) active surveillance program of the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock, and Supply from 2001 to 2005. The work was carried out in the Veterinary Pathology Laboratory of the Federal University of Santa Maria which at the time (2001-2007) was the national reference laboratory for the diagnosis of BSE and other transmissible spongiform encephalopathies. Both gross and histopathological aspects are described. Several gross aspects were annotated: anatomic normal structures not commonly recognized (non-lesions), lesions of no clinical significance, postmortem changes and artifacts; all these can amount to important pitfalls that distract the pathologist during the routine gross examination of the central nervous system (CNS). Accordingly, equivalent pitfalls were described in the histological examination. Non-lesions observed were the pineal body, embryo remnants such as the external germinal layer of the cerebellum, subependymal plates, and clusters of neuroblasts in the basal ganglia; or circumventricular structures such as area postrema, subcomisural organ, and melanosis in the leptomeninges and vessel walls. Lesions with little or no clinical importance included age-related changes as lipofuscin, hemosiderin, mineralization and hyalinization of vessel walls within the brain and meninges. Corpora amylacea and corpora arenacea were detected respectively in astrocyte processes and the pineal body. Cytoplasmic neuronal vacuolization was observed in the red nucleus and habenular nucleus. Sarcocystis sp. without a correspondent inflammatory reaction was rarely observed. Included within findings with no clinical manifestation were axonal spheroids and perivascular mononuclear cuffings. Changes in the CNS due to killing, sampling and fixation methods can obscure or distract from the more critical lesions. The ones related to the process of killing included hemorrhages caused in cattle destroyed by a captive bolt. Artifacts related to sampling and handling of CNS tissue consisted of inclusion of bone sand in the neural tissue from sawing the calvarium; dark neurons produced by excessive handling of the brain, and micro-organisms that contaminated the tissues during sampling or histological processing. Postmortem autolytic or putrefactive changes observed included vacuolar changes in the myelin sheath, clear halos surrounding neurons and oligodendrocytes, clusters of putrefaction bacilli within vessels or dispersed throughout the brain tissue associated or not to clear halos. One interesting, and somewhat frequent, postmortem autolytic change found in the bovine brain was the partial dissolution of the granule cell layer (GCL) of the cerebellum, also referred to as conglutination of the GCL or as the French denomination "état glace". Due to the shortage of comprehensive publications in the subject, this review is intended to address the main pitfalls that can be observed in the brain of cattle hoping to help other pathologists avoiding misinterpret them.(AU)

Os resultados deste estudo foram obtidos pelo exame macroscópico e histopatológico de 3.338 cérebros de bovinos examinados durante o programa de vigilância ativa da encefalopatia espongiforme bovina (BSE) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), de 2001 a 2005. O trabalho foi realizado no Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) que, de 2001 a 2007, foi o laboratório nacional de referência para o diagnóstico da BSE e de outras encefalopatias espongiformes transmissíveis. Macroscopicamente, foram descritas estruturas anatômicas normais (não-lesões), mas que são, com frequência, interpretadas como lesões; lesões sem significado clínico; alterações pós-mortais e artefatos. Esses achados podem confundir e desviar a atenção do patologista durante o exame de rotina do sistema nervoso central (SNC). Da mesma forma, estruturas equivalentes foram descritas no exame histológico. As não-lesões observadas foram corpo pineal, remanescentes embrionários, como a camada germinativa externa do cerebelo, placas subependimárias e aglomerados de neuroblastos nos gânglios da base; ou estruturas circunventriculares, como área de postrema, órgão subcomissural e melanose em leptomeninges e paredes dos vasos. Lesões com pouca ou nenhuma importância relacionadas ao envelhecimento incluíram lipofuscina, hemossiderina, mineralização, hialinização das paredes dos vasos do encéfalo e das meninges. Corpora amylacea foram detectados em processos astrocíticos e corpora arenacea, no corpo pineal. Adicionalmente, foi observada vacuolização no citoplasma de neurônios do núcleo vermelho e do núcleo habenular. Sarcocystis sp. sem reação inflamatória correspondente foi raramente observado. Incluídos nos achados sem manifestação clínica estavam esferóides axonais e manguitos mononucleares perivasculares. Alterações no SNC causadas pelo método de abate, amostragem e fixação podem simular ou obscurecer lesões mais importantes. Aquelas relacionadas ao método de abate incluíram hemorragias causadas em bovinos dessensibilizados pelo dardo cativo ou por punção por faca da medula na articulação atlanto-occipital. Artefatos relacionados à amostragem e manuseio de tecido do SNC consistiram na inclusão de pó de osso no tecido neural em consequência do uso de serra para abrir a caixa craniana; neurônios escuros produzidos pelo manuseio excessivo do cérebro e micro-organismos que contaminaram os tecidos durante a amostragem ou processamento histológico. Alterações autolíticas pós-mortais ou de putrefação incluíram vacuolizações na bainha de mielina, halos claros em torno dos neurônios e oligodendrócitos, aglomerados de bacilos de putrefação dentro dos vasos ou dispersos em todo o tecido cerebral, relacionados ou não a halos claros. Uma alteração autolítica pós-mortal intrigante e relativamente frequente encontrada foi a dissolução parcial da camada de células granulares (CCG) do cerebelo, também referida como conglutinação da CCG ou "état glacé". Devido à escassez de publicações abrangentes neste assunto, esta revisão pretende abordar as principais ciladas que possam aparecer no cérebro de bovinos, na esperança de ajudar outros patologistas a evitar interpretá-las erroneamente.(AU)

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.(AU)

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.(AU)

Encefalopatia espongiforme bovina atípica: uma revisão / Atypical bovine spongiform encephalopathy: a review

A encefalopatia espongiforme bovina (EEB), causada por um príon infectante, surgiu na década de 1980 na Europa como uma nova doença nos rebanhos bovinos e, desde então, estão sendo tomadas várias ações para sua prevenção e controle. A restrição da alimentação de ruminantes com subprodutos de origem animal e a remoção e destruição dos materiais de risco específico para a doença das carcaças em frigoríficos se mostraram efetivas medidas para o controle da doença, além de reduzirem a exposição humana ao agente, pois se trata de uma importante zoonose. No entanto, em 2004 os primeiros casos atípicos de EEB foram diagnosticados, nos quais os agentes causais apresentavam alterações de peso molecular na prova de Western blot, em relação ao agente da forma clássica. Além das diferenças moleculares dos agentes, as apresentações clínicas mostraram-se diferenciadas nas formas atípicas, acometendo principalmente bovinos com idade superior a oito anos. Por se tratar de uma nova forma da doença, muitos estudos estão sendo conduzidos buscando elucidar a patogenia, epidemiologia e seu potencial zoonótico. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados às EEB atípicas enfatizando sua etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico e medidas de controle.(AU)

Bovine spongiform encephalopathy (BSE), caused by an infectious prion, emerged in the 1980s in Europe as a new disease in cattle and, since then, several actions are being taken for its prevention and control. Restricting the feeding of ruminants with animal by-products and the removal and destruction of specific risk materials (SRM) for the condition of carcasses in slaughterhouses have been proven effective to control the disease, in addition to the reduction of human exposure to the agent, as this is an important zoonosis. However, in 2004 the first atypical cases of BSE were diagnosed, in which the causative agents showed different molecular weights in Western blot (WB), compared to the classical form of the agent. In addition to the molecular differences, clinical presentations proved to be differentiated in atypical forms, affecting mainly cattle older than eight years. Because it is a new form of the disease, many studies are being conducted to elucidate the pathogenesis, epidemiology and zoonotic potential of atypical BSE. The aim of this study was to review the main aspects of atypical BSE emphasizing its etiology, epidemiology, clinical signs, diagnosis and control and prevention measures.(AU)

Traditional knowledge and uses of medicinal plants by the inhabitants of the islands of the São Francisco river, Brazil and preliminary analysis of Rhaphiodon echinus (Lamiaceae)

Abstract This study aimed to carry out an ethnobotanical survey of medicinal plants used by inhabitants of the Rodeadouro Island, Jatoba Island and Massangano Island, located in The Submedium São Francisco River Valley. Also phytochemicals and preliminary pharmacological tests were performed to species most cited by the community. Ethnobotanical data were collected through observation visits and semi-structured interviews with 12 key informants. We calculated the relative importance (RI), the percentage of agreement related to the main uses (cAMU) and use value (UV). The aerial parts of Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer were used to obtain the lyophilizate (LYO-Re), crude ethanol extract (CEE-Re) and their hexanic (HEX-Re), chloroform (CLO-Re) and ethyl acetate (EA-Re) fractions. The microdilution technique was used for determining Minimum inhibitory concentration (MIC) for selected microorganisms. Already the spasmolytic effect was evaluated in isolated uterus fragments of Wistar rats, pre contracted with KCl 60 mM. We found 34 species cited, belonging to 22 families. The most plants were grown by locals. There were 51 different diseases, but the main indication was infectious and parasitic diseases. The species R. echinus was the most reported and it was indicated for urinary tract infection and dysmenorrhea. The screening revealed a higher prevalence of flavonoids, tannins, lignans and saponins in LYO-Re and AE-Re. Already terpene compounds were more present in HEX-Re and CLO-Re. The RE-Re fraction stood out with strong effect against E. coli and S. aureus while CEE-Re has moderate effect against gram-negative bacteria. The evaluation of the spasmolytic activity showed that LYO-Re, CEE-Re and HEX-Re fractions have similar activity, with partial effect and concentration-dependent response. This work brought about knowledge and use of medicinal plants by the riparian of the São Francisco River. It also revealed the importance of other methodologies for scientific evidence for the popular use of R. echinus.

Resumo Objetivou-se realizar um levantamento etnobotânico de plantas medicinais utilizadas nas ilhas do Massangano, Jatobá II e Rodeadouro, localizadas entre Petrolina-PE e Juazeiro-BA, no submédio do rio São Francisco e posterior investigação fitoquímica e farmacológica da espécie mais citada, conforme a indicação da comunidade. Realizaram-se visitas de observação nas ilhas e os dados etnobotânicos foram coletados por entrevistas semiestruturadas com 12 informantes-chave. Calculou-se a Importância Relativa (IR), a Porcentagem Corrigida de Concordância quanto ao Uso Principal (CUPc) e o Valor de Uso (VU). Utilizaram-se as partes aéreas da espécie mais citada para obtenção do extrato etanólico bruto (EEB-Re), suas frações hexânica (HEX-Re), clorofórmica (CLO-Re) e acetato de etila (AE-Re); o produto liofilizado (LIO-Re) e o óleo essencial (OE-Re). A técnica de microdiluição foi usada para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para microorganismos selecionados. A atividade espasmolítica foi avaliada em fragmentos isolados de útero de ratas Wistar pré-contraídos com KCl 60 mM. Foram relatadas 34 espécies, contidas em 22 famílias diferentes. A maioria das plantas era cultivada pelos moradores. Registraram-se 51 enfermidades diferentes, mas a principal indicação foi doenças parasitárias e infecciosas. A espécie Rhaphiodon echinus (Ness & Mart.) Schauer foi a mais citada, com principal indicação para tratar infecção do trato urinário e dismenorreia. O screening fitoquímico revelou prevalência de flavonoides, taninos, lignanas e saponinas em LIO-Re e AE-Re e compostos terpênicos em HEX-Re e CLO-Re. Os testes antibacterianos mostraram que AE-Re é mais atuante contra E. coli e S. aureus do que para P. aeruginosa. O EEB-Re tem efeito parcial contra bactérias gram-negativas e OE-Re possui moderada resposta para todos microorganismos testados. LIO-Re, EEB-Re e HEX-Re possuem atividade espasmolítica dependente da concentração, sem diferença significativa e sem relaxamento total. Este trabalho trouxe conhecimento sobre o uso de plantas medicinais pelos ribeirinhos do rio São Francisco e revela a importância de estudos mais aprofundados para a comprovação científica do uso popular da R. echinus.

Política sanitária para prevenção e vigilância da encefalopatia espongiforme bovina no Brasil / Sanitary policy for the prevention and surveillance of bovine spongiform encephalopathy in Brazil

O Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB) foi instituído pela Instrução Normativa nº 44, de 17 de setembro de 2013. Anteriormente, a política sanitária estava inserida no Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herbívoros. Desde 1990, as ações de prevenção da EEB vêm sendo estabelecidas e aprimoradas continuamente. Os principais objetivos do PNEEB são: evitar a entrada do agente da EEB no território nacional, aplicar medidas de mitigação de risco, no intuito de evitar eventual reciclagem e difusão do agente da EEB no país e manter um sistema de vigilância para detecção de animais infectados. As medidas sanitárias preventivas estão harmonizadas com o disposto pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE), que considera a gestão de risco para a ocorrência da EEB, sendo que, atualmente, classifica o Brasil na categoria de risco insignificante, demonstrando efetividade das medidas em curso. Para a prevenção da EEB é primordial o envolvimento de todos os setores, públicos (federal, estadual e municipal) e privados (produtores rurais, profissionais agropecuários, instituições de pesquisa e ensino, dentre outros). Este artigo detalha as diretrizes do Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da EEB (PNEEB), ressaltando as principais legislações e ações realizadas no estado de São Paulo, e explica a importância da adoção de medidas de prevenção e da participação efetiva dos profissionais do setor de saúde.

The Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB) was established by the Brazilian Normative Instruction nº 44, on September 17th, 2013. Previously, the health policy was part of the Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herbívoros. Since 1990, BSE preventive actions have been established and constantly improved. The main objectives of this program are: to prevent the entrance of BSE agent into the national territory; to apply risk mitigation measures to avoid possible recycling and diffusion of the BSE agent in the country and maintain a surveillance system for the detection of infected animals. The preventive health measures are in line with the World Organisation for Animal Health (OIE) recommendations, which examines the risk management for BSE occurrence, and currently have classified Brazil into the insignificant risk category, demonstrating the effectiveness of ongoing measures. The involvement of all sectors, public (federal, state and municipal) and private ones (rural producers, agricultural professionals, research and teaching institutions, among others), is decisive to prevent the BSE. This article details the guidelines of the Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB), highlighting the main legislation and actions in São Paulo, and explains the importance of preventive measures and the effectiveness of the participation of health professionals.

Política sanitária para prevenção e vigilância da encefalopatia espongiforme bovina no Brasil / Sanitary policy for the prevention and surveillance of bovine spongiform encephalopathy in Brazil

O Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB) foi instituído pela Instrução Normativa nº 44, de 17 de setembro de 2013. Anteriormente, a política sanitária estava inserida no Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herbívoros. Desde 1990, as ações de prevenção da EEB vêm sendo estabelecidas e aprimoradas continuamente. Os principais objetivos do PNEEB são: evitar a entrada do agente da EEB no território nacional, aplicar medidas de mitigação de risco, no intuito de evitar eventual reciclagem e difusão do agente da EEB no país e manter um sistema de vigilância para detecção de animais infectados. As medidas sanitárias preventivas estão harmonizadas com o disposto pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE), que considera a gestão de risco para a ocorrência da EEB, sendo que, atualmente, classifica o Brasil na categoria de risco insignificante, demonstrando efetividade das medidas em curso. Para a prevenção da EEB é primordial o envolvimento de todos os setores, públicos (federal, estadual e municipal) e privados (produtores rurais, profissionais agropecuários, instituições de pesquisa e ensino, dentre outros). Este artigo detalha as diretrizes do Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da EEB (PNEEB), ressaltando as principais legislações e ações realizadas no estado de São Paulo, e explica a importância da adoção de medidas de prevenção e da participação efetiva dos profissionais do setor de saúde.(AU)

The Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB) was established by the Brazilian Normative Instruction nº 44, on September 17th, 2013. Previously, the health policy was part of the Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herbívoros. Since 1990, BSE preventive actions have been established and constantly improved. The main objectives of this program are: to prevent the entrance of BSE agent into the national territory; to apply risk mitigation measures to avoid possible recycling and diffusion of the BSE agent in the country and maintain a surveillance system for the detection of infected animals. The preventive health measures are in line with the World Organisation for Animal Health (OIE) recommendations, which examines the risk management for BSE occurrence, and currently have classified Brazil into the insignificant risk category, demonstrating the effectiveness of ongoing measures. The involvement of all sectors, public (federal, state and municipal) and private ones (rural producers, agricultural professionals, research and teaching institutions, among others), is decisive to prevent the BSE. This article details the guidelines of the Programa Nacional de Prevenção e Vigilância da Encefalopatia Espongiforme Bovina (PNEEB), highlighting the main legislation and actions in São Paulo, and explains the importance of preventive measures and the effectiveness of the participation of health professionals.(AU)

Polymorphisms in the Prion Protein Gene of cattle breeds from Brazil / Polimorfismos no gene da proteína priônica em bovinos no Brasil

One of the alterations that occur in the PRNP gene in bovines is the insertion/deletion (indel) of base sequences in specific regions, such as indels of 12-base pairs (bp) in intron 1 and of 23- bp in the promoter region. The deletion allele of 23 bp is associated with susceptibility to bovine spongiform encephalopathy (BSE) as well as the presence of the deletion allele of 12 bp. In the present study, the variability of nucleotides in the promoter region and intron 1 of the PRNP gene was genotyped for the Angus, Canchim, Nellore and Simmental bovine breeds to identify the genotype profiles of resistance and/or susceptibility to BSE in each animal. Genomic DNA was extracted for amplification of the target regions of the PRNP gene using polymerase chain reaction (PCR) and specific primers. The PCR products were submitted to electrophoresis in agarose gel 3% and sequencing for genotyping. With the exception of the Angus breed, most breeds exhibited a higher frequency of deletion alleles for 12 bp and 23 bp in comparison to their respective insertion alleles for both regions. These results represent an important contribution to understanding the formation process of the Brazilian herd in relation to bovine PRNP gene polymorphisms.(AU)

Uma das mudanças que ocorrem no gene PRNP em bovinos é a inserção e/ou deleção (indels) de sequências de bases, em determinadas regiões como, por exemplo, as indels de 12 pares de bases (pb) no íntron 1 e 23pb na região promotora. O alelo de deleção de 23pb está relacionado com a suscetibilidade à Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB), assim como a presença do alelo de deleção de 12pb. Neste estudo foi genotipada a variabilidade de nucleotídeos da região promotora e íntron 1 do gene PRNP em bovinos das raças Angus, Canchim, Nelore e Simental, para identificar os perfis genotípicos de resistência e/ou suscetibilidade à EEB de cada animal. Foi realizada a extração de DNA genômico para amplificação das regiões alvo do gene PRNP, por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR) utilizando-se primers específicos. Os produtos da PCR foram submetidos à eletroforese em gel de agarose a 3%, e sequenciamento para a realização da genotipagem. Com exceção da raça Angus, a maioria das raças apresentaram maiores frequências do alelo de deleção tanto para 12pb como 23pb, em comparação com seus respectivos alelos de inserção, para as duas regiões. Esses resultados abrem caminhos para o conhecimento de como o rebanho brasileiro está sendo formado com relação aos polimorfismos do gene PRNP bovino.(AU)

Polymorphisms in the Prion Protein Gene of cattle breeds from Brazil / Polimorfismos no gene da proteína priônica em bovinos no Brasil

One of the alterations that occur in the PRNP gene in bovines is the insertion/deletion (indel) of base sequences in specific regions, such as indels of 12-base pairs (bp) in intron 1 and of 23- bp in the promoter region. The deletion allele of 23 bp is associated with susceptibility to bovine spongiform encephalopathy (BSE) as well as the presence of the deletion allele of 12 bp. In the present study, the variability of nucleotides in the promoter region and intron 1 of the PRNP gene was genotyped for the Angus, Canchim, Nellore and Simmental bovine breeds to identify the genotype profiles of resistance and/or susceptibility to BSE in each animal. Genomic DNA was extracted for amplification of the target regions of the PRNP gene using polymerase chain reaction (PCR) and specific primers. The PCR products were submitted to electrophoresis in agarose gel 3% and sequencing for genotyping. With the exception of the Angus breed, most breeds exhibited a higher frequency of deletion alleles for 12 bp and 23 bp in comparison to their respective insertion alleles for both regions. These results represent an important contribution to understanding the formation process of the Brazilian herd in relation to bovine PRNP gene polymorphisms.(AU)

Uma das mudanças que ocorrem no gene PRNP em bovinos é a inserção e/ou deleção (indels) de sequências de bases, em determinadas regiões como, por exemplo, as indels de 12 pares de bases (pb) no íntron 1 e 23pb na região promotora. O alelo de deleção de 23pb está relacionado com a suscetibilidade à Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB), assim como a presença do alelo de deleção de 12pb. Neste estudo foi genotipada a variabilidade de nucleotídeos da região promotora e íntron 1 do gene PRNP em bovinos das raças Angus, Canchim, Nelore e Simental, para identificar os perfis genotípicos de resistência e/ou suscetibilidade à EEB de cada animal. Foi realizada a extração de DNA genômico para amplificação das regiões alvo do gene PRNP, por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR) utilizando-se primers específicos. Os produtos da PCR foram submetidos à eletroforese em gel de agarose a 3%, e sequenciamento para a realização da genotipagem. Com exceção da raça Angus, a maioria das raças apresentaram maiores frequências do alelo de deleção tanto para 12pb como 23pb, em comparação com seus respectivos alelos de inserção, para as duas regiões. Esses resultados abrem caminhos para o conhecimento de como o rebanho brasileiro está sendo formado com relação aos polimorfismos do gene PRNP bovino.(AU)

Hymenaea martiana e polipirrol: Potenciais antimicrobianos in vitro e in vivo contra Aeromonas hydrophila

A piscicultura vem se destacando nos últimos anos, representando a cadeia produtiva de produtos cárneos que mais cresce dentre as atividades de maior relevância. Porém, um dos entraves da piscicultura são doenças causadas por bactérias e, o intenso uso de antibióticos para o combate às infecções dos plantéis tem selecionado cepas multirresistentes. Este trabalho teve como objetivos analisar o potencial antimicrobiano do extrato etanólico bruto (EEB) da folha da Hymenaea martiana e do polipirrol (PPy) contra Aeromonas hydrophila e, avaliar o efeito sobre a sobrevivência de tilápias alimentadas com ração contendo extrato etanólico bruto da folha da H. martiana e PPy e desafiadas com A. hydrophila. Foram realizados testes in vitro de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) dos compostos individuais e em sinergia contra a A. hydrophila. O experimento in vivo foi dividido em três tratamentos testes com ração contendo EEB da folha de jatobá e polipirrol e um tratamento controle. Os animais utilizados no teste in vivo pesavam por volta de 5g e foram divididos em vinte aquários contendo cinco peixes cada, alimentados com as respectivas rações em uma taxa de 10% do peso vivo. Nos testes in vitro o EEB da folha de jatobá e PPy tiveram ação eficaz contra A. hydrophila com resultados de CBM de 3125 g/mL para o EEB de jatobá e de 62,5 g/mL para PPy. Nos testes in vitro de interação dos compostos (checkerboard), os resultados demonstraram significativa redução dos valores individuais. Assim tivemos para o PPy uma redução da CBM para 1,95 g/mL e no EEB de jatobá o valor foi para 781,25 g/mL. Uma redução de trinta e duas vezes para o PPy e de quatro vezes para a CBM do EEB de jatobá, respectivamente. Para o experimento in vivo as concentrações de aditivo (EEB/PPy) encontradas nos testes de checkerboard foram então multiplicadas por 10 e introduzidos nas seguintes proporções (0,0 e 0,0; 0,8 e 0,002; 1,6 e 0,004 e 3,2 e 0,008% / kg de ração) de EEB da folha de Hymenaea martiana e PPy, correspondendo aos tratamentos T1, T2, T3 e T4, respectivamente. Nos testes in vivo, os tratamentos se mostraram estatisticamente iguais, porém a dieta com suplementação de 1,6 % (EEB) e 0,004 % (PPy) demonstrou uma menor taxa de mortalidade. Novos estudos que testem os componentes isolados do EEB de Hymenaea martiana em sinergia com PPy, florfenicol e entre si devem ser testados para verificar a qualidade de suas interações e a melhoria da resposta imune dos animais.

Fish farming has stood out in recent years, representing the meat product chain that grows most among the most relevant activities. However, one of the obstacles to fish farming are diseases caused by bacteria and the intense use of antibiotics to fight infections in the breeding stock has selected multiresistant strains. This work aimed to analyze the antimicrobial potential of the crude ethanolic extract (CEE) of the leaf of Hymenaea martiana and of the polypyrrole (PPy) against Aeromonas hydrophila and to evaluate the effect on the survival of tilapia fed with diet containing crude ethanol extract from the leaf of the H. martiana and PPy and challenged with A. hydrophila. In vitro tests of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (CBM) of individual compounds were carried out and in synergy against A. hydrophila. The in vivo experiment was divided into three test treatments with feed containing CEE from the jatoba leaf and polypyrrole and a control treatment. The animals used in the in vivo test weighed around 5g and were divided into twenty aquariums containing five fish each, fed with their respective diets at a rate of 10% of live weight. In the in vitro tests, the CEE of the jatoba leaf and PPy had an effective action against A. hydrophila with CBM results of 3125 g/mL for the CEE of jatoba and 62.5 g/mL for PPy. In the in vitro compound interaction tests (checkerboard), the results showed a significant reduction in individual values. Thus, for PPy, we had a reduction in CBM to 1.95 g/mL and in CEE of jatobá the value was 781.25 g/mL. A reduction of thirty-two times for the PPy and four times for the CBM of the Jatobá CEE, respectively. For the in vivo experiment, the additive concentrations (CEE/PPy) found in the checkerboard tests were then multiplied by 10 and introduced in the following proportions (0.0 and 0.0; 0.8 and 0.002; 1.6 and 0.004 and 3.2 and 0.008%/kg of feed) of BSE from the leaf of H. martiana and PPy, corresponding to treatments T1, T2, T3 and T4, respectively. In the in vivo tests, the treatments were shown to be statistically equal, however the supplemented diet of 1.6% (CEE) and 0.004% (PPy) showed a lower mortality rate. New studies that test the isolated components of H. martiana CEE in synergy with PPy, florfenicol and each other should be tested to verify the quality of their interactions and the improvement of the animals' immune response.

AVALIAÇÃO DO DODECIL SULFATO DE SÓDIO (SDS) E DE PRODUTOS NATURAIS COMO ANTIVIRAIS PARA LENTIVÍRUS DE PEQUENOS RUMINANTES EM COLOSTRO E LEITE CAPRINO

As Lentiviroses de Pequenos Ruminantes causam infecções crônicas em caprinos e ovinos, podendo ocasionar mastite, artrite, emagrecimento progressivo, pneumonia e problemas neurológicos. Estas enfermidades têm como principal via de transmissão a ingestão de leite e colostro oriundo de animais infectados, além de possuírem um alto índice de contágio e permanência em rebanhos a nível mundial. Vale ressaltar que, até o momento, não há tratamentos e/ou vacinas eficazes e disponíveis, necessitando, assim, a busca de meios inovadores passíveis de serem implementados no combate a estas enfermidades. Atualmente, vem se desenvolvendo pesquisas para o uso de antivirais tanto de origem sintética, como o dodecil sulfato de sódio (SDS), como de origem fitoquímica, como extratos Azadirachta indica A. Juss (Nim) e Melia azedarach (Cinamomo), que já demostraram ação antiviral com o vírus da imunodeficiência humana (HIV), os vírus da dengue e o herpes vírus tipo 1. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antiviral do SDS e de produtos naturais provenientes de meliáceas contra lentivírus de pequenos ruminantes presente em colostro e leite caprino. Este estudo foi dividido em duas etapas: Na primeira etapa, foi avaliado a ação antiviral do SDS no colostro e leite, em um estudo in vitro e in vivo. No estudo in vitro pode-se observar a ação antiviral do SDS na concentração de 1% no leite, no colostro, a ação antiviral não foi observada. Quanto ao estudo in vivo, esta concentração de 1% não foi eficiente e gerou problemas de saúde nos animais testados. Na segunda etapa, foram testados, in vitro, os extratos etanólicos brutos (EEB) de A. indica e M. azedarach, e as respectivas frações de acetato de etila (FAE) e metanol (FM), na contração de 150 g/mL, nas cepas isoladas de LVPRs (CAEVCO e MVVK1514) e em amostras de colostro e leite infectados pelo lentivírus caprino (LVC). Nas cepas de LVPRs, é possível observar a ação antiviral dos extratos de A. indica e M. azedarach, mais evidente na FAE, ao longo do ciclo replicativo da cepa aos CAEVCO e na cepa de MVVK1514, esta ação ocorreu somente com os extratos de A. indica, também na FAE, quando testados durante a inoculação viral. Em relação as amostras de colostro e leite, a FAE, na mesma concentração, de ambas as meliáceas, demonstrou maior eficácia contra LVC, com efeito antiviral potencializado principalmente no colostro.

Small Ruminant Lentiviroses cause chronic infections in goats and sheep, and can cause mastitis, arthritis, progressive weight loss, pneumonia, and neurological problems. These diseases has their main route of transmission the ingestion of milk and colostrum from infected animals, besides to having a high rate of contagion and permanence in herds worldwide. It is worth mentioning that, until now, there are no effective and available treatments and / or vaccines, thus requiring the search for innovative means that can be implemented in the fight against these diseases. Researches is currently being carried out on the use of antivirals, both synthetic in origin, such as sodium dodecyl sulfate (SDS), as well as phytochemical, such as extracts of Azadirachta indica and Melia azedarach, which have already demonstrated antiviral action with the human immunodeficiency virus (HIV), dengue viruses and herpes virus type 1. Therefore, the objective of this work was to evaluate the antiviral activity of SDS and natural products from meliaceas against small ruminant lentivirus present in colostrum and goat milk. This study was divided into two stages: In the first stage, the antiviral action of SDS on colostrum and milk was evaluated in an in vitro and in vivo study. In the in vitro study it is possible to observe the antiviral action of SDS at a concentration of 1% in milk. In colostrum, the antiviral action was not observed. About the in vivo study, this concentration of 1% was not efficient and generated health problems in the tested animals. In the second stage, the crude ethanolic extracts (BSE) of A. indica and M. azedarach were tested in vitro, with the respective fractions of ethyl acetate (EAF) and methanol (MF), in contraction of 150 g / mL in the isolated strains from LVPRs (CAEVCO and MVVK1514) and in samples of colostrum and milk infected caprine lentivirus (CLV). In the strains of SRLVs, it is possible to observe the antiviral action of the extracts of A. indica and M. azedarach, more evident in FAE, throughout the replicative cycle of the strain to CAEVCO and in the strain of MVVK1514. This action occurred only with the extracts of A. indica, also in EAF, when tested during viral inoculation. Regarding colostrum and milk samples, the EAF, in the same concentration, of both meliaceas, demonstrated greater efficacy against CLV, with antiviral effect potentiated mainly in colostrum.

VIGILÂNCIA DA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA (EEB) NO ESTADO DO MARANHÃO

O presente estudo objetivou caracterizar a vigilância ativa da Encefalopatia Espongiforme Bovina no Estado do Maranhão, relatar um episódio sanitário da ingestão de cama de aviário por bovinos e realizar diagnóstico situacional e parasitológico das camas de aviário oriundas de criatórios avícolas localizados no Sertão maranhense. Para obtenção das informações realizou-se levantamento de dados extraídos do Termo de investigação de alimentos fornecidos a ruminantes em estabelecimento de criação aplicados pelo Serviço Veterinário Oficial, no período de 2016 a 2019. Constatou-se que no período avaliado foram realizadas 526 fiscalizações em propriedades rurais para investigação de alimentos fornecidos a ruminantes em estabelecimento de criação, sendo 98,9% provenientes da vigilância ativa. A caracterização possibilitou a identificação do perfil dos estabelecimentos de criação fiscalizados, com predominância de: (i) exploração do tipo bovinocultura de corte 54,8%); (ii) sistema de criação extensivo (56,7%); (iii) bovinos como espécie de ruminante mais explorada (88,4%); e, (iv) alimentação dos ruminantes com pastagem associada a concentrados e/ou suplementos de diferentes tipos (60,3%). Registrou-se a presença de cama de aviário na propriedade em 18,3% das fiscalizações e em 1% constatou-se a utilização dessa cama na alimentação dos ruminantes. Quanto ao episódio sanitário, este foi resultado de vigilância ativa do serviço veterinário oficial no município de São João dos Patos, que mediante suspeita realizou coleta de amostra da alimentação dos bovinos para análise, onde fora confirmada a presença de ossos não calcinados, penas não hidrolisadas e sangue. Foram adotados os procedimentos para saneamento da propriedade conforme descrito na legislação vigente: interdição da propriedade, identificação dos animais que consumiram a cama de aviário, visitas complementares à propriedade até a confirmação laboratorial e abate dos animais envolvidos com retirada e eliminação dos materiais de risco específico. Com relação ao diagnóstico situacional e parasitológico das camas de aviário oriundas de criatórios avícolas localizados no Sertão maranhense foi possível identificar o perfil dos proprietários, as características das criações avícolas, o manejo sanitário adotado, bem como a produção e utilização da cama de aviário. Os exames parasitológicos mostraram a presença de ovos e larvas de nematoides, e coccídeos em 47,05% e 29,41% das amostras, respectivamente. Na análise morfológica dos oocistos encontrou-se as espécies Eimeria sp, todas de importância para sanidade avícola, não representando problemas para os ruminantes. Apesar da proibição, ainda é praticado o uso de cama de aviário para alimentar bovinos no Estado do Maranhão, dessa forma ressalta-se a importância das ações de vigilância nas propriedades com criação de ruminantes associadas às atividades de educação sanitária, bem como a importância do controle da cama de aviário para assegurar a destinação adequada desta e mitigar o risco da introdução da Encefalopatia Espongiforme Bovina.

The present study aimed to characterize the active surveillance of Bovine Spongiform Encephalopathy in the State of Maranhão, to report a sanitary episode of ingestion of poultry litter by cattle and to make a situational and parasitological diagnosis of poultry litter from poultry farms located in the hinterland of Maranhão. To obtain the information, a survey of data extracted from the Term of investigation of food provided to ruminants in a breeding establishment was applied by the Official Veterinary Service, in the period from 2016 to 2019. It was found that in the evaluated period, 526 inspections were carried out on rural properties to investigate food supplied to ruminants in a breeding establishment, 98.9% of which came from active surveillance. The characterization made it possible to identify the profile of the inspected breeding establishments, with a predominance of: (i) beef cattle farming (54.8%); (ii) extensive breeding system (56.7%); (iii) cattle as the most exploited ruminant species (88.4%); and, (iv) feeding of ruminants with pasture associated with concentrates and / or supplements of different types (60.3%). The presence of poultry litter on the property was registered in 18.3% of inspections and in 1% the use of this bed in the feeding of ruminants was verified. As for the sanitary episode, this was the result of active surveillance by the official veterinary service in the municipality of São João dos Patos, which, upon suspicion, collected a sample of the bovine feed for analysis, where the presence of non-calcined bones, non-hydrolyzed feathers was confirmed and blood. Procedures for sanitation of the property were adopted as described in the current legislation: interdiction of the property, identification of the animals that consumed the poultry litter, complementary visits to the property until laboratory confirmation and slaughter of the animals involved with the removal and disposal of specific risk materials. Regarding the situational and parasitological diagnosis of poultry litter from poultry farms located in the hinterland of Maranhão, it was possible to identify the profile of the owners, the characteristics of poultry farms, the adopted sanitary management, as well as the production and use of the poultry litter. Parasitological examinations showed the presence of eggs and larvae of nematodes, and coccids in 47.05% and 29.41% of the samples, respectively. In the morphological analysis of the oocysts, the species Eimeria sp were found, all of importance for poultry health, not representing problems for ruminants. Despite the prohibition, the use of poultry litter to feed cattle in the State of Maranhão is still practiced, thus emphasizing the importance of surveillance actions on properties with the creation of ruminants associated with health education activities, as well as the importance of control of poultry litter to ensure its proper destination and mitigate the risk of introducing Bovine Spongiform Encephalopathy.

AÇÃO DO EXTRATO ETANÓLICO DA Hymenaea martiana NA PRODUÇÃO DE BIOFILME E ADERÊNCIA DE Aeromonas spp.

O interesse pela ação farmacológica de produtos naturais tem crescido e encontrado significativa aceitação popular. Nas culturas de organismos aquáticos, os fitoterápicos são utilizados para diversas finalidades, como estimuladores de apetite e do sistema imunológico e como proposta de cultivos mais saudáveis e orgânicos. Mas, são problemas de surtos de mortalidade causados por Aeromonas spp. em cultivos, que levaram a proposições de novas com o extrato etanólico bruta (EEB) de Hymenaea martiana (Jatobá) contra fatores de virulência ligados as infecções por esse micro-organismo. O extrato foi testado em modelos in vitro e ex vivo, utilizado como substrato ex vivo, epitélio de Tilápia do Nilo exposto em placas de Petri à inóculos de Aeromonas spp. e ao extrato testado. Para a confirmação da presença de cinco genes de virulência importantes na aderência, fixação e invasão principalmente, foram feitos testes moleculares, onde 90% dos isolados apresentaram pelo menos um dos cinco genes analisados, sendo selecionados para o teste ex vivo os 14 isolados que apresentaram o maior número de genes pesquisados. O EEB de jatobá apresentou efetividade como antimicrobiano, possuindo como concentração bactericida mínima 781,3g/ml, onde foi analisado napesquisa a metade desse valor (concentração sub-inibitória). O modelo ex vivo foi avaliado em três ensaios laboratoriais (A, B e C), onde no grupo A (com EEB e sem icóculo), foi confirmado por histologia, que o EEB não se mostrou tóxico no epitélio, enquanto no grupo B (com inóculo e sem EEB) a aderência bacteriana foi associada ao grande desgaste do tecido, contrário do observado no Grupo C(com EEB e inóculo) onde a presença do EEB possibilitou a diminuição da aderência bacteriana e assim interferindo na freqüência da autólise tecidual. Foi confirmada a eficácia do EEB de jatobá contra fatores relacionados com a aderência e fixação da A. spp., não agredindo o epitélio da tilápia cultivada. O modelo ex vivo ainda possibilitou, com o uso de um meio mais complexo do que o caldo Muller Hinton (MH) usado no modelo in vitro, de observar reações do extrato, utilizando menos animais em uma proposta mais ética, abordando valores de redução, refinamento e substituição do uso de animais em pesquisas.

Interest in the pharmacological action of natural products has grown and found significant popular acceptance. In cultures of aquatic organisms, these herbal remedies have found several uses, such as appetite stimulators and the immune system. But they are problems of mortality outbreaks caused by Aeromonas spp. in cultures that lead the research to propose 72 new interventions with the crude ethanolic extract of the leaf of Hymenaea martiana against virulence factors linked to the infections by this microorganism. The methodologies tested were in vitro and ex vivo models, where the latter was used as substrate, Nile Tilapia epithelium, the most cultivated sweet fish in Brazil. To confirm the presence of five important virulence genes in adherence, fixation, invasion among others, molecular tests were performed. All the evaluated isolates had at least three of the five analyzed genes. The H. martiana CEE, known as jatobá, showed antimicrobial effectiveness, with a minimum bactericidal concentration of 781.3 g / ml and half of this value (subinhibitory concentration) was evaluated ex vivo in three different laboratory tests, where in group A, after histopathological analysis, confirmed that CEE was not toxic in the epithelium, while in group B, without its presence bacterial adhesion was one of the causes for the great tissue wear, contrary to that observed in Group C, where the presence of CEE allowed the reduction of bacterial adhesion and thus the frequency of tissue autolysis. The H. martiana BSE confirmed its efficacy against factors related to the adhesion and fixation of A. spp., Not attacking the cultured tilapia epithelium. The ex vivo model also made it possible, through a more complex medium than the Muller Hinton broth used in the in vitro model, to observe extract reactions, using fewer animals and thus less suffering in a more ethical proposal, approaching values of reduction, refinement and replacing the use of animals in research.