Biofilm formation by Prototheca zopfii isolated from clinical and subclinical bovine mastitis in distinct growth conditions under different dyes / Formação de biofilme por Prototheca zopfii isolados de mastite bovina clínica e subclínica em distintas condições de crescimento sob diferentes corantes

Prototheca spp. have been reported as an emergent environmental mastitis pathogen in several countries. Biofilm formation is a significant factor associated with different degrees of virulence developed by many microorganisms, including Prototheca spp. The present study aimed to compare two growth conditions and two staining dyes to determine which combination was more appropriate to evaluate qualitatively and quantitatively the production of biofilm by P. zopfii. Biofilm formation was evaluated in polystyrene microplates under static and dynamic growth conditions and staining with crystal violet or cotton blue dye. All P. zopfii isolates from cows with mastitis were classified as biofilm-producers in all growth conditions and staining. The cotton blue dye proved to be more appropriate method to classify the intensity of P. zopfii biofilm production.(AU)

Prototheca spp. tem sido relatado como um patógeno ambiental causador de mastite bovina em vários países. A formação de biofilme é um fator associado a diferentes graus de virulência desenvolvidos por muitos microrganismos, incluindo Prototheca zopfii. O presente estudo teve como objetivo comparar duas condições de crescimento e dois corantes para determinar a combinação mais adequada para avaliar qualitativa e quantitativamente a produção de biofilme por P. zopfii. A formação de biofilme foi avaliada em microplacas de poliestireno sob condições estáticas e dinâmicas de crescimento e coloração com cristal violeta ou azul de algodão. Todos os isolados de P. zopfii de vacas com mastite foram caracterizados como produtores de biofilme, independentemente das condições de crescimento e coloração. O corante azul de algodão demonstrou ser o método mais adequado para classificar a intensidade de produção de biofilme de P. zopfii.(AU)

Caracterização genética e perfil de sensibilidade a antimicrobianos de isolados de Pasteurella multocida oriundos da cavidade bucal de gatos domésticos sadios e com gengivite

REIS, C. A. C. 2019. Caracterização genética e perfil de sensibilidade a antimicrobianos de isolados de Pasteurella multocida oriundos da cavidade bucal de gatos domésticos sadios e com gengivite. 53 p. Dissertação de mestrado - Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2019. Pasteurella multocida é um agente zoonótico encontrado frequentemente na cavidade bucal de gatos domésticos. Em anos recentes, tornou-se um patógeno emergente de grande importância em saúde pública e possivelmente esteja relacionada a casos de gengivite felina. Nesse contexto, o presente trabalho teve a finalidade de caracterizar isolados de P. multocida oriundos da cavidade bucal de gatos domésticos sadios e com gengivite. Além disso, investigou-se a presença de 14 genes relacionados a fatores de virulência e o perfil de sensibilidade antimicrobiana em 48 isolados de P. multocida oriundos da cavidade bucal desses gatos. Os resultados mostraram que P. multocida foi encontrada frequentemente em amostras da cavidade bucal de gatos domésticos sadios e com gengivite. Em adição, o tipo capsular A foi determinado em 100% dos isolados investigados e os principais genes relacionados aos fatores de virulência nesses isolados foram ompH, oma87, nanB, nanH, exbB/tonB e hgbB. O perfil de sensibilidade antimicrobiano mostrou que a maioria dos isolados de P. multocida foi sensível a enrofloxacina, ciprofloxacina, norfloxacina, gentamicina, neomicina e canamicina. Altas taxas de resistência bacteriana foram observadas frente ao cloranfenicol, doxiciclina e a tetraciclina. Por fim, o presente estudo criou um banco de 48 isolados de P. multocida devidamente caracterizados, que nos permitirão realizar novos experimentos, principalmente abordadando aspectos relacionados à imunologia e a patogenicidade.

REIS, C.A.C. 2019. Genetic characterization and antimicrobial sensitivity profile of Pasteurella multocida isolates derived from healthy and with gingivitis oral cavity of domestic cats. 53 p. Dissertação de mestrado Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2019. Pasteurella multocida is a zoonotic agent frequently found in the oral cavity of domestic cats. Over the last few years, it has become an emergent pathogen of great importance in public health and it may be related to clinical diagnosis of feline gingivitis. In this context, the following work was aimed to characterize P. multocida isolates derived from healthy and with gingivitis oral cavity of domestic cats. Besides that, we investigated the presence of 14 genes related to virulence factors and the antimicrobial sensitivity profile in 48 P. multocida isolates derived from the oral cavity of these cats. The results showed that P. multocida was frequently found in oral samples derived from healthy and with gingivitis oral cavity of domestic cats. In addition, capsular type A was determined to be in 100% of the analyzed isolates and the main genes related to virulence factors in these isolates were ompH, oma87, nanB, nanH, exbB/tonB, and hgbB. The antimicrobial sensitivity profile showed that most of the isolates of P. multocida were sensitive to enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin, gentamicin, neomycin e kanamycin. High rates of bacterial resistance were observed against chloramphenicol, doxycycline, and tetracycline. Lastly, the present study created a bank of 48 P. multocida isolates properly characterized that will allow us to perform new assays, mostly regarding aspects related to immunology and pathogenicity.

ANÁLISE DO GENOMA COMPLETO DA CEPA FRANCISELLA NOATUNENSIS SUBSP. ORIENTALIS F1 E PREDIÇÃO DE CANDIDATOS VACINAIS CONTRA FRANCISELOSE EM PEIXES DE ÁGUAS QUENTES E FRIAS

A espécie Francisella noatunensis subsp. orientalis, agente causador da franciselose em tilápias, tem recebido destaque na tilapicultura mundial devido ao seu caráter emergente e por causar perdas na produção, principalmente em países de climas tropicais. Por outro lado, em regiões predominantemente frias, peixes como bacalhau do atlântico, salmão e truta tem sido acometidos pela subespécie Francisella noatunensis subsp. noatunensis. Este estudo tem por objetivo sequenciar, montar e depositar em bancos de dados públicos o genoma completo de uma cepa de F. noatunensis subespécie orientalis e predizer in silico candidatos proteicos imunogênicos conservados entre as subespecies para o desenvolvimento de uma vacina eficaz contra a franciselose em peixes de águas quentes e frias. A cepa F1 foi isolada de um surto em tilapicultura ocorrido no noroeste do estado de São Paulo em 2015. O DNA foi submetido à sequenciamento de próxima geração, as reads resultantes do sequenciamento foram filtradas, montadas em contigs e alinhadas com uma cepa referência para criação de um sccafold. Os gaps resultantes foram preenchidos através da verificação e extensão das bordas dos intervalos em mapeamentos sucessivos com as reads. A filogenia foi analisada utilizando a ferramenta Gegenees e a identificação de candidatos vacinais foi realizada utilizando as ferramentas MEDpipe e Vaxign. As proteínas resultantes desta última análise foram checadas quanto à homologia no genoma completo de Oreochromis niloticus e F. noatunensis subsp. noatunensis. A função das proteínas identificadas foram preditas utilizando a ferramenta Interproscan. Através da comparação com 12 genomas completos de Francisella spp. disponíveis no GenBank, a análise de filogenia apresentou uma grande similaridade da cepa F1 com as cepas de F. noatunensis subsp. orientalis isoladas no Brasil, e com uma cepa isolada na Indonésia. Além disso, os grupos de cepas que acometem humanos apresentaram-se distantes das cepas que acometem peixes. A vacinologia reversa e análise das proteínas selecionadas revelaram um total de 5 proteínas (WP_014715657.1, WP_014714512.1, WP_012280666.1, WP_014714564.1 e WP_014714557.1) potencialmente expostas ou secretadas, conservadas entre as duas subspécies de F. noatunensis, imunogênicas e sem homologia com proteínas do hospedeiro. As proteínas selecionadas que apresentaram resultado na predição estão associadas à mecanismos de sobrevivência no interior de macrófagos e secreção de hemolisina. Por fim, os resultados obtidos por este estudo servem de base para o desenvolvimento de testes in vivo que validem a eficácia dos alvos vacinais e posteriormente sua aplicação no campo.

Francisella noatunensis subsp. orientalis is a pathogen responsible for francisellosis in tilapia. Due to its emergent nature and high mortality profile, this species is a big concern to world aquaculture. In tropical countries, F. noatunensis subsp. orientalis is responsible for francisellosis in tilapia in winter. On the other hand, in cold countries, Francisella noatunensis subsp. noatunensis causes disease in atlantic cod and trout. This study aims to sequence, assembly and submit to public databases the complete genome of a F. noatunensis subspecies orientalis and to predict in silico immunogenic conserved proteins among the subspecies that can induce an efficient vaccine against franciselosis in warm and cold waters fish. The F1 strain was isolated from a tilapia farm francisellosis outbreak in Northwest of Sao Paulo State in 2015. The DNA sample was submitted to Next-Generation Sequencing, and resulting reads were filtered, assembled to contigs and aligned to a reference strain to create a sccafold. Remaining gaps were filled through extensions of the gap borders in sucessive mappings with raw reads. Phylogeny was performed using Gegenees tool and the identification of vaccine targets was ran through MEDpipe and Vaxign tools. Resulting proteins were checked for homology in the complete genomes of Oreochromis niloticus and F. noatunensis subsp. orientalis. Proteins function were predited using Interproscan database. Twelve complete genomes of Francisella spp. availabe at GenBank were compared to the F1 strain in the phylogeny step. The F1 strain displayed a high similarity with other F. noatunensis subsp. orientalis isolated from Brazil and with a strain isolated in Indonesia. Beyond, clusters of strains that infect humans were distant from clusters of strains that causes disease in fish. Reverse veccinology analysis revealed 5 proteins (WP_014715657.1, WP_014714512.1, WP_012280666.1, WP_014714564.1 e WP_014714557.1) potentially surface exposed, conserved in the F. noatunensis species, high imunogenic and with no host homology. The proteins with predicted functions were associated with mechanisms of survival within macrophages and hemolysin secretion. Results obtained in this study allow in vivo research to validate the efficacy of the vaccine targets found, followed by the development of a subunit vaccine applicable in tilapia farms.

Salmonella Agona em Perus (Meleagris gallopavo) de criações comerciais no Brasil / Salmonella Agona in Turkeys (Meleagris gallopavo) in commercial farms from Brazil

Salmonella spp. é um dos principais agentes envolvidos em casos de doenças de origem alimentar em humanos, responsável por perdas significativas na avicultura. O presente trabalho investigou a presença de Salmonella spp. em fezes de perus comerciais no Brasil. Foram colhidos suabes fecais de 14 lotes de perus comerciais (pool de seis aves/lote). Os suabes foram submetidos aos procedimentos de isolamento bacteriológico convencionais e a detecção de DNA do agente foi realizada com a técnica de PCR. Salmonella spp. foi detectada em um total de nove lotes dos 14 avaliados. As amostras foram negativas na identificação molecular dos sorovares Enteritidis e Typhimurium. Os isolados foram encaminhados ao laboratório de referência para sorotipagem e identificados como S. Agona; um patógeno considerado emergente em vários países.(AU)

Abstract Salmonella spp. is one of the major players involved in cases of foodborne diseases in humans and is responsible for significant losses in the poultry industry. The aim of this study was to investigate the presence of Salmonella spp. in feces of commercial turkeys from Brazil. Fecal swabs from 14 turkey farms (pool of six poults/flocks) were collected. The swabs were subject to the conventional bacteriological isolation procedures and to DNA detection of the agent trough PCR. Salmonella spp. was present in a total of nine from 14 turkey farms evaluated. The samples were negative on molecular identification for serovars Enteritidis and Typhimurium. Isolated strains submitted to the reference laboratory for serotyping were identified as S. Agona that has been described as emergent pathogen in several countries.(AU)

Hafnia alvei: uma revisão sistemática de literatura

A presença de Enterobacteriaceae indica a qualidade higiênica dos produtos alimentícios. Dentro do grupo das bactérias que fazem parte dessa família está Hafnia alvei. Estudo bibliométrico é uma importante ferramenta método lógica de revisão sistemática para reunir e sintetizar as diversas informações que surgem sobre um tema, inclusive sobre os estudos relativos a micro-organismos. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo bibliométrico sobre este agente. Para tal foi utilizada a base de dados Web of Science usando o nome do agente e o termo food para a busca e limitando a pesquisa entre 2007 e 2017. As informações principais dos documentos foram registradas, bem como a característica principal das publicações sobre o tema. Foram encontrados 42 artigos científicos que contemplaram os termos de busca. A maioria das publicações ocorreu em países e períodos onde ocorreram surtos alimentares e há uma grande pesquisa relacionada à genoma e resistência a antimicrobianos. Avalia-se que ainda existem várias oportunidades de pesquisa sobre os micro-organismos, visto que eles são pouco estudados, principalmente em nosso país.(AU)

The presence of Enterobacteriaceae indicates the hygienic quality of food products. As a part of this family, there is an emergent pathogen: Hafnia alvei. Bibliometrics appears as an important tool to gather and synthesize all the information that appears about the new microorganisms. The objective of this paper is to perform a systematic review of literature with bibliometric analysis in order to know the evolution of these bacteria and seek opportunities for new research. To do this, the Web of Science database was searched, individually searching for Hafnia alvei refining for ''food''. The articles found were analyzed from de anual production, countries, institutions, areas of knowledge, authors who produced the most and periodicals most used. A total of 42 articles were selected for Hafnia alvei. Most publications have occurred in countries and periods where there have been food outbreaks and there is great genome related research and antimicrobial resistance. lt is evaluated that there are still several research opportunities on microorganisms, since they are little studied, mainly in our country.(AU)

VIABILITY OF NON-O157 SHIGA TOXIN-PRODUCING Escherichia coli (STEC) IN MINAS FRESCAL CHEESE / VIABILIDADE DE Escherichia coli PRODUTORA DE TOXINA SHIGA (STEC) NÃO-O157 EM QUEIJO TIPO MINAS FRESCAL

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) an emergent foodborne pathogen that cause diarrhea, hemorrhagic colitis and haemolytic uremic syndrome in humans, represents a public health problem all over the world. Cattle are the main source of STEC. STEC are transmitted to humans by contaminated food, mainly those of bovine origin as meat and dairy products. This study aimed evaluates the non-O157 STEC viability of artificially inoculated in the milk used for the Minas Frescal cheeses production. The cheese was kept at 4C and analyzed at 1st, 2nd, 4th, 6th and 10th days after its production. 100% (32/32) of the cheese storad under refrigeration during 10 days had been the STEC strains viable. These results show that minas frescal cheese can transmit STEC. The adoption of good manufacturing practices is important from milking to the cheese production process to reduce the contamination risks by non-O157 sorotypes.KEY WORDS: Food safety, Minas cheese, PCR, STEC.

Escherichia coli, produtora de toxina Shiga (STEC), um patógeno emergente capaz de causar diarreia, colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica em humanos, representa um grave problema de saúde pública em todo o mundo. O principal reservatório de STEC são os bovinos. STEC são transmitidas aos humanos, principalmente através de alimentos contaminados, destacando-se aqueles de origem bovina como carne, leite e seus derivados. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de STEC não-O157 em queijo minas frescal preparado com leite artificialmente contaminado com diferentes cepas dessas bactérias. Os queijos foram mantidos a 4C e analisados no 1º, 2º, 4º, 6º e 10º dias de estocagem. As cepas de STEC mantiveram-se viáveis em 100% (32/32) dos queijos mantidos sob refrigeração por até dez dias. Os resultados mostram que o queijo minas pode ser veículo de transmissão de STEC. Recomenda-se a adoção de métodos higiênicos e sanitários desde a ordenha até o processo de produção do queijo para reduzir a possibilidade de contaminação com STEC.PALAVRAS-CHAVES: PCR, queijo minas, segurança alimentar, STEC.

Epidemiologia molecular de Escherichia coli patogênica em diversas etapas do abate bovino

A Escherichia coli O157:H7 é um patógeno emergente, responsável por causar diversos surtos de doenças de origem alimentar no mundo, sendo a ingestão de carne bovina contaminada por conteúdo intestinal dos animais durante as etapas do abate, o principal modo de transmissão da bactéria. Diante do exposto e da escassez de dados sobre a ocorrência do microrganismo no Brasil, foi estudada a presença e a origem ou fonte de contaminação de E. coli O157:H7 e de outros sorotipos patogênicos nas etapas do fluxograma de abate, realizada a confirmação sorológica dos sorotipos e de alguns genes de virulência, a possível origem comum dos isolados no matadouro-frigorífico e na carne, e o comportamento frente à ação de antimicrobianos. Foram colhidas 349 amostras de 9 locais e a bactéria foi isolada pela metodologia convencional, utilizando o ágar CT-SMAC, sendo os isolados caracterizados pela PCR. A PFGE foi utilizada na análise do perfil genético de alguns isolados e 15 antimicrobianos foram utilizados no teste de susceptibilidade. Os resultados mostram a presença de E. coli O157:H7 em 12,0% dos animais e de E. coli não-O157 em 32% deles e em 9,52% das amostras de facas, com destaque para a E. coli O26 presente em 8,0% dos animais e nas facas, e a E. coli O113 em 2,0% dos animais. Foi observado STEC O157:H7 em 12,0% e EPEC O157:H7 em 6,0% dos animais, STEC O26 em 4,76% das facas, EPEC O26 em 8,0% dos animais e 4,76% das facas, e STEC O113 em 2,0% dos animais, sendo relatada pela primeira vez a presença de STEC O26 sorbitol-negativa. Alta porcentagem de similaridade e um clone de E. coli O157:H7 foram encontrados entre amostras de fezes e pele de animais provenientes da mesma fazenda, um clone de E. coli O26 na pele de três animais da mesma fazenda e alta porcentagem de similaridade do sorotipo entre isolados de pele...

Escherichia coli O157:H7 is an emergent pathogen responsible to cause several outbreaks of foodborne disease in the world, and the ingestion of the meat contaminated with animal intestinal contents in the slaughterhouse steps is the main way of the bacteria transmission. Given the above and the paucity of data about the microrganism?s occurence in Brazil, the presence and the origin or the source of contamination of E. coli O157:H7 and others pathogenic serotypes, was studied in the flowchart steps of slaughtherhouse, performed serologic confirmation of serotypes and some virulence genes, a possible common origin of the isolates in the slaughterhouse and in the meat, and the behavior to the antimicrobial action. 349 samples were collected from nine locations and the bacterium was isolated by the conventional method using the CT-SMAC agar, and the isolates were characterized by PCR. PFGE was used to analyze the genetic profile of some isolates and 15 antimicrobial were used in the susceptibility test. The results show the presence of E. coli O157: H7 in 12.0% of animals and E. coli non-O157 in 32% of them, and in 9.52% of knives samples, especially E. coli O26 present in 8.0% of animals and knives, and E. coli O113 in 2.0% of animals. STEC O157:H7 was observed in 12.0% and EPEC O157:H7 in 6.0% of animals, STEC O26 in 4.76% knives, EPEC O26 in 8.0% of animals and 4.76% knives, and STEC O113 in 2.0% of animals, being first reported the presence of sorbitol-negative STEC O26. High percentage of similarity and a clone of E. coli O157:H7 were found between animal?s skin and stool samples from the same farm, a clone of E. coli O26 in three animal?s skin from the same farm and high percentage of serotype similarity between the isolates from skin, external carcass muscle and wastewater from washing carcass, and its presence...

An outbreak of Streptococcus dysgalactiae subsp equisimilis in a hospital in the south of Brazil

The beta-hemolytic group C streptococci (Lancefield's group) has been considered an emergent human pathogen, showing an important role as an opportunist agent, being responsible for nosocomial infections and outbreaks. This study is reporting the first outbreak of nosocomial infection caused by Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis in Brazil. From January, 2002, to December, 2004, S. equisimilis was isolated in 67/207 (32.37%) samples from secretions of patients' infected wounds, interned at the Hospital of Sanitary Dermatology in the State of Paraná (HDSPR). The prevalence of this microorganism increased from 11/42 (26.19%) in 2002, 14/65 (21.54%) in 2003 to 42/100 (42.00%) in 2004. This increase was statistically significant (p=0.024), and this microorganism became the most frequently isolated in these patients, overtaking the rates of isolation of Pseudomonas aeruginosa. The S. equisimilis grew in pure culture, as a unique microorganism, in six samples (2.9%) out of 207. Fresh feces of 15 animals (horses and sheep) living in the proximities of the hospital were also examined and three of them positive for S. equisimilis. The biochemical profile of the strains isolated from the patients and from the animals was the same. These animals might have been the source of the dissemination of the outbreak in the hospital. New studies will be necessary to confirm the genetic relationship between the strains isolated from patients and animals.

O estreptococo beta-hemolítico do grupo C de Lancefield tem sido considerado patógeno humano emergente, mostrando importante papel como agente oportunista, implicado algumas vezes em infecções hospitalares e surtos. Este estudo está relatando o primeiro surto de infecção hospitalar causado pelos Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis no Brasil. De janeiro de 2002 a dezembro de 2004, isolou-se S. equisimilis em 67/207 (32,37%) das amostras de secreções de lesões de feridas coletadas de pacientes internados no Hospital de Dermatologia Sanitária do Paraná (HDSPR). A prevalência deste microrganismo aumentou de 11/42 (26,19%) em 2002, 14/65 (21,54%) em 2003 para 42/100 (42,00%) em 2004. Este aumento foi estatisticamente significante (p=0.024), tornando este microrganismo o mais freqüentemente isolado nos pacientes, ultrapassando as taxas de isolamento de Pseudomonas aeruginosa. Em seis amostras (2,9%) entre as 207 examinadas, S. equisimilis cresceu em cultivo puro, como único microrganismo. Também foram examinadas fezes frescas de 15 animais (cavalos e ovelhas) que vivem nas proximidades do hospital, e três amostras foram positivas para S. equisimilis. O perfil bioquímico encontrado entre os isolados dos pacientes foi o mesmo encontrado entre os isolados das fezes dos animais. Acredita-se que estes animais possam ter sido a fonte de disseminação do surto no hospital. Novos estudos serão necessários para confirmar o relacionamento genético entre os isolados dos pacientes e animais.

Detection of Cryptosporidium sp. oocysts in groundwater for human consumption in Itaquaquecetuba city, S. Paulo-Brazil

Cryptosporidium is an emergent pathogen that causes profuse diarrhea in humans. Outbreaks of human cryptosporidiosis have implicated water as a possible source of contamination. In this study the presence of Cryptosporidium sp. oocysts was investigated as well as the fecal contamination in groundwater for consumption in Itaquaquecetuba - São Paulo. Therefore, it was possible to notice that the septic tanks were located close to the wells, exposing them to risk of contamination. As a consequence of these results and observations efficient disinfecting practices and groundwater monitoring are recommended.

Cryptosporidium é um patógeno emergente que causa diarréia em humanos. Muitos surtos graves de criptosporodíase tem a água como possível origem da contaminação. Neste estudo foi investigada a presença do oocisto de Cryptosporidium sp. em águas de poço, usadas para consumo humano em Itaquaquecetuba - São Paulo. Os resultados evidenciaram a presença de oocistos em 2 fossas e em 8 poços analisados, mostrando o risco que esta água representa para consumo humano e a necessidade de práticas mais eficientes de desinfecção e monitoramento da presença deste parasita em amostras de águas no estado de São Paulo.

VIABILITY OF NON-O157 SHIGA TOXIN-PRODUCING Escherichia coli (STEC) IN MINAS FRESCAL CHEESE / VIABILIDADE DE Escherichia coli PRODUTORA DE TOXINA SHIGA (STEC) NÃO-O157 EM QUEIJO TIPO MINAS FRESCAL.

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) an emergent foodborne pathogen that cause diarrhea, hemorrhagic colitis and haemolytic uremic syndrome in humans, represents a public health problem all over the world. Cattle are the main source of STEC. STEC are transmitted to humans by contaminated food, mainly those of bovine origin as meat and dairy products. This study aimed evaluates the non-O157 STEC viability of artificially inoculated in the milk used for the Minas Frescal cheeses production. The cheese was kept at 4C and analyzed at 1st, 2nd, 4th, 6th and 10th days after its production. 100% (32/32) of the cheese storad under refrigeration during 10 days had been the STEC strains viable. These results show that minas frescal cheese can transmit STEC. The adoption of good manufacturing practices is important from milking to the cheese production process to reduce the contamination risks by non-O157 sorotypes.KEY WORDS: Food safety, Minas cheese, PCR, STEC.

Escherichia coli, produtora de toxina Shiga (STEC), um patógeno emergente capaz de causar diarreia, colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica em humanos, representa um grave problema de saúde pública em todo o mundo. O principal reservatório de STEC são os bovinos. STEC são transmitidas aos humanos, principalmente através de alimentos contaminados, destacando-se aqueles de origem bovina como carne, leite e seus derivados. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de STEC não-O157 em queijo minas frescal preparado com leite artificialmente contaminado com diferentes cepas dessas bactérias. Os queijos foram mantidos a 4C e analisados no 1º, 2º, 4º, 6º e 10º dias de estocagem. As cepas de STEC mantiveram-se viáveis em 100% (32/32) dos queijos mantidos sob refrigeração por até dez dias. Os resultados mostram que o queijo minas pode ser veículo de transmissão de STEC. Recomenda-se a adoção de métodos higiênicos e sanitários desde a ordenha até o processo de produção do queijo para reduzir a possibilidade de contaminação com STEC.PALAVRAS-CHAVES: PCR, queijo minas, segurança alimentar, STEC.

Avaliação do efeito da fragmentação florestal na diversidade de carrapatos e patógenos transmitidos por carrapatos ma região do Pontal Paranapanema, SP / Evaluating the impact of forest fragmentation on prevalence and transmission of tick pathogens

Avaliou-se o impacto da fragmentação florestal na diversidade de carrapatos de vida-livre e a presença de patógenos nestes carrapatos em remanescentes florestais do Pontal do Paranapanema, estado de São Paulo, Brasil. Estes fragmentos florestais abrigam uma rica e importante biodiversidade, com espécies endêmicas e ameaçadas como o mico-leão-preto (Leontopithecus chrysopygus), a anta (Tapirus terrestris), a onça pintada (Panthera onca), o macuco (Tinamus solitarius) e várias outras espécies de aves, mamíferos, répteis, anfíbios e peixes. Aproximadamente 90% das espécies de carrapatos parasitam exclusivamente hospedeiros selvagens. O restante pode ter animais domésticos e humanos como hospedeiros. Embora a maioria das pesquisas tenha sido dirigida a espécies de importância econômica, os carrapatos que parasitam animais selvagens possuem relevante papel na manutenção dos níveis de patógenos em populações de vida livre. Algumas destas espécies, por exemplo, demonstraram que podem parasitar hospedeiros não selvagens e promover o surgimento de zoonoses. Em habitats fragmentados, a diversidade de espécies vertebradas é menor se comparado a habitats com pouca alteração antrópica. Portanto, a fragmentação do habitat diminui a diversidade de espécies de carrapatos também. Para estudar a relação entre a fragmentação florestal e a ecologia das populações de carrapatos foram coletados carrapatos em 8 fragmentos florestais pelo método de arrasto de flanela e inspeção visual da vegetação. Os índices de comparação utilizados foram de similaridade de Jaccard, de diversidade de Shannon e complexidade do fragmento florestal de Patton. Utilizou-se o modelo de regressão linear para compara os índices de Shannon e Patton. Um total de 2149 ninfas de Amblyomma spp foi coletado e foram identificadas as espécies de 629 carrapatos. As espécies coletadas foram Amblyomma cajennense (94,28%), A. coelebs (1,59%), A. naponense (2,86%), A. ovale (0,64%), A. nodosum (0,32%), A. brasiliense (0,16%) e Haemaphysalis juxtakochi (0,16%). Nenhum indivíduo testado foi positivo pelo teste da hemolinfa. Os resultados mostraram uma tendência de correlação entre a fragmentação floresta, e a diversidade de espécies de carrapatos

This study evaluated the impact of forest fragmentation on diversity of freeliving ticks and prevalence of tick pathogens in remaining forest fragments in the Pontal do Paranapanema, São Paulo state, Brazil. These forest fragments shelter rich and important biodiversity, with endemic and threatened species such as the black lion tamarin (Leontopithecus chrysopygus), the tapir (Tapirus terrestris), jaguar (Panthera onca), the solitary tinamou (Tinamus solitarius) and various other species of birds, mammals, reptiles, amphibians and fish. Approximately 90% of tick species parasitize exclusively wild hosts. The remainder can also have domestic animals and humans as hosts. Although most research has been directed to species of economic importance, ticks that parasitize wild animals are also relevant due to their role in maintaining enzootic pathogen levels in wild populations. Some of these species, for example, have been shown to cross-over onto non-wild hosts and promote emergent zoonoses. In fragmented habitats, the diversity of vertebrate species is normally lower than comparable habitats with minimal anthropic alteration. Thus, habitat fragmentation decreases the diversity of tick species too. To study the relationship between forest fragmentation and population ecology of ticks, ticks were collected in 8 forest fragments using dragging and visual inspection of vegetation. The index used were Jaccard´s similarity, diversity f Shannon and Patton. The linear regression model was used to compare Shannon and Patton indexes. A total of 2149 nymphs of Amblyomma spp. And 629 identified ticks was collected. The species of ticks collected was Amblyomma cajennense (94,28%), A. coelebs (1,59%), A. naponense (2,86%), A. ovale (0,64%), A. nodosum (0,32%), A. brasiliense (0,16%) e Haemaphysalis juxtakochi (0,16%). All ticks were negative by hemolimph test. The results showed a tendency of correlation between forest fragmentation and diversity of tick species

Listeria spp: um patógeno emergente / Listeria spp: an emergent pathogen

Listeria spp. é um patógeno emergente que vem sendo relacionado a diversos surtos de doenças de origem alimentar por estar presente no trato gastrintestinal dos animais, sendo muito comum a contaminação da carcaça e cortes de carne durante o abate, assim como durante o processamento inadequado dos alimentos. Considerando a importância deste patógeno para a indústria de alimentos e para a Saúde Pública, o presente trabalho teve como objetivo a realização de uma revisão bibliográfica elucidando as características do microrganismo, a virulência, a patogenicidade, a epidemiologia, as características da doença e as medidas de controle nos alimentos.(AU)

Listeria spp. is an emergent pathogen that has been related to many out- I breaks of food borne diseases, since it appears in the intestinal tract of animals, which makes very usual the contamination of the carcass and cuts of meat during slaughtering and also during the inadequate processing of food. Taking into consideration the importance of this pathogen for the food industries and for the Public Health agencies, the aim of this work is to make a bibliographic review explaining the microorganism' s characteristics, the virulence and pathogenesis, epidemiology, the disease' s characteristics, the occurrence and the control in the food.(AU)