PREVALÊNCIA DE Staphylococcus spp. RESISTENTE A METICILINA (MRS) EM EQUINOS NO AMBIENTE HOSPITALAR E HUMANOS CONTACTANTES

- Staphylococcus spp. causam várias enfermidades em humanos e animais. O crescente desenvolvimento de resistência bacteriana aos antimicrobianos convencionais dificulta o tratamento das infecções por esses micro-organismos, e é considerado problema de saúde humana e animal. Foi investigada a frequência e distribuição de clones de Staphylococcus spp. resistentes a meticilina (MRS) em equinos hospitalizados e profissionais da área (médicos veterinários e funcionários), bem como avaliar possível transmissão interespécies. Foram colhidas 131 amostras de suabe nasal de equinos e 35 de humanos, cultivados em ágar de ovo-telurite-glicina-piruvato (BD Baird-Parker Agar®). Os micro-organismos foram submetidos à coloração de Gram, identificação por provas bioquímicas e métodos genotípicos (PCR) e ITS-PCR para caracterização das espécies. A sensibilidade aos antimicrobianos foi determinada pelo método de concentração inibitória mínima (MIC). O perfil clonal e identificação da estirpe dos Staphylococcus spp. foi caracterizado por Eletroforese em Gel de Campo Pulsado (PFGE) e pelo Multilocus sequence Typing (MLST). O gênero Staphylococcus foi isolado em 17,5% (23/131) dos equinos, dos quais, 8,4% (11/131) foram identificados como S. hyicus, 3,8% (5/131) S. aureus, 3,8% (5/131) S. pseudintermedius e 1,5% (2/131) S. schleiferi. Foi detectado o gene mecA em um isolado de S. pseudintermedius. Nos 35 humanos amostrados, foram identificados 40% (14/35) de S. aureus. A tipagem molecular por PFGE possibilitou identificar similaridade clonal (C1) dos isolados de S. aureus, obtido de duas pessoas da área Clínica Cirúrgica de Grandes Animais (CCGA) e uma da área de Reprodução de Grandes Animais (RGA). Foi possível observar similaridade entre os dois isolados de humanos da CCGA (C2), bem como entre as duas estirpes de departamentos distintos (CCGA e RGA C5). Entre os isolados de S. aureus obtidas de equinos, obteve-se similaridade clonal entre os estafilococos provindos da RGA e Clínica de Grandes Animais (CGA) (C3), e de pacientes da CCGA (C4). Em quatro isolados foi identificado ST398, com similaridade clonal de 98,1% entre um estafilococo de equino e o de humano. Foi observado maior frequência de isolados de S. hyicus em equinos e S. aureus em humanos. O gene mecA foi detectado exclusivamente em S. pseudintermedius origem equina. A similaridade clonal foi atribuída entre isolados de S. aureus e S. hyicus de equinos, S. aureus de humanos, bem como entre as duas espécies estudadas, tendo como principais fatores de risco, o tempo de internação e o contato direto entre as espécies.

- Staphylococcus spp. is a primary agent of a wide variety of infections in humans and animals. The increasing of bacterial resistance of this microorganism to conventional antimicrobial difficults the treatment of infections and is considered a problem in human and animal health problem. The aim of this research was to investigate the prevalence and distribution of Staphylococcus spp. resistant (MRS) and clones of staphylococci in hospitalized horses and professionals with some contact of animals (veterinarians and medical staff), and evaluate the possibility of interspecies transmission. One hundred thirty-one samples were taken from nasal swabs of horses and 35 humans, subjected to agar egg-glycine-tellurite-pyruvate (BD Baird-Parker Agar®). The isolates were submitted to Gram staining and conventional biochemical tests (catalase, coagulase, maltose, trehalose and mannitol) to phenotypic characterization of the species. The antimicrobial susceptibility was determined by minimum inhibitory concentration (MIC) method. The profile of clonal and strain characterization of Staphylococcus spp. was realized by Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) and Multilocus sequence Typing (MLST). Staphylococcus genus was isolated in 17.5% (23/131) of horses, of which 8.4% (11/131) were S. hyicus, 3.8% (5/131) S. aureus, 3,8% (5/131) S. pseudintermedius and 1,5% (2/131) of the S. schleiferi. mecA gene was detected in one isolate of S. pseudintermedius (resistant to oxacillin). For the 35 humans sample was identified S. aureus in 40% (14/35). Molecular typing by PFGE identified a cluster (C1) of the S. aureus, obtained from strains of Large Animal Surgery Service (CCGA) and a Large Animal Breeding Service (RGA). It was observed similarity between two human isolates from CCGA (C2), and between two strains of different services (CCGA and RGA - C5). Among the samples of S. aureus obtained from horses, it was similarity between clonal isolates from the RGA and Large Animal Internal Medicine (CGA) (C3), and patients from CCGA (C4). Four strains was identified as ST398, among them, clonal similarity of 98.1% between equine and human strais. Higher frequency of S. hyicus was observed among horses and S. aureus from humans. The mecA gene was identified exclusively in S. pseudintermedius (horses). The clonal similarity was attributed between all samples and species studied, had the same risk factors, the length of stay and direct contact between the species.

Risk of food poisoning involving enterotoxigenic staphylococci carriers / Risco de intoxicação alimentar envolvendo portadores de Estafilococos Enterotoxigênicos

Healthy carriages constitute major reservoir of enterotoxigenic staphylococci. The intoxication occurs after ingestion of manipulated foods, maintained at inadequate preservation. This review discusses about the epidemiology at the interaction level between hospital professionals and food handlers, transferences of microorganisms and the possible development of enteroxigenic strains with high antibiotic resistence.  

Portadores sãos constituem a principal fonte de estafilococos enterotoxigênicos, sendo a intoxicação resultante da ingestão de alimentos manipulados e mantidos sob condição inadequada. A revisão discute epidemiologia a nível de interação entre profissionais hospitalares e manipuladores, rastreamento e papel deste contato no surgimento de linhagens enterotoxigênicos resistentes a antibióticos.    

Staphylococcal enterotoxin: advances in the detection methods in foods / Enterotoxina estafilocócica: avanços metodológicos na detecção em alimentos

Methods for staphylococcal enterotoxin detection have received constant attention and modification, with the intention of acelerating the food intoxication diagnosis. This study shows the actual situation and the perspectives about the development and application of rapid methods with high sensitivity, for the quality control in the food.  

Métodos visando detecção de enterotoxina estafilocócica tem recebido constante atenção e modificação, com a finalidade de acelerar diagnóstico numa intoxicação alimentar. A revisão expõe a situação atual e as perspectivas sobre o desenvolvimento e aplicação de métodos rápidos com elevada sensibilidade, para o controle de qualidade nos alimentos.    

Risk of food poisoning involving enterotoxigenic staphylococci carriers / Risco de intoxicação alimentar envolvendo portadores de Estafilococos Enterotoxigênicos

Healthy carriages constitute major reservoir of enterotoxigenic staphylococci. The intoxication occurs after ingestion of manipulated foods, maintained at inadequate preservation. This review discusses about the epidemiology at the interaction level between hospital professionals and food handlers, transferences of microorganisms and the possible development of enteroxigenic strains with high antibiotic resistence.  

Portadores sãos constituem a principal fonte de estafilococos enterotoxigênicos, sendo a intoxicação resultante da ingestão de alimentos manipulados e mantidos sob condição inadequada. A revisão discute epidemiologia a nível de interação entre profissionais hospitalares e manipuladores, rastreamento e papel deste contato no surgimento de linhagens enterotoxigênicos resistentes a antibióticos.    

Staphylococcal enterotoxin: advances in the detection methods in foods / Enterotoxina estafilocócica: avanços metodológicos na detecção em alimentos

Methods for staphylococcal enterotoxin detection have received constant attention and modification, with the intention of acelerating the food intoxication diagnosis. This study shows the actual situation and the perspectives about the development and application of rapid methods with high sensitivity, for the quality control in the food.  

Métodos visando detecção de enterotoxina estafilocócica tem recebido constante atenção e modificação, com a finalidade de acelerar diagnóstico numa intoxicação alimentar. A revisão expõe a situação atual e as perspectivas sobre o desenvolvimento e aplicação de métodos rápidos com elevada sensibilidade, para o controle de qualidade nos alimentos.    

Método rápido para detecção de TNAse estafilocócica ém leite utilizando membrana de diálise / Método rápido para detecção de TNAse estafilocócica ém leite utilizando membrana de diálise

Presence of thermonuclease in foods indicates that S. aureus developed at a critical number, enough to cause food intoxication. As the concentration of this enzyme in foods reaches only the level of ng, extraction and concentration processes are crucial for its detection. The use of dialysis membrane as an alternative method is proposed for TNAse extraction from milk inoculated with S. aureus 196-E. Milk samples, after heat treatment and without casein, were dialysed with different membranes against polyethylene glycol 6000 and sucrose. The nuclease activity in the extract was increased with heat treatment, improving the sensibility of the method. Both the use of commercial cellophane and sucrose for concentrating the sample is viable, indicating a rapid and cheap method for TNAse detection in milk contaminated with staphylococci.

A presença de temonuclease em alimentos indica que S. aureus atingiu número crítico, suficiente para causar intoxicação. Como a sua concentração atinge apenas a nível de ng nestes produtos, um processo de extração e concentração torna-se fundamental para sua detecção. A utilização de membrana de dálise é proposta como método alternativo para extração de TNAse em leite inoculado com S. aureus 196-E. As amostras de leite, após tratamento térmico e eliminação de caseína, foram dialisadas em diferentes membranas, com polietileno glicol 6000 e sacarose. A atividade nucleásica no extrato foi intensificada com tratamento térmico, melhorando a sensibilidade da metodologia. A utilização de celofane comercial, assim como de sacarose para concentrar o extrato é viável, propondo-se método rápido de custo acessível para detecção de TNAse em leite contaminado com estafilococo.

Método rápido para detecção de TNAse estafilocócica ém leite utilizando membrana de diálise / Método rápido para detecção de TNAse estafilocócica ém leite utilizando membrana de diálise

Presence of thermonuclease in foods indicates that S. aureus developed at a critical number, enough to cause food intoxication. As the concentration of this enzyme in foods reaches only the level of ng, extraction and concentration processes are crucial for its detection. The use of dialysis membrane as an alternative method is proposed for TNAse extraction from milk inoculated with S. aureus 196-E. Milk samples, after heat treatment and without casein, were dialysed with different membranes against polyethylene glycol 6000 and sucrose. The nuclease activity in the extract was increased with heat treatment, improving the sensibility of the method. Both the use of commercial cellophane and sucrose for concentrating the sample is viable, indicating a rapid and cheap method for TNAse detection in milk contaminated with staphylococci.  

A presença de temonuclease em alimentos indica que S. aureus atingiu número crítico, suficiente para causar intoxicação. Como a sua concentração atinge apenas a nível de ng nestes produtos, um processo de extração e concentração torna-se fundamental para sua detecção. A utilização de membrana de dálise é proposta como método alternativo para extração de TNAse em leite inoculado com S. aureus 196-E. As amostras de leite, após tratamento térmico e eliminação de caseína, foram dialisadas em diferentes membranas, com polietileno glicol 6000 e sacarose. A atividade nucleásica no extrato foi intensificada com tratamento térmico, melhorando a sensibilidade da metodologia. A utilização de celofane comercial, assim como de sacarose para concentrar o extrato é viável, propondo-se método rápido de custo acessível para detecção de TNAse em leite contaminado com estafilococo.    

Staphylococcal enterotoxin for standard production and remotion of food interferents in RPLA assay / Enterotoxina estafilocócica para produção de padrão e eliminação de interferentes alimentares no método de RPLA

The frequency of staphylococcal intoxication requires constant improvements to provide more sensitive and practical assays for enterotoxins detection in foods. Considering that such an advantage is always related to an unexpected events, this view point approaches about recent available resources to reduce the problems associated with new techniques. Emphasis was appointed to the culture formulations for enterotoxin purification, as the remotion of food components which interfire with the most simplied method of enterotoxin detection, the latex agglutination assay- RPLA.

A freqüente ocorrência de intoxicação estafilocócica requer desenvolvimento de métodos rápidos de diagnóstico, cada vez mais sensíveis e práticos para a detecção direta de enterotoxinas em alimentos. Considerando que estes métodos são constantemente acompanhados por imprevistos, nesta revisão apresenta-se um ponto de vista sobre os atuais recursos disponíveis, para contornar os problemas oriundos com o lançamento de novas técnicas. Ênfase foi dada aos meios de cultura que facilitam a purificação de enterotoxinas, assim como a eliminação de componentes alimentares no método de aglutinação de látex - RPLA, que consiste de técnica simples com alta sensibilidade para a detecção de enterotoxinas estafilocócicas.

Massive hemorrhage of the adrenals in scarlet fever. (Waterhouse-Friderichsen syndrorne in scarlet fever) / Hemorragia maciça das cápsulas suprarrenais na escarlatina (Síndrome de Waterhouse-Friderichsen na escarlatina)

A case of scarlet fever in eight year child with massive hemorrhage was studied. Based on the symptons observed and the anatomopathological lesions found this is a case of the Waterhouse Friderichsen Syndrome. This is the first reference in the medical literature of the syndrome in scarlet fever. Recording the results of the necropsia, the most important findings were, a wide and bilateral adrenal lesion, an intensive capillar congestion with small spots of hemorrhage, specially in arachnoide where no inflammations process was found.

Pela primeira vez é documentado na literatura mundial caso de hemorragia maciça das cápsulas suprarrenais, no transcorrer da escarlatina. Os sinais clínicos e achados anatomo-patológicos permitem incluir o referido caso na Síndrome de Waterhouse-Friderichsen. Estudo microscópico dos diferentes tecidos e órgãos demonstra a ação de toxina eritrogênica, evidenciando-se intensa dilatação e paralisia de toda a rede capilar, com focos de hemorragia. O exame macroscópico das suprarrenais revela-nos aspecto francamente hemorrágico; o exame microscópico mostra-nos grande extensão do parênquima, conservado, o que não impediu o estado de choque e morte do paciente. No presente trabalho não foi encontrada inflamação da meninge, o que também pode acontecer na síndrome de Waterhouse-Friderichsen. Outras bactérias, além do meningococo, têm sido identificadas por diversos autores como responsáveis pela síndrome, tais como: estreptococo, estafilococo, colibacilo, bacilo piociânico, bacilo de Friedlander; portanto, na meningococcemia fulminante ou na síndrome de Waterhouse-Friderichsen, é importante o isolamento do agente, no líquor, sangue, ou nas petequias ou máculas cutâneas.

Staphylococcal enterotoxin for standard production and remotion of food interferents in RPLA assay / Enterotoxina estafilocócica para produção de padrão e eliminação de interferentes alimentares no método de RPLA

The frequency of staphylococcal intoxication requires constant improvements to provide more sensitive and practical assays for enterotoxins detection in foods. Considering that such an advantage is always related to an unexpected events, this view point approaches about recent available resources to reduce the problems associated with new techniques. Emphasis was appointed to the culture formulations for enterotoxin purification, as the remotion of food components which interfire with the most simplied method of enterotoxin detection, the latex agglutination assay- RPLA.  

A freqüente ocorrência de intoxicação estafilocócica requer desenvolvimento de métodos rápidos de diagnóstico, cada vez mais sensíveis e práticos para a detecção direta de enterotoxinas em alimentos. Considerando que estes métodos são constantemente acompanhados por imprevistos, nesta revisão apresenta-se um ponto de vista sobre os atuais recursos disponíveis, para contornar os problemas oriundos com o lançamento de novas técnicas. Ênfase foi dada aos meios de cultura que facilitam a purificação de enterotoxinas, assim como a eliminação de componentes alimentares no método de aglutinação de látex - RPLA, que consiste de técnica simples com alta sensibilidade para a detecção de enterotoxinas estafilocócicas.    

Massive hemorrhage of the adrenals in scarlet fever. (Waterhouse-Friderichsen syndrorne in scarlet fever) / Hemorragia maciça das cápsulas suprarrenais na escarlatina (Síndrome de Waterhouse-Friderichsen na escarlatina)

A case of scarlet fever in eight year child with massive hemorrhage was studied. Based on the symptons observed and the anatomopathological lesions found this is a case of the Waterhouse Friderichsen Syndrome. This is the first reference in the medical literature of the syndrome in scarlet fever. Recording the results of the necropsia, the most important findings were, a wide and bilateral adrenal lesion, an intensive capillar congestion with small spots of hemorrhage, specially in arachnoide where no inflammations process was found.

Pela primeira vez é documentado na literatura mundial caso de hemorragia maciça das cápsulas suprarrenais, no transcorrer da escarlatina. Os sinais clínicos e achados anatomo-patológicos permitem incluir o referido caso na Síndrome de Waterhouse-Friderichsen. Estudo microscópico dos diferentes tecidos e órgãos demonstra a ação de toxina eritrogênica, evidenciando-se intensa dilatação e paralisia de toda a rede capilar, com focos de hemorragia. O exame macroscópico das suprarrenais revela-nos aspecto francamente hemorrágico; o exame microscópico mostra-nos grande extensão do parênquima, conservado, o que não impediu o estado de choque e morte do paciente. No presente trabalho não foi encontrada inflamação da meninge, o que também pode acontecer na síndrome de Waterhouse-Friderichsen. Outras bactérias, além do meningococo, têm sido identificadas por diversos autores como responsáveis pela síndrome, tais como: estreptococo, estafilococo, colibacilo, bacilo piociânico, bacilo de Friedlander; portanto, na meningococcemia fulminante ou na síndrome de Waterhouse-Friderichsen, é importante o isolamento do agente, no líquor, sangue, ou nas petequias ou máculas cutâneas.

Trichophyton album (Sabouraud, 1909) / Trichophyton album (Sabouraud, 1909)

The author describes in detail the case of a boy with lesions in the scalp and in the glabrous skin, due to T. album (Sabouraud, 1909). The microscopic examination of the affected hairs showed a Megasporum as the cause. The cultures in Sabouraud"s sugar media could not be obtained at first, while the culture media tubes were kept at room temperature; later on, when put in the incubator at 28C, the colonies began to appear, showing, by and by, the features of T. (faviforme) album, The author took the opportunity to verify the behaviour of that fungus in the so-called staphylococcus based media, as previously done by BAUDET. In such media the cultures grew well even at room temperature; they became vigorous, no longer glabrous but hairy and microscopically showed to be no longer formed by sterile filaments, as happened in the sugar media, but presented great quantity of reproductive organs. In other words, the T. (faviforme) album, when cultivated in more favorable media as surely is, for it, the staphylococcus based medium, looses its faviforme feature. BAUDET is right in suggesting the exclusion of the word faviform in the above expression. The author tried also, in the same staphylococcus based medium, the culture of other fungus of glabrous culture - the T. violaceum - but did not obtain changes in either the macro - or microscopic features of its cultures.

Descreve o autor, pormenorizadamente, o caso de um menino com lesões do couro cabeludo, o que é raro, e da pele glabra devida ao T. album (Sabouraud, 1909). O exame microscópico dos cabelos parasitados revelou tratar-se de Megasporo. As culturas em meio açucarado de Sabouraud não puderam ser obtidas no começo, enquanto conservados os tubos em temperatura ambiente. Mais tarde, quando colocados em estufa à temperatura de 28 C., começaram as colônias a aparecer, mostrando, aos poucos, as caraterísticas do T. (faviforme) album. Aproveitou-se o autor da oportunidade para a verificação do comportamento desse fungo nos chamados meios a base de estafilococos, como anteriormente o fizera BAUDET. Viu nesses meios as culturas prosperarem bem, mesmo em temperatura ambiente; tornarem-se viçosas, não mais glabras, mas penugentas e, microscopicamente, não serem mais formadas só de filamentos estéreis, como ocorria nos meios açucarados, mas apresentarem abundantes órgãos de frutificação. Em outras palavras, o T. (faviforme) album semeado em meiomais favorável como certamente o é para ele o meio a base de estafilococo, perde seu caráter faviforme. Tem razão BAUDET em sugerir a exclusão do termo faviforme na designação acima. O autor experimentou, também, no mesmo meio a base de estafilococos outro cogumelo de cultura glabra - o T. violaceum - não conseguindo, porém, modificações no aspeto macr

Trichophyton album (Sabouraud, 1909) / Trichophyton album (Sabouraud, 1909)

The author describes in detail the case of a boy with lesions in the scalp and in the glabrous skin, due to T. album (Sabouraud, 1909). The microscopic examination of the affected hairs showed a Megasporum as the cause. The cultures in Sabouraud"s sugar media could not be obtained at first, while the culture media tubes were kept at room temperature; later on, when put in the incubator at 28C, the colonies began to appear, showing, by and by, the features of T. (faviforme) album, The author took the opportunity to verify the behaviour of that fungus in the so-called staphylococcus based media, as previously done by BAUDET. In such media the cultures grew well even at room temperature; they became vigorous, no longer glabrous but hairy and microscopically showed to be no longer formed by sterile filaments, as happened in the sugar media, but presented great quantity of reproductive organs. In other words, the T. (faviforme) album, when cultivated in more favorable media as surely is, for it, the staphylococcus based medium, looses its faviforme feature. BAUDET is right in suggesting the exclusion of the word faviform in the above expression. The author tried also, in the same staphylococcus based medium, the culture of other fungus of glabrous culture - the T. violaceum - but did not obtain changes in either the macro - or microscopic features of its cultures.

Descreve o autor, pormenorizadamente, o caso de um menino com lesões do couro cabeludo, o que é raro, e da pele glabra devida ao T. album (Sabouraud, 1909). O exame microscópico dos cabelos parasitados revelou tratar-se de Megasporo. As culturas em meio açucarado de Sabouraud não puderam ser obtidas no começo, enquanto conservados os tubos em temperatura ambiente. Mais tarde, quando colocados em estufa à temperatura de 28 C., começaram as colônias a aparecer, mostrando, aos poucos, as caraterísticas do T. (faviforme) album. Aproveitou-se o autor da oportunidade para a verificação do comportamento desse fungo nos chamados meios a base de estafilococos, como anteriormente o fizera BAUDET. Viu nesses meios as culturas prosperarem bem, mesmo em temperatura ambiente; tornarem-se viçosas, não mais glabras, mas penugentas e, microscopicamente, não serem mais formadas só de filamentos estéreis, como ocorria nos meios açucarados, mas apresentarem abundantes órgãos de frutificação. Em outras palavras, o T. (faviforme) album semeado em meiomais favorável como certamente o é para ele o meio a base de estafilococo, perde seu caráter faviforme. Tem razão BAUDET em sugerir a exclusão do termo faviforme na designação acima. O autor experimentou, também, no mesmo meio a base de estafilococos outro cogumelo de cultura glabra - o T. violaceum - não conseguindo, porém, modificações no aspeto macr