Diagnóstico das anemias e a avaliação dos parâmetros do ferro em cães saudáveis e anêmicos

A anemia está presente frequentemente na rotina laboratorial veterinária, é uma manifestação clínica oriunda de diversas causas que devem ser diagnosticadas com intuito de entender a patogênese e realizar tratamento específico. O ferro é fundamental para o bom funcionamento do organismo dos seres vivos, a mensuração e avaliação e dos parâmetros do metabolismo do ferro nos animais anêmicos, aliado aos resultados hematológicos, são importantes para definir a causa da anemia. Sabe-se que diversas patologias têm potencial de interferir no metabolismo do ferro nos animais, porém necessitam de mais estudos para comprovação. Infelizmente a mensuração destes parâmetros, principalmente ferritina, não é realidade nos laboratórios brasileiros pois kits espécie-específicos são necessários e não estão disponíveis comercialmente. Além disso, há carência de valores referenciais em cães saudáveis no Brasil. Os objetivos do presente trabalho visaram estabelecer valores referenciais para os parâmetros do ferro em cães saudáveis da região de Curitiba-PR; validar teste piloto da ferritina em cães utilizando reagente humano pelo método de turbidimetria; diagnosticar as causas de anemias em cães e avaliar o metabolismo do ferro; analisar a ocorrência das anemias e classificar conforme a gravidade, índices hematimétricos, resposta da medula óssea, presença de alterações morfológicas eritrocitárias e resposta leucocitária; realizar o diagnóstico de anemia hemolítica imunomediada por meio do teste de Coombs e estabelecer taxa de mortalidade nos animais positivos. O primeiro capítulo compreende a análise dos parâmetros do ferro em 43 cães saudáveis e padronização de metodologias para uso na rotina veterinária. O segundo capítulo consiste no diagnóstico das anemias em 219 cães e análise dos parâmetros do metabolismo do ferro nas diversas causas de anemia. O terceiro capítulo compreende o diagnóstico de hemólise imunomediada em 17 cães e a taxa de mortalidade observada nesta patologia. As análises foram realizadas no Laboratório de Patologia Clínica Veterinária do Hospital Veterinário da UFPR; Laboratório de Patologia Clínica My Pets, localizado na região metropolitana de Curitiba-PR; Laboratório de Análises Clínicas da Clínica Veterinária Escola da UFSC (Campus Curitibanos); Laboratório de Virologia e Rickettsioses, e Biologia Molecular da UFMT. Os resultados apresentados são os seguintes: valores referenciais de cães saudáveis para ferro sérico, ferritina, capacidade de fixação do ferro e capacidade total de ligação do ferro; o teste piloto da ferritina canina com reagente específico humano foi validado para o uso em cães; elevação da concentração sérica da ferritina nas doenças infecciosas (hemoparasitoses e infecções bacterianas) e neoplásicas; diminuição da concentração plasmática de ferro em cães com cirrose em estágio terminal e hemorragia ativa; diagnóstico de Rangelia vitalli, Babesia canis vogeli e Ehrlichia canis; diagnóstico de anemia hemolítica imunomediada em 47% dos cães e taxa de mortalidade de 62,5%.

Anemia is frequently present in the veterinary laboratory routine, it is a clinical manifestation from several causes that must be diagnosed in order to understand the pathogenesis and perform specific treatment. Iron is essential for the proper functioning of the body of living beings, measurement and evaluation and parameters of iron metabolism in anemic animals, together with hematological results, are important to define the cause of anemia. It is known that several pathologies have the potential to interfere in the metabolism of iron in animals, but they need more studies to prove it. Unfortunately, the measurement of these parameters, mainly ferritin, is not a reality in Brazilian laboratories because species-specific kits are necessary and not commercially available. In addition, there is a lack of reference values in healthy dogs in Brazil. The objectives of this study were to establish reference values for iron parameters in healthy dogs from the Curitiba-PR region; validate pilot test of ferritin in dogs using human reagent by turbidimetry method; diagnose the causes of anemia in dogs and evaluate the metabolism of iron; analyze the occurrence of anemia and classify according to severity, hematimetric indices, bone marrow response, presence of erythrocyte morphological alterations and leukocyte response; to perform the diagnosis of immunomediated hemolytic anemia using the Coombs test and to establish a mortality rate in positive animals. The first chapter includes the analysis of iron parameters in 43 healthy dogs and standardization of methodologies for use in veterinary routine. The second chapter consists of the diagnosis of anemia in 219 dogs and analysis of the parameters of iron metabolism in the various causes of anemia. The third chapter comprises the diagnosis of immunomediated hemolysis in 17 dogs and the mortality rate observed in this pathology. The analyzes were carried out at the Laboratory of Veterinary Clinical Pathology of the Veterinary Hospital of UFPR; Laboratory of Clinical Pathology My Pets, located in the metropolitan region of Curitiba-PR; Laboratory of Clinical Analysis of the Veterinary Clinic School of UFSC (Curitibanos Campus); Laboratory of Virology and Rickettsioses, and Molecular Biology of UFMT. The results presented are as follows: healthy dog reference values for serum iron, ferritin, iron binding capacity and total iron binding capacity; the canine ferritin pilot test with human specific reagent has been validated for use in dogs; elevation of serum ferritin concentration in infectious diseases (hemoparasitoses and bacterial infections) and neoplastic diseases; decreased plasma iron concentration in dogs with end-stage cirrhosis and active hemorrhage; diagnosis of Rangelia vitalli, Babesia canis vogeli and Ehrlichia canis; diagnosis of immune-mediated hemolytic anemia in 47% of dogs and a mortality rate of 62.5%.

METABOLITOS DE FUNGOS E VEGETAIS DA CAATINGA COM ATIVIDADE ANTILEISHMANIAL

A leishmaniose tornou-se uma das doenças mais importantes da atualidade, dada a sua incidência e alta letalidade em indivíduos não tratados, idosos e crianças desnutridas. Dessa forma, na tentativa de descoberta de novos agentes mais eficazes e menos tóxicos para o combate à leishmaniose, os produtos naturais foram uma opção considerada no presente trabalho. Então foi realizada avaliação dos metabolitos primários e secundários de fungos e vegetais oriundos da Caatinga quanto às suas características químicas e às atividades biológicas, incluindo toxicidade às formas promastigotas e amastigotas de Leishmania sp., bem como o comparativo dessa atividade à de outros fitoterápicos. Foi selecionada a planta Caryocar coriaceum, bem como fungos endofíticos da planta Jatropha curcas a serem utilizados para a extração de enzimas hidrolíticas. De fungos do gênero Dichothomophtora e endofíticos dos gêneros Vermisporium-like e Emericella nidulans isolados de J. curcas, foram obtidos extratos proteicos ricos em lipases que foram testados contra fungos dermatófitos e Leishmania amazonensis. Os metabólitos secundários produzidos por C. coriaceum demonstraram possuir substâncias potencialmente bioativas com atividade antioxidante que atuaram como antifúngicas e antileishmaniais, principalmente pela eliminação de radicais livres dentro do vacúolo parasitário e mecanismos anticolinesterásicos de membrana. A caracterização química por cromatografia liquida de alta eficiência da presença de quercetina, rutina e isoquercitrina é indicativa dessas atividades. Extratos da folha de C. coriaceum exercem efeito leishmanicida atuando em formas primitivas por mecanismo semelhante a apoptose e amastigotas intracelulares pela resposta dependente da ferrugina Nrf2 / HO-1 / ferritina e depleção de ferro. Já extratos de frutos de C. coriaceum causam ação leishmanicida de forma direta em promastigotas e indireta em amastigotas intracelulares por modulação do metabolismo de ferro. Foi determinada a atividade antileishmanial de extratos proteicos de fungos endofíticos na caatinga, sem que essas substâncias causassem danos a células do hospedeiro, evidenciando nível de seletividade superior à droga padrão. Os dados obtidos nesse estudo comprovam a importância do estudo de metabolitos secundários obtidos de vegetais e de fungos endofíticos da caatinga, abrindo perspectivas ao uso desses extratos naturais, e substâncias isoladas, como agentes terapêuticos capazes de interromper o curso de infecções por Leishmania sp.

Leishmaniasis has become one of the most important diseases today, given its incidence and high lethality in untreated individuals, the elderly and malnourished children. Thus, to find new, more effective and less toxic agents to combat leishmaniasis, natural products were an option considered in the present work. Then, the primary and secondary metabolites of Caatinga fungi and vegetables were evaluated for their chemical characteristics and biological activities, including toxicity to the promastigote and amastigote forms of Leishmania sp., As well as the comparison of this activity to that of other phytotherapics. The Caryocar coriaceum plant was selected, as well as endophytic fungi of the Jatropha curcas plant to be used for the extraction of hydrolytic enzymes. From fungi of the genus Dichothomophtora and endophytic genera of Vermisporium-like and Emericella nidulans isolated from J. curcas, lipase-rich protein extracts were tested against dermatophytes fungi and Leishmania amazonensis. Secondary metabolites produced by C. coriaceum were shown to have potentially bioactive substances with antioxidant activity that acted as antifungal and antileishmanial, mainly by the elimination of free radicals within the parasitic vacuole and anticholinesterase membrane mechanisms. The chemical characterization by high performance liquid chromatography of the presence of quercetin, rutin and isoquercitrin is indicative of these activities. Extracts of C. coriaceum leaf exert leishmanicidal effect acting in primitive forms by apoptosis-like mechanism and intracellular amastigotes by Nrf2 / HO-1 / ferritin-dependent response and iron depletion. Already fruit extracts of C. coriaceum cause leishmanicidal action directly in promastigotes and indirectly in intracellular amastigotes by modulation of iron metabolism. The antileishmanial activity of protein extracts of endophytic fungi in the caatinga was determined, without these substances causing damage to host cells, showing a level of selectivity superior to the standard drug. The data obtained in this study confirm the importance of studying secondary metabolites obtained from caatinga endophytic plants and fungi, opening perspectives for the use of these natural extracts and isolated substances as therapeutic agents capable of interrupting the course of infections by Leishmania sp.

CHEMOBRAIN EM RATOS: ESTUDO DOS EFEITOS MORFOLÓGICOS, OXIDATIVOS, INFLAMATÓRIOS E COMPORTAMENTAIS DA ADMINISTRAÇÃO DO QUIMIOTERÁPICO DOXORRUBICINA

A doxorrubicina (DOX), um agente interativo da topoisomerase, é comumente utilizada no tratamento de vários tipos de câncer. Esta droga é conhecida por causar prejuízos cognitivos em indivíduos submetidos à quimioterapia de longo prazo (déficits também chamados de chemobrain). O presente estudo investigou se alterações morfológicas, oxidativas, inflamatórias e comportamentais poderiam ser induzidas por DOX. Ratos Wistar machos foram injetados com DOX (2,5 mg/kg, uma vez por semana, durante 28 dias, via intraperitoneal IP) ou solução fisiológica a 0,9% (mesmo volume, IP). Durante o período experimental, foram realizados estudos comportamentais, incluindo o teste de campo aberto, o de labirinto em cruz elevada, e os testes de preferência social e de reconhecimento de novo objeto (NORT). Os encéfalos foram coletados e analisados por técnicas de coloração com hematoxilina-eosina e luxol fast blue, bem como por imuno-histoquímica (GFAP expressão de glial fibrilary acidic protein em astrócitos) em diferentes áreas (córtex frontal, estriado, hipocampo, hipotálamo, camadas granular e molecular do cerebelo). Os parâmetros oxidativos foram também avaliados, tais como substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR), óxido nítrico (NO), ferro e ferritina encefálicos, assim como glutationa em seus estados reduzido (GSH) e oxidado (GSSG). Os níveis séricos e encefálicos de TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 e CXCL1 foram determinados por ELISA. A análise morfométrica mostrou que os ratos injetados com DOX apresentaram maior expressão de GFAP em todas as áreas analisadas. A administração de DOX também aumentou os níveis dos indicadores oxidativos TBARS, NO e GR, mas diminuiu os níveis encefálicos de GSSG e de ferritina, além de causar prejuízos de memória de reconhecimento, como visto no NORT. Não foram encontrados sinais de desmielinização e/ou perda neuronal. Níveis séricos e encefálicos aumentados de IL-6, IL-8 e CXCL1 foram observados no grupo DOX, embora a IL-10 tenha diminuído. Os resultados sugerem que a astrogliose e o estresse oxidativo induzidos pela DOX podem estar associados aos déficits de memória induzidos pela quimioterapia. Como a DOX possui uma pobre penetração por meio da barreira hematoencefálica, propõe-se que a entrada de citocinas séricas inflamatórias no encéfalo possa causar as mudanças encontradas em nosso estudo.

Doxorubicin (DOX), a topoisomerase interactive agent, is commonly used to treat several types of cancer. This drug is known to cause cognitive impairments in individuals submitted to long-term chemotherapy (deficits also called as chemobrain). The present study investigated whether morphological, oxidative, inflammation and behavioral impairments could be induced by DOX. Male Wistar rats were injected with DOX (2.5 mg/kg, once every week for 28 days, intraperitoneal route-IP) or 0.9% saline solution (same volume, IP). During the experimental period, behavioral studies were performed, including the open field test, the elevated plus maze, tests for social preference ande the novel object recognition task (NORT). Brains were collected and analyzed by hematoxylin-eosin and luxol fast blue staining techniques and by immunohistochemistry (GFAP- glial fibrillary acidic protein expression in astrocytes) in different areas (frontal cortex, striatum, hippocampus, hypothalamus, granular and molecular layers of the cerebellum). Oxidative parameters were also assessed, such as thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), nitric oxide (NO), brain iron and ferritin levels, as well as glutathione in its reduced (GSH) and oxidized (GSSG) states. Serum and brain levels of TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 and CXCL1 were determined by ELISA. Morphometric analysis showed that DOX-injected rats presented increased GFAP expression in all analyzed areas. DOX administration also increased the levels of the oxidative indicators TBARS, NO and GR, but decreased GSSG and brain ferritin levels, and caused memory impairments as seen in the NORT. No signs of demyelination and/or neuronal loss were found. Increased serum and brain levels of IL-6, IL-8 and CXCL1 were noted in the DOX group, although IL-10 decreased. Results suggest that astrogliosis and oxidative stress induced by DOX may be linked to chemotherapy-induced memory deficits. As DOX has a poor penetration across the blood-brain barrier, it is proposed that the entry of serum inflammatory cytokines into the brain may cause the changes found in our study.

Idosos praticantes de exercício físico moderado apresentam parâmetros alterados após ingestão de resveratrol

A prática regular de atividade física supervisionada é considerada um importante fator na promoção da saúde, inclusive para a população idosa, como um modo de prevenir doenças típicas dessa faixa etária. Porém, exercícios físicos podem estar relacionados à produção de espécies reativas de oxigênio (EROs). O presente estudo teve como objetivo avaliar de que modo o composto natural fenólico resveratrol, um agente antioxidante, pode interferir no processo inflamatório e, por conseguinte, na qualidade de vida de indivíduos idosos com idade entre 60 a 80 anos, que realizam exercícios físicos regularmente. Um estudo randomizado duplo-cego foi feito em praticantes de atividade física em um centro esportivo comunitário de São Paulo, SP. Os participantes receberam resveratrol na dose de 300 mg ao dia, durante 60 dias, e foram analisados peso, índice de massa corpórea, circunferência da cintura, pressão arterial, frequência cardíaca, e obtidos exames de sangue tais como hemograma, colesterol total, parâmetros sanguíneos da glicose em jejum, ácido úrico, triglicérides, colesterol total, ferritina, cortisol basal, hemograma, leucograma e plaquetograma. Foi observado aumento no IMC, peso, circunferência da cintura, pressão arterial sistólica e diastólica, ácido úrico, triglicérides, colesterol total, além de variações significativas nos valores de eritrócitos, hematócritos, VCM, HCM, CHCM, RDW, leucócitos, segmentados, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos. Embora as variações observadas se apresentassem dentro dos valores considerados normais para adultos, deve-se ter em conta que não há valores de referência destes parâmetros estipulados para a população idosa. Sendo assim, as alterações observadas passam a ser relevantes. A administração de resveratrol a idosos praticantes e não praticantes de exercícios físicos deve ser tomada com cautela, uma vez que, mesmo administrada por um período curto de tempo, apresentou alterações em diversos parâmetros indicadores de saúde.

The regular practice of supervised physical activity is considered an important factor in health promotion, including for the elderly population, as a way to prevent diseases typical of this age group. However, physical exercises may be related to the production of reactive oxygen species (ROS). The aim of the present study was to evaluate the effect of natural resveratrol phenolic compound, an antioxidant agent, on the inflammatory process and, consequently, on the quality of life of elderly individuals aged 60 to 80 years who regularly exercise . A randomized double-blind study was done in physical activity practitioners at a community sports center in São Paulo, SP. Participants received resveratrol at a dose of 300 mg daily for 60 days, and weight, body mass index, waist circumference, blood pressure, heart rate, and hemogram, total cholesterol, blood fasting glucose, uric acid, triglycerides, total cholesterol, ferritin, basal cortisol, blood count, leukogram, and plaquetogram. It was observed increase in BMI, weight, waist circumference, systolic and diastolic blood pressure, uric acid, triglycerides, total cholesterol, and significant variations in erythrocyte, hematocrit, MCV, HCM, CHCM, RDW, leucocytes, segmented, eosinophilic , basophils, lymphocytes and monocytes. Although the variations observed were within the values considered normal for adults, it should be taken into account that there are no reference values of these stipulated parameters for the elderly population. Therefore, the observed changes become relevant. The administration of resveratrol to practicing and non-exercising elderly should be taken with caution, since even when administered for a short period of time, it presented changes in several health indicators.

Efeito do pinçamento tardio do cordão umbilical nos níveis séricos de ferritina de crianças de 0, 3 e 6 meses de vida / Effect of delayed umbilical cord clamping on ferritin contents in sera from full-term infants aged 0, 3 and 6 months of life

Este estudo analisou o efeito do pinçamento tardio do cordão umbilical nos níveis de ferritina sérica de crianças de 0, 3 e 6 meses, que foi realizado no Centro Obstétrico do Hospital Universitário de Santa Maria-RS, Brasil, de maio de 2008 a abril de 2009. Foram analisados 101 recém-nascidos a termo, divididos em dois grupos: pinçamento precoce de 0 segundo a 1 minuto após o nascimento (n = 41) e pinçamento tardio de 1 a 3 minutos pós-nascimento (n = 60). Foram coletadas amostras de sangue venoso dos bebês,e a dosagem da ferritina sérica foi realizada no primeiro dia de vida, no terceiro e no sexto meses. Os resultados foram analisados pelo programa Statsoft Statistica v. 7.0.61.0EN. Para análise estatística foram utilizados teste Qui-Quadrado, teste de U Mann Whitney e teste de Correlação de Spearman. Os valores médios da ferritina no terceiro e no sexto meses mostraram-se superiores nas amostras de crianças do grupo de pinçamento tardio (111,82 ng/mL e 33,19 ng/mL, respectivamente) em relação às amostras do grupo de pinçamento precoce (97,79 ng/mL e 24,81 ng/mL, respectivamente). Estes dados fundamentam a alternativa de intervenção sustentável, de baixo custo e segura para integrar programas que visem à redução da deficiência de ferro em crianças, principalmente em países em desenvolvimento. (AU)

This study assessed the effect of delayed umbilical cord clampling on ferritin contents in serum samples from full-term infants aged 0, 3 and 6 months. This study was carried out at the Obstetric Center of the University Hospital of Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil, from May 2008 to April 2009. 101 full-term newborns were divided into two groups: early cord clamp from 0 second to 1 minute after birth (n = 41); and late cord clamp from 1 to 3 minutes after birth (n = 60). Venous blood samples were collected from infants at the 1st life day, and at 3rd and 6th months. The results were analyzed by Statsoft Statistica v. 7.0 6.1.0 EN. The tests ‘Qui-square, ‘U Mann Whitney and Spearmans correlation were used for statistical analyses. The mean values of ferritin in the 3rd and 6th months samples showed to be superior in infants of the late clamping group (111.82 ng/mL and 33.19 ng/mL, respectively) than in samples from children of early clamping group (97.79 ng/mL e 24.81 ng/mL). These findings evidenced an alternative for a sustainable intervention, safe and of low cost to integrate programs which aim at the reduction of iron deficiency anemia in infants, mainly in developing countries. (AU)

AVALIAÇÃO CLÍNICA E LABORATORIAL DO TRATAMENTO COM LACTULOSE DE CÃES COM DOENÇA RENAL CRÔNICA

Prebióticos, como a lactulose, podem favorecer a alteração do padrão fermentativo da microbiota colônica de proteolítico para sacarolítico; o que possibilita maior assimilação de compostos nitrogenados pelos microrganismos do cólon. O presente estudo teve por objetivo avaliar, em cães com DRC, o efeito da utilização continuada de lactulose por via oral, sobre o metabolismo de compostos nitrogenados; o metabolismo do ferro, e sobre as concentrações séricas de albumina, magnésio, cálcio e fósforo. Vinte e um animais portadores de DRC em estágios IRIS II e III, com manejo e alimentação normais, foram avaliados clinicamente e laboratorialmente por um período de 28 dias; divididos em três grupos conforme o tratamento: T1 lactulose + ração terapêutica, T2 lactulose + tratamento convencional + ração terapêutica, T3 tratamento convencional + ração terapêutica. Para os três grupos (T1, T2 e T3), os parâmetros clínicos foram indicativos de anemia e escore corporal de regular a ruim, de acordo com o grau da enfermidade, ao longo de todo tratamento. As médias dos parâmetros hematológicos e bioquímicos são condizentes com achados laboratoriais comuns em nefropatas; com elevados valores de ureia e creatinina e valores decrescidos de hematócrito. Para todos os parâmetros as variações durante o período não apresentaram diferença significativa entre os tempos e tratamentos, à exceção das médias de calcemia que foram maiores para o grupo T1; o que pode indicar que para os animais deste grupo a monoterapia com lactulose pode ter aumentado a absorção deste mineral. Com relação ao metabolismo de ferro, os dados revelaram que a anemia encontrada nos cães em todo o período experimental apresentou características de cronicidade, uma vez que as médias dos grupos permaneceram dentro dos intervalos de referência para ferro e transferrina; além de médias elevadas de ferritina, sem diferenças significativas entre grupos e momentos. Os dados obtidos permitiram concluir que não houve diferença entre os tratamentos propostos com relação ao estado clínico e aos perfis bioquímicos e minerais, bem como ao metabolismo de ferro; o que justifica que os mecanismos de ação dos prebióticos em nefropatas devem ser avaliados com maiores detalhes.

Prebiotics, such as lactulosis, may favor the switch on the fermentative pattern of the colonic microbiota from proteolytic to saccharolytic, which allows bigger assimilation of nitrogenous compounds by the microrganisms of the colon. The present study aimed to evaluate, in dogs with CKD, the effect of the continued orally use of lactulosis over the nitrogenous compounds metabolisms, the iron metabolism and on serum levels of albumin, magnesium, calcium and phosphorus. Twenty-one animals with CKD in IRIS II and III stages, under normal handling and feeding, were clinically and laboratorially evaluated by a 28 days period; divided in three groups according to treatment: T1 lactulosis + therapeutic diet, T2 lactulosis + standard treatment + therapeutic diet, T3 standard treatment + therapeutic diet . For the three groups (T1, T2 and T3), clinical parameters indicated anaemia and body score from regular to bad, according to the diseases degree, during the hole treatment. The haematological and biochemicals averages are consistent with common laboratorial findings in nephrophatic patients, with high levels of urea and creatinine; and low leves of haematocrit. For all the evaluated parameters in this study, the averages variations during the period didnt show any significant difference between times and treatments, with the exception of the calcemia averages that were greater for T1 group; which may indicate that for this animals group the monotherapy with lactulosis could have increased the absorption of this mineral in those patients. With regard to iron metabolism, this studys data revealed that the anaemia found in the dogs throughout the experimental period presented chronicity features, since the groups means remained within the iron and transferrin references, besides high ferritin averages, without significant differences between groups and moments. The obtained data allowed to conclude that there was no difference between the proposed treatments in relation to clinical state and the biochemical and mineral profiles, such as iron metabolism; which justifies that the action mechanisms of prebiotics in nephrophatic patients should be evaluated with more details.

Parâmetros utilizados na avaliação do metabolismo do ferro em cães

The determination of iron metabolism rates associated with hematological findings is an important tool to diagnosis, control and differentiation of anemic states. This study has as objective to determine the iron parameters (serum iron, unsaturated iron binding-capacity, total iron binding-capacity, transferrin saturation rate (IST), transferrin and ferritin) in healthy dogs. It was selected 120 dogs, shared in four different groups of sex and age (30 young males and 30 adult males, 30 young females and 30 adult females). The blood samples were collected between 8 and 11h AM, with fasted dogs. The average values to serum iron, unsaturated iron binding-capacity, total iron-binding-capacity, transferring percent saturation and transferrin are 138.2µl dl-1; 371µl dl-1; 232.6µl dl-1; 37.7% e 259.6mg dl-1 respectively. These rates were evaluated according to sex and age variation. The average values submitted to Tukey test it were not significant (P 0,01). Considering a 5% level variation of error probability, the serum iron was higher in adult male dogs, comparing with young male ones (P 0,05). The ferritin values were 0ng mL-1 in human chemiluminescent immunoassay kit.

A avaliação do metabolismo de ferro associado aos resultados hematológicos constitui uma ferramenta importante para o diagnóstico, controle e diferenciação de estados anêmicos. O presente trabalho objetivou determinar os parâmetros utilizados na avaliação do metabolismo do ferro (ferro sérico, capacidade latente de ligação do ferro, capacidade total de ligação do ferro, índice de saturação do ferro, transferrina e ferritina) em cães sadios. Foram selecionados 120 cães, divididos em quatro grupos de sexo e faixa etária distintos (30 machos jovens e 30 adultos, 30 fêmeas jovens e 30 adultas). As amostras de sangue foram coletadas das 8h às 11h, com os cães em jejum. Os valores médios para as concentrações de ferro sérico, capacidade latente de ligação do ferro, capacidade total de ligação do ferro, índice de saturação do ferro e transferrina foram 138,2µl dl-1; 371µl dl-1; 232,6µl dl-1; 37,7% e 259,6mg dl-1, respectivamente. Esses índices foram avaliados quanto às variações entre sexo e idade. Os valores médios foram submetidos ao teste de Tukey e não apresentaram variação significativa (P 0,01). A concentração de ferro sérico apresentou-se mais elevada em cães machos adultos, comparados aos machos jovens (P 0,05). O valor de ferritina obtido foi inferior a 1ng mL-1 com reagente comercial de imunoensaio quimioluminescente para humanos.

Parâmetros utilizados na avaliação do metabolismo do ferro em cães

The determination of iron metabolism rates associated with hematological findings is an important tool to diagnosis, control and differentiation of anemic states. This study has as objective to determine the iron parameters (serum iron, unsaturated iron binding-capacity, total iron binding-capacity, transferrin saturation rate (IST), transferrin and ferritin) in healthy dogs. It was selected 120 dogs, shared in four different groups of sex and age (30 young males and 30 adult males, 30 young females and 30 adult females). The blood samples were collected between 8 and 11h AM, with fasted dogs. The average values to serum iron, unsaturated iron binding-capacity, total iron-binding-capacity, transferring percent saturation and transferrin are 138.2µl dl-1; 371µl dl-1; 232.6µl dl-1; 37.7% e 259.6mg dl-1 respectively. These rates were evaluated according to sex and age variation. The average values submitted to Tukey test it were not significant (P 0,01). Considering a 5% level variation of error probability, the serum iron was higher in adult male dogs, comparing with young male ones (P 0,05). The ferritin values were 0ng mL-1 in human chemiluminescent immunoassay kit.

A avaliação do metabolismo de ferro associado aos resultados hematológicos constitui uma ferramenta importante para o diagnóstico, controle e diferenciação de estados anêmicos. O presente trabalho objetivou determinar os parâmetros utilizados na avaliação do metabolismo do ferro (ferro sérico, capacidade latente de ligação do ferro, capacidade total de ligação do ferro, índice de saturação do ferro, transferrina e ferritina) em cães sadios. Foram selecionados 120 cães, divididos em quatro grupos de sexo e faixa etária distintos (30 machos jovens e 30 adultos, 30 fêmeas jovens e 30 adultas). As amostras de sangue foram coletadas das 8h às 11h, com os cães em jejum. Os valores médios para as concentrações de ferro sérico, capacidade latente de ligação do ferro, capacidade total de ligação do ferro, índice de saturação do ferro e transferrina foram 138,2µl dl-1; 371µl dl-1; 232,6µl dl-1; 37,7% e 259,6mg dl-1, respectivamente. Esses índices foram avaliados quanto às variações entre sexo e idade. Os valores médios foram submetidos ao teste de Tukey e não apresentaram variação significativa (P 0,01). A concentração de ferro sérico apresentou-se mais elevada em cães machos adultos, comparados aos machos jovens (P 0,05). O valor de ferritina obtido foi inferior a 1ng mL-1 com reagente comercial de imunoensaio quimioluminescente para humanos.

Inflammatory and oxidative stress after surgery for the small area corrections of burn sequelae / Estresse inflamatório e oxidativo após cirurgia para correção de pequenas áreas de sequela de queimaduras

PURPOSE: To compare vitamin levels, inflammatory and oxidative stress markers before and after skin autograft surgery to correct burn scar areas. METHODS: This prospective study was conducted with 8 patients with a median age of 28 years (range, 16 to 40 years) that had burn sequelae and were admitted to a Burn Unit for correction of small burn scar areas [3.3 (1.0-5.0) % of the corporal surface]. The volunteers were evaluated before and 48 hours after excision of scar tissue and skin autograft. Routine laboratory data, along with a food questionnaire and anthropometry were collected in the preoperative period. Serum vitamin A, C, E, B12 and folic acid levels, inflammatory markers (C-protein reactive, alpha-1-acid glycoprotein, ferritin) and oxidative stress markers (reduced glutathione - GSH and Thiobarbituric Acid Reactive Substances - TBARS) were determined at preoperative and postoperative phases. Data were analyzed with two-sample Wilcoxon test. RESULTS: All volunteers were clinically stable and had adequate nutritional status at admission. After surgery, C-reactive protein serum levels increased [0.4 (0.01-1.0) vs. 2.5 (0.6-4.7) mg/dL, p=0.01] and vitamin A levels decreased [3.4 (2.1-4.2) vs. 2.4 (1.6-4.1) µmol/L, p=0.01]. No changes occurred in other vitamins, ferrritin, alpha-1-acid glycoprotein, GSH and TBARS levels. CONCLUSION: Minimal metabolic changes were produced after skin autograft in small areas of well-nourished patients without active infection or inflammation.(AU)

OBJETIVO: Comparar os níveis séricos de vitaminas e dos marcadores de estresse oxidativo e inflamatório antes e após enxerto cutâneo para correção de pequenas áreas de cicatrizes hipertróficas de queimaduras. MÉTODOS: O estudo prospectivo foi conduzido com oito pacientes com mediana de idade de 28 anos (variação de 16 a 40 anos) que apresentavam cicatrizes fibróticas decorrentes de queimaduras. Todos os pacientes foram admitidos em Unidade de Queimados para serem submetidos a enxertos autólogos [3,3 (1,0 a 5,0)% da superfície corporal]. Os voluntários foram avaliados antes e 48 horas após a excisão do tecido cicatricial e do enxerto autólogo. Exames laboratoriais de rotina, além do questionário alimentar e da antropometria foram obtidos no período pré-operatório. Os níveis séricos das vitaminas A, C, E, B12 e ácido fólico, os marcadores inflamatórios (proteína C reativa, alfa-1-glicoproteína ácida e ferritina) e marcadores de estresse oxidativo (glutationa reduzida - GSH e Substâncias Reativas do Ácido Tiobarbitúrico - TBARS) foram determinados nas fases pré e pós-operatórias. Os dados foram analisados pelo teste de Wilcoxon pareado. RESULTADOS: Todos os voluntários estavam clinicamente estáveis e apresentavam estado nutricional adequado à admissão hospitalar. Após a cirurgia, houve aumento dos níveis séricos de proteína C reativa [0,4 (0,01-1,0) vs 2,5 (0,6-4,7) mg/dL, p=0,01], enquanto houve redução nos níveis de vitamina A [3,4 (2,1-4,2) vs 2,4 (1,6-4,1) µmol/L, p=0,01]. Não houve mudanças nos níveis séricos de outras vitaminas, ferritina, alfa-1-glicoproteína ácida, GSH e TBARS. CONCLUSÃO: Em pacientes com bom estado nutricional e sem evidência de atividade inflamatória ou infecciosa ocorrem mudanças metabólicas mínimas após enxerto autólogo de pequenas áreas de cicatrizes de queimadura.(AU)

ANÁLISE TRANSCRITÔMICA DO INTESTINO DE FÊMEAS INGURGITADAS DE Ornithodoros mimon (ACARI: ARGASIDAE)

Ornithodoros mimon é um carrapato argasídeo parasita de quirópteras, aves e marsupiais, além de ser bastante agressivo aos humanos. O conhecimento dos transcritos presentes no intestino dos carrapatos auxilia no entendimento do papel de moléculas vitais no processo digestão e na relação parasito-hospedeiro, além de fornecer também informações sobre a evolução dos artrópodes hematófagos. Desta maneira, o presente estudo teve como objetivo conhecer e identificar as principais moléculas expressas no intestino de uma espécie de carrapato argasídeo após o repasto sanguíneo, através de uma análise transcritômica do intestino de fêmeas ingurgitadas de O. mimon. Sessenta fêmeas foram alimentadas e dissecadas para coleta o tecido intestinal. O RNAm da amostra do intestino foi extraído, purificado e quantificado. Esse serviu de molde para síntese do cDNA, que foi utilizado no pirosequenciamento. O transcritoma foi obtido através do método de montagem de novo do cDNA do tecido intestinal. Identificou-se 2235 sequências consensos (contigs) ou transcritos, dos quais 1729 apresentaram similaridade (hit) com sequências dos bancos de dados, enquanto que 506 não tiveram nenhuma similaridade. Os transcritos foram anotados e agrupados conforme as funções biológicas atribuídas as eles no processo de anotação gênica. Atividade catalítica, adesão e transporte foram as funções mais representativas com 780, 709 e 106 transcritos, respectivamente. Em uma análise não automatizada, os transcritos foram subcategorizados em 31 categorias. As categorias mais representativas foram desconhecido, atividade catalítica e transportadores-canais. Identificamos 103 transcritos digestivos associados à digestção de proteínas (67), carboidratos (19) e lipídios (17). Proteinases das classes serino, cisteíne, aspártica e metalo representaram as enzimas atuantes na digestão intracelular do constituinte proteíco do repasto sanguíneo. Genes associados com o transporte (hemelipoglicoproteína) e estocagem (ferritina) dos nutrientes resultantes da digestão foram encontrados bem expressos no trato digestivo. Registrou-se pela primeira vez a presença de uma cisteína peptidase do tipo catepsina O em carrapatos. Foram depositados no banco de dados gênico público 2213 transcritos de O. mimon. A análise filogenética das peptidases revelou que a maioria das proteinases de O. mimon é próxima aos genes codificadores de proteinases de carrapatos. Transcritos de catepsinas L de O. mimon parecem ter divergido de ancestrais recentes diferentes. A inferência filogenética baseada em conjunto de dados transcritos homólogos tem uma resolução topológica similar a de outros conjuntos de dados, como genoma mitocondrial e sequências nuclear de RNA ribossômico (rRNA). Os achados obtidos no presente estudo podem contribuir para compreensão dos importantes processos dos carrapatos argasídeos, como digestão, nutrição e imunidade, além de fornecer informações sobre a filogenia dos carrapatos.

Ornithodoros mimon is an argasid tick that parasitizes bats, birds and opossums and is also aggressive towards humans. It inhabits some countries in the Neotropical region. Knowledge of the transcripts present in the tick gut helps in understanding the role of vital molecules in the digestion process and parasite-host relationship, while also providing information about the evolution of arthropod hematophagy. Thus, the present study aimed to ascertain the main molecules expressed in the gut of argasid ticks after their blood meal, through analysis on the gut transcriptome of engorged females of O. mimon. Sixty females were fed and dissected to extract the gut tissue. The transcriptome was obtained through pyrosequencing and the de novo assembly method on mRNA of the gut tissue. We identified 2,235 contigs, of which 1,729 matched database sequences, while 506 did not present any hits. The transcripts were annotated and grouped according to their biological function. Catalytic, binding and transporter activity were the most representative functions, accounting for 780, 709 and 106 contigs, respectively. The transcripts were classified into 31 categories, using both bioinformatics and data curation practices. The most representative categories were, respectively, unknown, catalytic activity and transporter channels. One hundred and three (103) digestives transcritps associated to digestion of proteins (67), carbohydrates (19) and lipid (17) were identified in the transcriptome analysis. Peptidases associated with hemoglobin digestion, such as serine, cysteine, aspartic protease and metalloenzymes, were identified in the gut of the engorged females. Genes associated with transport (hemelipoglycoprotein) and storage (ferritin) of nutrients resulting from hemoglobin digestion, such as heme, were also found in the digestive tract. The presence of a cathepsin O-like cysteine peptidase was recorded in ticks, for the first time. Two thousand and two hundred thirteen (2213) transcripts were deposited to the Transcriptome Shotgun Assembly (TSA) portal of the NCBI.The phylogenetic analysis on the peptidases confirmed that most of them are clustered with other tick genes. Genes for cathepsin L in O. mimon appear to have diverged from other more common recent ancestors. The topology of the phylogenetic inferences, based on transcripts of inferred families of homologues, was similar to that of previous reports based on different datasets, such as mitochondrial genome and nuclear rRNA sequences. Our findings may help towards better understanding of important argasid metabolic processes, such as digestion, nutrition and immunity.

Suplementação com ferro injetável em cordeiros infectados experimentalmente por Haemonchus contortus

As verminoses gastro-intestinais é o principal entrave na produção de ovinos. O helminto Haemonchus contortus é a espécie que mais parasita ovinos no Brasil. Localiza-se no abomaso do hospedeiro e possui como hábito a hematofagia. Como sinais clínicos os animais apresentam anemia e hipoproteínemia, o que diminui a produtividade dos animais, pode levar a morte e traz sérios prejuízos para a atividade. A suplementação com ferro em ovinos parasitados auxilia no processo hematopoiético, porém ainda são necessários estudos para avaliar o metabolismo do ferro nestes animais. Diante do exposto, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da suplementação de ferro injetável em ovinos infectados experimentalmente com Haemonchus contortus. Utilizou-se 24 cordeiros divididos em quatro grupos experimentais, sendo o Grupo 1 animais não infectados, Grupo 2 animais infectados com 10000 larvas de terceiro estágio de H. contortus e tratados com três doses de 20mg /Kg de peso vivo de ferro dextrano por via intramuscular, um dose a cada sete dias, Grupo 3 animais não infectados e tratados com três doses de 20mg /Kg de peso vivo de ferro dextrano por via intramuscular, um dose a cada sete dias e Grupo 4 animais infectados com 10000 larvas de terceiro estágio de H. contortus. O período experimental foi de 21 dias. As amostras de sangue foram coletadas nos dias 10 (D10), 17 (D17), 24 (D24) e 31 (D31) pós-infecção parasitária para avaliação do metabolismo do ferro (Ferritina, Transferrina, Ferro Sérico, Índice de saturação à tranferrina, Capacidade Total de Ligação do Ferro e estoques de Ferro Medular) e do eritrograma (Contagem de Hemácia, Hematócrito, Hemoglobina, Reticulócitos, Volume Corpuscular Médio e a Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média). Amostras de fezes para quantificar o número de ovos por grama de fezes (OPG) foram obtidas nos mesmos momentos experimentais. Valores de OPG foram positivos somente nos Grupos 2 e 4. Quanto aos índices hematológicos, os grupos de animais infectado e tratados com ferro apresentaram maiores valores de hematócrito e hemoglobina em relação ao grupo dos animais infectado e não tratado com ferro. Os resultados demonstraram que as reservas de ferro medular foram maiores nos grupos suplementados com ferro. Ovinos infectados com H. contortus apresentam exaustão das reservas medulares de ferro, com isso o uso de ferro injetável auxilia na manutenção de estoque e torna o mineral mais disponível para a eritropoiese, melhorando a resposta orgânica dos animais contra à infecção.

Gastrointestinal worms are the main obstacle in the production of sheep. The helminth Haemonchus contortus is the species that most parasites sheep in Brazil. It is located in the abomaso of the host and has a habit of blood feeding. Considering clinical signs, the animals present anemia and hypoproteinemia, which reduces the productivity of animals; it can lead to death and causes serious damage to the activity. Iron supplementation in parasitized sheep assists in the hematopoietic process, although further studies are needed to assess the iron metabolism in such animals. Given the above, the following study aimed to evaluate the effects of injectable iron supplementation in sheep experimentally infected with Haemonchus contortusTwenty-four lambs have been used, divided into four groups, being Group 1 - uninfected animals, Group 2 - animals infected with 10000 third stage larvae of H. contortus and treated with three doses of 20mg/kg of body weight of dextran iron intramuscularly, one dose every seven days, Group 3 - non-infected animals and treated with three doses of 20mg/kg body weight iron dextran intramuscularly, one dose every seven days, and Group 4 - animals infected with 10000 third stage larvae of H. contortus. The experiment has lasted 21 days. Blood samples were collected on days 10 (D10), 17 (D17), 24 (D24), and 31 (D31) after parasitic infection to assess the metabolism of iron (ferritin, transferrin, Serum Iron, saturation index to transferrin, Iron Connection Total Capacity, and Spinal Cord Iron stocks) and erythrocyte (red blood cell count, Hematocrit, hemoglobin, reticulocytes, mean corpuscular hemoglobin concentration). Samples of feces for measuring the number of eggs per gram of feces (EPG) have been obtained at the same experimental time. OPG values were positive in Groups 2 and 4. Regarding hematological indices, groups of animals infected and treated with iron had higher values of hematocrit and hemoglobin compared to the group of animals infected and not treated with iron. The results showed that the spinal cord iron stocks were greater in the groups supplemented with iron. Sheep infected with H. contortus presented exhaustion of iron spinal cord reserves, thus the use of injectable iron aids in maintaining the stock and makes the mineral available for erythropoiesis by improving the organic response of animals against infection.

AVALIAÇÃO LABORATORIAL DA ANEMIA E DO METABOLISMO DO FERRO EM CÃES COM DOENÇA RENAL CRÔNICA

Os rins desenvolvem inúmeras funções no metabolismo, incluindo sua contribuição para eritropoiese. Diversos fatores contribuem para anemia em pacientes com doença renal crônica (DRC). A redução da eritropoietina de origem renal é uma causa importante, porém outros mecanismosestão envolvidos nessa alteração incluindo a anemia de origem inflamatória, supressão da eritropoiese, influência de toxinas urêmicas no tempo de sobrevivência da linhagem eritróide, deficiência de co-fatores e perda sanguínea por hemorragia intestinal ou em outros locais. O objetivo deste estudo foi avaliar a anemia e o metabolismo do ferro em cães com DRC. Foram avaliados 40 cães, independente de raça, sexo e idade. Os pacientes foram divididos em grupo controle (animais sadios), grupo de estudo (animais com DRC) e subgrupos DRCA (nefropatas anêmicos) e DRCNA (nefropatas não anêmicos). Todos estavam em jejum alimentar de 8-12 horas, para a realização dos seguintes procedimentos: coleta de sangue para realização de hemograma com pesquisa de hemoparasitos e microfilárias,dosagens bioquímicas séricas (avaliação hepática e renal), dosagem dos parâmetros relacionados ao metabolismo do ferro (ferro total, capacidade total de ligação do ferro-CTLF, índice de saturação de transferrina-IST e ferritina), urinálise e relação proteína-creatinina urinária, avaliação clínica e aferição da pressão arterial sistólica (PAS). A análise da ferritina sérica foi realizada no laboratório de hematologia comparada da Universidade do Kansas (EUA). A anemia do tipo normocítica normocrômica foi predominante (94,7%) no grupo DRC. Os animais dos estágios 3 e 4 da DRC (estadiamento proposto pela International Interest Renal Society) foram proporcionalmente mais acometidos pela anemia (>70%) que os animais do estágio 2. Verificou-se correlação negativa significativa entre a gravidade da anemia e as concentrações séricas de uréia, creatinina, fósforo, relação CaxP e correlação positiva entre anemia e albumina sérica. Houve redução significativa do ferro total e CTLF entre os grupos controle e DRC, entretanto o mesmo não foi observado para ferritina e IST. Não houve correlação significativa da anemia com escore de condição corporal (ECC), PAS, ferro, CTLF, IST, ferritina e sobrevida. Não houve diferença significativa dos valores de ferro, CTLF, IST e ferritina entre os grupos DRC 2, 3 e 4. Com base nesses resultados, pode-se inferir que a anemia normocítica normocrômica é proporcional ao agravamento da DRC e que a avaliação do ferro, CTLF, IST e ferritina não contribuem para avaliação do metabolismo do ferro em cães com DRC.

The kidneys develop multiple functions in metabolism, including their contribution to erythropoiesis. Several factors contribute to anemia in patients with chronic kidney disease (CKD). The reduction of erythropoietin from renal origin is an important cause of this, but others mechanisms are also involved in this change including anemia of inflammatory origin, erythropoiesis suppression, uremic toxins influence in survival time of the erythroid lineage, co-factors deficiency and blood loss by intestinal bleeding or other sources. The study aims to evaluate anemia and iron metabolism in dogs with CKD. We evaluated 40 dogs, regardless of race, gender and age. Patients were divided into control group (healthy animals) and study group (animals with CKD). The study group was subdivided in ACKD (anemic nephropathy) and NACKD (not anemic nephropathy). All animals were fasted for 12 hours before, blood sampling for CBC with haemoparasites and microfilariae researches, serum biochemical tests (liver and kidney evaluation), related metabolism iron tests (total iron, total iron binding capacity-TIBC, transferrin saturation-TS and ferritin), urinalyses and urinary protein-creatinine ratio, clinical evaluation and measurement of systolic blood pressure (SBP). The analysis of serum ferritin was made in compared hematology laboratory of University of Kansas (USA). The normocytic normochromic anemia was predominant (94.7%) in the CKD group. The animals in stages 3 and 4 of CKD (staging proposed by the International Renal Interest Society) were proportionally more affected by anemia (> 70%) than the animals in stage 2. There was a significant negative correlation between the severity of anemia and urea, creatinine, phosphorus, CaxP product and a positive correlation between anemia and serum albumin. There was a significant reduction in the total iron and TIBC between the control and CKD groups, however the same was not observed for serum ferritin and TS. There was no significant correlation between anemia and body condition score (BCS), SBP, total iron, TIBC, TS, serum ferritin and survival time. There was no significant difference in the values of total iron, TIBC, serum ferritin and TS between the CKD 2, 3 and 4 groups. Based on these results, we can infer that the normocytic normochromic anemia is proportional to the progression of CKD and that the assessment of total iron, TIBC, serum ferritin and TS do not contribute to assessment of iron metabolism in dogs with CKD.

Eritrograma, metabolismo do ferro e concentração sérica de eritropoetina em fêmeas caprinas da raça Saanen nos períodos de gestação, parto e pós-parto / Erithrogram, iron metabolism and serum erythropoietin concentration in female Saanen caprine in the pregnancy, parturition and postpartum periods

As alterações hematológicas durante o período de gestação, parto e pós-parto são de grande importância em humanos e têm sido estudadas em várias espécies de animais domésticos. O objetivo do trabalho foi determinar as alterações no eritrograma, no metabolismo do ferro e na concentração sérica de eritropoetina durante os períodos de gestação, parto e pós-parto em fêmeas nulíparas Saanen. Foram colhidas amostras de sangue de 20 fêmeas, clinicamente sadias, aos 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), sete (M7), três (M8) dias antes do parto, no dia do parto (M9), três (M10) e sete (M11) dias após o parto, para a realização do eritrograma, proteína plasmática total, e dosagens séricas de eritropoetina, ferro, capacidade total de ligação do ferro, índice de saturação da transferrina e ferritina. Os dados foram analisados pelo teste de análise de variância (ANOVA) ao nível de 5 por cento de significância (P<0,05). Houve diferença significativa (P<0,05) entre alguns momentos para as variáveis, número de eritrócitos, concentração de hemoglobina, volume globular, proteína total plasmática, concentração de ferro sérico, capacidade total de ligação do ferro (CLTF) e índice de saturação da transferrina (IST). Não houve diferença significativa (P<0,05) para as variáveis eritropoetina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), distribuição do diâmetro dos eritrócitos (DDE) e ferritina. Concluiu-se que não há aumento do estímulo para a produção de eritrócitos durante os períodos de gestação, parto e pós-parto em fêmeas Saanen e as alterações encontradas no eritrograma e no metabolismo do ferro não possuem significado clínico.(AU)

Hematological changes during the pregnancy and parturition are of great importance in humans and have been studied in several species of domestic animals. The objective was to determine changes in erythrogram, iron metabolism and the serum concentration of erythropoietin in nuliparous female Saanen caprine during periods of pregnancy, parturition and postpartum. Blood samples were collected from 20 goats, clinically healthy, the 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), seven (M7), three (M8) days in the pregnancy, parturition (M9), three (M10) and seven (M11) days postpartum for the erythrogram, plasma total protein and the serum of erythropoietin, iron, total iron binding capacity, transferrin saturation index and ferritin determination. The data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) at 5 percent level of significance (P<0,05). Significant difference (P<0,05) between a few moments for the variables, erythrocytes count, hemoglobin concentration, packed cell volume, total plasma proteins, serum iron concentration, total iron binding capacity (TIBC) and transferrin saturation index (TSI) determination. There were no significant difference for the variables erythropoietin, mean cell volume (MCV), mean cell hemoglobin (MCH), mean cell hemoglobin concentration (MCHC), red cell distribution width (RDW) and ferritin. In conclusion, there was no stimulus for the increasing of the red blood cells production during the periods of pregnancy, parturition and postpartum in nuliparous Saanen goats. No clinical significance was observed in the in red blood cell count and in the iron metabolism.(AU)

Role of ferritin in the rice tolerance to iron overload

Plants ordinarily face iron (Fe) deficiency, since this mineral is poorly available in soils under aerobic conditions. Nonetheless, wetland and irrigated rice plants can be exposed to excess, highly toxic Fe. Ferritin is a ubiquitous Fe-storage protein, important for iron homeostasis. Increased ferritin accumulation resulting from higher Fe availability was shown in some plant species. However, the role of ferritin in tolerance mechanisms to Fe overload in rice is yet to be established. In this study, recombinant rice ferritin was expressed in Escherichia coli, producing an anti-rice ferritin polyclonal antibody which was used to evaluate ferritin accumulation in two rice (Oryza sativa L.) cultivars, either susceptible (BR-IRGA 409) or tolerant (EPAGRI 108) to Fe toxicity. Increased ferritin mRNA and protein levels resulting from excess Fe treatment were detected in both cultivars, with higher ferritin protein accumulation in EPAGRI 108 plants, which also reached lower shoot Fe concentrations when submitted to iron overload. The tolerance mechanism to excess Fe in EPAGRI 108 seems to include both restricted Fe translocation and increased ferritin accumulation. This is the first work that shows higher accumulation of the ferritin protein in an iron-excess tolerant Oryza sativa cultivar, providing evidence of a possible role of this protein in iron tolerance mechanisms.

Deficiência de ferro (Fe) ocorre freqüentemente em plantas, uma vez que este mineral é pouco disponível em condições aeróbicas. Plantas de arroz cultivadas sob alagamento, no entanto, estão sujeitas ao excesso de Fe, que pode ser extremamente tóxico. Alguns cultivares de arroz são resistentes a altas concentrações de ferro, mas os mecanismos fisiológicos responsáveis por essa resistência são pouco conhecidos. A ferritina é uma proteína de ampla distribuição e capaz de armazenar ferro, sendo considerada importante para a homeostase deste metal. Acúmulo de ferritina em condições de alta disponibilidade de ferro já foi descrito em algumas espécies vegetais. Entretanto, o papel da ferritina no mecanismo de tolerância de plantas de arroz ao excesso de ferro não é conhecido. Neste trabalho, expressamos ferritina de arroz em E. coli, produzimos um anticorpo policlonal anti-ferritina de arroz e este foi utilizado para avaliar o acúmulo de ferritina em dois cultivares de arroz (Oryza sativa) considerados suscetível (BR-IRGA 409) e tolerante (EPAGRI 108) ao excesso de ferro. O anticorpo foi capaz de reconhecer ferritina purificada de sementes de ervilha, assim como ferritina de folhas de arroz. Aumentos nos níveis de mRNA e proteína foram observados nos dois cultivares sob excesso de ferro, com maior acúmulo da proteína no cultivar EPAGRI 108. Quando submetidas a excesso do elemento, plantas deste mesmo cultivar atingiram concentrações de Fe mais baixas do que plantas do cultivar BR-IRGA409, principalmente nas partes aéreas. Sugere-se que o mecanismo de tolerância ao excesso de ferro no cultivar EPAGRI 108 inclui limitação da translocação de Fe e aumento do acúmulo de ferritina. Este é o primeiro trabalho que mostra maior acúmulo da proteína ferritina em um cultivar de Oryza sativa tolerante ao excesso de Fe, fornecendo evidência de um possível papel desta proteína nos mecanismos de tolerância a este metal.

Role of ferritin in the rice tolerance to iron overload

Plants ordinarily face iron (Fe) deficiency, since this mineral is poorly available in soils under aerobic conditions. Nonetheless, wetland and irrigated rice plants can be exposed to excess, highly toxic Fe. Ferritin is a ubiquitous Fe-storage protein, important for iron homeostasis. Increased ferritin accumulation resulting from higher Fe availability was shown in some plant species. However, the role of ferritin in tolerance mechanisms to Fe overload in rice is yet to be established. In this study, recombinant rice ferritin was expressed in Escherichia coli, producing an anti-rice ferritin polyclonal antibody which was used to evaluate ferritin accumulation in two rice (Oryza sativa L.) cultivars, either susceptible (BR-IRGA 409) or tolerant (EPAGRI 108) to Fe toxicity. Increased ferritin mRNA and protein levels resulting from excess Fe treatment were detected in both cultivars, with higher ferritin protein accumulation in EPAGRI 108 plants, which also reached lower shoot Fe concentrations when submitted to iron overload. The tolerance mechanism to excess Fe in EPAGRI 108 seems to include both restricted Fe translocation and increased ferritin accumulation. This is the first work that shows higher accumulation of the ferritin protein in an iron-excess tolerant Oryza sativa cultivar, providing evidence of a possible role of this protein in iron tolerance mechanisms.

Deficiência de ferro (Fe) ocorre freqüentemente em plantas, uma vez que este mineral é pouco disponível em condições aeróbicas. Plantas de arroz cultivadas sob alagamento, no entanto, estão sujeitas ao excesso de Fe, que pode ser extremamente tóxico. Alguns cultivares de arroz são resistentes a altas concentrações de ferro, mas os mecanismos fisiológicos responsáveis por essa resistência são pouco conhecidos. A ferritina é uma proteína de ampla distribuição e capaz de armazenar ferro, sendo considerada importante para a homeostase deste metal. Acúmulo de ferritina em condições de alta disponibilidade de ferro já foi descrito em algumas espécies vegetais. Entretanto, o papel da ferritina no mecanismo de tolerância de plantas de arroz ao excesso de ferro não é conhecido. Neste trabalho, expressamos ferritina de arroz em E. coli, produzimos um anticorpo policlonal anti-ferritina de arroz e este foi utilizado para avaliar o acúmulo de ferritina em dois cultivares de arroz (Oryza sativa) considerados suscetível (BR-IRGA 409) e tolerante (EPAGRI 108) ao excesso de ferro. O anticorpo foi capaz de reconhecer ferritina purificada de sementes de ervilha, assim como ferritina de folhas de arroz. Aumentos nos níveis de mRNA e proteína foram observados nos dois cultivares sob excesso de ferro, com maior acúmulo da proteína no cultivar EPAGRI 108. Quando submetidas a excesso do elemento, plantas deste mesmo cultivar atingiram concentrações de Fe mais baixas do que plantas do cultivar BR-IRGA409, principalmente nas partes aéreas. Sugere-se que o mecanismo de tolerância ao excesso de ferro no cultivar EPAGRI 108 inclui limitação da translocação de Fe e aumento do acúmulo de ferritina. Este é o primeiro trabalho que mostra maior acúmulo da proteína ferritina em um cultivar de Oryza sativa tolerante ao excesso de Fe, fornecendo evidência de um possível papel desta proteína nos mecanismos de tolerância a este metal.

Anemia e marcadores séricos da deficiência de ferro em grávidas atendidas na rede pública municipal de Manaus, Amazonas, Brasil

This study aimed to evaluate anemia in pregnant women, comparing results of hemoglobin and hemotocrit dosages with analysis of iron serum status markers. 92 pregnant women, in pre-natal attendance in Public Health Service of Manaus, Amazonas, Brazil, participated in this study. A questionnaire was used to access anthropometric data and life style information. Serum levels of iron, latent iron binding capacity (LIBC), total iron binding capacity (TIBC), transferrin saturation (TS), transferrin, ferritin, and blood levels of hemoglobin and hematocrit were measured by automated methods, using commercially available kits. The study showed that 26.1% of the pregnant women had hemoglobin levels below 11 g/dL. Also, of the pregnant women with normal levels of hemoglobin, 17.4% showed inadequate iron levels and 9.8% low levels of ferritin. Ferritin and hemoglobin levels showed a significant statistical difference among the trimester pregnant women (p 0.05, ANOVA). Theses results suggest that the dosage of hemoglobin together with other iron serum markers can make for a more specific evaluation of iron deficiency in pregnancy.

O presente estudo teve como objetivo avaliar a anemia em grávidas, associando os resultados da dosagem de hemoglobina e hematócrito com a análise de marcadores do perfil sérico do ferro. Participaram do estudo 92 grávidas que estavam realizando pré-natal em unidades de atendimento à saúde no Município de Manaus, Amazonas, Brasil. Foi aplicado um formulário para obtenção dos dados antropométricos e informações sobre estilo de vida, além de serem realizadas dosagens dos níveis séricos de ferro, capacidade latente de ligação do ferro (CLLF), capacidade total de ligação do ferro (CTLF), índice de saturação da transferrina (IST), transferrina, ferritina e níveis sanguíneos de hemoglobina e hematócrito por metodologia automatizada utilizando kits comerciais disponíveis. Foram encontradas 26,1% de grávidas com níveis de hemoglobina abaixo de 11 g/dL. Observou-se que 17,4% das grávidas com níveis normais de hemoglobina apresentavam níveis inadequados de ferro sérico e 9,8% apresentavam níveis baixos de ferritina sérica. Os níveis de ferritina e de hemoglobina apresentaram diferença significativa entre os trimestres de gestação (p 0,05, ANOVA). Os resultados sugerem que a dosagem da hemoglobina juntamente com outros marcadores do perfil sérico do ferro pode trazer uma avaliação mais precisa da deficiência de ferro na gravidez.

Anemia e marcadores séricos da deficiência de ferro em grávidas atendidas na rede pública municipal de Manaus, Amazonas, Brasil

This study aimed to evaluate anemia in pregnant women, comparing results of hemoglobin and hemotocrit dosages with analysis of iron serum status markers. 92 pregnant women, in pre-natal attendance in Public Health Service of Manaus, Amazonas, Brazil, participated in this study. A questionnaire was used to access anthropometric data and life style information. Serum levels of iron, latent iron binding capacity (LIBC), total iron binding capacity (TIBC), transferrin saturation (TS), transferrin, ferritin, and blood levels of hemoglobin and hematocrit were measured by automated methods, using commercially available kits. The study showed that 26.1% of the pregnant women had hemoglobin levels below 11 g/dL. Also, of the pregnant women with normal levels of hemoglobin, 17.4% showed inadequate iron levels and 9.8% low levels of ferritin. Ferritin and hemoglobin levels showed a significant statistical difference among the trimester pregnant women (p 0.05, ANOVA). Theses results suggest that the dosage of hemoglobin together with other iron serum markers can make for a more specific evaluation of iron deficiency in pregnancy.

O presente estudo teve como objetivo avaliar a anemia em grávidas, associando os resultados da dosagem de hemoglobina e hematócrito com a análise de marcadores do perfil sérico do ferro. Participaram do estudo 92 grávidas que estavam realizando pré-natal em unidades de atendimento à saúde no Município de Manaus, Amazonas, Brasil. Foi aplicado um formulário para obtenção dos dados antropométricos e informações sobre estilo de vida, além de serem realizadas dosagens dos níveis séricos de ferro, capacidade latente de ligação do ferro (CLLF), capacidade total de ligação do ferro (CTLF), índice de saturação da transferrina (IST), transferrina, ferritina e níveis sanguíneos de hemoglobina e hematócrito por metodologia automatizada utilizando kits comerciais disponíveis. Foram encontradas 26,1% de grávidas com níveis de hemoglobina abaixo de 11 g/dL. Observou-se que 17,4% das grávidas com níveis normais de hemoglobina apresentavam níveis inadequados de ferro sérico e 9,8% apresentavam níveis baixos de ferritina sérica. Os níveis de ferritina e de hemoglobina apresentaram diferença significativa entre os trimestres de gestação (p 0,05, ANOVA). Os resultados sugerem que a dosagem da hemoglobina juntamente com outros marcadores do perfil sérico do ferro pode trazer uma avaliação mais precisa da deficiência de ferro na gravidez.

Metabolismo do ferro em suínos recebendo dietas contendo fitase, níveis reduzidos de fósforo inorgânico e sem suplemento micromineral e vitamínico

This research was aimed at evaluating the effect of mineral-vitamin supplement withdrawal associated to reduction of inorganic phosphorus level and addition of phytase in feed on iron metabolism of finishing-phase pigs. Erythrocyte and reticulocyte count, serum iron, ferritin and transferrin quantification was performed. Forty eight hybrid swine females with initial average weight of 60kg were allotted to a completely randomized experimental design with six with four replications of two animals each. Blood was drawn from a group of twenty four 100kg animals and from a second group of twenty four 120kg animals. No differences (P>0.05) were observed in erythrocyte and reticulocyte count or serum iron and transferrin quantification. However, ferritin levels were increased in 100kg animals fed basal feed without mineral/vitamin supplement and inorganic phosphorus with phytase when compared to animals fed basal feed without mineral/vitamin supplement with inorganic phosphorus with phytase. The enzyme, even in the absence of supplementation, assured the maintenance of iron reserves in the body. Difference as mentioned above was not detected in 120kg animals. The results of this work suggest that withdrawal of vitamin and mineral supplement combined with reduction of inorganic phosphorus and addition of phytase do not lead to significant changes in iron metabolism.

O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o metabolismo do ferro por meio da determinação do eritrograma, contagem de reticulócitos, dosagem de ferro sérico, ferritina sérica e transferrina sérica de suínos em fase de terminação alimentados com dietas contendo fitase, sem suplemento micromineral/vitamínico e redução dos níveis de fósforo inorgânico (Pi). Foram utilizadas 48 fêmeas suínas de linhagem comercial, com peso inicial de 60kg, distribuídas em seis tratamentos com oito animais em cada grupo. A colheita de sangue foi feita em um grupo de 24 animais com 100kg e em outro grupo de 24 animais com 120kg. Não foram observadas diferenças (P>0,05) nos valores obtidos do eritrograma, da contagem de reticulócitos, de ferro sérico e de transferrina para os animais nos tratamentos testados. Com relação à ferritina, verificou-se que os animais até os 100kg de peso vivo que receberam ração sem suplemento micromineral/vitamínico, sem fósforo inorgânico e com fitase apresentaram valores superiores (P 0,05) quando comparados aos alimentados com ração sem suplemento micromineral/vitamínico, com fósforo inorgânico e contendo fitase. A enzima, mesmo na ausência de suplementação, garantiu a manutenção de estoques de ferro do organismo. Essa diferença não foi detectada para os animais que foram alimentados com as mesmas rações até os 120kg de peso vivo. Os resultados encontrados neste experimento mostram que a redução do fósforo inorgânico, a retirada do suplemento vitamínico e mineral, bem como a adição da fitase, em dietas para suínos em terminação, não desencadeiam alterações significativas no metabolismo do ferro.

Metabolismo do ferro em suínos recebendo dietas contendo fitase, níveis reduzidos de fósforo inorgânico e sem suplemento micromineral e vitamínico

This research was aimed at evaluating the effect of mineral-vitamin supplement withdrawal associated to reduction of inorganic phosphorus level and addition of phytase in feed on iron metabolism of finishing-phase pigs. Erythrocyte and reticulocyte count, serum iron, ferritin and transferrin quantification was performed. Forty eight hybrid swine females with initial average weight of 60kg were allotted to a completely randomized experimental design with six with four replications of two animals each. Blood was drawn from a group of twenty four 100kg animals and from a second group of twenty four 120kg animals. No differences (P>0.05) were observed in erythrocyte and reticulocyte count or serum iron and transferrin quantification. However, ferritin levels were increased in 100kg animals fed basal feed without mineral/vitamin supplement and inorganic phosphorus with phytase when compared to animals fed basal feed without mineral/vitamin supplement with inorganic phosphorus with phytase. The enzyme, even in the absence of supplementation, assured the maintenance of iron reserves in the body. Difference as mentioned above was not detected in 120kg animals. The results of this work suggest that withdrawal of vitamin and mineral supplement combined with reduction of inorganic phosphorus and addition of phytase do not lead to significant changes in iron metabolism.

O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o metabolismo do ferro por meio da determinação do eritrograma, contagem de reticulócitos, dosagem de ferro sérico, ferritina sérica e transferrina sérica de suínos em fase de terminação alimentados com dietas contendo fitase, sem suplemento micromineral/vitamínico e redução dos níveis de fósforo inorgânico (Pi). Foram utilizadas 48 fêmeas suínas de linhagem comercial, com peso inicial de 60kg, distribuídas em seis tratamentos com oito animais em cada grupo. A colheita de sangue foi feita em um grupo de 24 animais com 100kg e em outro grupo de 24 animais com 120kg. Não foram observadas diferenças (P>0,05) nos valores obtidos do eritrograma, da contagem de reticulócitos, de ferro sérico e de transferrina para os animais nos tratamentos testados. Com relação à ferritina, verificou-se que os animais até os 100kg de peso vivo que receberam ração sem suplemento micromineral/vitamínico, sem fósforo inorgânico e com fitase apresentaram valores superiores (P 0,05) quando comparados aos alimentados com ração sem suplemento micromineral/vitamínico, com fósforo inorgânico e contendo fitase. A enzima, mesmo na ausência de suplementação, garantiu a manutenção de estoques de ferro do organismo. Essa diferença não foi detectada para os animais que foram alimentados com as mesmas rações até os 120kg de peso vivo. Os resultados encontrados neste experimento mostram que a redução do fósforo inorgânico, a retirada do suplemento vitamínico e mineral, bem como a adição da fitase, em dietas para suínos em terminação, não desencadeiam alterações significativas no metabolismo do ferro.

Iron and humoral immune response in pigs fed phytase-added rations with lower phosphorus levels / Ferro e imunidade humoral em suínos alimentados com fitase e níveis reduzidos de fósforo

Endogenous enzymes such as phytase have been widely used in swine production to increase phosphorus, amino acid and energy availability from feeds. This study aimed to evaluate the immune system through quantification of blood components associated to iron metabolism and determine humoral immune response elements in pigs fed phytase-added diets without micro minerals and vitamins and partial or total deletion of inorganic phosphorus. Forty-eight crossbred females with initial weight of 60 kg were randomly sorted into six groups of eight animals each, as follows: G1 -standard (complete) ration (control group); G2 - standard ration except that micromineral and vitamin supplement was deleted; G3 - group 2 ration with phytase, G4 - group 2 ration less 1/3 of inorganic P with phytase, G5 -  group 2 ration less 2/3 of inorganic P with phytase and G6 - group 2 ration without inorganic P with phytase. Statistical difference (p>0,05) was not recorded neither in white cells and platelet counts nor hemoglobin, serum iron levels, considering all the animals in all treatments. Nevertheless, pigs up to 100 kg that consumed diet without micro minerals and vitamins, total deletion of inorganic P and phytase addition presented increased ferritin levels (p>0,05) when compared to animals fed similar diet with inorganic phosphorus and phytase. The enzyme guaranteed maintenance of iron stocks

A utilização de enzimas exógenas, como a fitase, permite um melhor aproveitamento de nutrientes, incrementando a utilização do fósforo, dos aminoácidos e da energia. O presente estudo foi desenvolvido com objetivo de: 1 - avaliar o sistema imune por meio da quantificação de componentes sangüíneos relacionados ao metabolismo do ferro e 2 - determinar elementos da resposta imunológica humoral, em suínos recebendo dietas contendo fitase, níveis reduzidos de fósforo inorgânico (Pi) e sem suplemento micromineral e vitamínico. Utilizaram-se 48 fêmeas suínas de linhagem comercial, com peso inicial de 60kg, distribuídas em seis tratamentos com oito animais em cada grupo. A colheita de sangue foi feita em um grupo de 24 animais com 100 kg e outro grupo de 24 animais com 120 kg. Tratamentos: 1. ração basal (grupo-controle); 2. ração 1, sem suplemento micromineral/vitamínico; 3. ração 2, com fitase; 4. ração 2, sem 1/3 de fósforo inorgânico (Pi) e com fitase; 5. ração 2, sem 2/3 de Pi e com fitase, 6. ração 2, sem Pi e com fitase. Não se observaram diferenças (p>0,05) nos valores obtidos do leucograma e contagem de plaquetas para os animais nos diferentes tratamentos testados. Em relação à hemoglobina e ferro sérico também não foram observadas diferenças (p>0,05) nos valores obtidos para os animais nos diferentes tratamentos testados. Com relação à ferritina, verificou-se que os ani