Bioactive metabolites in of Ginkgo biloba leaves: variations by seasonal, meteorological and soil / Metabólitos bioativos em folhas de Ginkgo biloba: variações sazonais, meteorológicas e do solo

Ginkgo biloba is a traditional Chinese herbal medicine containing multiple components that contribute to its notable bioactivities. Variations of seasonal, meteorological and planting soil on the phytochemicals contents in G. biloba leaves due to the effects of growth meteorological and soil parameters were investigated in this study. The leaves of G. biloba were collected from different months and place in Zhejiang province, the contents of flavones (quercetin, kaempferol and isorhamnetin) and terpene lactones (bilobalide, ginkgolides A, B and C) were quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) and the evaporative light scattering detector (ELSD) method. The established methods were validated with good linearity, precision, repeatability, stability, and recovery. Comprehensive analysis suggested the proper harvest time for G. biloba was in October of Zhejiang province. The result of correlation analysis with meteorological factors shows that the temperature and precipitation have non-significant effect on the main components of G. biloba. In addition, the type and content (Mn and Zn) of the soil showed significantly effect on the content of flavonoids and terpene lactones. This study enriched the knowledge on the development and utilization value of the G. biloba leaves and was useful for determining the optimal harvest time and growing condition.(AU)

Ginkgo biloba é um fitoterápico tradicional da medicina chinesa que contém vários componentes que contribuem para suas notáveis bioatividades. Variações sazonais, meteorológicos e de plantio do solo sobre os teores fitoquímicos em folhas de G. biloba, devido aos efeitos do crescimento meteorológico e parâmetros do solo, foram investigadas neste estudo. As folhas de G. biloba foram coletadas em diferentes meses e na província de Zhejiang, os teores de flavonas (quercetina, kaempferol e isorhamnetina) e lactonas terpênicas (bilobalida, ginkgolídeos A, B e C) foram quantificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e pelo método do detector de dispersão da luz por evaporação. Os métodos estabelecidos foram validados com boa linearidade, precisão, repetibilidade, estabilidade e recuperação. Uma análise abrangente sugeriu que o tempo de colheita adequado para G. biloba foi em outubro na província de Zhejiang. O resultado da análise de correlação com fatores meteorológicos mostra que a temperatura e a precipitação não têm efeito significativo sobre os principais componentes de G. biloba. Além disso, o tipo e composição (Mn e Zn) do solo apresentaram efeito significativo sobre o teor de flavonoides e lactonas terpênicas. Este estudo enriqueceu o conhecimento sobre o valor de desenvolvimento e utilização das folhas de G. biloba e foi útil para determinar o melhor tempo de colheita e condição de crescimento.(AU)

Bioactive metabolites in of Ginkgo biloba leaves: variations by seasonal, meteorological and soil

Abstract Ginkgo biloba is a traditional Chinese herbal medicine containing multiple components that contribute to its notable bioactivities. Variations of seasonal, meteorological and planting soil on the phytochemicals contents in G. biloba leaves due to the effects of growth meteorological and soil parameters were investigated in this study. The leaves of G. biloba were collected from different months and place in Zhejiang province, the contents of flavones (quercetin, kaempferol and isorhamnetin) and terpene lactones (bilobalide, ginkgolides A, B and C) were quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) and the evaporative light scattering detector (ELSD) method. The established methods were validated with good linearity, precision, repeatability, stability, and recovery. Comprehensive analysis suggested the proper harvest time for G. biloba was in October of Zhejiang province. The result of correlation analysis with meteorological factors shows that the temperature and precipitation have non-significant effect on the main components of G. biloba. In addition, the type and content (Mn and Zn) of the soil showed significantly effect on the content of flavonoids and terpene lactones. This study enriched the knowledge on the development and utilization value of the G. biloba leaves and was useful for determining the optimal harvest time and growing condition.

Resumo Ginkgo biloba é um fitoterápico tradicional da medicina chinesa que contém vários componentes que contribuem para suas notáveis bioatividades. Variações sazonais, meteorológicos e de plantio do solo sobre os teores fitoquímicos em folhas de G. biloba, devido aos efeitos do crescimento meteorológico e parâmetros do solo, foram investigadas neste estudo. As folhas de G. biloba foram coletadas em diferentes meses e na província de Zhejiang, os teores de flavonas (quercetina, kaempferol e isorhamnetina) e lactonas terpênicas (bilobalida, ginkgolídeos A, B e C) foram quantificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e pelo método do detector de dispersão da luz por evaporação. Os métodos estabelecidos foram validados com boa linearidade, precisão, repetibilidade, estabilidade e recuperação. Uma análise abrangente sugeriu que o tempo de colheita adequado para G. biloba foi em outubro na província de Zhejiang. O resultado da análise de correlação com fatores meteorológicos mostra que a temperatura e a precipitação não têm efeito significativo sobre os principais componentes de G. biloba. Além disso, o tipo e composição (Mn e Zn) do solo apresentaram efeito significativo sobre o teor de flavonoides e lactonas terpênicas. Este estudo enriqueceu o conhecimento sobre o valor de desenvolvimento e utilização das folhas de G. biloba e foi útil para determinar o melhor tempo de colheita e condição de crescimento.

Bioactive metabolites in of Ginkgo biloba leaves: variations by seasonal, meteorological and soil

Abstract Ginkgo biloba is a traditional Chinese herbal medicine containing multiple components that contribute to its notable bioactivities. Variations of seasonal, meteorological and planting soil on the phytochemicals contents in G. biloba leaves due to the effects of growth meteorological and soil parameters were investigated in this study. The leaves of G. biloba were collected from different months and place in Zhejiang province, the contents of flavones (quercetin, kaempferol and isorhamnetin) and terpene lactones (bilobalide, ginkgolides A, B and C) were quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) and the evaporative light scattering detector (ELSD) method. The established methods were validated with good linearity, precision, repeatability, stability, and recovery. Comprehensive analysis suggested the proper harvest time for G. biloba was in October of Zhejiang province. The result of correlation analysis with meteorological factors shows that the temperature and precipitation have non-significant effect on the main components of G. biloba. In addition, the type and content (Mn and Zn) of the soil showed significantly effect on the content of flavonoids and terpene lactones. This study enriched the knowledge on the development and utilization value of the G. biloba leaves and was useful for determining the optimal harvest time and growing condition.

Resumo Ginkgo biloba é um fitoterápico tradicional da medicina chinesa que contém vários componentes que contribuem para suas notáveis bioatividades. Variações sazonais, meteorológicos e de plantio do solo sobre os teores fitoquímicos em folhas de G. biloba, devido aos efeitos do crescimento meteorológico e parâmetros do solo, foram investigadas neste estudo. As folhas de G. biloba foram coletadas em diferentes meses e na província de Zhejiang, os teores de flavonas (quercetina, kaempferol e isorhamnetina) e lactonas terpênicas (bilobalida, ginkgolídeos A, B e C) foram quantificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e pelo método do detector de dispersão da luz por evaporação. Os métodos estabelecidos foram validados com boa linearidade, precisão, repetibilidade, estabilidade e recuperação. Uma análise abrangente sugeriu que o tempo de colheita adequado para G. biloba foi em outubro na província de Zhejiang. O resultado da análise de correlação com fatores meteorológicos mostra que a temperatura e a precipitação não têm efeito significativo sobre os principais componentes de G. biloba. Além disso, o tipo e composição (Mn e Zn) do solo apresentaram efeito significativo sobre o teor de flavonoides e lactonas terpênicas. Este estudo enriqueceu o conhecimento sobre o valor de desenvolvimento e utilização das folhas de G. biloba e foi útil para determinar o melhor tempo de colheita e condição de crescimento.

RADIOPROTEÇÃO E RADIOMITIGAÇÃO DO Ginkgo biloba EM CÉREBRO DE RATOS EXPOSTOS AOS RAIOS-X DE 6 MeV

O sistema nervoso é afetado de diversas formas pela exposição à radiação ionizante (RI), incluindo danos cognitivos e morfológicos. O estresse oxidativo, por exemplo, trata-se de um dos efeitos da RI e é caracterizado pelo desequilíbrio entre a produção de espécies reativas de oxigênio e mecanismos de defesa antioxidante. Portanto, a busca por radioprotetores se faz cada vez mais pertinente para minimizar esses efeitos adversos. Uma espécime proeminente nesse cenário, é o Ginkgo biloba (Gb) por se tratar de um antioxidante e por já ter demonstrado ser um neuroprotetor. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo central avaliar a possível ação radioprotetora do extrato de Ginkgo biloba no cérebro de ratos expostos à RI. Para tanto foram utilizados 35 animais divididos em cinco grupos (n = 7): controle, irradiado, tratado apenas com o Gb, tratado com o Gb antes da irradiação (GBRI) e tratado com o Gb após da irradiação (RIGB). Os animais destes grupos passaram por um procedimento cirúrgico para implante dos eletrodos, visando o registro do eletrocorticograma. Os registros obtidos a partir do EMG 410C foram analisados pelos seguintes métodos matemáticos: Transformada de Fourier, Entropia Aproximada e Complexidade de Lempel-Ziv. Assim, foi observado que a RI interfere em todas as ondas cerebrais, aumentando a potência das ondas delta e beta e diminuindo as ondas teta e alfa. Por outro lado, os grupos RIGB e GBRI se assemelharam ao grupo controle, o que confere um caráter radioprotetor ao Gb. Do ponto de vista histológico, foi encontrado apoptose nas regiões CA1 e Giro Denteado apenas no grupo irradiado. Com base nos dados obtidos, pode-se concluir que efeito protetor do extrato do Ginkgo biloba pode ser uma escolha de terapia adjunta na redução da toxicidade induzida pela irradiação.

The nervous system is affected in several ways by exposure to ionizing radiation (IR), including cognitive and morphological damage. Oxidative stress, for example, is one of the effects of IR and is characterized by the imbalance between the production of reactive oxygen species and antioxidant defense mechanisms. Therefore, the search for radioprotectors becomes increasingly relevant to minimize these adverse effects. A prominent specimen in this scenario is Ginkgo biloba (Gb) because it is an antioxidant and has already been shown to be a neuroprotective. Therefore, the present work had as main objective to evaluate the possible radioprotective action of Ginkgo biloba extract in the brain of rats exposed to IR. For this purpose, 35 animals were used, divided into five groups (n = 7): control, irradiated, treated only with Gb, treated with Gb before irradiation (GBRI) and treated with Gb after irradiation (RIGB). The animals in these groups underwent a surgical procedure to implant the electrodes, aiming to register the electrocorticogram. The records obtained from the EMG 410C were analyzed by the following mathematical methods: Fourier Transform, Approximate Entropy and Lempel-Ziv Complexity. Thus, it was observed that IR interferes in all brain waves, increasing the power of the delta and beta waves and decreasing the theta and alpha waves. On the other hand, the RIGB and GBRI groups were similar to the control group, which gives Gb a radioprotective character. From the histological point of view, apoptosis was found in the CA1 and Dentate Gyrus regions only in the irradiated group. Based on the data obtained, it can be concluded that the protective effect of Ginkgo biloba extract can be a choice of adjunct therapy in reducing irradiation-induced toxicity.

A Catuama e o bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático / Catuama and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following sciatic nerve section

A Catuama® é a associação de quatro extratos hidroalcoolicos obtidos de plantas brasileiras (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale) com conhecida ação neuroprotetora, anti-inflamatória, antioxidante e antidepressiva. O bilobalide é um componente extraído das folhas do Ginkgo biloba, que tem comprovada ação neuroprotetora nos sistemas nervosos central e periférico. O presente estudo avaliou os efeitos da Catuama® e do bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático. Foram utilizados 40 ratos com implante de tubo de silicone preenchido por colágeno líquido, deixando-se um intervalo entre os segmentos nervosos de 10mm. Os animais foram divididos em 4 grupos: o grupo controle (A); os grupos que receberam a Catuama® administrada por via oral nos primeiros 28 dias de pós-operatório, nas doses de 100 (B) e 400mg.kg-1 (C); e o grupo que recebeu o bilobalide na dose de 200µM (D), este, adicionado ao colágeno líquido utilizado no implante de silicone. Os animais foram avaliados na primeira, quinta e décima semanas de pós-operatório pelo teste de marcha. Na décima semana, foi realizada avaliação eletrofisiológica e análises quantitativa e qualitativa dos cortes histológicos de amostras do nervo isquiático e do músculo gastrocnêmio. Em todas as análises utilizadas observou-se excelente regeneração dos nervos, no entanto, não foi encontrada diferença significativa (P>0,05) entre os grupos experimentais e controle.(AU)

The Catuama® is composed of four Brazilian plants extracts (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale). The Catuama® is known as having neuroprotector, anti-inflammatory, antioxidant and antidepressant effects. Bilobalide, extracted from leaves of Ginkgo biloba, is known by its neuroprotective effect in the central and peripheral nervous systems. The present study evaluates the effect of Catuama® and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following a sciatic nerve section. Sciatic nerve of forty adult rats was transected with a 10-mm gap and the proximal and distal nerve stumps were fixed in a silicone tube filled with liquid collagen. The animals were divided into four groups: the control group (A), two groups treated with Catuama® by gavage along 28 days after the surgery in different doses of 100 (B) and 400mg.kg-1 (C) and the group using 200µM bilobalide (D) associated with the liquid collagen in the silicone tube. Evaluations were done by a walk test on the first, fifth and tenth week after the surgery. Electrophysiological stimulation and quantitative and qualitative histological analyses of the sciatic nerve and gastrocnemius muscle were also performed on the tenth week after the surgery. All groups showed good regeneration but no statistical difference was found between treatments and control groups (P>0.05).(AU)

OTIMIZAÇÃO DO PERFIL DE SEGURANÇA DA NIMESULIDA ATRAVÉS DA ASSOCIAÇÃO COM HEPATOPROTETOR

Autor: Amanda Godoi Elias Orientador: Luciana Grazziotin Rossato Grando Passo Fundo, 30 de Setembro de 2019 Os antiinflamatórios juntamente com os antibióticos são as causas mais frequentes de lesões hepáticas induzidas por drogas. A nimesulida é um potente antiinflamatório, muito utilizado por ter seus efeitos rápidos e duradouros, porém é um medicamento que tem alto risco de hepatotoxicidade. Diante deste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de hepatoprotetores sobre os mecanismos hepatotóxicos induzidos pela nimesulida visando propor uma formulação mais segura. Inicialmente, fizemos um estudo in vitro através do modelo de cultura celular HepG2 para testar três possíveis hepatoprotetores: N-acetilcisteína, o Ginkgo biloba e a L-carnitina. Neste estudo constatamos que tanto N-acetelcisteína como o Gingko biloba tem bom potencial para antagonizar a citotoxicidade induzida pela nimesulida. Diante disso, selecionamos a N-acetilcisteína devido ao seu potencial antioxidante e maior experiência clínica em seu uso como antídoto de intoxicações hepatotóxicas. O estudo in vivo foi realizado utilizando 24 ratos Wistar machos como modelo animal. Os animais foram divididos em 4 grupos (6 animais por grupo): Controle que receberam solução salina; nimesulida 100mg/kg/dia de nimesulida; nimesulida e N-acetilcisteína 100mg/kg/dia de cada e Nacetilcisteína 100mg/kg/dia de N-acetilcisteína. Os tratamentos foram administrados por via oral (gavagem), durante o estudo dois animais do grupo que recebeu somente nimesulida morreram, após apresentar um emagrecimento progressivo. Com relação ao peso relativo dos animais, os que receberam nimesulida somente, apresentaram um menor ganho de peso com relação aos controles (p<0.0001) e a associação de nimesulida com N-acetilcisteína apresentou um ganho de peso significativamente maior quando comparado ao grupo que recebeu somente a nimesulida (p<0.05). Nas análises de histopatologia dos fígados, o grupo que recebeu somente nimesulida apresentou muitas lesões de degeneração e necrose, enquanto que no grupo que recebeu associação de nimesulida e N-acetilcisteína essas lesões foram de menor intensidade. Não houve alterações significativas em nenhum dos grupos com relação aos biomarcadores sanguíneos de lesão hepática e nem ocorrência de stress oxidativo nos fígados. Neste trabalho, pela primeira vez os efeitos da N-acetilcisteína como hepatoprotetor na lesão hepática induzida pela nimesulida foi demonstrado. Apesar dos excelentes resultados deste hepatoprotetor como antídoto em outras intoxicações, há uma proteção parcial na associação da nimesulida com Nacetilcisteína.

Author: Amanda Godoi Elias Advisor: Luciana Grazziotin Rossato Grando Passo Fundo, 30 de Setembro de 2019 Anti-inflamatory drugs, together with antibiotics, are the most relevant cause of druginduced hepatotoxicity. Nimesulide is a potent anti-inflammatory, which presents rapid and last-longing effects and also a high risk of hepatotoxicity. Thus, the aim of this work was to enhance nimesulide safety profile through the association with an hepatoprotector. First, we performed an in vitro study using HepG2 cell line model to test 3 possible hepatoprotectors: Nacetylcisteine, Gingko biloba, and L-carnitine. N-acetylcysteine and G. biloba show promisor results, then we selected N-acetylcysteine due to its board antioxidant effect and clinical experience as an antidote of hepatotoxicity. In vivo study was performed using 24 male Wistar rats, divided in 4 groups (6 animals/group): Control (receiving saline solution), Nimesulide 100mg/kg/day, Nimesulide 100mg/kg/day + N-acetylcysteine 100mg/kg/day, and Nacetylcysteyne 100mg/kg/day alone. Treatments were given through gavage, daily, for 15 days. During the study, 2 rats treated with nimesulide died after present a progressive weight-loss. Animals treated with nimesulide alone present lower body weight gain compared to control (p<0.0001and the association of nimesulide and N-acetylcysteine group presents higher body weight gain compared to nimesulide alone (p<0.05). Liver histology revealed hepatic lesions with degeneration and necrosis in animals receiving nimesulide. Rats treated with the association of nimesulide+N-acetylcysteine present hepatic lesions less pronounced. Liver, heart and spleen of animals treated with nimesulide show higher relative mass when compared to control. This change is reverted by the association with nimesulide only in hearts. It was not observed significant differences between groups in biochemical biomarkers or oxidative stress parameters. To the best our knowledge, we show for the first time the protection elicited by Nacetylcysteine against nimesulide-induced hepatotoxicity. Despite excellent effects of Nacetylcysteine used as antidote in other drug-induced hepatotoxicity, the protection obtained here is only partial.

Comportamento de ratas (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) expostas ao extrato de Ginkgo biloba durante a lactação

O presente estudo observou o efeito da administração de extrato de Gynkgo biloba no comportamento de ratas lactantes. os animais foram divididos em dois grupos experimentais (n=15 ratas/grupo): Controle (1 mL de água destilada) e Tratado (3,5 mg/Kg por peso de G. biloba), os quais foram tratados por gavagem via oral durante o período de lactação plena (do 2o ao 16o dia pósnatal).Variáveis observáveis: [1] sinais de toxidade maternal - massa corporal e aumento/diminuição da ingestão de água e alimento, locomoção dentro da gaiola, ereção de pêlos, estereotipia, diarréia e mortes; [2] Comportamento maternal - indiferença a ninhada, organização do ninho, recolher e lamber filhotes; [3] Número de filhotes vivos, mortos e canibalizados. Não foi possível evidenciar diferenças significativas para quaisquer das variáveis. Pode-se concluir que o extrato de Ginkgo biloba não alterou o comportamento de ratas lactantes no modelo experimental utilizado.

Comportamento de ratas (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769) expostas ao extrato de Ginkgo biloba durante a lactação

O presente estudo observou o efeito da administração de extrato de Gynkgo biloba no comportamento de ratas lactantes. os animais foram divididos em dois grupos experimentais (n=15 ratas/grupo): Controle (1 mL de água destilada) e Tratado (3,5 mg/Kg por peso de G. biloba), os quais foram tratados por gavagem via oral durante o período de lactação plena (do 2o ao 16o dia pósnatal).Variáveis observáveis: [1] sinais de toxidade maternal - massa corporal e aumento/diminuição da ingestão de água e alimento, locomoção dentro da gaiola, ereção de pêlos, estereotipia, diarréia e mortes; [2] Comportamento maternal - indiferença a ninhada, organização do ninho, recolher e lamber filhotes; [3] Número de filhotes vivos, mortos e canibalizados. Não foi possível evidenciar diferenças significativas para quaisquer das variáveis. Pode-se concluir que o extrato de Ginkgo biloba não alterou o comportamento de ratas lactantes no modelo experimental utilizado.

Protective effects of the antioxidant Ginkgo biloba extract and the protease inhibitor aprotinin against Leiurus quinquestriatus venom-induced tissue damage in rats

Oxidative stress and proteases have been implicated in several diseases and extensive evidence indicates that antioxidants and protease inhibitors help prevent organ functional damage. Leiurus quinquestriatus (LQQ) scorpion venom causes cellular injuries that may lead to multiple organ failure. Thus, the capability of the antioxidant "natural standardized extract of Gingko biloba leaves (Gin, EGb 761)" and the non-selective protease inhibitor, aprotinin, in ameliorating venom-induced biochemical alterations indicative of cellular injury and oxidative stress was studied to determine their effectiveness in protecting rats from venom-evoked cellular damages. Thus, in this study, rats were treated with LQQ venom (0.3mg.kg-1, subcutaneously) alone or after Gin (150mg.kg-1, orally, daily for 2 weeks before venom) and/or aprotinin (Apr, 46000 KIU.kg-1, intraperitoneally, 30 min before venom). Control groups were injected with saline or treatment modalities. Lungs and hearts were excised after decapitating rats (n=8/group) 60 min after venom injection and the following activities were measured: reduced glutathione (GSH), malondialdehyde (MDA) - an index of lipid peroxidation, glutathione peroxidase (GPx), glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD), and lactate dehydrogenase (LDH). Our findings demonstrate that LQQ venomsignificantly elevated GSH (p 0.05 vs. control), MDA (p 0.05), G6PD (p 0.05), and LDH activities (p 0.001) in hearts of envenomed rats. The venom also elevated MDA (p 0.05 vs. control) and reduced GSH and GPx (p 0.05) in the lungs of envenomed rats. In general, pretreatment with EGb761 attenuated LQQ venom-evoked increases in GSH (p 0.05 vs. venom), MDA in rat hearts and lungs (p 0.05 vs. venom), plus LDH in the heart (p 0.01). Aprotinin alone significantly reduced the venom-elicited increase in G6PD and LDH activities and the decrease in GPx levels (p 0.05). In general, these protective effects of EGb761 on GSH, MDA (p 0.01 vs. venom) and LDH (p 0.001) in the heart and/or lung were potentiated when combined with aprotinin. We concluded that the effectiveness of EGb761 and Apr in ameliorating venom-evoked biochemical changes indicative of necrosis and free radical generation point out the involvement of oxidative stress and proteases in venom-evoked cellular damages seen in this study in isolated rat hearts and lungs.

Protective effects of the antioxidant Ginkgo biloba extract and the protease inhibitor aprotinin against Leiurus quinquestriatus venom-induced tissue damage in rats

Oxidative stress and proteases have been implicated in several diseases and extensive evidence indicates that antioxidants and protease inhibitors help prevent organ functional damage. Leiurus quinquestriatus (LQQ) scorpion venom causes cellular injuries that may lead to multiple organ failure. Thus, the capability of the antioxidant "natural standardized extract of Gingko biloba leaves (Gin, EGb 761)" and the non-selective protease inhibitor, aprotinin, in ameliorating venom-induced biochemical alterations indicative of cellular injury and oxidative stress was studied to determine their effectiveness in protecting rats from venom-evoked cellular damages. Thus, in this study, rats were treated with LQQ venom (0.3mg.kg-1, subcutaneously) alone or after Gin (150mg.kg-1, orally, daily for 2 weeks before venom) and/or aprotinin (Apr, 46000 KIU.kg-1, intraperitoneally, 30 min before venom). Control groups were injected with saline or treatment modalities. Lungs and hearts were excised after decapitating rats (n=8/group) 60 min after venom injection and the following activities were measured: reduced glutathione (GSH), malondialdehyde (MDA) - an index of lipid peroxidation, glutathione peroxidase (GPx), glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD), and lactate dehydrogenase (LDH). Our findings demonstrate that LQQ venomsignificantly elevated GSH (p 0.05 vs. control), MDA (p 0.05), G6PD (p 0.05), and LDH activities (p 0.001) in hearts of envenomed rats. The venom also elevated MDA (p 0.05 vs. control) and reduced GSH and GPx (p 0.05) in the lungs of envenomed rats. In general, pretreatment with EGb761 attenuated LQQ venom-evoked increases in GSH (p 0.05 vs. venom), MDA in rat hearts and lungs (p 0.05 vs. venom), plus LDH in the heart (p 0.01). Aprotinin alone significantly reduced the venom-elicited increase in G6PD and LDH activities and the decrease in GPx levels (p 0.05). In general, these protective effects of EGb761 on GSH, MDA (p 0.01 vs. venom) and LDH (p 0.001) in the heart and/or lung were potentiated when combined with aprotinin. We concluded that the effectiveness of EGb761 and Apr in ameliorating venom-evoked biochemical changes indicative of necrosis and free radical generation point out the involvement of oxidative stress and proteases in venom-evoked cellular damages seen in this study in isolated rat hearts and lungs.

Avaliação toxicológica do Ginkgo biloba sobre a fertilidade e reprodução de ratos Wistar

Ginkgo biloba  é uma planta usada como fitoterápico por demonstrar efeitos benéficos sobre algumas funções cerebrais, especialmente no tratamento das doenças de Alzeimer e Parkinson. Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade reprodutiva do extrato de Ginkgo biloba administrado em ratos Wistar. Os animais foram tratados diariamente por via oral, na dose de 17 mg/kg com auxílio de uma sonda orogástrica e os resultados comparados a um grupo controle tratado com solução fisiológica na dose de 10 mL/kg. Os machos de ambos os grupos foram tratados por 91 dias, e as fêmeas por 77 dias, no período de préacasalamento, acasalamento, gestação e lactação. Com relação ao desenvolvimento ponderal, consumo de água e ração os animais tratados com extrato de Ginkgo biloba não apresentaram alterações comparados ao grupo controle. Não foram detectadas alterações morfológicas nos órgãos internos, cuja massa relativa não diferiu do controle. Não houve interferência sobre a gestação, assim como os índices reprodutivos e de desenvolvimento pós-natal não apresentaram alterações significativas em relação ao grupo controle. A avaliação do líquido seminal do ducto deferente e dos testículos não mostrou diferença na morfologia espermática e na contagem de células espermáticas, comparadas ao grupo controle. Os filhotes de animais tratados com Ginkgo biloba apresentaram desenvolvimento pós-natal

Atividade antioxidante dos extratos de Ginkgo biloba L / Antioxidant activity of extracts of Ginkgo biloba L

Atualmente, inúmeros ensaios têm demonstrado que os compostos bioativos encontrados em extratos vegetais, possuem eficácia no controle de reações oxidativas. Deste modo, este trabalho avaliou a efetividade de extratos obtidos das folhas de Ginkgo biloba L, como antioxidantes in vitro. Para tanto, elaboraram-se três extratos (um aquoso e dois purificados). As análises da atividade antioxidante, fenóis totais e redução de potência, foram realizadas para avaliar a ação antioxidante dos extratos. A atividade antioxidante encontrada foi elevada para os três extratos, encontrando-se valores entre 76 e 85% de inibição no teste da oxidação acelerada em banha e, correlacionou-se diretamente com a redução de potência. O extrato aquoso apresentou um maior rendimento no conteúdo de fenóis totais, comparando-se com os extratos purificados, entretanto, a sua atividade antioxidante foi inferior, comprovando-se, deste modo, a maior eficácia da extração por fracionamento na seleção dos compostos ativos do Ginkgo biloba L.(AU)

Actuality, various researches have demonstrated that bioactive compounds discovered in the plant extracts, hadefficient for the control of the oxidative reactions. Thus, this research analyzed an effectived of the raw extracts obtained in the leaves of Ginkgo biloba L as an in vitro antioxidants. It was developed aqueous one and purificated two extracts. The analyses of the antioxidant activity, phenolics and reducing power were conduced to determine theantioxidant action of the raw extracts. The antioxidant activity discovered it was highly significant for the three rawextracts, it was finded the value between 76 and 85% were found for inhibition, in the accelerated oxidation test inthe pork fat and, correlated directing as a reducing power. The aqueous extract exhibited a greater yield in thephenolics content, it was compared as a purificated extracts, however, its antioxidant activity was below, confirmed a tall efficient of the sequence extraction in the selection of the bioactive compounds of Ginkgo biloba L. (AU)

Avaliação toxicológica do Ginkgo biloba sobre a fertilidade e reprodução de ratos Wistar

Ginkgo biloba  é uma planta usada como fitoterápico por demonstrar efeitos benéficos sobre algumas funções cerebrais, especialmente no tratamento das doenças de Alzeimer e Parkinson. Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade reprodutiva do extrato de Ginkgo biloba administrado em ratos Wistar. Os animais foram tratados diariamente por via oral, na dose de 17 mg/kg com auxílio de uma sonda orogástrica e os resultados comparados a um grupo controle tratado com solução fisiológica na dose de 10 mL/kg. Os machos de ambos os grupos foram tratados por 91 dias, e as fêmeas por 77 dias, no período de préacasalamento, acasalamento, gestação e lactação. Com relação ao desenvolvimento ponderal, consumo de água e ração os animais tratados com extrato de Ginkgo biloba não apresentaram alterações comparados ao grupo controle. Não foram detectadas alterações morfológicas nos órgãos internos, cuja massa relativa não diferiu do controle. Não houve interferência sobre a gestação, assim como os índices reprodutivos e de desenvolvimento pós-natal não apresentaram alterações significativas em relação ao grupo controle. A avaliação do líquido seminal do ducto deferente e dos testículos não mostrou diferença na morfologia espermática e na contagem de células espermáticas, comparadas ao grupo controle. Os filhotes de animais tratados com Ginkgo biloba apresentaram desenvolvimento pós-natal

Avaliação toxicológica do Ginkgo biloba sobre a fertilidade e reprodução de ratos Wistar

Ginkgo biloba  é uma planta usada como fitoterápico por demonstrar efeitos benéficos sobre algumas funções cerebrais, especialmente no tratamento das doenças de Alzeimer e Parkinson. Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade reprodutiva do extrato de Ginkgo biloba administrado em ratos Wistar. Os animais foram tratados diariamente por via oral, na dose de 17 mg/kg com auxílio de uma sonda orogástrica e os resultados comparados a um grupo controle tratado com solução fisiológica na dose de 10 mL/kg. Os machos de ambos os grupos foram tratados por 91 dias, e as fêmeas por 77 dias, no período de préacasalamento, acasalamento, gestação e lactação. Com relação ao desenvolvimento ponderal, consumo de água e ração os animais tratados com extrato de Ginkgo biloba não apresentaram alterações comparados ao grupo controle. Não foram detectadas alterações morfológicas nos órgãos internos, cuja massa relativa não diferiu do controle. Não houve interferência sobre a gestação, assim como os índices reprodutivos e de desenvolvimento pós-natal não apresentaram alterações significativas em relação ao grupo controle. A avaliação do líquido seminal do ducto deferente e dos testículos não mostrou diferença na morfologia espermática e na contagem de células espermáticas, comparadas ao grupo controle. Os filhotes de animais tratados com Ginkgo biloba apresentaram desenvolvimento pós-natal

Estudo da ação do extrato de Ginkgo biloba e amido hidroxietílico hipertônico na atenuação de alterações decorrentes de isquemia e reperfusão de órgãos esplâncnicos em ratos

Splanchnic artery occlusion and reperfusion causes circulatory shock, due mainly to increased capillary permebility and cellular injury precipitated by oxygen derived free-radicals. The purpose of this study was to verify if Ginkgo biloba extract (Egb-761) and hypertonic hydroxyethyl starch (HHS) would be able to prevent hypovolemic shock at the splanchnic artery occlusion (SAO). Egb-761 is known for its antioxidant property, which is well documented by the literature. HHS has been used successfully in hypovolemic shock treatment. Anesthetized rats received Egb-761 and HHS infusion and had their celiac, superior mesenteric and inferior mesentereic arteries occluded for 30 minutes followed by reperfusion by 90 minutes. Ileal histology and malondialdehyd (MDA) were determinated, as well as, mean arterial blood pressure (MABP) records were performed. Treated animals exhibited higher MABP than the controls (F=18,29;p 0,001), at the end of reperfusion period. MDA (H=6,003; p> 0,10) and histology (H=4,61; p> 0,10) did not show statistical differences among the groups. In conclusion, Egb-761 and HHS, have improved the rats hemodinamics attenuating significantly the SAO shock. Further studies must be proceeded to clarify the histological changes and the lipid peroxidation final products formation.

A oclusão e reperfusão das artérias esplâncnicas ocasiona choque circulatório, causado principalmente pelo aumento de permeabilidade vascular e pela agressão celular provocada por radicais livres derivados do oxigênio. Este estudo tem por finalidade verificar a ação do extrato de Ginkgo biloba (Egb-761) e do amido hidroxietílico (AHH) na prevenção do choque circulatório produzido pela isquemia e reperfusão de órgãos esplâncnicos. O Egb-761 tem propriedades antioxidantes relatadas na literatura. O AHH, tem sido utilizado como recurso terapêutico do choque hipovolêmico. Ratos anestesiados receberam infusão contínua de Egb-761 ou AHH, sendo submetidos à isquemia (oclusão do tronco celíaco, artéria mesentérica superior e artéria mesentérica inferior por 30 minutos) e reperfusão (por 90 minutos) dos órgãos esplâncnicos. Foram feitas: análise histopatológica ileal, dosagem de malondialdeído ileal e determinação contínua da pressão arterial média (PAM). A PAM ao final do período de reperfusão foi significativamente mais elevada nos animais tratados com Egb-761 e AHH, que no grupo controle (F=18,29; p 0,001). Não houve diferença entre os grupos tratados e controle quanto à dosagem de MDA (H=4,61; p>0,10) e quanto às alterações histológicas (H=6,003; p>0,10). Em conclusão, houve melhora nas condições hemodinâmicas, com atenuação do choque nos ratos que receberam Egb-761 ou AHH. Novos estudos serão necessários para se avaliar melhor as alterações histológicas e para esclarecer a formação de produtos finais da peroxidação lipídica.

Efeito da catuama e do bilobalide na regeneração nervosa perifírica de ratos submetidos à secção do nervo isquático

Lesões no Sistema Nervoso Periférico (SNP) são relativamente freqüentes. Apesar do SNP apresentar capacidade regenerativa em muitas situações não ocorre regeneração nervosa adequada levando a perdas funcionais. A Catuama é a associação de quatro extratos hidroalcoólicos obtidos de plantas brasileiras (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale) com conhecida ação neuroprotetora, antiinflamatória, anti-oxidante e antidepressiva. O bilobalide é um componente extraído das folhas de Ginkgo biloba que tem demonstrada ação neuroprotetora nos sistemas nervosos central e periférico. O presente estudo avaliou a ação da Catuama e do bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático e reparação com implante de tubo de silicone preenchido por colágeno deixando um intervalo entre os segmentos nervosos de 10mm. A Catuama foi administrada por via oral nos primeiros 28 dias de pós-operatório, nas doses de 100, 200 e 400mg/kg e comparada ao bilobalide na dose de 200?M adicionado ao colágeno líquido do implante e ao grupo controle. Os animais foram avaliados na primeira, quinta e décima semana de pós-operatório pelo teste de marcha e na décima semana pela avaliação eletrofiosiológica e pelas análises quantitativa e qualitativa dos cortes histológicos de amostras do nervo isquiático e do músculo gastrocnêmio. Em todas as análises utilizadas não foi encontrada diferença (P>0,05) entre os grupos experimentais o que indica que a Catuama e o bilobalide não interferiram na regeneração nervosa periférica nas condições experimentais

Peripheral nerve lesions are common. Functional recovery after peripheral nerve injuries is frequently poor, despite the capacity for axonal regeneration, resulting in most cases in a functional loss of the nerve. The Catuama is composed of four brasilian plants extracts (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale). The Catuama is known as having neuroprotector, antinflamatory, antioxidant and antidepressive effects. Bilobalide, extraction of the leaves of Ginkgo biloba, is known by it´s neuroprotector effect in the central and peripheral nervous system. The present study evaluates the effect of Catuama and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following a sciatic nerve section. Sciatic nerve of adult rats was transected with a 10-mm gap and the proximal and distal nerve stumps were fixed in a silicone tube filled with collagen. The Catuama was oral administered along 28 days after the surgery. Three different treatment groups using doses of 100, 200 and 400mg/kg of Catuama were compared with one group using 200?M bilobalide associated with the liquid collagen in the silicone tube and the control group. Animals evaluations were done by a walk test on the first, fifth and tenth week after the surgery. Eletrophysiologic stimulation and quantitative and qualitative hystologic analysis of the sciatic nerve and gastrocnemius muscle were also realized on the tenth week after the surgery. No statistical difference was found in these variables between the five groups (P >0.05). These results suggest that there was no effect of Catuama or bilobalide on peripheral nerve regeneration regeneration

Cultivo in vitro e estaquia de Ginkgo biloba L

Cultivo in vitro e estaquia de Ginkgo biloba l. visando a propagação vegetativa Ginkgo biloba (Ginkgo biloba L.) é uma importante espécie ornamental originária da China. Nas últimas décadas esta planta tem despertado interesse científico no Ocidente, em função da sua capacidade de sintetizar compostos químicos, como ginkgolides e bilobalides, úteis no tratamento de diversas doenças. A dioicia, a dormência das sementes fora do seu habitat original e o baixo número de exemplares disponíveis no Brasil, são alguns dos fatores limitantes que justifica o desenvolvimento de técnicas como a cultura de tecidos e estaquia para a sua multiplicação. Visando estudar o comportamento da Ginkgo biloba durante o cultivo in vitro e estaquia, para futuramente estabelecer protocolos de propagação vegetativa da espécie, foram realizados cinco experimentos no Laboratório de Biotecnologia Vegetal e no setor de estufas de propagação de plantas da Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária da Universidade de Passo Fundo, em Passo Fundo-RS,com os seguintes objetivos: avaliar o comportamento de ápices caulinares e segmentos nodais de ginkgo cultivados em diferentes meios de cultura; avaliar as respostas morfogenéticas e o desenvolvimento in vitro dos explantes nos diversos subcultivos e avaliar o potencial de enraizamento de estacas semilenhosas de ginkgo utilizando diferentes concentrações do regulador de crescimento AIB, (ácido indolbutírico). Não foi possível estabelecer o cultivo in vitro a partir de segmentos nodais devido a elevada contaminações fúngicas. O problema de contaminações foi menos severo quando ápices caulinares foram utilizados, principalmente obtidos de árvore jovem tratadas com fungicida. Os ápices caulinares cultivados em meio MS (Murashige e Skoog, 1962) e WPM (Lloyd e McCown, 1980) sem reguladores de crescimento apresentaram o desenvolvimento de brotações, através do processo de organogênese direto, sendo que o meio WPM induziu maior número de folhas/explante. No entanto, plantas não foram regeneradas devido à ocorrência de necrose ao longo dos subcultivos. Meios suplementados com reguladores de crescimento benzilaminopurina (BAP), kinetina (KIN) combinados com ácido naftalenoacético (ANA) e ácido indolacético (AIA) e ácido giberélico (GA3), suplementados ou não com aditivos nutricionais, induziram a produção de calos em 100% dos ápices caulinares. A freqüência de calos organogênicos, bem como a sobrevivência dos mesmos foi influenciada pela composição do meio de cultura, sendo a combinação de citocinina+auxina+L-prolina+Caseína hidrolizada positiva para a indução deste tipo de calo. A necrose dos ápices caulinares quando cultivados em meio de cultura na ausência de regulador de crescimento e a necrose dos calos obtidos na presença de reguladores, após poucos subcultivos, é um problema a ser superado para o para o estabelecimento de protocolo de cultivo in vitro e micropropagação de Ginkgo biloba. No experimento realizado com estaquia, o enraizamento obtido nas três doses de AIB testadas, foi muito baixo, apenas 2,5%, não viabilizando economicamente a técnica