Effects of the lower energy and pulse stacking in carbon dioxide laser skin treatment: an objective analysis using second harmonic generation

ABSTRACT Purpose To evaluate the effect of fractional carbon dioxide (CO2) laser treatment using lower power associated with pulse stacking within collagen fibers, using second harmonic generation microscopy and computerized image analysis. Methods Twenty male Wistar rats aging eight weeks were used. Each treatment area received a single-pass CO2 fractional laser with different parameters. The 20 animals were divided into two groups and euthanized after 30 and 60 days. Second harmonic generation images were obtained and program ImageJ was utilized to evaluate the collagen organization within all areas. Collagen anisotropy, entropy and optical density were quantified. Results Increased anisotropy over time was observed in all four areas, but only reached statistical significance (p = 0.0305) when the mildest parameters were used (area four). Entropy decreased over time in all areas, but without significance(p = 0.1779) in area four. Density showed an overtime increase only in area four, but no statistical significance was reached (p = 0.6534). Conclusions When combined, the results obtained in this study regarding anisotropy, entropy and density tend to demonstrate that it is possible to achieve collagen remodeling with the use of lower power levels associated with stacked pulses.

Effects of the lower energy and pulse stacking in carbon dioxide laser skin treatment: an objective analysis using second harmonic generation

Purpose: To evaluate the effect of fractional carbon dioxide (CO2 ) laser treatment using lower power associated with pulse stacking within collagen fibers, using second harmonic generation microscopy and computerized image analysis. Methods: Twenty male Wistar rats aging eight weeks were used. Each treatment area received a single-pass CO2 fractional laser with different parameters. The 20 animals were divided into two groups and euthanized after 30 and 60 days. Second harmonic generation images were obtained and program ImageJ was utilized to evaluate the collagen organization within all areas. Collagen anisotropy, entropy and optical density were quantified. Results: Increased anisotropy over time was observed in all four areas, but only reached statistical significance (p = 0.0305) when the mildest parameters were used (area four). Entropy decreased over time in all areas, but without significance (p = 0.1779) in area four. Density showed an overtime increase only in area four, but no statistical significance was reached (p = 0.6534). Conclusion: When combined, the results obtained in this study regarding anisotropy, entropy and density tend to demonstrate that it is possible to achieve collagen remodeling with the use of lower power levels associated with stacked pulses.(AU)

Argon plasma versus electrofulguration in the treatment of anal and perianal condylomata acuminata in patients with acquired immunodeficiency virus

Purpose: To compare the effectiveness of anal and perianal condylomata treatment using argon plasma and electrofulguration. Methods: From January 2013 to April 2014, 37 patients with anal and perianal condylomata, who had been diagnosed through proctological examination, oncotic cytology, polymerase chain reaction (PCR) and histology, underwent treatment with argon plasma and electrofulguration. The perianal and anal regions were divided into two semicircles. Each semicircle was treated using one of the methods by means of simple randomization. Therapeutic sessions were repeated until all clinical signs of infection by HPV were eliminated. The patients were evaluated according to several variables like the genotype of HPV, HIV infection, oncological potential per genotype, oncotic cytology and histology. Results: Among all the variables studied, only immunosuppression due to HIV influenced the results, specifically when the fulguration method was used. There was no significant difference in effectiveness between argon and fulguration based on lesion relapse (p > 0.05). However, among HIV-positive patients, fulguration presented worse results, with a significant difference (p = 0.01). Conclusion: Regarding treatment of anal and perianal condylomata acuminata, comparison between applying fulguration and argon demonstrated that these methods were equivalent, but use of fulguration presented more relapses among HIV-positive patients.(AU)

Lower energy and pulse stacking. A safer alternative for skin tightening using fractional CO2 laser

PURPOSE: To evaluate the effect of different energies and stacking in skin shrinkage.METHODS: Three decreasing settings of a fractional CO2 laser were applied to the abdomen of Twenty five Wistar rats divided into three groups. Group I (n=5) was histologically evaluated for microthermal zones dimensions. Groups II and III (n=10 each) were macroscopic evaluated with freeware ImageJ for area contraction immediately and after 30 and 60 days.RESULTS: No statistical significance was found within microthermal zone histological dimensions (Group I) in all settings studied. (Ablation depth: 76.90 to 97.18µm; Coagulation depth: 186.01 to 219.84 µm). In Group II, macroscopic evaluation showed that all settings cause significant immediate skin contraction. The highest setting cause significant more intense tightening effect initially, contracting skin area from 258.65 to 179.09 mm2. The same pattern was observed in Group III. At 30 and 60 days, the lowest setting significantly sustained contraction.CONCLUSION: Lower fractional CO2 laser energies associated to pulse stacking could cause consistent and long lasting tissue contraction in rats.(AU)

Efeito do laser terapêutico de baixa potência no gânglio da raiz dorsal L5 de camundongos submetidos ao esmagamento do nervo ciático / Effect of low-power laser therapy in L5 dorsal root ganglion of mice submitted to sciatic nerve crush injury

Avaliou-se o efeito o efeito da terapia laser de baixa potência (TLBP) na regeneração de neurônios periféricos de animais adultos. O nervo ciático direito de doze camundongos machos adultos foi esmagado com pinça hemostática durante 30 segundos. Os animais foram divididos aleatória e equitativamente em quatro grupos: HeNe, AsGa, NR e NOR. O grupo HeNe recebeu irradiação laser HeNe (3J/cm²). Os animais do grupo AsGa receberam radiação laser AsGa (30 mJ) e os animais remanescentes (NR) não foram radiados. A radiação transcutânea sobre o gânglio da raiz dorsal L5 foi realizada uma vez ao dia, por 21 dias. Outros quatro animais não foram operados e serviram como controle de normalidade (NOR). Decorridos 21 dias, fragmentos do nervo ciático foram coletados para avaliação morfológica e contagem do número de axônios. O gânglio da raiz dorsal L5 foi removido para a avaliação morfológica e contagem dos neurônios sensitivos sobreviventes à lesão. Os grupos que sofreram esmagamento do nervo sofreram redução no número de axônios quando comparados ao grupo não operado (NOR). O gânglio da raiz dorsal L5 também foi removido e seccionado em série para a contagem e mensuração dos neurônios sensitivos. Não se observou diferença entre os grupos quando considerada a área do pericário e o número de neurônios. Os resultados indicam que a TLBP não estimulou a regeneração de nervos em camundongos. A TLBP não teve ação neuroprotetora sobre os neurônios após a lesão dos seus axônios. (AU)

The purpose of this study was to assess the effect of low-power laser therapy (LPLT) on the regenerating peripheral neurons in adult animals. The right sciatic nerve of twelve mice adults was experimentally crushed with a Halstead forceps during 30 seconds. Animals were randomly distributed into three: HeNe, GaAs and NR. HeNe group received radiation laser HeNe (3 J/cm2). The animals of the GaAs group received GaAs laser irradiation (30 mJ) and the remnant animals (NR) were not radiated. The radiation was daily transcutaneously applied to L5 dorsal root ganglion, for 21 days. Other four non-operated animals served as normal controls (NOR). After 21 days, the sciatic nerve was collected and processed for histological assessment and axonal counting. The L5 dorsal root ganglion (DRG) was also removed for morphologic and morphometric evaluation of sensory surviving neurons. No difference was found in the number and size of DRG neurons among the experimental groups. The results indicate that LPLT did not improve regeneration of peripheral nerves in mice. LPLT had no neuroprotective effect on neurons after axonal lesion. (AU)

Comparative study in swines' vocal cords healing after excision of fragment with CO2 laser with mitomycin and 5-fluorouracil postoperative topical application / Estudo comparado da cicatrização da prega vocal de suínos após exérese de fragmento com laser de CO2 e aplicação tópica pós-operatória de mitomicina e 5-fluorouracil

PURPOSE: To evaluate the deposition of collagen fibers at pig's vocal folds after topical use of mitomycin or 5-fluorouracil, when partial exeresis of mucosa layer had been promoted by CO2 laser. METHODS: There were used 18 Larger white pigs which were anesthetized and submitted to mucosa fragment's exeresis, bilaterally, at its free border. The animals were divided into 3 groups, each one with 6 animals: control group, without topical drug application; mitomycin group; and 5-fluorouracil group. After 30 days, the animals were subjected to euthanasia, and samples of the vocal folds were collected and stained by picrosirius red technique with polarization for quantification of total collagen deposition. RESULTS: In control group, the mean rate of right vocal fold's collagen deposition at submucosa consisted in a 3428.66 micrometers area. There was found an area whose size had, in average, 2196.36 micrometers, in mitomycin group, and 2269.19 micrometers, in 5-fluorouracil group. CONCLUSION: Mitomycin and 5-fluorouracil had promoted beneficial change in vocal fold's cicatrization with less collagen deposition, but there was no significant statistically difference when they were compared between themselves.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a deposição das fibras de colágeno total em pregas vocais suínas após o uso tópico de mitomicina ou 5-fluorouracil nas exéreses parciais de mucosa com laser de CO2. MÉTODOS: Foram utilizados 18 porcos da raça Larger white anestesiados e submetidos à exérese de fragmento de mucosa de borda livre da prega vocal direita e prega vocal esquerda. Os animais foram divididos em 3 grupos com 6 animais cada: grupo controle, sem aplicação de medicação tópica; grupo mitomicina, com uso tópico dessa substância; grupo 5-fluorouracil, uso tópico. Após 30 dias do experimento os animais foram submetidos à eutanásia, coletadas amostras das pregas vocais e coradas pela técnica do picrosirius red com polarização para a quantificação computadorizada da deposição do colágeno total. RESULTADOS: No grupo controle, a média da área do colágeno depositado na submucosa da prega vocal direita foi de 3428,66 micrômetros. No grupo mitomicina a média foi de 2196,36 micrômetros. No grupo 5-fluorouracil, a média foi de 2269,19 micrômetros. CONCLUSÃO: A mitomicina e o 5-fluorouracil promoveram mudança benéfica na cicatrização da prega vocal, com menor deposição de colágeno, porém, quando comparados entre si, eles não apresentaram diferença estatisticamente significante.(AU)

Avaliação Morfológica do Efeito do Laser de Baixa Potência Hene em Feridas Cutâneas de Coelhos / Morphological evaluation of the effect of low power He-Ne laser on cutaneous wounds in rabbits / Evaluación morfológica del efecto del láser baja potencia hene en heridas cutáneas de conejos

Foram utilizados nove coelhos hígidos, machos, adultos, com o objetivo de estudar os aspectos morfológicos da cicatrização de feridas cutâneas cirurgicamente produzidas e tratadas com a radiação laser de baixa potência HeNe. Foram induzidas três lesões limpas, na região torácica dorsal, mediante a utilização de “punch” dermatológico de 1 cm, com distância de, pelo menos, 10 cm entre cada lesão. As lesões foram diariamente radiadas com 3 ou 6 J/cm2 e a lesão restante não foi radiada. As feridas foram diariamente mensuradas e avaliadas quanto ao aspecto macroscópico. Os coelhos foram separados em 3 grupos, para biópsia, no 7o, 14o e 21o dias de pós-operatório. Não se observou diferença no padrão cicatricial em relação aos tratamentos nos diferentes dias de observação, quanto ao tamanho e aspecto da lesão, formação de fibras colágenas, neoformação de vasos e reepitelização completa da epiderme. Tais resultados podem ter ocorrido em decorrência do efeito sistêmico da terapia laser de baixa potência(AU)

Nine healthy, male, adult rabbits were used to study the morphological aspects of surgicaly induced cutaneous wounds treated with low power He-Ne laser therapy. Three clean wounds were bilaterally induced in the dorsal cranial thoracic region by using a 1-cm dermatological punch, with distance of 10 cm among each injury. The wounds were daily radiated with either 3 or 6 J/cm2. The remaining injury was not radiated. The wounds were daily measured and evaluated for their macroscopic aspect. Rabbits were separated into 3 groups for biopsy at the 7th, 14th, and 21st days after surgery. No statistical difference in cicatricial pattern was observed with respect to the treatments on different observation times in relation to the size and evolution of the wound, collagen fiber formation, vessel ingrowth and total reepithelialization of the epidermis. Such results can be explained due to the systemic effect of the low power laser therapy(AU)

Nueve conejos sanos, machos y adultos, fueron utilizados, con el objetivo de estudiar los aspectos morfológicos de la cicatrización de heridas cutáneas quirúrgicamente producidas y tratadas con radiación láser de baja potencia HeNe. Tres lesiones limpias fueron inducidas en la región dorsal del tórax, por medio del uso de “punch” dermatológico de 1 centímetro, con distancia de por lo menos 10 centímetros entre cada lesión. Las lesiones fueron diariamente radiadas con 3 o 6 J/cm2 y la lesión restante no fue radiada. Las heridas fueron mensuradas y evaluadas cuanto al aspecto macroscópico. Los conejos fueron separados en 3 grupos para biopsia, en el 7o, 14o y 21o días de postoperatorio. No se observó diferencia en el patrón cicatricial en relación a los tratamientos en los diferentes días de observación, cuánto al tamaño y aspecto de la lesión, formación de las fibras colágenas, nuevas formaciones vasculares y reepithelization completa de la epidermis. Tales resultados pueden haber ocurrido en consecuencia del efecto sistémico de la terapia láser de baja potencia(AU)

Efeito do laser de baixa potência sobre a viabilidade espermática e a produção in vitro de embriões bovinos / Effect of low potency laser on sperm viability and in vitro production of bovine embryos

O sucesso da fecundação e da sustentação do desenvolvimento embrionário subseqüente é dependente de atributos espermáticos relacionados à qualidade seminal. A produção in vitro de embriões em bovinos é uma ferramenta fundamental para a aceleração do ganho genético do rebanho, porém o uso comercial depende diretamente da melhoria do sistema de produções in vitrode embriões a um baixo custo. Técnicas que proporcionem melhoria da qualidade seminal possibilitando um incremento na produção in vitro de embriões e ainda a um baixo custo possuem apelo econômico. O laser de baixa potência emite ondas eletromagnéticas com efeitos biológicos. Este efeito é dependente dos parâmetros de irradiação e do tipo celular alvo. Trabalhos avaliando o laser de baixa potência em amostras seminais sugerem que seja utilizado para melhorar os atributos espermáticos e, conseqüentemente, a produção in vitro de embriões. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do laser de baixa potência sobre a viabilidade espermática e averiguar o efeito desta estimulação na produção in vitro de embriões bovinos. Para isso, amostras comerciais de sêmen criopreservado foram descongeladas e submetidas à irradiação com laser He-NE. No experimento 1 foram testadas as potências de 0; 5; 7,5 e 10mW, por 5 ou 10 minutos de tratamento. As amostras de sêmen foram avaliadas imediatamente após a irradiação e após 30 minutos de incubação. Foram verificadas possíveis interações duplas (Potência*Duração do Tratamento, Potência*Tempo e Duração do Tratamento*Tempo) e tripla (Potência*Duração do Tratamento*Tempo). No experimento 2 foi avaliado o efeito da melhor combinação potência X duração dos tratamentos utilizados no Experimento 1, para irradiar o sêmen utilizado para a produção in vitro de embriões. O laser de baixa potência apresentou efeito sobre diversos atributos relacionados à viabilidade espermática. Este efeito foi dependente da potência e da duração do tratamento. Nas condições experimentais, a potência de 5mW com duração de 10 minutos de aplicação sugere efeitos positivos no aumento na viabilidade espermática. No entanto, o tratamento de espermatozóides nesta potência e duração do tratamento, não apresenta incremento nas taxas de produção nem na qualidade embrionária

Success of fertilization and the maintenance of subsequent embryo development rely on sperm attributes related to seminal quality. The in vitro production of bovine embryos is an essential tool for genetic gain in the herd. However, its commercial use directly depends on improvement of the production system at a low cost. Inexpensive techniques which provide an increase of seminal quality, allowing the increment of in vitro production of embryos are of great interest to cattle breeding. Low-power laser emits electromagnetic waves with biological effects. These effects are dependent of irradiation parameters and target cell type. Studies with seminal samples irradiated by low potency laser suggest its use to improve several sperm features and, therefore, in vitro production of embryos. This study aimed to evaluate the effect of low potency laser on sperm viability and fertilization ability of irradiated sperm. Briefly, in Experiment 1, samples of frozen/thawed commercial semen were subjected to He-NE laser irradiation. Laser potencies of 0, 5, 7.5 or 10mW were tested for 5 or 10 min of treatment. Samples were evaluated immediately and 30 min after irradiation. Double (Potency*Treatment length, Potency*Time and Treatment length*Time) and triple interactions (Potency*Treatment length*Time) were assessed. Afterwards, in Experiment 2, the effect of the best combination of potency and exposure length on in vitro production of embryos was verified. Low potency laser affected several semen attributes related to sperm viability. This effect was dependent on laser potency and the length of treatment. In the experimental conditions tested in this study, 5mW potency combined to 10 min of exposure had appeared to have positive effect of increasing sperm viability. However, 5mW potency laser for 10 min sperm irradiation did not improve in vitro embryo production rates and bovine embryo quality

Analysis of the influence of low-power HeNe laser on the healing of skin wounds in diabetic and non-diabetic rats / Análise da influência do laser de baixa potência (HeNe) na cicatrização de feridas cutâneas em ratos diabéticos e não diabéticos

OBJETIVO: Estudar, comparativamente, através de análises morfométricas das fibras colágenas, a influência da irradiação com laser HeNe no percentual de colágeno de lesões cutâneas induzidas em ratos diabéticos aloxânico e não diabéticos. MÉTODOS: Foram utilizados 48 ratos Wistar, machos sendo estes divididos em grupos: Grupo 1 diabético tratado com laser, Grupo 2 diabético não-tratado, Grupo 3 não-diabético tratado e Grupo 4 não-diabéticos não-tratados. Nos grupos 1 e 2 diabetes foi induzido por injeção intravenosa (veia dorsal do pênis de Aloxana (2, 4, 5, 6 - Tetraoxypyrimidina; 5û6 Dioxyuracila) SIGMA, 0.1ml de solução a cada 100 g. de peso corporal. Todos os animais foram submetidos a uma lesão no dorso e os Grupos 1 e 3, foram tratados com laser HeNe com dosagem de 4 J/cm2 por 36 s. Um animal de cada grupo sofreu eutanásia no 3º, 7º e 14 dias após a lesão e retiradas as amostras que foram emblocadas em parafina, coradas com H.E., Tricrômico de Masson e a analisadas morfométricamente pelo software IMAGELAB . Os dados resultantes foram tratados estatisticamente pela análise de variância (ANOVA), e pelos testes t e Kruskal-Wallis fixou-se em 0,05 ou 5% (a £ 0,05) o nível de rejeição da hipótese de nulidade. RESULTADOS: Os resultados obtidos das amostras retiradas aos 3º, 7º e 14 dias após a lesão, demonstram que o grupo tratado com laser apresentou média de fibras colágenas maiore estatisticamente significante(p<0.05), em relação ao grupo não-tratado, tanto para diabéticos (p= 0.0104), como não-diabéticos (p= 0.039). CONCLUSÃO: O laser de baixa potência (632,8 nm) se mostrou capaz de influenciar o percentual de colágeno em feridas cutâneas, aumentando a média de fibras colágenas, tanto para o grupo diabético como no não-diabético.(AU)

PURPOSE: To study the influence of HeNe laser irradiation on the collagen percentage in surgically-induced skin wounds in rats with and without alloxan-induced diabetes, by morphometric analysis of collagen fibers. METHODS: 48 male Wistar rats were used, divided into groups: laser-treated diabetic (group 1); untreated diabetic (group 2); treated non-diabetic (group 3); and untreated non-diabetic (group 4). For groups 1 and 2, diabetes was induced by intravenous injection of alloxan (2,4,5,6-tetraoxypyrimidine; 5,6-dioxyuracil; Sigma), into the dorsal vein of the penis, at a rate of 0.1 ml of solution per 100 g of body weight. A wound was made on the back of all the animals. Groups 1 and 3 were treated with HeNe laser (4 J/cm2) for 60 s. One animal from each group was sacrificed on the 3rd, 7th and 14th days after wounding. Samples were taken, embedded in paraffin, stained with hematoxylin-eosin and Masson's trichrome, and morphometrically analyzed using the Imagelab software. The percentages of collagen fibers were determined from the samples from the euthanasia animals. The data were treated statistically using analysis of variance (ANOVA) and the Student t and Kruskal-Wallis tests. The significance level was set at 0.05 or 5%. RESULTS: The results obtained from the samples taken on the third, seventh and fourteenth days after wounding demonstrated that the laser-treated group presented a statistically significant (p<0.05) greater mean quantity of collagen fibers than in the non-treated group, both for diabetic rats (p = 0.0104) and for non-diabetic rats (p = 0.039). CONCLUSION: The low-power laser (632.8 nm) was shown to be capable of influencing the collagen percentage in skin wounds by increasing the mean quantity of collagen fibers, both for the diabetic and for the non-diabetic group.(AU)

Análises macro e microscópica de enxertos cutâneos por semeadura após laserterapia de baixa intensidade

Os enxertos de pele são uma alternativa para o fechamento de lesões extensas onde a reaproximação dos bordos da ferida não é possível. A incorporação do enxerto no leito receptor depende de conexões arteriais e venosas dessas duas partes. Baseando-se em trabalhos em que a laserterapia de baixa intensidade acelera o processo de cicatrização e favorece angiogênese e, com intenção de se obter melhor resultado em enxertos cutâneos por semeadura, optou-se pela aplicação do laser HeNe. Dessa forma 20 ratos foram submetidos a esta técnica de enxertia e separados em dois grupos iguais, um tratado com laser e outro não (controle). Os resultados mostraram maior velocidade de cicatrização, menor tempo de reação inflamatória, maior número de vasos sanguíneos, epitelização e queratinização precoces nos animais tratados com laser em relação aos não tratados, sugerindo então que a laserterapia de baixa intensidade é efetiva para o uso em enxertos por semeadura

Skin grafts are the alternative to close big lesions, when the borders approach are difficult or impossible. The graft incorporation on receptor site depends of blood vessels conection. Based on literature that low-level laser therapy acceletares the cicatricial process and favors the angiogenesis, HeNe laser was applied to accelerate the cicatricial process on island skin grafts. For this, 20 rats were submitted to this graft technique and divided in two groups with the same number of animals, one called laser and other called control. The results show faster cicatrization, short inflammatory period, larger number of blood vessels and precocious epitelization and queratinization on he laser group. These facts suggest that low-level laser therapy is effective and helps island skin grafts cicatrization

Construction and evaluation of a non-laser optical system for photodynamic process excitation

Purpose: To show that a non-laser light source can be constructed, using a 500 W Tungsten lamp and optical filters, and that this light source produces photodynamic effect via protoporphyrin IX (PpIX) similar to the effect produced by HeNe laser light. Methods: The broad band spectrum from a Tungsten lamp was filtered. Infrared and blue part of the spectrum was discarded by absorption process and the fraction of the spectrum, centered at the red portion, was filtered by an interference filter. Photodynamic effect was studied by the activity on endogenous PpIX of Harderian glands of Wistar rats. Twenty rats were used for the experiment. Each animal had its two Harderian gland surgically exposed, so one of them was treated with the system while the other was kept as control. After a 30 minutes period of treatment, the animals were sacrificed and their glands were removed for histological analysis. This analysis was compared to earlier published results obtained with HeNe laser light. Results: The resultant light source emission was centered around (636 ± 6.5) nm and gives up to 11.3 mW/cm² power density. It produces photodynamic effect in Harderian gland, observed either by fluorescence spectroscopy or by histological microscopy. Conclusion: There is no noticeable difference in Photodynamic effect results if activated by HeNe laser or by the proposed non-laser light source emitting at the red portion of the spectrum.

Objetivo: Descrever a construção de uma fonte de luz não-laser, a partir de uma lâmpada de Tungstênio e filtros óticos adequados e demonstrar que sua eficiência em estudos fotodinâmicos, mediados por protoporfirina IX, é semelhante a do laser de Hélio Neônio. Métodos: As regiões Infravermelha e Azul do espectro de emissão óptica de uma lâmpada de Tungstênio foram convenientemente descartadas por processos de absorção, enquanto que a fração centrada na região do vermelho foi removida com o uso de um filtro de interferência. O efeito fotodinâmico foi estudado, em glândula Harderiana de ratos Wistar em razão da produção endógena de protoporfirina IX (PpIX) por estas glândulas. Foram utilizados 20 ratos. Cada animal teve as duas glândulas expostas cirurgicamente, sendo uma delas tratada com a fonte não-laser e a outra mantida como controle. Após tratamento por 30 minutos os animais foram sacrificados e suas glândulas removidas para estudo histológico. Os resultados foram comparados a estudos realizados com laser de Hélio Neônio, já publicados. Resultados: A luz produzida pelo equipamento está centrada em torno de (636 ± 6,5) nm, fornecendo uma densidade de potência de 11,3 mW/cm². Os efeitos fotodinâmicos produzidos na glândula Harderiana, podem ser observados tanto por espectroscopia de fluorescência como por microscopia ótica. Conclusão: Não foram observadas diferenças significativas nos resultados do efeito fotodinâmico obtidos com a fonte de luz não-laser proposta, em comparação aos resultados conhecidos com o uso do laser de Hélio Neônio.

Biospeckle Laser na Análise de Alguns Parâmetros Cinéticos do Sêmen Equino

Os parâmetros de motilidade e vigor de espermatozóides são utilizados na avaliação de um ejaculado, entretanto, esta técnica apresenta alta subjetividade. A utilização da luz laser na avaliação da qualidade do sêmen mostrou-se uma técnica eficiente para avaliação de ejaculados in natura de ovinos (Nasciemento, 2005) e sêmen congelado de bovinos (Carvalho et al., 2006). O objetivo deste trabalho foi avaliar o sêmen eqüino pela técnica do biospeckle, utilizando o momento de inércia (MI) como forma de quantificação na variação temporal e correlacioná-lo com parâmetros físicos e morfológicos dos espermatozóides. Foram coletados ejaculados de 20 garanhões com idade entre 3 e 15 anos. Após avaliação das características físicas seminais, diluiram-se as amostras em meio Kenney modificado retiraram-se alíquotas para avaliação morfológica e 10ml de sêmen diluído foi iluminado pela luza laser, após 30 segundos de estabilização. As iluminações das amostras foram realizadas com o laser He-Ne (vermelho 632 nm - 10mW), que era captado por uma câmera CCD ligada a um computador. As imagens foram tranformadas em padrões STS, a partir do qual calculou-se o MI. A integridade funcional da membrana plasmática foi avaliada utilizando-se o teste hiposmótico (HO) descrito por Melo & Henry (1999). Observou-se correlação significativa e positiva entre o MI e o vigor (p=0,05;r=0,44), mas não com a motilidade total (p=0,09). Entre MI e HO (r=18) e MI e porcentagem de espermatozóides morfologicamente normais (r=0,43) as correlações não forma significativas (p>0,05). A caracterização da atividade biológica feita análise do biospeckle é complexa. Para a compreensão do fenômeno faz-se necessário o conhecimento da interação da luz com o material iluminado, pois o MI é o resultado desta interação e de vários fatores, tais como dimensões e velocidade das células, rotação da cabeça do espermatozóide e padrão de deslocamento, concentração espermática, composição do diluidor e configuração experimental do laser, que podem interferir no processo de avaliação. Apesar de term sido observadas correlações altas, em sêmen de ruminantes, entre MI e motilidade individual, na espécie eqüina estas correlações não foram significativas. O espermatozóide eqüino apresenta dimensões inferiores em relação ao ovino e bovino, fato que pode explicar esta diferença. Entretanto a luz laser pode detectar a intensidade de movimento dos espermatozóides, e o MI pode ser utilizado na avaliação do vigor de sêmen eqüino. Configurações do equipamento devem ser testadas para obtenção de um padrão de análise de sêmen nesta espécie