Ocurrence enzootic hematuria in buffaloes in Brazil: epidemiological, clinical, and pathological aspects / Ocorrência de hematúria enzoótica em búfalos no Brasil: aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos

It is reported the occurrence of enzootic hematuria (EH) in buffaloes in Brazil after performing an epidemiological survey and clinicopathological analises. To date, EH caused by ingestion of Pteridium esculentum subsp. arachnoideum, a radiomimetic plant popularly known as "bracken fern", has not been described in this species in Brazil. Bovine EH is responsible for high economic losses in Brazil's Southeast Region not only because of the deaths it causes, but also owing to its negative effect on productivity. In São José do Barreiro County, São Paulo, some farmers in areas with a high incidence of bovine EH have been replacing cattle with buffaloes, based on the premise that the latter would be more resistant to poisoning by ingestion of Pteridium spp. However, even though initial observations indicated that buffaloes are indeed less sensitive than cattle to the toxic principle of Pteridium spp., cases of hematuria in this species have been reported. According to preliminary date, EH only occurs in buffaloes over six years of age. Macroscopic examination revealed a thickened urinary vesicle mucosa, along with multiple foci of ulcerated, exophytic, verrucous, and pedunculated lesions. In one of the buffaloes studied, the bladder wall was ruptured and exhibited marked secondary inflammation. Histologically, neoplastic and non-neoplastic changes similar to those described in cattle poisoned by Pteridium spp. were observed. The neoplasms found included papilloma, carcinoma in situ, urothelial carcinoma (low and high grade), inverted, microcystic, and trabecular variants, urothelial carcinoma with divergent differentiation (squamous and glandular), squamous cell carcinoma, lymphangioma, hemangioma, and hemangiosarcoma. There was also coexistence of epithelial and mesenchymal neoplasms. Bovine papillomavirus particles were not detected by polymerase chain reaction in the bladder samples analyzed.

Descreve-se, através de levantamento epidemiológico e avaliação clínico-patológica, a ocorrência de hematúria enzoótica (HE) em búfalos no Brasil. Essa condição, causada pela ingestão da planta radiomimética Pteridium esculentum subsp. arachnoideum, conhecida popularmente como "samambaia" ou "samambaia do campo", até então não havia sido descrita nessa espécie no Brasil. Na Região Sudeste, a HE bovina é responsável por elevadas perdas econômicas, devidas não apenas aos óbitos, mas também em função da queda de produtividade. No município de São José do Barreiro/SP, alguns produtores de áreas com alta incidência de HE bovina, vêm substituindo os bovinos por búfalos, com base na premissa de que estes seriam mais resistentes à intoxicação. Embora, de acordo com observações iniciais, os búfalos realmente sejam menos sensíveis que os bovinos ao princípio tóxico de Pteridium spp., ainda assim, tem-se verificado a ocorrência de casos de hematúria nessa espécie. De acordo com o levantamento inicial, a HE só ocorre em búfalos com idade a partir de seis anos. Ao exame macroscópico, verificou-se a mucosa da bexiga espessa, com múltiplos focos de lesões ulceradas, exofíticas, papiliformes, verrucosas, pedunculadas. Histologicamente, foram observadas alterações neoplásicas e não neoplásicas semelhantes às descritas nos bovinos com HE. Entre as neoplasias foram encontrados papiloma, carcinoma in situ, carcinoma urotelial (baixo e alto grau), variantes invertida, microcística e trabecular, carcinoma urotelial com diferenciação divergente (escamosa e glandular), carcinoma de células escamosas, linfangioma, hemangioma e hemangiossarcoma. Ocorreu também coexistência entre neoplasias epiteliais e mesenquimais. Não foram detectadas partículas de papilomavírus bovino pelo teste PCR nas amostras de bexiga analisadas.

Ocurrence enzootic hematuria in buffaloes in Brazil: epidemiological, clinical, and pathological aspects

ABSTRACT: It is reported the occurrence of enzootic hematuria (EH) in buffaloes in Brazil after performing an epidemiological survey and clinicopathological analises. To date, EH caused by ingestion of Pteridium esculentum subsp. arachnoideum, a radiomimetic plant popularly known as bracken fern, has not been described in this species in Brazil. Bovine EH is responsible for high economic losses in Brazils Southeast Region not only because of the deaths it causes, but also owing to its negative effect on productivity. In São José do Barreiro County, São Paulo, some farmers in areas with a high incidence of bovine EH have been replacing cattle with buffaloes, based on the premise that the latter would be more resistant to poisoning by ingestion of Pteridium spp. However, even though initial observations indicated that buffaloes are indeed less sensitive than cattle to the toxic principle of Pteridium spp., cases of hematuria in this species have been reported. According to preliminary date, EH only occurs in buffaloes over six years of age. Macroscopic examination revealed a thickened urinary vesicle mucosa, along with multiple foci of ulcerated, exophytic, verrucous, and pedunculated lesions. In one of the buffaloes studied, the bladder wall was ruptured and exhibited marked secondary inflammation. Histologically, neoplastic and non-neoplastic changes similar to those described in cattle poisoned by Pteridium spp. were observed. The neoplasms found included papilloma, carcinoma in situ, urothelial carcinoma (low and high grade), inverted, microcystic, and trabecular variants, urothelial carcinoma with divergent differentiation (squamous and glandular), squamous cell carcinoma, lymphangioma, hemangioma, and hemangiosarcoma. There was also coexistence of epithelial and mesenchymal neoplasms. Bovine papillomavirus particles were not detected by polymerase chain reaction in the bladder samples analyzed.

RESUMO: Descreve-se, através de levantamento epidemiológico e avaliação clínico-patológica, a ocorrência de hematúria enzoótica (HE) em búfalos no Brasil. Essa condição, causada pela ingestão da planta radiomimética Pteridium esculentum subsp. arachnoideum, conhecida popularmente como samambaia ou samambaia do campo, até então não havia sido descrita nessa espécie no Brasil. Na Região Sudeste, a HE bovina é responsável por elevadas perdas econômicas, devidas não apenas aos óbitos, mas também em função da queda de produtividade. No município de São José do Barreiro/SP, alguns produtores de áreas com alta incidência de HE bovina, vêm substituindo os bovinos por búfalos, com base na premissa de que estes seriam mais resistentes à intoxicação. Embora, de acordo com observações iniciais, os búfalos realmente sejam menos sensíveis que os bovinos ao princípio tóxico de Pteridium spp., ainda assim, tem-se verificado a ocorrência de casos de hematúria nessa espécie. De acordo com o levantamento inicial, a HE só ocorre em búfalos com idade a partir de seis anos. Ao exame macroscópico, verificou-se a mucosa da bexiga espessa, com múltiplos focos de lesões ulceradas, exofíticas, papiliformes, verrucosas, pedunculadas. Histologicamente, foram observadas alterações neoplásicas e não neoplásicas semelhantes às descritas nos bovinos com HE. Entre as neoplasias foram encontrados papiloma, carcinoma in situ, carcinoma urotelial (baixo e alto grau), variantes invertida, microcística e trabecular, carcinoma urotelial com diferenciação divergente (escamosa e glandular), carcinoma de células escamosas, linfangioma, hemangioma e hemangiossarcoma. Ocorreu também coexistência entre neoplasias epiteliais e mesenquimais. Não foram detectadas partículas de papilomavírus bovino pelo teste PCR nas amostras de bexiga analisadas.

Bovine enzootic hematuria in the state of tocantins and use of ultrasonography as a diagnostic method / Hematúria enzoótica bovina no estado do Tocantins e o uso da ultrassonografia como método de diagnóstico

Bovine enzootic hematuria (BEH) is a chronic disease caused by ingestion of Pteridium esculentum subsp. arachnoideum (Kaulf.) Thomson. This disease has great importance because it affects the animal wellbeing, causes economic losses, and hinders public health due to the toxic principle that is present in the milk of cows that ingest this plant. Early diagnosis assists in the decision making for disposal and replacement of animals in endemic regions. Despite ultrasonography is a useful tool for diagnosis of this disease, there is a lack of studies evaluating BEH in the state of Tocantins, Brazil, using ultrasound and epidemiological data and clinical signs; however, the histopathological examination is the method that provides the definitive diagnosis. The objective of this study was to describe the occurrence of BEH in the state of Tocantins and evaluate the efficiency of bladder ultrasound examination for diagnosis and prognosis of BEH. Ten animals that presented intermittent hematuria and hypo-colored mucous membranes were subjected to clinical and complementary exams. The urine physical analysis presented light red color, high turbidity, and positive sedimentation. The ultrasonography showed a thick, irregular mass in the bladder wall, containing an echogenic liquid of high cellularity and pedunculated papillary lesions. Macro and microscopic analyses of the animals' bladders showed areas with vascular proliferation in the sub-mucous membranes associated with mononuclear inflammatory cell infiltrate and proliferation of the epithelium. Ultrasonography is an excellent option and, combined with clinical and laboratory exams of blood and urine, enables the diagnosis and prognosis of BEH. (AU)

Hematúria enzoótica bovina (HEB) doença crônica causada pela ingestão de Pteridium esculentum subsp. arach-noideum (Kaulf.) Thomson. Essa intoxicação tem grande importância no bem-estar animal, causando prejuizos econômicos e na saúde pública, uma vez que o princípio tóxico está presente no leite de vacas que ingerem a planta. Em regiões endêmicas o diagnóstico precoce auxilia na tomada de decisões, como o descarte e a substituição dos animais. Apesar da ultrossonografia ser uma ferramenta diagnóstica muito útil, há uma carência de estudos de HEB no estado do Tocantins no que diz respeito aos dados ultrassonográficos, epidemiológicos e sinais clínicos; entretanto, o exame histopatológico é o diagnóstico definitivo. O objetivo deste estudo foi descrever a ocorrência da doença neste estado e avaliar a eficácia do exame ultrassonográfico da bexiga urinária para o diagnóstico e prognóstico de HEB. Foram 10 animais submetidos a exames clínicos e complementares, ao exame apresentavam hematúria intermitente e mucosas hipocoradas. A análise física da urina apresentou-se vermelho vivo, turva e com sedimentação positiva. A ultrassonografia revelou massa na parede da bexiga urinária, espessa e irregular, contendo líquido ecogênico de alta celularidade e com lesões papilares pedunculadas. A análise macro e microscópica da bexiga do ani-mal mostrou áreas com proliferação vascular na submucosa, associadas a infiltrado inflamatório mononuclear e proliferação do epitélio. Pode-se concluir que a ultrassonografia é uma excelente opção e, associada aos exames clínicos e laboratoriais de sangue e urina, possibilitou o diagnóstico e o prognóstico da doença.(AU)

Determination of ptaquiloside in cow's milk by HPLC-UV / Determinação de ptaquilosídeo no leite de vacas por CLAE-UV

Ferns of the genus Pteridium are known to be responsible for cases of poisoning in cattle. The commonly found species of Pteridium in Brazil are P. arachnoideum and P. caudatum. The toxic principle of these ferns is ptaquiloside, a norsesquiterpene glucoside, which is a known carcinogen. Ptaquiloside can be secreted in the milk of cows grazing on bracken ferns, thereby posing a potential health risk for the milk consumers. The objective of the present study was to develop an analytical methodology using high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet (UV) detection to determine the concentrations of ptaquiloside in cow´s milk. HPLC-UV method, based on the conversion of ptaquiloside into pterosin B and its subsequent extraction using dichloromethane, was successfully developed for estimating concentrations of ptaquiloside in milk samples. However, the presence of ptaquiloside was not detected in milk samples obtained from cows with a history of bovine enzootic hematuria resulting from grazing on P. arachnoideum infested pastures in Brazil.(AU)

Samambaias do gênero Pteridium são reconhecidas como responsáveis por casos de intoxicação em bovinos. As espécies de Pteridium comumente encontradas no Brasil são P. arachnoideum e P. caudatum. O princípio tóxico dessas plantas é o ptaquilosídeo, um glicosídeos norsesquiterpênico, que é um conhecido carcinógeno. O ptaquilosídeo pode ser excretado no leite de vacas que consomem a samambaia, o que representa um potencial risco para quem o consuma. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma metodologia analítica utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta (UV) para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite bovino. Foi desenvolvida com sucesso uma metodologia analítica utilizando CLAE-UV para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite, baseada na conversão deste composto em pterosina B e posterior extração utilizando diclorometano. Entretanto, não foi detectada a presença de ptaquilosídeo nas amostras de leite de propriedades com histórico de hematúria enzoótica bovina e que possuíam P. arachnoideum na pastagem.(AU)

Determination of ptaquiloside in cow's milk by HPLC-UV / Determinação de ptaquilosídeo no leite de vacas por CLAE-UV

Ferns of the genus Pteridium are known to be responsible for cases of poisoning in cattle. The commonly found species of Pteridium in Brazil are P. arachnoideum and P. caudatum. The toxic principle of these ferns is ptaquiloside, a norsesquiterpene glucoside, which is a known carcinogen. Ptaquiloside can be secreted in the milk of cows grazing on bracken ferns, thereby posing a potential health risk for the milk consumers. The objective of the present study was to develop an analytical methodology using high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet (UV) detection to determine the concentrations of ptaquiloside in cow´s milk. HPLC-UV method, based on the conversion of ptaquiloside into pterosin B and its subsequent extraction using dichloromethane, was successfully developed for estimating concentrations of ptaquiloside in milk samples. However, the presence of ptaquiloside was not detected in milk samples obtained from cows with a history of bovine enzootic hematuria resulting from grazing on P. arachnoideum infested pastures in Brazil.

Samambaias do gênero Pteridium são reconhecidas como responsáveis por casos de intoxicação em bovinos. As espécies de Pteridium comumente encontradas no Brasil são P. arachnoideum e P. caudatum. O princípio tóxico dessas plantas é o ptaquilosídeo, um glicosídeos norsesquiterpênico, que é um conhecido carcinógeno. O ptaquilosídeo pode ser excretado no leite de vacas que consomem a samambaia, o que representa um potencial risco para quem o consuma. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma metodologia analítica utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta (UV) para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite bovino. Foi desenvolvida com sucesso uma metodologia analítica utilizando CLAE-UV para a determinação das concentrações do ptaquilosídeo no leite, baseada na conversão deste composto em pterosina B e posterior extração utilizando diclorometano. Entretanto, não foi detectada a presença de ptaquilosídeo nas amostras de leite de propriedades com histórico de hematúria enzoótica bovina e que possuíam P. arachnoideum na pastagem.

Resultados laboratoriais comparativos em fêmeas nelore de diferentes categorias provenientes de fazendas com e sem a presença de Pteridium arachnoideum nas pastagens / Comparative laboratory results of female nelore cattle in different farm categories with and without the presence of Pteridium arachnoideum in pastures / Resultados de laboratorio comparativos en hembras nelore de diferentes categorías provenientes de granjas con y sin la presencia de Pteridium arachnoideum en pastajes

A Pteridium arachnoideum, anteriormente classificada como Pteridium aquilinum, popularmente conhecida por samambaia, é um dos vegetais tóxicos mais preocupantes em vários países, incluindo o Brasil. No estado do Paraná há várias regiões onde a planta possui característica endêmica. Pesquisadores brasileiros caracterizaram, experimentalmente, três formas clínicas das doenças causadas pela samambaia aos bovinos: diátese hemorrágica, hematúria enzoótica dos bovinos e carcinomas epidermoides do trato digestório superior. No presente trabalho, estudaram-se os valores hematológicos, bioquímicos e de urinálise em duas diferentes fases do desenvolvimento animal, sendo 58 novilhas e 55 vacas, originadas de propriedades rurais com características zootécnicas semelhantes e com a presença ou não da samambaia. A finalidade foi estabelecer um protocolo para triagem e adotar medidas na melhoria do manejo, evitando-se mais prejuízos. Neste estudo, houve uma queda no número de hemácias de vacas e novilhas provenientes de propriedades rurais com presença de samambaia. O número de plaquetas foi significativamente superior em ambas as faixas etárias nos bovinos provenientes de propriedades rurais com samambaia. Por outro lado, não houve alterações significativas no leucograma, indicando que não havia em nenhuma das duas categorias, resposta inflamatória sistêmica.(AU)

Pteridium arachnoideum, previously classified as Pteridium aquilinum, popularly known as bracken fern, is one of the most preoccupying poisonous vegetables in several countries, including Brazil. Brazilian researchers experimentally characterized three clinical forms of diseases caused by bracken fern in cattle: bleeding diathesis, bovine enzootic hematuria and squamous cell carcinoma in the upper digestive tracts. This work studies the hematological, biochemical and urinalysis values of two different phases of the animal development, being 58 heifers and 55 cows from farms with similar zootechnical characteristics, with and without the presence of bracken fern. In this study, there was a fall in the number of red blood cells in the cows and heifers from farms with the presence of bracken fern. The number of platelets was significantly higher in all of the age groups of animals from farms with bracken fern. There were no significant changes in the leucocyte count, indicating there was no systemic inflammatory response in any of the two categories.(AU)

El Pteridium arachnoideum, previamente clasificado como Pteridium aquilinum, popularmente conocido como helecho, es una de las plantas tóxicas más preocupantes en varios países, entre ellos Brasil. En el estado de Paraná hay varias regiones en las que la planta tiene característica endémica. Investigadores brasileños han caracterizado, experimentalmente, tres formas clínicas de la enfermedad causada por el helecho en la especie bovina: diátesis hemorrágica, hematuria enzoótica de ganado y carcinomas de células escamosas del tracto digestivo superior. En este trabajo se ha estudiado los valores hematológicos, bioquímicos y análisis de orina en dos etapas diferentes del desarrollo animal, compuesto por 58 novillas y 55 vacas, pertenecientes a granjas con características zootécnicas similares y con presencia o no de helecho. El objetivo ha sido establecer un protocolo para la detección y adoptar medidas para mejorar la gestión, evitando pérdidas. En este estudio se observó una disminución en el número de hematíes de vacas y novillas de propiedades rurales con la presencia de helecho. El recuento de plaquetas fue significativamente mayor en ambas edades de bovinos provenientes de propiedades con helecho. Por otro lado, no hubo cambios significativos en el recuento de glóbulos blancos, señalando que no había en ninguna de las dos categorías, respuesta inflamatoria sistémica.(AU)

Resultados laboratoriais comparativos em fêmeas nelore de diferentes categorias provenientes de fazendas com e sem a presença de Pteridium arachnoideum nas pastagens / Comparative laboratory results of female nelore cattle in different farm categories with and without the presence of Pteridium arachnoideum in pastures / Resultados de laboratorio comparativos en hembras nelore de diferentes categorías provenientes de granjas con y sin la presencia de Pteridium arachnoideum en pastajes

A Pteridium arachnoideum, anteriormente classificada como Pteridium aquilinum, popularmente conhecida por samambaia, é um dos vegetais tóxicos mais preocupantes em vários países, incluindo o Brasil. No estado do Paraná há várias regiões onde a planta possui característica endêmica. Pesquisadores brasileiros caracterizaram, experimentalmente, três formas clínicas das doenças causadas pela samambaia aos bovinos: diátese hemorrágica, hematúria enzoótica dos bovinos e carcinomas epidermoides do trato digestório superior. No presente trabalho, estudaram-se os valores hematológicos, bioquímicos e de urinálise em duas diferentes fases do desenvolvimento animal, sendo 58 novilhas e 55 vacas, originadas de propriedades rurais com características zootécnicas semelhantes e com a presença ou não da samambaia. A finalidade foi estabelecer um protocolo para triagem e adotar medidas na melhoria do manejo, evitando-se mais prejuízos. Neste estudo, houve uma queda no número de hemácias de vacas e novilhas provenientes de propriedades rurais com presença de samambaia. O número de plaquetas foi significativamente superior em ambas as faixas etárias nos bovinos provenientes de propriedades rurais com samambaia. Por outro lado, não houve alterações significativas no leucograma, indicando que não havia em nenhuma das duas categorias, resposta inflamatória sistêmica.(AU)

Pteridium arachnoideum, previously classified as Pteridium aquilinum, popularly known as bracken fern, is one of the most preoccupying poisonous vegetables in several countries, including Brazil. Brazilian researchers experimentally characterized three clinical forms of diseases caused by bracken fern in cattle: bleeding diathesis, bovine enzootic hematuria and squamous cell carcinoma in the upper digestive tracts. This work studies the hematological, biochemical and urinalysis values of two different phases of the animal development, being 58 heifers and 55 cows from farms with similar zootechnical characteristics, with and without the presence of bracken fern. In this study, there was a fall in the number of red blood cells in the cows and heifers from farms with the presence of bracken fern. The number of platelets was significantly higher in all of the age groups of animals from farms with bracken fern. There were no significant changes in the leucocyte count, indicating there was no systemic inflammatory response in any of the two categories.(AU)

El Pteridium arachnoideum, previamente clasificado como Pteridium aquilinum, popularmente conocido como helecho, es una de las plantas tóxicas más preocupantes en varios países, entre ellos Brasil. En el estado de Paraná hay varias regiones en las que la planta tiene característica endémica. Investigadores brasileños han caracterizado, experimentalmente, tres formas clínicas de la enfermedad causada por el helecho en la especie bovina: diátesis hemorrágica, hematuria enzoótica de ganado y carcinomas de células escamosas del tracto digestivo superior. En este trabajo se ha estudiado los valores hematológicos, bioquímicos y análisis de orina en dos etapas diferentes del desarrollo animal, compuesto por 58 novillas y 55 vacas, pertenecientes a granjas con características zootécnicas similares y con presencia o no de helecho. El objetivo ha sido establecer un protocolo para la detección y adoptar medidas para mejorar la gestión, evitando pérdidas. En este estudio se observó una disminución en el número de hematíes de vacas y novillas de propiedades rurales con la presencia de helecho. El recuento de plaquetas fue significativamente mayor en ambas edades de bovinos provenientes de propiedades con helecho. Por otro lado, no hubo cambios significativos en el recuento de glóbulos blancos, señalando que no había en ninguna de las dos categorías, respuesta inflamatoria sistémica.(AU)

Lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica: padronização de técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica

ABSTRACT The bovine enzootic hematuria is a chronic disease that causes tumors in the bladder, and the cytophatologic test could assist in the early diagnosis. Aimed to standardize the technique of harvesting, obtaining samples and cytophatologic evaluation of bovine urinary bladder washing with bovine enzootic hematuria, 10 adult cows were divided into two groups: A (all the liquid infused in the bladder was recovered) and B (only the latter liquid was recovered). Liquids recovered were subjected to cytophatological evaluation. It was observed that the final volume of bladder liquid was higher in group A, however, in relation to the number of cells, no significant difference (p > 0.05) was observed between groups. The amount of inflammatory cells and epithelial cells obtained per sample revealed that in both groups all animals had more inflammatory cells than epithelial cells, however, there was no difference between the type of washing done. The epithelial cells were found in 60% of cases, the alterations observed were discretes and it was not possible to classify any sample as hyperplastic or neoplastic. Data from this study showed that the cytophatological examination of bovine urinary bladder washing may aid in the diagnosis of bovine enzootic hematuria and the two harvesting methods employed were adequate for obtaining viable samples. Cytopathological evaluation allowed the identification of non-neoplastic lesions predominantly inflammatory. It is believed that the use of molecular markers in cytological samples is important for early detection of pre-neoplastic or neoplastic lesions in these animals.

RESUMO A hematúria enzoótica bovina é uma doença crônica que causa neoplasias na bexiga, e o exame citopatológico poderia auxiliar no diagnóstico precoce. Objetivou-se padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica bovina. Foram utilizadas 10 vacas, adultas, distribuídas em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido, no grupo B foi recuperado apenas o último lavado. Os lavados foram submetidos à avaliação citopatológica. Apesar do volume final de líquido vesical ter sido maior no grupo A, em relação ao número de células, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. A quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, entretanto, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas, não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da hematúria enzoótica bovina e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias. Acredita-se que a utilização de técnicas moleculares com biomarcadores em amostras citológicas seria importante para detectar precocemente lesões pré-neoplásicas ou neoplásicas nesses animais.

Lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica: padronização de técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica

ABSTRACT The bovine enzootic hematuria is a chronic disease that causes tumors in the bladder, and the cytophatologic test could assist in the early diagnosis. Aimed to standardize the technique of harvesting, obtaining samples and cytophatologic evaluation of bovine urinary bladder washing with bovine enzootic hematuria, 10 adult cows were divided into two groups: A (all the liquid infused in the bladder was recovered) and B (only the latter liquid was recovered). Liquids recovered were subjected to cytophatological evaluation. It was observed that the final volume of bladder liquid was higher in group A, however, in relation to the number of cells, no significant difference (p > 0.05) was observed between groups. The amount of inflammatory cells and epithelial cells obtained per sample revealed that in both groups all animals had more inflammatory cells than epithelial cells, however, there was no difference between the type of washing done. The epithelial cells were found in 60% of cases, the alterations observed were discretes and it was not possible to classify any sample as hyperplastic or neoplastic. Data from this study showed that the cytophatological examination of bovine urinary bladder washing may aid in the diagnosis of bovine enzootic hematuria and the two harvesting methods employed were adequate for obtaining viable samples. Cytopathological evaluation allowed the identification of non-neoplastic lesions predominantly inflammatory. It is believed that the use of molecular markers in cytological samples is important for early detection of pre-neoplastic or neoplastic lesions in these animals.

RESUMO A hematúria enzoótica bovina é uma doença crônica que causa neoplasias na bexiga, e o exame citopatológico poderia auxiliar no diagnóstico precoce. Objetivou-se padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica bovina. Foram utilizadas 10 vacas, adultas, distribuídas em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido, no grupo B foi recuperado apenas o último lavado. Os lavados foram submetidos à avaliação citopatológica. Apesar do volume final de líquido vesical ter sido maior no grupo A, em relação ao número de células, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. A quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, entretanto, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas, não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da hematúria enzoótica bovina e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias. Acredita-se que a utilização de técnicas moleculares com biomarcadores em amostras citológicas seria importante para detectar precocemente lesões pré-neoplásicas ou neoplásicas nesses animais.

Bovine urinary bladder washing with enzootic hematuria: standardization of harvesting technique, sample collection and cytopathological evaluation / Lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica: padronização de técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica

The bovine enzootic hematuria is a chronic disease that causes tumors in the bladder, and the cytophatologic test could assist in the early diagnosis. Aimed to standardize the technique of harvesting, obtaining samples and cytophatologic evaluation of bovine urinary bladder washing with bovine enzootic hematuria, 10 adult cows were divided into two groups: A (all the liquid infused in the bladder was recovered) and B (only the latter liquid was recovered). Liquids recovered were subjected to cytophatological evaluation. It was observed that the final volume of bladder liquid was higher in group A, however, in relation to the number of cells, no significant difference (p  >  0.05) was observed between groups. The amount of inflammatory cells and epithelial cells obtained per sample revealed that in both groups all animals had more inflammatory cells than epithelial cells, however, there was no difference between the type of washing done. The epithelial cells were found in 60% of cases, the alterations observed were discretes and it was not possible to classify any sample as hyperplastic or neoplastic. Data from this study showed that the cytophatological examination of bovine  urinary bladder washing may aid in the diagnosis of bovine enzootic hematuria and the two harvesting methods employed were adequate for obtaining viable samples. Cytopathological evaluation allowed the identification of non-neoplastic lesions predominantly inflammatory. It is believed that the use of molecular markers in cytological samples is important for early detection of pre-neoplastic or neoplastic lesions in these animals.

A hematúria enzoótica bovina é uma doença crônica que causa neoplasias na bexiga, e o exame citopatológico poderia auxiliar no diagnóstico precoce. Objetivou-se padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica bovina. Foram utilizadas 10 vacas, adultas, distribuídas em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido, no grupo B foi recuperado apenas o último lavado. Os lavados foram submetidos à avaliação citopatológica. Apesar do volume final de líquido vesical ter sido maior no grupo A, em relação ao número de células, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. A quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, entretanto, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas, não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da hematúria enzoótica bovina e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias. Acredita-se que a utilização de técnicas moleculares com biomarcadores em amostras citológicas seria importante para detectar precocemente lesões pré-neoplásicas ou neoplásicas nesses animais.

Lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica: padronização de técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica / Bovine urinary bladder washing with enzootic hematuria: standardization of harvesting technique, sample collection and cytopathological evaluation

A hematúria enzoótica bovina é uma doença crônica que causa neoplasias na bexiga, e o exame citopatológico poderia auxiliar no diagnóstico precoce. Objetivou-se padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica bovina. Foram utilizadas 10 vacas, adultas, distribuídas em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido, no grupo B foi recuperado apenas o último lavado. Os lavados foram submetidos à avaliação citopatológica. Apesar do volume final de líquido vesical ter sido maior no grupo A, em relação ao número de células, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. A quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, entretanto, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas, não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da hematúria enzoótica bovina e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias. Acredita-se que a utilização de técnicas moleculares com biomarcadores em amostras citológicas seria importante para detectar precocemente lesões pré-neoplásicas ou neoplásicas nesses animais.(AU)

The bovine enzootic hematuria is a chronic disease that causes tumors in the bladder, and the cytophatologic test could assist in the early diagnosis. Aimed to standardize the technique of harvesting, obtaining samples and cytophatologic evaluation of bovine urinary bladder washing with bovine enzootic hematuria, 10 adult cows were divided into two groups: A (all the liquid infused in the bladder was recovered) and B (only the latter liquid was recovered). Liquids recovered were subjected to cytophatological evaluation. It was observed that the final volume of bladder liquid was higher in group A, however, in relation to the number of cells, no significant difference (p > 0.05) was observed between groups. The amount of inflammatory cells and epithelial cells obtained per sample revealed that in both groups all animals had more inflammatory cells than epithelial cells, however, there was no difference between the type of washing done. The epithelial cells were found in 60% of cases, the alterations observed were discretes and it was not possible to classify any sample as hyperplastic or neoplastic. Data from this study showed that the cytophatological examination of bovine urinary bladder washing may aid in the diagnosis of bovine enzootic hematuria and the two harvesting methods employed were adequate for obtaining viable samples. Cytopathological evaluation allowed the identification of non-neoplastic lesions predominantly inflammatory. It is believed that the use of molecular markers in cytological samples is important for early detection of pre-neoplastic or neoplastic lesions in these animals.(AU)

Bovine urinary bladder washing with enzootic hematuria: standardization of harvesting technique, sample collection and cytopathological evaluation / Lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica: padronização de técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica

The bovine enzootic hematuria is a chronic disease that causes tumors in the bladder, and the cytophatologic test could assist in the early diagnosis. Aimed to standardize the technique of harvesting, obtaining samples and cytophatologic evaluation of bovine urinary bladder washing with bovine enzootic hematuria, 10 adult cows were divided into two groups: A (all the liquid infused in the bladder was recovered) and B (only the latter liquid was recovered). Liquids recovered were subjected to cytophatological evaluation. It was observed that the final volume of bladder liquid was higher in group A, however, in relation to the number of cells, no significant difference (p  >  0.05) was observed between groups. The amount of inflammatory cells and epithelial cells obtained per sample revealed that in both groups all animals had more inflammatory cells than epithelial cells, however, there was no difference between the type of washing done. The epithelial cells were found in 60% of cases, the alterations observed were discretes and it was not possible to classify any sample as hyperplastic or neoplastic. Data from this study showed that the cytophatological examination of bovine  urinary bladder washing may aid in the diagnosis of bovine enzootic hematuria and the two harvesting methods employed were adequate for obtaining viable samples. Cytopathological evaluation allowed the identification of non-neoplastic lesions predominantly inflammatory. It is believed that the use of molecular markers in cytological samples is important for early detection of pre-neoplastic or neoplastic lesions in these animals.(AU)

A hematúria enzoótica bovina é uma doença crônica que causa neoplasias na bexiga, e o exame citopatológico poderia auxiliar no diagnóstico precoce. Objetivou-se padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com hematúria enzoótica bovina. Foram utilizadas 10 vacas, adultas, distribuídas em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido, no grupo B foi recuperado apenas o último lavado. Os lavados foram submetidos à avaliação citopatológica. Apesar do volume final de líquido vesical ter sido maior no grupo A, em relação ao número de células, não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os grupos. A quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, entretanto, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas, não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da hematúria enzoótica bovina e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias. Acredita-se que a utilização de técnicas moleculares com biomarcadores em amostras citológicas seria importante para detectar precocemente lesões pré-neoplásicas ou neoplásicas nesses animais.(AU)

Ocorrência de Hematúria Enzoótica e Neoplasias do Trato Alimentar Superior em Búfalos no Brasil

Plantas do gênero Pteridium spp. estão entre as plantas tóxicas mais importantes do mundo, dada sua distribuição cosmopolita e, principalmente, pelo seu alto potencial carcinogênico para animais e também para seres humanos. Na Região Sudeste, Pteridium arachnoideum, planta conhecida popularmente como samambaia ou samambaia do campo é uma das plantas que causam maiores prejuízos econômicos na pecuária. O efeito carcinogênico se dá pela presença de um norsesquiterpeno denominado ptaquilosídeo, princípio tóxico de ação radiomimética, cuja ação pode variar em função da espécie animal, do tempo de ingestão e da quantidade diária ingerida. Em bovinos, a ingestão de samambaia provoca um dos três diferentes quadros clínico-patológicos atribuídos à ação radiomimética do Pteridium sp., isto é, Carcinomas das Vias Digestivas Superiores (CVDS), Hematúria Enzoótica Bovina (HEB) e Diátese Hemorrágica (DH). Comumente esses tipos de intoxicação são descritas em bovinos. Até o momento, há poucas referências sobre Hematúria Enzoótica (HE) em búfalos. Em relação aos CVDS e DH não há relatos de ocorrência em bubalinos. Na Região Sudeste, pelo menos, a HEB é responsável pelo maior número de perdas, devidas não apenas ao óbito, mas também em função da queda de produtividade. Em áreas limítrofes do Estado de São Paulo, mais especificamente no Município de São José do Barreiro, há aproximadamente 12 anos, alguns produtores de áreas com alta incidência de HEB, vêm substituindo os bovinos por búfalos, com base na premissa de que estes seriam mais resistentes à intoxicação que o gado bovino. Embora, de acordo com observações iniciais, os búfalos realmente sejam mais resistentes que os bovinos ao princípio tóxico de Pteridium spp., ainda assim, tem-se verificado a ocorrência de casos de hematúria nessa espécie. Dessa forma, por necessária, impõe-se investigação direcionada no sentido de caracterizar a HE em seus aspectos epidemiológicos e clínico-patológicos em búfalos no Estado de São Paulo e em área limítrofe do Estado do Rio de Janeiro, bem como propor medidas profiláticas que visem minimizar os prejuízos decorrentes. Toda a coleta de dados, casos clínicos e material para análise laboratorial será feita em propriedades rurais que tenham a criação de bubalinos no município de São José do Barreiro, SP, e municípios limítrofes no Estado do Rio de Janeiro. Adicionalmente, será realizada coleta de bexigas, ureteres e rins de bubalinos com histórico de HE em frigoríficos. Por meio de inquérito aplicado aos produtores em visitas às propriedades, serão levantados dados referentes à epidemiologia da intoxicação por P. arachnoideum em bubalinos. Serão realizados exame clínico geral e exames laboratoriais em animais que apresentarem hematúria. Os animais que morrerem ou àqueles que os proprietários optarem pela eutanásia serão necropsiados e o material proveniente será analisado por exame histopatológico.

Species of the genus Pteridium are among the most important poisonous plants in the world. Their urbane distribution and highly carcinogenic effect, both in animals and human beings, contribute for the familiarity of those weeds worldwide. In the Southeast of Brazil, Pteridium arachnoideum, a weed popularly known as bracken or field bracken is a serious problem for the local farmers, constantly accounting for innumerous livestock death and inestimable economic loss. The carcinogenic effect of Pteridium arachnoideum is due to a norsesquiterpene-type ptaquiloside, a radiomimetic substance known for a number of distinct and well-recognized syndromes in livestock. Their occurrence will depend on several factors such as the amount of bracken available, the consumption rate and length of time. They main syndromes induced by bracken, commonly described in cattle, are as follows: Tumors of the Upper Alimentary Tract (TUAT), Bovine Enzootic Hematuria (BEH), and Acute Haemorrhagic Disease (AHD). Heretofore, no reports have been made on TUAT and AHD in buffaloes, while only a few cases of Enzootic Hematuria have been described in this species. In the southeast region of Brazil, it is well known that BEH is responsible for a great economic loss, not only regarding livestock death, but also due to a decrease in cattle productivity. Therefore, for the past 12 years, farmers located in the municipality of São José do Barreiro (a neighboring area of São Paulo State) have been replacing their cattle herd for buffaloes herds in areas severe infested by bracken; theoretically buffaloes would be more resistant to the toxic effects of Pteridium than cattle. Nevertheless, farmers have been reporting cases of EH in buffaloes from those areas. Ergo, we aim to evaluate epidemiological, clinical, and pathological aspects of EH on buffaloes in the São Paulo State and neighboring areas of Rio de Janeiro State. Moreover, we intend to propose prophylactic measures to minimize the consequent economic loss due to bracken poisoning. All data, clinical reports, and samples for laboratorial analysis will be made at buffaloes farms in the municipality of São José do Barreiro (São Paulo State, Brazil) and neighboring countries of Rio de Janeiro State (Brazil). Moreover, samples of bladders, ureters, and kidneys of slaughtered buffaloes will be collect at the local slaughterhouse. An epidemiological questionnaire investigation regarding P. arachnoideum poisoning in buffaloes will be carried. A thorough physical exam and the pertinent laboratorial tests will be conducted on buffaloes presetting signs of Hematuria. Necropsies will be performed in buffaloes that may die during the project, and samples of several tissues will undergo histopathological evaluation.

Avaliação da fita reagente para urinálise e cistoscopia na hematúria enzoótica bovina / Evaluation of urine dipstick and cystoscopy in bovine enzootic haematuria

Hematúria enzoótica bovina é causada principalmente pela ingestão crônica de samambaia e ainda é considerada uma importante causa de perdas econômicas em rebanhos de corte, especialmente em grandes áreas metropolitanas do Brasil que não são adequados para a agricultura (solo fraco, morros íngremes). O objetivo deste trabalho foi avaliar se há uma correlação entre o grau de hematúria e presença de lesões na bexiga urinária de vacas com hematúria enzoótica bovina (HEB). Avaliou-se a bexiga de vinte vacas Nelore com intoxicação por samambaia usando um endoscópio flexível para descrever as lesões presentes e foi realizado um teste de urina rápido por meio do uso de fitas químicas reagentes (Combur Roche ® - Suiça) para verificar o grau de hematúria; então foram correlacionados ambos os resultados com o uso do teste estatístico de Spearman. Todas as vacas apresentavam lesões na parede da bexiga e a urina estava visualmente avermelhada, também o teste com as tiras foi positivo para hematúria. As fitas reagentes apresentaram uma correlação positiva com o número de lesões da bexiga. Nos bexigas dos animais que foi realizado eutanásia, vários nódulos avermelhados difusos pela submucosa e múltiplos pontos de equimose foram vistos macroscopicamente, e em uma bexiga havia um tumor maior com um diâmetro de 3 centímetros, o qual foi determinado como hemangioma por meio da análise histopatológica. Concluiu-se que as fitas reagentes para urinálise são uma ferramentavaliosa para avaliar a gravidade das lesões da bexiga urinária nos casos de hematúria enzoótica bovina.Além disso, a cistoscopia é uma importante ferramenta diagnóstica para avaliar lesões vesicais embovinos. Mais estudos são necessários para avaliar o envolvimento de papilomavírus e ocorrência detumor de bexiga nestas vacas.(AU)

Enzootic bovine haematuria is mainly caused by the chronic ingestion of bracken fern and is still considered an important cause of economic losses in beef herds, particularly in large metropolitan areas of Brazil that are not suitable for agriculture (weak soil, steep hills).The aim of this paper was evaluate if there is a correlation between the degree of haematuria and the presence of lesions in the urinary bladder of cows with bovine enzootic haematuria (BEH).We evaluated the bladder of twenty Nelore cows with bracken fern intoxication using a flexible endoscope to describe the lesions present and we performed a rapid urine test with a chemical multiple-reagent commercial strips (Combur test Roche® Swiss) to check the degree of haematuria; then we correlated both results with the Spearman statistical test. All cows presented lesions in their bladder walls and the urine was visually reddish and positive for haematuria in the strips. Urine dipstick has shown to correlate with bladder lesion number. In the bladders of the euthanised animals, multiple sub-mucosal reddish nodules and multiple ecchymotic haemorrhages were seen macroscopically, and one bladder had a larger tumour with a 3cm diameter, which was determined to be a haemangioma by analysing the histopathology. We concluded that urine dipstick is a valuable device for bovine enzootic haematuria prognostic purposes and to evaluatethe severity of lesions from the urinary bladder. Moreover, cystoscopy is an important diagnostictool to assess bladder lesions in cattle. Further studies are necessary to evaluate the involvement ofpapillomaviruses and bladder tumour occurrence in these cows.(AU)

Perfil de propriedades rurais com pastos invadidos por Pteridium arachnoideum na região norte de Mato Grosso e prevalência de hematúria enzoótica bovina / Profile of farms with pastures invaded by Pteridium arachnoideum in northern Mato Grosso and prevalence of bovine enzootic hematuria

Descreve-se o perfil de 40 propriedades rurais com pastagens invadidas por Pteridium arachnoideum na região norte de Mato Grosso, bem como a prevalência de hematúria enzoótica bovina (HEB) em bovinos de leite e corte nessa região. A HEB foi observada em 15/40 propriedades com prevalências variando entre 0,8 e 16,6%. Aspectos relacionados à implantação das pastagens e manejos utilizados foram discutidos. A maior parte das propriedades que apresentaram HEB possuíam pastagens altamente invadidas pela planta, enquanto que a maioria das propriedades que nunca apresentaram animais acometidos por HEB possuíam pastos com áreas invadidas abaixo de 10%. O desmatamento e a utilização de queimada foram fatores determinantes na invasão de piquetes por P. arachnoidem.(AU)

The profile of 40 farms with pastures invaded by Pteridium arachnoideum in northern Mato Grosso as well as the prevalence of bovine enzootic haematuria (BEH) in dairy and beef cattle in the region are described. The BEH was observed in 15/40 properties with prevalence rates ranging from 0.8 to 16.6%. Aspects related to the deployment of pastures and management are discussed. In most farms where BEH occurs, the pastures were highly invaded by the plant, whereas in most farms where HEB does not occur the pastures had less than 10% of Pteridium arachnoideum. Deforestation and the use of fire were determinant factors in the invasion of the paddocks by P. arachnoideum.(AU)

AVALIAÇÃO CLÍNICA E LABORATORIAL DE NOVILHAS NELORES SUBMETIDAS À INTOXICAÇÃO POR Pteridium arachnoideum APÓS INGESTÃO DE DOSES SUBTÓXICAS

Pteridium arachnoideum, popularmente nominada de samambaia, é conhecida também como pluma e samambaia do campo e está disseminada na maioria das propriedades rurais, é considerada uma planta tóxica muito importante. As doenças relatadas em rebanhos de bovinos em áreas com a presença da samambaia incluem a intoxicação aguda (diátese hemorrágica) e crônica (carcinomas das vias digestórias superiores e hematúria enzoótica bovina HEB). Dentre as três formas clinicas acima descritas, a HEB é a de maior incidência. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da ingestão de doses subtóxicas de Pteridium arachonoideum nas manifestações clínicas, e laboratoriais de novilhas nelores suplementadas a pasto. Vinte e duas fêmeas foram selecionadas e separadas em três grupos: 10 gestantes, 10 não gestantes, e 2 não gestantes em lactação. Os animais foram confinados em um piquete de 0,5 hectares com grama estrela (Cinodon dactylon) contendo cochos coletivos em uma propriedade localizada na cidade de Regente Feijó- SP. Dieta: água ad libitum; suplemento concentrado (0,3%/PV/cab/dia) comercial e sal mineralizado com 40g de fósforo. Ofertada uma vez ao dia, durante os 120 dias de tratamento, adicionada de P. arachnoideum na dose de 4 g/kg PV. Os três grupos foram monitorados por meio de hemograma e urinálise a cada 15 dias, durante 120 dias. A partir dos 60 dias de experimento foi possível observar presença de microhematúria nos exames urinários.

Pteridium arachnoideum, popularly known as fern, is also known as feather and fern of the field and is widespread in most rural properties, is considered a very important toxic plant. Diseases reported in cattle herds in areas with fern include acute intoxication (haemorrhagic diathesis) and chronic intoxication (upper digestive tract carcinomas and enzootic bovine hematuria - HEB). Among the three clinical forms described above, HEB is the one with the highest incidence. The objective of this work was to verify the effect of the ingestion of subtoxic doses of Pteridium arachonoideum in the clinical manifestations, and laboratory of nellor heifers supplemented to pasture. Twenty-two females were selected and separated into three groups: 10 pregnant women, 10 non-pregnant women, and 2 non-pregnant women. The animals were confined in a 0.5-hectare picket with star grass (Cinodon dactylon) containing collective cocks in a property located in the city of Regente Feijó- SP. Diet: water ad libitum; concentrate supplement (0.3% / PV / hr / day) and mineralized salt with 40g of phosphorus. Offered once daily during the 120 days of treatment, added P. arachnoideum at the dose of 4 g / kg PV. The three groups were monitored by means of hemogram and urinalysis every 15 days for 120 days. From the 60 days of the experiment it was possible to observe the presence of microhematuria in the urinary exams.

Selênio como suplemento para bovinos intoxicados cronicamente por Pteridium sp. no Espirito Santo. 2017.

. Pteridium sp. (samambaia) é uma planta responsável por diversos quadros de intoxicação em animais e seres humanos. Em bovinos, um dos quadros comuns na região sul do Espírito Santo é a hematúria enzoótica bovina (HEB) que não possui tratamento. Assim, o objetivo do presente trabalho foi determinar os efeitos do selênio associado a vitamina E como suplemento em animais intoxicados cronicamente pelo Pteridium sp. Foram selecionados 21 animais intoxicados cronicamente pela planta e com HEB. Os animais foram examinados clinicamente e foi realizada a coleta da urina para a confirmação da hematúria. O delineamento experimental foi feito em quatro grupos divididos ao acaso (controle soro fisiológico; tratamento 1 0,05 mg/Kg do suplemento; tratamento 2 0,10 mg/Kg do suplemento; tratamento 3 0,20 mg/Kg do suplemento). Foi feita a suplementação parenteral, via intramuscular, uma vez por semana, durante 13 semanas. Quinzenalmente os animais foram avaliados clinicamente e foram coletadas amostras de sangue para dosagem do selênio sérico. A análise de selênio foi feita nos momentos inicial, antes da suplementação com selênio (M0), após quatro semanas de tratamento (M4), após oito semanas (M8) e após 12 semanas (M12), pelommétodo de espectrofotometria de absorção atômica. Utilizou-se a análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Tukey a 5%. Verificou- se que houve maior ganho de peso dos animais tratados com selênio em relação ao grupo controle e, também, entre os grupos. A intensidade da hematúria reduziu a partir da sexta semana e houve diferença significativa entre os grupos tratados e o grupo controle, assim como entre os grupos. Houve diferença significativa da concentração sérica de selênio entre os tratamentos. Assim, conclui-se que o selênio associado a vitamina E como suplemento para bovinos intoxicados cronicamente por Pteridium sp. no Espirito Santo com quadro de HEB teve efeito dose dependente sobre a melhora do quadro clínico causando redução da intensidade de hematúria e aumento do ganho de peso.

Pteridium sp. (bracken fern) is a plant responsible for several cases of intoxication in animals and humans. In bovines, one of the common conditions in the southern region of Espírito Santo is enzootic bovine hematuria (EBH) that doesnt have treatment. Thus, the aim of the present study was to determine the effects of selenium associated with vitamin E supplementation in animals chronically poisoned by Pteridium sp. Twenty-one animals chronically intoxicated by the plant and with EBH were selected. The animals were clinically examined to confirmation of hematuria and collection of urine. The experimental design was done in four randomized groups (control saline solution, treatment 1 - 0.05 mg.Kg-1 of the supplement, treatment 2 - 0.10 mg.Kg-1 of the supplement and treatment 3 - 0.20 mg.Kg-1 of the supplement. Parenteral supplementation was given intramuscularly once a week for 13 weeks. Biologically the animals were clinically evaluated and blood samples were collected for analysis of levels of serum selenium. Selenium analysis was done at the initial moments, before the supplementation (M0), after four weeks of treatment (M4), after eight weeks (M8) and after 12 weeks (M12), atomic absorption spectrophotometry method. The analysis of variance (ANOVA) followed by the Tukey test at 5% was used. It was verified that there was greater gain of weight of the animals treated with selenium and vitamin E in relation to the control group and, also, between the groups. The intensity of hematuria reduced from the sixth week and there was a significant difference between the treated groups and the control group, as well as between the groups. There was a significant difference in serum selenium concentration between treatments. Thus, it is concluded that selenium associated with vitamin E as a supplement for bovines chronically intoxicated for Pteridium sp. with EBH in Espirito Santo had a dose-dependent effect on the improvement of the clinical condition, causing a reduction in the intensity of hematuria and an increase in weight gain.

PARÂMETROS BIOQUÍMICOS SÉRICOS E PROTEÍNAS DE FASE AGUDA EM BOVINOS COM HEMATÚRIA ENZOÓTICA

A hematúria enzoótica bovina (HEB) é uma toxicose associada a ingestão crônica de pequenas quantidades de samambaia (Pteridium spp.). O principal composto tóxico em Pteridium spp. é o ptaquilosídeo (Pt), um glicosídeo carcinogênico capaz de induzir alterações hiperplásicas e neoplásicas na vesícula urinária nos bovinos. Clinicamente a doença se caracteriza por hematúria contínua ou intermitente e anemia, culminando no óbito do animal ou no seu descarte. Não há tratamento conhecido para a doença e sua prevenção é preconizada. A HEB tem distribuição mundial e já foi descrita em vários estados brasileiros. No Paraná ocorre em muitos municípios, inclusive na Região Metropolitana de Curitiba, onde foi desenvolvido esse estudo. Assim, objetivou-se estudar os parâmetros bioquímicos séricos e proteínas de fase aguda (PFA) em bovinos naturalmente intoxicados por Pteridium spp. e com HEB. Essa dissertação é dividida em dois capítulos. O primeiro abrange uma revisão bibliográfica sobre a HEB e os principais parâmetros hematológicos analisados nos bovinos, com ênfase na PFA haptoglobina (Hp). O segundo capítulo traz o estudo intitulado Parâmetros bioquímicos séricos e proteínas de fase aguda em bovinos com hematúria enzoótica, o qual compara os parâmetros hematológicos, séricos e a dinâmica da PFA Hp em bovinos saudáveis e com HEB oriundos de propriedades da Região Metropolitana de Curitiba e da Região do Vale do Ribeira, onde a doença é prevalente. A conclusão obtida nessa pesquisa foi de que os bovinos com HEB apresentam alterações significativas no eritrograma, leucograma, em alguns parâmetros séricos e na concentração de Hp, quando comparados à indivíduos saudáveis.

Bovine enzootic haematuria (BEH) is a toxicose associated with the chronic ingestion of small amounts of bracken fern (Pteridium spp.).The main toxic compound in Pteridium spp. is ptaquiloside (Pt), a carcinogenic glycoside capable of inducing hyperplasic and neoplasic changes in cattle urinary bladder. Clinically the disease is characterized by continuous or intermittent haematuria and anemia, culminating in the death of the animal or its disposal. There is no known treatment for the disease and its prevention is advocated. BEH has a worldwide distribution and has been described in several Brazilian states. In Paraná State it occurs in many municipalities, including the Metropolitan Region of Curitiba, where this study was developed. Thus, the objective was to study serum biochemical parameters and acute phase proteins (APP) in cattle naturally intoxicated with Pteridium spp. and with BEH. This dissertation is divided into two chapters. The first one covers a literature review about BEH and the main hematological parameters analyzed in cattle, with emphasis on PFA haptoglobin (Hp). The second chapter presents the study entitled "Serum biochemical parameters and acute phase proteins in cattle with enzootic haematuria", which compares the hematological, serum and APP Hp dynamics in healthy and BEH cattle from Metropolitan Region of Curitiba and the Ribeira Valley Region, where the disease is prevalent. The conclusion reached in this study was that cattle with BEH presented significant alterations in erythrogram, leukogram, in some serum parameters and in the Hp concentration, when compared to healthy individuals.

Validação de método e determinação de Ptaquilosídeo e Pterosina B por cromatografia líquida de alta eficiência em samambaias e no leite de vacas

A espécie Pteridium spp. é conhecida no Brasil como samambaia, samambaia do campo ou pluma. As espécies existentes são: P. arachnoideum e P. caudatum. A samambaia já foi registrada em praticamente todos os estados brasileiros. Quanto a sua ocorrência, está presente em regiões montanhosas, desde o sul da Bahia até o Rio Grande do Sul, porém também é invasora em áreas dos estados do Amazonas, Acre, Mato Grosso e Pernambuco. É encontrada em regiões frias de alta pluviosidade, solos ácidos, arenosos e bem drenados. P. arachnoideum tem dois princípios tóxicos: a tiaminase, responsável pela intoxicação em monogástricos, e o ptaquilosídeo (Pta), substância cancerígena, responsável pela intoxicação em ruminantes. Os animais de produção consomem a samambaia, especialmente as suas partes mais jovens, mesmo não sendo palatável. Os efeitos da ingestão são vários, dependendo da espécie animal e da dose ingerida. Cinco diferentes síndromes clínicas são descritas na literatura: deficiência de tiamina, degeneração progressiva da retina, síndrome hemorrágica aguda (diátese hemorrágica), hematúria enzoótica bovina (HEB) e carcinomas de vias digestivas superiores. As técnicas disponíveis atualmente para determinação do Pta promovem sua conversão em pterosina B (PtB), mas esta possui limitada disponibilidade comercial. O presente estudo teve por objetivos desenvolver uma metodologia para obtenção de PtB e determinar a quantidade do Pta, por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), em samambaias e no leite. Foram mensurados Pta e PtB em samambaias das espécies Pteridium arachnoideum, coletadas nos estados de Minas Gerais e Rio Grande do Sul, e Dicranoptris flexuosa, Gleichenella pectinata e Sticherus lanuginosus coletadas no Estado de Minas Gerais. Além disto, foram avaliadas amostras das samambaias Pteris deflexa e Pteris plumula, provenientes de propriedades da Argentina com casos de HEB, mas livres de qualquer espécie de Pteridium. Ao todo, foram utilizadas 47 amostras de folhas maduras e 23 amostras de broto. Foram utilizadas amostras de leite brancas para o desenvolvimento e avaliação da técnica analítica. Para a aplicação da técnica validada, foram utilizadas 60 amostras de leite cru de tanques provenientes de diversas propriedades do estado de Minas Gerais (MG), além de 20 amostras de leite cru de pequenas propriedades do município de Ouro Branco, MG, e 5 amostras do município de Esmeraldas, MG, ambas propriedades com histórico de casos de HEB e com presença da P. arachnoideum na pastagem. A concentração de Pta presente nas amostras de folhas maduras de P. arachnoideum variou de 2,4860,439 a 2,7530,844 mg/g e de PtB variou de 0,6840,152 a 0,8850,197 mg/g. Em brotos de P. arachnoideum obtivemos para Pta valores entre 12,4725,620 a 18,8092,338 mg/g e de PtB variou de 4,0260,982 a 10,4240,233 mg/g. Os valores encontrados nas espécies P. deflexa e P. plumula, para Pta variou de 2,424 a 3,235 mg/g e para PtB 0,727 a 1,543 mg/g. Além disso, S. lanuginosus apresentou níveis de Pta entre 2,4660,173 mg/g e de PtB 1,5720,166 mg/g e D. flexuosa apresentou níveis de Pta entre 0,8920,215 mg/g e de PtB 0,4660,083 mg/g. Em G. pectinata, não foi detectada a presença destes compostos tóxicos até o presente momento. Assim, S. lanuginosus e D. flexuosa foram identificadas pela primeira vez como produtoras de Pta e PtB, potencialmente tóxicas para ruminantes. Com relação às metodologias utilizadas para o clean-up das amostras de leite, foram encontradas duas metodologias eficientes na limpeza da matriz e também na recuperação do padrão nos testes de fortificação. No entanto, não foram detectadas amostras de leite positivas para Pta e PtB.

The species Pteridium spp. is a poisonous plant known as bracken fern. The existing species in Brazil are: P. arachnoideum and P. caudatum. The fern has already been recorded in practically all Brazilian states. As for its occurrence, it is present in mountainous regions, from the south of Bahia to Rio Grande do Sul states, but is also invasive in areas of the states of Amazonas, Acre, Mato Grosso and Pernambuco. It is found in cold regions of high rainfall, acid soils, sandy and well drained. P. arachnoideum has two toxic principles: thiaminase, responsible for monogastric intoxication, and ptaquiloside (Pta), the carcinogenic substance responsible for intoxication in ruminants. Production animals consume the fern, especially its younger parts, even though it is not palatable. The effects of the ingestion are several, depending on the animal species and the dose ingested. Five different clinical syndromes are described in the literature: thiamine deficiency, progressive retinal degeneration, acute hemorrhagic syndrome (hemorrhagic diathesis), bovine enzootic hematuria (BEH) and upper digestive tract carcinomas. The currently available techniques for determination of Pta promote its conversion into pterosin B (PtB), but this has limited commercial availability. The aim of the present study was to develop a methodology for obtaining pterosin B (PtB) and for determining the amount of the ptaquiloside (Pta) carcinogen in plants and milk by high performance liquid chromatography (HPLC). Pta and PtB were measured in ferns Pteridium arachnoideum, collected in the states of Minas Gerais and Rio Grande do Sul, and in Dicranoptris flexuosa, Gleichenella pectinata and Sticherus lanuginosus collected in the state of Minas Gerais. In addition, samples of the ferns Pteris deflexa and Pteris plumula were sampled from Argentinian farms with BEH cases, but free of any Pteridium species. A total of 47 samples of mature leaves and 23 shoots samples were used. Blank milk samples were used for the development and evaluation of the analytical technique. For the application of the validated technique, 60 samples of raw tank milk from from several farms in Minas Gerais (MG) state, and 20 samples of raw milk from small properties from Ouro Branco city, MG, and 5 samples from Esmeraldas city, MG, both with cases of HEB and presence of P. arachnoideum in the rangeland. The concentration of Pta in leaf samples of P. arachnoideum ranged from 2.486±0.439 to 2.753±0.844 mg/g and PtB ranged from 0.684±0.152 to 0.885±0.197 mg/g, in P. arachnoideum sprouts Pta values ranged from 12.472±5.620 to 18.809±2.338 mg/g and PtB ranged from 4.026±0.982 to 10.424±0.233 mg/g. The values found in P. deflexa and P. plumula for Pta ranged from 2.424 to 3.235 mg/g and for PtB ranged from 0.727 to 1.543 mg/g. In addition, S. lanuginosus showed Pta levels of 2.466±0.173 mg/g and PtB levels of 1.572±0.166 mg/g, and D. flexuosa had Pta levels of 0.892-0.215 mg/g and PtB 0.466-0.083 mg/g. In G. pectinata, these toxic compounds were not detected until the present moment. Thus, S. lanuginosus and D. flexuosa were identified for the first time as producers of Pta and PtB, potentially toxic to ruminants. Regarding the methodologies used for the clean-up of the milk samples, two methods were efficient in cleaning the matrix and in the recovery of the standard after fortification tests. However, no milk samples were found positive for Pta and PtB.

Sobrevivência/viabilidade de bovinos com Hematúria Enzoótica após transferência para região livre de Pteridium arachnoideum / Survival/viability of cattle with Bovine Enzootic Hematuria after transfer to area free of Pteridium arachnoideum

With the objective of explaining the question of survival of cattle affected by Enzootic Hematuria, when transferred to areas free of Pteridium arachnoideum, the study was accomplished in two parts: a) by a questionnaire regarding the epidemic aspects of that illness, which was answered by the proprietors of 73 cattle establishments visited in the areas of Southeast of Brazil, where P. arachnoideum is prevalent. The applied questionnaire to the proprietors indicates that enzootic hematuria is responsible for serious socioeconomic problems; b) clinical and laboratorial attendance of 51 cattle of this area affected by Enzootic Hematuria, between 2007 and 2011, transferred to area free of P. arachnoideum. More than 90% of the affected animals by HEB died before two years after removal from areas free of P. arachnoideum.(AU)

Com o objetivo de esclarecer a questão da sobrevida de bovinos afetados por Hematúria Enzoótica, quando transferidos para áreas livres de Pteridium arachnoideum, o estudo foi realizado em duas partes: a) aplicação de questionário versando sobre os aspectos epidemiológicos dessa enfermidade, respondido por proprietários de 73 estabelecimentos pecuários visitados nas áreas da Região Sudeste onde P. arachnoideum é prevalente. O questionário aplicado aos proprietários indica que a HEB é causa de sérios problemas sócio-econômicos. b) acompanhamento clínico e laboratorial de 51 bovinos desta região, afetados pela Hematúria Enzoótica entre 2007 e 2011, transferidos para região livre de P. arachnoideum. Verificou-se que mais de 90% dos animais afetados por HEB morre antes de dois anos após serem transferidos para áreas indenes de P. arachnoideum.(AU)