Reactivity against Sarcocystis neurona and Sarcocystis falcatula-like in horses from Southeastern and Midwestern Brazil / Reatividade contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis falcatula-like em equinos das regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is a neurological disease caused by Sarcocystis neurona. Immunofluorescence antibody tests (IFATs) have been widely used to identify exposure of horses to S. neurona in Brazil. Here we used IFAT to search for IgG antibodies against Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) and S. neurona (SN138) in sera from 342 horses sampled in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state (Midwestern), and São Paulo, São Paulo state (Southeastern), Brazil. The 1:25 cutoff value was chosen to maximize sensitivity of the test. IgG antibodies against S. neurona were detected in 239 horses (69.88%), whereas IgG antibodies against S. falcatula-like were detected in 177 horses (51.75%). Sera from 132 horses (38.59%) reacted against both isolates. Absence of reactivity was evidenced in 58/342 horses (16.95%). The lower cutoff used, and the presence of opossums infected with S. falcatula-like and Sarcocystis spp. in the regions where the horses were sampled, might justify the high seroprevalence observed here. Owing to the similarity among antigens targeted in immunoassays, reports on S. neurona-seropositive horses in Brazil may also derive from the exposure of horses to other Sarcocystis species. The role of other Sarcocystis species in causing neurological diseases in horses in Brazil remains unclear.(AU)

Mieloencefalite protozoária equina (MPE) é uma doença neurológica causada por Sarcocystis neurona. Reação de imunofluorescência indireta (RIFI) tem sido utilizada para identificar a exposição de equinos à S. neurona no Brasil. Neste estudo, a RIFI foi utilizada para avaliar a presença de anticorpos IgG anti-Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) e anti-S. neurona (SN138) no soro de 342 equinos de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Centro-oeste) e São Paulo, São Paulo (Sudeste), Brasil. O ponto de corte de 1:25 foi escolhido para maximizar a sensibilidade. Anticorpos IgG anti-S. neurona foram detectados em 239 cavalos (69,88%), enquanto anticorpos IgG anti-S. falcatula-like foram detectados em 177 cavalos (51,75%). O soro de 132 animais (38,59%) reagiu contra ambos os isolados. A ausência de reatividade foi evidenciada em 58/342 animais (16,95%). O baixo ponto de corte e a presença de gambás infectados com S. falcatula-like e Sarcocystis spp., nas regiões onde os equinos foram amostrados podem justificar a alta soroprevalência aqui observada. Devido à similaridade entre antígenos de superfície detectados nos imunoensaios, relatos de soropositividade contra S. neurona no Brasil podem resultar da exposição dos equinos a outras espécies de Sarcocystis. O papel de outras espécies de Sarcocystis como causa de doença neurológica em equinos no Brasil permanece incerto.(AU)

Evaluation of the use of dry blood spots for progesterone determination in ewes / Avaliação do uso de manchas secas de sangue para dosagem de progesterona em ovinos

The use of dried blood spots on filter paper has been shown to be a practical alternative in several studies with humans and animals, enabling a simple means of storing and transporting viable blood samples for various laboratory analyses. However, its applicability in the measurement of progesterone in animals is scarce. Thus, the objective of this study was to evaluate the feasibility of using dried blood spots for the measurement of progesterone in sheep. In total, 38 blood samples from 6 sheep were dripped onto filter paper, and the remainder of each sample was separated into serum. The progesterone levels in the serum samples and in the dry drops were measured by enzyme immunoassay and subsequently correlated. The levels of progesterone in the serum and dry spots showed a high correlation between the matrices (R2 = 0.9694). In conclusion, this study demonstrated the feasibility of using samples of dried sheep blood spots for the measurement of progesterone, and the storage and transport technique can be applied in the field.

O uso de manchas secas de sangue em papel filtro tem se demonstrado uma alternativa prática em vários estudos com humanos e animais, possibilitando um meio simples de armazenamento e transporte de amostras de sangue viáveis para várias análises laboratoriais. Entretanto, sua aplicabilidade na dosagem de progesterona em animais é escassa. Deste modo, o objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade do uso de manchas secas de sangue para a dosagem de progesterona em ovinos. Assim, 38 amostras de sangue de 6 ovelhas foram gotejadas em papel filtro e o restante de cada amostra foi separado o soro. Os níveis de progesterona nas amostras de soro e nas gotas secas foram mensurados por enzimaimunoensaio e posteriormente correlacionados. Os níveis de progesterona no soro e nas manchas secas apresentaram uma alta correlação entre as matrizes (R2=0,9694). Em conclusão, este estudo demonstrou a viabilidade do uso de amostras de manchas secas de sangue de ovino para a dosagem de progesterona, podendo a técnica de armazenamento e transporte ser aplicada a campo.

Clostridioides difficile: achados epidemiológicos em animais domésticos em um Hospital Veterinário Universitário em ­ Teresina, PI / Clostridioides difficile: epidemiological findings in domestic animals in a University Veterinary Hospital in Teresina, PI

O objetivo deste estudo foi analisar a prevalência de Clostridioides difficile e suas toxinas (A/B) nas fezes de animais domésticos de um Hospital Veterinário Universitário de Teresina - PI. A detecção de C. difficile e suas toxinas foi realizada por meio de um ensaio imunoenzimático, denominado C. Diff Quik Chek Complete® (TECHLAB), capaz de detectar antígeno Glutamato Desidrogenase (GDH) e as toxinas A/B produzidas pelo bacilo, realizado em amostras fecais de cães (C. lupus) e e gatos (Felis catus) coletadas entre agosto de 2019 a setembro de 2020. Um total de 54 amostras fecais foram analisadas, das quais 16 foram positivas para C. difficile (29,63%). 68,75% (11/16) pertenciam a caninos, enquanto 31,25% (5/16) a felinos. Amostras diarreicas e não diarreicas foram utilizadas para o estudo e uma maior prevalência do bacilo pôde ser identificada em amostras diarreicas (33%). Nenhuma das amostras apresentou toxinas do patógeno. Os achados deste estudo evidenciam que C.difficile está presente no estado do Piauí. Foi possível identificá-lo em todas as espécies e em amostras diarreicas ou não, demonstrando que essa infecção pode se manifestar de formasintomática e assintomática, levantando a possibilidade de infecção cruzada entre o animal e seu tutor.

The aim of this study was to analyze the prevalence of Clostridioides difficile and its toxins (A/B) in the feces of domestic animals at a University Veterinary Hospital in Teresina - PI. The detection of C. difficile and its toxins was performed by an immunogenic enzyme, called C. Diff Quik Chek Complete® (TECHLAB), capable of detecting antigen glutamate dehydrogenase (GDH) and A/B toxins produced by this bacillus, performed in fecal samples of dogs (C. lupus) and cats (Felis catus) collected between August 2019 and September 2020.:54 stools were analyzed, of which 16 were positive for C. difficile (29.63%). 68.75% (11/16) belonged to canines, while 3.25% (5/16) to felines. Diarrheal and non-diarrheal diseases are used for the study and a higher prevalence of bacillus can be identified in diarrheal diseases (33%). None of the samples present pathogen toxins. The results of this study show that C. difficile is present in the state of Piauí. It can be identified in all species and in diarrheal or non-diarrheic samples, demonstrating that this infection can be symptomatic and asymptomatic, giving the possibility of cross-infection between the animal and its owner.

Padronização de um ELISA indireto a partir da utilização de uma proteína de superfície do vírus da anemia infecciosa equina como antígeno para o diagnóstico dessa enfermidade / Standardization of an indirect ELISA using a surface protein of the equine infectious anemia virus as an antigen for the diagnosis of this disease

A anemia infecciosa equina é uma importante enfermidade que acomete os equídeos em todo o mundo, se apresentando de forma aguda, crônica e assintomática causando grandes prejuízos para a economia tanto para criadores que vivem do trabalho desses animais quantos aos criadores que investem no melhoramento das raças, impedindo o acesso ao mercado tanto nacional quanto internacional. O Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento considera o IDGA como teste oficial para diagnóstico dessa enfermidade, porém essa técnica é demorada e muita vez acaba sendo subjetiva, dependendo da experiencia particular de cada Laboratorista. Além de não conseguir detectar animais no início da infecção. Logo, a necessidade de se buscar novas técnicas como o ELISA indireto que aperfeiçoem o tempo de análise dos resultados, facilita a automação e obtém resultados confiáveis. O estudo realizado teve como objetivo padronizar uma técnica de ELISA indireto utilizando uma proteína de envelope viral GP90 como antígeno para diagnóstico da anemia infecciosa equina. Avaliando o desempenho do teste a partir da sensibilidade, especificidade e valores preditivos positivo e negativo. Os valores obtidos foram: 91,11%, 93,33%, 91,11% e 93,33% respectivamente. Concluiu-se que o teste apresenta bom desempenho, além da possibilidade de detectar amimais positivos no início da infecção.

Equine infectious anemia is an important disease that affects horses all over the world, presenting in an acute, chronic and asymptomatic way, causing great damage to the economy, both for breeders who live off the work of these animals and for breeders who invest in the improvement of breeds, preventing access to both national and international markets. The Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply considers AGID to be the official test for diagnosing this disease, but this technique takes time and often ends up being subjective, depending on the particular experience of each laboratory worker. In addition to not being able to detect animals at the beginning of the infection. Therefore, the need to seek new techniques such as indirect ELISA that improve the time of analysis of results, facilitate automation and obtain reliable results. The aim of this study was to standardize an indirect ELISA technique using a GP90 viral envelope protein as an antigen for the diagnosis of equine infectious anemia. Evaluating test performance based on sensitivity, specificity and positive and negative predictive values. The values obtained were 91.11%, 93.33%, 91.11 and 93.33 respectively. It was concluded that the test performs well, in addition to the possibility of detecting positive animals at the beginning of the infection.

Results of a sample-to-cutoff ratio using Abbott Architect rHTLV-I/II assay allow to predict detection of HTLV-1 and HTLV-2 proviral DNA by real-time PCR / Resultados da razão sinal da amostra sobre o cutoff da reação no ensaio Abbott Architect rHTLV-I/II permite prever a detecção de DNA proviral por PCR em tempo real

The present study aims to correlate the sample-to-cutoff ratios (S/CO) distributions of reactive results for HTLV-1/2 antibodies with the detection of proviral DNA in a population of blood donor candidates. It was carried out a retrospective data search of 632 HTLV-1/2 reactive samples, submitted to confirmatory testing from January 2015 to December 2019. Serological screening was performed by chemiluminescent microparticle immunoassay Architect rHTLV-I/II, whereas confirmatory testing was performed by in-house real-time polymerase chain reaction method. 496 out of 632 samples (78%) had undetectable HTLV-1/2 proviral DNA and 136 (22%) had detectable proviral DNA. HTLV infection was not confirmed in any individual for whom the S/CO ratio value was <4, and proviral DNA detection rates gradually escalated as S/CO ratio values increased. The sensitivity and predictive positive value found for the Architect rHTLV-I/II was 100% and 22%, respectively. The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis showed that the optimal S/CO ratio value for predicting the presence of HTLV-1/2 was 18.11. High S/CO ratios were more associated with the detection of proviral DNA. The S/CO ratio value <4 suggests excluding true HTLV infection and the risk of blood transmission (AU).

O estudo tem como objetivo correlacionar às distribuições das razões sample-to-cutoff (S/CO) de resultados reagentes para anticorpos HTLV-1/2 com a detecção de DNA proviral em uma população de candidatos à doação de sangue. Realizou-se uma busca retrospectiva de dados de 632 amostras reagentes para HTLV-1/2 submetidas à testagem confirmatória entre janeiro de 2015 a dezembro de 2019. A triagem sorológica foi realizada pelo imunoensaio quimioluminescente de micropartículas Architect rHTLV-I/II, enquanto o teste confirmatório foi realizado pelo método de PCR em tempo real in-house. 496 de 632 amostras (78%) apresentaram DNA proviral indetectável e 136 (22%) apresentaram DNA proviral detectável. A infecção por HTLV não foi confirmada em nenhum indivíduo com valor de S/CO <4 e as taxas de detecção de DNA proviral escalonaram gradualmente à medida que as razões S/CO aumentaram. A sensibilidade e valor preditivo positivo encontrados para o Architect rHTLV-I/II foram 100% e 22%, respectivamente. Utilizando análise de curva ROC, o valor de razão S/CO ideal para predizer a presença de DNA proviral foi de 18,11. Razões S/CO elevadas foram mais associadas à detecção de DNA proviral. Em suma, o valor de S/CO <4 sugere a exclusão de infecção por HTLV e o risco de transmissão pelo sangue (AU).

Monitoring the outbreak of equine glanders in Alagoas, Brazil: Clinical, immunological, molecular, and anatomopathological findings / Monitoramento de surtos de mormo nos equídeos em Alagoas, Brasil: achados clínicos, imunológicos, moleculares e anatomopatológico

ABSTRACT: Glanders is an infectious and often lethal zoonotic disease of equines caused by the bacterium, Burkholderia mallei. This condition is characterized by respiratory, lymphatic, and cutaneous lesions. In this study, we monitored the development of clinical symptoms in animals naturally infected with B. mallei across different equine breeds and also isolated and characterized the disease-causing bacteria. We studied two official glanders outbreaks in the state of Alagoas, Brazil. During the outbreaks, we performed clinical and immunological follow-up of the animals, as well as euthanasia and anatomopathological examination. We also collected diagnostic materials for isolative, phenotypic, molecular, and biological testing. We did not observe any clinical patterns of glanders among animals infected with the same strain of B. mallei. Based on our results, we suggest that early diagnosis of infection should be made through highly sensitive and specific immunoassays. In asymptomatic but positive test cases, we confirmed the importance of conducting pathological, microbiological, and molecular examinations.

RESUMO: O mormo é uma enfermidade infectocontagiosa e frequentemente letal, aguda ou crônica, caracterizada por lesões respiratórias, linfáticas e cutâneas em equídeos, porém de caráter zoonótico. Objetivou-se acompanhar o desenvolvimento dos sinais clínicos e de lesões em animais infectados naturalmente por B. mallei em diferentes propriedades de criação de equídeos, e isolar e caracterizar a bactéria causadora da doença. Foram estudados dois focos oficiais para o mormo no estado de Alagoas. Realizou-se o acompanhamento clinico e imunológico dos animais nos focos, eutanásia e exame anatomopatológico dos animais, além de colheita de material para diagnóstico através de técnicas de isolamento, fenotípicas, moleculares e prova biológica. Neste estudo não se observou um padrão clínico para o diagnóstico do mormo em animais infectados com a mesma cepa de B. mallei. O diagnóstico precoce da infecção deve ser realizado por meio de testes imunológicos de elevada sensibilidade e especificidade. Nos casos assintomáticos e positivos nos testes oficiais é importante a realização do exame anatomopatológico, microbiológico e molecular.

Soroepidemiological survey of chlamydia abortus infection in bovine in the State of Pernambuco, Brazil / Inquérito soroepidemiológico da infecção por chlamydia abortus em bovinos no Estado de Pernambuco, Brasil

The objective of this study was to conduct a seroepidemiological survey of Chlamydia abortus infection in dairy cattle herds. A total of 303 blood serum samples were collected from 24 property in Vale do Ipanema microregion in the state of Pernambuco, Brazil. For the diagnosis of C. abortus infection, a commercial enzyme immunoassay kit (ELISA) was used. A prevalence of 34.0% (103/303; 95% CI: 28.7%-39.7%) of infected animals was identified. In 79.8% (19/24) of the properties, at least one infected animal was detected. The risk factors identified were: semi-intensive system (OR = 3.47, p ≤ 0.000), extensive system (OR = 8.14; p ≤ 0.000), supply of water in troughs and directly at the fountain (OR = 2.29, p = 0.002), pasture rent (OR = 1.72, p = 0.041), use of artificial insemination (AI) (OR = 3.07, p = 0.002), and use of AI associated with natural mount (OR = 2.22, p = 0.003). The occurrence of C. abortus infection in dairy cattle in the state of Pernambuco, Brazil, was recorded for the first time. It is concluded that the infection by this agent is present in the analyzed herds and that hygienic and sanitary management measures based on the identified risk factors should be implemented to avoid reproductive losses and losses to the producers.(AU)

Objetivou-se realizar um inquérito soroepidemiológico da infecção por Chlamydia abortus em rebanhos bovinos leiteiros. Foram coletadas 303 amostras de soro sanguíneo de bovinos procedentes de 24 propriedades da microrregião do Vale do Ipanema no estado de Pernambuco, Brasil. Para o diagnóstico da infecção por C. abortus, utilizou-se kit comercial de ensaio imunoenzimático (ELISA). Foi identificada uma prevalência de 34,0% (103/303; IC 95% - 28,7% - 39,7%) de animais positivos. Em 79,8% (19/24) das propriedades foi detectado pelo menos um animal positivo. Os fatores de risco identificados foram: sistema semi-intensivo (OR = 3,47; p= < 0,000), sistema extensivo (OR = 8,14; p = < 0,000); fornecimento de água em cochos e diretamente na fonte (OR = 2,29; p = 0,002); aluguel de pasto (OR = 1,72; p = 0,041); uso de inseminação artificial (IA) (OR = 3,07; p = 0,002) e uso de IA associado à monta natural (OR = 2,22; p = 0,003). Registra-se, pela primeira vez, a ocorrência da infecção por C. abortus em bovinos no estado de Pernambuco, Brasil. Conclui-se que a infecção por esse agente está presente nos rebanhos analisados e que medidas de manejo higiênico-sanitário baseadas nos fatores de risco identificados devem ser implementadas com o intuito de evitar perdas reprodutivas e prejuízos para os produtores.(AU)

Production of polyclonal antibodies anti - Igm of nile tilapia, Oreochromis niloticus for standardization of immunoenzymatic assay / Produção de anticorpos policlonais anti - Igm de tilápia-do-nilo, Oreochromis niloticus para padronização de ensaio imunoenzimático

In this letter, we describe the development of an immunodiagnostic assay capable of detecting specific IgM in the blood circulation of experimental Nile tilapia that received the vaccine against S. agalactiae.(AU)

Production of polyclonal antibodies anti - Igm of nile tilapia, Oreochromis niloticus for standardization of immunoenzymatic assay / Produção de anticorpos policlonais anti - Igm de tilápia-do-nilo, Oreochromis niloticus para padronização de ensaio imunoenzimático

In this letter, we describe the development of an immunodiagnostic assay capable of detecting specific IgM in the blood circulation of experimental Nile tilapia that received the vaccine against S. agalactiae.

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Monitoring the outbreak of equine glanders in Alagoas, Brazil: Clinical, immunological, molecular, and anatomopathological findings / Monitoramento de surtos de mormo nos equídeos em Alagoas, Brasil: achados clínicos, imunológicos, moleculares e anatomopatológico

Glanders is an infectious and often lethal zoonotic disease of equines caused by the bacterium, Burkholderia mallei. This condition is characterized by respiratory, lymphatic, and cutaneous lesions. In this study, we monitored the development of clinical symptoms in animals naturally infected with B. mallei across different equine breeds and also isolated and characterized the disease-causing bacteria. We studied two official glanders outbreaks in the state of Alagoas, Brazil. During the outbreaks, we performed clinical and immunological follow-up of the animals, as well as euthanasia and anatomopathological examination. We also collected diagnostic materials for isolative, phenotypic, molecular, and biological testing. We did not observe any clinical patterns of glanders among animals infected with the same strain of B. mallei. Based on our results, we suggest that early diagnosis of infection should be made through highly sensitive and specific immunoassays. In asymptomatic but positive test cases, we confirmed the importance of conducting pathological, microbiological, and molecular examinations.

O mormo é uma enfermidade infectocontagiosa e frequentemente letal, aguda ou crônica, caracterizada por lesões respiratórias, linfáticas e cutâneas em equídeos, porém de caráter zoonótico. Objetivou-se acompanhar o desenvolvimento dos sinais clínicos e de lesões em animais infectados naturalmente por B. mallei em diferentes propriedades de criação de equídeos, e isolar e caracterizar a bactéria causadora da doença. Foram estudados dois focos oficiais para o mormo no estado de Alagoas. Realizou-se o acompanhamento clinico e imunológico dos animais nos focos, eutanásia e exame anatomopatológico dos animais, além de colheita de material para diagnóstico através de técnicas de isolamento, fenotípicas, moleculares e prova biológica. Neste estudo não se observou um padrão clínico para o diagnóstico do mormo em animais infectados com a mesma cepa de B. mallei. O diagnóstico precoce da infecção deve ser realizado por meio de testes imunológicos de elevada sensibilidade e especificidade. Nos casos assintomáticos e positivos nos testes oficiais é importante a realização do exame anatomopatológico, microbiológico e molecular.

Monitoring the outbreak of equine glanders in Alagoas, Brazil: Clinical, immunological, molecular, and anatomopathological findings / Monitoramento de surtos de mormo nos equídeos em Alagoas, Brasil: achados clínicos, imunológicos, moleculares e anatomopatológico

Glanders is an infectious and often lethal zoonotic disease of equines caused by the bacterium, Burkholderia mallei. This condition is characterized by respiratory, lymphatic, and cutaneous lesions. In this study, we monitored the development of clinical symptoms in animals naturally infected with B. mallei across different equine breeds and also isolated and characterized the disease-causing bacteria. We studied two official glanders outbreaks in the state of Alagoas, Brazil. During the outbreaks, we performed clinical and immunological follow-up of the animals, as well as euthanasia and anatomopathological examination. We also collected diagnostic materials for isolative, phenotypic, molecular, and biological testing. We did not observe any clinical patterns of glanders among animals infected with the same strain of B. mallei. Based on our results, we suggest that early diagnosis of infection should be made through highly sensitive and specific immunoassays. In asymptomatic but positive test cases, we confirmed the importance of conducting pathological, microbiological, and molecular examinations.(AU)

O mormo é uma enfermidade infectocontagiosa e frequentemente letal, aguda ou crônica, caracterizada por lesões respiratórias, linfáticas e cutâneas em equídeos, porém de caráter zoonótico. Objetivou-se acompanhar o desenvolvimento dos sinais clínicos e de lesões em animais infectados naturalmente por B. mallei em diferentes propriedades de criação de equídeos, e isolar e caracterizar a bactéria causadora da doença. Foram estudados dois focos oficiais para o mormo no estado de Alagoas. Realizou-se o acompanhamento clinico e imunológico dos animais nos focos, eutanásia e exame anatomopatológico dos animais, além de colheita de material para diagnóstico através de técnicas de isolamento, fenotípicas, moleculares e prova biológica. Neste estudo não se observou um padrão clínico para o diagnóstico do mormo em animais infectados com a mesma cepa de B. mallei. O diagnóstico precoce da infecção deve ser realizado por meio de testes imunológicos de elevada sensibilidade e especificidade. Nos casos assintomáticos e positivos nos testes oficiais é importante a realização do exame anatomopatológico, microbiológico e molecular.(AU)

Anatomomopathological and immunohistochemical analyses of the spleen and lymph node of dogs seropositives for leishmaniasis in serological tests / Análises anatomopatológica e imuno-histoquímica do baço e linfonodo de cães soropositivos para leishmaniose em testes sorológicos

Canine leishmaniasis (CanL) is a zoonosis caused by the protozoan of the species Leishmania infantum. The spleen and lymph nodes undergo morphological changes during CanL. This research aimed to perform an anatomopathological and immunohistochemical study of these organs in dogs reactive to leishmaniasis in the Dual-path Platform chromatographic immunoassay (DPP®) and Enzyme Immunoabsorption Assay (ELISA). Twenty-seven dogs were evaluated for anatomopathological examination with 92.6% showing changes at gross evaluation, specially splenomegaly and lymphadenomegaly. All dogs showed changes in the spleen unrelated to the parasitic load, with granulomatous splenitis being the most severe change. Diffuse cortical and paracortical hyperplasia, and hyperplasia and hypertrophy of the medullary cords were observed in the lymph node. Amastigote forms of Leishmania spp. were found in the spleen and lymph node at histopathological and immunohistochemical evaluations, with good agreement between these evaluations (k = 0.55, p = 0.00124), but no difference was observed in the parasitic intensity of these organs at immunohistochemistry (p = 0.23). It was concluded that spleen and lymph node from dogs reactive to leishmaniasis on the DPP® and ELISA tests show histomorphological changes resulting from the disease, independent to the parasitic load, as well as these organs show similar parasitic load at immunohistochemical test.

A leishmaniose canina (CanL) é uma zoonose causada pelo protozoário da espécie Leishmania infantum. O baço e os linfonodos sofrem alterações morfológicas durante o CanL. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo anatomopatológico e imuno-histoquímico desses órgãos em cães reativos para leishmaniose aos testes de Imunoensaio Cromatográfico "Dual Path Platform" (DPP®) e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Vinte e sete cães foram avaliados ao exame anatomopatológico, com 92,6% exibindo alterações à avaliação macroscópica, especialmente esplenomegalia e linfadenomegalia. Todos os cães apresentaram alterações no baço não relacionadas à carga parasitária, sendo a esplenite granulomatosa a alteração mais grave. Hiperplasia cortical e paracortical difusa e hiperplasia e hipertrofia dos cordões medulares foram observadas nos linfonodos. Formas amastigotas de Leishmania spp. foram encontradas no baço e linfonodo às avaliações histopatológica e imuno-histoquímica, com boa concordância entre os métodos (k = 0,55, p = 0,00124), mas não foi observada diferença na intensidade parasitária entre esses órgãos à imuno-histoquímica (p = 0,23). Conclui-se que baço e linfonodo de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA apresentam alterações histomorfológicas decorrentes da doença, independente da carga parasitária, assim como esses órgãos apresentam carga parasitária semelhante ao método imuno-histoquímico.

Serological survey of porcine circovirus 2 antibodies in Northeastern Brazil by immunoperoxidase monolayer assay / Investigação sorológica de circovirus suíno 2 em granjas comerciais de suínos da região Nordeste do Brasil pela técnica de imunoperoxidase em monocamada de células

Porcine circovirus 2 (PCV2) specific antibodies were evaluated in pigs at 15 to 25 weeks of age by immunoperoxidase monolayer assay. Serum samples (n = 575) were obtained from 16 commercial farms located in six states of northeastern Brazil, including two in Ceará (n = 85), three in Rio Grande do Norte (n = 92), two in Paraíba (n = 49), three in Pernambuco (n = 107), two in Alagoas (n = 39), and four in Bahia (n = 203). Out of the 575 evaluated sera, 470 (81.74%) were reagents with antibody titers ranging from 20 to 5,120. All farms presented reactive animals. There was a statistically significant difference in reactivity proportions between the states of Bahia and Ceará (p < 0.05) and between Bahia and Rio Grande do Norte (p < 0.05). This study provides the first serological investigation for PCV2 in pigs from commercial farms in Northeastern Brazil.

A presença de anticorpos específicos contra o circovirus suíno 2 (PCV2) foi avaliada em suínos com 15 a 25 semanas de idade pela técnica de imunoperoxidase em monocamada de células. As amostras de soros (n = 575) foram procedentes de 16 granjas comerciais localizadas em seis Estados da região Nordeste do Brasil, incluindo duas no Ceará (n = 85), três no Rio Grande do Norte (n = 92), duas na Paraíba (n=49), três em Pernambuco (n = 107), duas em Alagoas (n = 39) e quatro na Bahia (n = 203). Dos 575 soros avaliados, 470 (81,74%) foram reagentes com títulos de anticorpos que variaram de 20 até 5.120. Todas as granjas avaliadas apresentaram animais reagentes. Houve diferença estatística significante nas proporções de sororeatividade entre os Estados da Bahia e Ceará (p < 0,05) e entre os Estados Bahia e Rio Grande do Norte (p < 0,05). Este estudo mostra a primeira investigação sorológica para PCV2 em suínos de granjas comerciais da região Nordeste do Brasil.

Serological survey of porcine circovirus 2 antibodies in Northeastern Brazil by immunoperoxidase monolayer assay / Investigação sorológica de circovirus suíno 2 em granjas comerciais de suínos da região Nordeste do Brasil pela técnica de imunoperoxidase em monocamada de células

Porcine circovirus 2 (PCV2) specific antibodies were evaluated in pigs at 15 to 25 weeks of age by immunoperoxidase monolayer assay. Serum samples (n = 575) were obtained from 16 commercial farms located in six states of northeastern Brazil, including two in Ceará (n = 85), three in Rio Grande do Norte (n = 92), two in Paraíba (n = 49), three in Pernambuco (n = 107), two in Alagoas (n = 39), and four in Bahia (n = 203). Out of the 575 evaluated sera, 470 (81.74%) were reagents with antibody titers ranging from 20 to 5,120. All farms presented reactive animals. There was a statistically significant difference in reactivity proportions between the states of Bahia and Ceará (p < 0.05) and between Bahia and Rio Grande do Norte (p < 0.05). This study provides the first serological investigation for PCV2 in pigs from commercial farms in Northeastern Brazil.(AU)

A presença de anticorpos específicos contra o circovirus suíno 2 (PCV2) foi avaliada em suínos com 15 a 25 semanas de idade pela técnica de imunoperoxidase em monocamada de células. As amostras de soros (n = 575) foram procedentes de 16 granjas comerciais localizadas em seis Estados da região Nordeste do Brasil, incluindo duas no Ceará (n = 85), três no Rio Grande do Norte (n = 92), duas na Paraíba (n=49), três em Pernambuco (n = 107), duas em Alagoas (n = 39) e quatro na Bahia (n = 203). Dos 575 soros avaliados, 470 (81,74%) foram reagentes com títulos de anticorpos que variaram de 20 até 5.120. Todas as granjas avaliadas apresentaram animais reagentes. Houve diferença estatística significante nas proporções de sororeatividade entre os Estados da Bahia e Ceará (p < 0,05) e entre os Estados Bahia e Rio Grande do Norte (p < 0,05). Este estudo mostra a primeira investigação sorológica para PCV2 em suínos de granjas comerciais da região Nordeste do Brasil.(AU)

Fauna flebotomínica e soroprevalência para leishmaniose visceral canina em área urbana na região Centro-Oeste do Brasil / [Phlebotomine fauna and seroprevalence for canine visceral leishmaniasis in urban area from Central-West region of Brazil]

A leishmaniose visceral americana (LVA) é uma zoonose de transmissão vetorial na qual o cão tem papel importante na epidemiologia da doença. No Brasil, a elevada prevalência da infecção em cães está diretamente correlacionada com o aumento no risco de ocorrência de casos de LVA. O objetivo deste estudo foi investigar a fauna flebotomínica e verificar a soroprevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) na localidade Pedra 90, no município de Cuiabá. Para o levantamento entomológico, armadilhas CDC foram utilizadas de agosto de 2014 a julho de 2015. Na avaliação sorológica dos cães, o teste imunocromatográfico DPP LVC foi utilizado para a triagem das amostras, enquanto o ensaio imunoenzimático (EIE) para o diagnóstico da LVC (Bio-Manguinhos) foi empregado como teste confirmatório. O trabalho vem acrescentar à fauna flebotomínica do município de Cuiabá as espécies Lu. andersoni, Lu. braziliensis, Lu. bourrouli e Lu. scaffi, não registradas em publicações anteriores. Além disso, entre as espécies de flebotomíneos com importância médica, Lu. cruzi, Lu. flaviscutellata e Lu. whitmani foram capturadas. No inquérito canino, a prevalência de LVC observada na localidade Pedra 90 foi de 1,14%, indicando que a região pode ser considerada como área de transmissão.(AU)

American visceral leishmaniasis (AVL) is a vector-borne zoonosis in which the dog has an important role in the epidemiology of the disease. In Brazil, a high prevalence of canine infection is directly correlated with an increased risk of occurrence of AVL. The aim of this study was to investigate the phlebotomine fauna and seroprevalence of canine visceral leishmaniasis in Pedra 90 region of Cuiabá municipality. For the entomological survey, CDC traps were used from August 2014 to July 2015. In the serological evaluation of dogs, the immunochromatographic test DPP LVC was employed for screening the samples while enzyme-linked immunosorbent assay (Bio-Manguinhos) was used as a confirmatory assay. The previously unreported phlebotomine species Lu. andersoni, Lu. braziliensis, Lu. bourrouli, and Lu. scaffi were added to the phlebotomine fauna of Cuiabá. In addition, the medically important phlebotomine species Lu. cruzi, Lu. flaviscutellata, and Lu. whitmani were identified. The canine survey revealed the prevalence of 1.14% for canine visceral leishmaniasis in the Pedra 90 region, the region being considered a transmission area.(AU)

Fauna flebotomínica e soroprevalência para leishmaniose visceral canina em área urbana na região Centro-Oeste do Brasil / [Phlebotomine fauna and seroprevalence for canine visceral leishmaniasis in urban area from Central-West region of Brazil]

A leishmaniose visceral americana (LVA) é uma zoonose de transmissão vetorial na qual o cão tem papel importante na epidemiologia da doença. No Brasil, a elevada prevalência da infecção em cães está diretamente correlacionada com o aumento no risco de ocorrência de casos de LVA. O objetivo deste estudo foi investigar a fauna flebotomínica e verificar a soroprevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) na localidade Pedra 90, no município de Cuiabá. Para o levantamento entomológico, armadilhas CDC foram utilizadas de agosto de 2014 a julho de 2015. Na avaliação sorológica dos cães, o teste imunocromatográfico DPP LVC foi utilizado para a triagem das amostras, enquanto o ensaio imunoenzimático (EIE) para o diagnóstico da LVC (Bio-Manguinhos) foi empregado como teste confirmatório. O trabalho vem acrescentar à fauna flebotomínica do município de Cuiabá as espécies Lu. andersoni, Lu. braziliensis, Lu. bourrouli e Lu. scaffi, não registradas em publicações anteriores. Além disso, entre as espécies de flebotomíneos com importância médica, Lu. cruzi, Lu. flaviscutellata e Lu. whitmani foram capturadas. No inquérito canino, a prevalência de LVC observada na localidade Pedra 90 foi de 1,14%, indicando que a região pode ser considerada como área de transmissão.(AU)

American visceral leishmaniasis (AVL) is a vector-borne zoonosis in which the dog has an important role in the epidemiology of the disease. In Brazil, a high prevalence of canine infection is directly correlated with an increased risk of occurrence of AVL. The aim of this study was to investigate the phlebotomine fauna and seroprevalence of canine visceral leishmaniasis in Pedra 90 region of Cuiabá municipality. For the entomological survey, CDC traps were used from August 2014 to July 2015. In the serological evaluation of dogs, the immunochromatographic test DPP LVC was employed for screening the samples while enzyme-linked immunosorbent assay (Bio-Manguinhos) was used as a confirmatory assay. The previously unreported phlebotomine species Lu. andersoni, Lu. braziliensis, Lu. bourrouli, and Lu. scaffi were added to the phlebotomine fauna of Cuiabá. In addition, the medically important phlebotomine species Lu. cruzi, Lu. flaviscutellata, and Lu. whitmani were identified. The canine survey revealed the prevalence of 1.14% for canine visceral leishmaniasis in the Pedra 90 region, the region being considered a transmission area.(AU)

Epidemiological and clinical aspects of snakebites in the upper Juruá River region, western Brazilian Amazonia / Aspectos clínicos e epidemiológicos de acidentes ofídicos na região do Alto Juruá, oeste da Amazônia brasileira

This study addresses the clinical and epidemiological aspects of envenoming cases resulting from snakebites treated at a hospital in Cruzeiro do Sul, in the upper Juruá River region, western Brazilian Amazonia. The specific identity of snakes that caused the envenomings was inferred (a) from the diagnosis of patient symptoms and signs upon hospital admission, (b) by enzyme immunoassay for detection of Bothrops atrox and Lachesis muta venom from serum samples taken from patients before antivenom therapy, or (c) by direct identification of the snake, when it was brought along to the hospital or photographed. There were 133 snakebites (76.2 cases per 100,000 inhabitants) registered during one year (July 2017 to June 2018). Most snakebites (88.7%) were caused by Bothrops spp., and the rest by non-venomous snakes or dry bites. Snakebites tended to occur more often during the rainy season, coinciding with the period of greater reproductive activity of the snakes and greater availability of their prey. In addition, the increase in the water level of rivers and lakes during the rainy season tends to concentrate snakes in dry places and, thus, to increase encounters with humans. Information campaigns on prevention and first aid, specially among the most vulnerable groups (indigenous people, farmers, and children and teenagers in rural areas), and the importance of using protective equipment (boots, leggings, leather gloves) in certain high risk activities (e.g. agriculture and extractivism in forests) are fundamental for the reduction of snakebite morbidity.(AU)

Este estudo aborda os aspectos clínicos e epidemiológicos dos envenenamentos ofídicos tratados em um hospital em Cruzeiro do Sul, Acre, resultantes de acidentes que ocorreram na região do Alto Juruá, no oeste da Amazônia brasileira. A identidade específica das serpentes que causaram os envenenamentos foi inferida (a) pelos sinais e sintomas apresentados pelo paciente na admissão hospitalar, (b) por imunoensaio enzimático para detecção de veneno de Bothrops atrox e Lachesis muta em amostras de soro retiradas de pacientes antes da soroterapia, e (c) pela identificação direta da serpente, quando esta foi levada para o hospital ou fotografada. Houve 133 casos (76,2 casos por 100.000 habitantes) de acidentes ofídicos registrados durante um ano (julho 2017 a junho 2018). A maioria das picadas de serpentes (88,7%) foi causada por Bothrops spp., e o restante por espécies não peçonhentas ou picadas secas. Os acidentes ofídicos tenderam a ocorrer com maior frequência durante a estação chuvosa, coincidindo com o período de maior atividade reprodutiva das serpentes e maior disponibilidade de suas presas. Além disso, o aumento dos níveis de rios e lagos pode fazer com que esses animais procurem locais mais secos, aumentando a frequência de encontro com seres humanos. Campanhas educativas sobre prevenção e primeiros socorros, principalmente entre os grupos mais vulneráveis (indígenas, agricultores, crianças e adolescentes em áreas rurais), e sobre a importância da utilização de equipamentos de proteção (botas, perneiras, luvas de couro) em determinadas atividades de maior risco (e.g., agricultura e extrativismo em florestas), são fundamentais para reduzir a morbidade de picadas de serpentes.(AU)

Anticorpos policlonais para o imunodiagnóstico de vírus bovino / Polyclonal antibodies for the immunodiagnostic of bovine viruses

O objetivo do estudo foi produzir anticorpos policlonais para vírus bovino e testar a reatividade em imunoensaios como imunofluorescência, imunoperoxidase e slot blot. Como imunógeno utilizou-se cepas e/ou isolados dos herpesvírus bovino tipo 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5), vírus da diarreia viral bovina (BVDV), vírus respiratório sincicial bovino (BRSV), vírus da língua azul (BTV) e vírus vaccina (VACV) amplificados em cultivo celular. Os coelhos foram imunizados em intervalos regulares e o soro hiperimune produzido foi utilizado como anticorpo primário nos imunoensaios. A diluição de trabalho para cada antissoro foi determinada por diluição seriada limitante e variaram entre 1:800 e 1:51.200. As maiores diluições foram observadas para imunoperoxidase, quando comparadas com a imunofluorescência e slot blot. Diluições menores que 1:800 foram associadas com aumento de reações inespecíficas. Os antissoros anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV e -BRSV reagiram frente a isolados heterólogos em ensaios de imunofluorescência e imunoperoxidase. Conclui-se que os antissoros produzidos possuem elevadas concentrações de anticorpos específicos para os vírus e é uma alternativa para a utilização em imunoensaios.

The objective of the study was to produce polyclonal antibodies to bovine viruses and to test the reactivity in immunoassays such as immunofluorescence, immunoperoxidase and slot blot. Bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine respiratory syncytial virus (BRSV), bovine herpesvirus type 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) blue tongue virus (BTV) and vaccinia virus (VACV) were amplified in cell culture and used to immunize rabbits. Animals were immunized at regular intervals and the hyper immune serum produced was used as primary antibody in the immunoassays. The working dilution for each antiserum was determined by limiting serial dilution and varied from 1: 800 to 1: 51,200. The highest dilutions were observed for immunoperoxidase, when compared with immunofluorescence and slot blot. Dilutions lower than 1:800 were associated with the presence of nonspecific reactions. Anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV and -BRSV antisera reacted against heterologous isolates in immunofluorescence and immunoperoxidase assays. It is concluded that the produced polyclonal antibodies have high concentrations of virus-specific antibodies and are an alternative for use in immunoassays.

Anticorpos policlonais para o imunodiagnóstico de vírus bovino / Polyclonal antibodies for the immunodiagnostic of bovine viruses

O objetivo do estudo foi produzir anticorpos policlonais para vírus bovino e testar a reatividade em imunoensaios como imunofluorescência, imunoperoxidase e slot blot. Como imunógeno utilizou-se cepas e/ou isolados dos herpesvírus bovino tipo 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5), vírus da diarreia viral bovina (BVDV), vírus respiratório sincicial bovino (BRSV), vírus da língua azul (BTV) e vírus vaccina (VACV) amplificados em cultivo celular. Os coelhos foram imunizados em intervalos regulares e o soro hiperimune produzido foi utilizado como anticorpo primário nos imunoensaios. A diluição de trabalho para cada antissoro foi determinada por diluição seriada limitante e variaram entre 1:800 e 1:51.200. As maiores diluições foram observadas para imunoperoxidase, quando comparadas com a imunofluorescência e slot blot. Diluições menores que 1:800 foram associadas com aumento de reações inespecíficas. Os antissoros anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV e -BRSV reagiram frente a isolados heterólogos em ensaios de imunofluorescência e imunoperoxidase. Conclui-se que os antissoros produzidos possuem elevadas concentrações de anticorpos específicos para os vírus e é uma alternativa para a utilização em imunoensaios.(AU)

The objective of the study was to produce polyclonal antibodies to bovine viruses and to test the reactivity in immunoassays such as immunofluorescence, immunoperoxidase and slot blot. Bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine respiratory syncytial virus (BRSV), bovine herpesvirus type 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) blue tongue virus (BTV) and vaccinia virus (VACV) were amplified in cell culture and used to immunize rabbits. Animals were immunized at regular intervals and the hyper immune serum produced was used as primary antibody in the immunoassays. The working dilution for each antiserum was determined by limiting serial dilution and varied from 1: 800 to 1: 51,200. The highest dilutions were observed for immunoperoxidase, when compared with immunofluorescence and slot blot. Dilutions lower than 1:800 were associated with the presence of nonspecific reactions. Anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV and -BRSV antisera reacted against heterologous isolates in immunofluorescence and immunoperoxidase assays. It is concluded that the produced polyclonal antibodies have high concentrations of virus-specific antibodies and are an alternative for use in immunoassays.(AU)