Assessment of Cholinesterase inhibition activity of birds inhabiting pesticide exposed croplands and protected area in hot semi-arid region of Pakistan

Abstract Acetylcholinesterase (AChE) activity levels can be used as an indicator for AChE inhibition due to pesticide poisoning in bird species. We assessed the comparative brain cholinesterase (AChE) activity level of five bird species inhabiting pesticide exposed croplands and Protected Area i.e. Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber by using a spectrophotometric method. AChE activity levels ranged from 56.3 to 85.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing DVNP. However, AChE activity levels ranged from 27.6 to 79.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing croplands. AChE activity levels observed in Jungle babbler, Common babbler, and Red-vented bulbul showed significant differences (P 0.05) at two sites. However, White wagtail and Black drongo demonstrated non-significant differences (P > 0.05). Maximum inhibition was recorded in Jungle babbler (53%) followed by Common babbler (35%), Red-vented bulbul (18%), White wagtail (15%), and Black drongo (7%). The brain cholinesterase inhibition levels under-protected ecosystems (DVNP, Bhimber) and agricultural landscape suggest insecticidal contamination and its impact on avifauna diversity. The study also emphasizes on the importance of pesticide-free zones to protect the biodiversity of birds.

Resumo Os níveis de atividade da acetilcolinesterase (AChE) podem ser usados como um indicador para a inibição da AChE devido ao envenenamento por pesticidas em espécies de aves. Avaliamos o nível de atividade comparativa da colinesterase cerebral (AChE) de cinco espécies de aves que habitam áreas cultivadas expostas a pesticidas e Área Protegida, ou seja, Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber, usando um método espectrofotométrico. Os níveis de atividade da AChE variaram de 56,3 a 85,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando DVNP. No entanto, os níveis de atividade da AChE variaram de 27,6 a 79,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando áreas de cultivo. Os níveis de atividade de AChE observados no tagarela da selva, tagarela comum e bulbul vermelho exalado mostraram diferenças significativas (P 0,05) em dois locais. No entanto, alvéola branca e drongo preto demonstraram diferenças não significativas (P > 0,05). A inibição máxima foi registrada no tagarela da selva (53%), seguido pelo tagarela comum (35%), bulbul vermelho (18%), alvéola branca (15%) e drongo preto (7%). Os níveis de inibição da colinesterase cerebral nos ecossistemas subprotegidos (DVNP, Bhimber) e na paisagem agrícola sugerem contaminação por inseticida e seu impacto na diversidade da avifauna. O estudo também enfatiza a importância das zonas livres de pesticidas para proteger a biodiversidade das aves.

Seroprevalence of arboviruses in Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) of synanthropic habitats in the Iguaçu National Park, Brazilian Atlantic Forest / Soroprevalência de arbovirus em Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) de hábitos sinantrópicos no Parque Nacional do Iguaçu, Mata Atlântica brasileira

ABSTRACT: Arboviruses are agents transmitted by arthropods and represent a considerable threat to public health worldwide, causing diseases in humans and animals. A serological investigation was carried out to detect total antibodies against different types of arboviruses in free-living coatis (Nasua nasua) from the Iguaçu National Park (INP) through the Hemagglutination Inhibition test. Serum samples were tested using antigens from 33 arboviruses belonging to the genera Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus, and Phlebovirus. The data showed that 23.6% (17/72) of coatis were seropositive for at least one of the tested antigens, including monotypic and heterotypic reactions. Seropositivity was detected for Alphavirus (5.9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64.7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, WNV, DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4, and NJLV), Phlebovirus (88.2%, 15/17; ICOV and BUJV) and Orthobunyavirus (5.9%, 1/17; ORIV). The presence of antibodies to these viruses in coatis from INP indicated an apparent silent circulation of arbovirus, implying N. nasua to be a possible amplifying host of these arboviruses in the studied area. The data reported also serve as a warning about the possible risk of establishing an arbovirus transmission cycle involving vector arthropods and coatis, or even other wild animals, consequently, including humans in this transmission chain.

RESUMO: Os arbovírus são agentes transmitidos por artrópodes que representam considerável ameaça à saúde pública em todo o mundo, causando doenças em humanos e animais. Neste trabalho foi realizada investigação sorológica para detecção de anticorpos totais contra diferentes tipos de arbovírus em quatis (Nasua nasua) de vida livre do Parque Nacional do Iguaçu (PNI) através do teste de Inibição da Hemaglutinação. Amostras de soro foram testadas utilizando-se antígenos de 33 arbovírus pertencentes aos gêneros Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus. As análises evidenciaram que 23,6% (17/72) dos quatis apresentaram soropositividade para pelo menos um dos antígenos testados, incluindo reações monotípicas e heterotípicas. Foi detectada soropositividade para Alphavirus (5,9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64,7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, VNO, DEN1, DEN2, DEN3, DEN4, NJLV), Phlebovirus (88,2%, 15/17; ICOV, BUJV) e Orthobunyavirus (5,9%, 1/17; ORIV). A presença de anticorpos para esses vírus em quatis do PNI indica uma aparente transmissão silenciosa de arbovírus, incluindo N. nasua como um possível amplificador destes arbovírus na área estudada. Os dados encontrados servem de alerta quanto ao possível risco de estabelecimento de um ciclo de transmissão de arbovírus envolvendo insetos vetores e quatis, ou ainda, outros animais silvestres, consequentemente, podendo incluir o homem nessa cadeia de transmissão.

Assessment of Cholinesterase inhibition activity of birds inhabiting pesticide exposed croplands and protected area in hot semi-arid region of Pakistan / Avaliação da atividade de inibição da colinesterase de pássaros que habitam áreas cultivadas e áreas protegidas expostas a pesticidas na região semiárida quente do Paquistão

Acetylcholinesterase (AChE) activity levels can be used as an indicator for AChE inhibition due to pesticide poisoning in bird species. We assessed the comparative brain cholinesterase (AChE) activity level of five bird species inhabiting pesticide exposed croplands and Protected Area i.e. Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber by using a spectrophotometric method. AChE activity levels ranged from 56.3 to 85.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing DVNP. However, AChE activity levels ranged from 27.6 to 79.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing croplands. AChE activity levels observed in Jungle babbler, Common babbler, and Red-vented bulbul showed significant differences (P 0.05). Maximum inhibition was recorded in Jungle babbler (53%) followed by Common babbler (35%), Red-vented bulbul (18%), White wagtail (15%), and Black drongo (7%). The brain cholinesterase inhibition levels under-protected ecosystems (DVNP, Bhimber) and agricultural landscape suggest insecticidal contamination and its impact on avifauna diversity. The study also emphasizes on the importance of pesticide-free zones to protect the biodiversity of birds.

Os níveis de atividade da acetilcolinesterase (AChE) podem ser usados como um indicador para a inibição da AChE devido ao envenenamento por pesticidas em espécies de aves. Avaliamos o nível de atividade comparativa da colinesterase cerebral (AChE) de cinco espécies de aves que habitam áreas cultivadas expostas a pesticidas e Área Protegida, ou seja, Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber, usando um método espectrofotométrico. Os níveis de atividade da AChE variaram de 56,3 a 85,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando DVNP. No entanto, os níveis de atividade da AChE variaram de 27,6 a 79,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando áreas de cultivo. Os níveis de atividade de AChE observados no tagarela da selva, tagarela comum e bulbul vermelho exalado mostraram diferenças significativas (P 0,05). A inibição máxima foi registrada no tagarela da selva (53%), seguido pelo tagarela comum (35%), bulbul vermelho (18%), alvéola branca (15%) e drongo preto (7%). Os níveis de inibição da colinesterase cerebral nos ecossistemas subprotegidos (DVNP, Bhimber) e na paisagem agrícola sugerem contaminação por inseticida e seu impacto na diversidade da avifauna. O estudo também enfatiza a importância das zonas livres de pesticidas para proteger a biodiversidade das aves.

Assessment of Cholinesterase inhibition activity of birds inhabiting pesticide exposed croplands and protected area in hot semi-arid region of Pakistan / Avaliação da atividade de inibição da colinesterase de pássaros que habitam áreas cultivadas e áreas protegidas expostas a pesticidas na região semiárida quente do Paquistão

Abstract Acetylcholinesterase (AChE) activity levels can be used as an indicator for AChE inhibition due to pesticide poisoning in bird species. We assessed the comparative brain cholinesterase (AChE) activity level of five bird species inhabiting pesticide exposed croplands and Protected Area i.e. Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber by using a spectrophotometric method. AChE activity levels ranged from 56.3 to 85.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing DVNP. However, AChE activity levels ranged from 27.6 to 79.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing croplands. AChE activity levels observed in Jungle babbler, Common babbler, and Red-vented bulbul showed significant differences (P < 0.05) at two sites. However, White wagtail and Black drongo demonstrated non-significant differences (P > 0.05). Maximum inhibition was recorded in Jungle babbler (53%) followed by Common babbler (35%), Red-vented bulbul (18%), White wagtail (15%), and Black drongo (7%). The brain cholinesterase inhibition levels under-protected ecosystems (DVNP, Bhimber) and agricultural landscape suggest insecticidal contamination and its impact on avifauna diversity. The study also emphasizes on the importance of pesticide-free zones to protect the biodiversity of birds.

Resumo Os níveis de atividade da acetilcolinesterase (AChE) podem ser usados ​​como um indicador para a inibição da AChE devido ao envenenamento por pesticidas em espécies de aves. Avaliamos o nível de atividade comparativa da colinesterase cerebral (AChE) de cinco espécies de aves que habitam áreas cultivadas expostas a pesticidas e Área Protegida, ou seja, Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber, usando um método espectrofotométrico. Os níveis de atividade da AChE variaram de 56,3 a 85,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando DVNP. No entanto, os níveis de atividade da AChE variaram de 27,6 a 79,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando áreas de cultivo. Os níveis de atividade de AChE observados no tagarela da selva, tagarela comum e bulbul vermelho exalado mostraram diferenças significativas (P < 0,05) em dois locais. No entanto, alvéola branca e drongo preto demonstraram diferenças não significativas (P > 0,05). A inibição máxima foi registrada no tagarela da selva (53%), seguido pelo tagarela comum (35%), bulbul vermelho (18%), alvéola branca (15%) e drongo preto (7%). Os níveis de inibição da colinesterase cerebral nos ecossistemas subprotegidos (DVNP, Bhimber) e na paisagem agrícola sugerem contaminação por inseticida e seu impacto na diversidade da avifauna. O estudo também enfatiza a importância das zonas livres de pesticidas para proteger a biodiversidade das aves.

Assessment of Cholinesterase inhibition activity of birds inhabiting pesticide exposed croplands and protected area in hot semi-arid region of Pakistan / Avaliação da atividade de inibição da colinesterase de pássaros que habitam áreas cultivadas e áreas protegidas expostas a pesticidas na região semiárida quente do Paquistão

Acetylcholinesterase (AChE) activity levels can be used as an indicator for AChE inhibition due to pesticide poisoning in bird species. We assessed the comparative brain cholinesterase (AChE) activity level of five bird species inhabiting pesticide exposed croplands and Protected Area i.e. Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber by using a spectrophotometric method. AChE activity levels ranged from 56.3 to 85.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing DVNP. However, AChE activity levels ranged from 27.6 to 79.9 µmol/min/g of brain tissue of birds representing croplands. AChE activity levels observed in Jungle babbler, Common babbler, and Red-vented bulbul showed significant differences (P < 0.05) at two sites. However, White wagtail and Black drongo demonstrated non-significant differences (P > 0.05). Maximum inhibition was recorded in Jungle babbler (53%) followed by Common babbler (35%), Red-vented bulbul (18%), White wagtail (15%), and Black drongo (7%). The brain cholinesterase inhibition levels under-protected ecosystems (DVNP, Bhimber) and agricultural landscape suggest insecticidal contamination and its impact on avifauna diversity. The study also emphasizes on the importance of pesticide-free zones to protect the biodiversity of birds.(AU)

Os níveis de atividade da acetilcolinesterase (AChE) podem ser usados como um indicador para a inibição da AChE devido ao envenenamento por pesticidas em espécies de aves. Avaliamos o nível de atividade comparativa da colinesterase cerebral (AChE) de cinco espécies de aves que habitam áreas cultivadas expostas a pesticidas e Área Protegida, ou seja, Deva Vatala National Park (DVNP), Bhimber, usando um método espectrofotométrico. Os níveis de atividade da AChE variaram de 56,3 a 85,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando DVNP. No entanto, os níveis de atividade da AChE variaram de 27,6 a 79,9 µmol / min / g de tecido cerebral de aves representando áreas de cultivo. Os níveis de atividade de AChE observados no tagarela da selva, tagarela comum e bulbul vermelho exalado mostraram diferenças significativas (P < 0,05) em dois locais. No entanto, alvéola branca e drongo preto demonstraram diferenças não significativas (P > 0,05). A inibição máxima foi registrada no tagarela da selva (53%), seguido pelo tagarela comum (35%), bulbul vermelho (18%), alvéola branca (15%) e drongo preto (7%). Os níveis de inibição da colinesterase cerebral nos ecossistemas subprotegidos (DVNP, Bhimber) e na paisagem agrícola sugerem contaminação por inseticida e seu impacto na diversidade da avifauna. O estudo também enfatiza a importância das zonas livres de pesticidas para proteger a biodiversidade das aves.(AU)

Mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus

Abstract This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.

Resumo Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract

Abstract Many soil microorganisms i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence analysis. Finally, the isolates were identified as B. cereus accession number LC538271and K. pneumoniae accession number MT078679. Analysis of bacterial extract S20 through GC-MS indicated the presence of 8 compounds of diverse nature and structure. Present study suggests that wastes of pharmaceutical and poultry feed industry may have antibiotic producing bacteria. These bacteria could be utilized for the production of antibiotics. B. cereus and K. pneumoniae isolated from wastes of poultry feed and pharmaceutical industries have the potential to produce antibiotics and could be used to control the microbial growth.

Resumo Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S rRNA. Finalmente, os isolados foram identificados como B. cereus número de acesso LC538271 e K. pneumoniae número de acesso MT078679. A análise do extrato bacteriano S20 por meio de GC-MS indicou a presença de oito compostos de natureza e estrutura diversas. O presente estudo sugere que resíduos da indústria farmacêutica e de ração para aves podem conter bactérias produtoras de antibióticos. Essas bactérias podem ser utilizadas para a produção de antibióticos B. cereus e K. pneumoniae isolados de resíduos de rações de aves e indústrias farmacêuticas têm potencial para produzir antibióticos e podem ser usados para controlar o crescimento microbiano.

Filtrates from cultures of endophytic fungi isolated from leaves of Copaifera oblongifolia (Fabaceae) affect germination and seedling development differently

Abstract Interactions between endophytic fungi (EFs) and their host plants range from positive to neutral to negative. The results of such interactions can vary depending on the organ of the infected host plant. EFs isolated from the leaves of some species of plants have potential for use as agents to inhibit seed germination and control invasive plants. The objectives of this study were to identify EFs present in the leaves of Copaifera oblongifolia and to evaluate the role of these fungi in seed germination and seedling development. A total of 11 species of EFs were isolated, which were identified using the internal transcribed spacers (ITS) sequence of the nuclear ribosomal DNA. The isolated species of EFs are generalists and probably are transmitted horizontally. Laboratory tests revealed that filtrates of these fungal isolates differently affect seed germination and seedling development of C. oblongifolia. The species Curvularia intermedia, Neofusicoccum parvum, Pseudofusicoccum stromaticum and Phomopsis sp. negatively affected seed germination, with N. parvum standing out for its negative effects, inhibiting seedling germination and survival in 89 and 222%, respectively. In addition, Cochliobolus intermedius negatively affected seedling development. Thus, the combined use of N. parvum and C. intermedius, or products from the metabolism of these microorganisms, in the control of invasive plants deserves attention from future studies.

Resumo As interações entre fungos endofíticos (FEs) e suas plantas hospedeiras variam de positivas, neutras a negativas. Os resultados destas interações podem variar dependendo do órgão da planta hospedeira infectada. FEs isolados de folhas de algumas espécies de plantas têm potencial para serem usados como agentes inibidores da germinação de sementes e no controle de plantas invasoras. Os objetivos deste estudo foram identificar os FEs presentes nas folhas de Copaifera oblongifolia e avaliar o papel destes fungos na germinação das sementes e no desenvolvimento das plântulas. Um total de 11 espécies de FEs foi isolado das folhas de C. oblongifolia e identificado através da sequência dos espaçadores internos transcritos do DNA ribossomal nuclear. As espécies de FEs isoladas são generalistas e provavelmente devem ser transmitidas horizontalmente. Os resultados dos testes de germinação mostraram que filtrados destes isolados fúngicos podem afetar diferentemente a germinação das sementes e o desenvolvimento das plântulas de C. oblongifolia. As espécies Curvularia intermedia, Neofusicoccum parvum, Pseudofusicoccum stromaticum e Phomopsis sp. afetaram negativamente a germinação das sementes de C. oblongifolia. Dentre estas espécies devemos destacar que N. parvum reduziu a germinação e a sobrevivência das plântulas em 89 e 222%, respectivamente. Além disso, Cochiliobolus intermedius afetou negativamente o desenvolvimento das plântulas. Assim, o uso combinado de N. parvum e C. intermedius, ou de produtos do metabolismo destas espécies de fungos, têm potencial para serem usados no manejo de plantas invasoras.

Inhibition of mycelial growth, conidial germination, and Botrytis cinerea Pers: Fr colonization in begonia with biocompatible products

This study evaluated the effects of potassium and sodium carbonate and bicarbonate, Bacillus subtilis (Cohn, 1872) QST-713, Bacillus pumilus (Meyer & Gottheil, 1901) QST-2808, and crude and roasted coffee oils on the inhibition of mycelial growth and conidial germination in Botrytis cinerea Pers.: Fr and the colonization of begonia (Begonia elatior Hort. ex Steud) leaf discs by B. cinerea inoculated before, simultaneously and after with these alternative products. The assays were carried out using the Baladin begonia cultivar. The inhibition of B. cinerea mycelial growth and conidial germination was proportional to increases in the concentration of all the products. The inhibition of conidial germination was directly proportional to the concentrations of B. pumilus QST-2808 and B. subtilis QST-713. Coffee oils were less efficient in inhibiting germination than the other products. The crude and roasted coffee oils, potassium and sodium carbonates and bicarbonates, and B. pumilus and B. subtilis sprayed 24 h before, simultaneously, or 24 h after pathogen inoculation inhibited the colonization of begonia leaf discs by B. cinerea. The positive results for the suppression of B. cinerea by the alternative products tested herein merit scrutiny. There is a pressing need to evaluate these products in the management of gray mold, as the severity of this disease is usually high under favorable conditions in greenhouses.

Metabolic profile, antimicrobial and toxicity evaluation of Azadirachta indica roots / Perfil metabólico, atividade antimicrobiana e de toxicidade das raízes de Azadirachta indica

ABSTRACT: The constituents of the hydroethanolic extract ofAzadiractaindicaroot were investigated using ultra-performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight mass spectrometry (UPLC-QTOOF-MSE). Acute toxicity was evaluated in an experimental animal model. We investigated the antibacterial activities ofA. indicaroots againstSalmonella typhimuriumandStaphylococcus aureusand the antifungal activities against strains ofTrichophyton rubrum, Candida albicansandCandida tropicalis. We identified nine secondary metabolites in the hydroethanolic extract by UPLC-QTOOF-MSE. The extract was highly effective in inhibiting the growth of T. rubrum strains, so it can be effective in combating the dermatophyte tested,but it had no inhibition potential on any bacterial strains orCandidaspecies evaluated. It was possible to infer that the extract had no acute toxicity in relation to the animal model Danio rerio. Therefore, since neem has a high bioactive potential and adapts well to the climate of semiarid regions, growing this species could become a source of income for farmers by its use to produce naturals fungicide and drug, as alternatives to conventional products, which can cause microbiological resistance and/or are toxic to the environment, besides being expensive.

RESUMO: Os constituintes do extrato hidroetanólico da raiz deA. indicaforam investigados por cromatografia líquida de ultra-alta performance acoplada à espectrometria de massas do tipo quadrupolo-tempo de voo (UPLC-QTOOF-MSE). A toxicidade aguda foi avaliada em modelo animal. Investigamos as atividades antibacterianas contra Salmonella typhimuriumeStaphylococcus aureuse as atividades antifúngicas contra cepas deTrichophyton rubrum, Candida albicanseCandida tropicalis. Identificamos nove metabólitos secundários no extrato etanólico por UPLC-QTOOF-MSE. O extrato foi altamente eficaz na inibição do crescimento de cepas de T. rubrum, podendo ser eficaz no combate ao dermatofito avaliado, mas não apresentou potencial de inibição em nenhuma cepa bacteriana ou espécies deCandidaavaliadas. Também foi possível inferir que o extrato não apresentou toxicidade aguda em relação ao modelo animalDanio rerio. Portanto, como o Neem tem alto potencial bioativo e se adapta bem ao clima das regiões semiáridas, o cultivo dessa espécie pode se tornar uma fonte de renda para os agricultores a partir da utilização da planta para produção de fungicida e/ou fármaco naturais como alternativa aos produtos convencionais, que podem causar resistência microbiológica e/ou são tóxicas ao meio ambiente, além de serem caros.

Mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus / Atividades mosquitocidas do extrato de n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus

This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.

Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.

Probiotic yeast Saccharomyces cerevisiae Az-12 isolated from pomegranate juice presented inhibitory effects against pathogenic bacteria / Levedura probiótica Saccharomyces cerevisiae Az-12 isolada de suco de romã apresentando efeitos inibitórios contra bactérias patogênicas

The potential probiotic yeast was isolated from the Kyzyl Anor pomegranate variety growing in the Turkestan region (Kazakhstan). The yeast strain was identified as Saccharomyces cerevisiae Az-12. Molecular genetic identification was carried out using the Sanger sequencing method. The degree of homology of the S. cerevisiae Az-12 strain with the strain MH608341.1 Saccharomyces cerevisiae isolate extr03 was 99.65%. Antagonistic effect of the yeast against pathogenic bacteria was confirmed according inhibition zones for Staphylococcus aureus 13.5 ± 0.05 mm; the inhibition zones for Escherichia coli 12.8 ± 0.05 mm; and 10.7 ± 0.05 mm for Pseudomonas aeruginosa. Scanning microscopy of S. cerevisiae Az-12 and S. aureus confirmed the adhesive ability of the yeast cell surface to S. aureus. S. cerevisiae Az-12 were chosen as the most promising, as they are able to quickly ferment juices. Functional drinks containing pomegranate juice and yeast with a probiotic effect can be considered as a useful synbiotic product formulation.

A levedura probiótica potencial foi compreendida da variedade de romã Kyzyl Anor que cresce na região do Turquestão (Cazaquistão). A cepa de levedura foi identificada como Saccharomyces cerevisiae Az-12. A identificação genética molecular foi realizada pelo método de sequenciamento de Sanger. O grau de homologia da cepa S. cerevisiae Az-12 com a cepa MH608341.1 Saccharomyces cerevisiae isolado extr-03 foi de 99,65%. O efeito antagônico da levedura contra bactérias patogênicas foi confirmado de acordo com as zonas de inibição para Staphylococcus aureus 13,5 ± 0,05 mm; as zonas de inibição para Escherichia coli 12,8 ± 0,05 mm; e 10,7 ± 0,05 mm para Pseudomonas aeruginosa. A microscopia de varredura de S. cerevisiae Az-12 e S. aureus confirmou a capacidade de adesão da superfície celular de levedura a S. aureus. S. cerevisiae Az-12 foram escolhidas como as mais promissoras, pois são capazes de fermentar sucos rapidamente. Bebidas funcionais contendo suco de romã e fermento com efeito probiótico podem ser consideradas como uma formulação de produto simbiótico útil.

Mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus / Atividades mosquitocidas do extrato de n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus

Abstract This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.

Resumo Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.

Seroprevalence of arboviruses in Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) of synanthropic habitats in the Iguaçu National Park, Brazilian Atlantic Forest / Soroprevalência de arbovirus em Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) de hábitos sinantrópicos no Parque Nacional do Iguaçu, Mata Atlântica brasileira

Os arbovírus são agentes transmitidos por artrópodes que representam considerável ameaça à saúde pública em todo o mundo, causando doenças em humanos e animais. Neste trabalho foi realizada investigação sorológica para detecção de anticorpos totais contra diferentes tipos de arbovírus em quatis (Nasua nasua) de vida livre do Parque Nacional do Iguaçu (PNI) através do teste de Inibição da Hemaglutinação. Amostras de soro foram testadas utilizando-se antígenos de 33 arbovírus pertencentes aos gêneros Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus. As análises evidenciaram que 23,6% (17/72) dos quatis apresentaram soropositividade para pelo menos um dos antígenos testados, incluindo reações monotípicas e heterotípicas. Foi detectada soropositividade para Alphavirus (5,9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64,7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, VNO, DEN1, DEN2, DEN3, DEN4, NJLV), Phlebovirus (88,2%, 15/17; ICOV, BUJV) e Orthobunyavirus (5,9%, 1/17; ORIV). A presença de anticorpos para esses vírus em quatis do PNI indica uma aparente transmissão silenciosa de arbovírus, incluindo N. nasua como um possível amplificador destes arbovírus na área estudada. Os dados encontrados servem de alerta quanto ao possível risco de estabelecimento de um ciclo de transmissão de arbovírus envolvendo insetos vetores e quatis, ou ainda, outros animais silvestres, consequentemente, podendo incluir o homem nessa cadeia de transmissão.

Arboviruses are agents transmitted by arthropods and represent a considerable threat to public health worldwide, causing diseases in humans and animals. A serological investigation was carried out to detect total antibodies against different types of arboviruses in free-living coatis (Nasua nasua) from the Iguaçu National Park (INP) through the Hemagglutination Inhibition test. Serum samples were tested using antigens from 33 arboviruses belonging to the genera Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus, and Phlebovirus. The data showed that 23.6% (17/72) of coatis were seropositive for at least one of the tested antigens, including monotypic and heterotypic reactions. Seropositivity was detected for Alphavirus (5.9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64.7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, WNV, DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4, and NJLV), Phlebovirus (88.2%, 15/17; ICOV and BUJV) and Orthobunyavirus (5.9%, 1/17; ORIV). The presence of antibodies to these viruses in coatis from INP indicated an apparent silent circulation of arbovirus, implying N. nasua to be a possible amplifying host of these arboviruses in the studied area. The data reported also serve as a warning about the possible risk of establishing an arbovirus transmission cycle involving vector arthropods and coatis, or even other wild animals, consequently, including humans in this transmission chain.

Mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus / Atividades mosquitocidas do extrato de n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus

This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.(AU)

Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.(AU)

Portrayal of Punica granatum L. peel extract through High Performance Liquid Chromatography and antimicrobial activity evaluation

Abstract Increasing trend in antimicrobial resistance and failure of chemically synthesized antibiotics lead to discover alternative methods for the treatment of bacterial infections. Various medicinal plants are in use traditionally and their active compounds can be further applied for treatment of bacterial diseases. This study was designed to determine the antibacterial activity of Punica granatum (P. granatum L.) (pomegranate) peel extract against Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) and Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae)] and gram-positive bacterium [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. Methanolic extract of P. granatum L. peel was prepared by Soxhlet apparatus method. Total flavonoid and phenolic contents from the extract were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The antibacterial activity of P. granatum L. peel extract was evaluated through agar well diffusion method. HPLC showed the range of phenolics (gallic acid, caffeic acid, benzoic acid, cinnamic acid) and flavonoid compounds. The chemical structures of flavonoid and phenolics found in the methanolic extract of P. granatum L. peel have been reported for the first time. The methanolic peel extract (50 ul) of yellow P. granatum L. showed 26, 10, 10 and 9mm zones of inhibition (ZOI) against S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. The methanolic extract of red P. granatum L. (100 ul) showed 27, 8, 12 and 15 mm ZOI against Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae and E. coli, respectively. Highest ZOI was observed against Staph. aureus. Many of the bacteria studied in the present work may cause serious gastrointestinal infections, which can lead to hemorrhagic diarrhea in children. These infections can be life-threatening to young children and the elderly. There is an incentive to find alternative control measures, such as plant and herbal extracts, especially in lesser-developed countries where traditional antibiotics may not be readily available.

Resumo A tendência crescente na resistência antimicrobiana e na falha dos antibióticos sintetizados quimicamente leva à descoberta de métodos alternativos para o tratamento de infecções bacterianas. Várias plantas medicinais estão em uso tradicionalmente e seus compostos ativos podem ser posteriormente aplicados para o tratamento de doenças bacterianas. Este estudo foi desenhado para determinar a atividade antibacteriana do extrato de casca de Punica granatum (P. granatum L.) (romã) contra Enterobacteriaceae [Escherichia coli (E. coli), Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) e Shigella Dysenteriae (S. Dysenteriae) ] e bactéria gram-positiva [Staphylococcus aureus (Staph aureus)]. O extrato metanólico da casca de P. granatum L. foi preparado pelo método do aparelho de Soxhlet. O conteúdo total de flavonoides e fenólicos do extrato foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A atividade antibacteriana do extrato da casca de P. granatum L. foi avaliada através do método de difusão em ágar. HPLC mostrou a gama de compostos fenólicos (ácido gálico, ácido cafeico, ácido benzoico, ácido cinâmico) e flavonoides. As estruturas químicas de flavonoides e fenólicos encontradas no extrato metanólico da casca de P. granatum L. foram relatadas pela primeira vez. O extrato metanólico da casca (50 ul) de P. granatum L. amarelo apresentou zonas de inibição (ZOI) de 26, 10, 10 e 9mm contra S. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O extrato metanólico de P. granatum L. vermelho (100 ul) apresentou 27, 8, 12 e 15 mm IOI contra Staph. aureus, S. Typhimurium, S. Dysenteriae e E. coli, respectivamente. O ZOI mais alto foi observado contra Staph. aureus. Muitas das bactérias estudadas no presente trabalho podem causar infecções gastrointestinais graves, que podem levar à diarreia hemorrágica em crianças. Essas infecções podem ser fatais para crianças pequenas e idosos. Há um incentivo para encontrar medidas de controle alternativas, como extratos de plantas e ervas, especialmente em países menos desenvolvidos, onde os antibióticos tradicionais podem não estar prontamente disponíveis.

Protective effects of Zizyphus oxyphyla on liver and kidney related serum biomarkers in (CCl4) intoxicate rabbits

Abstract The study was aimed to evaluate the therapeutic effects of Zizyphus oxyphyla leaves methanolic (ZOX-LME), on serum liver, kidney and hematology along with other serum parameters in Carbon tetrachloride (CCl4) intoxicated rabbits. Experimental animals were divided into five groups, six rabbits in each. These were: group NC (normal control), group, TC (toxic control) and group ST i.e. silymarine administered group at dose rate (50) mg/kg body weight (BW). Group ET1 and group ET2 treated with (ZOX-LME) at dose 200 mg/kg BW and 400 mg/kg BW. CCl4 administration caused significant (P> 0.05) impairment in serum liver enzymes, blood factors and other serum indices. Treatment with (ZOX-LME) significantly (P 0.05) reduced and normalized the levels of serum alanine transaminase (ALT) aspartate transaminase (AST) and alkaline phosphatase (ALP) and hematological indices. Also significant (P 0.05) reduction was observed in creatinine, urea, uric acid, blood urea nitrogen (BUN), and albumin and glucose concentrations. The altered levels of lipid profile and serum electrolytes (Ca, Mg, Cl, Na, K, and P) were significantly (P 0.05) change toward normal levels with (ZOX-LME) feeding. In addition (ZOX-LME) ingestion caused significant improvement in GSH, GST and CAT levels, while reducing the TBARS levels, exhibited antioxidant capacity. Also (ZOX-LME) showed increase inhibition against percent scavenging of 2, 2-diphenile-1-picrylehydrazyle (DPPH) free radical. Significant (P 0.05) normalizing effects were observed with high dose 400 mg/kg BW of (ZOX-LME and were equivalent to silymarine administered groups. The histological study of liver supported the hepatoprotective and renal curative activity of (ZOX-LME).

Resumo O estudo teve como objetivo avaliar os efeitos terapêuticos das folhas metanólicas de Zizyphus oxyphyla (ZOX-LME) no fígado, rim e hematologia séricos, juntamente com outros parâmetros séricos em coelhos intoxicados com tetracloreto de carbono (CCl4). Os animais experimentais foram divididos em cinco grupos, seis coelhos em cada. Estes foram: grupo NC (controle normal), grupo TC (controle tóxico) e grupo ST, isto é, grupo administrado com silimarina na taxa de dose (50) mg / kg de peso corporal (PC). Grupo ET1 e grupo ET2 tratado com (ZOX-LME) na dose de 200 mg / kg de peso corporal e 400 mg / kg de peso corporal. A administração de CCl4 causou prejuízo significativo (P > 0,05) nas enzimas hepáticas séricas, fatores sanguíneos e outros índices séricos. O tratamento com (ZOX-LME) reduziu significativamente (P 0,05) e normalizou os níveis de alanina transaminase (ALT), aspartato transaminase (AST) e fosfatase alcalina (ALP) e os índices hematológicos. Também foi observada redução significativa (P 0,05) nas concentrações de creatinina, ureia, ácido úrico, nitrogênio ureico no sangue (BUN), albumina e glicose. Os níveis alterados de perfil lipídico e eletrólitos séricos (Ca, Mg, Cl, Na, K e P) foram significativamente (P 0,05) mudando em direção aos níveis normais com a alimentação (ZOX-LME). Além disso, a ingestão de (ZOX-LME) causou melhora significativa nos níveis de GSH, GST e CAT, enquanto reduzia os níveis de TBARS, exibindo capacidade antioxidante. Também (ZOX-LME) mostrou inibição aumentada contra a eliminação percentual do radical livre 2, 2-difenila-1-picrilehidrazila (DPPH). Efeitos de normalização significativos (P 0,05) foram observados com altas doses de 400 mg / kg de peso corporal de (ZOX-LME) e foram equivalentes aos grupos administrados com silimarina. O estudo histológico do fígado confirmou a atividade hepatoprotetora e curativa renal de (ZOX-LME).

Evaluation of antibacterial activity of vitamin C against human bacterial pathogens

Abstract Now a days multidrug resistance phenomenon has become the main cause for concern and there has been an inadequate achievement in the development of novel antibiotics to treat the bacterial infections. Therefore, there is an unmet need to search for novel adjuvant. Vitamin C is one such promising adjuvant. The present study was aimed to elucidate the antibacterial effect of vitamin C at various temperatures (4°C, 37°C and 50°C) and pH (3, 8, and 11), against Gram-positive and Gram-negative bacteria at various concentrations (5-20 mg/ml) through agar well diffusion method. Growth inhibition of all bacterial strains by vitamin C was concentration-dependent. Vitamin C significantly inhibited the growth of Gram-positive bacteria: Bacillus licheniformis (25.3 ± 0.9 mm), Staphylococcus aureus (22.0 ± 0.6 mm), Bacillus subtilis (19.3 ± 0.3 mm) and Gram-negative bacteria: Proteus mirabilis (27.67 ± 0.882 mm), Klebsiella pneumoniae (21.33±0.9 mm), Pseudomonas aeruginosa (18.0 ± 1.5 mm) and Escherichia coli (18.3 ± 0.3 mm). The stability of vitamin C was observed at various pH values and various temperatures. Vitamin C showed significant antibacterial activity at acidic pH against all bacterial strains. Vitamin C remained the stable at different temperatures. It was concluded that vitamin C is an effective and safe antibacterial agent that can be used in the future as an adjunct treatment option to combat infections in humans.

Resumo Agora, a resistência antimicrobiana de um dia em patógenos aos antibióticos tornou-se a principal causa de preocupação e houve uma realização inadequada no desenvolvimento de novos antibióticos para tratar infecções bacterianas. Portanto, há uma necessidade de pesquisar um novo adjuvante, e a vitamina C é um desses adjuvantes promissores. O objetivo do presente estudo foi elucidar o efeito antibacteriano da vitamina C em diferentes temperaturas (4 °C, 37 °C e 50 °C) e pH (3, 8 e 11), contra Gram-positivos e Gram-cepas bacterianas negativas em várias concentrações (5-20 mg / ml) através do método de difusão em ágar bem. A inibição do crescimento de todas as cepas bacterianas pela vitamina C era dependente da concentração. A vitamina C inibiu significativamente o crescimento de bactérias Gram-positivas: Bacillus licheniformis (25,3 ± 0,9 mm), Staphylococcus aureus (22,0 ± 0,6 mm), Bacillus subtilis (19,3 ± 0,3 mm) e bactérias Gram- negativas: Proteus mirabilis (27,7 ± 0,9 mm), Klebsiella pneumoniae (21,3 ± 0,9 mm), Pseudomonas aeruginosa (18,0 ± 1,5 mm) e Escherichia coli (18,3 ± 0,3 mm). A estabilidade da vitamina C foi observada em vários valores de pH e várias temperaturas. A vitamina C mostrou atividade antibacteriana significativa em pH ácido contra todas as cepas bacterianas. A estabilidade da vitamina C permaneceu nas mesmas diferentes temperaturas (4 °C, 37 °C e 50 °C). Concluímos que a vitamina C é um agente antibacteriano eficaz e seguro que pode ser usado no futuro como uma opção de tratamento auxiliar para combater infecções em humanos, pois pode apoiar o sistema imunológico diretamente.

Bioactive properties of Persea lingue Ness (Lauraceae) fruit and leaf extracts

Abstract Persea lingue Ness is a tree species that lives mainly in temperate forests of south-central Chile. Its leaves are used in ethnomedicine, the fruit is a drupe similar to that of the avocado and has not been studied. The aim of this study was to determine the cytotoxicity in leukemia cell and antibacterial activity, along with some chemical content characteristics of P. lingue fruit and leaf extracts. The antibacterial activity was determined by the inhibition of bacterial growth in liquid medium assay against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The leukemia cell lines Kasumi-1 and Jurkat were used to evaluate the cytotoxic activity by using propidium iodide and AlamarBlue assays. Total phenolic, flavonoid, condensed tannin, alkaloid and lipid contents were evaluated in the fruit and in the leaf extracts. The antioxidant activity of both extracts were also elavaluated. Leaf extract presented the highest content of total phenols, condensed tannins and flavonoids, and also the highest antioxidant activity. While the fruit extract has a higher amount of lipids and alkaloids and the high antibacterial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium and Micrococcus luteus. The leaf extract only showed activity against M. luteus. Concerning the cytotoxic activity, only the fruit extract showed cytotoxicity against the cell lines Jurkat and Kasumi-1. P. lingue fruit extract is a potential source of biologically active molecules for the development of new drugs to be used in some types of leukemia, as well as antibacterial agent.

Resumo Persea lingue Ness é uma árvore que vive principalmente na floresta temperada do centro-sul do Chile. As folhas são usadas na etnomedicina. O fruto é uma drupa similar ao abacate e que nunca foi pesquisada anteriormente. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a citotoxicidade em células leucêmicas e as atividades antibacterianas, assim como algumas características químicas do extrato de fruto e da folha do P. lingue. As atividades antibacterianas foram determinadas pelo método da inibição do crescimento bacteriano em meio líquido empregando-se bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As linhagens celulares leucêmicas, Kasumi-1 e Jurkat foram usadas para avaliar a atividade citotóxica em ensaios empregando-se iodeto de propídio e AlamarBlue. Foram avaliados os teores totais de fenóis, flavonóides, taninos condensados, alcalóides e lipídeos presentes nos extratos das folhas e dos frutos. As atividades antioxidantes de ambos os extratos também foram avaliadas. O extrato das folhas foi o que apresentou o maior conteúdo de fenóis, taninos condensados e flavonóides totais e a maior atividade antioxidante. Já o extrato de fruto apresentou a maior quantidade de lipídios e alcaloides e a melhor atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus megaterium e Micrococcus luteus. Já o extrato das folhas apresentou apenas atividade contra M. luteus. Em relação à atividade citotóxica, apenas o extrato do fruto apresentou citotoxicidade contra as linhagens celulares Jurkat e Kasumi-1. Em resumo, o extrato do fruto de P. lingue é uma potencial fonte de moléculas com atividade biológica para o desenvolvimento de novos fármacos a serem utilizados em alguns tipos de leucemia, bem como agente antibacteriano.

Phytochemical characterization, antioxidant potential and antibacterial activity of the Croton argyrophylloides Muell. Arg. (Euphorbiaceae)

Abstract Croton argyrophylloides Muell. Arg., from the Euphorbiaceae family, popularly known as marmeleiro prateado or sacatinga, is a plant from the Caatinga biome commonly found in Brazils northeastern region. The present study aimed to evaluate the antioxidant activity of the species. The phytochemical study was performed through qualitative analysis of chemical constituents and quantitative determination of the total phenol content through the Folin-Ciocalteu test. The qualitative and quantitative antioxidant tests were performed using the DPPH method (2.2 diphenyl-1-picryl hydrazil) and ferric reducing antioxidant power (FRAP). The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by microdilution in 96-well plates. The ethanolic extract of the leaves of C. argyrophylloides manifested antioxidant action in the quantitative DPPH test with a significant bioactivity of 84.70 AAO% in 500 µg/mL, with an EC50 of 236.79. The content of total phenolic compounds was 946.06 mg of gallic acid equivalents/g of sample, and total flavonoids was 58.11 mg of quercetin equivalents/g of sample, the result obtained for FRAP was 15294.44 µM Trolox/g of sample and ABTS was 718 M Trolox of sample. The prospecting of the chemical constituents of the leaves of C. argyrophylloides revealed the presence of the main compounds that manifests the antioxidant activity and it was proven by the DPPH method that there is antioxidant activity in the analyzed sample, in addition to demonstrating a significant content of phenolic compounds and total flavonoid content in the species, which corroborates the antioxidant activity of the plant sample. The leaf extracts presented growth inhibition halos of 10 and 12 mm upon Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Resumo Croton argyrophylloides Muell. Arg., pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como marmeleiro prateado e sacatinga, é um vegetal do bioma caatinga comumente encontrado no Nordeste do Brasil. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antioxidante da espécie. O estudo fitoquímico foi realizado por meio de análise qualitativa dos constituintes químicos e determinação quantitativa do teor de fenóis totais pelo teste de Folin-Ciocalteu. Os testes antioxidantes qualitativos e quantitativos foram realizados pelo método do DPPH (2,2 difenil-1- picril-hidrazila) e redução do ferro (FRAP). A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por microdiluição em placas de 96 poços. O extrato etanólico das folhas de C. argyrophylloides apresentou ação antioxidante no teste DPPH quantitativo com uma significativa bioatividade de 84.70 AAO% em 500 µg/mL, apresentando um CE50 de 236.79. O teor de compostos fenólicos totais, foi de 946,06 mg equivalentes de ácido gálico/g de amostra, e de flavonoides totais de 58,11 mg equivalentes de quercetina/g da amostra, o valor encontrado para FRAP foi de 15294,44 µM Trolox/g da amostra e de ABTS foi 718 M Trolox da amostra. A prospecção dos constituintes químicos das folhas de C. argyrophylloides revelou a presença dos principais compostos que caracterizam a atividade antioxidante e foi possível comprovar pelo método de DPPH que há atividade antioxidante na amostra analisada, além de demonstrar um resultado significativo de teor de compostos fenólicos e teor de flavonoides totais na espécie e o que corrobora com a atividade antioxidante da amostra vegetal. Os extratos das folhas apresentaram halos de inibição de crescimento de 10 e 12mm frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923.