Avaliação do desempenho reprodutivo em suínos entre as técnicas de inseminação artificial pós-cervical e intracervical / Avaluation of the reproductive performance in swine between the techiniques of artificial inseminatio postcervica and intracervical

Com o objetivo de avaliar o desempenho reprodutivo de suínos utilizando duas técnicas de inseminação artificial. Foram utilizadas 60 fêmeas suínas, da linhagem DB 90 (DanBred), com média de idade de 22 meses e peso médio de 210 kg. Conforme o delineamento experimental as fêmeas foram subdividas em dois grupos, cada um contendo 30 animais, de forma aleatória. No primeiro grupo os animais foram inseminados com técnica de inseminação artificial pós-cervical, com 1,5 bilhões de espermatozoides em 50 ml, e no segundo grupo foi realizada a técnica de inseminação artificial intracervical, com 3 bilhões de espermatozoides em 80 ml. A análise estatística foi realizada por análise não paramétrica (Kruskal-Wallis) e teste das médias por Student-Newman-Keuls (p 0.05). O número de retorno ao estro foi de 2 em ambos os grupos (inseminação artificial pós-cervical vs inseminação artificial intracervical), o número de abortos ( 0 vs 2), o número de partos (28 vs 26), a taxa de parição (93,33% vs 86,68%), e o número de leitões nascidos totais (14,07 vs 14,10), respectivamente. A inseminação artificial pós-cervical, mostrou resultados semelhantes à técnica de inseminação artificial intracervical. Desta forma conclui-se que a técnica pós-cervical, possibilita uma série de vantagens ao produtor. Sendo possível, a redução do plantel de reprodutores.

Com o objetivo de avaliar o desempenho reprodutivo de suínos utilizando duas técnicas de inseminação artificial. Foram utilizadas 60 fêmeas suínas, da linhagem DB 90 (DanBred), com média de idade de 22 meses e peso médio de 210 kg. Conforme o delineamento experimental as fêmeas foram subdividas em dois grupos, cada um contendo 30 animais, de forma aleatória. No primeiro grupo os animais foram inseminados com técnica de inseminação artificial pós-cervical, com 1,5 bilhões de espermatozoides em 50 ml, e no segundo grupo foi realizada a técnica de inseminação artificial intracervical, com 3 bilhões de espermatozoides em 80 ml. A análise estatística foi realizada por análise não paramétrica (Kruskal-Wallis) e teste das médias por Student-Newman-Keuls (p< 0.05). O número de retorno ao estro foi de 2 em ambos os grupos (inseminação artificial pós-cervical vs inseminação artificial intracervical), o número de abortos ( 0 vs 2), o número de partos (28 vs 26), a taxa de parição (93,33% vs 86,68%), e o número de leitões nascidos totais (14,07 vs 14,10), respectivamente. A inseminação artificial pós-cervical, mostrou resultados semelhantes à técnica de inseminação artificial intracervical. Desta forma conclui-se que a técnica pós-cervical, possibilita uma série de vantagens ao produtor. Sendo possível, a redução do plantel de reprodutores.

Avaliação do desempenho reprodutivo em suínos entre as técnicas de inseminação artificial pós-cervical e intracervical / Avaluation of the reproductive performance in swine between the techiniques of artificial inseminatio postcervica and intracervical

Com o objetivo de avaliar o desempenho reprodutivo de suínos utilizando duas técnicas de inseminação artificial. Foram utilizadas 60 fêmeas suínas, da linhagem DB 90 (DanBred), com média de idade de 22 meses e peso médio de 210 kg. Conforme o delineamento experimental as fêmeas foram subdividas em dois grupos, cada um contendo 30 animais, de forma aleatória. No primeiro grupo os animais foram inseminados com técnica de inseminação artificial pós-cervical, com 1,5 bilhões de espermatozoides em 50 ml, e no segundo grupo foi realizada a técnica de inseminação artificial intracervical, com 3 bilhões de espermatozoides em 80 ml. A análise estatística foi realizada por análise não paramétrica (Kruskal-Wallis) e teste das médias por Student-Newman-Keuls (p 0.05). O número de retorno ao estro foi de 2 em ambos os grupos (inseminação artificial pós-cervical vs inseminação artificial intracervical), o número de abortos ( 0 vs 2), o número de partos (28 vs 26), a taxa de parição (93,33% vs 86,68%), e o número de leitões nascidos totais (14,07 vs 14,10), respectivamente. A inseminação artificial pós-cervical, mostrou resultados semelhantes à técnica de inseminação artificial intracervical. Desta forma conclui-se que a técnica pós-cervical, possibilita uma série de vantagens ao produtor. Sendo possível, a redução do plantel de reprodutores.(AU)

Com o objetivo de avaliar o desempenho reprodutivo de suínos utilizando duas técnicas de inseminação artificial. Foram utilizadas 60 fêmeas suínas, da linhagem DB 90 (DanBred), com média de idade de 22 meses e peso médio de 210 kg. Conforme o delineamento experimental as fêmeas foram subdividas em dois grupos, cada um contendo 30 animais, de forma aleatória. No primeiro grupo os animais foram inseminados com técnica de inseminação artificial pós-cervical, com 1,5 bilhões de espermatozoides em 50 ml, e no segundo grupo foi realizada a técnica de inseminação artificial intracervical, com 3 bilhões de espermatozoides em 80 ml. A análise estatística foi realizada por análise não paramétrica (Kruskal-Wallis) e teste das médias por Student-Newman-Keuls (p< 0.05). O número de retorno ao estro foi de 2 em ambos os grupos (inseminação artificial pós-cervical vs inseminação artificial intracervical), o número de abortos ( 0 vs 2), o número de partos (28 vs 26), a taxa de parição (93,33% vs 86,68%), e o número de leitões nascidos totais (14,07 vs 14,10), respectivamente. A inseminação artificial pós-cervical, mostrou resultados semelhantes à técnica de inseminação artificial intracervical. Desta forma conclui-se que a técnica pós-cervical, possibilita uma série de vantagens ao produtor. Sendo possível, a redução do plantel de reprodutores.(AU)

Aplicabilidade da técnica de inseminação artificial pós-cervical em leitoas e desempenho reprodutivo utilizando 1,5 ou 2,5 bilhões de células espermáticas por dose inseminante

APLICABILIDADE DA TÉCNICA DE INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL PÓSCERVICAL EM LEITOAS E DESEMPENHO REPRODUTIVO UTILIZANDO 1,5 OU 2,5 BILHÕES DE CÉLULAS ESPERMÁTICAS POR DOSE INSEMINANTE Autora: Kelly Jaqueline Will Orientador: Prof. Rafael da Rosa Ulguim Coorientador: Prof. Fernando Pandolfo Bortolozzo A inseminação artificial pós-cervical (IAPC) é um método que permite a redução do número de células espermáticas e volume da dose inseminante sem comprometer o desempenho reprodutivo comparada a inseminação artificial intracervical (IAC). A IAPC é aplicada com sucesso em pluríparas e primíparas, porém ainda é limitada para leitoas devido à dificuldade de passagem do cateter intrauterino pela cérvix. O presente estudo avaliou a aplicabilidade da IAPC em leitoas e o impacto da idade e diferentes características corporais na taxa de sucesso de inserção do cateter intrauterino. O desempenho reprodutivo foi avaliado para IAPC e IAC, considerando diferentes tamanhos de doses. Um total de 636 leitoas foram distribuídas em um delineamento fatorial 2 × 2, sendo os fatores: duas técnicas de inseminação artificial (IAC e IAPC) e dois diferentes tamanhos de doses inseminantes (1,5 × 109 células espermáticas viáveis/50 mL; ou 2,5 × 109 células espermáticas viáveis/80 mL). Independentemente da dose inseminante utilizada, para as 319 leitoas do grupo IAPC, foi realizada a caracterização da inserção do cateter intrauterino. Para todos os grupos foram avaliados o desempenho reprodutivo, e ocorrência de sangramento e refluxo de sêmen durante todas as inseminações. Dois subgrupos foram avaliados em relação ao tempo para realizar a inseminação (n = 380) e refluxo de sêmen coletado durante 1 h após a inseminação (n = 114). As análises foram realizadas pelo software SAS utilizando o procedimento GLIMMIX. As médias das variáveis contínuas foram comparadas pelo teste TukeyKramer, variáveis frequência foram analisadas por regressão logística considerando a distribuição binária e a distribuição multinomial para as variáveis categóricas com mais de dois escores. Variáveis não paramétricas foram comparadas pelo teste Kruskal-Wallis. A taxa de sucesso de inserção do cateter foi de 58,93%, considerando leitoas que permitiram a inserção do cateter em todas as inseminações realizadas durante o estro. Adicionalmente, maior possibilidade (>60%; P 0,04) de inserção do cateter foi observada em leitoas mais pesadas no primeiro estro detectado ( 124 kg), e em leitoas com idade superior ( 225 d) e maior escore de condição corporal (>3) na inseminação. Não houve diferença entre os grupos na taxa de prenhez ( 95,26%; P = 0,23), taxa de parto ( 93,67%; P = 0,54), número total de leitões nascidos (14,45; P = 0,45), bem como sangramento e refluxo durante a inseminação. Entretanto, a porcentagem de volume e de células espermáticas no refluxo foi menor em leitoas inseminadas com 1,5 bilhão de células espermáticas/50 mL (P < 0,01) que nos demais grupos. Não houve redução expressiva no tempo utilizado para realizar a IAPC comparada com a IAC. Porém, para leitoas inseminadas com 1,5 bilhão de células espermáticas/50 mL o tempo total para a inseminação foi menor que nos demais grupos (P < 0,01). Concluindo, a IAPC continua limitada para leitoas devido à baixa taxa de sucesso de inserção do cateter. O desempenho reprodutivo não foi afetado pela técnica de inseminação (IAPC ou IAC) ou pela dose inseminante (1,5 bilhão de células espermáticas/50 mL ou 2,5 bilhões de células espermáticas/80 mL).

APPLICABILITY OF POST-CERVICAL ARTIFICIAL INSEMINATION IN GILTS AND REPRODUCTIVE PERFORMANCE USING 1.5 OR 2.5 BILLION SPERM CELLS IN THE INSEMINATING DOSE Author: Kelly Jaqueline Will Advisor: Rafael da Rosa Ulguim Co-advisor: Fernando Pandolfo Bortolozzo The post-cervical artificial insemination (PCAI) is a method that allows the reduction in the number of sperm cells and volume of the insemination doses, without compromising the reproductive performance compared to cervical artificial insemination (CAI). The PCAI is successfully applied in pluriparous and primiparous sows but is still limited to gilts due to the difficulty for cannula insertion through the cervix. This study evaluated the applicability of PCAI in gilts and the impact of age and different body characteristics of the gilts on the success rate for cannula insertion. The reproductive performance was evaluated for PCAI and CAI, considering different semen dose sizes. A total of 636 gilts were assigned in a 2 × 2 factorial design: two artificial insemination techniques (CAI and PCAI) and two different semen dose sizes (1.5 × 109 viable sperm cells/50 mL; or 2.5 × 109 viable sperm cells/80 mL). Regardless of the insemination dose used, for the 319 gilts assigned to PCAI, a characterization of the intrauterine cannula insertion was performed. For all groups, reproductive performance, and occurrence of bleeding and semen backflow during all inseminations were recorded. Two subgroups were evaluated regarding the time expended to perform the insemination (n = 380), and the semen backflow collected during 1 h after insemination (n = 114). The SAS system using the GLIMMIX procedure was performed. The averages of continuous variables were compared by the Tukey-Kramer test, frequency variables were analyzed by logistic regression considering a binary distribution and a multinomial distribution was considered for the categorical variables with more than two scores. The nonparametric variables were compared by Kruskal-Wallis test. The success rate for intrauterine cannula insertion, based on a successful insertion in all inseminations performed during estrus, was 58.93% Additionally, greater possibility (> 60%; P 0.04) of cannula insertion was observed in heavier gilts at first detected estrus ( 124 kg), as well as in older gilts ( 225 d) and greater body condition score (> 3) at insemination. There were no differences among the groups in pregnancy rate ( 95.26%; P = 0.23), farrowing rate ( 93.67%; P = 0.54), total piglets born ( 14.45; P = 0.45), as well as bleeding and backflow during insemination. However, the percentage of semen backflow volume and percentage of sperm cells in the backflow were lower in gilts inseminated by CAI with 1.5 billion sperm cells/50 mL (P < 0.01). There was no expressive reduction in time expended to perform PCAI compared to CAI. However, gilts inseminated with 1.5 billion sperm cells/50 mL showed a lower total time to inseminate than all other groups (P < 0.01). In conclusion, PCAI remains limited for gilts due to the low success rate for cannula insertion. The reproductive performance was not affected by the AI technique (PCAI or CAI) or semen dose size (1.5 billion sperm cells in 50 mL or 2.5 billion sperm cells in 80 mL).

Genetic paternity test for piglets generated by heterospermic cervical and post-cervical artificial insemination / Determinação genética da paternidade em leitões nascidos de inseminação artificial heterospérmica cervical e pós-cervical

Post-cervical artificial insemination (AI) with reduced sperm concentration allows the use of semen from few boars on a high number of females, but the common use of pooled semen in commercial AI programs masks the subfertility of individual boars. This study compared the reproductive performance of postcervical and cervical heterospermic AI, in commercial farm conditions and through paternity tests. Each AI method was conducted in two groups of 150 sows. Sperm concentration was 3.0 x 109/85mL for cervical AI and 1.5 x 109/60mL for post-cervical AI. Conception and farrowing rates for post-cervical AI (90.7% and 85.3%, respectively) were lower (P<0.05) than for cervical AI (98.7% and 94.7%, respectively). Total litter size did not differ (P>0.05) for post-cervical (12.8 ± 0.3) and cervical AI (13.5 ± 0.3), but it was greater (P<0.05) for paritytwo females than for those having 3-5 parities. The paternity test used nine microsatellite markers to genotype 300 piglets from 25 litters, but paternity exclusion was achieved for only 95 piglets, which did not differentiate boars across AI methods.(AU)

A inseminação artificial intra-uterina (IAIC) com reduzida concentração de espermatozóides por dose permite que o sêmen de um menor número de reprodutores seja usado em um maior número de fêmeas. Porém, o uso freqüente de pools de sêmen de dois ou mais machos na inseminação heterospérmica pode mascarar o baixo desempenho de alguns reprodutores. O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho reprodutivo da IAIU com a inseminação artificial intracervical (IAIC), usando amostras heterospérmicas de sêmen, em condições de rotina de campo e através de teste de paternidade. A IAIC foi feita com 3,0 x 109 espermatozóides/85mL e a IAIU foi feita com 1,5 x 109 espermatozóides/60mL, ambas em grupos de 150 fêmeas. A IAIU apresentou taxas menores (P<0,05) de concepção (90,7%) e parição (85,3%) do que a IAIC (98,7% e 94,7%, respectivamente). O tamanho total da leitegada não diferiu (P>0,05) entre IAIC (13,7 ± 0,3) e IAIU (13,0 ± 0,3), mas foi mais alto nas fêmeas de segundo parto do que nas com 3-5 partos (P<0,05). O teste de paternidade usou nove microssatélites para a genotipagem de 25 leitegadas, totalizando 300 leitões, havendo exclusão de paternidade somente em 95 leitões, o que não permitiu diferenciação entre os machos, dentro das técnicas de IA.(AU)

Genetic paternity test for piglets generated by heterospermic cervical and post-cervical artificial insemination / Determinação genética da paternidade em leitões nascidos de inseminação artificial heterospérmica cervical e pós-cervical

Post-cervical artificial insemination (AI) with reduced sperm concentration allows the use of semen from few boars on a high number of females, but the common use of pooled semen in commercial AI programs masks the subfertility of individual boars. This study compared the reproductive performance of post-cervical and cervical heterospermic AI, in commercial farm conditions and through paternity tests. Each AI method was conducted in two groups of 150 sows. Sperm concentration was 3.0 x 109/85mL for cervical AI and 1.5 x 109/60mL for post-cervical AI. Conception and farrowing rates for post-cervical AI (90.7% and 85.3%, respectively) were lower (P<0.05) than for cervical AI (98.7% and 94.7%, respectively). Total litter size did not differ (P>0.05) for post-cervical (12.8 ± 0.3) and cervical AI (13.5 ± 0.3), but it was greater (P<0.05) for parity-two females than for those having 3-5 parities. The paternity test used nine microsatellite markers to genotype 300 piglets from 25 litters, but paternity exclusion was achieved for only 95 piglets, which did not differentiate boars across AI methods.

A inseminação artificial intra-uterina (IAIC) com reduzida concentração de espermatozóides por dose permite que o sêmen de um menor número de reprodutores seja usado em um maior número de fêmeas. Porém, o uso freqüente de pools de sêmen de dois ou mais machos na inseminação heterospérmica pode mascarar o baixo desempenho de alguns reprodutores. O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho reprodutivo da IAIU com a inseminação artificial intracervical (IAIC), usando amostras heterospérmicas de sêmen, em condições de rotina de campo e através de teste de paternidade. A IAIC foi feita com 3,0 x 109espermatozóides/85mL e a IAIU foi feita com 1,5 x 109 espermatozóides/60mL, ambas em grupos de 150 fêmeas. A IAIU apresentou taxas menores (P<0,05) de concepção (90,7%) e parição (85,3%) do que a IAIC (98,7% e 94,7%, respectivamente). O tamanho total da leitegada não diferiu (P>0,05) entre IAIC (13,7 ± 0,3) e IAIU (13,0 ± 0,3), mas foi mais alto nas fêmeas de segundo parto do que nas com 3-5 partos (P<0,05). O teste de paternidade usou nove microssatélites para a genotipagem de 25 leitegadas, totalizando 300 leitões, havendo exclusão de paternidade somente em 95 leitões, o que não permitiu diferenciação entre os machos, dentro das técnicas de IA.

Human assisted reproduction

Background: Infertility is defined as the failure to conceive after one year of unprotected intercourse, and this time has been lowered to 6 month if the female partner is older than 35 years. Infertile couples are offered to low and high complexity treatments are available according to their cause of infertility. Low complexity treatments comprise timed intercourse, intrauterine insemination with or without controlled ovarian stimulation. High complexity treatments comprise standard in vitro fertilization (IVF) and IVF by intracytoplasmatic sperm injection (ICSI). Additionally to these treatments, infertile patients might be benefited by accessory techniques such as preimplantational genetic screening and diagnosis. These techniques aim to detect the most common human aneuploydies related to abortion and chromosomal syndromes; and to identify embryos carriers of genetic diseases like talassemia, Huntington's disease, fragile-X syndrome among others. Human assisted reproduction is a dynamic branch of Medicine performed by several medical specialists from gynecologists to surgeons, and professional as nurses, biologists and veterinarians. Review: Initially, human infertility was treated by intracervical insemination due to the risk of endometrial insemination and the occurrence of pelvic inflammation, but the development of better insemination techniques and instruments led to the report of a safe intrauterine insemination method in 1974. However, insemination was restricted to oligozoospermia or cervical factors and it was not able to overcome ovarian and tubal infertility factors, neither severe male infertility factor. The range of infertility treatment was tremendously broadened in 1978 with the report of the first IVF baby birth. Since then infertile couples due to tubal factors, ovarian and moderate male infertility factors started to be treated with IVF. Several changes in embryo culture conditions and instruments for IVF were developed and the technology was world wide spread. The first IVF baby was a girl born in 1984 in Brazil. Even though, some ovarian conditions and severe male factor infertility couldn't be treated until 1992. This landmark was the report of the first babies originated by in vitro fertilization with ICSI. In parallel to those scientific and medical evolutions, drugs and new protocols of controlled ovarian stimulation increased the number of oocytes available for fertilization and, consequently, the number of exceeding embryos. These spare oocytes and embryos required the development of cryopreservation techniques for long term storage. Slow rate freezing and vitrification of embryos were reported approximately 25 years ago, but just recently vitrification of oocytes and embryos became the first option for fertility preservation and/or embryo storage in humans. Preimplantational genetic screening and diagnosis were complementary techniques developed during the same period. These tests require precise and meticulous micromanipulation techniques and skills for the obtainment of a single blastomere with intact genetic material for screening of aneuploydies by fluorescent in situ hybridization or the detection of a deleterious allele by single cell PCR. New drugs, protocols, instruments and techniques for Human Assisted Reproduction are still under development in many Universities, infertility clinics and private companies aiming to increase the efficiency of infertility treatments. Conclusion: Human assisted reproduction is constantly evolving with the development of more precise diagnostic tests and with the improvement of clinical approaches to infertility and better conditions in embryology laboratories and this constant evolution is the result of the synergic interaction of clinical infertility specialists with researchers of different backgrounds.

Gestation rate of Santa Inês females submitted to transcervical insemination with fresh semen associated or not to the epidural anesthesia / Taxa de gestação em fêmeas da raça Santa Inês inseminadas pela via transcervical com sêmen fresco

The present study aimed to evaluate the effect of epidural anesthesia associated to the technique of transcervical artificial insemination using fresh semen, on subsequent fertility of heat synchronized female sheep. Thirty multiparous and ovulocyclic Santa Ines ewes were randomly divided into three groups: G1 (12 females inseminated via transcervical without previous epidural anesthesia), G2 (12 females inseminated via transcervical with previous epidural anesthesia with 2% lidocaine with vasoconstrictor) and G3 (six females mated by the male). All animals received hormonal treatment for estrous induction and synchronization. There was no difference (p>0.05) between the average time expended to carry the procedures of transcervical artificial insemination in female sheep, being 9.9 ± 5.45 and 9.1 ± 1.67 minutes for G1 and G2, respectively. Approximately 75.0% and 58.3% of the inseminations were intrauterine or deep cervical for the G1 and G2 groups, respectively. Gestation rates of 75% and 83,3% for the groups G1 and G2 were observed, respectively (p>0.05). Transcervical artificial insemination technique using fresh semen presents good gestation rates but the previous use of epidural anesthesia with 2% lidocaine do not amplify cervical penetration and, as consequence, the gestation rate.

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da anestesia epidural com lidocaína, associada à técnica de inseminação artificial transcervical com sêmen fresco, sobre a taxa de gestação de fêmeas ovinas Santa Inês com estro sincronizado. Foram utilizadas 30 ovelhas multíparas, cíclicas, da raça Santa Inês divididas aleatoriamente em três grupos: G1 (12 fêmeas inseminadas pela via transcervical sem a realização prévia de anestesia epidural com lidocaína), G2 (12 fêmeas inseminadas pela via transcervical com prévia anestesia epidural com cloridrato de lidocaína a 2% com vasoconstritor) e G3 (06 fêmeas que foram cobertas pelo macho). Todas as ovelhas foram submetidas a tratamento hormonal para indução e sincronização do estro. Não foram observadas diferenças (p>0,05) entre o tempo médio gasto para realizar os procedimentos de inseminação artificial transcervical em fêmeas ovinas da raça Santa Inês, 9,9 ± 5,45 e 9,1 ± 1,67 minutos para G1 e G2, respectivamente. Aproximadamente 75,8 e 58,3% das inseminações foram intra-uterina ou cervical profunda para os grupos G1 e G2, respectivamente. Foram observadas taxas de gestação de 75 e 83,3% para os grupos G1 e G2, respectivamente (p>0,05). A técnica de inseminação artificial transcervical utilizando sêmen fresco apresenta bons índices gestacionais, porém a utilização prévia de anestesia epidural com lidocaína 2% não amplifica a pen

Inseminação artificial intra-uterina em leitoas com sêmen criopreservado com dimetilacetamida e glicerol

The objective of this study was to evaluate the use of dimethylacetamide (DMA) and glycerol in boar semen cryopreservation on the conception and fertility rates.Sixty pre-pubertal gilts were synchronized and inseminated with semen including either glycerol 3% or DMA 5% as cryoprotectants (n=30 for both groups). Artificial insemination was conducted with the intrauterine method using doses with 1 x 10(9) viable spermatozoa. The gilts were slaughtered 36-40h after the insemination and the hemorrhagic bodies (CH) in the ovaries were counted. The oviducts were washed, so oocytes and embryos could be recovered to determine the conception and fertility rates. The average CH obtained with glycerol 3% did not differ (P>0.05) from those observed with DMA (10.4 x 10.2, respectively). Recovery rates also did not differ (P>0.05) between groups (68.9% with glycerol and 66.9% with DMA). Conception (73.3 x 76.6%) and fertility rate (48.6 x 59.4%) were also similar (P>0.05) for glycerol and DMA, respectively. Those results indicate that DMA 5% can replace glycerol 3% in the composition of extenders for frozen boar semen.

Este estudo teve por objetivo avaliar o uso da dimetilacetamida (DMA) e de glicerol na criopreservação de sêmen suíno sobre as taxas de concepção e fertilização in vivo, utilizando o método de inseminação artificial pós-cervical. Foram sincronizadas 60 leitoas pré-púberes e inseminadas com o uso de sêmen congelado com glicerol 3% (30 fêmeas) e DMA 5% (30 fêmeas). O método de inseminação utilizado foi o pós-cervical, com concentração de 1 x 10(9) espermatozóides vivos por dose. Após 36 a 40h da inseminação, as fêmeas foram abatidas, sendo realizada a contagem de corpos hemorrágicos (CH) nos ovários. Foi realizada a lavagem dos ovidutos das fêmeas, verificando o número de estruturas recuperadas (oócitos e embriões), calculando-se as taxas de concepção e fertilização. A média de CH nas fêmeas do grupo glicerol 3% não diferiu (P>0,05) daquelas do grupo DMA 5% (10,4 x 10,2, respectivamente). Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de recuperação de estruturas entre os grupos glicerol 3% (68,9%) e DMA 5% (66,9%). Os resultados obtidos nos grupos glicerol 3% e DMA 5% para as taxas de concepção (73,3 x 76,6%) e fertilização (48,6 x 59,4%) não apresentaram diferença (P>0,05). Conclui-se que não há diferenças nas taxas de concepção e fertilização in vivo utilizando-se sêmen congelado com o uso de dimetilacetamida ou de glicerol.

Inseminação artificial intra-uterina em leitoas com sêmen criopreservado com dimetilacetamida e glicerol

The objective of this study was to evaluate the use of dimethylacetamide (DMA) and glycerol in boar semen cryopreservation on the conception and fertility rates.Sixty pre-pubertal gilts were synchronized and inseminated with semen including either glycerol 3% or DMA 5% as cryoprotectants (n=30 for both groups). Artificial insemination was conducted with the intrauterine method using doses with 1 x 10(9) viable spermatozoa. The gilts were slaughtered 36-40h after the insemination and the hemorrhagic bodies (CH) in the ovaries were counted. The oviducts were washed, so oocytes and embryos could be recovered to determine the conception and fertility rates. The average CH obtained with glycerol 3% did not differ (P>0.05) from those observed with DMA (10.4 x 10.2, respectively). Recovery rates also did not differ (P>0.05) between groups (68.9% with glycerol and 66.9% with DMA). Conception (73.3 x 76.6%) and fertility rate (48.6 x 59.4%) were also similar (P>0.05) for glycerol and DMA, respectively. Those results indicate that DMA 5% can replace glycerol 3% in the composition of extenders for frozen boar semen.

Este estudo teve por objetivo avaliar o uso da dimetilacetamida (DMA) e de glicerol na criopreservação de sêmen suíno sobre as taxas de concepção e fertilização in vivo, utilizando o método de inseminação artificial pós-cervical. Foram sincronizadas 60 leitoas pré-púberes e inseminadas com o uso de sêmen congelado com glicerol 3% (30 fêmeas) e DMA 5% (30 fêmeas). O método de inseminação utilizado foi o pós-cervical, com concentração de 1 x 10(9) espermatozóides vivos por dose. Após 36 a 40h da inseminação, as fêmeas foram abatidas, sendo realizada a contagem de corpos hemorrágicos (CH) nos ovários. Foi realizada a lavagem dos ovidutos das fêmeas, verificando o número de estruturas recuperadas (oócitos e embriões), calculando-se as taxas de concepção e fertilização. A média de CH nas fêmeas do grupo glicerol 3% não diferiu (P>0,05) daquelas do grupo DMA 5% (10,4 x 10,2, respectivamente). Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de recuperação de estruturas entre os grupos glicerol 3% (68,9%) e DMA 5% (66,9%). Os resultados obtidos nos grupos glicerol 3% e DMA 5% para as taxas de concepção (73,3 x 76,6%) e fertilização (48,6 x 59,4%) não apresentaram diferença (P>0,05). Conclui-se que não há diferenças nas taxas de concepção e fertilização in vivo utilizando-se sêmen congelado com o uso de dimetilacetamida ou de glicerol.

Emprego do sêmen criopreservado e capacitado in vitro na inseminação artificial intracervical superficial em ovinos

A inseminação artificial intracervical superficial em ovinos é uma técnica simples, de baixo custo e eficiente no emprego do sêmen fresco. Por outro lado, particularidades do aparelho reprodutivo da fêmea ovina, a quantidade de células espermáticas que sobrevivem ao pós-congelamento bem como a capacitação precoce de espermatozóides durante o processo de criopreservação, impedem o emprego desta técnica com sêmen criopreservado, fazendo-se necessária a deposição intrauterina, com auxílio da laparoscopia. Desconhece-se a eficiência da inseminação artificial intracervical superficial em ovinos, empregando-se sêmen criopreservado e capacitado in vitro. O experimento foi realizado com objetivo de determinar as taxas de prenhez com o sêmen criopreservado e capacitado in vitro. Os animais foram divididos aleatoriamente em 5 grupos: sêmen fresco (SF); sêmen congelado cervical (SCC); sêmen congelado laparoscopia (SCL); sêmen congelado capacitado cervical (SCCC); e sêmen congelado capacitado laparoscopia (SCCL). Todas as fêmeas receberam doses inseminantes com concentração de 200x106 sptz. As inseminações ocorreram em um período de 52 a 60 horas após a retirada dos dispositivos de progesterona. Os diagnósticos de prenhez foram realizados com auxílio da ultrassonografia 30 dias após as inseminações. As taxas de prenhez observadas foram: No grupo SF 42,30% (11/26), SCC 23,07% (6/26), SCL 54,16% (13/24), SCCC 25,92% (7/27), SCCL 48,14% (13/27), não existindo diferença estatística entre os grupos experimentais. O experimento realizado mostrou que é possível obter prenhez, empregando sêmen criopreservado e capacitado in vitro, na inseminação artificial pela via cervical em ovinos

The superficial intracervical insemination in sheep is a simple, low cost and efficient technique using fresh semen. Still, the particularities of the female tract, the amount of sperm cells wich survive and the early capacitation during the cryopreservation process, difficult the use of this technique with cryopreserved semen, maaing it s necessary to intrauterine with the aid of laparoscopy. It s unanown the efficiency of superficial intracervical insemination in ovine, using cryopreserved and in vitro capacitated semen. The experiment was carried out with the objective to determine the pregnancy rate of ewes inseminated with cryopreserved and in vitro capacitated semen. The females were randomly distributed among five experimental groups: fresh semen (SF), frozen semen cervical (SCC), frozen semen laparoscopy (SCL), frozen semen in vitro capacitated cervical (SCCC), frozen semen in vitro capacitated laparoscopy (SCCL). All females received dosis with 00x106sptz per insemination. The inseminations were performed from to 60 hours after the withdrawal of progesterone implants. The pregnancy diagnosis was conducted by ultrasongraphy 30 days after inseminations. The observed pregnancy rates was: SF ,30% (113 6), SCC 3,07% (63 6), SCL ,16% (133 ) SCCC %, SCCL 4,1 % (133 7). our experiment showed that in sheep it s viable the superficial cervical artificial insemination using cryopreserved and in vitro capacitated semen

Effect of transcervical techniques and laparoscopy on pregnancy rate of sheep inseminated in fixed-time / Efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo

The objective of this experiment was to evaluate the effect of the transcervical and laparoscopic techniques on the pregnancy rate of inseminated sheep in fixed-time. The pregnancy rate for the transcervical and for laparoscopic techniques was 40% (p>0.05). About the place of deposition of the semen in transcervical artificial insemination (AI), there was not difference in the pregnancy rate (p>0.05), with rates of 25.0% in the superficial cervical, 43.7% in medium cervical, 41.7% in deep cervical and 50.0% intrauterine. These results demonstrate that transcervical AI showed similar results to the obtained with laparoscopy, when these techniques are accomplished in fixed-time. KEY WORDS: Cervix, intrauterine, frozen semen, traction

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo. A taxa de prenhez para as técnicas transcervical e laparoscópica foi de 40% (p>0.05). Quanto ao local de deposição do sêmen na inseminação artificial (IA) transcervical, não houve diferença na taxa de prenhez (p>0.05), com taxas de 25.0% na cervical superficial, 43.7% cervical médio, 41.7% cervical profundo e 50.0% intra-uterino. Estes resultados demonstram que a IA transcervical apresenta resultados semelhantes aos obtidos com o uso de laparoscopia, quando estas técnicas são realizadas em tempo-fixo. PALAVRAS-CHAVE: Cérvix, intrauterino, sêmen congelado, tracionamento

Efeito da glutationa reduzida (GSH) na criopreservação de espermatozóides da espécie canina: avaliação in vitro e in vivo / Effect of reduced glutathione (GSH) in the cryopreservation of canine spermatozoa: in vitro and in vivo evaluation

O presente experimento teve por objetivos comparar a adição de diferentes concentrações de glutationa reduzida (GSH) no diluidor para criopreservação do sêmen de cães, considerando-se as características morfofuncionais pós-descongelação; e verificar os índices de gestação e número de filhotes por ninhada obtidos a partir da inseminação artificial intra-uterina, por cateterização cervical endoscópica, com sêmen criopreservado contendo diferentes concentrações de glutationa. Na primeira fase do experimento, foram realizadas duas colheitas seminais de 11 reprodutores com intervalo mínimo de uma semana entre os procedimentos. Foram empregadas três concentrações diferentes de glutationa reduzida (0, 10 e 20 mM) ao meio de congelação tris-gema-citrato. O sêmen fresco, refrigerado, glicerolizado e descongelado foram avaliados por citometria de fluxo com uso de sondas específicas para determinar a integridade das membranas plasmática e acrossomal, potencial de membrana mitocondrial e fragmentação de DNA. Também foi realizada dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) para avaliar os níveis de estresse oxidativo. Na segunda fase do experimento, foram inseminadas 6 fêmeas, alocadas em dois grupos: inseminação intra-uterina com sêmen congelado em diluidor contendo 10 mM (IA-GSH10, n=3) e sem a adição de glutationa (IA-GSH0, n=3). O acompanhamento do ciclo estral foi realizado por citologia vaginal, vaginoscopia, dosagem de progesterona e LH. Foram realizadas duas inseminações no 5o e 6o dias após pico de LH e a gestação diagnosticada aos 30 dias. A adição de 10 e 20 mM de GSH ao diluidor para criopreservação promoveu queda na motilidade espermática nas amostras descongeladas, sendo o maior prejuízo observado na concentração de 20 mM. Foi detectada maior porcentagem de acrossomos íntegros nos grupos tratados. A glicerolização e, principalmente, a exposição do espermatozóide ao nitrogênio líquido e posterior descongelação foram responsáveis pela diminuição da motilidade espermática, em consequência ao prejuízo da função mitocondrial promovida pela produção de radicais livres durante o processamento seminal. A gestação foi diagnosticada em duas fêmeas do grupo IA-GSH10 e duas do grupo IA-GSH0. Em conclusão, a adição de 10 e 20 mM de GSH ao diluidor para criopreservação seminal não promoveu os efeitos protetores esperados na espécie canina, sendo a concentração de 20 mM responsável por maiores prejuízos à amostra seminal. A adição de 10 mM de GSH ao diluidor para criopreservação seminal na espécie canina manteve o índice de fertilidade semelhante ao obtido com sêmen criopreservado sem a suplementação antioxidante

The present experiment aimed to compare the addition of different concentrations of reduced glutathione (GSH) on frozen-thawed canine semen, considering the morphofunctional characteristics; and to verify the pregnancy rate and number of puppies per litter obtained from intrauterine insemination by endoscopic catheterization of the cervix, with frozen-thawed semen containing different concentrations of glutathione. During the first phase of the experiment, two seminal samples collected weekly from 11 mature dogs were used. Three different concentrations of reduced glutathione (0, 10 and 20 mM) were supplemented in a tris-citrate egg yolk extender. The fresh, chilled, glycerolized and post-thawed semen were assessed by flow cytometry using specific probes to determine plasma membrane and acrosomal integrity, mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay was also performed to assess the occurrence of oxidative stress. In the second phase of the experiment, six canine females were allocated into two groups: intrauterine insemination with frozen-thawed semen containing 10 mM GSH (IA-GSH10, n = 3) and without the addition of glutathione (IA-GSH0, n = 3). Bitches were monitored by vaginal cytology, vaginoscopy, progesterone and LH assays. Two inseminations were performed on days 5 and 6 post LH peak. We verified that the addition of 10 and 20 mM of GSH to semen extender promoted a decrease in post-thaw sperm motility, as well as a higher damage degree at the 20 mM concentration. We also detected a higher percentage of acrossomal integrity in treated groups. At glycerolization and moreover, the sperm exposure to liquid nitrogen and further thawing, were responsible for the decrease in sperm motility, due to the loss of mitochondrial function through the free radicals production. Gestation was diagnosed in two female from IA-GSH10 group and two bitches of the IA-GSH0 group. In conclusion, we did not observe the expected protective effects of the addition of 10 and 20 mM GSH to semen extender. Furthermore, the concentration of 20 mM was responsible for the more extreme damage to semen sample. The supplementation of 10 mM GSH to semen extender for cryopreservation maintained the fertility rates similar to the ones observed for cryopreservation without antioxidant supplementation in dogs

Efeito da glutationa reduzida (GSH) na criopreservação de espermatozóides da espécie canina: avaliação in vitro e in vivo / Effect of reduced glutathione (GSH) in the cryopreservation of canine spermatozoa: in vitro and in vivo evaluation

O presente experimento teve por objetivos comparar a adição de diferentes concentrações de glutationa reduzida (GSH) no diluidor para criopreservação do sêmen de cães, considerando-se as características morfofuncionais pós-descongelação; e verificar os índices de gestação e número de filhotes por ninhada obtidos a partir da inseminação artificial intra-uterina, por cateterização cervical endoscópica, com sêmen criopreservado contendo diferentes concentrações de glutationa. Na primeira fase do experimento, foram realizadas duas colheitas seminais de 11 reprodutores com intervalo mínimo de uma semana entre os procedimentos. Foram empregadas três concentrações diferentes de glutationa reduzida (0, 10 e 20 mM) ao meio de congelação tris-gema-citrato. O sêmen fresco, refrigerado, glicerolizado e descongelado foram avaliados por citometria de fluxo com uso de sondas específicas para determinar a integridade das membranas plasmática e acrossomal, potencial de membrana mitocondrial e fragmentação de DNA. Também foi realizada dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) para avaliar os níveis de estresse oxidativo. Na segunda fase do experimento, foram inseminadas 6 fêmeas, alocadas em dois grupos: inseminação intra-uterina com sêmen congelado em diluidor contendo 10 mM (IA-GSH10, n=3) e sem a adição de glutationa (IA-GSH0, n=3). O acompanhamento do ciclo estral foi realizado por citologia vaginal, vaginoscopia, dosagem de progesterona e LH. Foram realizadas duas inseminações no 5o e 6o dias após pico de LH e a gestação diagnosticada aos 30 dias. A adição de 10 e 20 mM de GSH ao diluidor para criopreservação promoveu queda na motilidade espermática nas amostras descongeladas, sendo o maior prejuízo observado na concentração de 20 mM. Foi detectada maior porcentagem de acrossomos íntegros nos grupos tratados. A glicerolização e, principalmente, a exposição do espermatozóide ao nitrogênio líquido e posterior descongelação foram responsáveis pela diminuição da motilidade espermática, em consequência ao prejuízo da função mitocondrial promovida pela produção de radicais livres durante o processamento seminal. A gestação foi diagnosticada em duas fêmeas do grupo IA-GSH10 e duas do grupo IA-GSH0. Em conclusão, a adição de 10 e 20 mM de GSH ao diluidor para criopreservação seminal não promoveu os efeitos protetores esperados na espécie canina, sendo a concentração de 20 mM responsável por maiores prejuízos à amostra seminal. A adição de 10 mM de GSH ao diluidor para criopreservação seminal na espécie canina manteve o índice de fertilidade semelhante ao obtido com sêmen criopreservado sem a suplementação antioxidante (AU)

The present experiment aimed to compare the addition of different concentrations of reduced glutathione (GSH) on frozen-thawed canine semen, considering the morphofunctional characteristics; and to verify the pregnancy rate and number of puppies per litter obtained from intrauterine insemination by endoscopic catheterization of the cervix, with frozen-thawed semen containing different concentrations of glutathione. During the first phase of the experiment, two seminal samples collected weekly from 11 mature dogs were used. Three different concentrations of reduced glutathione (0, 10 and 20 mM) were supplemented in a tris-citrate egg yolk extender. The fresh, chilled, glycerolized and post-thawed semen were assessed by flow cytometry using specific probes to determine plasma membrane and acrosomal integrity, mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay was also performed to assess the occurrence of oxidative stress. In the second phase of the experiment, six canine females were allocated into two groups: intrauterine insemination with frozen-thawed semen containing 10 mM GSH (IA-GSH10, n = 3) and without the addition of glutathione (IA-GSH0, n = 3). Bitches were monitored by vaginal cytology, vaginoscopy, progesterone and LH assays. Two inseminations were performed on days 5 and 6 post LH peak. We verified that the addition of 10 and 20 mM of GSH to semen extender promoted a decrease in post-thaw sperm motility, as well as a higher damage degree at the 20 mM concentration. We also detected a higher percentage of acrossomal integrity in treated groups. At glycerolization and moreover, the sperm exposure to liquid nitrogen and further thawing, were responsible for the decrease in sperm motility, due to the loss of mitochondrial function through the free radicals production. Gestation was diagnosed in two female from IA-GSH10 group and two bitches of the IA-GSH0 group. In conclusion, we did not observe the expected protective effects of the addition of 10 and 20 mM GSH to semen extender. Furthermore, the concentration of 20 mM was responsible for the more extreme damage to semen sample. The supplementation of 10 mM GSH to semen extender for cryopreservation maintained the fertility rates similar to the ones observed for cryopreservation without antioxidant supplementation in dogs (AU)

Fertilidade após a inseminação artificial intra-cervical ou laparoscópica intra-uterina de ovelhas utilizando diluidores à base de água de coco / Fertility following intracervical or intrauterine laparoscopic insemination of ewes using extenders based on coconut water

O objetivo deste estudo foi avaliar a taxa de prenhez em ovelhas utilizando diluidores à base de água de coco (in natura: ACN ou em pó: ACP-102®) após inseminação artificial intra-cervical (Experimento 1) ou laparoscópica intra-uterina (Experimento 2). Experimento 1. Sêmen de 4 carneiros Santa Inês foi coletado, diluído a 37°C (T1: ACN; T2: ACP-102®) e resfriado á 4°C. 56 ovelhas Santa Inês foram inseminadas cervicalmente após a sincronização, 31 utilizando o diluidor ACN e 25 o diluidor ACP-102®. Experimento 2. Sêmen de 5 carneiros adultos (Santa Inês: n=04; Dorper n=01) foi coletado e processado de acordo com o descrito. 64 ovelhas SRD foram inseminadas intra-uterina por laparoscopia após a sincronização do estro, 37 utilizando o diluidor ACN e 27 o diluidor ACP-102®. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia. A taxa de prenhez entre os tratamentos, dentro de cada método de inseminação, entre cada diluidor para ambos métodos de inseminação foi analisada pelo teste do Qui-quadrado (p<0,05). A taxa de prenhez após IA intra-cervical (ACN: 25,8% vs. ACP-102®: 48%) e laparoscópica (ACN: 72,9% vs ACP-102®: 70,3%) não foi influenciada pelos diluidores. A taxa de prenhez foi influenciada pelo método de inseminação (intra-cervical: 35,7% vs.laparoscopia: 71,8%; p<0,05). Os diluidores a base de água de coco podem ser utilizados nas inseminações artificiais cervical ou laparoscopica em ovelhas do Nordeste do Brasil em condições de campo.(AU)

The objetive of this study was to evaluate pregnancy rates in ewes using extenders based on coconut water (in natura: NCW or in powder: PCW-102®) following intra - cervical (Trial 1) or intrauterine laparoscopic insemination (Trial2). Trial 1. Semen from 4 Santa Inês rams were collected, diluted at 32°C (T1: NCW; T2: PCW-102®) and cooled to 4°C. 56 adult Santa Inês ewes were inseminated intra-cervically following syncronization, 31 using the extender NCW and 25 the extender PCW-102®. Trial 2. Semen from 5 rams (Santa Inês: n=04; Dorper n=01) were collected and processed as described. 64 adult crossbred multiparous ewes were inseminated intrauterine by laparoscopy following oestrus syncronization. 37 ewes using the extender NCW and 27 the extender PCW-102®. The pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography. The fertility rates between treatments for each method of insemination and within each extender for both methods were analysed by Chi-square test (p<0,05). The pregnancy rates following intra-cervical (NCW: 25.8% vs PCW-102®: 48%) and intrauterine (NCW: 72.9% vs 70.3%) inseminations were not influenced by the extenders. The pregnancy rate was influenced by insemination method (intra-cervical: 35.7% vs laparoscopy: 71.8%; p<0,05). The extenders based coconut water as basis can be used following cervical or intra-uterine laparoscopic inseminations in ewes from Northeast of Brazil under field conditions.(AU)

EFFECT OF TRANSCERVICAL TECHNIQUES AND LAPAROSCOPY ON PREGNANCY RATE OF SHEEP INSEMINATED IN FIXED-TIME / EFEITO DAS TÉCNICAS TRANSCERVICAL E LAPAROSCÓPICA SOBRE A TAXA DE PRENHEZ DE OVELHAS INSEMINADAS EM TEMPO-FIXO

The objective of this experiment was to evaluate the effect of the transcervical and laparoscopic techniques on the pregnancy rate of inseminated sheep in fixed-time. The pregnancy rate for the transcervical and for laparoscopic techniques was 40% (p>0.05). About the place of deposition of the semen in transcervical artificial insemination (AI), there was not difference in the pregnancy rate (p>0.05), with rates of 25.0% in the superficial cervical, 43.7% in medium cervical, 41.7% in deep cervical and 50.0% intrauterine. These results demonstrate that transcervical AI showed similar results to the obtained with laparoscopy, when these techniques are accomplished in fixed-time. KEY WORDS: Cervix, intrauterine, frozen semen, traction

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo. A taxa de prenhez para as técnicas transcervical e laparoscópica foi de 40% (p>0.05). Quanto ao local de deposição do sêmen na inseminação artificial (IA) transcervical, não houve diferença na taxa de prenhez (p>0.05), com taxas de 25.0% na cervical superficial, 43.7% cervical médio, 41.7% cervical profundo e 50.0% intra-uterino. Estes resultados demonstram que a IA transcervical apresenta resultados semelhantes aos obtidos com o uso de laparoscopia, quando estas técnicas são realizadas em tempo-fixo. PALAVRAS-CHAVE: Cérvix, intrauterino, sêmen congelado, tracionamento

Gestation rate of Santa Inês females submitted to transcervical insemination with fresh semen associated or not to the epidural anesthesia / Taxa de gestação em fêmeas da raça Santa Inês inseminadas pela via transcervical com sêmen fresco

The present study aimed to evaluate the effect of epidural anesthesia associated to the technique of transcervical artificial insemination using fresh semen, on subsequent fertility of heat synchronized female sheep. Thirty multiparous and ovulocyclic Santa Ines ewes were randomly divided into three groups: G1 (12 females inseminated via transcervical without previous epidural anesthesia), G2 (12 females inseminated via transcervical with previous epidural anesthesia with 2% lidocaine with vasoconstrictor) and G3 (six females mated by the male). All animals received hormonal treatment for estrous induction and synchronization. There was no difference (p>0.05) between the average time expended to carry the procedures of transcervical artificial insemination in female sheep, being 9.9 ± 5.45 and 9.1 ± 1.67 minutes for G1 and G2, respectively. Approximately 75.0% and 58.3% of the inseminations were intrauterine or deep cervical for the G1 and G2 groups, respectively. Gestation rates of 75% and 83,3% for the groups G1 and G2 were observed, respectively (p>0.05). Transcervical artificial insemination technique using fresh semen presents good gestation rates but the previous use of epidural anesthesia with 2% lidocaine do not amplify cervical penetration and, as consequence, the gestation rate.

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da anestesia epidural com lidocaína, associada à técnica de inseminação artificial transcervical com sêmen fresco, sobre a taxa de gestação de fêmeas ovinas Santa Inês com estro sincronizado. Foram utilizadas 30 ovelhas multíparas, cíclicas, da raça Santa Inês divididas aleatoriamente em três grupos: G1 (12 fêmeas inseminadas pela via transcervical sem a realização prévia de anestesia epidural com lidocaína), G2 (12 fêmeas inseminadas pela via transcervical com prévia anestesia epidural com cloridrato de lidocaína a 2% com vasoconstritor) e G3 (06 fêmeas que foram cobertas pelo macho). Todas as ovelhas foram submetidas a tratamento hormonal para indução e sincronização do estro. Não foram observadas diferenças (p>0,05) entre o tempo médio gasto para realizar os procedimentos de inseminação artificial transcervical em fêmeas ovinas da raça Santa Inês, 9,9 ± 5,45 e 9,1 ± 1,67 minutos para G1 e G2, respectivamente. Aproximadamente 75,8 e 58,3% das inseminações foram intra-uterina ou cervical profunda para os grupos G1 e G2, respectivamente. Foram observadas taxas de gestação de 75 e 83,3% para os grupos G1 e G2, respectivamente (p>0,05). A técnica de inseminação artificial transcervical utilizando sêmen fresco apresenta bons índices gestacionais, porém a utilização prévia de anestesia epidural com lidocaína 2% não amplifica a pen

Avaliação dos protocolos de sincronização de estro em ovelhas, com diferentes tempos de exposição aos progestágenos e distintas doses de eCG

Objetivou-se avaliar protocolos de sincronização do estro e da ovulação, com esponja impregnada de acetato de medroxiprogesterona (MAP), mantida por diferentes períodos (G ? grupo - I e GII ? 6 dias, GIII e GIV ? 9 dias e GV e GVI ? 13 dias) e associado a duas dosagens de gonadotrofina coriônica eqüina (eCG, GII, GIV e GVI ? 350UI e GIII, GV e GVI ? 500UI). Assim, ovelhas da raça Santa Inês (n=53) receberam pessários intra-vaginais de MAP, com administração do eCG no momento da retirada. A inseminação foi realizada 48 horas após a retirada dos pessários, pela via cervical superficial, empregando-se sêmen fresco. A taxa de gestação foi determinada através da ultra-sonografia 60 dias após a inseminação. A progesterona plasmática foi determinada através de radiomunoensaio. As taxas de estro e prenhez nos grupos GI, GII, GIII, GIV, GV e GVI foram, respectivamente, 90% e 30 %; 100% e 33,3%; 100% e 33,3; 20% e 20%; 100% e 37,50 % e 80% e 40%. Foi observada diferença estatística quanto ao número de ovelhas em estro (P<0,05), mas a taxa de prenhez entre os grupos foram semelhantes. No momento da retirada do pessário, a concentração de progesterona foi superior (P<0,05) para os grupos de nove dias (GII e GV). Conforme os resultados obtidos neste estudo, conclui-se que a dosagem de eCG não influenciou os resultados obtidos e que o protocolo de curta duração pode ser utilizado com eficácia semelhante ao de longa duração, para a sincronização de estro das ovelhas

The aim was to analyze the estrous and ovulation synchronization´s protocols, with medroxyprogesterone acetate (MAP), maintained by different periods (G ? group - I and GII - 6 days, GIII and GIV - 9 days and GV and GVI - 13 days) and linked to two doses of equine chorionic gonadotropin (eCG, GII, GIV and GVI - 350UI and GIII, GV and GVI- 500UI). Thus, Santa Ines sheep breed (n=53) received intravaginal pessaries of MAP, with administration of eCG at the time of withdrawal. The insemination was performed 48 hours after the withdrawal of pessaries, through superficial cervical, using fresh sperm. The pregnancy rate was determined by ultrasound 60 days after insemination. The progesterone plasma was determined by radiomunoensaio. The rate of estrus and pregnancy in groups GI, GII, GIII, GIV, GV and GVI were respectively, 90% and 30%; 100% and 33.3%; 100% and 33.3; 20% and 20%; 100% and 37.50% and 80% and 40%. The number of ewes in estrus was a statistical difference in (P< 0.05) , but the pregnancy rates between the groups were similar. At the time of withdrawal of the pessaries, the concentration of progesterone was higher (P <0.05) for groups of nine days (GII and GV). It was concluded that the strength of eCG did not influence the results and that the protocol of short duration can be used with similar efficacy to the long-term for the synchronization of estrus of sheep