First molecular detection of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi in a domestic cat (Felis catus) from an urban area in eastern Amazon

Background: Domestic cats have been implicated as accidental hosts of Leishmania sp. However, in recent years, the recurrent description of new cases in endemic and nonendemic areas draw attention to the potential epidemiological role of cats as reservoir hosts. Although dogs are considered urban reservoirs, cats could act as a secondary natural reservoirs in these areas. Thus, feline leishmaniasis has become an emerging disease in several countries worldwide. Case presentation: This study aimed to describe the first case of feline leishmaniasis in a stray animal that presented lesions compatible with the disease in Belém, Pará, Brazil, an important urban area in eastern Amazon. Serological tests for Leishmania infantum (ELISA and IFA) were nonreactive, whereas histopathological examination indicated infectious dermatitis caused by Leishmania spp. or Toxoplasma gondii. Cytopathological study of lesion aspirate confirmed the presence of Leishmania sp. amastigotes within macrophages. Finally, molecular analyses revealed that the feline infection was caused by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. Conclusion: To the best of the authors' knowledge, this study reports the first case of natural infection by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi in a feline from eastern Amazon. These findings suggest domestic cats as potential secondary reservoir hosts of Leishmania spp. in Belém, which reinforces the importance of further epidemiological investigation of feline leishmaniasis, especially in urban areas with human cases.(AU)

Outbreak of leishmaniasis caused by Leishmania enriettii in guinea pigs (Cavia porcellus) / Surto de leishmaniose causada por Leishmania enriettii em cobaias (Cavia porcellus)

We describe an outbreak of leishmaniasis in seven guinea pigs (Cavia porcellus) in which nodular ulcerated skin lesions of varying sizes were observed in the nasal cavity, upper lip, pinnae, vulva, and periarticular region of the limbs. Cytologic exam of collected samples of the lesions in the auricle of one of the animals revealed macrophages containing parasitophorous vacuoles of approximately 4.0μm in diameter in their cytoplasm with morphology suggestive of Leishmania sp. Although skin lesions spontaneously regressed in two of the Guinea pigs, only one survived. All six animals that died were necropsied. Grossly, all animals showed bloody nodular cutaneous lesions with crusts. One of the guinea pigs had distended dark red and firm lungs. Histopathology of the skin lesions revealed histiocytic interstitial acanthotic dermatitis associated with a myriad of Leishmania organisms within macrophages cytoplasm. In the lung, the lesions were characteristic of broncho-interstitial pneumonia with focal infiltrates of neutrophils, epithelioid macrophages, and multinucleated giant cells containing 2µm basophilic amastigotes with morphology compatible with Leishmania spp. A focal granulomatous lesion ,associated with the causal agent in the lung is a novel description of leishmaniasis in guinea pigs caused by L. enriettii. The polymerase chain reaction (PCR) technique with mini-exon primer performed in samples of lesions from two affected guinea pigs was positive and equal to the reference strain, identifying Leishmania enriettii. The cytological, macroscopic, and histological lesions associated with the PCR technique allowed the diagnosis of leishmaniasis and the identification of the specie L. enriettii.

Descrevemos um surto de leishmaniose em sete cobaias (Cavia porcellus), com lesões cutâneas nodulares ulceradas de tamanhos variados observadas na cavidade nasal, lábio superior, pavilhões auriculares, vulva e região periarticular dos membros. No exame citológico foram encontrados macrófagos contendo vacúolos parasitóforos no citoplasma de aproximadamente 4.0μm em diâmetro com morfologia sugestiva de Leishmania sp. Apesar de regressão espontânea das lesões cutâneas terem ocorrido em duas das sete cobaias, apenas um sobreviveu. Seis dos sete animais afetados morreram e foram necropsiados. Macroscopicamente, todos os animais apresentaram lesões cutâneas nodulares, crostosas e sanguinolentas. Uma das cobaias tinha pulmões vermelho-escuros, distendidos e firmes. A histopatologia das lesões cutâneas revelou dermatite acantótica intersticial histiocítica associada a miríades de organismos de Leishmania no citoplasma de macrófagos. Nos pulmões as lesões eram características de pneumonia bronco-intersticial com infiltrado focal de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos epitelioides e células gigantes multinucleadas contendo amastigotas basofílicos de 2µm com morfologia compatível com Leishmania spp. Lesões granulomatosas focais associadas ao agente no pulmão são um achado inédito na leishmaniose causada por L. enriettii em cobaias. A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) com primer mini-exon realizada em amostras de lesões de duas cobaias afetadas foi positiva, identificando Leishmania enriettii. Os aspectos macroscópicos, citológicos, e histológicos associados à técnica da (PCR), permitiram o diagnóstico da leishmaniose e a identificação da espécie L. enriettii.

Patógenos transmitidos por vetores na reprodução canina / Vector-borne pathogens in canine reproduction

O artigo apresenta uma revisão sobre os efeitos reprodutivos da infecção pelos principais patógenos transmitidos por vetores que acometem cães, Leishmania spp., Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp. e Trypanosoma spp. São discutidas a patologia genital, fertilidade masculina e feminina, transmissão venérea, transmissão vertical, transmissão horizontal mãe-filho e sua relevância na epidemiologia das doenças.(AU)

The article presents a review of the reproductive effects of infection by main vector-borne pathogens of dogs, Leishmania spp., Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp. and Trypanosoma spp. Genital pathology, male and female fertility, venereal transmission, vertical transmission, horizontal mother-offspring transmission and their relevance to the epidemiology of the diseases are discussed.(AU)

High titers of anti-Leishmania spp. antibodies in apparently healthy dogs in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná, Brazil / Títulos altos de anticorpos anti-Leishmania spp. em cães aparentemente saudáveis da Mesoregião Norte Pioneiro do estado do Paraná, Brasil

Leishmaniasis is an anthropozoonosis with vector transmission, and knowledge regarding the occurrence of this parasitosis in sentinels can contribute to infection and disease control measures in humans. The objectives of this study were to evaluate the occurrence of Leishmania exposure and infection in dogs from urban and rural areas in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná, to evaluate possible risk factors, and to analyze the statistical agreement between the serological techniques that were used. Using a convenience sampling, serum and whole blood samples were collected to perform serological and molecular assays, respectively. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect fluorescent antibody test (IFAT) identified 29/204 (14.2%) and 20/204 (9.8%) seropositive dogs, respectively. Five dogs (2.4%) were seropositive for both serological tests, and four dogs presented high titers in the IFAT. None of the samples tested positive for Leishmania spp. DNA according to polymerase chain reaction analysis. No factors were significantly associated with infection. Leishmania parasites circulate in urban and rural dogs in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná. Despite the absence of clinical cases, seropositive animals with high antibody titers should serve as a warning to the local population that should be properly informed regarding the prevention.(AU)

A Leishmaniose é uma antropozoonose e sua transmissão ocorre através da picada de flebotomíneos de diferentes gêneros, dependendo da localização geográfica. O conhecimento sobre a ocorrência desta parasitose nos reservatórios pode colaborar com medidas de controle da infecção e doença nos humanos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar a ocorrência da infecção por Leishmania, em cães de áreas urbanas e rurais, na região da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná; avaliar possíveis fatores de risco à infecção e analisar a concordância estatística entre as técnicas sorológicas utilizadas. Para tanto, foram colhidas 204 amostras de soro e sangue total de cães escolhidos aleatoriamente de municípios da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná para a detecção de anticorpos anti-Leishmania spp., pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), e para a detecção de DNA de Leishmania spp. pela reação em cadeia pela polimerase (PCR). Dos 204 cães testados, 29 (14,2%) e 20 (9,8%) foram soropositivos pelo ELISA e RIFI, respectivamente. Cinco cães (2,4%) foram soropositivos em ambos os testes sorológicos. Não foram observados fatores abióticos e bióticos associados à infecção. A concordância entre as técnicas diagnósticas calculada por Kappa foi de 0,34. Conclui-se que, apesar da baixa ocorrência de positividade para leishmaniose e da ausência de casos sintomáticos, os resultados deste estudo devem ser um alerta para a população local por se tratar de uma importante zoonose e, portanto, medidas de prevenção e controle não devem ser negligenciadas.(AU)

In-house serological ELISA as a leishmaniosis diagnostic test: development and applications in canines from the western border of Brazil / ELISA "in house" para o diagnóstico de leishmaniose: desenvolvimento e aplicação em caninos da fronteira Oeste do Brasil

Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

Feline leishmaniosis: hematological and biochemical analysis / Leishmaniose felina: análises de hematologia e bioquímica

One hundred and sixty-six cats from two animal shelters were subjected to enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), conventional polymerase chain reaction (cPCR), quantitative PCR (qPCR) and parasitological tests (PA) for the diagnosis of Leishmania spp. Among them, 15% (25/166), 53.6% (89/166), 3.6% (06/166) and 1.8% (03/166) were positive by ELISA, IFAT, both PCRs and PA, respectively. The sequencing of ITS-1 PCR amplicons revealed a 100% match with Leishmania infantum. After the Leishmania spp. survey, 12 cats were selected and divided into two groups for clinical, hematological, and biochemical analysis: six L. infantum positive cats (G1) and six Leishmania spp. negative cats (G2). All the cats were negative for feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV). A statistical analysis indicated significantly low platelet counts and significant hyperproteinemia associated with hypoalbuminemia in positive cats (p<0.05). Our results suggest that in endemic areas, cats with clinical signs of feline leishmaniosis (such as skin lesions, weight loss and/or enlarged lymph nodes) and that exhibit hematological and biochemical changes, such as low platelet counts and hyperproteinemia with hypoalbuminemia, should be tested for Leishmania spp. infection.(AU)

Cento e sessenta e seis gatos de dois abrigos foram submetidos ao diagnóstico de Leishmania spp. por ensaio imunoenzimático (ELISA), imunofluorescência indireta (RIFI), reação em cadeia pela polimerase convencional (cPCR) e quantitativa (qPCR) e métodos parasitológicos (PA). Destes, 15% (25/166), 53,6% (89/166), 3,6% (06/166) e 1,8% (03/166) foram positivos por ELISA, RIFI, as duas PCRs e PA, respectivamente. O sequenciamento dos produtos amplificados da PCR ITS-1 foi 100% idêntico à Leishmania infantum. Após o inquérito, 12 gatos foram selecionados para compor dois grupos para análises de hematologia e bioquímica: 6 gatos positivos para L. infantum (G1) e 6 gatos Leishmania spp. negativos (G2). Todos os gatos foram negativos para o vírus da imunodeficiência felina (FIV) e o da leucemia felina (FeLV). Foi observada uma diminuição na contagem de plaquetas e uma hiperproteinemia e hipoalbuminemia significativas em gatos positivos (p<0,05). Esses resultados sugerem que, em áreas endêmicas, os gatos com sinais clínicos de leishmaniose felina (tais como lesões dermatológicas, perda de peso e/ou linfonodos aumentados), associados a alterações hematológicas e bioquímicas, como contagem reduzida de plaquetas e hiperproteinemia com hipoalbuminemia, devem ser testados para leishmaniose felina.(AU)

In-house serological ELISA as a leishmaniosis diagnostic test: development and applications in canines from the western border of Brazil / ELISA "in house" para o diagnóstico de leishmaniose: desenvolvimento e aplicação em caninos da fronteira Oeste do Brasil

ABSTRACT: Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

RESUMO: A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

A case of canine visceral leishmaniasis of unknown origin in Curitiba (state of Paraná, Brazil) treated successfully with miltefosine / Caso de leishmaniose visceral canina de origem desconhecida em Curitiba (Estado do Paraná, Brasil) tratado com sucesso com miltefosina

There are no records of autochthonous cases of canine visceral leishmaniasis in the city of Curitiba, Paraná state, Brazil. In 2020, a male French bulldog (CW01), approximately 2 years old was taken by its owners to a private veterinarian clinic. The suspicion of CVL was confirmed by means of a serology test (ELISA/IFAT reagent), rapid chromatographic immunoassay (DPP®) (ELISA - Biomanguinhos®), parasitological culture and quantitative polymerase chain reaction (qPCR). The animal routinely frequented parks in Curitiba and was taken on several trips to the municipalities of Bombinhas and Balneário Camboriú (Santa Catarina) and to Matinhos (Paraná) where CVL had not previously been reported. Treatment was initiated orally with Milteforan™ which resulted in a significant reduction in the parasitic load. The suspicion of autochthony was investigated through entomological research. A total of 10 traps were installed, one at the animal's home, seven in adjacent city blocks and two in a forest edge. No sandflies were trapped in the dog's home and adjacent houses. The traps in the forest edge caught one Migonemyia migonei female and five Brumptomyia spp. females. This case serves as a warning of the possible introduction of CVL in the city of Curitiba.(AU)

Não há registros de casos autóctones de leishmaniose visceral canina (LVC) no município de Curitiba, Paraná, Brasil. Em 2020, um "bulldog" francês macho (CW01), com aproximadamente 2 anos de idade, foi levado por seus donos a uma clínica veterinária particular. A suspeita de LVC foi confirmada por meio de teste sorológico (reagente ELISA/IFAT), imunoensaio cromatográfico rápido (DPP®) (ELISA - Biomanguinhos®), cultura parasitológica e reação quantitativa em cadeia da polimerase (qPCR). O animal frequentava, rotineiramente, parques de Curitiba e foi levado em diversas viagens para Bombinhas e Balneário Camboriú (Santa Catarina) e para Matinhos (Paraná), onde a LVC não havia sido relatada anteriormente. O tratamento foi iniciado por via oral com Milteforan™ (Virbac) o que resultou em redução significativa da carga parasitária. A suspeita de autóctone foi investigada por meio de pesquisa entomológica. Foram instaladas 10 armadilhas, uma na casa do animal, sete em quarteirões adjacentes e duas na borda da mata. Nenhum inseto foi capturado na casa do proprietário do animal e nas casas adjacentes. As armadilhas na borda da mata capturaram uma fêmea de Migonemyia migonei e cinco Brumptomyia spp. fêmeas. Este caso serve de alerta para a possível introdução da LVC na cidade de Curitiba.(AU)

PCR-RLFP characterization of Leishmania spp. in domestic animals from the south-western border of Brazil / Caracterização de Leishmania spp. pela técnica de PCR-RFLP em animais domésticos da fronteira Oeste do Brasil

The aim of this study was to characterize Leishmania spp. from canine and feline samples using Polymerase Chain Reaction (PCR)- Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP). It was conducted in the southern region of Brazil, located at border crossings to Argentina and Uruguay. Samples were collected from 116 dogs (Canis lupus familiaris) and 89 cats (Felis catus). The PCR was performed to screen for an LT1 fragment from kinetoplast DNA (kDNA) target gene, and positive samples were subjected to a second PCR for an internal transcribed spacers (ITS1) region from ribosomal DNA (rDNA) target. RFLP was performed using the Haemophilus aegyptius (HAE III) restriction endonuclease (Fermentas ®). Positive samples by PCR ITS1 were sequenced and deposited in NCBI GenBank, and a phylogenetic analysis was developed. We found that 12.9% (15/116) of the samples from dogs were positive. All the 89 cat samples were negative. Positive samples were tested against Leishmania reference strains presenting different patterns in PCR-RFLP, and these samples showed bands denoting similarity to the standard species of Leishmania infantum, proven through sequencing and phylogenetic analysis. The RFLP technique, alone, was shown to be feasible for practical application and confirmation of the involved Leishmania spp.(AU)

O objetivo deste trabalho foi caracterizar espécies de Leishmania em amostras de caninos e felinos, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR)- polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição (RFLP). O estudo foi realizado na região de fronteira no sul do Brasil, divisa com Argentina e Uruguai. Amostras foram coletadas de 116 cães (Canis lupus familiaris) e 89 gatos (Felis catus). A PCR foi realizada com o gene alvo do fragmento LT1 do DNA do cinetoplasto (kDNA) para triagem e, as amostras positivas foram submetidas a uma segunda PCR com alvo ITS1 no DNA ribossomal (rDNA). O RFLP foi realizado com a endonuclease de restrição Haemophilus aegyptius (HAE III) (Fermentas ®). As sequências positivas no PCR-ITS1 foram depositadas no NCBI GenBank, além disso, a análise filogenética foi realizada. Foram detectadas 12,9% (15/116) amostras positivas em cães. Das 89 amostras de gatos todas foram negativas. Cepas de referência de Leishmania, com padrões diferentes na PCR-RFLP, e amostras positivas apresentaram similaridade das bandas com as espécies padrão de Leishmania infantum, o que foi comprovado no sequenciamento e análise filogenética. A técnica de RFLP, sozinha, demonstrou viabilidade para a aplicação prática e a confirmação das espécies de Leishmania spp. envolvidas.(AU)

Molecular survey of Leishmania spp. in skin samples of capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from different areas of Brazil / Investigação molecular de Leishmania spp. em amostras de pele de capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) de diferentes regiões do Brasil

Leishmaniases comprise a spectrum of diseases caused by protozoan parasites of the genus Leishmania, with some species of rodents being incriminated as reservoirs. The capybara is the largest extant rodent species in the world and is widely distributed in South America. The occurrence of infection by Leishmania spp. was investigated in capybaras captured in Brazil during 2015­2019 from established populations in five highly anthropic areas of the state of São Paulo and two natural areas of the states of Mato Grosso and Mato Grosso do Sul. A total of 186 individuals were captured and subjected to abdominal skin biopsy. All skin samples were Leishmania kDNA-negative, suggesting that capybaras have no role in the transmission cycles of Leishmania species in the studied areas despite the well-known role of other rodents in the life cycle of Leishmania spp.(AU)

As leishmanioses compreendem um espectro de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e algumas espécies de roedores são incriminadas como reservatórios de Leishmania spp. As capivaras compreendem a maior espécie de roedores existentes e são amplamente distribuídas na América do Sul. Para investigar a ocorrência de infecção por Leishmania spp. em capivaras, durante os anos de 2015-2019 capivaras foram capturadas em cinco áreas antrópicas do estado de São Paulo e em duas áreas naturais dos estados do Mato Grosso e do Mato Grosso do Sul, todos esses ambientes com populações de capivaras estabelecidas. Um total de 186 indivíduos foram capturados e submetidos à biópsia de pele abdominal. Todas as amostras de pele foram negativas para o alvo kDNA, assim, os dados sugerem que nas áreas estudadas as capivaras não têm papel no ciclo de transmissão de espécies de Leishmania spp., apesar do papel bem conhecido de outros roedores no ciclo de vida de Leishmania spp.(AU)

The outcomes of polyparasitism in stray cats from Brazilian Midwest assessed by epidemiological, hematological and pathological data / Poliparasitismo em gatos não domiciliados no Centro-Oeste brasileiro avaliado através dos aspectos epidemiológicos, hematológicos e patológicos

We evaluated the epidemiological, hematological, and pathological data of Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, feline immunodeficiency virus (FIV), and feline leukemia virus (FeLV) infections and the coinfections in stray cats of an endemic area for leishmaniasis. The diagnosis was performed by serological tests and necropsy. We described gross lesions and histopathological findings. We used immunohistochemistry and chromogenic in situ hybridization for L. infantum detection. We found infection in 27 out of 50 sampled cats, among them, 14 presented coinfections. A strong correlation between splenomegaly and lymphadenomegaly with FeLV, and an association between hepatic lesions and cachexia with parasitism due to P. illiciens were observed. Moreover, we found a significant increase in the monocyte count in the FeLV-infected and a decrease in the red blood cell count in the FIV-infected animals. Amastigote forms of Leishmania spp. and tissue changes were detected in lymphoid organs of an animal coinfected with P. illiciens, T. gondii, and FIV. Polyparasitism recorded in stray cats of the Brazilian Midwest should be considered in effective control strategies for public health diseases. Moreover, stray cats of Campo Grande may be a source of infection of FIV, FeLV and P. illiciens for populations of domiciled cats.(AU)

Foi avaliada a epidemiologia, hematologia e patologia das infecções por Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, vírus da imunodeficiência felina (FIV) e vírus da leucemia felina (FeLV) e das coinfecções em gatos não domiciliados em uma área endêmica para leishmaniose. O diagnóstico foi realizado por exames sorológicos e necropsia. Foram descritas lesões macroscópicas e achados histopatológicos. Usaram-se imuno-histoquímica e hibridização cromogênica in situ para detecção de L. infantum. Encontrou-se infecção em 27 dos 50 gatos amostrados, dentre eles, 14 apresentavam coinfecções. Foi observada forte correlação entre esplenomegalia e linfadenomegalia com FeLV, e associação entre lesões hepáticas e caquexia com parasitismo por P. illiciens. Além disso, foi encontrado um aumento significativo na contagem de monócitos nos animais infectados pelo FeLV e uma diminuição na contagem de hemácias nos animais infectados pelo FIV. Formas amastigotas de Leishmania spp. e alterações teciduais foram detectadas em órgãos linfoides de um animal coinfectado com P. illiciens, T. gondii e FIV. O poliparasitismo registrado em gatos errantes do Centro-Oeste brasileiro deve ser considerado nas estratégias de controle de zoonoses. Além disso, gatos errantes de Campo Grande podem ser fontes de infecção de FIV, FeLV e P. illiciens para populações de gatos domiciliados.(AU)

Ocorrência de Leishmania spp. na população canina domiciliada e humana de Três Lagoas, Mato Grosso do Sul e análise espacial / Occurrence of Leishmania spp. in canine domiciled and human population of Three Lagoas, Mato Grosso do Sul and spatial analysis / Presencia de Leishmania spp. em población humana y domiciliada canina de Tres Lagoas, Mato Grosso do Sul y análisis espacial

A Leishmaniose Visceral (LV), doença negligenciada de caráter crônico e sistêmico, causada pelo parasita Leishmania spp. representa um problema de Saúde Pública, principalmente em países com população vulnerável, como o Brasil. Devido à urbanização de grandes centros, cães infectados por este parasito representam um importante reservatório no ciclo urbano, precedem a doença humana e contribuem para a manutenção de casos de Leishmaniose Visceral Canina (LVC). O objetivo do estudo foi identificar a ocorrência de Leishmania spp. na população canina domiciliada e humana de Três Lagoas ­ MS, Brasil, pelo uso das técnicas de Dual Path Platform (DPP), Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e análise por georreferenciamento. Foram coletadas 566 amostras sanguíneas de cães. Além disso, informações epidemiológicas adicionais foram coletadas do sistema de saúde do município, e posteriormente, a análise espacial foi realizada. Como resultado obteve ­ se 267 amostras reagentes ao teste DPP, 267 amostras reagentes ao ELISA e 97 à RIFI, com 95% de concordância entre os métodos DPP e ELISA. Das amostras submetidas à PCR, 16 foram positivas para Leishmania spp. O uso do georreferenciamento para LVC canina em Três Lagoas forneceu subsídios para identificar áreas com prioridade de intervenção para o controle da doença. A presença de flebotomíneos, associado à localização geográfica, bem como às condições ambientais na região estudada, foram favoráveis à sua disseminação, bem como à transmissão da doença aos cães e a humanos.

Visceral Leishmaniasis (VL), a neglected disease of chronic and systemic character, caused by the parasite Leishmania spp. represents a public health problem, especially in countries with vulnerable population, such as Brazil. Due to urbanization, dogs constitute an important reservoir in the disease's urban cycle, preceding human cases, and contributing to the maintenance of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL). However, few serological surveys added to the spatial analysis involving human and animal populations have been described in Três Lagoas. Therefore, the aim of this study was to identify the occurrence of Leishmania spp. in the human and domiciled canine population of Três Lagoas-MS, Brazil, using the techniques of Dual Path Platform (DPP), Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Indirect Immunofluorescence Reaction (RIFI), Polymerase chain reaction (PCR) and spatial analysis. For this study, 566 blood samples were collected from dogs. In addition, epidemiological information was collected from the municipal health system, and subsequently, spatial analysis was performed. As a result, 267 samples were reactive to the DPP test, 267 reactive to ELISA and 97 reactive to RIFI, with 95% of agreement between the DPP and ELISA methods. Sixteen samples submitted to PCR were positive for Leishmania spp. The use of georeferencing for canine CVL in Três Lagoas provided subsidies to identify areas that needed priority intervention for the control of Leishmaniasis. The presence of sandflies, associated with the geographic location, as well as the environmental conditions in the studied region, favored their dissemination, as well as the transmission of the disease to dogs and humans.

La leishmaniosis visceral (LV), enfermedad desatendida de carácter crónico y sistémico, causada por el parásito Leishmania spp. representa un problema de salud pública, principalmente en países con población vulnerable, como Brasil. Debido a la urbanización de los grandes centros, los caninos constituyen un importante reservorio del ciclo urbano de la enfermedad, precediendo casos humanos, además de contribuir para el mantenimiento de casos de Leishmaniosis Visceral Canina (LVC). A pesar de ello, pocos estudios epidemiológicos sumados al análisis espacial involucrando la población humana y animal fueron descritos en el municipio de Três Lagoas. El objetivo del estudio fue identificar la ocurrencia de Leishmania spp. en la población canina domiciliada y la población humana de Três Lagoas ­ MS, Brasil, utilizando las técnicas de Dual Path Platform (DPP), Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), la Reacción de Immunofluorescencia Indirecta (RIFI), Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y análisis de georreferenciamiento. Para eso, fueron colectadas 566 muestras sanguíneas de caninos. Además, informaciones epidemiológicas adicional es fueron colectadas del sistema de salud del municipio para la realización del análisis espacial. Como resultados se obtuvieron 267 muestras positivas para DPP, 267 muestras positivas para ELISA y 97 muestras positivas para RIFI, con 95% de concordancia entre los métodos DPP y ELISA. De las 566 muestras destinadas para PCR, 16 fueron positivas para Leishmania spp. El uso del georreferenciamiento para LVC en Três Lagoas ayudó a identificar áreas con prioridad de intervención para el control de la enfermedad. La presencia de flebotomíneos, asociada a la localización geográfica, así como las condiciones ambientales en la región estudiada, se mostraron favorables para la diseminación y para la transmisión de la enfermedad a los caninos y humanos.

Histological and immunohistochemical evaluations of the bone marrow from femur and sternal manubrium of dogs reactive for leishmaniasis by DPP® and ELISA tests / Avaliações histológica e imunoistoquímica da medula óssea do fêmur e do manúbrio esternal de cães reagentes para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA

As the bone marrow is one of the most organs affected by canine visceral leishmaniasis (CVL), samples from this are frequently taken for parasitological tests, with occurrence of myelodysplastic changes, with consequent anemia, leukopenia, and thrombocytopenia. Thus, this study aimed to investigate the histological and immunohistochemical changes in the bone marrow of the femur and sternal manubrium of dogs reactive for leishmaniasis by DPP® and ELISA tests. For this, thirteen canines from the epidemiological routine for CVL carried out by the Directorate of Zoonosis Surveillance of Goiânia (DVZ), GO, Brazil, were subjected to anatomopathological examination. 46.2% of bone marrow samples from the femur showed a higher proportion of the red series, and 53.9% of bone marrow of the sternal manubrium evidenced a higher proportion of the red series. Also, there were varied macrophage hyperplasia, hemosiderosis, and megakaryocytic emperipolesis. Amastigote forms of Leishmania spp. in the bone marrow of the femur and sternal manubrium to histopathological and immunohistochemical evaluations were observed, with good agreement them, but without difference in the parasite intensity between the bone marrow of these anatomical sites. It was concluded that bone marrow of the femur and sternal manubrium of dogs reactive for leishmaniasis by DPP® and ELISA tests has histological changes resulting from the disease, regardless of the parasite presence or intensity, with macrophage hyperplasia, hemosiderosis, and emperipolesis being the main medullary changes in these animals. Also, the bone marrow of the femur and sternal manubrium are useful anatomical sites for the diagnosis of CVL by direct methods.

Como a medula óssea é um dos órgãos mais acometidos pela leishmaniose visceral canina (LVC), amostras desta são frequentemente colhidas para exames parasitológicos, sendo possível a ocorrência de alterações mielodisplásicas, com consequente anemia, leucopenia e trombocitopenia. Assim, este estudo teve como objetivo investigar alterações histológicas e imunoistoquímicas na medula óssea do fêmur e manúbrio esternal de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA. Para isso, 13 caninos da rotina epidemiológica para LVC realizada pela Diretoria de Vigilância de Zoonoses de Goiânia (DVZ), GO, Brasil, foram submetidos ao exame anatomopatológico. 46,2% e 53,9% das amostras de medula óssea do fêmur e do manúbrio esternal apresentaram maior proporção da série vermelha, respectivamente. Além disso, havia variados graus de hiperplasia macrofágica, hemossiderose e emperipolese megacariocítica. Formas amastigotas de Leishmania spp. na medula óssea do fêmur e do manúbrio esternal às avaliações histopatológicas e imunoistoquímicas foram observadas, com boa concordância entre essas, mas sem diferença na intensidade parasitária entre a medula óssea desses sítios anatômicos. Conclui-se que a medula óssea do fêmur e do manúbrio esternal de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA apresenta alterações histológicas decorrentes da doença, independente da presença ou intensidade do parasito, sendo hiperplasia de macrófagos, hemossiderose e emperipolese as principais alterações medulares nesses animais. Além disso, a medula óssea do fêmur e do manúbrio esternal compreendem sítios anatômicos úteis ao diagnóstico de LVC por métodos diretos.

Seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Leishmania spp. in hunting dogs from Mato Grosso do Sul, Brazil / Soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leishmania spp. em cães de caça do Mato Grosso do Sul, Brasil

Toxoplasmosis, neosporosis, and leishmaniasis are important diseases of worldwide distribution and can affect both pets and humans. Hunting dogs have been trained to hunt domestic and wild animals, which makes them more exposed to parasitic infections. The present study aimed to evaluate the seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Leishmania spp. in hunting dogs from a rural area in Mato Grosso do Sul, Brazil. Serum samples were collected from 39 American Foxhound dogs, and the sex and age variables were recorded. Serum samples were subjected to an indirect fluorescent antibody test (IFAT) to detect antibodies. Seroprevalence was 35.9%, 15.4%, and 2.6% for Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leishmania spp., respectively. There was no statistical difference between genders for these diseases (P>0.05). Results demonstrated a circulation of these protozoa in hunting dogs in a rural area of the state of Mato Grosso do Sul, which can contribute to the epidemiology of these diseases.(AU)

Toxoplasmose, neosporose e leishmaniose são importantes doenças de distribuição mundial e podem afetar tanto os animais de companhia quanto os humanos. Os cães de caça têm sido treinados para caçar animais domésticos e selvagens, o que torna esses animais mais expostos a infecções parasitárias. O presente estudo teve como objetivo avaliar a soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leishmania spp. em cães de caça de área rural do Mato Grosso do Sul, Brasil. Foram coletadas amostras de soro de 39 cães da raça Foxhound-americano e as variáveis sexo e idade foram registradas. As amostras de soro foram submetidas a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção dos anticorpos. A soroprevalência foi de 35,9%, 15,4% e 2,6% para Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leishmania spp., respectivamente. Não foi observado diferença estatística entre os sexos para todas as doenças (P>0.05). Os resultados demonstram circulação desses protozoários em cães de caça de uma área rural do estado do Mato Grosso do Sul, o que pode contribuir para a epidemiologia dessas doenças.(AU)

In silico and in vitro evaluation of primers for molecular differentiation of Leishmania species / Avaliação in silico e in vitro de iniciadores para a diferenciação molecular de espécies de Leishmania

Leishmaniasis is a zoonotic disease caused by over 20 species of protozoan parasites of the genus Leishmania. Infection is commonly spread by sandflies and produces a wide spectrum of clinical signs and symptoms. Therefore, from an epidemiological and therapeutic standpoint, it is important to detect and differentiate Leishmania spp. The objective of this study was to combinate in silico and in vitro strategies to evaluate the analytical specificity of primers previously described in the literature. According to electronic PCR (e-PCR) analysis, 23 out of 141 pairs of primers selected through literature search matched their previously reported analytical specificity. In vitro evaluation of nine of these primer pairs by quantitative PCR (qPCR) confirmed the analytical specificity of five of them at the level of Leishmania spp., L. mexicana complex or Leishmania and Viannia subgenera. Based on these findings, the combination of e-PCR and qPCR is suggested to be a valuable approach to maximize the specificity of new primer pairs for the laboratory diagnosis of infections with Leishmania spp.(AU)

As leishmanioses são zoonoses causadas por mais de 20 espécies de protozoários do gênero Leishmania. As infecções são comumente disseminadas por flebotomíneos e causam um amplo espectro de manifestações clínicas. Portanto, a detecção e diferenciação de espécies de Leishmania são importantes do ponto de vista epidemiológico e terapêutico. O objetivo deste estudo foi combinar estratégias in silico e in vitro para avaliar a especificidade analítica dos primers descritos anteriormente na literatura. De acordo com a PCR eletrônica (e-PCR), 23 dos 141 pares de primers selecionados por meio de pesquisa da literatura estavam de acordo com a especificidade analítica anteriormente relatada. A avaliação in vitro de nove desses pares de primers, por PCR quantitativa (qPCR), confirmou a especificidade analítica de cinco deles ao nível de espécie de Leishmania, do complexo L. mexicana ou dos subgêneros Leishmania e Viannia. Com base nos resultados, sugere-se que a combinação de e-PCR e qPCR é uma abordagem valiosa para a validação e maximização da especificidade de novos pares de primers para o diagnóstico laboratorial de infecções com Leishmania spp.(AU)

The spread of visceral leishmaniasis in Brazil: the first canine cases described in Ji-Paraná, Rondônia, Brazil / A disseminação da leishmaniose visceral no Brasil: os primeiros casos caninos descritos em Ji-Paraná, Rondônia, Brasil

Abstract Leishmaniases are zoonotic diseases caused by protozoa of the genus Leishmania. The disease has two clinical manifestations described in humans: visceral (VL) and cutaneous (CL) leishmaniasis. In Brazil, there has been an expansion of human VL. The participation of the dog as a reservoir of Leishmania infantum, the agent of VL, is important for the epidemiology of the disease since canine cases generally precede human cases. The present study aimed to evaluate the occurrence of Leishmania spp. infection in dogs in the municipality of Ji-Paraná by PCR assays using blood samples. Leishmania DNA was detected in two of the 105 studied dogs. The PCR products were sequenced and confirmed that the two samples (1.90%) correspond to L. infantum. The dogs had allochthonous history. Therefore, the positive results found here should serve as a warning to public health agencies. This is because Ji-Paraná is the third municipality to register cases of canine leishmaniasis (CanL) in Rondônia state. Thus, reinforcing the importance of expanding studies on the epidemiology and surveillance of VL in the region.

Resumo As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania. A doença apresenta duas manifestações clínicas: leishmaniose visceral (LV) e cutânea (LC). No Brasil, a LV está em expansão. A participação do cão como reservatório é importante para a epidemiologia da doença, pois os casos caninos geralmente precedem os humanos. O presente estudo avaliou a ocorrência de LV em cães (LVC) do município de Ji-Paraná por meio de ensaios de PCR, utilizando-se amostras de sangue. O DNA de Leishmania foi detectado em dois dos 105 cães estudados. Os produtos da PCR foram sequenciados e confirmaram que duas amostras (1,90%) eram Leishmania infantum. Os cães tinham histórico alóctone. Os resultados positivos encontrados servem de alerta aos órgãos públicos de saúde. Isso porque Ji-Paraná é o terceiro município a registrar casos de LVC no estado de Rondônia. Dessa forma, reforça-se a importância da ampliação dos estudos sobre a epidemiologia e vigilância da LV na região.

Comparison of serological and molecular tests to investigate Leishmania spp. infections in stray dogs from an area of intense visceral leishmaniasis transmission in Brazil / Comparação de testes sorológicos e moleculares para investigar infecções por Leishmania spp. em cães errantes de uma área de intensa transmissão de leishmaniose visceral no Brasil

Abstract The aim of this study was to investigate the level of exposure to Leishmania infection in stray dogs in an area of intense visceral leishmaniasis transmission in the state of Pernambuco, Brazil. Blood samples from 178 dogs were analyzed using serological and molecular assays: rapid immunochromatographic test (ICT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunofluorescence antibody test (IFAT), and conventional and quantitative polymerase chain reaction (cPCR and qPCR). Positivity values obtained with serological tests were 71.4% (127/178), 70.2% (125/178), and 50.6% (90/178) using ICT, ELISA, and IFAT, respectively, with 38.8% (69/178) of the dogs were simultaneously positive for all three tests. The positivity values obtained with cPCR and qPCR were 20.2% (36/178) and 38.8% (69/178), respectively, with 11.8% (21/178) testing positive in both molecular assays. Overall, 87.1% (155/178) were positive for anti-Leishmania spp. antibodies and/or Leishmania spp. DNA. Positivity to one or more tests was statistically associated with lymphadenomegaly, skin lesions, lymphocytosis, anemia and hyperproteinemia. The results of this study revealed a high level of exposure to Leishmania in stray dogs in an area of intense human visceral leishmaniasis transmission, suggesting that dogs play a role as reservoirs in the transmission cycle of this zoonosis.

Resumo O objetivo deste estudo foi investigar o nível de exposição à infecção por Leishmania em cães errantes de uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral no estado de Pernambuco. Amostras de sangue de 178 cães foram avaliadas por testes sorológicos e moleculares: teste imunocromatográfico (IC), ensaio imunoenzimático (ELISA), teste de imunofluorescência de anticorpos (RIFI), reação em cadeia da polimerase convencional e quantitativa (cPCR e qPCR). Os valores de positividade obtidos com os testes sorológicos foram 71,4% (127/178), 70,2% (125/178) e 50,6% (90/178) com IC, ELISA e RIFI, respectivamente. E com 38,8% (69/178) dos cães mostraram-se simultaneamente positivos aos três testes. Os valores de positividade obtidos por cPCR e qPCR foram 20,2% (36/178) e 38,8% (69/178), respectivamente. E com 11,8% (21/178) dos cães foram positivos em ambos os testes moleculares. No geral, 87,1% (155/178) foram positivos para anticorpos anti-Leishmania spp. e/ou material genético de Leishmania spp. A positividade a um ou mais testes foi estatisticamente associada à linfonodomegalia, lesões cutâneas, linfocitose, anemia e hiperproteinemia. Os resultados do estudo revelam um alto nível de exposição à Leishmania spp. em cães errantes em uma área de transmissão intensa de leishmaniose visceral humana, sugerindo que eles podem desempenhar um papel como reservatórios no ciclo de transmissão dessa zoonose.

Anatomomopathological and immunohistochemical analyses of the spleen and lymph node of dogs seropositives for leishmaniasis in serological tests / Análises anatomopatológica e imuno-histoquímica do baço e linfonodo de cães soropositivos para leishmaniose em testes sorológicos

Canine leishmaniasis (CanL) is a zoonosis caused by the protozoan of the species Leishmania infantum. The spleen and lymph nodes undergo morphological changes during CanL. This research aimed to perform an anatomopathological and immunohistochemical study of these organs in dogs reactive to leishmaniasis in the Dual-path Platform chromatographic immunoassay (DPP®) and Enzyme Immunoabsorption Assay (ELISA). Twenty-seven dogs were evaluated for anatomopathological examination with 92.6% showing changes at gross evaluation, specially splenomegaly and lymphadenomegaly. All dogs showed changes in the spleen unrelated to the parasitic load, with granulomatous splenitis being the most severe change. Diffuse cortical and paracortical hyperplasia, and hyperplasia and hypertrophy of the medullary cords were observed in the lymph node. Amastigote forms of Leishmania spp. were found in the spleen and lymph node at histopathological and immunohistochemical evaluations, with good agreement between these evaluations (k = 0.55, p = 0.00124), but no difference was observed in the parasitic intensity of these organs at immunohistochemistry (p = 0.23). It was concluded that spleen and lymph node from dogs reactive to leishmaniasis on the DPP® and ELISA tests show histomorphological changes resulting from the disease, independent to the parasitic load, as well as these organs show similar parasitic load at immunohistochemical test.

A leishmaniose canina (CanL) é uma zoonose causada pelo protozoário da espécie Leishmania infantum. O baço e os linfonodos sofrem alterações morfológicas durante o CanL. Esta pesquisa teve como objetivo realizar um estudo anatomopatológico e imuno-histoquímico desses órgãos em cães reativos para leishmaniose aos testes de Imunoensaio Cromatográfico "Dual Path Platform" (DPP®) e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Vinte e sete cães foram avaliados ao exame anatomopatológico, com 92,6% exibindo alterações à avaliação macroscópica, especialmente esplenomegalia e linfadenomegalia. Todos os cães apresentaram alterações no baço não relacionadas à carga parasitária, sendo a esplenite granulomatosa a alteração mais grave. Hiperplasia cortical e paracortical difusa e hiperplasia e hipertrofia dos cordões medulares foram observadas nos linfonodos. Formas amastigotas de Leishmania spp. foram encontradas no baço e linfonodo às avaliações histopatológica e imuno-histoquímica, com boa concordância entre os métodos (k = 0,55, p = 0,00124), mas não foi observada diferença na intensidade parasitária entre esses órgãos à imuno-histoquímica (p = 0,23). Conclui-se que baço e linfonodo de cães reativos para leishmaniose aos testes DPP® e ELISA apresentam alterações histomorfológicas decorrentes da doença, independente da carga parasitária, assim como esses órgãos apresentam carga parasitária semelhante ao método imuno-histoquímico.

Pesquisa de anticorpos para Toxoplasma gondii, Leptospira spp. e Leishmania spp. em cães no município de Pardinho, São Paulo / Research for Toxoplasma gondii, Leptospira spp. and Leishmania spp. antibodies in dogs from Pardinho, São Paulo / Investigación de anticuerpos para Toxoplasma gondii, Leptospira spp. y Leishmania spp. en perros en el municipio de Pardinho, São Paulo

Com a crescente abordagem integração entre saúde humana, saúde animal e ambiental, o cão vem se destacando como potencial reservatório ou sentinela na cadeia epidemiológica de determinadas zoonoses, devido a sua importância como membro do núcleo familiar atual. O presente estudo objetivou determinar a soroprevalência e fatores de risco para toxoplasmose, leptospirose e leishmaniose visceral canina (LVC) em 181 cães do município de Pardinho, SP, Brasil, participantes de Programa de Controle Populacional, realizado pelo Serviço de Vigilância Sanitária local. As amostras de soro foram submetidas a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii (T. gondii)e Leishmania spp. pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), bem como anticorpos para Leptospira spp. pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM). Adicionalmente, questionário epidemiológico relacionado às zoonoses abordadas foi aplicado aos tutores para verificar associação epidemiológica dos fatores de risco com os resultados sorológicos. Para leptospirose, 7/181 (3,87%; IC95% 1,5-7,8%) animais foram reagentes, sendo Canicola o sorovar prevalente (5/7, 71,43%), seguido por Icterohaemorrhagiae (1/7, 14,29%) e Pyrogenes (1/7, 14,29%). Para toxoplasmose, 17/181 (9,39%; IC95% 5,6-14,6%) amostras apresentaram anticorpos específicos, sendo 8/17 (47,05%) com título de 16, 7/17 (41,17%) com título 64, 1/17 (5,88%) com título 256 e 1/17 (5,89%) com título 4096. Por outro lado, nenhuma amostra apresentou anticorpos específicos detectáveis para Leishmania spp. Por meio deste estudo, foi possível o registro da circulação de T. gondii e Leishmania spp. em cães do município estudado. Com isso, demonstra-se a importância de realização de inquéritos sorológicos em cães durante programas de controle populacional. Dada a importância de se controlar estas e outras zoonoses relevantes a saúde pública, se destacam a necessidade de ações de vigilância epidemiológica e a importância do cão como sentinela.

The dog, with the growing approach to the integration between human, animal and environmental, has been standing out as a potential reservoir or sentinel to the epidemiological chain of some specific zoonoses, due to its importance as a member of the current family nucleus. The present study aimed to determine the seroprevalence and risk factors to toxoplasmosis, leptospirosis and canine visceral leishmaniasis (LVC) in 181 dogs from Pardinho, SP, Brazil, included on a Population Control Program carried outby the local Health Surveillance Service. Serum samples were researched for Toxoplasma gondii (T. gondii) and Leishmania spp. IgG antibodies using the indirect immunofluorescence test (IFAT), whereas Leptospira spp. antibodies using the microscopic agglutination test (MAT). Additionally, an epidemiological questionnaire related to the studied zoonoses was applied to the owners to verify the epidemiological association of the risk factors to the serological results. For leptospirosis, seropositivity was in 7/181 (3.87%; 95%CI 1.5-7.8%) animals resulted reagent, with Canicola as the prevalent serovar (5/7, 71.43%), followed by Icterohaemorrhagiae (1/7, 14.29%) and Pyrogenes (1/7, 14.29%). For toxoplasmosis, 17/181 (9.39%; 95%CI 5.6-14.6%) samples resulted positive, presenting titer 16 (8/17, 47.05%), titer 64 (7/17, 41.17%), titer 256 (1/17, 5.89%), and titer 4096 (1/17, 5.88%). On the other hand, no sample resulted positive for Leishmania spp. antibodies. In this way, this study reports the unprecedented record of the circulation of T. gondii and Leptospira spp. among dogs in the studied area. This demonstrates the importance of serological surveys on dogs during population control programs. The need for epidemiological surveillance actions and the importance of the dog as sentinel are highlighted, due to the importance of controlling these and other zoonoses relevant to public health.

Con el creciente enfoque para la integración entre la salud humana, animal y ambiental, el perro se destaca como potencial reservorio o centinela en la cadena epidemiológica de determinadas zoonosis, por su importancia como miembro del núcleo familiar actual. El presente estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo para toxoplasmosis, leptospirosis y leishmaniasis visceral canina (LVC) en 181 perros de la ciudad de Pardinho, SP, Brasil, participantes del Programa de Control de la Población, realizado por el Servicio de Vigilancia Sanitaria local. Las muestras de suero fueronsometidas a reacción de inmunofluorescencia indirecta (RIFI) para la detección de anticuerpos IgG para Toxoplasma gondii (T. gondii) y Leishmania spp., así como anticuerpos frente a Leptospiraspp. por la técnica de aglutinación microscópica (SAM). Adicionalmente, se aplicó a los propietarios un cuestionario epidemiológico relacionado a las zoonosis abordadas para verificar la asociación epidemiológica de los factores de riesgo con los resultados serológicos. Para la leptospirosis, 7/181 (3,87%; IC95% 1,5-7,8%) animales fueron reactivos, siendo Canicola el serovar prevalente (5/7, 71,43%), seguido de Icterohaemorrhagiae (1/7, 14,29%) y Pyrogenes (1/7, 14,29%). Para la toxoplasmosis, 17/181 (9,39%; IC95% 5,6-14,6%) mostraron anticuerpos específicos, 8/17 (47,05%) con un título de 16, 7/17 (41,17%) %) con título 64, 1/17 (5,89%) con título 256 y 1/17 (5,88%) con título 4096. Por otro lado, ninguna muestra mostró anticuerpos específicos detectables para Leishmaniaspp. Así, en este estudio fue posible registrar la circulación de T. gondiiy Leishmaniaspp. en los perros del municipio estudiado. Esto demuestra la importancia de realizar investigaciones serológicas en perros durante los programas de control de la población. Dada la importancia de controlar estas y otras zoonosis relevantes para la salud pública, se destaca la necesidad de acciones de vigilancia epidemiológica y la importancia del perro como centinela.

Pesquisa de anticorpos para Toxoplasma gondii, Leptospira spp. e Leishmania spp. em cães no município de Pardinho, São Paulo / Research for Toxoplasma gondii, Leptospira spp. and Leishmania spp. antibodies in dogs from Pardinho, São Paulo / Investigación de anticuerpos para Toxoplasma gondii, Leptospira spp. y Leishmania spp. en perros en el municipio de Pardinho, São Paulo

Com a crescente abordagem integração entre saúde humana, saúde animal e ambiental, o cão vem se destacando como potencial reservatório ou sentinela na cadeia epidemiológica de determinadas zoonoses, devido a sua importância como membro do núcleo familiar atual. O presente estudo objetivou determinar a soroprevalência e fatores de risco para toxoplasmose, leptospirose e leishmaniose visceral canina (LVC) em 181 cães do município de Pardinho, SP, Brasil, participantes de Programa de Controle Populacional, realizado pelo Serviço de Vigilância Sanitária local. As amostras de soro foram submetidas a detecção de anticorpos IgG para Toxoplasma gondii (T. gondii)e Leishmania spp. pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), bem como anticorpos para Leptospira spp. pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM). Adicionalmente, questionário epidemiológico relacionado às zoonoses abordadas foi aplicado aos tutores para verificar associação epidemiológica dos fatores de risco com os resultados sorológicos. Para leptospirose, 7/181 (3,87%; IC95% 1,5-7,8%) animais foram reagentes, sendo Canicola o sorovar prevalente (5/7, 71,43%), seguido por Icterohaemorrhagiae (1/7, 14,29%) e Pyrogenes (1/7, 14,29%). Para toxoplasmose, 17/181 (9,39%; IC95% 5,6-14,6%) amostras apresentaram anticorpos específicos, sendo 8/17 (47,05%) com título de 16, 7/17 (41,17%) com título 64, 1/17 (5,88%) com título 256 e 1/17 (5,89%) com título 4096. Por outro lado, nenhuma amostra apresentou anticorpos específicos detectáveis para Leishmania spp. Por meio deste estudo, foi possível o registro da circulação de T. gondii e Leishmania spp. em cães do município estudado. Com isso, demonstra-se a importância de realização de inquéritos sorológicos em cães durante programas de controle populacional. Dada a importância de se controlar estas e outras zoonoses relevantes a saúde pública, se destacam a necessidade de ações de vigilância epidemiológica e a importância do cão como sentinela.(AU)

The dog, with the growing approach to the integration between human, animal and environmental, has been standing out as a potential reservoir or sentinel to the epidemiological chain of some specific zoonoses, due to its importance as a member of the current family nucleus. The present study aimed to determine the seroprevalence and risk factors to toxoplasmosis, leptospirosis and canine visceral leishmaniasis (LVC) in 181 dogs from Pardinho, SP, Brazil, included on a Population Control Program carried outby the local Health Surveillance Service. Serum samples were researched for Toxoplasma gondii (T. gondii) and Leishmania spp. IgG antibodies using the indirect immunofluorescence test (IFAT), whereas Leptospira spp. antibodies using the microscopic agglutination test (MAT). Additionally, an epidemiological questionnaire related to the studied zoonoses was applied to the owners to verify the epidemiological association of the risk factors to the serological results. For leptospirosis, seropositivity was in 7/181 (3.87%; 95%CI 1.5-7.8%) animals resulted reagent, with Canicola as the prevalent serovar (5/7, 71.43%), followed by Icterohaemorrhagiae (1/7, 14.29%) and Pyrogenes (1/7, 14.29%). For toxoplasmosis, 17/181 (9.39%; 95%CI 5.6-14.6%) samples resulted positive, presenting titer 16 (8/17, 47.05%), titer 64 (7/17, 41.17%), titer 256 (1/17, 5.89%), and titer 4096 (1/17, 5.88%). On the other hand, no sample resulted positive for Leishmania spp. antibodies. In this way, this study reports the unprecedented record of the circulation of T. gondii and Leptospira spp. among dogs in the studied area. This demonstrates the importance of serological surveys on dogs during population control programs. The need for epidemiological surveillance actions and the importance of the dog as sentinel are highlighted, due to the importance of controlling these and other zoonoses relevant to public health.(AU)

Con el creciente enfoque para la integración entre la salud humana, animal y ambiental, el perro se destaca como potencial reservorio o centinela en la cadena epidemiológica de determinadas zoonosis, por su importancia como miembro del núcleo familiar actual. El presente estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo para toxoplasmosis, leptospirosis y leishmaniasis visceral canina (LVC) en 181 perros de la ciudad de Pardinho, SP, Brasil, participantes del Programa de Control de la Población, realizado por el Servicio de Vigilancia Sanitaria local. Las muestras de suero fueronsometidas a reacción de inmunofluorescencia indirecta (RIFI) para la detección de anticuerpos IgG para Toxoplasma gondii (T. gondii) y Leishmania spp., así como anticuerpos frente a Leptospiraspp. por la técnica de aglutinación microscópica (SAM). Adicionalmente, se aplicó a los propietarios un cuestionario epidemiológico relacionado a las zoonosis abordadas para verificar la asociación epidemiológica de los factores de riesgo con los resultados serológicos. Para la leptospirosis, 7/181 (3,87%; IC95% 1,5-7,8%) animales fueron reactivos, siendo Canicola el serovar prevalente (5/7, 71,43%), seguido de Icterohaemorrhagiae (1/7, 14,29%) y Pyrogenes (1/7, 14,29%). Para la toxoplasmosis, 17/181 (9,39%; IC95% 5,6-14,6%) mostraron anticuerpos específicos, 8/17 (47,05%) con un título de 16, 7/17 (41,17%) %) con título 64, 1/17 (5,89%) con título 256 y 1/17 (5,88%) con título 4096. Por otro lado, ninguna muestra mostró anticuerpos específicos detectables para Leishmaniaspp. Así, en este estudio fue posible registrar la circulación de T. gondiiy Leishmaniaspp. en los perros del municipio estudiado. Esto demuestra la importancia de realizar investigaciones serológicas en perros durante los programas de control de la población. Dada la importancia de controlar estas y otras zoonosis relevantes para la salud pública, se destaca la necesidad de acciones de vigilancia epidemiológica y la importancia del perro como centinela.(AU)