Caracterização epidemiológica da leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro

ABSTRACT: This study was conducted in pigs of Mossoró, Rio Grande do Norte, with the objective of epidemiological characterization of swine leptospirosis in herds reared under poor technical and sanitary conditions in the Brazilian semiarid. Serological diagnosis of infection was carried out by means of microscopic agglutination test (MAT), and the samples were submitted to a collection of 24 Leptospira serovars. Information about, variables referring to the farm owner, general property characteristics, productive, reproductive and health management were obtained, by means of visits to the farms and interviews, in order to perform an analysis of risk factors. A prevalence of 78.6% (324/412) of seropositive pigs was observed. The samples were positive to 15 serovars, with predominance of serovar Icterohaemorrhagiae, followed by Pomona, Shermani and Tarassovi. The animals were positive for up to eight serovars. The titles ranged from 100 to 12,800, and the highest titers were observed to serovar Pomona. In all the 20 examined herds there were reactor animals, and the prevalence in each herd ranged from 25% to 100%. The risk factors that were associated with leptospirosis were the confinement system of animals and bad sanitation of breeding facilities. The use of treated water for watering the animals showed a protective factor. The results showed that Leptospira spp. was found to be quite widespread in swine farms of Mossoró, with wide variation of circulating serovars, representing a problem in animal production and risks to public health.

RESUMO: Este estudo foi realizado em suínos do município de Mossoró, Rio Grande do Norte, com o objetivo de caracterizar epidemiologicamente a leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro. Para isso, foi realizado diagnóstico sorológico da infecção pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), sendo as amostras submetidas a uma coleção de 24 variantes de leptospira, e foram obtidas informações, por meio de visitas às criações e entrevistas com os proprietários, abordando variáveis referentes a criador, características gerais da propriedade, manejo produtivo, reprodutivo e sanitário, com o propósito de realizar análise de fatores de risco. Obteve-se uma prevalência de 78,6% (324/412) de suínos soropositivos. As amostras foram positivas para 15 sorovares, com predominância do sorovar Icterohaemorrhagiae, seguido do Pomona, Shermani e Tarassovi. Os animais foram positivos a até oito sorovares. Os títulos variaram de 100 a 12.800, sendo as maiores titulações contra o sorovar Pomona. Em todas as 20 propriedades trabalhadas (100%) existiam animais reagentes, e a prevalência da infecção em cada propriedade variou de 25% a 100%. Os fatores de risco que estavam associados à leptospirose foram o sistema de confinamento dos animais e o saneamento ruim das instalações de criação. O uso de água tratada na dessedentação dos animais se mostrou fator de proteção. Os resultados mostraram que a Leptospira spp. encontrava-se bastante disseminada nas criações de suínos de Mossoró, com grande variação de sorovares circulantes, representando um problema na produção animal e riscos para a saúde pública.

Caracterização epidemiológica da leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro / Epidemiological characterization of leptospirosis in pig herds reared under poor technical condition in the Brazilian semiarid

Este estudo foi realizado em suínos do município de Mossoró, Rio Grande do Norte, com o objetivo de caracterizar epidemiologicamente a leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro. Para isso, foi realizado diagnóstico sorológico da infecção pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), sendo as amostras submetidas a uma coleção de 24 variantes de leptospira, e foram obtidas informações, por meio de visitas às criações e entrevistas com os proprietários, abordando variáveis referentes a criador, características gerais da propriedade, manejo produtivo, reprodutivo e sanitário, com o propósito de realizar análise de fatores de risco. Obteve-se uma prevalência de 78,6% (324/412) de suínos soropositivos. As amostras foram positivas para 15 sorovares, com predominância do sorovar Icterohaemorrhagiae, seguido do Pomona, Shermani e Tarassovi. Os animais foram positivos a até oito sorovares. Os títulos variaram de 100 a 12.800, sendo as maiores titulações contra o sorovar Pomona. Em todas as 20 propriedades trabalhadas (100%) existiam animais reagentes, e a prevalência da infecção em cada propriedade variou de 25% a 100%. Os fatores de risco que estavam associados à leptospirose foram o sistema de confinamento dos animais e o saneamento ruim das instalações de criação. O uso de água tratada na dessedentação dos animais se mostrou fator de proteção. Os resultados mostraram que a Leptospira spp. encontrava-se bastante disseminada nas criações de suínos de Mossoró, com grande variação de sorovares circulantes, representando um problema na produção animal e riscos para a saúde pública.(AU)

This study was conducted in pigs of Mossoró, Rio Grande do Norte, with the objective of epidemiological characterization of swine leptospirosis in herds reared under poor technical and sanitary conditions in the Brazilian semiarid. Serological diagnosis of infection was carried out by means of microscopic agglutination test (MAT), and the samples were submitted to a collection of 24 Leptospira serovars. Information about, variables referring to the farm owner, general property characteristics, productive, reproductive and health management were obtained, by means of visits to the farms and interviews, in order to perform an analysis of risk factors. A prevalence of 78.6% (324/412) of seropositive pigs was observed. The samples were positive to 15 serovars, with predominance of serovar Icterohaemorrhagiae, followed by Pomona, Shermani and Tarassovi. The animals were positive for up to eight serovars. The titles ranged from 100 to 12,800, and the highest titers were observed to serovar Pomona. In all the 20 examined herds there were reactor animals, and the prevalence in each herd ranged from 25% to 100%. The risk factors that were associated with leptospirosis were the confinement system of animals and bad sanitation of breeding facilities. The use of treated water for watering the animals showed a protective factor. The results showed that Leptospira spp. was found to be quite widespread in swine farms of Mossoró, with wide variation of circulating serovars, representing a problem in animal production and risks to public health.(AU)

Caracterização epidemiológica da leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro / Epidemiological characterization of leptospirosis in pig herds reared under poor technical condition in the Brazilian semiarid

Este estudo foi realizado em suínos do município de Mossoró, Rio Grande do Norte, com o objetivo de caracterizar epidemiologicamente a leptospirose suína em criações não tecnificadas do semiárido brasileiro. Para isso, foi realizado diagnóstico sorológico da infecção pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), sendo as amostras submetidas a uma coleção de 24 variantes de leptospira, e foram obtidas informações, por meio de visitas às criações e entrevistas com os proprietários, abordando variáveis referentes a criador, características gerais da propriedade, manejo produtivo, reprodutivo e sanitário, com o propósito de realizar análise de fatores de risco. Obteve-se uma prevalência de 78,6% (324/412) de suínos soropositivos. As amostras foram positivas para 15 sorovares, com predominância do sorovar Icterohaemorrhagiae, seguido do Pomona, Shermani e Tarassovi. Os animais foram positivos a até oito sorovares. Os títulos variaram de 100 a 12.800, sendo as maiores titulações contra o sorovar Pomona. Em todas as 20 propriedades trabalhadas (100%) existiam animais reagentes, e a prevalência da infecção em cada propriedade variou de 25% a 100%. Os fatores de risco que estavam associados à leptospirose foram o sistema de confinamento dos animais e o saneamento ruim das instalações de criação. O uso de água tratada na dessedentação dos animais se mostrou fator de proteção. Os resultados mostraram que a Leptospira spp. encontrava-se bastante disseminada nas criações de suínos de Mossoró, com grande variação de sorovares circulantes, representando um problema na produção animal e riscos para a saúde pública.(AU)

This study was conducted in pigs of Mossoró, Rio Grande do Norte, with the objective of epidemiological characterization of swine leptospirosis in herds reared under poor technical and sanitary conditions in the Brazilian semiarid. Serological diagnosis of infection was carried out by means of microscopic agglutination test (MAT), and the samples were submitted to a collection of 24 Leptospira serovars. Information about, variables referring to the farm owner, general property characteristics, productive, reproductive and health management were obtained, by means of visits to the farms and interviews, in order to perform an analysis of risk factors. A prevalence of 78.6% (324/412) of seropositive pigs was observed. The samples were positive to 15 serovars, with predominance of serovar Icterohaemorrhagiae, followed by Pomona, Shermani and Tarassovi. The animals were positive for up to eight serovars. The titles ranged from 100 to 12,800, and the highest titers were observed to serovar Pomona. In all the 20 examined herds there were reactor animals, and the prevalence in each herd ranged from 25% to 100%. The risk factors that were associated with leptospirosis were the confinement system of animals and bad sanitation of breeding facilities. The use of treated water for watering the animals showed a protective factor. The results showed that Leptospira spp. was found to be quite widespread in swine farms of Mossoró, with wide variation of circulating serovars, representing a problem in animal production and risks to public health.(AU)

The role of alveolar type II cells in swine leptospirosis / O papel das células alveolares tipo II na leptospirose suína

This study aimed to investigate a possible relationship between alveolar type II cells and the inflammatory response to infection with Leptospira spp., and thus comprise a further element that can be involved in the pathogenesis of lung injury in naturally infected pigs. The study group consisted of 73 adult pigs that were extensively reared and slaughtered in Teresina, Piauí state, and Timon, Maranhão state, Brazil. The diagnosis of leptospirosis was made using the microscopic agglutination test (MAT) aided by immunohistochemistry and polymerase chain reaction. The MAT registered the occurrence of anti-Leptospira antibodies in 10.96% (8/73) of the pigs. Immunohistochemistry allowed for the visualization of the Leptospira spp. antigen in the lungs of 87.67% (64/73) of the pigs. There was hyperplasia of bronchus-associated lymphoid tissue and circulatory changes, such as congestion of alveolar septa, parenchymal hemorrhage and edema within the alveoli. Lung inflammation was more intense (p = 0.0312) in infected animals, which also showed increased thickening of the alveolar septa (p = 0.0006). Evaluation of alveolar type II (ATII) cells using an anti-TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) antibody showed that there were more immunostained cells in the non-infected pigs (53.8%) than in the infected animals (46.2%) and that there was an inverse correlation between TTF-1 positive cells and the inflammatory infiltrate. There was no amplification of Leptospira DNA in the lung samples, but leptospiral DNA amplification was observed in the kidneys. The results of this study showed that a relationship exists between a decrease in alveolar type II cells and a leptospire infection. Thus, this work points to the importance of studying the ATII cells as a potential marker of the level of lung innate immune response during leptospirosis in pigs.(AU)

Setenta e três suínos adultos de criação extensiva, abatidos em Teresina, no estado do Piauí e Timon, no estado do Maranhão, constituíram o grupo de estudo. O diagnóstico da leptospirose foi realizado utilizando a técnica de soroaglutinação microscópica (MAT), auxiliada por imunoistoquímica e reação em cadeia pela polimerase. A SAM registrou a ocorrência de anticorpos anti-leptospiras em 10,96% (8/73) dos suínos. A imunoistoquímica permitiu a visualização de antígenos de Leptospira spp. em pulmões de 87,67% (64/73) dos suínos. Havia hiperplasia do tecido linfoide associado ao brônquio e alterações circulatórias como, congestão do septo alveolar, hemorragia parenquimatosa e edema no interior de alvéolos. Os focos de inflamações pulmonares eram mais numerosos (p=0,0312) nos animais infectados, bem como o espessamento do septo alveolar (p=0,0006). A quantificação de células alveolares tipo II marcadas pelo anticorpo anti-TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) mostrou que existia mais células imunocoradas em suínos não infectados (53,8%) comparados aos infectados (46,2%) e uma correlação inversa em relação ao infiltrado inflamatório. Não houve amplificação de DNA de Leptospira spp. em amostras de tecido pulmonar, no entanto DNA leptospiral foi observado em rim. Os resultados deste estudo mostraram que existe uma relação entre a diminuição das células alveolares tipo II e a infecção por leptospiras. Dessa forma, este trabalho aponta para a importância do estudo dessas células, como um provável marcador da modulação da resposta imune inata do pulmão na leptospirose em suínos.(AU)

SOROEPIDEMIOLOGIA DA LEPTOSPIROSE SUÍNA EM RONDÔNIA, BRASIL

O estado de Rondônia (RO) tem o segundo maior rebanho suíno da região norte do Brasil, porém, a presença da leptospirose pode causar grandes perdas para o setor. O trabalho objetivou evidenciar a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em suínos de RO e os principais sorovares envolvidos; além de analisar a correlação do percentual de positividade com alguns fatores de risco da enfermidade. Foram analisadas 1276 amostras de suínos, criados sem tecnificação, em RO. O estado foi dividido em oito regiões (I, II, III. IV, V, VI, VII e VIII), segundo o IBGE (Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística), para a análise dos resultados. Para a pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp. foi utilizada o teste de Soroaglutinação Microscópica (MAT), frente a uma coleção de 15 sorovariedades de Leptospira spp. As amostras de soro foram triadas na diluição de 1:100; e após realizou-se a titulação (200, 400, 800 e 1600). Foram consideradas reagentes as amostras que tinham a presença de aglutinação maior ou igual a 50%. Houve sororreação para Leptospira spp. em 319 amostras (25%); e 33,54% dos suínos reagiram a mais de um tipo de sorovar. Houve índice maior de sororreação aos sorovares: Djasiman (7,92%) e Autumnalis (6,97%); e um menor índice das sorovariedades: Hardjo (2,19%), Bataviae (1,88%) e Copenhageni (1,25%). As maiores titulações (800 e 1600) ocorreram para as sorovaridades: Canicola, Pomona e Grippotyphosa. Os sorovares variaram conforme a região do estado e verificou-se que a região com maior prevalência de anticorpos anti-Leptospira foi a VII (37,7%), já a com menor prevalência de animais sororreagentes foi a região I (16,2%). Considerando essas regiões de RO, o único fator de risco avaliado que variou foi a área territorial. Realizou-se a correlação dos fatores avaliados com os municípios e quanto menor a área territorial, o IDHM e o PIB, maior a positividade para Leptospira spp. Com base nos resultados, concluiu-se alta prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. nos suínos de criação não tecnificada de RO (com maior sororreação para os sorovares Djasiman e Autumnalis); e que houve casos de sororreação a mais de um sorovar. Verificou-se que no estado existe infecção ativa; sendo esta causada principalmente pelos sorovares: Canicola, Pomona e Grippotyphosa. Os fatores de risco IDH, PIB per capita e área territorial influenciam na prevalência do agente, nos municípios de RO.

The state of Rondônia (RO) has the second largest pig herd in the northern region of Brazil, however, the presence of leptospirosis can cause great losses for the sector. This study aimed to show the prevalence of anti-Leptospira spp. in RO pigs and the main serovars involved; in addition to analyzing the correlation of the percentage of positivity with some risk factors for the disease. A total of 1276 swine samples were analyzed, raised without technification, in RO. The state was divided into eight regions (I, II, III. IV, V, VI, VII and VIII), according to IBGE (Brazilian Institute of Geography and Statistics), for the analysis of the results. For anti-Leptospira spp. the microscopic serum agglutination test (MAT) was used against a collection of 15 serovarieties of Leptospira spp. The serum samples were screened at a 1: 100 dilution; and after the titration was performed (200, 400, 800 and 1600). Samples that had the presence of agglutination greater than or equal to 50% were considered as reagents. There was seroreaction for Leptospira spp. in 319 samples (25%); and 33.54% of the pigs reacted to more than one type of serovar. There was a higher rate of seroreaction to serovars: Djasiman (7.92%) and Autumnalis (6.97%); and a lower index of serovarieties: Hardjo (2.19%), Bataviae (1.88%) and Copenhageni (1.25%). The highest titrations (800 and 1600) occurred for serovarities: Canicola, Pomona and Grippotyphosa. The serovars varied according to the region of the state and it was found that the region with the highest prevalence of anti-Leptospira antibodies was VII (37.7%), while the region with the lowest prevalence of seroreagent animals was region I (16.2%). Considering these RO regions, the only risk factor assessed that varied was the territorial area. The factors evaluated were correlated with the municipalities and the smaller the territorial area, the MHDI and the GDP, the greater the positivity for Leptospira spp. Based on the results, a high prevalence of anti-Leptospira spp. in non-technically raised RO pigs (with greater seroreaction for the Djasiman and Autumnalis serovars); and that there were cases of seroreaction to more than one serovar. It was found that in the state there is active infection; this being caused mainly by serovars: Canicola, Pomona and Grippotyphosa. The risk factors HDI, GDP per capita and territorial area influence the prevalence of the agent in the municipalities of RO.

Levantamento sorológico e isolamento do agente da leptospirose suína em animais abatidos nos frigoríficos da cidade de Pelotas/RS

A leptospirose é uma zoonose de grande importância devido ao seu impacto produtivo e o seu risco à saúde pública. O conhecimento de fatores de risco para a doença, assim como os principais sorovares circulantes em uma região são essenciais para o controle da leptospirose. Dessa maneira, neste trabalho foi realizado um levantamento sorológico do agente da leptospirose em suínos abatidos em frigorífico da cidade de Pelotas, RS. Das 108 amostras de soro suíno analisadas, 38,88% foram reagentes ao teste de aglutinação microscópica (MAT). Dos 42 suínos reagentes, 45,23% eram provenientes da região de Rodeio Bonito, 26,19% da região de Pelotas, 14,28% da região de Horizontina e 14,28% da região de Santo Cristo. Os sorovares mais frequentes foram Canicola, Autumnalis e Copenhageni com 52,38%, 23,80% e 21,42% respectivamente. Quanto à titulação, os títulos mais altos foram de 1:800, observados contra os sorovares Canicola, Autumnalis e Bratislava. De acordo com a revisão bibliográfica, a soroprevalência varia entre os rebanhos e entre as regiões. Com isso, o conhecimento de fatores de risco para a doença, assim como os principais sorovares circulantes em uma região são essenciais para o controle da leptospirose suína.

Leptospirosis is a zoonosis of great importance because of its productive impact and its risk to public health. The knowledge of risk factors for the disease, as well as the main serovars circulating in a region are essential for the control of leptospirosis. Thus, in this work a serological survey of the leptospirosis agent was carried out on pigs slaughtered in a refrigerator in the city of Pelotas, RS. Of the 108 swine serum samples analyzed, 38.88% were MAT reactants. Of the 42 reactive pigs, 45.23% came from the Rodeio Bonito region, 26.19% from the Pelotas region, 14.28% from the Horizontina region and 14.28% from the Santo Cristo region. The most frequent serovars were Canicola, Autumnalis and Copenhageni with 52.38%, 23.80% and 21.42% respectively. As for the titration, the highest titres were 1: 800, observed against the serovars Canicola, Autumnalis and Bratislava. According to the literature review, the seroprevalence varies between the herds and between the regions. Thus, the knowledge of risk factors for the disease, as well as the main circulating serovars in a region are essential for the control of swine leptospirosis.

Principais causas de problemas reprodutivos em porcas / Main causes of reproduction disorders in sows

Esta revisão de literatura visa abordar os principais problemas reprodutivos dentro de uma granja suína. O aborto pode ser categorizado em dois tipos: oriundo de causas infecciosas e oriundo de causas não infecciosas. O percentual de aborto aceitável na suinocultura tecnificada encontra-se entre 1 a 1,5%, entretanto, alguns estudos relatam taxa um pouco maiores em alguns rebanhos suínos. Existem diversos fatores predisponentes, tais como abortos sazonais, stress calórico e ambiental, baixo nível de higiene, deficiências nutricionais, entre outros. Entre as causas infecciosas, podemos destacar: doença de Aujeszky, parvovirose, leptospirose, circovirose, peste suína clássica, brucelose e PRRS. Observando todos esses fatores de influência no sucesso reprodutivo de uma granja, devemos sempre estar atentos a suas causas, de modo a prevenir sua ocorrência. (AU)

The literature review focused on the main reproductive disorders in pig herds, Abortion are general divided into two categories: abortions caused by infectious agents and caused by non-infectious agents. The acceptable rate of abortion in intensive pig farming is between 1 and 1,5%, however, studies shows higher rates are common in breeding farms. Several predisponent factors such as: seasonal abortion, caloric and environmental stress, sunburns, low level of hygiene, nutritional deficiency, and others, help to raise those rates. Among the infectious agents, which can cause abortion, there are Aujeszky disease virus, parvovirus, leptospirosis, circovirus, classic swine fever virus, brucellosis, PRRS virus and others. Looking through all those factors that have broad influence on the reproductive success of a pig herd, we it is recommended always being aware of the causes so it is possible to prevent them. (AU)

Principais causas de problemas reprodutivos em porcas / Main causes of reproduction disorders in sows

Esta revisão de literatura visa abordar os principais problemas reprodutivos dentro de uma granja suína. O aborto pode ser categorizado em dois tipos: oriundo de causas infecciosas e oriundo de causas não infecciosas. O percentual de aborto aceitável na suinocultura tecnificada encontra-se entre 1 a 1,5%, entretanto, alguns estudos relatam taxa um pouco maiores em alguns rebanhos suínos. Existem diversos fatores predisponentes, tais como abortos sazonais, stress calórico e ambiental, baixo nível de higiene, deficiências nutricionais, entre outros. Entre as causas infecciosas, podemos destacar: doença de Aujeszky, parvovirose, leptospirose, circovirose, peste suína clássica, brucelose e PRRS. Observando todos esses fatores de influência no sucesso reprodutivo de uma granja, devemos sempre estar atentos a suas causas, de modo a prevenir sua ocorrência.

The literature review focused on the main reproductive disorders in pig herds, Abortion are general divided into two categories: abortions caused by infectious agents and caused by non-infectious agents. The acceptable rate of abortion in intensive pig farming is between 1 and 1,5%, however, studies shows higher rates are common in breeding farms. Several predisponent factors such as: seasonal abortion, caloric and environmental stress, sunburns, low level of hygiene, nutritional deficiency, and others, help to raise those rates. Among the infectious agents, which can cause abortion, there are Aujeszky disease virus, parvovirus, leptospirosis, circovirus, classic swine fever virus, brucellosis, PRRS virus and others. Looking through all those factors that have broad influence on the reproductive success of a pig herd, we it is recommended always being aware of the causes so it is possible to prevent them.

TERMOGRAFIA NA AVALIAÇÃO DE REAÇÃO ADVERSA DE VACINAS CONTRA PARVOVIROSE, ERISIPELA E LEPTOSPIROSE EM FÊMEAS SUÍNAS

O primeiro objetivo desse estudo foi comparar a febre em matrizes suínas causada por duas vacinas contra parvovirose, erisipela e leptospirose em uma granja comercial suína. O segundo objetivo foi avaliar a precisão do aplicativo Degree2act para diagnóstico de temperaturas corporais em condições de campo. As matrizes foram divididas em 3 grupos: G-cnt (controle, inoculação de solução buffer fosfato), G-ery (vacinado com Eryseng®Parvo/Lepto) e G-farm (vacinado com a vacina de rotina da granja). Temperaturas retais e imagens termográficas foram registradas do dia D-2 (dois dias antes da vacinação) até o dia D+3 (três dias após vacinação). G-ery mostrou pela primeira vez maior frequência que a esperada de matrizes com febre às seis horas após vacinação, e a febre teve duração de 18 horas. G-farm também apresentou frequência maior que a esperada de matrizes com febre em 6 horas após vacina, porém a duração da febre foi de 21 horas. Além do mais, a frequência de matrizes com febre intensa (>41ºC) em G-farm foi maior que a esperada. G-ery e G-farm apresentaram 1,102 e 1,460 mais chance de terem matrizes com febre que G-cnt, respectivamente; e G-farm teve 1,325 mais chance de apresentar matrizes com febre que G-ery. Em relação ao Degree2act, o aplicativo apresentou alta precisão para diagnóstico de animais com temperatura corporal normal, porém baixa precisão para os animais com febre e baixa probabilidade de febre. Como conclusão, Eryseng®Parvo/Lepto causou febre mais curta e menos intensa quando comparada à vacina usada na granja. O Degree2act tem potencial de se tornar uma ferramenta de auxílio no diagnóstico de febre, porém mais ajustes são necessários.

The first aim of this study was to compare fever caused by two parvovirus-erysipelas-leptospira vaccines in sows in a pig farm. The second aim was to evaluate the accuracy of the application Degree2act for body temperature diagnosis under field conditions. Sows were divided into 3 groups: G-cnt (control, inoculation of Phosphate Buffered Saline), G-ery (vaccinated with Eryseng®Parvo/Lepto,) and G-farm (vaccinated with the pig farm vaccine). Rectal temperatures and thermal images were taken from D-2 (two days before vaccination) to D+3 (three days after vaccination). G-ery showed for the first time greater frequency of sows with fever six hours after the vaccine, and fever lasted up to 18 hours. G-farm also showed a greater frequency of sows with fever six hours after the vaccine, but fever lasted up to 21 hours. Moreover, the frequency of sows with intense fever (41ºC) in G-farm was greater than expected frequency. Furthermore, G-ery and G-farm had 1.102 and 1.460 more risk of sows with fever than G-cnt, respectively; and G-farm had 1.325 more risk of sows with fever than G-ery. Regarding Degree2act, it showed high accuracy for diagnosis of animals with normal body temperature, but low accuracy for those with fever and low probability of fever. In conclusion, Eryseng®Parvo/Lepto caused shorter and less intense fever in sows when compared to the vaccine used in the pig farm and Degree2act has a huge potential to be a helpful tool for farmers, but it needs adjustments.

ISOLAMENTO, CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E SOROEPIDEMIOLÓGICA DA Leptospira spp. EM SUÍNOS ABATIDOS NO ESTADO DE SÃO PAULO

A carne suína é a proteína de origem animal mais produzida e consumida no mundo, sendo o Brasil o quarto no ranking de produção e exportação mundial, com perspectivas de crescimento. Devido à proximidade homem-animal deste seguimento, é fundamental que se conheça a sanidade dos suínos, e entre as diversas doenças deve-se destacar a leptospirose, uma importante zoonose de caráter ocupacional que atinge vários elos da cadeia produtiva, como: funcionários da granja, médicos veterinários, magarefes e a população em geral. O trabalho teve como objetivo geral realizar isolamento, caracterização molecular e soroepidemiológica da Leptospira spp. em suínos abatidos no Estado de São Paulo e como objetivos específicos identificar a variabilidade genética de forma acurada e determinar as sorovariedades presentes. Foram analisadas 1.284 amostras de sangue, 980 amostras de urina e 74 rins de suínos adultos, clinicamente saudáveis, oriundos de granjas das regiões Centro-Oeste, Sudeste e Sul, abatidos em 3 matadouros-frigoríficos localizados na Mesorregião de Ribeirão Preto no Estado de São Paulo, no ano de 2016. Para o diagnóstico sorológico foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica com uma coleção de antígenos de 38 sorovares. As amostras de urina e rim foram semeadas em meios de cultivo, e os isolados foram confirmados e caracterizados pelas técnicas de sorogrupagem, PCR (gene lipL32), VNTR e sequenciamento nucleotídico dos genes rrs e secY, e os resultados obtidos foram utilizados para elaborar árvores filogenéticas. Pela técnica de isolamento foi possível ter êxito em 5 culturas, de amostras de tecido renal e urina de suínos, nomeadas Unesp01, Unesp02, Unesp03, Unesp04 e Unesp05, sendo encontradas leptospiras das especies L. interrogans e L. santarosai, dos sorogrupos: Icterohaemorrhagiae (Unesp01 e Unesp05), Autumnalis (unesp02 e Unesp04) e Sejroe (Unesp03). No sequenciamento nucleotídico dos genes rrs (16S) e secY, as amostras Unesp01, Unesp02, Unesp04 e Unesp05 demonstraram 100% de similaridade com a sequência de Leptospira interrogans, e a amostra Unesp03 demostrou 99% de similaridade com a sequência da espécie L. santarosai. Na sorologia, observou-se 46,57% (598/1.284) de sororreagentes a pelo menos uma das 38 sorovariedades de Leptospira spp. utilizadas, apresentando reatividade a 86,84% (33/38) dos sorovares utilizados da coleção de antígenos. A caracterização sorológica e molecular é fundamental para a compreensão da epidemiologia da infecção por este importante agente etiológico. O isolamento propicia material para uma ampla variedade de análises e a possibilidade da utilização do isolado como parte da coleção de antígenos para os testes sorológicos, enquanto a sorologia dá subsídios em estudos em que não há disponibilidade de tempo ou amostra ideal para o isolamento. Os resultados do trabalho demonstram a circulação do agente nas granjas de suínos, condição de risco para os trabalhadores da cadeia produtiva da carne e para a saúde pública em uma visão geral.

Pork is the most widely consumed animal protein in the world, Brazil being the fourth largest producer and exporter in the world, with growth prospects. Due to the man-animal proximity of this follow-up, it is essential to know the sanity of the swines, and among the various diseases should be highlighted leptospirosis, an important occupational zoonosis that reaches several links in the production chain, such as: Farm employees, veterinarians, doctors and the population in general. The objective of this study was to isolate and characterize molecular and seroepidemiologically the Leptospira spp. in swine slaughtered in the State of São Paulo, and as specific objectives to identify the genetic variability in an accurate way and determine the serovarities present. A total of 1,284 blood samples, 980 urine samples and 74 kidneys, of clinically healthy adult swine, from Central-West, Southeast and South swine farms, slaughtered in three slaughterhouses located in the Meso-region of Ribeirão Preto, State of São Paulo, in the year 2016, were analyzed. For the serological diagnosis, the microscopic sero-agglutination technique was used with a collection of antigens of 38 serovars. Urine and kidney samples were seeded in culture media and the isolates were confirmed and characterized by serogrouping, PCR (lipL32 gene), VNTR, and nucleotide sequencing of the rrs and secY genes, and the results obtained were used to elaborate phylogenetic trees. The isolates were identified in five culture: Unesp01, Unesp02, Unesp03, Unesp04 and Unesp05, and leptospiras of the L. interrogans and L. santarosai species of the serogroups: Icterohaemorrhagiae (Unesp01 and Unesp05), Autumnalis (unesp02 and Unesp04) and Sejroe (Unesp03). In the nucleotide sequencing of the rrs and secY gene, the Unesp01, Unesp02, Unesp04 and Unesp05 samples demonstrated 100% similarity to the Leptospira interrogans sequence, and the Unesp03 sample demonstrated 99% similarity to the L. santarosai sequence. In serology, 46.57% (598/1,284) were seroreactors, observed in at least one of the 38 serovars of Leptospira spp. used, presenting reactivity to 86.84% (33/38) of the serovars used in the antigen collection. Serological and molecular characterization is fundamental for the understanding of the epidemiology of infection by this important etiological agent. The isolation provides material for a wide variety of analyzes and the possibility of using it as part of the collection of antigens for the serological tests, while the serology gives subsidies in surveys in studies where there is no time availability or ideal sample for isolation. The results of the work show the circulation of the agent in the pig farms, a risk condition for workers in the meat production chain and for public health in an overview.

Interrelação entre frequência de anticorpos anti-leptospira Spp. e exames histopatológicos (hematoxilina-eosina e Warthin Starry) em suínos abatidos no semiárido paraibano / Interrelation between frequency of anti-leptospira spp. Antibodies and findings of histopathological examinations (hematoxylin-eosin and warthin-starry) in pigs slaughtered in the semiarid of Paraiba state, northeastern Brazil

Este trabalho foi realizado em suínos abatidos no Município de Patos, Estado da Paraíba, Brasil,com o objetivo de determinar a frequência de anticorpos anti-Leptospira spp., comparando os achados sorológicos com exames histopatológicos de rim, fígado, ovário e útero. A soroaglutinação microscópica foi realizada em 126 animais. Os exames histopatológicos realizados em cortes de fígado, rim, ovário e útero, corados pela hematoxilina-eosina (HE), foram realizados em 20 animaisescolhidos aleatoriamente, sendo 10 do grupo com títulos ≥ 100 e 10 do grupo com títulos < 100. Paralelamente, foi realizada pesquisa direta de leptospiras pela técnica de Warthin-Starry em amostras de rim de todos os animais soropositivos e nos 10 animais soronegativos submetidos à HE. Dos 126 animais examinados, 18 (14,6%) foram soropositivos, com predominância de reações para o sorovar Autumnalis (11 animais; 8,73%). Quatro animais soropositivos e dois animais soronegativosapresentaram infiltrado inflamatório e necrose de graus variados em um dos rins e no fígado. Os ovários e úteros examinados não apresentaram lesões. A pesquisa direta de leptospiras pela técnica de Warthin-Starry não revelou animais positivos em nenhuma amostra testada. Em face da soropositividade encontrada (14,6%), sugere-se a importância da conscientização por parte dos produtores acerca da implantação de medidas de prevenção adequadas com o objetivo de impedir, ou pelo menos diminuir, a disseminação das leptospiras em suínos e, consequentemente, bloquear a possível transmissão do agente para os seres humanos. (AU)

Interrelation between frequency of anti-leptospira spp. Antibodies and findings of histopathological examinations (hematoxylin-eosin and warthin-starry) in pigs slaughtered in the semiarid of paraiba state, northeastern brazil. This work was conducted in slaughtered pigs in Patos County, Paraiba State, Brazil, with the aim to determine the frequency of anti-leptospira antibodies and to compare the serological findings with the histopathological findings of kidney, liver, ovary and uterus. The microscopic agglutination test (MAT) was performed on 126 animals. The histopathological examination performed in sections of livers, kidneys, ovaries and uteruses stained with hematoxylin-eosin (HE) was conducted in 20 randomly chosen animals (10 from group with serological titer ≥ 100 and 10 from group < 100). Parallel to this, a direct search for leptospires was carried out by Warthin-Starry technique in kidney samples from all seropositive animals and in the 10 seronegative animals submitted to HE. In the 126 animals examined, 18 (14.6%) were seropositive, with prevalence of reactions to Autumnalis serovar (11 animals; 8.73%). Four seropositive and two seronegative animals showed different degrees of inflammatory infiltrate and necrosis in liver or kidney. The ovaries and uterus no showed lesions. Direct analysis of leptospires by the Warthin-Starry technique did not reveal positive animals in any sample tested. The rate of seropositivity found (14.6%) suggests the importance of awareness by producers about the implementation of preventive measures aimed at preventing, or at least reducing the spread of leptospiras in pigs and thereby blocking the possible transmission of the agent to humans. (AU)

Pesquisa de aglutininas, antígeno de leptospiras e apoptose em rim de suínos naturalmente infectados por Leptospira spp / Search agglutinins, leptospires antigen and apoptosis in the kidney of swine naturally infected with Leptospira spp

Soro e rim de 75 suínos mestiços sem raça definida, criados em sistema extensivo e abatidos em Timon (MA) e Teresina (Piauí), Brasil, duas cidades separadas pelo Rio Parnaíba e 75 suínos mestiços de um sistema de criação em confinamento, filhos de Landrace, Large White e/ou Duroc foram utilizados neste estudo. Das 150 amostras analisadas pela prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM), sete foram reagentes e o sorovar Icterohaemorrhagiae (42,86 por cento) foi o mais frequente. Uma comparação entre os dois sistemas para examinar uma predisposição para infecção para Leptospira spp. mostrou que a suscetibilidade foi maior nos animais criados extensivamente do que naqueles criados em confinamento (teste χ2, p<0,05). A presença de infiltrado inflamatório foi significantemente maior nos animais soropositivos comparados aos soronegativos (p<0,05, Teste U de Mann-Whitney). A análise morfométrica mostrou Leptospira spp. e o antígeno de leptospira apenas nos animais soropositivos (p<0,05, teste de U de Mann-Whitney). Apoptose em células epiteliais tubulares foi significantemente mais evidente nos animais infectados comparados aos não infectados (p<0,05, Teste U de Mann-Whitney). Uma eventual associação de antígeno de Leptospira e células epiteliais em apoptose sugere um provável mecanismo de lesão renal na leptospirose suína.(AU)

Serum and kidney of 75 mixed bred swine (no definite breed) reared in an extensive system and slaughtered in Timon (state of Maranhão) and Teresina (state of Piauí), Brazil, two cities separated from each other by the Parnaiba River, and 75 crossbred swine from a confinement rearing system, sired by Landrace, Large White and/or Duroc, were used in this study. From the 150 analyzed samples for the microscopic agglutination test (MAT), seven were reagents and the serovar Icterohaemorrhagiae (42.86 percent) was the most frequent. A comparison between both systems to verify a predisposition to Leptospira spp. infection showed that susceptibility was greater in extensively reared animals than in those bred in confinement (χ2 test, p<0.05). Inflammatory infiltrates covered an average area larger in the seropositive revealing a significant difference for the seronegative animals (p<0.05, Mann-Whitney U-Test). Morphometric analysis showed Leptospira spp. and antigen labeling in seropositive animals only (p<0.05, Mann-Whitney U-test). Apoptosis in tubular epithelial cells was significantly more evident in the infected animals compared to uninfected. The rearing system and environment conditions are an important factor in the susceptibility of swine to Leptospira spp. infection. An eventual association of leptospira antigen and apoptotic cells suggests a probable mechanism of renal injury at leptospirosis.(AU)

Soroprevalência de leptospirose suína na região noroeste do Paraná / Seroprevalencia de leptospirosis porcina en la región noroeste de Paraná / Seroprevalence of swine leptospirosis in northwest region Paraná, Brazil

A leptospirose é uma doença zoonótica causada por bactéria da família Leptospiraceae, gênero Leptospira representando risco para a saúde pública, principalmente de médicos veterinários, magarefes, e funcionários de granjas suínas que estão sujeitos ao contato direto com o agente, e trazendo grandes prejuízos reprodutivos para os produtores tais como: aborto no terço final de gestação, repetição de cio, fetal mumificações ou natimortos, nascimento de leitões fracos, baixo número de leitões, descarga vulvar e morte embrionária. Atualmente existem 23 sorogrupos de Leptospira interrogans com aproximadamente 200 sorovares diferentes, neste trabalho usaram-se culturas vivas de 16 sorogrupos de Leptospira spp em amostras de 297 animais da região Noroeste do Paraná submetidas a prova de soroaglutina microscópica com o objetivo de identificar os sorovares predominantes na região. Obteve-se 19,865% de amostras soropositivas para um ou mais sorovares com titulações de 1:100, 1:200 e 1:400, na qual tiveram maior prevalência para o sorovar hardjo com 57,627%, seguido pelos sorovares pyrogenes 30,508%, hardjo C.T.G. 13,559%, icterohaemorrhagiae 5,084%, djasiman 1,694% e copenhageni 1,694%, concluindo que o sorovar Hardjo como o mais prevalente na região noroeste do Paraná.(AU)

Leptospirosis is a zoonotic disease caused by a bacteria of the family Leptospiraceae, genus Leptospira that represent risks to public health, especially veterinarians, butcher, and employees from pig farms that are subject to direct contact with the agent, and causing high damages to reproductive producers such as abortion in the final of gestation, re-heat, fetal mummification or stillbirths, birth of weak piglets, low number of piglets, vulvar discharge and embryonic death. Currently there are 23 serogroups of Leptospira interrogans with approximately 200 different serovars, in this study we used live cultures of 16 serogroups from Leptospira spp in samples of 297 animals of the northwest of Paraná, Brazil subjected to microscopic evidence of serum agglutination to identify the predominant serovars in the region. There were 19.865% of samples seropositive for one or more serovars with titers of 1:100, 1:200 and 1:400 which were predominant for serovar hardjo 57.627% , followed by pyrogenes serovars with 30.508%, hardjo CTG 13.559%, icterohaemorrhagiae 5.084%, djasiman 1.694% and copenhageni 1.694%, concluding that the serovar hardjo is the most prevalent in the northwest of Paraná.(AU)

La leptospirosis es una enfermedad zoonótica causada por bacteria de la familia Leptospiraceae, género Leptospira representando riesgo para la salud pública, principalmente de médicos veterinarios, carniceros, y funcionarios de granjas porcinas que están sujetos al contacto directo con el agente, trayendo grandes daños reproductivos para los productores tales como: aborto en el último tercio de la preñez, repetición de celo, momificaciones de fetos o mortinatos, nacimientos de lechones débiles, bajo número de lechones, secreción vulvaria y la muerte embrionaria. Actualmente hay 23 serogrupos de Leptospira interrogans con aproximadamente 200 serovares diferentes, en esta investigación se usó culturas vivas de 16 serogrupos de Leptospira spp en muestras de 297 animales de la región Noroeste de Paraná, sometidas a la prueba de seroaglutina microscópica con el objetivo de identificar los serovares predominantes en la región. Se alcanzó 19,865% de muestras seropositivas para un o más serovares con titulaciones de 1:100, 1:200 y 1:400, en la cual tuvieron mayor prevalencia para el serovar hardjo con 57,627%, seguido por los serovares pyrogenes 30,508%, hardjo C.T.G. 13,559%, icterohaemorrhagiae 5,084%, djasiman 1,694% y copenhageni 1,694%, concluyendo que el serovar Hardjo es los más prevalente en la región noroeste de Paraná.(AU)

ANÁLISE RETROSPECTIVA DE EXAMES SOROLÓGICOS DE LEPTOSPIROSE ANIMAL EXECUTADOS NO LABORATÓRIO DE LEPTOSPIROSE E BRUCELOSE DA UNESP, CÂMPUS JABOTICABAL, DE 2007 A 2015

Com o intuito avaliar a frequência de aglutinas anti-Leptospira dentre as amostras analisadas no Laboratório de Brucelose e Leptospirose da Unesp, Câmpus Jaboticabal, realizou- se uma investigação retrospectiva dos resultados de exames sorológicos para diagnóstico de leptospirose entre os anos de 2007 e 2015. Neste período foram recebidas 24.483 amostras bovinas, 1.855 amostras equinas, 819 amostras caninas, 532 amostras ovinas, 230 amostras caprinas e 123 amostras suínas. As amostras bovinas provinham de 21 estados brasileiros e a frequência de reagentes foi de 35,30% (IC 95%: 34,70% - 35,90%), sendo o sorogrupo Sejroe o mais relevante. Das amostras caninas, a maioria foi originaria do Estado de São Paulo e a frequência de amostras reagentes foi de 23,93% (IC 95%: 21,01% - 26,85%), sendo o sorogrupo Canicola o mais relevante. Nos equinos, a frequência de amostras reagentes encontrada foi de 46,95% (IC 95%: 44,68% - 49,23%), sendo o sorogrupo Icterohaemorrhagiae o mais importante nesta espécie. A frequência de reagentes encontrada nas amostras das espécies ovina, caprina e suína foi 7,32% (IC 95%: 5,12% - 9,55%), 1,30% (IC 95%: 0,0044% - 3,764%) e 6,03% (IC 95%: 1,70% - 10,37%), respectivamente, e o sorogrupo de maior ocorrência nesses animais foi Icterohaemorrhagiae. Tais resultados permitem confirmar o caráter endêmico da leptospirose em território brasileiro, bem como evidenciar a importância dos hospedeiros de manutenção do agente na disseminação da doença

In order to evaluate the frequency of anti-Leptospira agglutinins among the samples analyzed in the Leptospirosis and Brucellosis Laboratory, Unesp, Jaboticabal Campus, a retrospective investigation of the results of serological tests for leptospirosis between the years 2007 and 2015 was performed. During this period, 24,483 bovine samples, 1,855 equine samples, 819 canine samples, 532 sheep samples, 230 goats samples and 123 swine samples were received. Bovine samples came from 21 Brazilian states and the frequency of reactors was 35.30% (95% CI: 34.70% - 35.90%) and serogroup Sejroe was the most relevant. Of canine samples, most were originally from the state of São Paulo and the frequency of reacting samples was 23.93% (95% CI: 21.01% - 26.85%), the serogroup Canicola wasthe most relevant. In horses, the frequency of reagent samples was found to be 46.95% (95% CI: 44.68% - 49.23%), the serogroup Icterohaemorrhagiae was the most important in this species. The frequency of reactors among of sheep, goats and swine samples was 7.32% (95% CI: 5.12% - 9.55%), 1.30% (95% CI: 0.0044% - 3.764%) and 6.03% (95% CI: 1.70% - 10.37%), respectively, and the serogroup most frequent in these animals was Icterohaemorrhagiae. These results confirm the endemicity of leptospirosis in Brazil, as well as highlight the importance of the agent maintenance hosts in the dissemination of the disease.

PESQUISA DE Leptospira spp. EM RINS DE SUÍNOS ABATIDOS EM FRIGORÍFICOS DO DISTRITO FEDERAL POR PCR

O presente trabalho teve como objetivo detectar através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a presença do fragmento do gene lipL32 em fragmentos coletados de rins de suínos abatidos em frigoríficos localizados no Distrito Federal com o intuito de estudar a ocorrência da Leptospira spp., assim como identificar suínos portadores renais do agente. Foram coletadas amostras renais de 50 carcaças provenientes de animais oriundos de três propriedades diferentes. A PCR foi baseada na detecção do fragmento do gene lipL32, o qual é extremamente conservado em todas as cepas patogênicas da Leptospira spp. O resultado encontrado em todas as amostras do estudo foi negativo para a bactéria Leptospira spp. Em granjas com boas condições sanitárias, apesar de o risco de transmissão ser baixo, a leptospirose suína permanece como um assunto preocupante tanto para a Saúde Animal quanto para a Saúde Pública.

This study aimed to detect through the Polymerase Chain Reaction (PCR) the presence of lipL32 gene in fragments collected from pig kidneys in slaughterhouses located in Distrito Federal in order to study the occurrence of the Leptospira spp. as well as identify renal carriers of the agent. Kidney samples from 50 animals from three different properties were collected. The PCR method was based on the detection of lipL32 gene which is highly conserved in all strains of pathogenic Leptospira spp. The PCR was negative in all the surveyed kidney samples. In farms with good sanitary conditions, despite the low risk of transmission, swine leptospirosis remains a matter of concern both for Animal Health and for Public Health.

Prevalence of anti-leptospira spp. antibodies in swine slaughtered in the public slaughterhouse of patos city, paraíba state, northeast region of brazil

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 131 swine slaughtered in the public slaughterhouse of Patos city, Northeast region of Brazil, to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. agglutinins. For serologic diagnosis of leptospirosis, the microscopic agglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 131 swine analyzed, 44 were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar, resulting in a seroprevalence of 33.6% (95% CI = 25.5% 42.4%). The most frequent serovar was Pomona, with 38 (29.0%; 95% CI = 21.4% 37.6%) reactant sera. Other reactant serovars and respective prevalence were: Pyrogenes (2.3%; 95% CI = 0.5% 6.5%), Canicola (1.5%; 95% CI = 0.2% 5.4%) and Shermani (0.8%; 95% CI = 0.02% 4.2%). There was statistical difference in seroprevalence to serovar Pomona compared with others reactant serovars (P 0.0001).

RESUMO Com o objetivo de determinar a prevalência de aglutininas anti-Leptospira spp., foi realizado um inquérito sorológico em 131 suínos abatidos no matadouro público de Patos, Estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico sorológico de leptospirose, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes. Soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Dos 131 suínos, 44 foram soropositivos para pelo menos um dos sorovares empregados, resultando em uma soroprevalência de 33,6% (IC 95% = 25,5% 42,4%). O sorovar mais provável foi o Pomona, com 38 (29,0%; IC 95% = 21,4% 37,6%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Pyrogenes (2,3%; IC 95% = 0,5% 6,5%), Canicola (1,5%; IC 95% = 0,2% 5,4%) e Shermani (0,8%; IC 95% = 0,02% 4,2%). Houve diferença significativa na soroprevalência para o sorovar Pomona em relação aos demais sorovares (P 0,0001).

Leptospirose suína

ABSTRACT Swine leptospirosis is an important cause of economic loss in reproductive herds, and it occurs all over the world. Swine l eptospirosis can be presented in basically the two types acute and chronic. Fever, focal mastitis and leptospiruria are observed in the acute infection of adult animals. In the chronic type, infertility, abortions, stillborn and weak piglets are common. The serovars Canicola, Pomona and Icterohaemorrhagiae are the most important in the epidemiology of this disease. Although there are many available diagnostic techniques and others which are being developed, the microscopic agglutination test is the most commonly used, especially in swine and it is considered a serogroup specific test with a complex interpretation. Swine leptospirosis control is based on the immunization of susceptible swine in conjunction with actions related to infection sources, in order to reduce the quantity of leptospiras spread to the environment and to identify and eliminate factors which amplify the pathogenic agents survival. Swine anti-leptospira polyvalent vaccines are composed of whole inactivated bacteria. The most frequently used serovars are: Canicola, Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, Pomona, Grippotyphosa and Bratislava. Proteins from external membrane and from the surface of pathogenic leptospiras are effective antigens for anti-leptospira vaccine production and have become particularly interesting for the development of new anti-leptospira vaccines.

RESUMO A leptospirose suína é uma importante causa de prejuízos em rebanhos de reprodução, e ocorre em de todas as partes do mundo. A leptospirose suína pode se apresentar basicamente nas formas aguda e crônica. Na forma aguda, pode ocorrer febre, mastite focal e leptospirúria em animais adultos. Na forma crônica é comum a infertilidade, com a ocorrência de abortamentos, natimortos e nascimento de leitões fracos. Os sorovares Canicola, Pomona e Icterohaemorrhagiae são os mais importantes na epidemiologia da doença. Apesar das várias técnicas disponíveis e as que estão sendo desenvolvidas para o diagnóstico da leptospirose, a soroaglutinação microscópica ainda é a mais praticada, principalmente em suínos, sendo um teste considerado sorogrupo específico e a sua interpretação é complexa. O controle da leptospirose suína é baseado na imunização de suscetíveis, nas ações sobre as fontes de infecção, visando a diminuição da quantidade de leptospiras lançadas no ambiente e na identificação e eliminação dos fatores que ampliam a sobrevivência do agente. As vacinas anti-leptospirose suína são constituídas de bactérias íntegras inativadas polivalentes. Os sorovares comumente presentes são: Canicola, Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, Pomona, Grippotyphosa e Bratislava. As proteínas, especialmente as de membrana externa e de superfície das leptospiras patogênicas, são antígenos efetivos para a produção de vacinas anti-leptospirose e têm se tornado um dos maiores pontos de interesse para o desenvolvimento de vacinas anti-leptospirose.

Ocorrência de anticorpos anti-toxoplasma gondii e anti-leptospira spp. em suínos abatidos em três abatedouros dos estados de minas gerais e são paulo

ABSTRACT Many seroepidemiological inquiries of toxoplasmosis and leptospirosis in swine have been realized in many Brazilian states, demonstrating the importance of these diseases for swine farming, as well as the potential of this swine species as a source of infection of these diseases for man. This study aimed to establish the occurrence of antibodies anti-Toxoplasma gondii and anti-Leptospira spp. in swine slaughtered in 3 slaughterhouses, located in Minas Gerais and São Paulo states, Brazil. Two hundred sixty-two blood samples were collected from slaughtered swine, from 16 cities, and the sera samples were submitted to the modified agglutination test, to investigate antiT. gondii antibodies, and to the microscopic agglutination test, to investigate anti-Leptospira spp. antibodies. No sample was positive for T. gondii, and 2 samples reacted to Leptospira interrogans, serovar Pyrogenes (titer 100). These low occurrences of antibodies in the studied swine, for the Leptospiratest, could be due the use of the system of total confinement, allied to the hygienic-sanitary swine management and the slaughtered animals short length of stay at the farms.

RESUMO Diversos inquéritos soroepidemiológicos a respeito da toxoplasmose e leptospirose em suínos foram realizados em diferentes estados brasileiros, demonstrando a importância destas enfermidades para a suinocultura, bem como o potencial da espécie suína como fonte de infecção destas enfermidades para o homem. Este trabalho objetivou estabelecer as ocorrências de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Leptospira spp. em suínos abatidos em três abatedouros, situados nos Estados de Minas Gerais e São Paulo. Foram colhidas 262 amostras de sangue de suínos terminados, provenientes de 16 municípios. Os soros foram submetidos ao método de Aglutinação Direta Modificada (MAD) para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, e à Soroaglutinação Microscópica (SAM), para anticorpos anti-Leptospira spp. Nenhuma amostra foi positiva para T. gondii e duas amostras reagiram para Leptospira interrogans, sorovar Pyrogenes (título 100). Os resultados devem ser em função do emprego do sistema de confinamento total, aliado ao manejo higiênico-sanitário na atividade suinícola e pelo pequeno período de permanência dos animais terminados nas granjas.

Avaliação da eficácia de bacterina antileptospirose suína: relação entre o resultado do teste de inibição de crescimento de leptospiras in vitro aplicado ao soro de suínos com o obtido no teste de potência in vivo em hamsters / Evaluation of the efficacy of a swine antileptospiral bacterin: relationship between the results of in vitro leptospiral growth inhibition test applied to swine sera with the ones in vivo potency test in hamsters

O controle da eficiência de bacterinas antileptospirose de uso animal é o teste de potência com desafio em hamsters, contudo, na atualidade, tem sido estimulada a busca de alternativas que dispensem o uso de animais de laboratório. O teste de inibição de crescimento de leptospiras in vitro (ICLIV) tem sido proposto como possível alternativa. O presente trabalho empregou os testes de ICLIV, soroaglutinação microscópica (SAM) e ELISA anti IgG para avaliar a intensidade e a duração da imunidade passiva em leitões em aleitamento e ativa em matrizes suínas e leitões desmamados imunizados com bacterina experimental antileptospirose aprovada no teste de potência em hamster. Foi produzida uma bacterina experimental antileptospirose com estirpe patogênica de Leptospira interrogans, sorovar Kennewicki, estirpe Pomona Fromm (LPF), padronizada para conter 109 leptospiras por mL e associada ao adjuvante de hidróxido de alumínio na proporção de 10% do volume da dose final. Para a avaliação da eficácia da concentração mínima de leptospiras a ser utilizada na bacterina, diluições seriadas de razão dez de cultivo de leptospiras variando de 105 a 109 leptospiras/mL, foram submetidas ao teste de potência com desafio em hamsters (Experimento A), apenas a bacterina produzida na concentração de 109 leptospiras/mL foi capaz de proteger os hamsters contra a infecção induzida pela estirpe LPF, quando a vacina foi testada na diluição de 1:800, critério internacional de aprovação. A bacterina na concentração de 109 leptospiras/mL foi submetida ao teste de potência em hamsters (Experimento B), imunizados com a vacina pura e em diluições seriadas de razão dois (200 a 25600). A bacterina foi aprovada no teste de desafio em hamster até a diluição de 1:6400. O controle do inóculo de desafio foi constituído por 100 DL50. Fêmeas suínas que nunca haviam sido vacinadas contra a leptospirose e que foram não reagentes no teste de soroaglutinação microscópica aplicado a leptospirose efetuado com 24 estirpes de referência e no teste ICLIV com a estirpe LPF (Experimento 1), receberam duas aplicações intervaladas de 30 dias e um reforço aos 210 da primeira dose da bacterina pura e em diluições seriadas de razão dois (400 a 3200). Estes animais foram 16 monitorados com colheitas de sangue efetuadas a cada 30 dias. Os picos máximos de anticorpos avaliados pelos testes de SAM e de ICLIV foram observados aos 30 dias da segunda aplicação da vacina, com maior magnitude para a vacina pura, contudo aos 120 dias da segunda aplicação da vacina houve um declínio acentuado nos níveis de anticorpos. Para encontrar um melhor intervalo entre as imunizações (Experimento 2), fêmeas suínas receberam duas aplicações da bacterina pura intervaladas de 30 dias e o reforço aos 150 da primeira dose. A redução do intervalo de revacinação após as duas doses iniciais determinou a persistência dos títulos de aglutininas e de anticorpos neutralizantes com níveis sempre superiores a 0,4 log. Nos leitões em aleitamento filhos das matrizes imunizadas com bacterina na concentração de 109 leptospiras/mL foi constatada a transferência de imunidade passiva, confirmada pelos títulos de anticorpos aglutinantes detectáveis no quinto dia de vida e de neutralizantes no quinto e décimo dia de vida. Nos ensaios realizados em leitões desmamados imunizados com uma série de diluições de razão dez variando de a 109 leptospiras/mL os picos máximos de anticorpos foram observados aos 30 dias da segunda imunização, com maior magnitude para a bacterina testada na concentração de 109 leptospiras/mL. Os parâmetros finalmente obtidos foram que matrizes suínas e leitões desmamados, primovacinados com duas aplicações intervaladas de 30 dias da bacterina aprovada no teste de potência com desafio em hamster, apresentaram no teste de ICLIV efetuado aos 60 dias da primo-vacinação, intervalos de títulos de anticorpos (95%) expressos em log variando, respectivamente de (0,87 a 1,35) e de (1,22 a 1,58). Os valores máximos (12.800) para o teste de ELISA anti IgG das matrizes suínas foram obtidos após o reforço efetuado aos 210 dias

The potency of antileptospirosis bacterins is controlled by in vivo experimental assay performed in hamsters; however, nowadays the search for in vitro methodologies that could replace the use of laboratory animals has been stimulated. For this purpose, the In vitro leptospiral growth inhibition test (IVLGIT) has been proposed as an alternative test. In this work, the intensity and duration of the passive immunity in suckling piglets and active immunity in weaned piglets and adult sows were evaluated, after vaccination with an experimental leptospirosis bacterin, which had been approved previously on the potency test in hamsters. The in vitro tests applied to swine sera were the growth inhibition test (IVLGIT), microscopic agglutination (MAT) and anti-IgG ELISA. The bacterin was produced with a pathogenic Leptospira interrogans serovar Kennewicki strain identified as Pomona Fromm (LPF), and added with aluminum hydroxide as adjuvant at a concentration of 10% of the final volume dose. In order to evaluate the efficacy of the minimum concentration of the leptospires to be used in the bacterin, ten-fold serial dilutions of a culture of leptospira varying from 105 to 109 leptospires/mL were submitted to potency-challenge test in hamsters (Trial A). Only the bacterin produced at the concentration of 109 leptospires/mL protected the hamsters against the infection by LPF strain, when the vaccine was tested at the dilution of 1:800, which is the international criterion for the approval. The bacterin at the concentration of 109 leptospires/mL was submitted to the potency test in hamsters (Trial B), which had been immunized with an undiluted and with two-fold serially diluted bacterin (from 1:200 to 1:25,600). In the challenge test in hamsters, the bacterin has passed till the dilution of 1:6,400. The control of the challenge inoculum presented a titer of 100 LD50. Adult sows, never been vaccinated against leptospirosis, and that showed negative MAT results using 24 reference serovars and with negative IVLGIT with the LPF strain (Trial 1) had administered two doses of bacterin with 30 day interval and a booster dose at 210th day after the first application of the undiluted bacterin and the two-fold diluted ones (1:400 to :3,200). The animals were 18 monitored with bleeding performed each 30 days. The levels of antibodies evaluated by MAT and IVLGIT showed the maximum peak at the 30th day after the second vaccination of the bacterin, with high magnitude found with the undiluted bacterin, however, at the 120th day after the second vaccination there were found a marked decline in antibodies levels. To find a better immunization scheme (Trial 2), the sows received two doses of undiluted bacterin with 30 day interval and the booster dose at the 150th day after the first dose. The reduction on the interval of revaccination after the two initial doses determined the persistence of a higher levels agglutinins and neutralizing antibodies with titers 0.4 log. In suckling piglets born from sows immunized with the bacterin at the concentration of 109 leptospires/mL, the passive transference of antibodies was confirmed by MAT titers detected on the fifth day, and by IVLGIT titers, at the fifth and tenth days after birth. In the study of weaned piglets immunized with the bacterin at the concentrations of 106, 107, 108 and 109 leptospires/mL (Trial 3), the highest antibodies levels were observed at the 30th day after the second immunization, with greater magnitude for the bacterin tested at the concentration of 109 leptospires/mL. The final results indicate that sows and weaned piglets, primo-vaccinated and revaccinated with 30 day interval with bacterin that had passed in the potency-challenge test in hamsters, presented the IVLGIT results varying (95% CI) from 0.87 log to 1.35 log for sows and 1.22 to 1.58 log for weaned piglets, at the 60th day after the first vaccination. In adult sows the highest anti-IgG ELISA titer reached 12,800, obtained after the booster vaccine dose performed at 210th day from the first vaccination

Frequency of anti-leptospires agglutinins in sows from a swine herd in the ibiúna municipality, state of são paulo, brazil

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 164 sows from a single farrow-to-finish swine herd located in the Ibiúna municipality, state of São Paulo, Brasil, to determine the frequency of antileptospires agglutinins. For detection of anti-leptospires antibodies, the microscopic serumagglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 164 sows, 27 (16.5%) were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar. The most frequent serovar was Hardjo (Hardjobovis), with 13 (54.2%) reactant sera. Other reactant serovars and respective frequency were: Shermani (16.6%), Bratislava (12.5%), Autumnalis (12.5%) and Icterohaemorrhagiae (4.2%).

RESUMO Com o objetivo de determinar a freqüência de aglutininas anti-leptospiras, foi realizado um inquérito sorológico em 164 matrizes de uma granja suína de ciclo completo localizada no Município de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Para a detecção de anticorpos anti-leptospiras, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes, e soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Das 164 matrizes suínas, 27 (16,5%) foram soropositivas para pelo menos um dos sorovares empregados. O sorovar mais provável foi o Hardjo (Hardjobovis), com 13 (54,2%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Shermani (16,6%), Bratislava (12,5%), Autumnalis (12,5%) and Icterohaemorrhagiae (4,2%).