Effects of copaiba oil on dermonecrosis induced by Loxosceles intermedia venom

Background:Accidents caused by spiders of the genus Loxosceles constitute an important public health problem in Brazil. The venom of Loxosceles sp induces dermonecrosis at the bite site and systemic disease in severe cases. Traditional medicine based on plant-derived products has been proven to reduce the local effects of envenomation. The present study verified the healing effects of copaiba oil on lesions induced by the venom of L. intermedia.Methods:Cutaneous lesions were induced on the backs of rabbits by intradermal injection of L. intermedia venom. Copaiba oil was applied topically 6 hours after injection; the treatment was repeated for 30 days, after which animal skins were removed and processed for histopathological analysis. Blood samples were also collected before and 24 hours after venom inoculation to measure the hematological parameters.Results:Compared to the control group, the platelet count was reduced significantly in all groups inoculated with venom, accompanied by a decreased number of heterophils in the blood. The minimum necrotic dose (MND) was defined as 2.4 μg/kg. Topical treatment with copaiba oil demonstrated a differentiated healing profile: large skin lesions were observed 10 days after venom inoculation, whereas formation of a thick crust, without scarring was observed 30 days after venom inoculation. Histopathological analysis showed no significant difference after treatment. Nevertheless, the copaiba oil treatment induced a collagen distribution similar to control skin, in marked contrast to the group that received only the spider venom injection.Conclusions:We conclude that copaiba oil may interfere in the healing process and thus propose it as a possible topical treatment for cutaneous lesions induced by L. intermedia venom.(AU)

Effects of copaiba oil on dermonecrosis induced by Loxosceles intermedia venom

Accidents caused by spiders of the genus Loxosceles constitute an important public health problem in Brazil. The venom of Loxosceles sp induces dermonecrosis at the bite site and systemic disease in severe cases. Traditional medicine based on plant-derived products has been proven to reduce the local effects of envenomation. The present study verified the healing effects of copaiba oil on lesions induced by the venom of L. intermedia. Methods: Cutaneous lesions were induced on the backs of rabbits by intradermal injection of L. intermedia venom. Copaiba oil was applied topically 6 hours after injection; the treatment was repeated for 30 days, after which animal skins were removed and processed for histopathological analysis. Blood samples were also collected before and 24 hours after venom inoculation to measure the hematological parameters. Results: Compared to the control group, the platelet count was reduced significantly in all groups inoculated with venom, accompanied by a decreased number of heterophils in the blood. The minimum necrotic dose (MND) was defined as 2.4 μg/kg. Topical treatment with copaiba oil demonstrated a differentiated healing profile: large skin lesions were observed 10 days after venom inoculation, whereas formation of a thick crust, without scarring was observed 30 days after venom inoculation. Histopathological analysis showed no significant difference after treatment. Nevertheless, the copaiba oil treatment induced a collagen distribution similar to control skin, in marked contrast to the group that received only the spider venom injection. Conclusions: We conclude that copaiba oil may interfere in the healing process and thus propose it as a possible topical treatment for cutaneous lesions induced by L. intermedia venom.(AU)

Secretoma no tratamento de lesão dermonecrótica induzida pelo veneno de Loxosceles intermedia

Objetivou-se avaliar os efeitos do secretoma, em feridas dermonecróticas em coelhos submetidos à injeção de veneno de Loxosceles intermedia. Foram utilizados 16 coelhos machos, adultos, Nova Zelândia, com peso médio de 2,0 kg, distribuídos em quatro grupos (n=4). À exceção do grupo controle (grupo I), que foi submetido apenas à aplicação de secretoma (60g de secretoma diluído em tampão fosfato-salina a 0,5%), todos os outros grupos foram submetidos à administração de 10g de veneno de Loxosceles intermedia, diluído em NaCl 0,9%, via intradérmica (ID) na região interescapular e, tratados 30 minutos após a injeção do veneno, da seguinte forma: grupo II (NaCl 0,9%, via ID); grupo III (60g de secretoma diluído em tampão fosfato-salina 0,5%, via ID) e, grupo IV (60g de secretoma diluído em tampão fosfato-salina 0,5% via endovenosa - EV). Os animais foram avaliados diariamente e realizados registros fotográficos em altura pré-definida de 30 cm para posterior análise da evolução da área da ferida por morfometria. Amostras de sangue foram coletadas imediatamente antes da aplicação do veneno (tempo 0) e 3, 9 e 15 dias após, para avaliação e monitoração de parâmetros hematológicos e bioquímicos séricos e plasmáticos. Após 15 dias os animais foram eutanasiados, submetidos a necropsia e amostras de pele ao redor da lesão foram coletadas para posterior análise histológica. Os resultados demonstraram que os animais do GI não apresentaram edema, eritema, halo ou necrose. No primeiro dia da injeção do veneno, após tratamentos com secretoma, os animais do GIII e GIV, apresentaram maior grau de edema, quando comparado aos animais do GII. Todavia, no 15ª dia de avaliação, o edema foi menor nos animais do GIII e GIV e, de forma inversa, maior no GI. O eritema foi observado nos grupos que receberam veneno de L. intermedia (GII, GIII e GIV), e comparativamente, no primeiro dia, nos grupos II e III foram similares entre si, e diferentes do GIV que apresentou menor diâmetro de eritema (p<0,05). O halo hemorrágico não foi observado no GI e nos animais que receberam veneno (GII, GIII e GIV), nos tempos 1 e 3, não houve diferença (p>0,05). Deve ser salientado que, no nono dia, somente nos animais do GIV, ainda havia halo hemorrágico. Todavia, macroscopicamente, no GIV, apenas um animal apresentou evolução para ferida dermonecrótica. Na avaliação microscópica, não foram observadas alterações na pele dos animais do GI, entretanto, apesar de todos animais que foram desafiados com o veneno, apresentarem alterações muito semelhantes, como necrose e infiltração heterofílica, no GIV, os animais apresentaram ativação fibroblástica, desenvolvimento precoce de tecido conjuntivo, neovascularização e reepitelização tecidual, conferindo alternativa comprovadamente eficaz em relação ao processo de cicatrização. Em relação a hematologia não houve alteração digna de nota e na bioquímica sérica, somente houve aumento na concentração de CK no tempo 3, nos grupos GIII e GIV e, posterior redução a partir do nono dia. Esses mesmos grupos também apresentaram aumento de LDH e ureia, porém os valores permaneceram dentro dos parâmetros fisiológicos para a espécie leporina. Conclui-se que a terapia com o secretoma pode ser utilizada na cicatrização da ferida dermonecrótica no loxoscelismo.

The objective was to evaluate the effects of the secretome, in dermonecrotic wounds in rabbits subjected to injection of Loxosceles intermedia. Sixteen male, adult, New Zealand rabbits, with a mean weight of 2.0 kg, were distributed in four groups (n=4). Except for the control group (group I), which was subjected only to the application of secretome (60g of secretome diluted in 0.5% phosphate-saline buffer), all other groups were subjected to the administration of 10g of L. intermedia venom, diluted in 0.9% NaCl, via intradermal (ID) in the interscapular region and, treated 30 minutes after the venom injection, as follows: group II (NaCl 0.9%, via ID); Group III (60g of secretome diluted in 0.5% phosphate-saline buffer, via ID) and, group IV (60g of secretome diluted in 0.5% phosphate-saline buffer intravenous - IV). Animals were evaluated daily and photographic records were taken at a predefined height of 30 cm for later analysis of the evolution of the wound area by morphometry. Blood samples were collected immediately before venom application (time 0) and 3, 9 and 15 days after, for evaluation and monitoring of hematological and serum and plasma biochemical parameters. After 15 days, the animals were euthanized, submitted to necropsy, and skin samples around the lesion were collected for subsequent histological analysis. The results showed that the animals in GI did not have edema, erythema, hemorrhagic halo or necrosis. On the first day of venom injection, after secretome treatments, the animals in GIII and GIV showed a more significant degree of edema, when compared to the animals in GII. However, on the 15th day of evaluation, the edema was lower in the animals of GIII and GIV, and conversely, higher in GI. Erythema was observed in the groups that received L. intermedia venom (GII, GIII and GIV), and comparatively, on day 1st, groups II and III were similar to each other, and different from GIV which showed smaller erythema diameter (p<0.05). The hemorrhagic halo was not observed in GI and in the animals that received venom (GII, GIII, and GIV), at times 1 and 3, there was no difference (p>0.05). It should be noted that on the 9th day, only in the animals of GIV, there was still a hemorrhagic halo. However, macroscopically, in GIV, only one animal showed evolution to a dermonecrotic wound. In the microscopic evaluation, no changes were observed in the skin of animals of GI, however, although all animals that were challenged with the venom presented very similar changes, such as necrosis and heterophilic infiltration, in GIV, the animals showed fibroblastic activation, early development of connective tissue, neovascularization, and tissue reepithelialization, conferring a proven effective alternative in relation to the healing process. Regarding hematology, there was no noteworthy change, and in biochemistry serum profile, there was only an increase in CK concentration at time 3, in groups GIII and GIV, and a subsequent reduction from day 9. These same groups also showed an increase in LDH and urea, but the values remained within the physiological parameters for the leporine species. It is concluded that secretome therapy can be used in dermonecrotic wound healing in loxoscelism.

CLINICAL AND LABORATORIAL EFFECTS AND IMMUNOGENICITY OF Loxosceles spp. VENOM PROTEINS IN HORSES PARTAKING IN ANTIVENOM PRODUCTION

O envenenamento por aranhas detém importância mundial no âmbito da saúde pública e alcança números cada vez mais significativos a cada ano. Acidentes envolvendo Loxosceles spp. detêm destaque nessa estatística, especialmente no Brasil. A soroterapia permanece sendo o único tratamento efetivo contra esse agravo e o seu processo produtivo enfrenta diversos problemas, uma vez que o mesmo é diretamente dependente da imunização de animais (principalmente cavalos) para o posterior processamento do plasma, o que possui implicâncias éticas referentes à bem estar animal. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho é avaliar os efeitos clínicos causados pelo veneno de Loxosceles spp. em equinos submetidos a imunização para produção de antiveneno, assim como o de coelhos submetidos a um procedimento de imunização semelhante. No experimento 1, 11 equinos hígidos, nunca antes imunizados, foram avaliados em três momentos experimentais distintos: T0 (antes da imunização); T1 (após o primeiro ciclo de imunização); e T2 (após a primeira sangria comercial). Os animais foram avaliados clinicamente, submeteram-se à coleta de sangue e ao exame eletrocardiográfico (ECG). Achados clínicos de destaque recaíram sobre a presença de abscessos subcutâneos supurados atribuídos ao emprego de adjuvantes de Freund e tromboflebites devido às venopunções sistemáticas. Equinos em T2 apresentaram as alterações hematimétricas mais relevantes, com redução do hematócrito (PCV), contagem de células vermelhas (RBC) e de hemoglobina. Funções hepática e renal permaneceram normais. A hiperproteinemia diagnosticada foi atribuída ao aumento do teor de globulinas, O ECG ilustrou arritmias em poucos equinos em T2, como bloqueio átrio-ventricular de segundo grau (BAV-2) e aumento em amplitude de ondas T e R. No experimento 2, sete equinos, os quais já haviam sido submetidos à seis ou mais ciclos completos de imunização para produção de antiveneno, foram avaliados e denominados grupo imunizado (GI). Onze equinos, sob o mesmo manejo, foram dispostos como grupo controle (GC). GI apresentou menor PCV e RBC, apesar de mantê-los dentro dos índices de referência para a espécie. A função renal não se apresentou comprometida, mas as enzimas hepáticas apresentaram-se elevadas em relação ao GC, provavelmente devido ao alto requerimento de produção de imunoglobulinas. O ECG ilustrou anormalidades de traçado no GI, corroboradas com o aumento na enzima creatina quinase em sua fração MB (CK-MB). No experimento 3, 11 coelhos machos Nova Zelândia foram utilizados. Cinco foram alocados no grupo controle (GC), recebendo adjuvante (montanide) e tampão salina-fosfato. Os seis coelhos restantes receberam 21g de veneno de Loxosceles spp. empregando como adjuvante o montanide (GV). Após cinco ciclos de imunização, um desafio foi realizado com 7g de veneno de L. intermedia, com posterior mensuração das lesões dermonecróticas. Os coelhos foram eutanasiados e amostras de órgãos e tecidos foram coletados para análise histopatológica. Nenhum parâmetro sanguíneo referente ao eritrograma mostrou-se alterado significativamente, mas a contagem total de leucócitos foi maior em GV, corroborando com a ação quimiotáxica neutrofílica já descrita para o veneno. Fígado e rins mantiveram a função preservada de acordo com a análise de bioquímica sérica. O ECG não demonstrou alterações entre grupos e momentos experimentais. A histopatologia elucidou uma tendência do veneno loxoscélico em induzir cardio/reno e hepatotoxicidade, tanto de forma direta como indireta. Conclui-se que apesar de o veneno possui ação cardio/reno e hepatotóxica, ambos coelhos e equinos mantiveram-se em condições clínicas adequadas. Uma maior deve ser dada aos equinos no período pós-sangria, devendo os mesmos serem acompanhados. A reinfusão de papa de hemácias é uma sugestão para esses animais.

Spider envenomation holds worldwide importance in public health and reaches significant and increasing numbers every year. Loxosceles spp. plays an important role in these statistics, especially in Brazil. Antivenom remains the only effective treatment against this ailment, and its production faces several hindrances since it depends on immunizing animals (mainly horses) and later processing their plasma, which leads to increasing animal welfare concerns. Therefore, the aim of this study is to evaluate the general clinical effects of Loxosceles spp. venom in horses that underwent immunization protocols for loxoscelic antivenom procurement, as well as those in rabbits who underwent a shorter immunization protocol. In experiment 1, eleven healthy horses, never immunized, were evaluated on three different periods: T0 before immunization; T1 after their first loxoscelic antivenom immunization; and T2 after their first commercial bleeding. Horses were clinically evaluated, sampled for blood, and underwent electrocardiographic (ECG) recordings. Significant clinical findings were the several suppurated subcutaneous abscesses due to the use of Freunds adjuvants and thrombophlebitis due to systematic venipunctures for commercial bleeding procedures. Horses at T2 presented the most blood alterations, including reduced packed cell volume (PCV), red blood cells (RBC), and hemoglobin. Liver and renal functions were unaffected. Hyperproteinemia occurred due to increase in globulin levels. ECG showed arrhythmias in few horses in T2, such as second-degree atrioventricular block (AVblock), as well as an increase in T and R waves. On experiment 2, seven crossbred horses, who had partaken in six or more complete antivenom-producing cycles, were used and established as the immunized group (IG). Eleven horses, under the same handling and general management, were established as the control group (CG). IG presented lower red blood cell count and packed cell volume, despite keeping values within inferior limits for the species. Renal function was not impaired, but liver-related enzymes were higher when compared to CG, probably due to liver exertion from immunoglobulin synthesis. ECG showed some abnormalities in IG, corroborated by increase in creatine kinase/isoenzyme MB fraction (CK-MB). In experiment 3, eleven male New Zealand rabbits were used. Five were allocated as a control group (CG), that received adjuvant (montanide) and phosphate-buffer saline. The six remaining rabbits received 21g of Loxosceles spp. venom using montanide as adjuvant (VG). After five immunization cycles, a trial with 7g of L. intermedia was performed, and dermonecrotic lesions were measured. Rabbits were then euthanized, and their organs harvested for histopathology analysis. No erythrocyte-related parameter showed significance, but white blood cell count was higher in VG, corroborating with venoms neutrophil chemotaxis. Liver and kidney functions were also preserved according to blood biochemical panel. ECG showed no alteration between experimental groups and evaluation periods. Histopathology showed a tendency for loxoscelic venom to produce a direct and indirect cardiotoxicity, renal toxicity, and hepatotoxicity. It was concluded that despite loxoscelic venom exerts cardiotoxicity, hepatotoxicity, and renal toxicity, both rabbits and horses were kept within acceptable clinical conditions. A crucial point to be highlighted is bleeding for industrial antivenom production, when horses should receive greater attention and perhaps reinfusion with suspended red blood cells.

Development of Loxosceles intermedia Mello-Leitão (1934) (Araneae, Sicariidae) genital tract / Desenvolvimento do trato genital de Loxosceles intermedia Mello-Leitão (1934) (Aranea: Sicariidae)

We examined the post-embryonic development of the male and female genital apparatus of the brown spider, Loxosceles intermedia. The development of the genital apparatus for both sexes begins with the appearance of inner structures. In the male genital apparatus, formation of the testes occurs first, followed by differentiation of the duct, ampulla and vas deferens, and finally the formation of the genital opening and differentiation of the copulatory organ (secondary sexual characteristic). Similarly, the development of the female genital apparatus begins with the formation of the ovaries, followed by the appearance of oocytes in vitellogenesis, then the development of oviducts and uterus internus and, finally, the spermatheca. These data may be very important in further comparative studies on the development of the reproductive system of spiders.(AU)

Examinamos o desenvolvimento pós-embrionário do aparelho genital masculino e feminino da aranha-marrom Loxosceles intermedia. O desenvolvimento do aparelho genital de ambos os sexos começa com o aparecimento de estruturas internas. No aparelho genital masculino a formação dos testículos ocorre primeiro, seguida pela diferenciação do ducto, ampola e vas deferens e, finalmente, a formação da abertura genital e diferenciação do órgão copulador (característica sexual secundária). Da mesma forma, o desenvolvimento do aparelho genital feminino começa com a formação dos ovários, seguida pelo aparecimento de oócitos em vitelogênese, o desenvolvimento dos ovidutos e uterus internus e, finalmente, a espermateca. Esses dados podem ser muito importantes em estudos comparativos sobre o desenvolvimento do sistema reprodutivo de aranhas.(AU)

Asymmetry and experience in the predatory probing behavior of spitting spiders Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae)

Assimetria e experiência no comportamento de tocar a presa de aranhas cuspideiras Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae). Pouco se conhece a respeito das assimetrias comportamentais em aranhas. Procuramos aqui verificar, em oito aranhas da espécie Scytodes globula, vieses laterais e efeitos de experiência nos movimentos de tocar a presa com as pernas I e II, durante quatro encontros predatórios sucessivos com aranhas-marrons Loxosceles intermedia. No primeiro encontro, as pernas esquerdas de ambos os pares foram usadas mais do que as pernas direitas; no último encontro, apenas as pernas I esquerdas. A frequência dos toques com as pernas I e II diminuiu do primeiro para o último encontro. Os resultados confirmam resultados anteriores sobre a lateralidade de S. globula e mostram a existência de efeitos de experiência no comportamento predatório desta aranha.

Assimetria e experiência no comportamento de tocar a presa de aranhas cuspideiras Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae) / Asymmetry and experience in the predatory probing behavior of spitting spiders Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae)

Pouco se conhece a respeito das assimetrias comportamentais em aranhas. Procuramos aqui verificar, em oito aranhas da espécie Scytodes globula, vieses laterais e efeitos de experiência nos movimentos de tocar a presa com as pernas I e II, durante quatro encontros predatórios sucessivos com aranhas-marrons Loxosceles intermedia. No primeiro encontro, as pernas esquerdas de ambos os pares foram usadas mais do que as pernas direitas; no último encontro, apenas as pernas I esquerdas. A frequência dos toques com as pernas I e II diminuiu do primeiro para o último encontro. Os resultados confirmam resultados anteriores sobre a lateralidade de S. globula e mostram a existência de efeitos de experiência no comportamento predatório desta aranha.(AU)

Little is known about behavioral asymmetries in spiders. We here examined lateral biases and experience effects in probing movements with legs I and II in eight spitting spiders Scytodes globula during four successive predatory encounters with recluse spiders Loxosceles intermedia. In trial 1, left leg probing was more frequent than right leg probing, for both pairs of legs; in the last trial, only for legs I. Frequency of probing by left and right legs of both pairs decreased from the first to the last trial. Results confirm previous ones on the laterality of S. globula and indicate that experience may influence the predatory behavior of this spider.(AU)

Assimetria e experiência no comportamento de tocar a presa de aranhas cuspideiras Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae) / Asymmetry and experience in the predatory probing behavior of spitting spiders Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae)

Pouco se conhece a respeito das assimetrias comportamentais em aranhas. Procuramos aqui verificar, em oito aranhas da espécie Scytodes globula, vieses laterais e efeitos de experiência nos movimentos de tocar a presa com as pernas I e II, durante quatro encontros predatórios sucessivos com aranhas-marrons Loxosceles intermedia. No primeiro encontro, as pernas esquerdas de ambos os pares foram usadas mais do que as pernas direitas; no último encontro, apenas as pernas I esquerdas. A frequência dos toques com as pernas I e II diminuiu do primeiro para o último encontro. Os resultados confirmam resultados anteriores sobre a lateralidade de S. globula e mostram a existência de efeitos de experiência no comportamento predatório desta aranha.

Little is known about behavioral asymmetries in spiders. We here examined lateral biases and experience effects in probing movements with legs I and II in eight spitting spiders Scytodes globula during four successive predatory encounters with recluse spiders Loxosceles intermedia. In trial 1, left leg probing was more frequent than right leg probing, for both pairs of legs; in the last trial, only for legs I. Frequency of probing by left and right legs of both pairs decreased from the first to the last trial. Results confirm previous ones on the laterality of S. globula and indicate that experience may influence the predatory behavior of this spider.

Padrão de descarte de presas e avaliação da atividade antimicrobiana de constituintes da teia de Loxosceles intermedia Mello-Leitão, 1934 e Loxosceles laeta (Nicolet, 1849) (Araneae; Sicariidae)

As aranhas do gênero Loxosceles não apresentam comportamento de limpeza dos restos de presa presentes na teia, fato que leva à expectativa que as propriedades antimicrobianas dos fios de seda impeçam o desenvolvimento de fungos e bactérias que poderiam contaminar as presas e causar mortalidade nas aranhas. Assim, objetivou-se caracterizar o descarte de presas por L. intermedia e L. laeta e verificar a atividade antimicrobiana nos constituintes da teia. O padrão de descarte de presas foi avaliado em teias presentes em laboratório, árvores, peri- e intradomicílio e a análise da ação antimicrobiana dos componentes da teia foi realizada utilizando as técnicas de difusão de poços e difusão de disco. Os resultados evidenciaram que o padrão de descarte varioude acordo com a espécie e o ambiente. A inibição do crescimento de fungos foi mais efetiva para L. laeta, provavelmente por secretar maior quantidade de teia, devido ao seu hábito mais sedentário. Enquanto que ambientes fechados, como os de laboratório provavelmente similar ao encontrado em forros e porões, foram mais favoráveis à contaminação por fungos. Os componentes extraídos da teia não inibiram o crescimento de bactérias e fungos em experimentos laboratoriais elucidando que a barreira físicaparece ter maior importância contra o crescimento de microrganismos do que a química.

Padrão de descarte de presas e avaliação da atividade antimicrobiana de constituintes da teia de Loxosceles intermedia Mello-Leitão, 1934 e Loxosceles laeta (Nicolet, 1849) (Araneae; Sicariidae)

As aranhas do gênero Loxosceles não apresentam comportamento de limpeza dos restos de presa presentes na teia, fato que leva à expectativa que as propriedades antimicrobianas dos fios de seda impeçam o desenvolvimento de fungos e bactérias que poderiam contaminar as presas e causar mortalidade nas aranhas. Assim, objetivou-se caracterizar o descarte de presas por L. intermedia e L. laeta e verificar a atividade antimicrobiana nos constituintes da teia. O padrão de descarte de presas foi avaliado em teias presentes em laboratório, árvores, peri- e intradomicílio e a análise da ação antimicrobiana dos componentes da teia foi realizada utilizando as técnicas de difusão de poços e difusão de disco. Os resultados evidenciaram que o padrão de descarte varioude acordo com a espécie e o ambiente. A inibição do crescimento de fungos foi mais efetiva para L. laeta, provavelmente por secretar maior quantidade de teia, devido ao seu hábito mais sedentário. Enquanto que ambientes fechados, como os de laboratório provavelmente similar ao encontrado em forros e porões, foram mais favoráveis à contaminação por fungos. Os componentes extraídos da teia não inibiram o crescimento de bactérias e fungos em experimentos laboratoriais elucidando que a barreira físicaparece ter maior importância contra o crescimento de microrganismos do que a química.

Evaluation of the efficacy of vacuum cleaners for the integrated control of brown spider Loxosceles intermedia

Some venomous spiders of the genus Loxosceles can reach high population densities inside and around houses. In Brazil, most spider accidents are related to Loxosceles intermedia. Control of loxoscelism should utilize integrated pest management tools, such as vacuum cleaners, to eliminate egg sacs, webs and spiders. The present study tested the efficacy of one type of vacuum cleaner (for professional and domestic use) in the control of L. intermedia populations. Cockroaches (Pycnoscelus surinamensis) were used in some tests for comparison. Vacuuming using standard accessories or a paper tube resulted in the death of all female (n=60), male (n=60), young (n=60) and just-hatched (n=60) L. intermedia, and all egg sacs (n=5) were destroyed. The removal of the plastic plate present at the bottom of the vacuuming tube inside the machine allowed some spiders to survive the vacuuming process. When kept inside a vacuum bag full of dust and debris, adult females (n=10) survived for 10 days; however, significant mortality was observed among male (n=10) and young individuals (n=10). Addition of cornstarch to the vacuum bag did not affect the spiders (n=20). Vacuum cleaners, such as the one used in the present investigation, are promising tools for integrated management of L. intermedia and other spiders in domestic environments.

Evaluation of the efficacy of vacuum cleaners for the integrated control of brown spider Loxosceles intermedia

Some venomous spiders of the genus Loxosceles can reach high population densities inside and around houses. In Brazil, most spider accidents are related to Loxosceles intermedia. Control of loxoscelism should utilize integrated pest management tools, such as vacuum cleaners, to eliminate egg sacs, webs and spiders. The present study tested the efficacy of one type of vacuum cleaner (for professional and domestic use) in the control of L. intermedia populations. Cockroaches (Pycnoscelus surinamensis) were used in some tests for comparison. Vacuuming using standard accessories or a paper tube resulted in the death of all female (n=60), male (n=60), young (n=60) and just-hatched (n=60) L. intermedia, and all egg sacs (n=5) were destroyed. The removal of the plastic plate present at the bottom of the vacuuming tube inside the machine allowed some spiders to survive the vacuuming process. When kept inside a vacuum bag full of dust and debris, adult females (n=10) survived for 10 days; however, significant mortality was observed among male (n=10) and young individuals (n=10). Addition of cornstarch to the vacuum bag did not affect the spiders (n=20). Vacuum cleaners, such as the one used in the present investigation, are promising tools for integrated management of L. intermedia and other spiders in domestic environments.(AU)

Evaluation of fixative solutions for ultrastructural analysis of brown spider Loxosceles intermedia (araneae: sicariidae) tissues

In view of the widely varying compositions of fixative solutions used for studying spiders, five different fixative formulas were tested for fixing male brown-spider (Loxosceles intermedia) gonad tissues. The brown spider represents a public health problem in Curitiba (Paraná State, Brazil). Morphological study of its gonads may aid in understanding the reproductive strategies of this species, and possibly in developing a reproduction control program. The fixatives tested contained glutaraldehyde alone or combined with paraformaldehyde, and the buffers cacodylate or phosphate, with or without the addition of sucrose or sodium chloride as osmolytes. Those containing 2.5% glutaraldehyde and 2% paraformaldehyde in 100 mM phosphate buffer with 200 mM sucrose, or in 200 mM sodium cacodylate, satisfactorily preserved mitochondria, the Golgi apparatus, and the membranes in general. These formulas were nearly isosmotic (439 mOsm/kg H2O and 455 mOsm/kg H2O respectively) to brown spider hemolymph (478 mOsm/kg H2O). With respective to the fixative agents, a glutaraldehyde-paraformaldehyde combination resulted in optimal fixation of Loxosceles intermedia cells. For other species of spiders, hemolymph osmolality should be considered, but the fixative formulas cited above would also probably yield good results.

Dada a variabilidade na composição de soluções fixadoras utilizadas em aranhas, cinco diferentes fixadores foram elaborados para a análise ultra-estrutural dos tecidos da aranha marrom Loxosceles intermedia. A aranha marrom representa um problema de saúde pública na cidade de Curitiba, e o estudo morfológico de suas gônadas pode auxiliar na compreensão de suas estratégias reprodutivas e, possivelmente, no desenvolvimento de um programa de controle da sua população. As fórmulas usadas continham glutaraldeído com ou sem paraformaldeído, tampão cacodilato ou fosfato, e NaCl ou sacarose como osmólitos. As soluções fixadoras compostas por 2.5% glutaraldeído e 2% paraformaldeído, em tampão fosfato com adição de sacarose ou em 200 mM cacodilato de sódio, preservaram bem estruturas como mitocôndrias, aparelho de Golgi e membranas em geral. Os tampões são praticamente isosmóticos (439 mOsm/kg H2O e 455 mOsm/kg H2O, respectivamente) à hemolinfa da aranha marrom (478 mOsm/kg H2O). Ainda, com relação aos agentes fixadores, a combinação do glutaraldeído e paraformaldeído levou a uma melhor preservação das células. Para outras espécies de aranhas, a osmolalidade da hemolinfa deve ser medida e considerada, mas as fórmulas acima citadas podem ser testadas, com chance de sucesso.

Tropical House Gecko (Hemidactylus mabouia) predation on brown spiders (Loxosceles intermedia)

Brown spiders (Loxosceles spp.) are venomous arachnids, successfully adapted to urban habitats in Brazil. Loxoscelism became a serious public health problem in Paraná State, especially at the capital Curitiba, where the most abundant species is Loxosceles intermedia. Hemidactylus mabouia (Gekkonidae) lizards are synanthropic predators of arthropods. In this paper, we describe the predatory behavior of the Tropical House Gecko H. mabouia on L. intermedia under laboratory conditions. Twelve geckos were observed, and all of them fed on brown spiders (n=123 observations). The attack consisted of a fast run followed by one bite on the spiders abdomen or legs. The geckos did not attack L. intermedia anterior body parts, probably due to the fangs present in this region. Two Hemidactylus individuals were killed by L. intermedia bites: during a predatory encounter, and by an induced bite on a restrained lizard. The observations summarized in this paper show that H. mabouia could be used in the biological control of Loxosceles populations in human dwellings. However, additional field studies are necessary to quantify the impact of H. mabouia predation on urban populations of L. intermedia and other species of the same genus.

Asymmetry and experience in the predatory probing behavior of spitting spiders Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae)

Assimetria e experiência no comportamento de tocar a presa de aranhas cuspideiras Scytodes globula Nicolet, 1849 (Araneae, Scytodidae). Pouco se conhece a respeito das assimetrias comportamentais em aranhas. Procuramos aqui verificar, em oito aranhas da espécie Scytodes globula, vieses laterais e efeitos de experiência nos movimentos de tocar a presa com as pernas I e II, durante quatro encontros predatórios sucessivos com aranhas-marrons Loxosceles intermedia. No primeiro encontro, as pernas esquerdas de ambos os pares foram usadas mais do que as pernas direitas; no último encontro, apenas as pernas I esquerdas. A frequência dos toques com as pernas I e II diminuiu do primeiro para o último encontro. Os resultados confirmam resultados anteriores sobre a lateralidade de S. globula e mostram a existência de efeitos de experiência no comportamento predatório desta aranha.