Antioxidant activity of essential oils from condiment plants and their effect on lactic cultures and pathogenic bacteria / Atividade antioxidante do óleo essencial de plantas condimentares e efeito sobre culturas lácticas e bactérias patogênicas

Studies about preservative and antioxidant activity of essential oils have been encouraged in recent years, given their importance to food industry. The aim of the current study was to evaluate the antioxidant properties and antimicrobial activity of essential oils deriving from Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratus and Lippia alba against lactic and pathogenic bacteria responsible for food-borne diseases. Essential oil antibacterial activity was assessed through disc diffusion and macrodilution tests conducted in a mixed lactic culture of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus (YF-L903) and of Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017) strains. Based on the chromatographic analysis results, the essential oils shown to be composed of eugenol (79.41%) which was the prevalent compound in S. aromaticum, geranial (31.89%), neral (24.52%) and β-myrcene (25.37%) in C. citratus, as well as of geranial (33.80%) and neral (25.63%) in L. alba. The observed antibacterial activity confirmed the dose-dependent effect of these three oils on all the assessed bacteria; there was halo inhibition at concentration 20μL mL-1. The essential oil of S. aromaticum presented better antioxidant activity, with IC50 equal to 5.76μg mL-1 and antioxidant activity index of 6.94, and it was considered strong (AAI>2.0) in comparison to the other evaluated oils. This essential oil also presented excellent antioxidant activity at concentrations lower than the one required to inhibit lactic cultures. Based in this outcome, the essential oil from S. aromaticum can be used as preservative agent in processed food whose formulation presents lactic cultures.(AU)

A atividade conservante e antioxidante de óleos essenciais são importantes ferramentas para uso na indústria de alimentos e pesquisas são estimuladas na atualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades antioxidantes e a atividade antimicrobiana de óleos essenciais de Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratuse Lippia alba (LA) contra bactérias lácticas e patogênicas com importância em doenças transmitidas por alimentos. A atividade antibacteriana dos óleos foi avaliada por testes de disco-difusão e macrodiluição em caldo, utilizando-se cultura láctica mista de Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus e Streptococcus thermophilus (YF-L903), e Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017). Os compostos dos óleos essenciais foram identificados por cromatografia, mostrando eugenol (79,41%) como composto predominante em S. aromaticum, geranial (31,89%), neral (24,52%) e β-mirceno (25,37%) em C. citratus, e o geranial (33,80%) e neral (25,63%) em L. alba. A atividade antibacteriana confirmou o efeito dose-dependente dos três óleos para todas as bactérias avaliadas, apresentando halos de inibição a partir da concentração de 20μL mL-1. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou melhor atividade antioxidante, com IC 50 IC50 (at concentration capable of generating 50% inhibition) igual a 5.76μg mL-1 e índice de atividade antioxidante (AAI) de 6,94, considerado forte (AAI>2,0) em relação aos demais óleos avaliados. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou excelente atividade antioxidante em menor concentração que anecessário para inibir a cultura láctica, indicando que este óleo pode ser usado como conservante em alimentos processados contendo culturas lácticas.(AU)

Óleos essenciais e nanoemulsões como alternativas no controle de Clostridium sporogenes em mortadela / Essential oils and nanoemulsions as alternatives in the control of Clostridium sporogenes in mortadela

Avaliou-se a ação antimicrobiana da combinação dos óleos essenciais de canela, pimenta chinesa, limão Taiti e cardamomo e de suas nanoemulsões no controle de Clostridium sporogenes e sua influência sobre a oxidação lipídica em mortadela. A Concentração Mínima Bactericida (CMB) de cada óleo foi determinada pelo método de macrodiluição. As CMB encontradas foram: 0,10% óleo essencial de pimenta chinesa e canela e 1,00% óleo essencial de cardamomo e limão Taiti. A nanoemulsão elaborada apresentou redução significativa no número de células vegetativas de C. sporogenes na mortadela, além de ser o tratamento mais eficiente no controle da oxidação lipídica. Os resultados obtidos comprovam a ação antimicrobiana dos óleos testados, sugerindo sua possível utilização como conservantes naturais em produtos alimentícios.(AU)

Óleos essenciais e nanoemulsões como alternativas no controle de Clostridium sporogenes em mortadela / Essential oils and nanoemulsions as alternatives in the control of Clostridium sporogenes in mortadela

Avaliou-se a ação antimicrobiana da combinação dos óleos essenciais de canela, pimenta chinesa, limão Taiti e cardamomo e de suas nanoemulsões no controle de Clostridium sporogenes e sua influência sobre a oxidação lipídica em mortadela. A Concentração Mínima Bactericida (CMB) de cada óleo foi determinada pelo método de macrodiluição. As CMB encontradas foram: 0,10% óleo essencial de pimenta chinesa e canela e 1,00% óleo essencial de cardamomo e limão Taiti. A nanoemulsão elaborada apresentou redução significativa no número de células vegetativas de C. sporogenes na mortadela, além de ser o tratamento mais eficiente no controle da oxidação lipídica. Os resultados obtidos comprovam a ação antimicrobiana dos óleos testados, sugerindo sua possível utilização como conservantes naturais em produtos alimentícios.

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL <->1. Para cada teste, foram ensaiados 3 tubos por concentração e o teste foi repetido 4 vezes. O meio utilizado foi caldo Mueller-Hinton com cátions ajustados suplementado com sangue lisado de cavalo a 5%. Para cada tubo teste havia a concentração final de 2,0 x 10 UFC de bactéria de Streptococcus agalactiae. Os mesmos foram incubados a 28°C por 48 horas. Após este período, uma alíquota de 100 μL de cada tubo foi dispersa em superfície em placa de petri com ágar sangue seletivo para S. agalactiae, incubados nas mesmas condições dos tubos. Realizado após 48 horas a contagem de unidades formadoras de colônia por mL (UFC.mL-1. Assim, os resultados para CIM 99,9% para todas as repetições realizadas oscilou de 0,09 a 0,18 μg.mL-1 e o CBM 100% oscilou entre 1,5 a 2 ,5 μg.mL-1. A média encontrada para controle positivo foi de 1,04 x 107 UFC.mL-1 e os tubos pertencentes ao controle negativo não apresentaram nenhuma multiplicação bacteriana. Em comparação a literatura de referência, amoxicilina triidratada apresentou para o isolado de S. agalactiae um valor de CIM e CBM baixo, considerando assim sensível e adequado para o ensaio.(AU)

Antibacterial activity and stability of microencapsulated lemon grass essential oil in feeds for broiler chickens / Atividade antimicrobiana e estabilidade do óleo essencial de capim-limão (Cymbopogon citratus) microencapsulados em ração para frangos de corte

The antibacterial effect of microencapsulated lemon grass (Cymbopogon citratus) essential oil on strains of Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) and Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), and the stability of this oil in feeds for broiler chickens were evaluated. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined by the macrodilution method, using the microencapsulated lemon grass essential oil at concentrations of 160 μL mL−1, 80 μL mL−1, 40 μL mL−1, 20 μL mL−1, and 10 μL mL−1. The oil concentration of 80 μL mL−1 presented the best results against the three bacteria evaluated. Samples of 200 g of feed mixed with 120 μL g−1 of the microencapsulated lemon grass essential oil was stored to evaluate the oil stability. Feed without microencapsulated lemon grass essential oil was prepared as control. The oil remained active for seven days, with significant reduction of S. aureus (3.08 CFU), E. coli (3.01 CFU), and S. enterica (3.10 CFU). The microencapsulated lemon grass essential oil at concentration of 80 μL mL−1 had antibacterial effect against the E. coli, S. enterica and S. aureus, and maintained stability of the feed for seven days, even with presence of organic matter, which is source of nutrients for pathogens.(AU)

No trabalho foi avaliado o efeito antimicrobiano do óleo capim limão (Cymbopogon citratus) microencapsulado frente a cepas de Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), e a estabilidade do óleo em ração de frangos de corte. O teste de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) do óleo essencial de capim-limão microencapsulado foi determinado pelo método de macrodiluição (tubo) utilizando as concentrações de 160μL/mL, 80μL/mL, 40μL/mL, 20μL/mLe 10μL/mL. A concentração do óleo de 80μL/mL apresentou melhores resultados frente às três bactérias. Para a avaliação da estabilidade foram separados e armazenadas porções de 200g de ração misturadas com o óleo essencial de capim limão na dosagem de 120μL/g de ração, foram preparadas porções de ração sem a presença do óleo essencial para teste controle, os resultados mostraram que o óleo permaneceu ativo até sete dias, com redução significativa de 3,08 UFC para S. aureus, 3, 01 para E. coli e 3,10 S. entérica. Conclui-se que, óleo essencial de capimlimão microencapuslado tem atividade antibacteriana na concentração de 80 μL/mL frente à Escherichia coli, S. entérica e S. aureus e promove a estabilidade da ração no período de sete dias mesmo na presença da matéria orgânica que é fonte de nutrientes para patógenos.(AU)

Antibacterial activity and stability of microencapsulated lemon grass essential oil in feeds for broiler chickens / Atividade antimicrobiana e estabilidade do óleo essencial de capim-limão (Cymbopogon citratus) microencapsulados em ração para frangos de corte

The antibacterial effect of microencapsulated lemon grass (Cymbopogon citratus) essential oil on strains of Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) and Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), and the stability of this oil in feeds for broiler chickens were evaluated. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined by the macrodilution method, using the microencapsulated lemon grass essential oil at concentrations of 160 μL mL−1, 80 μL mL−1, 40 μL mL−1, 20 μL mL−1, and 10 μL mL−1. The oil concentration of 80 μL mL−1 presented the best results against the three bacteria evaluated. Samples of 200 g of feed mixed with 120 μL g−1 of the microencapsulated lemon grass essential oil was stored to evaluate the oil stability. Feed without microencapsulated lemon grass essential oil was prepared as control. The oil remained active for seven days, with significant reduction of S. aureus (3.08 CFU), E. coli (3.01 CFU), and S. enterica (3.10 CFU). The microencapsulated lemon grass essential oil at concentration of 80 μL mL−1 had antibacterial effect against the E. coli, S. enterica and S. aureus, and maintained stability of the feed for seven days, even with presence of organic matter, which is source of nutrients for pathogens.

No trabalho foi avaliado o efeito antimicrobiano do óleo capim limão (Cymbopogon citratus) microencapsulado frente a cepas de Escherichia coli (ATCC8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Salmonella enterica subsp. enterica (ATCC 6017), e a estabilidade do óleo em ração de frangos de corte. O teste de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) do óleo essencial de capim-limão microencapsulado foi determinado pelo método de macrodiluição (tubo) utilizando as concentrações de 160μL/mL, 80μL/mL, 40μL/mL, 20μL/mLe 10μL/mL. A concentração do óleo de 80μL/mL apresentou melhores resultados frente às três bactérias. Para a avaliação da estabilidade foram separados e armazenadas porções de 200g de ração misturadas com o óleo essencial de capim limão na dosagem de 120μL/g de ração, foram preparadas porções de ração sem a presença do óleo essencial para teste controle, os resultados mostraram que o óleo permaneceu ativo até sete dias, com redução significativa de 3,08 UFC para S. aureus, 3, 01 para E. coli e 3,10 S. entérica. Conclui-se que, óleo essencial de capimlimão microencapuslado tem atividade antibacteriana na concentração de 80 μL/mL frente à Escherichia coli, S. entérica e S. aureus e promove a estabilidade da ração no período de sete dias mesmo na presença da matéria orgânica que é fonte de nutrientes para patógenos.

In vitro antibacterial activity of Origanum vulgare (oregano) essential oil against Escherichia coli and Staphylococcus aureus strains / Teste da ação antibacteriana in vitro de óleo essencial comercial de Origanum vulgare (orégano) diante das cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus

Origanum vulgare (oregano) was recognized as a species with several therapeutic properties. Nowadays, its antimicrobial potential has been receiving a large scientific interest. This study aimed at evaluating the antimicrobial activity (bactericidal and bacteriostatic) of an O. vulgare commercial essential oil against strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus bacteria related to food intoxication and infection. Standard (American Type Culture Collection ATCC) and clinical strains were submitted to the action of an essential oil in different concentrations through microdilution (for determination of minimum inhibitory concentration MIC) and macrodilution (for determination of the minimum bactericidal concentration  MBC) techniques. Variation in the antimicrobial potential of an essential oil among the tested strains was observed. For E. coli ATCC 25922, the MIC was 6.25 L/mL and MBC 12.5 L/ mL, while for the clinical sample, values varied respectively between 12.5 and 25 L/mL. For S. aureus ATCC 25923, values of MIC and MBC were 12.5 L/mL, while for the clinical sample they respectively were  6.25 and 25 L/mL. Thus, the essential oil of O. vulgare showed inhibition power of growth and viability in the tested strains. However, further studies are necessary to determine the optimal concentrations of oregano to act as a natural antimicrobial, considering the factors that influence their composition, and the quantity and quality of active compounds.

Origanum vulgare (orégano) tem sido reconhecido como uma espécie vegetal que possui várias propriedades terapêuticas, de modo que atualmente seu potencial antimicrobiano vem recebendo um grande interesse científico. Este estudo objetivou avaliar a ação antimicrobiana (bactericida e bacteriostática) do óleo essencial comercial de O. vulgare sobre cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, bactérias envolvidas em toxinfecções alimentares. Foram utilizadas cepas padrão (American Type Culture Collection  ATCC) e clínicas e estas foram submetidas à ação do óleo essencial em diferentes concentrações, por meio das técnicas de microdiluição (para determinação da concentração inibitória mínima CIM) e de macrodiluição (para determinação da concentração bactericida mínima CBM). Foi possível observar que houve variação do potencial antimicrobiano do óleo essencial entre as cepas utilizadas. Para E. coli ATCC 25922, a CIM foi de 6,25 L/ mL e a CBM de 12,5 L/mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 12,5 e 25 L/mL, respectivamente. Já para S. aureus ATCC 25923, a CIM e a CBM foram de 12,5 L/ mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 6,25 e 25 L/mL, respectivamente. Portanto, esse óleo essencial de O. vulgare mostrou poder de inibição do crescimento e viabilidade das cepas ensaiadas. No entanto, novos estudos são necessários para que sejam determinadas as concentrações ideais do orégano como antimicrobiano natural, levando em consideração os fatores que influenciam sua composição e a quantidade e qualidade dos compostos ativos.

Teste da ação antibacteriana in vitro de óleo essencial comercial de Origanum vulgare (orégano) diante das cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus / In vitro antibacterial activity of Origanum vulgare (oregano) essential oil against Escherichia coli and Staphylococcus aureus strains

Origanum vulgare (orégano) tem sido reconhecido como uma espécie vegetal que possui várias propriedades terapêuticas, de modo que atualmente seu potencial antimicrobiano vem recebendo um grande interesse científico. Este estudo objetivou avaliar a ação antimicrobiana (bactericida e bacteriostática) do óleo essencial comercial de O. vulgare sobre cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus , bactérias envolvidas em toxinfecções alimentares. Foram utilizadas cepas padrão (American Type Culture Collection - ATCC) e clínicas e estas foram submetidas à ação do óleo essencial em diferentes concentrações, por meio das técnicas de microdiluição (para determinação da concentração inibitória mínima - CIM) e de macrodiluição (para determinação da concentração bactericida mínima - CBM). Foi possível observar que houve variação do potencial antimicrobiano do óleo essencial entre as cepas utilizadas. Para E. coli ATCC 25922, a CIM foi de 6,25 µL/ mL e a CBM de 12,5 µL/mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 12,5 e 25 µL/mL, respectivamente. Já para S. aureus ATCC 25923, a CIM e a CBM foram de 12,5 µL/ mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 6,25 e 25 µL/mL, respectivamente. Portanto, esse óleo essencial de O. vulgare mostrou poder de inibição do crescimento e viabilidade das cepas ensaiadas. No entanto, novos estudos são necessários para que sejam determinadas as concentrações ideais do orégano como antimicrobiano natural, levando em consideração os fatores que influenciam sua composição e a quantidade e qualidade dos compostos ativos.(AU)

Origanum vulgare (oregano) was recognized as a species with several therapeutic properties. Nowadays, its antimicrobial potential has been receiving a large scientific interest. This study aimed at evaluating the antimicrobial activity (bactericidal and bacteriostatic) of an O. vulgare commercial essential oil against strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus bacteria related to food intoxication and infection. Standard (American Type Culture Collection - ATCC) and clinical strains were submitted to the action of an essential oil in different concentrations through microdilution (for determination of minimum inhibitory concentration - MIC) and macrodilution (for determination of the minimum bactericidal concentration - MBC) techniques. Variation in the antimicrobial potential of an essential oil among the tested strains was observed. For E. coli ATCC 25922, the MIC was 6.25 µL/mL and MBC 12.5 µL/ mL, while for the clinical sample, values varied respectively between 12.5 and 25 µL/mL. For S. aureus ATCC 25923, values of MIC and MBC were 12.5 µL/mL, while for the clinical sample they respectively ​​were 6.25 and 25 µL/mL. Thus, the essential oil of O. vulgare showed inhibition power of growth and viability in the tested strains. However, further studies are necessary to determine the optimal concentrations of oregano to act as a natural antimicrobial, considering the factors that influence their composition, and the quantity and quality of active compounds.(AU)

In vitro antibacterial activity of Origanum vulgare (oregano) essential oil against Escherichia coli and Staphylococcus aureus strains / Teste da ação antibacteriana in vitro de óleo essencial comercial de Origanum vulgare (orégano) diante das cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus

Origanum vulgare (oregano) was recognized as a species with several therapeutic properties. Nowadays, its antimicrobial potential has been receiving a large scientific interest. This study aimed at evaluating the antimicrobial activity (bactericidal and bacteriostatic) of an O. vulgare commercial essential oil against strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus bacteria related to food intoxication and infection. Standard (American Type Culture Collection ATCC) and clinical strains were submitted to the action of an essential oil in different concentrations through microdilution (for determination of minimum inhibitory concentration MIC) and macrodilution (for determination of the minimum bactericidal concentration  MBC) techniques. Variation in the antimicrobial potential of an essential oil among the tested strains was observed. For E. coli ATCC 25922, the MIC was 6.25 L/mL and MBC 12.5 L/ mL, while for the clinical sample, values varied respectively between 12.5 and 25 L/mL. For S. aureus ATCC 25923, values of MIC and MBC were 12.5 L/mL, while for the clinical sample they respectively were  6.25 and 25 L/mL. Thus, the essential oil of O. vulgare showed inhibition power of growth and viability in the tested strains. However, further studies are necessary to determine the optimal concentrations of oregano to act as a natural antimicrobial, considering the factors that influence their composition, and the quantity and quality of active compounds.(AU)

Origanum vulgare (orégano) tem sido reconhecido como uma espécie vegetal que possui várias propriedades terapêuticas, de modo que atualmente seu potencial antimicrobiano vem recebendo um grande interesse científico. Este estudo objetivou avaliar a ação antimicrobiana (bactericida e bacteriostática) do óleo essencial comercial de O. vulgare sobre cepas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, bactérias envolvidas em toxinfecções alimentares. Foram utilizadas cepas padrão (American Type Culture Collection  ATCC) e clínicas e estas foram submetidas à ação do óleo essencial em diferentes concentrações, por meio das técnicas de microdiluição (para determinação da concentração inibitória mínima CIM) e de macrodiluição (para determinação da concentração bactericida mínima CBM). Foi possível observar que houve variação do potencial antimicrobiano do óleo essencial entre as cepas utilizadas. Para E. coli ATCC 25922, a CIM foi de 6,25 L/ mL e a CBM de 12,5 L/mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 12,5 e 25 L/mL, respectivamente. Já para S. aureus ATCC 25923, a CIM e a CBM foram de 12,5 L/ mL, enquanto para a amostra clínica os valores foram 6,25 e 25 L/mL, respectivamente. Portanto, esse óleo essencial de O. vulgare mostrou poder de inibição do crescimento e viabilidade das cepas ensaiadas. No entanto, novos estudos são necessários para que sejam determinadas as concentrações ideais do orégano como antimicrobiano natural, levando em consideração os fatores que influenciam sua composição e a quantidade e qualidade dos compostos ativos.(AU)

Hipoclorito de Sódio (NaClO) para inativação de Salmonella spp. no contexto do processamento de peixes: concentração x tempo de exposição

A aquicultura é um dos setores de produção de alimentos que mais cresce nos últimos anos. Todos os indicativos de qualidade, potencial de produtividade e expectativa de demanda apontam o pescado como proteína animal do futuro. A Salmonella spp. tem sido apontada como a maior causadora de doenças bacterianas de origem alimentar, no homem, o qual se infecta mediante a ingestão de alimentos contaminados. O peixe não é um reservatório natural de Salmonella spp. mesmo assim este patógeno tem sido identificado e considerado um desafio para garantir a inocuidade do pescado durante seu processamento. Os produtos clorados são sanitizantes amplamente usados para eliminar microrganismos patogênicos na indústria alimentícia. Além disso, no Brasil, o cloro é atualmente o único desinfetante permitido para processo de lavagem de peixes. Nesse contexto, o presente estudo objetivou determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) de hipoclorito de sódio (NaClO), e avaliar a sobrevivência de Salmonella Typhimurium e Salmonella Ndolo em água clorada com presença e ausência de matéria orgânica de peixe para fins do cálculo do D value. A CIM foi realizada pelo método de macrodiluição em tubos, e os dois sorovares de Salmonella foram desafiados com água clorada a 5 ppm e 50 ppm, e a viabilidade bacteriana foi avaliada em até cinco diferentes tempos (5, 30, 60, 90 e 120 min). Os resultados revelaram uma CIM do NaClO em Salmonella Typhimurium e S. Ndolo de 0,76 ± 0,24 ppm e 0,28±0,03 ppm respectivamente. In vitro a 5 ppm de cloro livre, os sorovares apresentaram uma redução populacional de 2,6 e 3,8 Log UFC/mL, e um D value de 5 ppm de 25 minutos para Salmonella Typhimurium e 16 minutos para S. Ndolo. A presença de 10 % de matéria orgânica demonstrou uma relação direta na diminuição do efeito antimicrobiano do NaClO, afetou diretamente os parâmetros químicos (pH, cloro total e cloro livre), aumentou a sobrevivência de S. Typhimurium e multiplicou em 4 vezes o valor D5ppm. Contudo, nas mesmas condições de matéria orgânica, S. Typhimurium é completamente inativada quando submetida a água com NaClO a 50 ppm de cloro livre. Assim, concluímos que sorovares de Salmonella isolados de peixes são sensíveis a baixas concentrações de cloro livre, entretanto os resultados in vitro revelam que água a pH neutro com 5 ppm de cloro livre de NaClO é ineficaz para inativar totalmente 4 Log de Salmonella Typhimurium e S. Ndolo, ao passo que 50 ppm permite inativar rapidamente a mesma população, mesmo em presença de matéria orgânica, indicando que essa concentração de cloro livre tem potencial para controlar Salmonella spp. em peixes.

Aquaculture is one of the fastest growing food production sectors in recent years (FAO, 2018). All indicators of quality, productivity potential and demand expectations point to fish as the animal protein of the future. Salmonella ssp. has been identified as the main cause of food-borne bacterial diseases in man, which is infected by eating contaminated food.Fish is not a natural reservoir of Salmonella spp. even so, this pathogen has been identified and considered a challenge to guarantee the safety of the fish during its processing. Chlorinated products are sanitizers widely used to eliminate pathogenic microorganisms in the food industry. In addition, in Brazil, chlorine is currently the only disinfectant allowed for the fish washing process. In this context, the present study aimed to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of sodium hypochlorite (NaClO), and to evaluate the survival of Salmonella Typhimurium and Salmonella Ndolo in chlorinated water with and without presence of the fish organic material to calculate D. value. MIC was performed by the macrodilution method in tubes, and two serovars were challenged with chlorinated water at 5 ppm and 50 ppm, and bacteria survavial was evaluated in up to five different times (5, 30, 60, 90 and 120 minutes). The Results revealed a MIC of free chlorine NaClO for Salmonella Typhimurium and S. Ndolo of 0.76 ± 0.24 ppm and 0.28 ± 0.03 ppm, respectively. In vitro, a free chlorine of 5 ppm, shows a reduction of 2.6 and 3.8 logs CFU / mL of Salmonella Typhimurium and S. Ndolo, respectively, as well a D5ppm of 25 and 16 minutes to each one. The presence of 10% organic matter demonstrated a direct relationship with decrease ot the antimicrobial effect of NaClO, affecteded by chemicals factors (pH, total chlorine and free chlorine), increasing the survival of S. Typhimurium and multiplied by 4 times the D5ppm value. However, under organic matter conditions, S. Typhimurium is completely inactivated when submitted to water with 50 ppm of free chlorine NaClO, even with fish organic matter. Thus, we concluded that Salmonella spp. from fish is sensible at low free chlorine concentrations, but in vitro results reveal that water in neutral pH with 5 ppm of free chlorine NaClO is ineffective to inactivate 4 Logs of Salmonella Ndolo and S. Thyphimurium, while 50 ppm allows to inactivate quickly the same population, so this concentration of free chlorine has potential to control Salmonella spp. in fish processing.

Survival of foodborne pathogens adhered to the stainless steel after applying the Cymbopogon flexuosus essential oil / Sobrevivência de patógenos de origem alimentar aderidos em aço inoxidável após aplicação de óleo essencial de Cymbopogon flexuosus

The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of different concentrations of essential oil (EO) of Cymbopogon flexuosos on the standard strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella Choleraesuis adhered to the stainless steel surface AISI 304 /4. Initially, the minimum inhibitory concentrations (MIC) and the minimum bactericidal concentrations (MBC) were determined by means of EO macrodilution broth assay. Subsequently, the adhesion and the biofilm formation on stainless steel surface were evaluated for 15 h at 37 C under agitation, and also the OE sanitizing action against adherent cells on the coupons after 20 and 40 min of contact. The MIC value found for all species was 7.5 L.mL-1, which is the concentration used for preparing the sanitizing solution. A complete removal of adhered cells of E. coli and S. Choleraesuis occurred after being exposed during both periods of time. The adhered cells of S. aureus were not removed; however, a reduction in the number of adhered cells was detected when compared to that quantity showed before being subjected to sanitizing treatments. The EO of C. flexuosus might be an alternative for microbial control in surfaces during food processing.(AU)

Foi avaliada a atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do óleo essencial (OE) de Cymbopogon flexuosus sobre as estirpes padrão de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Salmonella Choleraesuis aderidas em superfície de aço inoxidável AISI 304 /4. Inicialmente, as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e as concentrações bactericidas mínimas (CBM) do OE foram determinadas pela técnica de macrodiluição em caldo. Posteriormente, a adesão e a formação de biofilme em superfícies de aço inoxidável foram avaliadas por 15 h a 37 C sob agitação, e a ação sanitizante do OE contra as células aderidas nos cupons após 20 e 40 min de contato. O valor da CIM encontrada para todas as espécies foi de 7,5 L.mL-1, e esta concentração foi utilizada para o preparo da solução sanitizante. Após ambos os períodos de sanitização constatou-se a remoção total das células aderidas para as espécies de E. coli e S. Choleraesuis. Não foi possível eliminar as células aderidas de S. aureus, contudo, houve uma redução quando comparada ao número de células aderidas antes de serem submetidas aos tratamentos de sanitização. O OE de C. flexuosus pode ser uma alternativa no controle microbiano em superfícies durante o processamento de alimentos.(AU)

Atividade antibacteriana do extrato hidroalcoólico de Schinus terebinthifolius Raddi frente a Staphylococcus coagulase positiva oxacilina resistentes

Diversas plantas têm sido utilizadas para o tratamento de enfermidades de importância em medicina veterinária e vêm despertando interesse da comunidade científica quanto a sua ação antimicrobiana como a espécie, Schinus terebenthifolius Raddi. A aroeira pertence à família Anacardiaceae, é uma espécie nativa da América Central e do Sul. Possui ação antimicrobiana, antiinflamatória e antiulcerogênica, sendo utilizada como antisséptico e no tratamento de estomatites. E a medicina veterinária vem se apropriando do conhecimento das práticas populares utilizadas para o tratamento ou prevenção das doenças que acometem os animais. Com isso também cresce a necessidade de estudos referentes a eficiência, qualidade e segurança de fitoterápicos. Devido à importância do conhecimento do potencial da atividade antimicrobiana desta espécie, objetivou-se: (i) avaliar a ação antimicrobiana de extratos de Aroeira preparado em diferentes tempos, (ii) determinar os extratos mais eficazes no controle da atividade antimicrobiana frente a Staphylococcus coagulase positiva resistentes a oxacilina isoladas de leite bovino; (iii) analisar o sinergismo in vitro da planta com antimicrobiano comercial; (iv) avaliar a atividade desinfetante do extrato (v) caracterizar os compostos fenólicos e antocianinas. A atividade antibacteriana do extrato hidroalcoólico da folha de Aroeira, foi testada pela técnica de microdiluição serial em placas contra trinta e três amostras de Staphylococcus coagulase positiva resistentes relacionadas a mastite bovina. A atividade antimicrobiana dos extratos hidroalcoólicos foi analisada pelo método de macrodiluição frente a isolados de Staphylococcus para interação extrato antibiótico. Foram analisadas 988 amostras de leite de vacas com mastite, sendo 342 (34,61%) das amostras Staphylococcus coagulase positivo, e deste 33 (3,33%) apresentaram-se resistentes a oxacilina. Comparando os extratos nas condições do experimento pode-se concluir que houve pouca influência da variável tempo na atividade antibacteriana dos extratos. A interação entre extratos vegetais e antimicrobianos sintéticos foi considerada positiva devido ao índice de efeitos sinérgicos. Na avaliação da atividade antiséptico/desinfetante da planta frente a cepas de Staphylococcus spp. oxacilina resistentes, apresentou resultados promissores, promovendo ação de inativação ou redução na densidade populacional dos inóculos bacterianos.

Several plants have been used for the treatment of diseases of importance in veterinary medicine and have aroused interest of the scientific community regarding its antimicrobial action as the species, Schinus terebenthifolius Raddi. Aroeira belongs to the family Anacardiaceae, is a species native to Central and South America. It has antimicrobial, anti-inflammatory and antiulcerogenic action, being used as an antiseptic and in the treatment of stomatitis. And veterinary medicine has been appropriating knowledge of the popular practices used for the treatment or prevention of diseases that affect the animals. This also increases the need for studies regarding the efficiency, quality and safety of herbal medicines. Due to the importance of the knowledge of the potential of the antimicrobial activity of this species, the objective was: (i) to evaluate the antimicrobial action of Aroeira extracts prepared at different times, (ii) to determine the most effective extracts in the control of antimicrobial activity against Staphylococcus coagulase positive oxacillin resistant isolates from bovine milk; (iii) to analyze the in vitro synergism of the plant with commercial antimicrobial; (iv) to evaluate the disinfectant activity of the extract (v) to characterize the phenolic compounds and anthocyanins. The antibacterial activity of the hydroalcoholic extract of the Aroeira leaf was tested by the serial microdilution technique on plaques against thirty three strains of Staphylococcus coagulase positive resistant related to bovine mastitis. The antimicrobial activity of hydroalcoholic extracts was analyzed by the macrodilution method against isolates of Staphylococcus for extract - antibiotic interaction. 988 milk samples from cows with mastitis were analyzed, 342 (34.61%) of the Staphylococcus coagulase positive samples were present, and 33 (3.33%) were resistant to oxacillin. Comparing the extracts under the conditions of the experiment it can be concluded that there was little influence of the time variable on the antibacterial activity of the extracts. The interaction between plant extracts and synthetic antimicrobials was considered positive due to the synergistic effect index. In the evaluation of the antiseptic / disinfectant activity of the plant against strains of Staphylococcus spp. oxacillin, presented promising results, promoting action of inactivation or reduction in population density of bacterial inocula.

Essential oil of Rosmarinus officinalis L. as natural sanitizer for controlling the sessile bacteria and as antimicrobial on the food-cutting surfaces / Óleo essencial de Rosmarinus officinalis L. como sanitizante natural para controle de bactérias sésseis em superfície utilizada para corte de alimentos

The objective of this study was to determine the minimum inhibitory concentrations (MIC) and the minimum bactericidal concentrations (MBC) by using broth macro-dilution method in essential oil (EO) of Rosmarinus officinalis L. on the standard strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella Choleraesuis and Pseudomonas aeruginosa. The antibacterial activity of EO solutions on these bacteria adhered to the polypropylene surface used for cutting food was also evaluated, after 12 h at 37º C under shaking on. The sanitizers EO solutions were formulated based on MBC findings, separately for each bacterial strain. The sanitizing action of the solutions on the bacterial cells-adhered surface was evaluated after being contacted for 20 and 40 min. For E. coli, S. Choleraesuis and P. aeruginosa, the contact for 20 min was sufficient for inducing complete elimination of adhered cells, and S. aureus populations were significantly reduced at both evaluated periods of time. The EO of R. officinalis may represent as natural alternative form to carry out the pathogenic and contaminants bacteria control in food industry.(AU)

Objetivou-se neste estudo determinar as concentrações mínimas inibitórias (CMI) e as concentrações bactericidas mínimas (CBM) pela técnica de macrodiluição em caldo do óleo essencial (OE) de Rosmarinus officinalis L. sobre as cepas padrões de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella Choleraesuis e Pseudomonas aeruginosa. Avaliou-se também a ação antibacteriana de soluções do OE sobre estes micro-organismos aderidos, por 12 h a 37º C sob agitação, em superfície de polipropileno utilizada para corte de alimentos. As soluções sanitizantes de OE foram formuladas com base nos valores encontrados nas CBM, para cada estirpe bacteriana separadamente. A ação sanitizante da solução contra as células aderidas à superfície foi avaliada após 20 e 40 minutos de contato. Para E. coli, S. Choleraesuis e P. aeruginosa, o tempo de 20 minutos de contato foi suficiente para a remoção total das células aderidas, e para S. aureus houve redução significativa para ambos os períodos avaliados. O OE de alecrim pode ser considerado como alternativa natural para realizar o controle de bactérias patogênicas e contaminantes na indústria de alimentos.(AU)

AVALIAÇÃO FENOTIPICA DOS PERFIS DE SUSCEPTIBILIDADE A ANTIMICROBIANOS DE ESTIRPES DE LEPTOSPIRA SP. DE BOVINOS DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

A leptospirose é uma doença zoonótica mundial determinada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira. Em bovinos, a doença é caracterizada principalmente por problemas reprodutivos, tais como infertilidade, aumento no número de serviços por concepção, intervalo entre partos prolongados, abortamento, ocorrência de natimortos e crias fracas, levando a importantes prejuízos econômicos. O controle da leptospirose bovina envolve várias medidas, incluindo identificação de portadores e tratamento antimicrobiano. Apesar da importância da antibioticoterapia, poucos estudos sobre a susceptibilidade antimicrobiana de estirpes de origem bovina foram realizados. O objetivo deste estudo foi determinar a susceptibilidade fenotípica de estirpes de Leptospira obtidas de bovinos no Rio de Janeiro, Brasil, contra os principais antibióticos utilizados na prática veterinária bovina. Foram estudadas 23 estirpes de Leptospira sp. e seus perfis de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) foram determinados in vitro pela técnica de macrodiluição em caldo. Não foram observadas diferenças significativas na susceptibilidade entre as espécies de Leptospira, exceto para a CIM de tetraciclina para L. santarosai (p <0.05). Comparando as estirpes do sorogrupo Sejroe (L. santarosai e L. interrogans), principais agentes de leptospirose bovina, observaram-se importantes diferenças na CIM, principalmente para ceftiofur, doxiciclina e em CBM para estreptomicina (p <0.05). Importante salientar que duas estirpes apresentaram valores de CBM acima da concentração plasmática máxima descrita para a estreptomicina e foram classificadas como de susceptibilidade reduzida. Assim, a eficácia da terapia antimicrobiana na leptospirose bovina pode ser comprometida devido à ocorrência de infecção por estirpes de Leptospira apresentando susceptibilidade reduzida.

Leptospirosis is a zoonotic disease worldwide determined by pathogenic spirochetes of the genus Leptospira. In cattle, the disease is mainly characterized by reproductive problems, such as infertility, increase in the number of services per conception, prolonged birth intervals, abortion and occurrence of stillbirths, leading to important economic losses. Control of bovine leptospirosis involves several measures, including identification of carriers and antibiotic treatment. Despite the importance of antibiotic therapy, few studies on antimicrobial susceptibility of strains of bovine origin were performed. The objective of this study was to determine the phenotypic susceptibility of Leptospira strains obtained from cattle in Rio de Janeiro, Brazil, against the main antibiotics used in bovine veterinary practice. Twenty-three strains of Leptospira sp. was studied and their Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) profiles were determined in vitro by broth macrodilution technique. There were not significant differences on the susceptibility among species of Leptospira, except for tetracycline MIC for L. santarosai (p <0.05). In comparison of strains from serogroup Sejroe (L. santarosai and L. interrogans), the main agent of bovine leptospirosis, significant results were observed in MIC of ceftiofur and doxycycline and CBM for streptomycin (p <0.05). Noteworthy that the most important results in comparison to plasma concentrations of each drug, was noticed to streptomycin, against whom two strains had MBC values above the maximum plasma concentration reported, and were classified as having reduced susceptibility. Thus, the efficacy of antimicrobial therapy in bovine leptospirosis can be compromised due to the occurrence of infection by Leptospira strains presenting reduced susceptibility.

DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E ATIVIDADE ANTIFÚNGICA FRENTE À Glomerella cingulata DE NANOEMULSÕES CONTENDO MANCOZEBE E EUGENOL

A viticultura no Brasil apresenta uma grande importância econômica e uma extensão de aproximadamente 80.000 hectares, gerando emprego e renda para várias famílias, entretanto é bastante propensa a processos infecciosos, o que diminui drasticamente sua produtividade. Dentre estes agentes está a Glomerella cingulata, cujo controle é realizado por fungicidas, como o mancozebe. Entretanto o uso deste produto comercial está relacionado com contaminação do ambiente, além de conhecido efeito tóxico para os seres humanos. Neste contexto o uso de substância de origem natural, como o eugenol, poderia ser uma alternativa promissora. Entretanto, o eugenol, que possui ação antimicrobiana, apresenta alta volatilização e baixa solubilidade em água, prejudicando assim sua administração e eficácia. Uma possibilidade para minimizar a toxicidade do fungicida, e a instabilidade do eugenol, é a nanoencapsulação. Sendo assim, a proposta deste trabalho foi verificar a viabilidade de co-encapsulação do mancozebe e do eugenol em nanoemulsões e avaliar a potencial atividade antifúngica de nanoemulsões contendo estes compostos isolados e associados frente à Glomerella cingulata. Foram preparadas nanoemulsões contendo eugenol (NE-E), mancozebe e eugenol (NE- ME), nanoemulsões com mancozebe (NE-M) e nanoemulsões brancas, sem os ativos (NE-B) através do método emulsificação espontânea. As formulações, foram caracterizadas de acordo com diâmetro médio, índice de polidispersão (PDI), potencial zeta, pH, teor e morfologia. Também foi avaliada a estabilidade das formulações durante 30 dias em diferentes condições de armazenamento e a atividade antifúngica frente à G. cingulata. As nanoemulsões apresentaram diâmetro médio de aproximadamente 200 nm, PDI de aproximadamente 0,170, potencial zeta de -11,0 mV, pH próximo à 5,0 e teor de eugenol, para NE-E e NE-ME, em torno de 40%. A microscopia eletrônica de transmissão demonstrou formato esférico. O ensaio da atividade antifúngica foi realizado pela técnica de macrodiluição, sendo analisados os ativos: eugenol, mancozebe, mancozebe e eugenol livres e os mesmos nanoencapsulados. A NE-M, obteve uma atividade inibitória mínima de 0,009 µg/mL, resultado satisfatório, seguida da NE-ME 0,02 µg/mL de mancozebe e 2 µg/mL de eugenol, comparada a suas formas livres. A melhor condição para armazenamento das formulações foi sob refrigeração e a atividade antifúngica foi potencializada após nanoencapsulação para todas as formulações. Este estudo apresenta uma alternativa inovadora para o tratamento da G. cingulata através do emprego da nanotecnologia.

Viticulture in Brazil has a great economic importance and an extension of approximately 80,000 hectares, generating employment and income for several families, however it is quite prone to infectious processes, which drastically reduces its productivity. Among these agents is Glomerella cingulata, which is controlled by fungicides, such as mancozeb. However, the use of this commercial product is related to contamination of the environment, in addition to a known toxic effect for humans. In this context the use of a naturally occurring substance, such as eugenol, could be a promising alternative. However, eugenol, which has an antimicrobial action, presents high volatilization and low solubility in water, thus impairing its administration and efficacy. One possibility to minimize toxicity of the fungicide, and the instability of eugenol, is nanoencapsulation. Therefore, the aim of this work was to verify the feasibility of co-encapsulation of mancozeb and eugenol in nanoemulsions and to evaluate the potential antifungal activity of nanoemulsions containing these compounds isolated and associated with Glomerella cingulata. Nanoemulsions containing eugenol (NE-E), mancozeb and eugenol (NE-ME), nanoemulsions with mancozeb (NE-M) and white nanoemulsions, without the active ones (NE-B) were prepared by the spontaneous emulsification method. The formulations were characterized according to mean diameter, polydispersity index (PDI), zeta potential, pH, content and morphology. The stability of the formulations for 30 days under different storage conditions and the antifungal activity against G. cingulata were also evaluated. The nanoemulsions had a mean diameter of approximately 200 nm, PDI of approximately 0.170, zeta potential of -11.0 mV, pH close to 5.0 and eugenol content, for NE-E and NE-ME, around 40%. Transmission electron microscopy showed spherical shape. The antifungal activity assay was performed by the macrodilution technique, and the active compounds were analyzed: free eugenol, mancozeb, mancozeb and eugenol and the same nanoencapsulated ones. The NE-M obtained a minimum inhibitory activity of 0.009 g / mL, a satisfactory result, followed by NE-ME 0.02 g / mL mancozeb + 2 µg/mL eugenol compared to its free forms. The best condition for storage of the formulations was under refrigeration and antifungal activity was potentiated after nanoencapsulation for all formulations. This study presents an innovative alternative for the treatment of G. cingulata through the use of nanotechnology.

Eficácia terapêutica, segurança clínica e ecotoxicológica da amoxicilina por via intramuscular para o tratamento de estreptococose em tilápias do Nilo

O presente estudo avaliou a eficácia terapêutica, segurança clínica e ecotoxicológica da amoxicilina triidratada, via intramuscular, para o tratamento de Streptococcusagalactiae em Oreochromisniloticus. Para tal, realizou-se vários ensaioselencados a seguir. Determinou-sea CIMda amoxicilina para oS. agalactiae pelo método de macrodiluição. Quantificou-se por cromatografia líquida com detecção por espectrometria de massas sequencial a concentração plasmática da amoxicilina administrada via intramuscular em O. niloticusnas doses de 30 mg.kg-1e 60 mg.kg-1. Avaliou-se o perfil de infecção sistêmica do S. agalatiaeemO. niloticus submetidos a infecção experimental por administração de inóculo na bexiga natatória nas concentrações de 104 e105 UFC. Estes animais foram avaliados quanto.acontagem de UFC. mL-1 em ágar sangue seletivo para S. agalactiae para os órgãos cérebro, coração e soro. Avaliou-se a eficácia terapêutica da amoxicilina administrada via intramuscular para o S.agalactiae pela avaliação de 3 grupos: tratados com 30 mg.kg-1, tratadas com 60 mg.kg-1e não tratadas. Para este ensaio, submeteu-se os peixes a infecção sistêmica com inóculo na concentração de 105 e o avalioupela contagem de UFC. mL-1 para os órgãos cérebro, coração e soro. Realizou-se a avaliação do hemograma e bioquímica sérica de O. niloticussubmetidas a infecção experimental em 2 grupos: tratadas com 30mg.kg-1 e não tratadas.Avaliou-se também a segurança clínica da amoxicilina pela análise do hemograma, bioquímica sérica, índice somático do coração, fígado, rim e baço e histopatológico do fígado e rimem3 grupos: dose terapêutica 30 mg.kg-1, 150 mg.kg-1 e 300 mg.kg-1. Determinou-se de fator toxicidade ambiental para O. niloticus, Lemna minor e Daphnia magna. Comos resultados, constatou-se que a cepa de S. agalactiae empregada neste estudo é sensível ao princípio ativo amoxicilina, com concentração oscilando de 0,09 a 0,18 µg mL-1. A curva plasmática da amoxicilina triidratada para as concentrações de 30 e 60 mg. Kg-1permitiram o intervalo entre doses de 48 horas em 48 horas para ambas as concentrações. O modelo experimental de aplicação de inóculo de bacteriano S. agalactiae via bexiga natatória na concentração de 105 UFC.mL-1 induziu com eficácia estreptococose nas tilápias do Nilo apresentando progressão crescente da contagem de UFC.mL-1 para os órgãos avaliados, com maior isolamento no sétimo dia de avaliação. A administração das doses de 30 e 60 mg/kg de amoxicilina triidratada via intramuscular em O. niloticusdesafiados com inóculos vivos de S.agalactiae mostraram-se igualmente eficazes para tratamento da infecção. Os peixes infectados por S. agalactiae e tratados com a dose 30 mg.kg-1 de amoxicilina não diferiram clinicamente entre si em decorrência de ambos os grupos estarem com a doença já instalada, no entanto peixes que não foram tratados apresentaram maior recrutamento de leucócitos e queda no número de trombócitos.A amoxicilina na concentração de 10 vezes a dose terapêutica mostrou-se segura clinicamente, não apresentando alterações em comparação ao padrão fisiológico. As espécies L. minor, D. magna e O. niloticus não demonstraram toxicidade para amoxicilina na concentração de 2,6g L-1 nas condições experimentais aplicadas. A administração de amoxicilina via intramuscular na dose de 30mg.Kg-1 mostrou-se promissora para tratamento de S.agalactie em O.niloticus.

The present study evaluated the therapeutic efficacy, clinical and ecotoxicological safety of amoxicillin trihydrate, administered through intramuscular (I.M.) route, for the treatment of Streptococcus agalactiae in Oreochromis niloticus. To this end, the following tests were performed: MIC (minimal inhibitory concentration) of amoxicillin for S. agalactiae was determined by the macrodilution method. The plasma concentration of amoxicillin administered by I.M. route in O. niloticus at doses of 30 mg.kg -1 and 60 mg.kg -1 was quantified by liquid chromatography with sequential mass spectrometry detection. The profile of systemic infection of S. agalactiae in O. niloticus submitted to experimental infection by the administration of 104 and 105 CFU inoculum in the swimming bladder was evaluated. These animals were evaluated for S. agalactiae infection by the counting of CFU mL-1 in brain, heart and blood. The therapeutic efficacy of amoxicillin by I.M. route to S. agalactiae was evaluated in three groups: treated with 30 mg.kg-1, treated with 60 mg.kg-1 and untreated (Control). For this assay, fish were subjected to systemic infection with inoculum at the concentration of 105 and evaluated by the count CFU. mL-1 in brain, heart, and blood. The hemogram and serum biochemistry of Nile tilapia submitted to experimental infection were evaluated in 2 groups: treated with 30 mg.kg-1 and untreated. The clinical safety of amoxicillin was evaluated by hemogram, serum biochemistry, somatic index of the heart, liver, kidney and spleen and histopathology of liver and kidney in fish from three groups: therapeutic dose 30 mg.kg-1, 150 mg.kg -1 and 300 mg.kg-1. Environmental toxicity factor was determined for O. niloticus, Lemna minor and Daphnia magna. The results showed that the S. agalactiae strain used in this study is sensitive to the active principle amoxicillin, with a concentration ranging from 0.09 to 0.18 g mL-1. The plasma curve of amoxicillin trihydrate at concentrations of 30 and 60 mg. Kg-1 allowed an interval of 48 h for both concentrations. The experimental model of bacterial inoculum application of S. agalactiae via the swimming bladder at the concentration of 105CFU.mL-1 effectively induced streptococci disease in Nile tilapia showing an progressive increase of CFU.mL-1 counts in the evaluated organs, with isolation in the seventh day of evaluation. Administration of 30 and 60 mg. Kg-1 doses of amoxicillin trihydrate by I.M. route in O. niloticus challenged with live S.agalactiae inoculum were equally effective. Fish infected with S. agalactiae and treated with the dose 30 mg.kg-1 amoxicillin did not differ clinically as a result of both groups having the disease already installed, however fish that were not treated showed higher leukocyte recruitment and fall in the number of thrombocytes. Amoxicillin, even at a concentration of 10 times the therapeutic dose, demonstrated to be clinically safety for tilapias, with no alterations in the tests performed in comparison to the physiological standard fish. Amoxicillin in the concentration of 2.6 g.L-1 showed low toxicity for L. minor, D. magna and O. niloticus under the experimental conditions applied. Amoxicillin at the dose of 30mg.Kg-1 administered by I.M. route in O. niloticus presented promising results for the treatment of S. agalactiae

Conservação de lingüiça frescal de frango adicionada de óleos essenciais

A linguiça frescal contêm aditivos químicos utilizados em sua formulação com o objetivo de aumentar a vida de prateleira, inibir a ação de microrganismos e a oxidação lipídica. No entanto, além das propriedades antimicrobianas e antioxidantes, o emprego dos sais de cura, nitrato e nitrito, podem provocar danos à saúde do consumidor. Nesse contexto, os aditivos naturais à base de óleos essenciais (OEs) consistem em uma alternativa para atender à demanda por produtos sem adição de conservantes e aditivos químicos. Esse estudo tem como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante dos OEs de Origanum vulgare L. e Lippia origanoides Kunth. aplicados em linguiça frescal de frango. A avaliação da atividade antimicrobiana in vitro dos OEs frente a estirpes de Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella Choleraesuis ATCC 10708 e Escherichia coli ATCC 25923 foi realizada pela CIM (Concentração Inibitória Mínima) e CBM (Concentração Bactericida Mínima) pela técnica de macrodiluição. A atividade antioxidante foi determinada pelo ensaio com radical DPPH para determinação da CE50 (concentração eficiente 50%) e Índice de Atividade Antioxidante (IAA). A composição química dos OE foi determinada por meio da cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). O OE de orégano apresentou CIM e CBM de 5 g mL-1 para as estirpes de S. coagulase positiva e E. coli e CIM de 20 g mL-1 e CBM de 40 L/mL para Salmonella. O óleo essencial (OE) de alecrim-pimenta apresentou valores de CIM de 10 g mL-1 para as estirpes de S. coagulase positiva e E. coli e de 40 g mL-1 para Salmonella, os valores de CBM foram de 40 L mL-1 para S. coagulase positiva e Salmonella e de 10 L mL-1 para E. coli.. O OE de alfavaca não apresentou inibição dos microrganismos testados, no entanto, apresentou a melhor atividade antioxidante com CE50 de 3,25 g mL-1 e IAA=12,3. Foram identificados como compostos majoritários: o carvacrol para o OE de alecrim-pimenta, 4-terpineol para o OE de orégano e o-cimeno para a alfavaca. A determinação do efeito antimicrobiano dos OE na matriz alimentar foi realizada por meio das análises de coliformes a 45 ºC, Staphylococcus coagulase positiva e Salmonella sp. As análises físico-quimicas de determinação do pH, oxidação lipídica pelo método de reação ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e a análise dos voláteis via HS-CG/EM foram realizadas com o intuito de verificar a permanência dos OEs e a estabilidade do produto final. As linguiças frescais adicionadas de OE de orégano e alecrim-pimenta apresentaram-se aptas para o consumo e com qualidade microbiológica adequada durante o armazenamento. Não foram detectadas alterações nos valores de pH proveniente da adição de OE. Todas as amostras permaneceram estáveis sem o desenvolvimento de oxidação lipídica e foi possível identificar a presença dos principais marcadores químicos ao final do período de armazenamento. Os resultados observados demonstram alto potencial para a aplicação de OEs como agentes antioxidantes e antimicrobianos em alimentos.

The fresh sausage contains chemical additives used in its formulation with the aim of increase the shelf life, inhibit the action of microorganisms and lipid oxidation. However, beyond the antimicrobial and antioxidant properties, the use of curing salts, nitrate and nitrite, may cause harm to the health of the consumer. In this context, natural essential oil additives (EOs) consist of an alternative to attend the demand for products without the addition of preservatives and chemical additives.The objective of this study was to evaluate the antimicrobial and antioxidant activity of EOs of Origanum vulgare L. and Lippia origanoides Kunth. applied in fresh chicken sausage. The evaluation of the in vitro antimicrobial activity of EOs against the strains of S. coagulase positive ATCC 25923, Salmonella Choleraesuis ATCC 10708 and Escherichia coli ATCC 25923 were performed by MIC (Minimum Inhibitory Concentration) and MBC (Minimum Bactericidal Concentration) by the macrodilution method. The antioxidant activity was determined by the DPPH radical assay for determination of EC50 (50% efficient concentration) and Antioxidant Activity Index (AAI). The chemical composition of EO was determined by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS). The EO of oregano showed MIC and MBC of 5 g mL-1 to the strains of S. coagulase positive and E. coli and MIC of the 20 g mL-1 and MBC of the 40 g mL-1 for Salmonella. The EO of alecrim-pimenta showed values of MIC of the 10 g mL-1 for the strains of S. coagulase positive and E. coli and 40 g mL-1 for Salmonella, the values of MBC were 40 g mL-1 for S. coagulase positive and Salmonella and 10 g mL-1 for E. coli. The EO of basil did not showed inhibition of the tested microorganisms, however, it presented the best antioxidant activity with EC50 of 3.25 g mL-1 and AAI = 12.3. Carvacrol was identified as major compound for EO of alecrim-pimenta, 4-terpineol for EO of oregano and o-cymene for alfavaca. The determination of the antimicrobial effect of EO in the food matrix was realized by Coliforms at 45 ºC, S. coagulase positive and Salmonella sp. Physical-chemical analyses of pH, lipid oxidation by the thiobarbituric acid reaction (TBARS) and the analysis of the volatiles via HS-CG/MS were realized with the purpose of verifying the permanence of the oils and the stability on the final product. The fresh sausages added with EO of oregano and alecrim-pimenta were suitable to be consumed with adequate microbiological quality during storage. Changes were not detected in the pH values from the addition of OE. All samples remained stable without the development of lipid oxidation and it was possible to identify the presence of the main chemical markers at the end of the storage period. The results demonstrate high potential for the application of EOs as antioxidant and antimicrobial agents in food.

CARACTERIZAÇÃO POLIFÁSICA DA COMUNIDADE BACTERIANA HETEROTRÓFICA DE AMBIENTE DE CARCINICULTURA FRENTE ÀS TETRACICLINAS

Antimicrobianos da classe das tetraciclinas têm sido extensivamente usados em aquicultura para o controle de doenças e como promotores de crescimento. Dessa forma, foi traçado como objetivo geral avaliar o perfil polifásico da comunidade bacteriana de ambiente de criação de camarão frente aos antimicrobianos das classes das tetraciclinas, com enfoque no gênero Vibrio. Amostras de água e sedimento foram coletadas de quatro (4) fazendas de carcinicultura: duas (2) no estado do Ceará e duas (2) no estado do Rio Grande do Norte, dos pontos: estuário, canal de abastecimento, viveiro e canal de drenagem. Foram pesquisadas bactérias heterotróficas cultiváveis (BHC), com resistência à tetraciclina (BHC+TET) e oxitetraciclina (BHC+OTC), Vibrio total, sacarose positivos e negativos pelo método de Contagem Padrão em Placas (CPP). As cepas isoladas de BHC, BHC+TET, BHC+OTC e Vibrio foram submetidas à identificação fenotípica. O perfil fenotípico de susceptibilidade antimicrobiana das cepas de Vibrio e demais BHC foi comparado entre as técnicas de disco-difusão e macrodiluição, pela determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) para os antimicrobianos tetraciclina e oxitetraciclina. Os genes de resistência tet(M), tet(S), otr(A) e otr(B) foram pesquisados nas cepas fenotipicamente caracterizadas como resistentes. A diversidade de bactérias heterotróficas foi influenciada pelos períodos de estio e chuvoso e também pelos diferentes pontos de coleta dentro das fazendas de carcinicultura. No geral, as contagens de BHC, BHC+TET e BHC+OTC e Vibrio e demais BHC diferiram entre os períodos de coleta, com quantificações superiores no período chuvoso para os pontos de coleta viveiro e canal de drenagem. Foram isoladas 146 cepas de BHC, 57 de BHC+TET, 25 de BHC+OTC, das quais os gêneros mais representativos foram Vibrio e Enterobacter. Foi possível o isolamento de 100 cepas de Vibrio, das quais V. coralliilyticus foi a espécie mais representativa. O perfil antimicrobiano diferiu entre as cepas de Vibrio e demais BHC entre as técnicas de disco-difusão e macrodiluição, sendo a de macrodiluição a mais eficiente na caracterização de resistência dentre os isolados. Todas as cepas de Vibrio e demais BHC, fenotipicamente resistentes, apresentaram o gene tet(M) como determinante de resistência, no entanto os genes tet(S), otr(A) e otr(B) não foram verificados. Com isso, comprovou-se que Vibrio é gênero mais abundante dentre as bactérias heterotróficas com resistência às tetraciclinas, estando a diversidade bacteriana fortemente influenciada pelos períodos do ano.

Antimicrobial agents of tetracycline class has been extensively used in aquaculture for disease control and growth promotion. Thus, the aim of this study was to evaluate the polyphase profile of the bacterial community in shrimp farming environment front antimicrobial classes of tetracyclines, focusing on Vibrio genus. Water and sediment samples were collected four (4) shrimp farms: two (2) in the state of Ceará and two (2) in the state of Rio Grande do Norte, of points: estuary, supply channel, pond and drainage channel. Cultivable heterotrophic bacteria (CHB), with resistance to tetracycline (CHB+TET) and oxytetracycline (CHB+OTC), total Vibrio, positive sucrose Vibrio and sucrose negative Vibrio were surveyed by Standard Plate Count method (SPC). The strains isolated from CHB, CHB+TET, CHB+OTC and Vibrio underwent phenotypic identification. The phenotypic profile of antimicrobial susceptibility of strains of Vibrio and other BHC was compared between the disk diffusion techniques and macrodilution by determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) for tetracycline and oxytetracycline antimicrobials. Resistance genes tet(M), tet(S) otr(A) and otr(B) were investigated in strains characterized as phenotypically resistant. Diversity of heterotrophic bacteria is influenced by wet and rainy seasons and also by the different collection points within the shrimp farms. Overall, the CHB, CHB+TET and CHB+OTC and Vibrio counts differ between the collection seasons, with higher measurements during the rainy season to the points of pond and drainage channel. 146 strains of CHB, 57 of CHB+TET and 45 of CHB+OTC were isolated, of which the most representative genera were Vibrio and Enterobacter. A total of 100 strains of Vibrio were isolated, which V. coralliilyticus was the most representative species. Antimicrobial profile of Vibrio and other CHB differed between disk-diffusion and macrodilution techniques, being the macrodilution the most efficient in the characterization of resistance among isolates. All strains of Vibrio and other CHB, phenotypically resistant, presented the tet(M) gene as a determinant of resistance determinat, but tet(S) otr(A) and otr(B) genes were not observed. Thus, it proves that Vibrio genus is most abundant among herotrotrophic bacteria with resistance to tetracyclines, with the bacterial diversity strongly influenced by seasons.

Atividade in vitro, individual ou em combinação, de voriconazol, itraconazol e terbinafina contra isolados brasileiros de Pythium insidiosum

Pythium insidiosum,  classificado no Reino Stramenopila e Classe Oomycetes, é o agente etiológico da pitiose, uma doença diagnosticada principalmente em eqüinos, caninos e humanos. As atividades in vitro do voriconazol, itraconazol e terbinafina, sozinhos ou em combinação, foram estudadas empregando uma metodologia de macrodiluição baseada na técnica M 38-A (CLSI, 2002) contra 30 isolados clínicos de Pythium insidiosum, com o objetivo de avaliar novas medidas para tratar infecções causadas por este agente utilizando quimioterapia. As combinações (terbinafina e voriconazol; terbinafina e itraconazol) tiveram suas interações avaliadas utilizando a técnica de checkerboard, seguindo o modelo da macrodiluição em caldo. Terbinafina foi ativa quando testada sozinha, mostrando uma concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima 8,0 mg/L para todos os isolados. Voriconazol e itraconazol foram inativos contra os isolados testados, quando usados sozinhos. A combinação de voriconazol com terbinafina foi sinérgica contra 17% das amostras e indiferente em 25 (83%) amostras. O uso concomitante de terbinafina e itraconazol foi sinérgico contra 17% e indiferente contra 83% das amostras. As interpretações de ambas as interações foram equivalentes para 26 isolados (87%): vinte e três foram indiferentes e três mostraram efeito sinérgico. Antagonismo não foi observado. A t