Effect of antioxidant supplementation in diets of roosters during the post-peak phase on reproduction and production characteristics of offspring / Efeito da suplementação de antioxidantes na dieta de reprodutores de frangos de corte na fase pós-pico sobre características reprodutivas e produtivas da progênie

This study aimed to evaluate the effects of antioxidant supplementation in diets of breeding roosters during the post-peak phase on reproduction characteristics and muscle performance of offspring in two similar breeder houses from a local company. Treatments consisted of a control diet and a diet supplemented with antioxidants (8 ppm canthaxanthin + 40 ppm lycopene + 150 ppm vitamin C). During the 66th week of age, eggs were incubated, and offspring were housed. Dietary supplementation of the blend of antioxidant resulted in higher (p0.05) of supplementation of the antioxidant blend on weight gain and breast weight and count and diameter of muscle fibers of offspring at 7 days of age. Feed conversion and weight gain from 14 to 35 days were better (p<0.05) in offspring from supplemented roosters. The supplementation of an antioxidant blend in roosters improved reproductive characteristics assessed and feed conversion and weight gain of offspring.

O objetivo foi avaliar o efeito da suplementação de antioxidantes em dietas para reprodutores machos de frangos de corte na fase pós-pico sobre características reprodutivas e muscular da progênie. O experimento foi conduzido no matrizeiro de uma agroindústria local. Os tratamentos consistiram em uma dieta controle e uma dieta suplementada com blend de antioxidantes (8 ppm de cantaxantina + 40 ppm de licopeno + 150 ppm de vitamina C). Na 66ª semana de idade, os ovos foram incubados e a progênie foi alojada. A suplementação de antioxidantes na dieta resultou em maior (p0,05) dos antioxidantes na dieta dos reprodutores sobre o ganho de peso e o peso de peito e a contagem e diâmetro da fibra muscular da progênie aos 7 dias de idade. A conversão alimentar e ganho de peso na fase de 14 a 35 dias foram melhores (p<0,05) para a progênie dos reprodutores suplementados. A suplementação de antioxidantes na dieta dos reprodutores melhorou as características reprodutivas avaliadas e o ganho de peso e a conversão alimentar da progênie.

Effect of antioxidant supplementation in diets of roosters during the post-peak phase on reproduction and production characteristics of offspring / Efeito da suplementação de antioxidantes na dieta de reprodutores de frangos de corte na fase pós-pico sobre características reprodutivas e produtivas da progênie

This study aimed to evaluate the effects of antioxidant supplementation in diets of breeding roosters during the post-peak phase on reproduction characteristics and muscle performance of offspring in two similar breeder houses from a local company. Treatments consisted of a control diet and a diet supplemented with antioxidants (8 ppm canthaxanthin + 40 ppm lycopene + 150 ppm vitamin C). During the 66th week of age, eggs were incubated, and offspring were housed. Dietary supplementation of the blend of antioxidant resulted in higher (p<0.05) weights of testicles, crests, dewlaps, dewlap thickness, and number of perforations (53.35 x 25.30) in relation to non-supplemented roosters. There was no significant effect (p>0.05) of supplementation of the antioxidant blend on weight gain and breast weight and count and diameter of muscle fibers of offspring at 7 days of age. Feed conversion and weight gain from 14 to 35 days were better (p<0.05) in offspring from supplemented roosters. The supplementation of an antioxidant blend in roosters improved reproductive characteristics assessed and feed conversion and weight gain of offspring.(AU)

O objetivo foi avaliar o efeito da suplementação de antioxidantes em dietas para reprodutores machos de frangos de corte na fase pós-pico sobre características reprodutivas e muscular da progênie. O experimento foi conduzido no matrizeiro de uma agroindústria local. Os tratamentos consistiram em uma dieta controle e uma dieta suplementada com blend de antioxidantes (8 ppm de cantaxantina + 40 ppm de licopeno + 150 ppm de vitamina C). Na 66ª semana de idade, os ovos foram incubados e a progênie foi alojada. A suplementação de antioxidantes na dieta resultou em maior (p<0,05) peso de testículos, cristas, peso e espessura de barbelas e maior número de perfurações (53,35 x 25,30) em relação aos não suplementados. Não houve efeito significativo (p>0,05) dos antioxidantes na dieta dos reprodutores sobre o ganho de peso e o peso de peito e a contagem e diâmetro da fibra muscular da progênie aos 7 dias de idade. A conversão alimentar e ganho de peso na fase de 14 a 35 dias foram melhores (p<0,05) para a progênie dos reprodutores suplementados. A suplementação de antioxidantes na dieta dos reprodutores melhorou as características reprodutivas avaliadas e o ganho de peso e a conversão alimentar da progênie.(AU)

Sperm-binding to the perivitelline membrane of chicken egg yolk as a functional test for sperm evaluation in dogs / Teste de ligação espermática à membrana perivitelínica da gema de ovo de galinha como avaliação funcional do sêmen de cães

During fertilization, spermatozoa interact with the zona pellucida (ZP) through the binding between the acrosome and proteins 2 and 3 (ZP2 and ZP3). The perivitelline membrane of chicken egg yolk is homologous to the mammalian ZP3, which allows the binding of sperm of several species. The aim of this study was to standardize and evaluate the efficiency of sperm-binding to the perivitelline membrane of chicken eggs as a functional method for canine semen evaluation. For this purpose, nine post-thaw sperm samples were used, which were divided into two aliquots: the first was kept in water bath at 37ºC (live sample) and the second was submitted to cold shock to induce cellular damage (dead sample). The two aliquots were mixed on five proportions, corresponding to 0%, 25%, 50%, 75%, and 100% of viable cells, and the binding test was performed by analyzing the number of spermatozoa bonded to the perivitelline membrane by means of computerized assessment of sperm motility (CASA) or conventional microscopy. Additionally, samples were submitted to sperm motility analysis, evaluation of plasmatic and acrosomal membrane integrity, and sperm mitochondrial activity. The sperm-binding test to the perivitelline membrane of chicken egg yolk was considered a feasible sperm analysis test for both fertilizing capacity and overall sperm attributes evaluation, mainly when the analysis is performed by a conventional microscope, which expands its practicality to the majority of canine reproduction laboratories.(AU)

Durante a fecundação, os espermatozoides interagem com a zona pelúcida (ZP) por meio da ligação entre o acrossomo e as proteínas 2 e 3 (ZP2 e ZP3). A membrana perivitelínica da gema de ovo de galinhas é homóloga à ZP3 de mamíferos, possibilitando a ligação espermática de diversas espécies. Este trabalho padronizou e avaliou a eficiência do teste de ligação espermática à membrana perivitelínica da gema de ovo de galinhas como avaliação funcional do sêmen de cães. Para tal, foram utilizadas nove amostras seminais previamente criopreservadas. Cada amostra foi dividida em duas alíquotas: a primeira foi mantida em banho-maria à 37ºC (vivos) e a segunda submetida a choque térmico com o intuito de induzir dano celular (mortos). As duas alíquotas foram misturadas, correspondendo a 0, 25, 50, 75 e 100% de células viáveis. As amostras foram avaliadas quanto ao número de espermatozoides ligados à membrana perivitelínica por meio da análise computadorizada da motilidade (CASA) ou microscopia convencional. Ademais, as amostras foram avaliadas quanto à motilidade espermática, integridade das membranas acrossomal e plasmática e atividade mitocondrial espermática. O teste de ligação espermática à membrana perivitelínica de ovos de galinha foi considerado um teste de análise seminal exequível tanto para avaliar a capacidade fecundante dos espermatozoides como atributos seminais gerais, especialmente quando realizado em microscopia convencional, expandindo sua praticidade para a maioria dos laboratórios de análise de sêmen canino.(AU)

Sperm-binding to the perivitelline membrane of chicken egg yolk as a functional test for sperm evaluation in dogs / Teste de ligação espermática à membrana perivitelínica da gema de ovo de galinha como avaliação funcional do sêmen de cães

During fertilization, spermatozoa interact with the zona pellucida (ZP) through the binding between the acrosome and proteins 2 and 3 (ZP2 and ZP3). The perivitelline membrane of chicken egg yolk is homologous to the mammalian ZP3, which allows the binding of sperm of several species. The aim of this study was to standardize and evaluate the efficiency of sperm-binding to the perivitelline membrane of chicken eggs as a functional method for canine semen evaluation. For this purpose, nine post-thaw sperm samples were used, which were divided into two aliquots: the first was kept in water bath at 37ºC (live sample) and the second was submitted to cold shock to induce cellular damage (dead sample). The two aliquots were mixed on five proportions, corresponding to 0%, 25%, 50%, 75%, and 100% of viable cells, and the binding test was performed by analyzing the number of spermatozoa bonded to the perivitelline membrane by means of computerized assessment of sperm motility (CASA) or conventional microscopy. Additionally, samples were submitted to sperm motility analysis, evaluation of plasmatic and acrosomal membrane integrity, and sperm mitochondrial activity. The sperm-binding test to the perivitelline membrane of chicken egg yolk was considered a feasible sperm analysis test for both fertilizing capacity and overall sperm attributes evaluation, mainly when the analysis is performed by a conventional microscope, which expands its practicality to the majority of canine reproduction laboratories.(AU)

Durante a fecundação, os espermatozoides interagem com a zona pelúcida (ZP) por meio da ligação entre o acrossomo e as proteínas 2 e 3 (ZP2 e ZP3). A membrana perivitelínica da gema de ovo de galinhas é homóloga à ZP3 de mamíferos, possibilitando a ligação espermática de diversas espécies. Este trabalho padronizou e avaliou a eficiência do teste de ligação espermática à membrana perivitelínica da gema de ovo de galinhas como avaliação funcional do sêmen de cães. Para tal, foram utilizadas nove amostras seminais previamente criopreservadas. Cada amostra foi dividida em duas alíquotas: a primeira foi mantida em banho-maria à 37ºC (vivos) e a segunda submetida a choque térmico com o intuito de induzir dano celular (mortos). As duas alíquotas foram misturadas, correspondendo a 0, 25, 50, 75 e 100% de células viáveis. As amostras foram avaliadas quanto ao número de espermatozoides ligados à membrana perivitelínica por meio da análise computadorizada da motilidade (CASA) ou microscopia convencional. Ademais, as amostras foram avaliadas quanto à motilidade espermática, integridade das membranas acrossomal e plasmática e atividade mitocondrial espermática. O teste de ligação espermática à membrana perivitelínica de ovos de galinha foi considerado um teste de análise seminal exequível tanto para avaliar a capacidade fecundante dos espermatozoides como atributos seminais gerais, especialmente quando realizado em microscopia convencional, expandindo sua praticidade para a maioria dos laboratórios de análise de sêmen canino.(AU)

Extrato floral de Tajetes erecta e vitamina E em dietas para reprodutores(as) de codornas: perfil oxidativo, produção, reprodução, incubação e progênie

Objetivou-se avaliar os efeitos da suplementação de extrato floral de Tagetes erecta (TFE) e de vitamina E (VE) na dieta de reprodutores machos e fêmeas de codornas japonesas sobre o desempenho produtivo, reprodutivo e de incubação e o perfil oxidativo de reprodutores, embriões e de pintinhos recém-eclodidos. No primeiro experimento (I), objetivou-se avaliar os efeitos de TFE associada ou não a níveis crescentes de VE sobre o desempenho produtivo e o estado oxidativo dos reprodutores de codornas japonesas. As aves foram distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso, com 5 dietas (controle com 25 mg/kg VE e 4 doses de VE associadas a TFE: 25, 100, 175 e 250 mg/kg VE + 3 g/kg TFE) e 12 repetições de 8 aves (6 machos e 2 fêmeas). No segundo experimento (II) foi avaliado a expressão gênica de enzimas antioxidantes na mucosa da vagina de fêmeas e o desempenho de incubação dos ovos oriundos do lote de aves descrito no primeiro trabalho. A duração da fertilidade dos ovos em dias após a cópula e a interação espermatozoide-ovo, foram analisados em casais 10 casais/tratamento. No terceiro experimento, foram avaliados os efeitos das dietas experimentais fornecidas aos reprodutores (as) sobre o status antioxidante da gema, vitelo e de fígado de embriões (11 e 15 dias de incubação) e de pintainhos (1 e 3 dias) e sobre o desempenho da progênie (1 a 28 dias). Os dados de todos os experimentos foram submetidos a análise estatística e consideradas diferenças significativas quando P<0,05. No experimento I, a inclusão de TFE isolada melhorou a conversão alimentar e aumentou a coloração da gema dos ovos, melhorou o estado oxidativo no soro de machos e fêmeas e reduziu a peroxidação lipídica no fígado dos reprodutores machos. Doses crescentes de VE associado a TFE melhoraram o estado oxidativo e reduziram a peroxidação lipídica hepática e no soro de machos e fêmeas. No experimento II, não foram observados efeitos das dietas sobre a eclosão, a mortalidade embrionária e a qualidade da progênie, mas os níveis de VE+TFE aumentaram a fertilidade. A duração da fertilidade e o número de pontos de hidrólise na membrana perivitelínica (PHMP) causados pelos espermatozoides foram avaliadas em 10 casais/dieta e em 12 dias de ovos consecutivos, após a cópula. Os ovos dos casais com VE+TFE foram férteis por mais dias e tiveram mais buracos quando comparados ao controle e os níveis mais altos de VE reduziram o número de PHMP, em geral. Quando apenas as fêmeas receberam as dietas, a quantidade de PHMP foi maior, demonstrando maior sobrevivência dos espermatozoides e, portanto, um forte efeito no oviduto em geral. No entanto, a expressão relativa dos genes das enzimas do sistema antioxidante SOD1 e GPX7 na mucosa da vagina não foi influenciada pela dieta. O aumento na fertilidade e no número de PHMP dos ovos, em função do VE+TFE se devem, provavelmente a maior concentração ou qualidade espermática ou maior sobrevivência dos espermatozoides no trato genital feminino. No experimento III, a suplementação de VE na dieta elevou a concentração de -tocoferol na gema e no fígado de pintainhos recém-eclodidos e a TFE aumentou a concentração de carotenoides totais na gema. Doses crescentes de VE + 3 g/kg TFE reduziram a peroxidação lipídica e aumentaram a atividade antioxidante na gema, no vitelo e no fígado de embriões e pintinhos. A TFE teve efeito isolado reduzindo a peroxidação lipídica e melhorando o estado antioxidante na gema. A atividade da enzima SOD no fígado de pintainhos recém-eclodidos aumentou linearmente com os níveis de VE, não sendo alterada por TFE. As dietas experimentais não influenciaram a expressão relativa dos genes das enzimas SOD1 e GPX7 no fígado de pintainhos, bem como o desempenho produtivo da progênie. De modo geral, conclui-se que suplementação de doses crescentes de VE associadas a 3 g de TFE melhorou a fertilidade e o estado antioxidante de reprodutores, de embriões e de pintainhos recém-eclodidos de codornas, sendo recomendada para produção de ovos férteis em reprodutores de codornas japonesas.

This study aimed to assess the effects of dietary supplementation with Tagetes erecta flower extract (TFE) and vitamin E (VE) on the productive, reproductive, and incubation performance and oxidative profile of male and female Japanese quail breeders, embryos, and newly hatched chicks. Experiment I was designed to investigate the effects of TFE alone and in combination with increasing levels of VE on the productive performance and oxidative status of Japanese quail breeders. Birds were distributed in a completely randomized design, with five diets (a control diet containing 25 mg/kg VE and four diets supplemented with 3 g/kg TFE + 25, 100, 175, or 250 mg/kg VE) and 12 replications of 8 birds each (6 males and 2 females). Experiment II examined gene expression levels of antioxidant enzymes in the vaginal mucosa of birds and the incubation performance of eggs from Experiment I. Fertility duration (measured in days after mating) and the number of points of hydrolysis in the perivitelline membrane (PHPM) produced by spermatozoa were determined in 10 couples per treatment during 12 consecutive egglaying days after mating. A third experiment was conducted to determine the parental effects of experimental diets on the antioxidant status of the yolk, yolk sac, and liver of embryos (at 11 and 15 days of incubation) and chicks (at 1 and 3 days after hatching) and on progeny performance (from 1 to 28 days of age). Data from all experiments were subjected to statistical analysis, and the level of significance was set at P < 0.05. In Experiment I, the TFE-supplemented diet containing control levels of VE improved feed conversion and serum oxidative status in male and female birds, enhanced yolk color, and reduced lipid peroxidation in the liver of male quail. Increasing doses of VE associated with TFE improved oxidative status and reduced lipid peroxidation in the liver and serum of male and female birds. In Experiment II, there were no effects of experimental diets on hatchability, embryo mortality, or progeny quality, but TFE + VE diets significantly increased fertility. Eggs from quail fed TFE + VE diets remained fertile for longer periods and had higher PHPM numbers compared with control eggs; however, in general, high VE levels led to reduced PHPM numbers. PHPM number was higher when only hens were fed supplemented diets, suggesting enhanced sperm survival and, therefore, a strong effect on the female oviduct. However, the relative expression of antioxidant enzyme genes (SOD1 and GPX7) in the vaginal mucous membrane was not influenced by diet. These results suggest that the increase in egg fertility and PHPM number promoted by TFE + VE supplementation is probably due to increased sperm concentration or quality or enhanced sperm survival in the female genital tract. In Experiment III, dietary VE supplementation increased -tocopherol content in the yolk and liver of newly hatched chicks and TFE supplementation increased total carotenoid content in yolk. Diets containing 3 g/kg TFE + increasing VE levels reduced lipid peroxidation and increased antioxidant activity in the yolk, yolk sac, and liver of embryos and chicks. TFE supplementation independently decreased lipid peroxidation and improved yolk antioxidant status. Superoxide dismutase activity in the liver of newly hatched chicks increased linearly with VE level without being affected by TFE. Experimental diets did not influence offspring performance or SOD1 or GPX7 relative expression in the liver of chicks. It was concluded that dietary supplementation with VE + 3 g/kg TFE improved the fertility and antioxidant status of quail, embryos, and newly hatched chicks and may be recommended to improve the production of fertile eggs in Japanese quail breeders

Perfil proteico do sêmen de cães: em busca de um antígeno espermático para contracepção

Vacinas contraceptivas têm sido propostas como uma forma mais rápida e menos invasiva para esterilização de cães. Este estudo objetivou descrever a relação entre as proteínas das células espermáticas ejaculadas e do epidídimo, do plasma seminal e do fluído epididimário, produzindo base experimental para o design destas vacinas. Para isso, utilizou-se 5 cães (n = 5), dos quais foram obtidos o ejaculado e, após a orquiectomia, o produto da recuperação da cauda do epidídimo. As amostras foram submetidas a avaliação da concentração, morfologia, cinética espermática, citometria de fluxo e teste de ligação em membrana perivitelínica de ovo, sendo separadas em 4 grupos: plasma seminal (PS), fluido epididimário (FE), espermatozoides do ejaculado (EJAC) e do epidídimo (EPID). Para análise proteômica a digestão das proteínas dos 4 grupos foi feita in gel e avaliadas em espectrômetro de massas Q-Tof. Os parâmetros de motilidade progressiva, retilinearidade, linearidade, coeficiente de oscilação, produção de H2O2 e percentagem de membrana plasmática íntegra e acrossomal lesada foram mais expressivos (P< 0,01) no grupo EJAC do que no EPID. Foram encontradas 177 proteínas entre EJAC e PS (16 up-regulated no EJAC e 14 no PS); 241 proteínas entre EPID e FE (27 up-regulated no EPID e 14 no FE); e 210 proteínas entre EJAC e EPID (3 up-regulated no EJAC e 17 no EPID).

Contraceptive vaccines has been proposed as a faster and less invasive way to sterilize dogs. This study aimed to describe the relation between proteins of ejaculated sperm cells and epididymis, seminal plasma and epididymal fluid, producing an experimental basis for designing these vaccines. For this, 5 dogs (n = 5) were used, from which the semen and, after orchiectomy, the epididymis tail recovery product was obtained. Samples were submitted to concentration, morphology, sperm kinetics, flow cytometry and egg perivitellin membrane binding test analisys, and separated into 4 groups: seminal plasma (PS), epididymal fluid (EF), ejaculate spermatozoa (EJAC) and epididymis spermatozoa (EPID). For proteomic analysis the protein digestion of the 4 groups was performed in gel and evaluated by Q-Tof mass spectrometer. The parameters of progressive motility, rectilinearity, linearity, wobble, H2O2 production and percentage of plasma membrane integrity and damaged acrosomal membrane were more expressive (p <0.01) in the EJAC group than in EPID group. 177 proteins were found between EJAC and PS (16 up-regulated in EJAC and 14 in PS); 241 proteins between EPID and FE (27 up-regulated in EPID and 14 in FE); and 210 proteins between EJAC and EPID (3 up-regulated in EJAC and 17 in EPID).

A Influência da Hiperplasia Prostática Benigna e do tratamento com finasterida nos principais parâmetros de congelabilidade de espermatozoides caninos

Resumo: O objetivo do presente estudo é verificar a influência da Hiperplasia Prostática Benigna (HPB) nos principais parâmetros de congelabilidade do sêmen de cães. Para tanto, foram selecionados 20 cães, alocados em 3 grupos experimentais de acordo com a presença, tratamento com finasterida e ausência da afecção: Grupo Controle (n=9), Grupo HPB (n=5) e Grupo HPB+FIN (n=6). De forma complementar, o experimento foi subdividido em Sêmen Fresco e Sêmen Criopreservado. Para a seleção dos cães, foi considerada idade superior a 6 anos, diagnóstico presuntivo da HPB por constatação dos sinais clínicos, toque retal e ultrassonografia modo B. As amostras seminais in natura foram avaliadas quanto ao volume, cor, aspecto, concentração, cinética espermática, atividade mitocondrial espermática, estresse oxidativo, integridade de membrana plasmática, acrossomal, DNA espermático por citometria de fluxo e teste de ligação espermática em membrana perivitelínica em gema de ovo de galinha. Sequencialmente, o sêmen foi criopreservado em etapa única, posteriormente descongelado a 37ºC por 30 segundos e foram avaliado conforme anteriormente. Como resultados, nas avaliações seminais realizadas no sêmen fresco, o Grupo HPB+Finasterida apresentou menor escore para o aspecto do ejaculado, em comparação aos demais grupos. Ademais, o grupo HPB+Finasterida apresentou maior frequência de batimento flagelar dos espermatozóides em relação ao grupo Controle e menor porcentagem de motilidade em velocidade média, em comparação aos demais grupos. O grupo Controle apresentou maior porcentagem de espermatozóides com média atividade mitocondrial, em relação aos demais grupos. Ainda, o grupo Controle apresentou maior porcentagem de integridade do DNA espermático. Por outro lado, o grupo HPB apresentou menor porcentagem de integridade do DNA espermático. Nas avaliações seminais realizadas no sêmen descongelado, o Grupo Controle apresentou maior porcentagem de espermatozóides com alta atividade mitocondrial, em comparação aos demais grupos. Já o Grupo HPB+Finasterida apresentou maior número de espermatozoides ligados à membrana perivitelínica de gema de ovo de galinha, em comparação ao grupo HPB. O grupo HPB apresentou maior porcentagem de espermatozoides com lesão de membrana acrossomal (sem lesão de membrana plasmática), em comparação ao grupo Controle. Com relação ao estresse oxidativo, o Grupo Controle apresentou maior peroxidação lipídica em comparação ao grupo HPB+Finasterida. Por outro lado, o Grupo Controle mostrou maior integridade de DNA espermático em comparação aos demais grupos, sendo o grupo HPB com menor integridade de DNA espermático. Em conclusão, os espermatozoides oriundos de cães afetados pela HPB apresentam maior sensibilidade às injúrias da criopreservação seminal. Por outro lado, o tratamento com finasterida é capaz de minimizar os efeitos deletérios da congelação do sêmen de cães portadores de HPB, permitindo o emprego de tais animais em programas reprodutivos.

Abstract: The objective of the present study is to analyze the influence of Benign Prostatic Hyperplasia (BPH) on the main freezing parameters of canine sperm. For such purpose, 20 dogs were previously selected and composed 3 experimental groups, according to the presence or absence of BPH diagnosis and treatment with finasteride: control group (n=9), BPH group (n=5) and BPH+FIN (n=6). Complementarily, the experiment was subdivided in fresh or post-thaw sperm. Dogs had more than 6 years and a presumptive diagnosis of BPH through the verification of clinical signs, rectal examination and B mode ultrasonography. The fresh seminal samples were evaluated for volume, color, aspect, sperm concentration, sperm motility, sperm mitochondrial activity, oxidative stress, plasmatic and acrosomal membrane integrity, sperm DNA fragmentation by flow citometry and sperm binding test on perivitelic membrane of chicken egg yolk. Subsequently, semen was cryopreserved in one step, thawed at 37ºC for 30 seconds and evaluated according to previously described. For the fresh semen results, the BPH+Finasteride group had lower score of ejaculate aspect compared to the other groups. Additionally, BPH+Finasteride group had a higher frequency of sperm flagellar beating in relation to the control group and a lower percentage of sperm with medium velocity in relation to the other groups. The control group had higher percentage of medium sperm mitochondrial activity in relation to the other groups. Also, the control group had higher percentage of sperm DNA integrity. Conversely, BPH group showed the lowest percentage of DNA integrity. For the post-thaw analysis, the control group presented a higher percentage of high mitochondrial activity compared to the other groups. However, the BPH+Finasteride group showed a higher number of spermatozoa bound to the perivitelinic membrane of chicken egg yolk, compared to the BPH group. The BPH group presented a higher percentage of spermatozoa with acrossomal membrane lesion (without lesion of plasmatic membrane) compared to the control group. Regarding the oxidative stress, the control group presented higher lipid peroxidation compared to the BPH+Finasteride group. On the other hand, the control group had higher sperm DNA integrity compared to the other groups, and the BPH group had the lowest percentage of sperm DNA integrity. In conclusion, sperm of BPH dogs presented higher susceptibility to cryoinjury. However, finasteride treatment was able to minimize the deleterious effects of sperm cryopreservation, allowing for the use of HPB dogs for reproductive purposes.

Morphological aspects of the ovaries of turtle Kinosternon scorpioides raised in captivity / Aspectos morfológicos dos ovários da tartaruga Kinosternon scorpioides criada em cativeiro

The swear turtle "jurará" (Kinosternon scorpioides) is a mud turtle of the Amazon region exposed to disordering capture in the rural areas of Maranhão, Brazil. Despite its popularity in these areas, little meaningful information regarding the reproductive morphology is currently available, fact that impedes the adoption of policies for preservation of the species. To obtain more information, we studied the ovarian morphology adult jurará females kept in captivity by morphological and morphometric analysis in the dry and rainy season. The results revealed that all females were sexually mature and were in a vitellogenic period. The ovaries are two irregular structures composed by follicles in different stages of development (primary, secondary and tertiary) scattered in a stroma of loose connective highly vascularized tissue. The ovary weight was 6.25±4.23g and 2.27±1.42g, for the right and left one respectively. The gonadosomatic indexes were 2.06% for the dry season and 1.79% for the rainy season. The average of the follicles was 29.83 units per ovary. Microscopically, the mature ovaries revealed a basal layer composed by four cellular layers: the inner and outer theca, stratum granulosum with perivitelline membrane and zona radiata with vitelline membrane. No significant differences were observed in the ovaries either in the dry or wet period.(AU)

O jurará (Kinosternon scorpioides) é um cágado da Região Amazônica que sofre com as capturas desordenadas nos interiores maranhenses e que apesar da sua popularidade nessas áreas, os dados relacionados à morfologia reprodutiva ainda são poucos esclarecedores, o que dificulta a adoção de medidas para preservação da espécie. Desta forma, caracterizou-se morfologicamente os ovários de fêmeas adultas de jurara oriundas de cativeiro através da análise morfológica e morfométrica em dois períodos do ano, seco e o chuvoso. Os resultados comprovaram que todas as fêmeas eram maduras sexualmente e se encontravam em período vitelogênico. Os ovários são duas estruturas irregulares constituídas por diversos folículos em desenvolvimento (primários, secundários e terciários) sobre um estroma de tecido conjuntivo frouxo ricamente vascularizado, com média de peso do direito e esquerdo respectivamente de 6,25±4,23g and 2,27±1,42g. Índices gonadossomáticos de 2,06% para o período seco e de 1,79% para o chuvoso. Média de folículos observados de 29,83 unidades por ovário. Histologicamente, os ovários maduros possuíam camada basal composta por quatro camadas celulares: as tecas externa e interna, o estrato granuloso com membrana perivitelínica e a zona radiata com membrana vitelínica. Não foram observadas diferenças significativas dos ovários entre os dois períodos estudados.(AU)

Efeito do tratamento antioxidante sistêmico em touros Bos taurus taurus submetidos ao estresse térmico e suplementados com dieta rica em ácidos graxos poliinsaturados sobre a capacidade de ligação de espermatozóides à membrana vitelínica de ovos de galinha / Effect of systemic antioxidant treatment in Bos taurus taurus bulls under heat stress and supplemented with polyunsaturated fatty acids on sperm binding capacity to the chicken egg perivitelline membrane

Diversos estudos indicam que touros europeus (Bos taurus) apresentam uma maior susceptibilidade ao estresse térmico com um consequentemente aumento do estresse oxidativo. Este, por sua vez, leva a uma diminuição na qualidade espermática. O espermatozoide possui, fisiologicamente, uma grande quantidade de ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs) em sua membrana. As ligações duplas entre carbonos desses PUFAs confere a membrana plasmática uma maior fluidez, necessária aos processos fisiológicos do espermatozoide como motilidade e fertilização. No entanto essas ligações são mais facilmente oxidadas e, portanto, mais susceptíveis a peroxidação lipídica. Sendo assim, a suplementação com PUFAs promoveria uma melhoria na qualidade espermática, porém, tornaria o espermatozoide ainda mais susceptível à peroxidação lipídica. A vitamina E é um antioxidante chave na prevenção do estresse oxidativo através da interceptação do radical hidroxila, protegendo os PUFAs da membrana espermática contra a peroxidação lipídica. Portanto, uma alternativa para melhorar a qualidade espermática de touros europeus submetidos ao estresse térmico, seria a suplementação com PUFAs associada a um tratamento com vitamina E para prevenir um possível efeito deletério oxidativo desses ácidos graxos. Estudos sugerem uma importante relação entre os testes convencionais de avaliação de sêmen e fertilidade. No entanto, a limitação destes testes também tem sido reconhecida, principalmente em casos de infertilidade idiopática. Estudos demonstram que os testes funcionais de avaliação do sêmen, podem ser uma alternativa importante para a avaliação da capacidade fecundante de uma determinada amostra seminal. [...] No entanto, a associação entre estes tratamentos não foi eficiente para melhorar a qualidade espermática assim como a capacidade fecundante avaliada através do teste de ligação espermática em membrana perivitelínica de ovos de galinha.

Several studies suggest a high susceptibility of European bulls (Bos taurus) to the heat stress, which will lead to an increase on oxidative stress and consequent impairment on sperm viability. Sperm membranes are rich in poly-unsaturated fatty acids (PUFAs). The carbon-carbon double bounds (insaturations) that characterize these PUFAs confer the necessary fluidity to the sperm membrane, essential to motility and fecundation capacity. However, these insaturations are more unstable and, therefore, more susceptible to the lipid peroxidation (i.e., attack of reactive oxygen species to the lipids). Hence, PUFA supplementation would improve certain sperm characteristics but increase the already high susceptibility to the oxidative stress. Vitamin E is a key antioxidante on oxidative stress prevention by intercepting hydroxyl radical and protecting sperm membrane PUFAS against lipid peroxidation. Therefore, an alternative to improve sperm quality in heat stressed european bulls would be a PUFA supplementation associated to a Vitamin E therapy in order to avoid a possible deleterious oxidative effects of these fatty acids. Estudies suggest an important relationship between conventional tests for sperm evaluation and fertility. However, limitations have been also verified, especially in cases of idiopathic infertility. Thus, tests to evaluate sperm functionality may be an interesting alternative to assess fecundation capacity of semen samples. The binding of sperm to the zona pellucida occurs initially by the interaction between acrosomal receptors and oocyte proteins ZP3 and ZP2. The perivitelline membrane of chicken eggs present homologies to zona pellucida proteins, which allows sperm from several species to bind to this membrane. [...] However, the association between both treatments were not efficient to improve sperm quality as well as the fecundation capacity as evaluated by the sperm binding test to the chicken perivitelline membrane.

Efeito do tratamento antioxidante sistêmico em touros Bos taurus taurus submetidos ao estresse térmico e suplementados com dieta rica em ácidos graxos poliinsaturados sobre a capacidade de ligação de espermatozóides à membrana vitelínica de ovos de galinha / Effect of systemic antioxidant treatment in Bos taurus taurus bulls under heat stress and supplemented with polyunsaturated fatty acids on sperm binding capacity to the chicken egg perivitelline membrane

Diversos estudos indicam que touros europeus (Bos taurus) apresentam uma maior susceptibilidade ao estresse térmico com um consequentemente aumento do estresse oxidativo. Este, por sua vez, leva a uma diminuição na qualidade espermática. O espermatozoide possui, fisiologicamente, uma grande quantidade de ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs) em sua membrana. As ligações duplas entre carbonos desses PUFAs confere a membrana plasmática uma maior fluidez, necessária aos processos fisiológicos do espermatozoide como motilidade e fertilização. No entanto essas ligações são mais facilmente oxidadas e, portanto, mais susceptíveis a peroxidação lipídica. Sendo assim, a suplementação com PUFAs promoveria uma melhoria na qualidade espermática, porém, tornaria o espermatozoide ainda mais susceptível à peroxidação lipídica. A vitamina E é um antioxidante chave na prevenção do estresse oxidativo através da interceptação do radical hidroxila, protegendo os PUFAs da membrana espermática contra a peroxidação lipídica. Portanto, uma alternativa para melhorar a qualidade espermática de touros europeus submetidos ao estresse térmico, seria a suplementação com PUFAs associada a um tratamento com vitamina E para prevenir um possível efeito deletério oxidativo desses ácidos graxos. Estudos sugerem uma importante relação entre os testes convencionais de avaliação de sêmen e fertilidade. No entanto, a limitação destes testes também tem sido reconhecida, principalmente em casos de infertilidade idiopática. Estudos demonstram que os testes funcionais de avaliação do sêmen, podem ser uma alternativa importante para a avaliação da capacidade fecundante de uma determinada amostra seminal. [...] No entanto, a associação entre estes tratamentos não foi eficiente para melhorar a qualidade espermática assim como a capacidade fecundante avaliada através do teste de ligação espermática em membrana perivitelínica de ovos de galinha. (AU)

Several studies suggest a high susceptibility of European bulls (Bos taurus) to the heat stress, which will lead to an increase on oxidative stress and consequent impairment on sperm viability. Sperm membranes are rich in poly-unsaturated fatty acids (PUFAs). The carbon-carbon double bounds (insaturations) that characterize these PUFAs confer the necessary fluidity to the sperm membrane, essential to motility and fecundation capacity. However, these insaturations are more unstable and, therefore, more susceptible to the lipid peroxidation (i.e., attack of reactive oxygen species to the lipids). Hence, PUFA supplementation would improve certain sperm characteristics but increase the already high susceptibility to the oxidative stress. Vitamin E is a key antioxidante on oxidative stress prevention by intercepting hydroxyl radical and protecting sperm membrane PUFAS against lipid peroxidation. Therefore, an alternative to improve sperm quality in heat stressed european bulls would be a PUFA supplementation associated to a Vitamin E therapy in order to avoid a possible deleterious oxidative effects of these fatty acids. Estudies suggest an important relationship between conventional tests for sperm evaluation and fertility. However, limitations have been also verified, especially in cases of idiopathic infertility. Thus, tests to evaluate sperm functionality may be an interesting alternative to assess fecundation capacity of semen samples. The binding of sperm to the zona pellucida occurs initially by the interaction between acrosomal receptors and oocyte proteins ZP3 and ZP2. The perivitelline membrane of chicken eggs present homologies to zona pellucida proteins, which allows sperm from several species to bind to this membrane. [...] However, the association between both treatments were not efficient to improve sperm quality as well as the fecundation capacity as evaluated by the sperm binding test to the chicken perivitelline membrane. (AU)

Perfurações espermáticas ao redopr do disco germinativo de ovos incubáveis e correlação com fertilidade e ecodibilidade de reprodutoras pesadas

No presente estudo foram correlacionados os resultados das contagem de perfurações espermáticas na membrana perivitelínica externa de ovos incubáveis com as taxas de eclosão e fertilidade, objetivando-se analisar a possibilidade do uso dessa técnica como alternativa aos métodos tradicionais de avaliação da fertilidade, executados no incubatório. As avaliações foram realizadas a cada três semanas durante todo o período reprodutivo de um lote comercial de matrizes de corte da linhagem Avian Cobb 48, submetidas à monta natural a partir da 25a semana de idade. Foram realizadas 10 avaliações, sendo utilizados 30 ovos em cada avaliação. Foi realizada a extração, fixação e coloração da membrana perivitelínica externa para possibilitar a visualização das perfurações ao microscópio óptico. A idade da ave influenciou negativamente o número de perfurações espermáticas na membrana perivitelínica externa, bem como a taxa de fertilidade e de eclosão. Houve correlação positiva entre o número de perfurações espermáticas na membrana perivitelínica e a taxa de fertilidade (r= 0,885; P<0,05), assim como com a taxa de eclosão (r= 0,800; P<0,05). É possível inferir que a contagem de perfurações espermáticas pode ser utilizada como ferramenta de avaliação da fertilidade de ovos incubáveis

In this study we correlated the results of counting sperm penetration in the outer perivitelline layer of hatching eggs to the fertility and hatching rates, aiming to examine the possibility of using this technique as an alternative to traditional methods of fertility evaluation, performed in the hatchery. The evaluations were performed every three weeks throughout the reproductive period of a flock of commercial broiler strain Cobb Avian 48, submitted to natural mating from the 25th week of age. Were performed 10 evaluations, 30 eggs were used in each assessment. Was extracted, fixed and stained outer perivitelline layer to enable viewing of holes in an optical microscope. The bird's age negatively influenced the number of sperm holes in the outer perivitelline layer and the fertility rate and hatching. A positive correlation between the number of sperm holes in the perivitelline layer and the fertility rate (r = 0.885, P <0.05), as well as the hatching rate (r = 0.800, P <0.05). It can infer that the sperm count of holes can be used as a tool for assessing the fertility of eggs hatching

USO DE SONDAS FLUORESCENTES E ENSAIO DE LIGAÇÃO A OVÓCITOS HETERÓLOGOS E A MEMBRANA PERIVITELÍNICA DE OVO DE GALINHA (Gallus gallus) PARA A AVALIAÇÃO DE ESPERMATOZOIDES FRESCOS E DESCONGELADOS DE JAGUATIRICA (Leopardus pardalis)

ARAUJO, Gediendson Ribeiro de, M. Sc., Universidade Federal de Viçosa, fevereiro de 2012. Uso de sondas fluorescentes e ensaio de ligação a ovócitos heterólogos e a membrana perivitelínica de ovo de galinha (Gallus gallus) para a avaliação de espermatozoides frescos e descongelados de jaguatirica (Leopardus pardalis). Orientador: Tarcízio Antônio Rego de Paula. Coorientador: José Domingos Guimarães. Estratégias de conservação ex situ objetivam auxiliar na manutenção de populações geneticamente viáveis, por meio de estratégias de reprodução assistida e criopreservação de materiais genéticos. Objetivou-se a validação do uso de combinação de sondas fluorescentes e do teste de ligação à zona pelúcida de ovócitos heterólogos criopreservados na qualificação de sêmen fresco e descongelados de jaguatiricas. Foram usadas três jaguatiricas mantidas em cativeiro, sendo obtidos ejaculados por meio de eletroejaculação e avaliados por testes clássicos de rotina. Através destes testes (vigor e motilidade espermáticos, hiposmótico e morfologia) observou-se queda (p<0,05) dos padrões qualitativos do sêmen descongelado em relação ao sêmen fresco. A associação das sondas Iodeto de Propídeo, Hoechst 33342 e Pisum Sativum Agglutinin conjugada com Lectina Fluorescente (FITC-PSA), permitiu a identificação de subpopulações espermáticas de acordo com a localização específica de lesões celulares e detectou de forma mais acurada o efeito deletério da criopreservação no sêmen. O uso de ovócitos criopreservados de gatas domésticas permitiu a observação da queda da capacidade ligante (p<0,05) dos espermatozoides descongelados em relação aos espermatozoides a fresco de jaguatiricas, havendo ainda correlação entre o total de ligantes nas amostras de espermatozoides a fresco com padrões qualitativos no sêmen após o descongelamento. A combinação de sondas fluorescentes utilizadas e o uso de ensaio de ligação a ovócitos heterólogos criopreservados de gatas domésticas foram mais específicos e confiáveis na detecção da queda na qualidade espermática de jaguatiricas após o descongelamento. Os espermatozóides de jaguatiricas também foram capazes de se ligar à membrana perivitelínica em ambos os tratamentos. Apesar de não observada diferença na quantidade de espermatozóides ligados nos tratamentos (p>0,05), houve correlação positiva (r= 0,91; p<0,05) entre eles. Foi observada ainda correlação negativa entre a taxa de espermatozoides ligados na membrana perivitelínica no sêmen a fresco e no descongelado com a população de espermatozóides com cauda dobrada no sêmen descongelado (r= -0,81; p<0,05 e r= -0,86; p<0,05, respectivamente) e correlação negativa (r= -0,71; p< 0,05) entre a população de espermatozóides com cauda fortemente dobrada (defeito maior) com a quantidade de espermatozóides ligados na membrana perivitelínica, ambos no sêmen descongelado. Apesar dos espermatozoides de jaguatirica terem se ligado de forma satisfatória à membrana perivitelínica, o reduzido número de amostras avaliadas não permitiu demonstrar correlação com a fertilidade do espermatozoide. No entanto, o mecanismo suporte desenvolvido para a membrana permitiu a manutenção do seu estiramento durante o processamento e a definição de uma área de avaliação. Sendo assim, estudos futuros, com uma maior amostragem, são necessários para a efetiva validação desta técnica. ABSTRACT ARAUJO, Gediendson Ribeiro de, M. Sc., Universidade Federal de Viçosa, February, 2012. Using fluorescent probes and sperm bin

Fatores relacionados com a produtividades de ovos de avestruzes (Struthio camelus)

A estrutiocultura brasileira é uma atividade nova com apenas 10 anos de implantação. O Brasil já possui o segundo maior plantel mundial, de aproximadamente 335 mil aves, perdendo apenas para a África do Sul, centenária na criação e comercialização de avestruzes. Assim como em outros países, no Brasil existem poucas pesquisas sobre a produção comercial destas aves. Os objetivos deste trabalho foram o de identificar as principais características dos ovos de avestruzes e sua relação com a produtividade em condições de incubação artificial; verificar o comportamento dos componentes do ovo: casca, gema e albúmem, nas três fases da estação reprodutiva; obter pela visualização do disco germinativo (DG) a fertilidade (FERDG) e infertilidade (INFDG) reais; analisar e quantificar o número de perfurações espermáticas na membrana perivitelínica (PEMPV) e relacioná-las às taxas de fertilidade (FER) dos ovos incubados. Em 2004, durante os seis meses de postura, foram acompanhadas 8 fêmeas que botaram em média 44 ovos cada uma, equivalente à performance produtiva de 45%. Encontrou-se diferença no peso inicial (PI) dos ovos (1428 g), no peso dos filhotes ao nascimento (864 g), na porcentagem do peso do filhote (PPFI) (60,4%) e no índice de perda de peso (IPP) (14,8%) tanto entre os piquetes quanto fases da estação reprodutiva. A PPFI e o IPP também diferiram entre os dias de duração da incubação. Os pesos médios da gema (305 g), albúmem (808 g) e casca (256 g) variaram entre os piquetes mas não no decorrer da estação reprodutiva. Suas proporções foram semelhantes entre os piquetes e fases, com 21,8% de gema, 58,1% de albúmem e 18,3% de casca. As características dos ovos se mantiveram constantes durante a estação. A largura (12,2 cm) e a área total da casca (582 cm²) se diferenciaram nos quatro trios. As outras características...

The ostrich farm in Brazil is a new activity with just nearly 10 years of establishment. Brazil has become the second world in breeding ostriches, with about 335 thousand birds, following South Africa, the first one in breeding and commercial farming for over a century. As in other countries, in Brazil there are few researches on the commercial production of these birds. The objectives of this work were to identify the main measurable morphologic characteristics of the ostrich eggs and its relation with the hatchability rate in artificial incubation conditions; to verify how the egg components ? shell, yolk and albumen? vary during the laying season; to determine by the germinal disc (GD) the vitalization of the real fertility (FERGD) and infertility (INFGD), and to analyze and quantify the number of sperm penetration (SP) in the inner perivitelline layer (PL) and to correlate with fertility (FER) of the incubated eggs. During the six months of 2004´ reproductive period the 8 females laid an average of 44 eggs each, corresponding to productive percentage of 45%. Differences were found in the initial egg weight (EW) (1428 g), in the chick weight at hatch (864 g), in the percentage of chick weight (PCW) (60.4%) relate to the EW and in the egg weight loss (EWL) (14.8%) at by pen phases. The PCW and the EWL were also different when the incubation length was considered. The weight of the yolk (305 g), albumen (808 g) and shell (256 g) varied among the pens but not during the reproduction period. The proportions of the egg components were similar among pens and in the phases, with 21.8% of yolk, 58.1% of albumen and 18.3% of shell. The egg characteristics had no change during the laying period. On the other hand the trio had a variation in its width (12.2 cm) and the total shell area (582 cm²). Other characteristics were analyzed, such as the length of the egg (15 cm), the index of egg...