Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.(AU)

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.(AU)

Proposal of an iELISA for Mycoplasma bovis diagnosis in dairy cattle and associated risk factors / [Proposta de um iELISA para diagnóstico de Mycoplasma bovis em bovinos leiteiros e fatores de risco associados]

Mycoplasma bovis is a highly contagious agent associated with several pathologies in cattle. The detection of reactive antibodies to M. bovis by Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (iELISA) identifies if there was an exposure to the microorganism. The current study aimed to optimize an iELISA from M. bovis total cell antigen, applying it to bovine serum samples, and to evaluate risk factors. Serum samples were obtained from 400 cows from 17 herds from Southeast Brazil. In the optimization of iELISA, the following was established: 2 µg/mL of antigen, sera dilution 1:300, and conjugate dilution 1:15000. The frequency was 62.3% (249/400) of reactive animals and 100% (17/17) of reactive herds. Risk factors were: herds with more than 100 animals (OR= 3.1; CI= 95%); Holstein breed (OR= 72.5; CI= 95%); cows (OR= 29.7; CI= 95%); intensive breeding system (OR= 3.3; CI= 95%); associated small ruminant production (OR= 4.4; CI= 95%); milk production above 500L (OR= 2.9; CI= 95%); no quarantine (OR= 1.5; CI= 95%); mechanical milking (OR= 5.5; CI= 95%) and cases of mastitis (OR= 5.5; CI= 95%). The proposed iELISA was able to detect antibodies reactive to M. bovis in bovine serum. Knowledge of these risk factors can assist in the implementation of prophylactic measures.(AU)

Mycoplasma bovis é um agente altamente contagioso relacionado a várias patologias em bovinos. A detecção de anticorpos reativos a M. bovis por Ensaio de Imunoadsorção Enzimática Indireto (iELISA) identifica se houve exposição ao microrganismo. O presente estudo teve como objetivo otimizar um iELISA de antígeno celular total de M. bovis, aplicando-o a amostras de soro bovino, bem como avaliar fatores de risco. Amostras de soro foram obtidas de 400 vacas de 17 rebanhos da Região Sudeste do Brasil. Na otimização do iELISA foram obtidos: 2µg/mL de antígeno, diluição dos soros 1:300 e do conjugado 1:15000. A frequência de animais reativos foi de 62,3% (249/400) e de 100% (17/17) para os rebanhos. Os fatores de risco foram: rebanhos com mais de 100 animais (OR= 3,1; IC= 95%); raça Holandesa (OR= 72,5;IC= 95%); vacas (OR= 29,7;IC= 95%); sistema intensivo (OR= 3,3; C= 95%); produção de pequenos ruminantes (OR= 4,4;IC=95%); produção de leite acima de 500L (OR= 2,9;IC= 95%); sem quarentena (OR= 1,5;IC= 95%); ordenha mecânica (OR= 5,5;IC= 95%) e casos de mastite (OR= 5,5;IC= 95%). O iELISA proposto foi capaz de detectar anticorpos reativos a M. bovis no soro bovino. O conhecimento desses fatores de risco pode auxiliar na implementação de medidas profiláticas.(AU)

Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

ABSTRACT: Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

RESUMO: Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

Presença de Mollicutes e Mycoplasma bovis em swabs nasais de bezerros e na secreção mastítica de vacas / Presence of Mollicutes and Mycoplasma bovis in nasal swabs from calves and in mastitic secretion from cows / Presencia de Mollicutes e Mycoplasma bovis en hisopos nasalses de terneros y secrecion de mastitis de vacas

Mycoplasma bovis faz parte da microbiota do trato respiratório bovino, mas é considerado um patógeno oportunista de extrema importância nas doenças respiratórias de bezerros. Causa ao rebanho diversas doenças como mastite, poliartrite, pneumonia e endometrite. Esse patógeno é altamente contagioso e os animais com mastite são potenciais disseminadores da infecção para o rebanho, pois liberam de 106a 108UFC por mL de leite. Da mesma forma, animais com pneumonia eliminam, por meio de secreções respiratórias, altas cargas microbianas do agente. O presente estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de Mycoplasma bovis em 185 amostras de secreção mastítica de vacas, bem como em 50 amostras de swab nasal de bezerros saudáveis com ou sem sinais de pneumonia e nascidos de vacas com mastite, pertencentes a quatro fazendas leiteiras do estado do Paraná, onde foram diagnosticados casos de mastite. A extração do DNA de ambas as secreções foi realizada pelo método de termólise. Para a reação em cadeia da polimerase (PCR), primers genéricos foram empregados para amplificar o DNA dos Mollicutes e as amostras positivas foram submetidas à PCR com primers específicos para M. bovis. A positividade para M. bovis foi de 3,78% nas amostras de secreção mastítica, independente da fazenda, e de 20% nos swabs nasais.

Mycoplasma bovis is part of the bovine respiratory tract microbiota but is considered an opportunistic pathogen of extreme importance in respiratory diseases of calves. It causes to the herd several diseases such as mastitis, polyarthritis, pneumonia and endometritis. This pathogen is highly contagious and animals with mastitis are potential disseminators of infection to the herd since they release from 106 to 108CFU per mL milk. Similarly, animals with pneumonia eliminate, through respiratory secretions, high microbial loads of the agent. The present study aimed to perform molecular detection of Mycoplasma bovis in 185 milk samples from cows with clinical mastitis, as well as in 50 nasal swab samples from healthy calves with or without signs of pneumonia and born from cows with mastitis, all belonging to four dairy farms in Paraná State, where cases of mastitis had been diagnosed. DNA extraction from both secretions was carried out according to the thermolysis method. For polymerase chain reaction (PCR), generic primers were employed to amplify the Mollicutes DNA and positive samples were subjected to PCR with primers specific for M. bovis. Positivity for M. bovis was 3.78% in mastitic samples, regardless of the farm, and 20% in nasal swabs.

Mycoplasma bovis forma parte de la microbiota del tracto respiratorio bovino, pero se considera un patógeno oportunista de extrema importancia en las enfermedades respiratorias de los terneros. Provoca en el rebaño diversas enfermedades como mastitis, poliartritis, neumonía y endometritis. Este patógeno es altamente contagioso y los animales con mastitis son potenciales diseminadores de la infección al hato, ya que liberan de 106 a 108 UFC por ml de leche. Asimismo, los animales con neumonía eliminan, através de secreciones respiratorias, altas cargas microbianas del agente. El presente estudio tuvo como objetivo realizar la detección molecular de Mycoplasma bovis en 185 muestras de secretion de mastitis de vacas con mastitis clínica, así como en 50 muestras de hisopos nasales de terneros sanos con o sin signos de neumonía y nacidos de vacas con mastitis, todos pertenecientes a cuatro granjas lecheras en el estado de Paraná, donde se diagnosticaron casos de mastitis. La extracción de ADN de ambas secreciones se realizó mediante el método de termólisis. Para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se utilizaron cebadores genéricos para amplificar el ADN de los Mollicutes y las muestras positivas se sometieron a PCR con cebadores específicos para M. bovis. La positividad para M. bovis fue del 3,78% en muestras de mastitis, independientemente de la granja, y del 20% en hisopos nasales.

Presença de Mollicutes e Mycoplasma bovis em swabs nasais de bezerros e na secreção mastítica de vacas / Presence of Mollicutes and Mycoplasma bovis in nasal swabs from calves and in mastitic secretion from cows / Presencia de Mollicutes e Mycoplasma bovis en hisopos nasalses de terneros y secrecion de mastitis de vacas

Mycoplasma bovis faz parte da microbiota do trato respiratório bovino, mas é considerado um patógeno oportunista de extrema importância nas doenças respiratórias de bezerros. Causa ao rebanho diversas doenças como mastite, poliartrite, pneumonia e endometrite. Esse patógeno é altamente contagioso e os animais com mastite são potenciais disseminadores da infecção para o rebanho, pois liberam de 106a 108UFC por mL de leite. Da mesma forma, animais com pneumonia eliminam, por meio de secreções respiratórias, altas cargas microbianas do agente. O presente estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de Mycoplasma bovis em 185 amostras de secreção mastítica de vacas, bem como em 50 amostras de swab nasal de bezerros saudáveis com ou sem sinais de pneumonia e nascidos de vacas com mastite, pertencentes a quatro fazendas leiteiras do estado do Paraná, onde foram diagnosticados casos de mastite. A extração do DNA de ambas as secreções foi realizada pelo método de termólise. Para a reação em cadeia da polimerase (PCR), primers genéricos foram empregados para amplificar o DNA dos Mollicutes e as amostras positivas foram submetidas à PCR com primers específicos para M. bovis. A positividade para M. bovis foi de 3,78% nas amostras de secreção mastítica, independente da fazenda, e de 20% nos swabs nasais.(AU)

Mycoplasma bovis is part of the bovine respiratory tract microbiota but is considered an opportunistic pathogen of extreme importance in respiratory diseases of calves. It causes to the herd several diseases such as mastitis, polyarthritis, pneumonia and endometritis. This pathogen is highly contagious and animals with mastitis are potential disseminators of infection to the herd since they release from 106 to 108CFU per mL milk. Similarly, animals with pneumonia eliminate, through respiratory secretions, high microbial loads of the agent. The present study aimed to perform molecular detection of Mycoplasma bovis in 185 milk samples from cows with clinical mastitis, as well as in 50 nasal swab samples from healthy calves with or without signs of pneumonia and born from cows with mastitis, all belonging to four dairy farms in Paraná State, where cases of mastitis had been diagnosed. DNA extraction from both secretions was carried out according to the thermolysis method. For polymerase chain reaction (PCR), generic primers were employed to amplify the Mollicutes DNA and positive samples were subjected to PCR with primers specific for M. bovis. Positivity for M. bovis was 3.78% in mastitic samples, regardless of the farm, and 20% in nasal swabs.(AU)

Mycoplasma bovis forma parte de la microbiota del tracto respiratorio bovino, pero se considera un patógeno oportunista de extrema importancia en las enfermedades respiratorias de los terneros. Provoca en el rebaño diversas enfermedades como mastitis, poliartritis, neumonía y endometritis. Este patógeno es altamente contagioso y los animales con mastitis son potenciales diseminadores de la infección al hato, ya que liberan de 106 a 108 UFC por ml de leche. Asimismo, los animales con neumonía eliminan, através de secreciones respiratorias, altas cargas microbianas del agente. El presente estudio tuvo como objetivo realizar la detección molecular de Mycoplasma bovis en 185 muestras de secretion de mastitis de vacas con mastitis clínica, así como en 50 muestras de hisopos nasales de terneros sanos con o sin signos de neumonía y nacidos de vacas con mastitis, todos pertenecientes a cuatro granjas lecheras en el estado de Paraná, donde se diagnosticaron casos de mastitis. La extracción de ADN de ambas secreciones se realizó mediante el método de termólisis. Para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se utilizaron cebadores genéricos para amplificar el ADN de los Mollicutes y las muestras positivas se sometieron a PCR con cebadores específicos para M. bovis. La positividad para M. bovis fue del 3,78% en muestras de mastitis, independientemente de la granja, y del 20% en hisopos nasales.(AU)

Bovine respiratory disease in Brasil: a short review / Doença respiratória bovina no Brasil: uma breve revisão

The bovine respiratory disease (BRD) complex is a multifactorial and multietiological disease entity described in all geographic regions of Brazil. This brief review discusses aspects related to epidemiology, etiologic agents, clinical and pathological manifestations, and challenges in the diagnosis of BRD in Brazil. The main infectious disease agents associated with respiratory outbreaks in cattle from Brazil are bovine alphaherpesvirus type 1, bovine viral diarrhea virus, bovine respiratory syncytial virus, and Mycoplasma bovis. Ovine gammaherpesvirus-2 and HoBi-like pestivirus have been associated with the development of pneumonia in adult cattle and calves, respectively in Brazil, and should be considered as possible causes of BRD. Additionally, studies using epidemiological data, histopathological and molecular associations with morbidity and mortality should be carried out in Brazil, to demonstrate the real impacts of BRD on livestock.

O complexo da doença respiratória bovina (DRB) é uma enfermidade multifatorial e multietiológica descrita em todas as regiões geográficas do Brasil. Essa breve revisão discute os aspectos relacionados epidemiologia, aos agentes etiológicos, as manifestações clínicas e patológicas e os desafios no diagnóstico da DRB no Brasil. Os principais agentes associados a surtos respiratórios brasileiros são: alfaherpesvírus bovino tipo 1, vírus da diarreia viral bovina, vírus sincicial respiratório bovino e Mycoplasma bovis. Gammaherpesvirus-ovino tipo-2 e HoBi-like pestivírus foram associados ao desenvolvimento de pneumonia em bovinos adultos e bezerros no país, respectivamente, e devem ser considerados como possíveis agentes no desenvolvimento da DRB. Adicionalmente, mais estudos utilizando dados epidemiológicos, associação histopatológica e molecular com morbidade e mortalidade devam ser realizados no Brasil, para demonstrar os verdadeiros efeitos de DRB em bovinos confinados.

Bovine respiratory disease in Brasil: a short review / Doença respiratória bovina no Brasil: uma breve revisão

The bovine respiratory disease (BRD) complex is a multifactorial and multietiological disease entity described in all geographic regions of Brazil. This brief review discusses aspects related to epidemiology, etiologic agents, clinical and pathological manifestations, and challenges in the diagnosis of BRD in Brazil. The main infectious disease agents associated with respiratory outbreaks in cattle from Brazil are bovine alphaherpesvirus type 1, bovine viral diarrhea virus, bovine respiratory syncytial virus, and Mycoplasma bovis. Ovine gammaherpesvirus-2 and HoBi-like pestivirus have been associated with the development of pneumonia in adult cattle and calves, respectively in Brazil, and should be considered as possible causes of BRD. Additionally, studies using epidemiological data, histopathological and molecular associations with morbidity and mortality should be carried out in Brazil, to demonstrate the real impacts of BRD on livestock.(AU)

O complexo da doença respiratória bovina (DRB) é uma enfermidade multifatorial e multietiológica descrita em todas as regiões geográficas do Brasil. Essa breve revisão discute os aspectos relacionados epidemiologia, aos agentes etiológicos, as manifestações clínicas e patológicas e os desafios no diagnóstico da DRB no Brasil. Os principais agentes associados a surtos respiratórios brasileiros são: alfaherpesvírus bovino tipo 1, vírus da diarreia viral bovina, vírus sincicial respiratório bovino e Mycoplasma bovis. Gammaherpesvirus-ovino tipo-2 e HoBi-like pestivírus foram associados ao desenvolvimento de pneumonia em bovinos adultos e bezerros no país, respectivamente, e devem ser considerados como possíveis agentes no desenvolvimento da DRB. Adicionalmente, mais estudos utilizando dados epidemiológicos, associação histopatológica e molecular com morbidade e mortalidade devam ser realizados no Brasil, para demonstrar os verdadeiros efeitos de DRB em bovinos confinados.(AU)

Bovine respiratory disease in Brasil: a short review / Doença respiratória bovina no Brasil: uma breve revisão

The bovine respiratory disease (BRD) complex is a multifactorial and multietiological disease entity described in all geographic regions of Brazil. This brief review discusses aspects related to epidemiology, etiologic agents, clinical and pathological manifestations, and challenges in the diagnosis of BRD in Brazil. The main infectious disease agents associated with respiratory outbreaks in cattle from Brazil are bovine alphaherpesvirus type 1, bovine viral diarrhea virus, bovine respiratory syncytial virus, and Mycoplasma bovis. Ovine gammaherpesvirus-2 and HoBi-like pestivirus have been associated with the development of pneumonia in adult cattle and calves, respectively in Brazil, and should be considered as possible causes of BRD. Additionally, studies using epidemiological data, histopathological and molecular associations with morbidity and mortality should be carried out in Brazil, to demonstrate the real impacts of BRD on livestock.

O complexo da doença respiratória bovina (DRB) é uma enfermidade multifatorial e multietiológica descrita em todas as regiões geográficas do Brasil. Essa breve revisão discute os aspectos relacionados epidemiologia, aos agentes etiológicos, as manifestações clínicas e patológicas e os desafios no diagnóstico da DRB no Brasil. Os principais agentes associados a surtos respiratórios brasileiros são: alfaherpesvírus bovino tipo 1, vírus da diarreia viral bovina, vírus sincicial respiratório bovino e Mycoplasma bovis. Gammaherpesvirus ovino tipo-2 e HoBi-like pestivírus foram associados ao desenvolvimento de pneumonia em bovinos adultos e bezerros no país, respectivamente, e devem ser considerados como possíveis agentes no desenvolvimento da DRB. Adicionalmente, mais estudos utilizando dados epidemiológicos, associação histopatológica e molecular com morbidade e mortalidade devam ser realizados no Brasil, para demonstrar os verdadeiros efeitos de DRB em bovinos confinados.

Bovine respiratory disease in Brasil: a short review / Doença respiratória bovina no Brasil: uma breve revisão

The bovine respiratory disease (BRD) complex is a multifactorial and multietiological disease entity described in all geographic regions of Brazil. This brief review discusses aspects related to epidemiology, etiologic agents, clinical and pathological manifestations, and challenges in the diagnosis of BRD in Brazil. The main infectious disease agents associated with respiratory outbreaks in cattle from Brazil are bovine alphaherpesvirus type 1, bovine viral diarrhea virus, bovine respiratory syncytial virus, and Mycoplasma bovis. Ovine gammaherpesvirus-2 and HoBi-like pestivirus have been associated with the development of pneumonia in adult cattle and calves, respectively in Brazil, and should be considered as possible causes of BRD. Additionally, studies using epidemiological data, histopathological and molecular associations with morbidity and mortality should be carried out in Brazil, to demonstrate the real impacts of BRD on livestock.(AU)

O complexo da doença respiratória bovina (DRB) é uma enfermidade multifatorial e multietiológica descrita em todas as regiões geográficas do Brasil. Essa breve revisão discute os aspectos relacionados epidemiologia, aos agentes etiológicos, as manifestações clínicas e patológicas e os desafios no diagnóstico da DRB no Brasil. Os principais agentes associados a surtos respiratórios brasileiros são: alfaherpesvírus bovino tipo 1, vírus da diarreia viral bovina, vírus sincicial respiratório bovino e Mycoplasma bovis. Gammaherpesvirus ovino tipo-2 e HoBi-like pestivírus foram associados ao desenvolvimento de pneumonia em bovinos adultos e bezerros no país, respectivamente, e devem ser considerados como possíveis agentes no desenvolvimento da DRB. Adicionalmente, mais estudos utilizando dados epidemiológicos, associação histopatológica e molecular com morbidade e mortalidade devam ser realizados no Brasil, para demonstrar os verdadeiros efeitos de DRB em bovinos confinados.(AU)

Microbiological and molecular detection of Mycoplasma bovis in milk samples from bovine clinical mastitis / Detecção microbiológica e molecular de Mycoplasma bovis em amostras de leite oriundas de mastite clínica bovina

The genus Mycoplasma includes more than 200 bacterial species that cause disease in animals. It is responsible for causing mastitis in bovines and may be related to other manifestations, such as arthritis and pneumonia in calves and heifers. The present study aimed to detect Mycoplasma bovis isolated from milk samples of bovine clinical mastitis, and to compare the isolation rates in two culture media: Hayflick and SP4. An initial screening was performed in order to detect the presence of the class Mollicutes in 1166 milk samples from clinical mastitis by the conventional Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. According to the 1166 milk samples evaluated, 8.6% (100/1166) were positive to class Mollicutes. Regarding molecular analyses, 1.1% (13/1166) of conventional PCR for positive M. bovis was obtained and 0.9% (11/1166) in real-time PCR. The results of the microbiological culture of the 100 samples previously screened demonstrated that 6% (6/100) of colony growth have been developed when using the Hayflick medium, and 11% (11/100) when using the SP4 medium (including the positive on Hayflick medium). Concerning the 11 isolates obtained in the microbiological culture, conventional PCR confirmed M. bovis in nine of them, and two cultures were negative. In the phylogenetic analysis of the isolates, all of them were grouped in M. bovis and M. agalactiae clusters. The results confirmed the importance of the presence of M. bovis in the etiology of bovine clinical mastitis and reinforced the need for further studies to elucidate other Mycoplasma species that may be involved in bovine clinical mastitis in Brazil.(AU)

O gênero Mycoplasma inclui mais de 200 espécies que causam doenças nos animais. É responsável por quadros de mastite em bovinos, podendo também estar relacionado à outras manifestações como artrite e pneumonia em bezerros e novilhas. O presente estudo objetivou a detecção de Mycoplasma bovis isolados a partir de amostras de leite de mastite clínica bovina, bem como, a comparação da taxa de isolamento em dois meios de cultura: Hayflick e SP4. Para efeito de triagem amostral, foram avaliadas quanto à presença da classe Mollicutes 1166 amostras de leite de casos de mastite clínica pela técnica de PCR convencional. Das 1166 amostras de leite avaliadas, 8,6% (100/1166) foram positivas à classe. Nas análises moleculares, obteve-se 1,1% (13/1166) de positividade para Mycoplasma bovis na PCR convencional e 0,9% (11/1166) na PCR em tempo real. Os resultados do cultivo microbiológico das 100 amostras triadas previamente demonstraram 6% (6/100) de crescimento de colônias ao se utilizar o meio Hayflick e 11% (11/100) ao se utilizar o meio SP4 (incluindo as positivas ao primeiro). A partir dos 11 isolados obtidos no cultivo microbiológico, a PCR convencional confirmou Mycoplasma bovis em nove deles, e dois foram negativos para o agente. Na análise filogenética dos isolados, todos agruparam no cluster Mycoplasma bovis e Mycoplasma agalactiae. Frente aos resultados, ressalta-se a importância da presença de Mycoplasma bovis na etiologia da mastite clínica bovina e reforça a necessidade de estudos mais aprofundados para a elucidação de outras espécies de micoplasmas que possam estar envolvidas na mastite bovina.(AU)

Microbiological and molecular detection of Mycoplasma bovis in milk samples from bovine clinical mastitis / Detecção microbiológica e molecular de Mycoplasma bovis em amostras de leite oriundas de mastite clínica bovina

The genus Mycoplasma includes more than 200 bacterial species that cause disease in animals. It is responsible for causing mastitis in bovines and may be related to other manifestations, such as arthritis and pneumonia in calves and heifers. The present study aimed to detect Mycoplasma bovis isolated from milk samples of bovine clinical mastitis, and to compare the isolation rates in two culture media: Hayflick and SP4. An initial screening was performed in order to detect the presence of the class Mollicutes in 1166 milk samples from clinical mastitis by the conventional Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. According to the 1166 milk samples evaluated, 8.6% (100/1166) were positive to class Mollicutes. Regarding molecular analyses, 1.1% (13/1166) of conventional PCR for positive M. bovis was obtained and 0.9% (11/1166) in real-time PCR. The results of the microbiological culture of the 100 samples previously screened demonstrated that 6% (6/100) of colony growth have been developed when using the Hayflick medium, and 11% (11/100) when using the SP4 medium (including the positive on Hayflick medium). Concerning the 11 isolates obtained in the microbiological culture, conventional PCR confirmed M. bovis in nine of them, and two cultures were negative. In the phylogenetic analysis of the isolates, all of them were grouped in M. bovis and M. agalactiae clusters. The results confirmed the importance of the presence of M. bovis in the etiology of bovine clinical mastitis and reinforced the need for further studies to elucidate other Mycoplasma species that may be involved in bovine clinical mastitis in Brazil.(AU)

O gênero Mycoplasma inclui mais de 200 espécies que causam doenças nos animais. É responsável por quadros de mastite em bovinos, podendo também estar relacionado à outras manifestações como artrite e pneumonia em bezerros e novilhas. O presente estudo objetivou a detecção de Mycoplasma bovis isolados a partir de amostras de leite de mastite clínica bovina, bem como, a comparação da taxa de isolamento em dois meios de cultura: Hayflick e SP4. Para efeito de triagem amostral, foram avaliadas quanto à presença da classe Mollicutes 1166 amostras de leite de casos de mastite clínica pela técnica de PCR convencional. Das 1166 amostras de leite avaliadas, 8,6% (100/1166) foram positivas à classe. Nas análises moleculares, obteve-se 1,1% (13/1166) de positividade para Mycoplasma bovis na PCR convencional e 0,9% (11/1166) na PCR em tempo real. Os resultados do cultivo microbiológico das 100 amostras triadas previamente demonstraram 6% (6/100) de crescimento de colônias ao se utilizar o meio Hayflick e 11% (11/100) ao se utilizar o meio SP4 (incluindo as positivas ao primeiro). A partir dos 11 isolados obtidos no cultivo microbiológico, a PCR convencional confirmou Mycoplasma bovis em nove deles, e dois foram negativos para o agente. Na análise filogenética dos isolados, todos agruparam no cluster Mycoplasma bovis e Mycoplasma agalactiae. Frente aos resultados, ressalta-se a importância da presença de Mycoplasma bovis na etiologia da mastite clínica bovina e reforça a necessidade de estudos mais aprofundados para a elucidação de outras espécies de micoplasmas que possam estar envolvidas na mastite bovina.(AU)

Prevalência de Mycoplasma bovis em rebanhos de vacas leiteiras

ABSTRACT: Mycoplasma is a highly contagious pathogen, which can cause mastitis, pneumonia, arthritis, among other diseases. Its isolation requires specific means and conditions due to its fastidious growth. Due to the complexity of its diagnosis, it is believed that the real prevalence of mastitis cases by Mycoplasma is underestimated. The objective of the present study was to identify the prevalence of Mycoplasma bovis in different dairy herds in the state of São Paulo. The study was divided into a screening phase in which samples were collected from 67 expansion tanks and individual collection, in which positive properties for M. bovis were visited and collected milk samples from all animals with clinical and subclinical mastitis. The laboratory diagnosis was made through PCR and specific microbiological culture. The prevalence of M. bovis found in the screening phase was 1.4%. In the individual phase, all milk samples from M. bovis positive property in the expansion tank were negative, which allows to conclude the low prevalence of the agent under the conditions of the present study.

RESUMO: Mycoplasma é um patógeno altamente contagioso, podendo causar mastite, pneumonia, artrite, entre outras enfermidades. Seu isolamento requer meios e condições específicas devido ao seu crescimento fastidioso. Devido à complexidade do seu diagnóstico, acredita-se que a real prevalência de casos de mastite por micoplasma seja subestimada. O objetivo do presente estudo foi identificar a prevalência de Mycoplasma bovis em diferentes rebanhos de bovinos leiteiros no estado de São Paulo. O estudo foi dividido em fase de triagem, na qual colheram-se amostras de 67 tanques de expansão e a coleta individual, na qual propriedades positivas para M. bovis foram visitadas e colhidas amostras de leite de todos os animais com mastite clínica e subclínica. O diagnóstico laboratorial foi feito por meio da PCR e cultivo microbiológico específico. A prevalência de M. bovis encontrada na fase de triagem foi de 1,4%. Na fase individual, todas as amostras de leite, procedentes de propriedade positiva para M. bovis no tanque de expansão, foram negativas, o que permite concluir pela baixa prevalência do agente nas condições do presente estudo.

Prevalência de Mycoplasma bovis em rebanhos de vacas leiteiras / Prevalence of Mycoplasma bovis in dairy herds

Mycoplasma é um patógeno altamente contagioso, podendo causar mastite, pneumonia, artrite, entre outras enfermidades. Seu isolamento requer meios e condições específicas devido ao seu crescimento fastidioso. Devido à complexidade do seu diagnóstico, acredita-se que a real prevalência de casos de mastite por micoplasma seja subestimada. O objetivo do presente estudo foi identificar a prevalência de Mycoplasma bovis em diferentes rebanhos de bovinos leiteiros no estado de São Paulo. O estudo foi dividido em fase de triagem, na qual colheram-se amostras de 67 tanques de expansão e a coleta individual, na qual propriedades positivas para M. bovis foram visitadas e colhidas amostras de leite de todos os animais com mastite clínica e subclínica. O diagnóstico laboratorial foi feito por meio da PCR e cultivo microbiológico específico. A prevalência de M. bovis encontrada na fase de triagem foi de 1,4%. Na fase individual, todas as amostras de leite, procedentes de propriedade positiva para M. bovis no tanque de expansão, foram negativas, o que permite concluir pela baixa prevalência do agente nas condições do presente estudo.(AU)

Mycoplasma is a highly contagious pathogen, which can cause mastitis, pneumonia, arthritis, among other diseases. Its isolation requires specific means and conditions due to its fastidious growth. Due to the complexity of its diagnosis, it is believed that the real prevalence of mastitis cases by Mycoplasma is underestimated. The objective of the present study was to identify the prevalence of Mycoplasma bovis in ​​different dairy herds in the state of São Paulo. The study was divided into a screening phase in which samples were collected from 67 expansion tanks and individual collection, in which positive properties for M. bovis were visited and collected milk samples from all animals with clinical and subclinical mastitis. The laboratory diagnosis was made through PCR and specific microbiological culture. The prevalence of M. bovis found in the screening phase was 1.4%. In the individual phase, all milk samples from M. bovis positive property in the expansion tank were negative, which allows to conclude the low prevalence of the agent under the conditions of the present study.(AU)

Prevalência de Mycoplasma bovis em rebanhos de vacas leiteiras / Prevalence of Mycoplasma bovis in dairy herds

Mycoplasma é um patógeno altamente contagioso, podendo causar mastite, pneumonia, artrite, entre outras enfermidades. Seu isolamento requer meios e condições específicas devido ao seu crescimento fastidioso. Devido à complexidade do seu diagnóstico, acredita-se que a real prevalência de casos de mastite por micoplasma seja subestimada. O objetivo do presente estudo foi identificar a prevalência de Mycoplasma bovis em diferentes rebanhos de bovinos leiteiros no estado de São Paulo. O estudo foi dividido em fase de triagem, na qual colheram-se amostras de 67 tanques de expansão e a coleta individual, na qual propriedades positivas para M. bovis foram visitadas e colhidas amostras de leite de todos os animais com mastite clínica e subclínica. O diagnóstico laboratorial foi feito por meio da PCR e cultivo microbiológico específico. A prevalência de M. bovis encontrada na fase de triagem foi de 1,4%. Na fase individual, todas as amostras de leite, procedentes de propriedade positiva para M. bovis no tanque de expansão, foram negativas, o que permite concluir pela baixa prevalência do agente nas condições do presente estudo.(AU)

Mycoplasma is a highly contagious pathogen, which can cause mastitis, pneumonia, arthritis, among other diseases. Its isolation requires specific means and conditions due to its fastidious growth. Due to the complexity of its diagnosis, it is believed that the real prevalence of mastitis cases by Mycoplasma is underestimated. The objective of the present study was to identify the prevalence of Mycoplasma bovis in ​​different dairy herds in the state of São Paulo. The study was divided into a screening phase in which samples were collected from 67 expansion tanks and individual collection, in which positive properties for M. bovis were visited and collected milk samples from all animals with clinical and subclinical mastitis. The laboratory diagnosis was made through PCR and specific microbiological culture. The prevalence of M. bovis found in the screening phase was 1.4%. In the individual phase, all milk samples from M. bovis positive property in the expansion tank were negative, which allows to conclude the low prevalence of the agent under the conditions of the present study.(AU)

Identification of subclinical mastitis caused by Mycoplasma spp. from screenings of bulk tanks / Identificação de mastite subclínica causada por Mycoplasma spp. de triagem de tanques de expansão

Mastitis caused by Mycoplasma spp., regardless of species, are considered highly contagious pathogens and, usually was not responsive to antimicrobial therapy. Five dairy herds, comprising 489 animals and 1,956 mammary glands, were used in this study. Milk samples were obtained from bulk tanks and subjected to polymerase chain reaction (PCR) for the identification of Mollicutes, Mycoplasma spp., and Mycoplasma bovis. Moreover, individual samples from cases of clinical and subclinical mastitis in quarters of the dairy herds' animals that yielded a positive PCR upon bulk tank analysis were subjected to molecular analysis. Only one bulk tank was positive for class Mollicutes by PCR. All positive samples classified as mastitis teats had their DNA extracted and tested by PCR for both class Mollicutes and M. bovis. Of these, two (2.08%) were positive for Mycoplasma genus, although none was positive for M. bovis. This result suggests that the PCR of bulk tanks is a viable tool in monitoring and preventing mastitis infections caused by Mycoplasma spp.(AU)

Mastites bovinas causadas por Mycoplasma spp., independentemente da espécie causadora, são consideradas de alta contagiosidade e geralmente não responsivas à terapia antimicrobiana. Cinco propriedades leiteiras foram utilizadas neste estudo, totalizando 489 animais e 1956 quartos mamários. As amostras de leite foram obtidas de tanques de expansão e submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para pesquisa de Mollicutes, Mycoplasma spp. e Mycoplasma bovis. Apenas um tanque de uma propriedade foi positivo na PCR para a classe Mollicutes. Amostras individuais de casos de mastite subclínica provenientes de propriedade com tanque positivo também foram submetidas à análise molecular; dessas, duas delas (2,08%) foram positivas para a classe Mollicutes e para o gênero Mycoplasma, entretanto nenhuma foi positiva para a espécie Mycoplasma bovis. Isso sugere que a PCR de tanques de expansão de propriedades leiteiras demonstra ser uma ferramenta viável no monitoramento e na prevenção de infecções por Mycoplasma spp.(AU)

Identification of subclinical mastitis caused by Mycoplasma spp. from screenings of bulk tanks / Identificação de mastite subclínica causada por Mycoplasma spp. de triagem de tanques de expansão

Mastitis caused by Mycoplasma spp., regardless of species, are considered highly contagious pathogens and, usually was not responsive to antimicrobial therapy. Five dairy herds, comprising 489 animals and 1,956 mammary glands, were used in this study. Milk samples were obtained from bulk tanks and subjected to polymerase chain reaction (PCR) for the identification of Mollicutes, Mycoplasma spp., and Mycoplasma bovis. Moreover, individual samples from cases of clinical and subclinical mastitis in quarters of the dairy herds' animals that yielded a positive PCR upon bulk tank analysis were subjected to molecular analysis. Only one bulk tank was positive for class Mollicutes by PCR. All positive samples classified as mastitis teats had their DNA extracted and tested by PCR for both class Mollicutes and M. bovis. Of these, two (2.08%) were positive for Mycoplasma genus, although none was positive for M. bovis. This result suggests that the PCR of bulk tanks is a viable tool in monitoring and preventing mastitis infections caused by Mycoplasma spp.(AU)

Mastites bovinas causadas por Mycoplasma spp., independentemente da espécie causadora, são consideradas de alta contagiosidade e geralmente não responsivas à terapia antimicrobiana. Cinco propriedades leiteiras foram utilizadas neste estudo, totalizando 489 animais e 1956 quartos mamários. As amostras de leite foram obtidas de tanques de expansão e submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para pesquisa de Mollicutes, Mycoplasma spp. e Mycoplasma bovis. Apenas um tanque de uma propriedade foi positivo na PCR para a classe Mollicutes. Amostras individuais de casos de mastite subclínica provenientes de propriedade com tanque positivo também foram submetidas à análise molecular; dessas, duas delas (2,08%) foram positivas para a classe Mollicutes e para o gênero Mycoplasma, entretanto nenhuma foi positiva para a espécie Mycoplasma bovis. Isso sugere que a PCR de tanques de expansão de propriedades leiteiras demonstra ser uma ferramenta viável no monitoramento e na prevenção de infecções por Mycoplasma spp.(AU)

Bacterial pathogens of the lower respiratory tract of calves from Brazilian rural settlement herds and their association with clinical signs of bovine respiratory disease / Patógenos bacterianos do trato respiratório inferior de bezerros criados em rebanhos de assentamentos brasileiros e sua associação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is considered the major cause of economic losses in dairy and beef cattle production. The study aimed to detect the most important bacteria related to respiratory disease in tracheobronchial fluid samples of healthy and dairy calves with clinical signs of BRD in Brazilian rural settlements. Hundred and forty-one mongrel dairy calves were randomly selected from 42 family farm dairy herds from Brazilian settlements. Physical examination was performed and calves were classified as healthy (n=100) and BRD (n=41). Tracheobronchial fluid samples were collected. Isolation and molecular detection of Mycoplasma dispar, M. bovis and M. mycoides subsp. mycoides SC besides isolation of other aerobic bacteria were performed. Abnormal lung sounds (crackle/snoring/whistle), mucopurulent/purulent nasal discharge, body temperature >39.5°C and respiratory rate >40 breaths/min were higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and non-fermentative Gram-negative were the most prevalent bacteria isolated. Non-identified species from Enterobacteriaceae family was higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Mollicutes were isolated in 7.4% of samples and only M. dispar was detected. Mollicutes was associated with purulent/mucopurulent nasal discharge (P=0.017). Pantoea agglomerans was associated to tachypnea (P=0.020), and Streptococcus spp. was associated with hyperthermia. Statistical tendencies were observed to M. dispar and tachypnea (P=0.066), and P. agglomerans and tachycardia (P=0.066). The obtained results describe the microorganisms found in tracheobronchial fluid of calves with BRD in some herds of Brazilian family farming and their relation to clinical signs of BRD.(AU)

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é considerada a principal causa de perdas econômicas nas produções de leite e carne. O objetivo deste estudo foi detectar as mais importantes bactérias relacionadas a doença respiratória presentes em amostras de lavado traqueobrônquico de bezerros sadios e com sinais clínicos da DRB de assentamentos brasileiros. Cento e quarenta e um bezerros leiteiros sem raça definida foram randomicamente selecionados de 42 rebanhos leiteiros de assentamentos brasileiros. Exame físico foi realizado e os animais foram classificados em sadios (n=100) e com DRB (n=41). Amostras de lavado traqueobrônquico foram coletadas. Foram realizados o isolamento e a detecção molecular de Mycoplasma dispar, M. bovis e M. mycoides subsp. mycoides SC além de isolamento de outras bactérias aeróbias. Ruídos pulmonares anormais (crepitação/ ronco/sibilo), secreção nasal mucopurulenta/purulenta, temperatura corporal >39.5°C e frequência respiratória >40 movimentos respiratórios/min foram observados com maior frequência em bezerros com DRB comparado aos animais sadios (P<0.05). Bacillus sp, Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras foram as bactérias mais prevalentes. Bactérias da família Enterobacteriaceae cuja espécie não fora identificada foram mais frequentes em bezerros com DRB comparado aos bezerros sadios (P<0.05). Mollicutes foram isolados em 7,4% das amostras e somente M. dispar foi detectado. Mollicutes foi associado à secreção nasal purulenta/mucopurulenta (P=0.017). Pantoea agglomerans foi associada a taquipneia (P=0.020), e Streptococcus spp. Foi associado a hipertermia. Tendência estatística foi observada para M. dispar e taquipneia (P=0.066), e P. agglomerans e taquicardia (P=0.066). Os resultados obtidos descrevem os micro-organismos encontrados no lavado traqueobrônquico de bezerros com DRB em rebanhos de agricultura familiar brasileira e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.(AU)

Bacterial pathogens of the lower respiratory tract of calves from Brazilian rural settlement herds and their association with clinical signs of bovine respiratory disease / Patógenos bacterianos do trato respiratório inferior de bezerros criados em rebanhos de assentamentos brasileiros e sua associação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is considered the major cause of economic losses in dairy and beef cattle production. The study aimed to detect the most important bacteria related to respiratory disease in tracheobronchial fluid samples of healthy and dairy calves with clinical signs of BRD in Brazilian rural settlements. Hundred and forty-one mongrel dairy calves were randomly selected from 42 family farm dairy herds from Brazilian settlements. Physical examination was performed and calves were classified as healthy (n=100) and BRD (n=41). Tracheobronchial fluid samples were collected. Isolation and molecular detection of Mycoplasma dispar, M. bovis and M. mycoides subsp. mycoides SC besides isolation of other aerobic bacteria were performed. Abnormal lung sounds (crackle/snoring/whistle), mucopurulent/purulent nasal discharge, body temperature >39.5°C and respiratory rate >40 breaths/min were higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and non-fermentative Gram-negative were the most prevalent bacteria isolated. Non-identified species from Enterobacteriaceae family was higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Mollicutes were isolated in 7.4% of samples and only M. dispar was detected. Mollicutes was associated with purulent/mucopurulent nasal discharge (P=0.017). Pantoea agglomerans was associated to tachypnea (P=0.020), and Streptococcus spp. was associated with hyperthermia. Statistical tendencies were observed to M. dispar and tachypnea (P=0.066), and P. agglomerans and tachycardia (P=0.066). The obtained results describe the microorganisms found in tracheobronchial fluid of calves with BRD in some herds of Brazilian family farming and their relation to clinical signs of BRD.(AU)

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é considerada a principal causa de perdas econômicas nas produções de leite e carne. O objetivo deste estudo foi detectar as mais importantes bactérias relacionadas a doença respiratória presentes em amostras de lavado traqueobrônquico de bezerros sadios e com sinais clínicos da DRB de assentamentos brasileiros. Cento e quarenta e um bezerros leiteiros sem raça definida foram randomicamente selecionados de 42 rebanhos leiteiros de assentamentos brasileiros. Exame físico foi realizado e os animais foram classificados em sadios (n=100) e com DRB (n=41). Amostras de lavado traqueobrônquico foram coletadas. Foram realizados o isolamento e a detecção molecular de Mycoplasma dispar, M. bovis e M. mycoides subsp. mycoides SC além de isolamento de outras bactérias aeróbias. Ruídos pulmonares anormais (crepitação/ ronco/sibilo), secreção nasal mucopurulenta/purulenta, temperatura corporal >39.5°C e frequência respiratória >40 movimentos respiratórios/min foram observados com maior frequência em bezerros com DRB comparado aos animais sadios (P<0.05). Bacillus sp, Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras foram as bactérias mais prevalentes. Bactérias da família Enterobacteriaceae cuja espécie não fora identificada foram mais frequentes em bezerros com DRB comparado aos bezerros sadios (P<0.05). Mollicutes foram isolados em 7,4% das amostras e somente M. dispar foi detectado. Mollicutes foi associado à secreção nasal purulenta/mucopurulenta (P=0.017). Pantoea agglomerans foi associada a taquipneia (P=0.020), e Streptococcus spp. Foi associado a hipertermia. Tendência estatística foi observada para M. dispar e taquipneia (P=0.066), e P. agglomerans e taquicardia (P=0.066). Os resultados obtidos descrevem os micro-organismos encontrados no lavado traqueobrônquico de bezerros com DRB em rebanhos de agricultura familiar brasileira e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.(AU)

Etioligia de las mastitis: participación de microorganismos de la clase Mollicutes / Etiology of mastitis: participation of mocroorganisms of the class Mollicutes / Etiologia das mastites: pesquisa de micro-organismos da classe Mollicutes

La mastitis es la principal afección del ganado destinado a la producción lechera, que pesa el productor y la industria láctea. En el primer caso por la pérdida en cuanto a la producción, y en el segundo por el menor rendimiento industrial de los derivados lácteos. Es una enfermedad multifactorial, de múltiple etiología, incluyendo microorganismos como bacterias, virus, hongos, levaduras y algas. Entre los microorganismos bacterianos se destacan los estafilococos coagulosa-positivos (SCP) y la negativa (SCN), siendo el principal Staphylococcus aureus y varias especies de SCN, todas caracterizadas como contagiosas, además de Corynebacterium bovis. Con una elevada contagiosidad se tiene Mycoplasma spp., Con destaque para M. bovis importante patógeno en otros países, sin embargo, menos estudiado en Brasil. El objetivo del presente estudio fue evaluar la presencia de bacterias de la clase Mollicutes, en muestras de leche bovina con mastitis clínica, a partir de técnicas moleculares. De las 170 muestras de leche evaluadas, procedentes de cuatro propiedades lecheras de pequeño porte de la región de Botucatu, no fue posible detectar la presencia de Mollicutes.(AU)

Mastitis is the main disease of livestock destined for dairy production, which affects the dairy producer and the dairy industry. In the first case the loss of production, and the second because of the lower industrial yield of dairy products. It is a multifactorial, multiple etiology, including microorganisms such as bacteria, viruses, fungi, yeasts and algae. Staphylococcus aureus and several species of SCN, all characterized as contagious, in addition to Corynebacterium bovis, are prominent among bacterial microorganisms (SCP) and negative (SCN) staphylococci. Mycoplasma spp. Is highly contagious, with M. bovis being an important pathogen in other countries, but less studied in Brazil. The objective of the present study was to evaluate the presence of bacteria of the class Mollicutesin samples of bovine milk with clinical mastitis, based on molecular techniques. Of the 170 milk samples evaluated, from four small dairy farms in the Botucatu region, it was not possible to detect the presence of Mollicutes.(AU)

A mastite é a principal afecção do gado destinado à produção leiteira, que onera o produtor e a indústria de laticínios. No primeiro caso pela perda quanto a produção, e no segundo pelo menor rendimento industrial dos derivados lácteos. É uma enfermidade multifatorial, de múltipla etiologia, incluindo micro-organismos como bactérias, vírus, fungos, leveduras e algas. Entre os micro-organismos bacterianos ganham destaque os estafilococos coagulase-positivas (SCP) e negativa (SCN), sendo o principal Staphylococcus aureus e várias espécies de SCN, todas caracterizadas como contagiosos, além de Corynebacterium bovis. Com elevada contagiosidade tem-se Mycoplasma spp., com destaque para M. bovis importante patógeno em outros países, entretanto, menos estudado no Brasil. O objetivo do presente estudo foi avaliar a presença de bactérias da classe Mollicutes, em amostras de leite bovino com mastite clinica, a partir de técnicas moleculares. Das 170 amostras de leite avaliadas, procedentes de quatro propriedades leiteiras de pequeno porte da região de Botucatu, não foi possível detectar a presença de Mollicutes.(AU)