Efeito da atividade física moderada sobre neurônios mioentéricos nitrérgicos do íleo de ratos de meia idade / The effect of moderate physical activity on myoenteric nitrergic neurons in the ileum of middle-aged rats / Efecto de la actividad física moderada en neuronas mientéricas nitrérgicas del íleon de ratas de mediana edad

Poucos são os relatos a respeito do efeito da atividade física sobre o plexo mioentérico ao longo do envelhecimento. Portanto, analisaram-se os neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do íleo em ratos que envelheceram praticando atividade física a partir dos seis meses de vida. Dez ratos Wistar foram distribuídos em dois grupos (n = 5/grupo): S (ratos sedentários controles com 12 meses de idade) e T (ratos treinados com 12 meses de idade). Os animais do grupo T realizaram, dos seis aos 12 meses de idade, atividade física regulada conforme resultados obtidos em teste de esforço máximo. Ao final do período experimental, o íleo obtido de cada animal foi processado para a técnica de NADPH-diaforase para evidenciar neurônios mioentéricos em preparados de membrana e quantificar e mensurar a área do pericário desses neurônios. A área do pericário não diferiu (P> 0,05) entre o grupo S (218,49 µm2) e o grupo T (210,59 µm2). A média de neurônios presente em 60 campos microscópicos de preparados de membranas no grupo S (126 neurônios) foi superior (P<0,05) a média encontrada no grupo T (93 neurônios), sugerindo que a atividade física pode inibir ou diminuir a expressão dos neurônios nitrérgicos em ratos de 12 meses de idade que praticaram atividade física desde os seis meses de vida. Os resultados quantitativos sugerem que a falta de atividade física regular propicia aumento na atividade dos neurônios nitrérgicos, contribuindo para o surgimento dos distúrbios da motricidade gastrointestinal que podem ocorrer ao longo do envelhecimento.(AU)

There are only a few reports on the effect of physical activity in the myoenteric plexus throughout the aging process. For such, the positive myoenteric NADPH-diaphoresis neurons in the ileum of those rats that aged practicing physical activity from the sixth month were analyzed. Ten Wistar rats were distributed into two groups (n= 5/group): S (12 months-old control sedentary rats) and T (12 months-old trained rats). The animals from the T group practiced controlled physical activity from the age of 6 months to 12 months, according to the maximum effort test results. At the end of the experimental period, the ileum obtained from each animal was processed in the NADPH-diaphoresis technique to highlight myoenteric neurons in membrane preparations, and quantify and measure the perikaryon area from those neurons. The Perikaryon area did not differ (P>0.05) among the S group (218.49 µm2) and the T group (210.59 µm2). The average of neurons in 60 membrane preparations in the S group (126 neurons) was higher (P<0.05) than the average finding in the T group (93 neurons), indicating that the physical activity can inhibit or decrease the nitrergic expression in 12 month-old rats that have practiced physical activity from the age of 6 months. The quantitative results suggest that the lack of regular physical activity provides the elevation of nitrergic neurons, concurring to the emergence of gastrointestinal motility disorders that can occur during the aging process.(AU)

Hay pocos informes sobre el efecto de la actividad física sobre el plexo mientérico a lo largo del envejecimiento. Por lo tanto, se analizaron las neuronas mientéricas NADPH-diaforasa positivas del íleon en ratas que envejecieron practicando actividad física a partir de seis meses de vida. Diez ratas Wistar se dividieron en dos grupos (n = 5 / grupo): S (ratas sedentarias de control con 12 meses de edad) y T (ratas entrenadas con 12 meses de edad). Los animales del grupo T realizaron, de los seis a los doce meses de edad, actividad física regulada conforme resultados obtenidos en prueba de esfuerzo máximo. Al final del período experimental, el íleon obtenido de cada animal se procesó por la técnica de NADPH-diaforasa para mostrar las neuronas mientéricas en preparados de membrana, cuantificar y medir el área del pericario de esas neuronas. El área del pericario no difirió (P> 0.05) entre el grupo S (218.49 µm2) y el grupo T (210.59 µm2). El número medio de neuronas presentes en 60 campos microscópicos de preparados de membranas en el grupo S (126 neuronas) fue mayor (P <0,05), promedio encontrado en el grupo T (93 neuronas), lo que sugiere que la actividad física puede inhibir o disminuir la expresión de las neuronas nitrérgicas en ratas de 12 meses de edad que practicaron actividad física desde los seis meses de edad. Los resultados cuantitativos sugieren que la falta de actividad física regular promueve aumento en la actividad de las neuronas nitrérgicas, contribuyendo a la aparición de disturbios de la motricidad gastrointestinal que pueden ocurrir a lo largo del envejecimiento.(AU)

Investigação dos efeitos do ácido 2, 4 diclorofenoxiacético sobre diferentes populações de neurônios mioentéricos do duodeno de ratos / Investigation of 2, 4 dichlorophenoxyacetic acid effects in different population of rat duodenum myenteric neurons / Investigación de los efectos del ácido 2, 4 diclorofenoxiacético sobre diferentes poblaciones de neuronas mioentéricas del duodeno de ratones

O herbicida mais usado, tanto em pequenas como em grandes propriedades, por isso mais amplamente estudado é o 2,4-D. Os estudos de toxicidade têm se concentrado sobre as alterações do sistema nervoso central, e por isto pouco se conhece sobre seus efeitos no sistema nervoso entérico. Com o objetivo de avaliar os efeitos do 2,4-D sobre os neurônios mioentéricos do duodeno de ratos foi fornecido durante 60 dias doses de 2,4-D na concentração de 5mg/kg de peso de corpóreo para ratosWistarde dois grupos experimentais (n=5). Os animais dos grupos controle permaneceram o mesmo período sem receber 2,4-D. Ao final do período experimental os animais foram mortos, os duodenos foram coletados e processados por meio das técnicas histoquímicas de NADH-diaforase e NADPH-diaforase. Os neurônios foram quantificados e os resultados foram analisados estatisticamente. A densidade dos neurônios NADHd diferiu estatisticamente (P?0,05) entre os grupos experimental e controle, sendo maior no grupo controle. Já os neurônios NADPHd foram encontrados em maior quantidade no grupo experimental. Estes resultados sugerem que o 2,4-D possui ação neurotóxica sobre os neurônios do plexo mioentérico, interferindo na densidade neuronal mioentérica, quando se compara diferentes populações destes neurônios.(AU)

The 2,4-D herbicide is the most widely used, both in small and in large properties. Therefore, it is also the one that is most broadly studied. Toxicity studies have been focused on changes in the central nervous system, and for this reason, little is known about its effect in the enteric nervous system. With the objective of measuring the effects of 2,4-D on the myenteric neurons in the duodenum of rats, doses of 2,4-D were supplied for 60 days at a concentration of 5mg/kg of body weight to Wistar rats divided into two different experimental groups (n=5). The animals in the control groups remained without 2,4-D doses for the same period. At the end of the experimental period, the animals were euthanized and their duodenum were collected and processed through NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase histochemical techniques. The neurons were quantified and the results were statistically analyzed. The density of NADHd neurons differed statistically (P< 0,05) between the experimental and control groups, being higher in the control group. However, NADPHd neurons were found in a greater quantity in the experimental group. These results suggest that the 2,4-D has a neurotoxic action in the neurons from the myenteric plexus, interfering in the myenteric neuronal density, when different population of these neurons are compared.(AU)

El herbicida más utilizado, tanto en pequeñas como en grandes propiedades es el 2,4-D, por eso lo más estudiado. Los estudios de toxicidad se han centrado sobre las alteraciones del sistema nervioso central, y por lo tanto, poco se sabe sobre sus efectos en el sistema nervioso entérico. Con el objetivo de evaluar los efectos del 2,4-D sobre las neuronas mioentéricas del duodeno de ratas se ha administrado durante 60 días dosis de 2,4-D en la concentración de 5mg/kg de peso corporal para ratones Wistarde, dos grupos experimentales (n = 5). Los animales de los grupos control permanecieron el mismo período sin recibir el 2,4-D. Al final del periodo experimental los animales fueron sacrificados, los duodenos fueron recogidos y procesados a través de las técnicas de histoquímicas de NADH-diaforasa y NADPH-diaforasa. Las neuronas fueron cuantificadas y los resultados analizados estadísticamente. La densidad de las neuronas NADHd difirió estadísticamente (P?0,05) entre los grupos experimental y control, siendo mayor en el grupo control. Ya las neuronas NADPHd se encontraron en mayor cantidad en el grupo experimental. Estos resultados sugieren que el 2,4-D tiene una acción neurotóxica sobre las neuronas del plexo mioentérico, lo que interfiere en la densidad neuronal mioentérica al comparar diferentes poblaciones de estas neuronas. (AU)

Hemoplasma prevalence and hematological abnormalities associated with infection in three different cat populations from Southern Brazil / Prevalência da infecção por hemoplasmas e alterações hematológicas associadas à infecção em três diferentes populações de gatos do sul do Brasil

Three hemoplasma species are recognized in domestic cats: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. We report the prevalence and hematological abnormalities of hemoplasma infection in 369 domestic cats from three different populations (blood donors, hospitalized cats and shelter cats) from Southern Brazil. Complete blood counts were performed at the time of blood collection, and DNA was extracted and tested by conventional PCR for each hemoplasma species. A total of 79 samples (21.40%) were positive for at least one species. The most prevalent hemoplasma was ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, with 50/369 (13.55%) positive cats, followed by ‘Candidatus Mycoplasma turicensis, 10/369 (2.71%), and Mycoplasma haemofelis, 8/369 (2.16%). Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum coinfection was observed in 4/369 (1.08%), whereas ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis in 5/369 (1.35%). Three cats (0.81%) were infected with all three hemoplasmas. There was no association between infection and the different populations. Anemia was associated with Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, but not with ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. Male cats and cats with outdoor access were more likely to be infected. Although ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum is believed to cause minimal or no hematological alterations, the infected cats studied herein were more likely to be anemic.

Três espécies de hemoplasmas são reconhecidas em gatos domésticos: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. A prevalência e alterações hematológicas associadas à infecção por hemoplasmas foi estudada, em 369 gatos domésticos de três populações distintas (doadores de sangue, hospitais e gatos de abrigo) do Sul do Brasil. Foram realizados hemogramas completos no momento da coleta de sangue e as amostras tiveram seu DNA extraído e testado por PCR convencional para cada espécie de hemoplasmas. Setenta e nove amostras (21,40%) foram positivas para pelo menos uma espécie. O mais prevalente foi ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum com 50/369 (13,55%) gatos positivos, seguidos por ‘Candidatus Mycoplasma turicensis com 10/369 (2,71%) e Mycoplasma haemofelis com 8/369 (2,16%). Coinfecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum foi observada em 4/369 (1,08%), enquanto ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis coinfectaram 5/369 (1,35%) gatos. Três (0,81%) gatos apresentaram infecção pelos três hemoplasmas. Não houve associação entre a infecção e as diferentes populações. Anemia foi associada com a infecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, mas não com ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. Gatos machos e com acesso à rua apresentaram maior probabilidade de serem infectados. Embora se acredite que ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum possa causar alterações hematológicas mínimas ou ausentes, gatos infectados encontrados neste estudo foram mais propensos à anemia.

Assessment of NADPH-diaphorase stained myenteric neurons of the jejunum of diabetic rats supplemented with ascorbic acid

The relation between hyperglycemia and diabetic neuropathy has already been demonstrated in some studies. Among the theories proposed for its etiology the oxidative stress stands out. The performance of nitric oxide as a link between the metabolic and vascular neuropathogenic factors that triggers the diabetic neuropathy has already been put forward. This study aimed to assess the quantification and measurements of the cell body profile area (CBPA) of NADPH-diaphorase reactive (NADPH-dp) myenteric neurons of the jejunum of diabetic rats (induced by streptozotocin) supplemented with Ascorbic Acid (AA). These changes in the myenteric neurons seem to be related to the gastrointestinal disturbances observed in diabetes mellitus (DM). Twenty male Wistar rats (Rattus norvegicus) were distributed in 4 groups (n=5): controls (C), control supplemented (CS), diabetic (D), and diabetic suplemented (DS). DM was induced by estreptozotocin (50mg/kg body wt). One week after the induction and confirmation of the DM (glycemia exam), animals of the groups CS and DS received 50mg of AA three times a week by gavage. After 90 days of experiment, the animals were anesthetized with lethal thiopental dose (40mg/kg) and the collected jejunum processed for the histochemistry NADPH-diaphorase technique. Whole-mount preparations were obtained for quantitative and morphometric analysis of the myenteric neurons. A quantity of jejunum neurons in the Group D (96±7.5) was not different (P>0.05) from Group DS (116±8.08), C (92±9.7), and CS (81±5.4), but in Group DS the quantity was higher (P<0.05) than in Group C and CS. The CBPA of neurons from Group D (189.50±2.68µm²) and DS (195.92±3.75µm²) were lower (P<0.05) than from Group C (225.13±4.37µm²) and CS (210.23±3.15µm²). The streptozotocin-induced DM did not change the jejunum-ileum area, the jejunum myenteric plexus space organization and the density of NADPH-dp ...(AU)

A relação entre hiperglicemia e neuropatia diabética foi demonstrada em várias pesquisas. Entre as teorias propostas para sua etiologia destaca-se o estresse oxidativo. O papel do óxido nítrico como elo entre os fatores neuropatogênicos metabólico e vascular que ativam a neuropatia diabética tem sido ressaltado. Este estudo objetivou avaliar a quantificação e a morfometria da área do perfil do corpo celular (CBPA) de neurônios mioentéricos NADPH-diaforase reativos (NADPH-dp) do jejuno de ratos diabéticos e suplementados com Ácido Ascórbico (AA), uma vez que alterações nos neurônios mioentéricos parecem estar relacionadas aos distúrbios gastrointestinais observados no diabetes mellitus (DM). Vinte ratos machos da linhagem Wistar (Rattus norvergicus) foram distribuídos em 4 grupos (n=5): controle (C), controle suplementado (CS), diabético (D) e diabético suplementado (DS). O DM foi induzido através de injeção de estreptozootocina (50mg/kg de peso corporal). Uma semana depois da indução e confirmação do DM (glicemia), animais dos grupos CS e DS receberam, via gavagem, 50mg de AA três vezes por semana. Após 90 dias de período experimental, os animais foram anestesiados com dose letal de thiopental intravenosa (40mg/kg) e o jejuno foi retirado e processado para a técnica histoquímica da NADPH-diaforase. Preparados de membrana foram obtidos para análises quantitativa e morfométrica dos neurônios mioentéricos. A quantidade de neurônios do jejuno do Grupo D (96±7,5) não diferiu (P>0,05) dos Grupos DS (116±8,08), C (92±9,7) e CS (81±5,4), mas no Grupo DS o número de neurônios foi superior (P<0,05) aos Grupos C e CS. A CBPA de neurônios do Grupo D (189,50±2,68µm²) e DS (195,92±3,75µm²) foi menor (P<0,05) do que a dos Grupos C (225,13±4,37µm²) e CS (210,23±3,15µm²). O DM induzido por estreptozootocina não alterou a área do jejuno-íleo, a organização espacial do plexo mioentérico e a densidade...(AU)

The number and profile of reactive NADH-d and NADPH-d neurons of myenteric plexus of six-month-old rats are different in the cecum portions / O número de neurônios e a área do perfil neuronal NADH-d e NADPH-d reativos do plexo mioentérico de ratos com seis meses de idade são diferentes nas diferentes porções e regiões do ceco

Whole-mount preparations were prepared and submitted to NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase histochemistry techniques. The myenteric plexus arrangement and the number of neurons were comparatively evaluated among the different portions of the cecum. The neurons from the apical and basal regions were distributed in classes at intervals of 100µm², the means of the corresponding intervals being compared. The ganglia, in both techniques, were often connected by fine bundles, which became thicker in the mesenteric region and in the region next to the cecal ampulla. The number of positive NADH-d neurons was higher than that of NADPH-d neurons in all portions, from both regions. The numbers of reactive NADH-d e NADPH-d neurons were significantly different among the different portions of the cecum, except for the antimesenteric basal and intermediate basal regions, considering the NADH-d neurons. The profile area for the reactive NADH-d e NADPH-d neurons was higher in the apical region than in the basal area. Differences in arrangement, distribution and size of positive NADH-d e NADPH-d neurons in the different cecum portions evidenced the importance of the subdivision of the analyzed organ.(AU)

Estudaram-se o arranjo do plexo mioentérico, o número de neurônios e a área do perfil do corpo celular (µm²) dos neurônios mioentéricos, nas regiões apical e basal do ceco de ratos Wistar com 6 meses de idade. Estas regiões foram subdivididas nas seguintes porções: apical mesentérica (AM); apical intermediária (AI); apical antimesentérica (AA); próximo à ampola cecal (PA); basal intermediária (BI), e basal antimesentérica (BA). Foram montados preparados de membrana que receberam as técnicas histoquímica de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d). O arranjo do plexo mioentérico e o número de neurônios foram avaliados comparativamente entre as diferentes porções das regiões do ceco. Os neurônios das regiões apical e basal foram distribuídos em classes com intervalos de 100µm², sendo comparadas às médias da mensuração dos pares. Os gânglios, em ambas as técnicas, apresentavam-se, em geral, conectados por feixes delicados, tornando-se mais espessos na porção mesentérica e naquela próxima à ampola cecal. O número de neurônios NADH-d positivos foi maior do que o de NADPH-d em todas as porções, de ambas as regiões. O número de neurônios reativos a NADH-d e NADPH-d foi significativamente diferente entre as diferentes porções do ceco, com exceção das comparações entre as porções basal antimesentérica e basal intermediária, para os primeiros; e entre a basal intermediária e porção próxima à ampola cecal, e comparando-se a apical mesentérica e porção próxima à ampola cecal, para os neurônios NADPH-d positivos. A área do perfil dos neurônios NADH-d e NADPH-d reativos foi maior na região apical do que na basal. Pela primeira vez, o número de neurônios do plexo mioentérico é reportado em porções pré-estabelecidas do ceco de ratos. Nossos resultados reiteram a importância da indicação precisa da porção estudada em pesquisas envolvendo este segmento intestinal.(AU)