Quantification of the neurons of myenteric plexus of the bat molossus rufus / Quantificação dos neurônios do plexo mientérico de morcegos da espécie Molossus rufus

There are no studies that characterize the enteric nervous system (ENS) bats. The organization and density of myenteric neurons may vary according to the animal species, as well as the segment of the digestive tube considered. The nitric oxide is one of the key neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as a mediator in the smooth muscle relaxation. These neurons are evidenced by immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or by NADPH-diaphorase histochemistry. In this sense, this study aimed to characterize the total neuronal population and subpopulation NADPH-d+ of the myenteric plexus present in the jejunum of the insectivore species Molossus rufus quantitatively. Five specimens were collected of M. rufus in a buffer area of the "Reserva Biológica das Perobas" in the microregion of Cianorte/PR. After the euthanasia, in a chamber saturated with isoflurane, segments were collected from the small intestine corresponding to the jejunum intended for two techniques for neuronal marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a fragment to the histological technique of hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. All the procedures were approved by the "Comitê de Ética no Uso de Animais Unipar" (CEUA - protocol No. 34347/2017) and the "Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade" (ICMBio - protocol No. 60061-1) The histological sections allowed to highlight the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers of the muscular tunic. The myenteric plexus had an average of total neuronal population (neurons Giemsa+) of 279.23 neurons/mm2, being the nitrergic neurons (neurons NADPH-d+) represented 20.4% of this total population, with an average of 58.14 neuron/mm2. Therefore, the collected data are consistent with previous studies in other mammalian species concerning the location of the myenteric plexus, as well as the neural myenteric proportion NADPH-d+ compared with the population of neurons Giemsa+. The gaps in the knowledge of ENS of bats limits comparative intraspecific and interspecific studies.(AU)

Não há estudos que caracterizem o sistema nervoso entérico (SNE) destes animais, configurando uma lacuna no conhecimento quanto à biologia destes indivíduos. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como o segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico presente no jejuno da espécie Molossus rufus de hábito alimentar insetívoro. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas na microrregião de Cianorte/PR. Após a eutanásia, em câmara saturada com isoflurano, foram coletados segmentos do intestino delgado correspondentes ao jejuno destinados a duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um fragmento para a técnica histológica de hematoxilina-eosina e tricômio de Masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo nº 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo nº 60061-1) Os cortes histológicos possibilitaram evidenciar a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média 20,4% da população neuronal mientérica total, sendo evidenciados 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Portanto, os dados coletados mostram-se condizentes com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico, bem como, a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+. As lacunas existentes quanto ao conhecimento do SNE de morcegos limita possíveis inferências em comparativo intraespecífico e interespecífico.(AU)

Quantification of the neurons of myenteric plexus of the bat molossus rufus / Quantificação dos neurônios do plexo mientérico de morcegos da espécie Molossus rufus

There are no studies that characterize the enteric nervous system (ENS) bats. The organization and density of myenteric neurons may vary according to the animal species, as well as the segment of the digestive tube considered. The nitric oxide is one of the key neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as a mediator in the smooth muscle relaxation. These neurons are evidenced by immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or by NADPH-diaphorase histochemistry. In this sense, this study aimed to characterize the total neuronal population and subpopulation NADPH-d+ of the myenteric plexus present in the jejunum of the insectivore species Molossus rufus quantitatively. Five specimens were collected of M. rufus in a buffer area of the "Reserva Biológica das Perobas" in the microregion of Cianorte/PR. After the euthanasia, in a chamber saturated with isoflurane, segments were collected from the small intestine corresponding to the jejunum intended for two techniques for neuronal marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a fragment to the histological technique of hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. All the procedures were approved by the "Comitê de Ética no Uso de Animais Unipar" (CEUA - protocol No. 34347/2017) and the "Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade" (ICMBio - protocol No. 60061-1) The histological sections allowed to highlight the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers of the muscular tunic. The myenteric plexus had an average of total neuronal population (neurons Giemsa+) of 279.23 neurons/mm2, being the nitrergic neurons (neurons NADPH-d+) represented 20.4% of this total population, with an average of 58.14 neuron/mm2. Therefore, the collected data are consistent with previous studies in other mammalian species concerning the location of the myenteric plexus, as well as the neural myenteric proportion NADPH-d+ compared with the population of neurons Giemsa+. The gaps in the knowledge of ENS of bats limits comparative intraspecific and interspecific studies.(AU)

Não há estudos que caracterizem o sistema nervoso entérico (SNE) destes animais, configurando uma lacuna no conhecimento quanto à biologia destes indivíduos. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como o segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico presente no jejuno da espécie Molossus rufus de hábito alimentar insetívoro. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas na microrregião de Cianorte/PR. Após a eutanásia, em câmara saturada com isoflurano, foram coletados segmentos do intestino delgado correspondentes ao jejuno destinados a duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um fragmento para a técnica histológica de hematoxilina-eosina e tricômio de Masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo nº 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo nº 60061-1) Os cortes histológicos possibilitaram evidenciar a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média 20,4% da população neuronal mientérica total, sendo evidenciados 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Portanto, os dados coletados mostram-se condizentes com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico, bem como, a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+. As lacunas existentes quanto ao conhecimento do SNE de morcegos limita possíveis inferências em comparativo intraespecífico e interespecífico.(AU)

CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DO TUBO DIGESTÓRIO DE MORCEGOS INSETÍVOROS DA ESPÉCIE Molossus rufus DA REGIÃO NOROESTE DO ESTADO DO PARANÁ, BRASIL

Estudos em diversas áreas relacionadas a biologia das espécies de morcegos, até o presente momento, são escassos sobre a morfologia do tubo digestório da espécie Molossus rufus. O presente trabalho objetivou avaliar alguns aspectos morfológicos da parede do tubo digestório da cavidade abdominal de morcegos da espécie Molossus rufus oriundos da região noroeste do estado do Paraná. Para isso foram capturados cinco exemplares machos, da espécie Molossus rufus, autorizada pelo Instituto Chico Mendes da Biodiversidade (ICMBio - SisBio No 60061-1), mediante aprovação do Comitê de Ética (protocolo n. 34563/2018) da Universidade Paranaense. As coletas foram realizadas em uma área situada na região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Após a captura os animais foram identificados utilizando chave dicotômica, acondicionados e transportados em saco de algodão até o laboratório, onde os animais foram pesados e seguiram para eutanásia com supra dose de isoflurano. Em seguida os animais foram laparatomizados e os segmentos do tubo digestório foram avaliados quanto as características macroscópicas e então foram coletados e fixados em formol neutro a 10%. Após a fixação por 48horas os segmentos seguiram para o processamento histológico de rotina de emblocamento, corte e coloração. Um fragmento foi destinado as técnicas de coloração básica Giemsa, e a histoquímica da NADPH-diaforase, que permitiu avaliar o arranjo ganglionado do plexo mioentérico. Todos os segmentos foram fotografados. A localização do plexo mioentérico encontrava-se entre os estratos circular e longitudinal, na túnica muscular e os neurônios apresentavam-se em gânglios envoltos por fibras colágenas. O peso médio dos animais foi de 39,33g, o estômago com tamanho médio de 1cm e o intestino 15cm. As características macroscópicas do tubo digestório permitiram identificar o segmento esofágico na cavidade abdominal, o estômago do tipo sacular em forma de J, e o intestino delgado sendo dividido em duodeno, jejuno-íleo e íleo terminal. Quanto ao intestino grosso este foi identificado como uma dilação do órgão a partir do segmento final do intestino delgado, com trajeto único no sentido oral-aboral terminando no ânus, o qual foi denominado cólon descendente. As características morfológicas da parede de todos os segmentos podem ser comparadas aquelas descrições existentes para mamíferos, contudo, algumas peculiaridades foram observadas como a ausência de glândulas esofágicas, glândulas de Brunner do intestino, do ceco, e de apêndices. O intestino grosso não é subdivido, mas sim formado por um único segmento o cólon descendente. A localização e o arranjo do plexo mioentérico é similar a outros mamíferos. A disposição anatômica dos segmentos correspondente ao tubo digestório, bem como, o padrão tissular destes segmentos em Molossus rufus, são similares aqueles encontrados em outras espécies de morcegos insetívoras. Porém, algumas destas características chamam atenção para possíveis adaptações do tubo digestório ao hábito alimentar das espécies insetívoras, que podem ser impactadas com as ações humanas nos ambientes de forrageio, alterando as populações de insetos que naturalmente são encontradas nestes locais, podendo impactar fortemente na sobrevivência destas espécies de morcegos que são parceiras no controle biológico de insetos.

Studies in several areas related to the biology of bat species, so far, are scarce on the morphology of the digestive tube of the species Molossus rufus. This study aimed to evaluate some morphological aspects of the digestive tube wall of the abdominal cavity of Molossus rufus bats from the northwest region of the state of Paraná. For this purpose, five male specimens of the species Molossus rufus were captured, authorized by the Chico Mendes Institute of Biodiversity (ICMBio - SisBio No 60061-1), with the approval of the Ethics Committee (protocol no. 34563/2018) of the Universidade Paranaense. The collections were carried out in an area located in the northwest region of the state of Paraná, Brazil. After capture, the animals were identified using a dichotomous key, packed and transported in a cotton bag to the laboratory, where the animals were weighed and then euthanized with a supradose of isoflurane. Afterwards, the animals were laparatomized and the segments of the digestive tube were evaluated for macroscopic characteristics and then they were collected and fixed in 10% neutral formalin. After fixation for 48 hours, the segments were followed for routine histological processing of blocking, cutting and staining. A fragment was destined to Giemsa basic staining techniques, and NADPH-diaphorase histochemistry, which allowed evaluating the ganglionic arrangement of the myenteric plexus. All segments were photographed. The location of the myenteric plexus was found between the circular and longitudinal strata, in the tunica muscularis, and the neurons were in ganglia surrounded by collagen fibers. The average weight of the animals was 39.33g, the average size of the stomach was 1cm and the intestine was 15cm. The macroscopic characteristics of the digestive tube allowed the identification of the esophageal segment in the abdominal cavity, the J-shaped saccular stomach, and the small intestine being divided into duodenum, jejunum-ileum and terminal ileum. As for the large intestine, this was identified as a dilation of the organ from the final segment of the small intestine, with a single path in the oral-aboral direction, ending in the anus, which was called descending colon. The morphological characteristics of the wall of all segments can be compared to those existing descriptions for mammals, however, some peculiarities were observed as the absence of esophageal glands, Brunner's glands of intestine, cecum, and appendages. The large intestine is not subdivided, but formed by a single segment, the descending colon. The location and arrangement of the myenteric plexus is similar to other mammals. The anatomical disposition of the segments corresponding to the digestive tube, as well as the tissue pattern of these segments in Molossus rufus, are similar to those found in other species of insectivorous bats. However, some of these characteristics draw attention to possible adaptations of the digestive tube to the feeding habits of insectivorous species, which can be impacted by anthropic actions in foraging environments, changing the insect populations that are naturally found in these places, which can strongly impact survival of these bat species that are partners in the biological control of insects.

Efeito da atividade física moderada sobre neurônios mioentéricos nitrérgicos do íleo de ratos de meia idade / The effect of moderate physical activity on myoenteric nitrergic neurons in the ileum of middle-aged rats / Efecto de la actividad física moderada en neuronas mientéricas nitrérgicas del íleon de ratas de mediana edad

Poucos são os relatos a respeito do efeito da atividade física sobre o plexo mioentérico ao longo do envelhecimento. Portanto, analisaram-se os neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do íleo em ratos que envelheceram praticando atividade física a partir dos seis meses de vida. Dez ratos Wistar foram distribuídos em dois grupos (n = 5/grupo): S (ratos sedentários controles com 12 meses de idade) e T (ratos treinados com 12 meses de idade). Os animais do grupo T realizaram, dos seis aos 12 meses de idade, atividade física regulada conforme resultados obtidos em teste de esforço máximo. Ao final do período experimental, o íleo obtido de cada animal foi processado para a técnica de NADPH-diaforase para evidenciar neurônios mioentéricos em preparados de membrana e quantificar e mensurar a área do pericário desses neurônios. A área do pericário não diferiu (P> 0,05) entre o grupo S (218,49 µm2) e o grupo T (210,59 µm2). A média de neurônios presente em 60 campos microscópicos de preparados de membranas no grupo S (126 neurônios) foi superior (P<0,05) a média encontrada no grupo T (93 neurônios), sugerindo que a atividade física pode inibir ou diminuir a expressão dos neurônios nitrérgicos em ratos de 12 meses de idade que praticaram atividade física desde os seis meses de vida. Os resultados quantitativos sugerem que a falta de atividade física regular propicia aumento na atividade dos neurônios nitrérgicos, contribuindo para o surgimento dos distúrbios da motricidade gastrointestinal que podem ocorrer ao longo do envelhecimento.(AU)

There are only a few reports on the effect of physical activity in the myoenteric plexus throughout the aging process. For such, the positive myoenteric NADPH-diaphoresis neurons in the ileum of those rats that aged practicing physical activity from the sixth month were analyzed. Ten Wistar rats were distributed into two groups (n= 5/group): S (12 months-old control sedentary rats) and T (12 months-old trained rats). The animals from the T group practiced controlled physical activity from the age of 6 months to 12 months, according to the maximum effort test results. At the end of the experimental period, the ileum obtained from each animal was processed in the NADPH-diaphoresis technique to highlight myoenteric neurons in membrane preparations, and quantify and measure the perikaryon area from those neurons. The Perikaryon area did not differ (P>0.05) among the S group (218.49 µm2) and the T group (210.59 µm2). The average of neurons in 60 membrane preparations in the S group (126 neurons) was higher (P<0.05) than the average finding in the T group (93 neurons), indicating that the physical activity can inhibit or decrease the nitrergic expression in 12 month-old rats that have practiced physical activity from the age of 6 months. The quantitative results suggest that the lack of regular physical activity provides the elevation of nitrergic neurons, concurring to the emergence of gastrointestinal motility disorders that can occur during the aging process.(AU)

Hay pocos informes sobre el efecto de la actividad física sobre el plexo mientérico a lo largo del envejecimiento. Por lo tanto, se analizaron las neuronas mientéricas NADPH-diaforasa positivas del íleon en ratas que envejecieron practicando actividad física a partir de seis meses de vida. Diez ratas Wistar se dividieron en dos grupos (n = 5 / grupo): S (ratas sedentarias de control con 12 meses de edad) y T (ratas entrenadas con 12 meses de edad). Los animales del grupo T realizaron, de los seis a los doce meses de edad, actividad física regulada conforme resultados obtenidos en prueba de esfuerzo máximo. Al final del período experimental, el íleon obtenido de cada animal se procesó por la técnica de NADPH-diaforasa para mostrar las neuronas mientéricas en preparados de membrana, cuantificar y medir el área del pericario de esas neuronas. El área del pericario no difirió (P> 0.05) entre el grupo S (218.49 µm2) y el grupo T (210.59 µm2). El número medio de neuronas presentes en 60 campos microscópicos de preparados de membranas en el grupo S (126 neuronas) fue mayor (P <0,05), promedio encontrado en el grupo T (93 neuronas), lo que sugiere que la actividad física puede inhibir o disminuir la expresión de las neuronas nitrérgicas en ratas de 12 meses de edad que practicaron actividad física desde los seis meses de edad. Los resultados cuantitativos sugieren que la falta de actividad física regular promueve aumento en la actividad de las neuronas nitrérgicas, contribuyendo a la aparición de disturbios de la motricidad gastrointestinal que pueden ocurrir a lo largo del envejecimiento.(AU)

DETECÇÃO DE NEURÔNIOS DO PLEXO MIOENTÉRICO, PERFIL GLICÊMICO E LIPÍDICO, EM RATOS EXPOSTOS AOS FATORES DE RISCO DIABETES, TABAGISMO E DISLIPIDEMIA TRATADOS COM CARQUEJA

A hiperglicemia gerada pelo diabetes mellitus promove alterações fisiológicas em todo o organismo, sendo recorrente o aparecimento de distúrbios gastrintestinais nos portadores desta doença, devido ao dano ao plexo mioentérico. Além do diabetes, sabe-se que há uma relação entre o uso do tabaco e dislipidemia no sistema digestório, porém, ainda há uma lacuna no conhecimento sobre possíveis alterações nos neurônios entéricos. Algumas plantas medicinais são apontadas como terapias complementares no tratamento de doenças gastrointestinais, dentre elas, a Baccharis trimera, que possui em sua composição antioxidantes, que podem exercer efeito neuroprotetor nos neurônios do plexo mioentérico. O objetivo do presente estudo foi avaliar o possível efeito protetor da B. trimera, popularmente conhecida como carqueja, sobre os neurônios mioentéricos, perfil lipídico e glicêmico de ratos expostos ao modelo experimental com a indução do diabetes mellitus, dislipidemia e o tabagismo. Ratos machos, Wistar, com 90 dias, foram divididos em cinco grupos (n=5), (C-) animais normoglicêmicos, não dislipidêmicos e não tabagistas tratados com veículo (água filtrada), (C+) diabético, dislipidêmico e tabagista tratados com veículo (água filtrada) e animais diabéticos, dislipidêmicos e tabagistas tratados com diferentes doses de carqueja (BT30mg/kg, BT100mg/kg e BT300mg/kg). A indução do diabetes foi realizada via intraperitoneal, com 60mg/kg de estreptozotocina, a dislipidemia, pela adição de 0,5% de colesterol em ração comercial e posteriormente, expostos a inalação de fumaça de nove cigarros comerciais, uma vez por dia, cinco dias por semana, durante quatro semanas. Após 2 semanas, iniciou-se o tratamento com diferentes doses da fração solúvel em etanol de carqueja, via oral por gavagem, uma vez ao dia, por duas semanas em diferentes doses. Foi coletado sangue do plexo ocular dos animais para posteriormente verificar os níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos. No intuito de quantificar a população de neurônios mioentéricos, foram realizadas as técnicas de coloração básica Giemsa, a fim de marcar a população total e a histoquímica da NADPH-diaforase, que permitiu quantificar os neurônios da subpopulação inibitória. Os animais dos grupos tratados com as diferentes doses de carqueja e C+ apresentaram redução de peso significativa. Na dose de 30mg/kg os níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos foram reduzidos, porém, não houve redução da glicemia nos ratos tratados com B. trimera. Não foi observada redução neuronal significativa entre os neurônios nitrérgicos, identificados pela técnica NADPH-diaforase, contudo, pelo método de Giemsa, foi observada redução do número de neurônios, dos grupos controle positivo (C+) e os grupos tratados com carqueja (BT30, BT100 e BT300), em relação ao grupo controle negativo (C-), o que pode ter sido agravado pela inclusão do tabagismo ou da dieta hipercolesterolêmica. Assim pode-se concluir que na dose de 30mg/kg de carqueja houve redução significativa nos níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos, contudo, não foi encontrada redução glicêmica em nenhum dos tratamentos. Quanto aos neurônios mioentéricos a carqueja não apresentou efeitos protetores com redução significativa na quantificação da população total, e a manutenção da subpopulação nitrérgica em todos os grupos, nos permite sugerir que estes neurônios são mais resistentes aos efeitos deletérios do diabetes, tabagismo e dieta hipercolesterolêmica.

The hyperglycemia generated by diabetes mellitus promotes physiological changes throughout the body, with the appearance of gastrointestinal disorders in patients with this disease recurring, due to damage to the myenteric plexus. In addition to diabetes, it is known that there is a relationship between tobacco use and dyslipidemia in the digestive system, however, there is still a gap in knowledge about possible changes in enteric neurons. Some medicinal plants are considered as complementary therapies in the treatment of gastrointestinal diseases, among them, Baccharis trimera, which has antioxidants in its composition, which can exert a neuroprotective effect on neurons in the myenteric plexus. The aim of the present study was to evaluate the possible protective effect of B. trimera, popularly known as gorse, on the myenteric neurons, lipid and glycemic profile of rats exposed to the experimental model with the induction of diabetes mellitus, dyslipidemia and smoking. Male, 90-day-old Wistar rats were divided into five groups (n=5), (C-) normoglycemic, non-dyslipidemic and non-smoking animals treated with vehicle (filtered water), (C+) diabetic, dyslipidemic and smoking treated with vehicle (filtered water) and diabetic, dyslipidemic animals and smokers treated with different doses of gorse (BT30mg/ kg, BT100mg/kg and BT300mg/kg). Diabetes induction was performed intraperitoneally, with 60mg/kg of streptozotocin, dyslipidemia, by the addition of 0.5% cholesterol in commercial ration and later, exposed to smoke inhalation of nine commercial cigarettes, once a day, five days a week for four weeks. After 2 weeks, treatment with different doses of the fraction soluble in gorse ethanol was started, orally by gavage, once a day, for two weeks in different doses. Blood was collected from the animals' ocular plexus to later check plasma levels of cholesterol and triglycerides. In order to quantify the population of myenteric neurons, basic Giemsa staining techniques were performed in order to mark the total population and the histochemistry of NADPH-diaphorase, which allowed quantifying the neurons of the inhibitory subpopulation. The animals in the groups treated with different doses of carqueja and C + showed significant weight reduction. At a dose of 30mg / kg, plasma levels of cholesterol and triglycerides were reduced, however, there was no reduction in blood glucose in rats treated with B. trimera. No significant neuronal reduction was observed between nitrergic neurons, identified by the NADPH-diaphorase technique, however, using the Giemsa method, a reduction in the number of neurons was observed in the positive control groups (C+) and the groups treated with gorse (BT30, BT100 and BT300), in relation to the negative control group (C-), which may have been aggravated by the inclusion of smoking or the hypercholesterolemic diet. Thus, it can be concluded that at the dose of 30mg/kg of gorse there was a significant reduction in plasma cholesterol and triglyceride levels, however, no glycemic reduction was found in any of the treatments. As for myenteric neurons, gorse did not present protective effects with significant reduction in the quantification of the total population, and the maintenance of the nitrergic subpopulation in all groups, allows us to suggest that these neurons are more resistant to the deleterious effects of diabetes, smoking and a hypercholesterolemic diet.

QUANTIFICAÇÃO DOS NEURÔNIOS DO PLEXO MIENTÉRICO DE MORCEGOS DA ESPÉCIE Molossus rufus

Morcegos da espécie Molossus rufus tem hábito alimentar insetívoro o que lhe confere um importante papel na dinâmica biológica do controle de insetos. Características do tubo digestório são marcadas pelo hábito alimentar, elucidando, além das características já conhecidas, diferenças anatomorfohistológicas, podendo inclusive exercer efeitos sobre Sistema Nervoso Entérico (SNE). O SNE está presente ao longo de todo o tubo digestório, estando os neurônios dispostos em plexos, destacando-se dentre eles o plexo mientérico, que atua no controle da motricidade, exercendo assim, influência na absorção dos nutrientes. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como do segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico (NO) é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico de M. rufus, visto que não há relatos sobre o SNE e dos seus plexos em morcegos. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em residência rural na microrregião de Cianorte-PR, região que configura-se como área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas, constituindo corredor ecológico para diversas espécies. Os animais foram transportados individualmente em sacos de algodão, visando minimizar o estresse. A eutanásia foi realizada em câmara saturada com isoflurano e, após confirmada a morte dos animais, foram coletados segmentos de intestino delgado, correspondentes ao jejuno, de igual tamanho, destinados à duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um terceiro fragmento foi destinado às técnicas histológicas de hematoxilina-eosina e tricômio de masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo n. 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo n. 60061-1). A partir da análise dos cortes histológicos, evidenciou-se a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média à 20,40% da população neuronal mientérica total, sendo quantificados uma média de 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Não há relatos sobre as características do SNE e do plexo mientérico de morcegos, o que impõe uma limitação quanto ao conhecimento completo da sua biologia, conferindo lacunas quanto à compreensão dos morcegos como indivíduos integrantes de um todo complexo, bem como limita possíveis inferências intraespecíficas e interespecíficas sobre os efeitos ambientais da atividade antrópica na sobrevivência destes animais. Os dados coletados mostram-se condizente com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico bem como a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+.

Bats of the species Molossus rufus have an insectivorous feeding habit which gives it an important role in the biological dynamics of insect control. Characteristics from digestive tract are marked by the alimentary habit, elucidating, in addition to the known characteristics, anatomorphohistological differences, and may even exert effects on the Enteric Nervous System (ENS). The ENS is present throughout the entire digestive tract, with the neurons disposed in plexus, standing out among them the myenteric plexus, which acts on the motor control, exerting an influence on the absorption of nutrients. The organization and density of the myenteric neurons may vary according to the animal species as well as the segment of the digestive tube under consideration. Nitric oxide (NO) is one of the main neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as mediator in the relaxation of gastrointestinal smooth muscle, so that these neurons are also evidenced by the immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or the histochemistry of NADPH-diaphorase. In this sense, we aimed to quantitatively characterize the total neuronal population and NADPH-d+ subpopulation of the myenteric plexus of M. rufus, since there are no reports on the ENS and its plexus in bats. Five specimens of M. rufus were collected in a rural residence in the Cianorte-PR microregion, a region that is a buffer zone of the Reserva Biológica das Perobas, constituting an ecological corridor for several species. The animals were individually transported in cotton bags in order to minimize stress. Euthanasia was performed in a chamber saturated with isoflurane, confirmed the death of the animals, small intestine segments of jejunum of equal size were collected for two techniques for neural marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a third fragment was destined to the hematoxylin-eosin and masson trichrome histological techniques. All the procedures performed were approved by the Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocol n. 34347/2017) and by the Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocol n. 60061-1). From the analysis of the histological sections, the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers from muscular tunica was evidenced. Giemsa+ neurons presented a mean of 279.23 neurons/mm2, whereas the nitrergic neurons presented on average to 20.40% of the total neuronal myenteric population, being quantified a mean of 58.14 neurons NADPH-d+/mm2. There are no reports on the characteristics of the ENS and the myenteric plexus of bats, which imposes a limitation on the complete knowledge of their biology, conferring gaps in the understanding of the bats as individuals integrating a complex whole as well as limiting intraspecific and interspecific inferences, on the environmental effects of anthropic activity on the survival of these animals. The data collected are consistent with previous studies in other mammals on the location of the myenteric plexus as well as the NADPH-d+ myenteric neuronal ratio compared to the population of Giemsa+ neurons.

Investigação dos efeitos do ácido 2, 4 diclorofenoxiacético sobre diferentes populações de neurônios mioentéricos do duodeno de ratos / Investigation of 2, 4 dichlorophenoxyacetic acid effects in different population of rat duodenum myenteric neurons / Investigación de los efectos del ácido 2, 4 diclorofenoxiacético sobre diferentes poblaciones de neuronas mioentéricas del duodeno de ratones

O herbicida mais usado, tanto em pequenas como em grandes propriedades, por isso mais amplamente estudado é o 2,4-D. Os estudos de toxicidade têm se concentrado sobre as alterações do sistema nervoso central, e por isto pouco se conhece sobre seus efeitos no sistema nervoso entérico. Com o objetivo de avaliar os efeitos do 2,4-D sobre os neurônios mioentéricos do duodeno de ratos foi fornecido durante 60 dias doses de 2,4-D na concentração de 5mg/kg de peso de corpóreo para ratosWistarde dois grupos experimentais (n=5). Os animais dos grupos controle permaneceram o mesmo período sem receber 2,4-D. Ao final do período experimental os animais foram mortos, os duodenos foram coletados e processados por meio das técnicas histoquímicas de NADH-diaforase e NADPH-diaforase. Os neurônios foram quantificados e os resultados foram analisados estatisticamente. A densidade dos neurônios NADHd diferiu estatisticamente (P?0,05) entre os grupos experimental e controle, sendo maior no grupo controle. Já os neurônios NADPHd foram encontrados em maior quantidade no grupo experimental. Estes resultados sugerem que o 2,4-D possui ação neurotóxica sobre os neurônios do plexo mioentérico, interferindo na densidade neuronal mioentérica, quando se compara diferentes populações destes neurônios.(AU)

The 2,4-D herbicide is the most widely used, both in small and in large properties. Therefore, it is also the one that is most broadly studied. Toxicity studies have been focused on changes in the central nervous system, and for this reason, little is known about its effect in the enteric nervous system. With the objective of measuring the effects of 2,4-D on the myenteric neurons in the duodenum of rats, doses of 2,4-D were supplied for 60 days at a concentration of 5mg/kg of body weight to Wistar rats divided into two different experimental groups (n=5). The animals in the control groups remained without 2,4-D doses for the same period. At the end of the experimental period, the animals were euthanized and their duodenum were collected and processed through NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase histochemical techniques. The neurons were quantified and the results were statistically analyzed. The density of NADHd neurons differed statistically (P< 0,05) between the experimental and control groups, being higher in the control group. However, NADPHd neurons were found in a greater quantity in the experimental group. These results suggest that the 2,4-D has a neurotoxic action in the neurons from the myenteric plexus, interfering in the myenteric neuronal density, when different population of these neurons are compared.(AU)

El herbicida más utilizado, tanto en pequeñas como en grandes propiedades es el 2,4-D, por eso lo más estudiado. Los estudios de toxicidad se han centrado sobre las alteraciones del sistema nervioso central, y por lo tanto, poco se sabe sobre sus efectos en el sistema nervioso entérico. Con el objetivo de evaluar los efectos del 2,4-D sobre las neuronas mioentéricas del duodeno de ratas se ha administrado durante 60 días dosis de 2,4-D en la concentración de 5mg/kg de peso corporal para ratones Wistarde, dos grupos experimentales (n = 5). Los animales de los grupos control permanecieron el mismo período sin recibir el 2,4-D. Al final del periodo experimental los animales fueron sacrificados, los duodenos fueron recogidos y procesados a través de las técnicas de histoquímicas de NADH-diaforasa y NADPH-diaforasa. Las neuronas fueron cuantificadas y los resultados analizados estadísticamente. La densidad de las neuronas NADHd difirió estadísticamente (P?0,05) entre los grupos experimental y control, siendo mayor en el grupo control. Ya las neuronas NADPHd se encontraron en mayor cantidad en el grupo experimental. Estos resultados sugieren que el 2,4-D tiene una acción neurotóxica sobre las neuronas del plexo mioentérico, lo que interfiere en la densidad neuronal mioentérica al comparar diferentes poblaciones de estas neuronas. (AU)

Hemoplasma prevalence and hematological abnormalities associated with infection in three different cat populations from Southern Brazil / Prevalência da infecção por hemoplasmas e alterações hematológicas associadas à infecção em três diferentes populações de gatos do sul do Brasil

Three hemoplasma species are recognized in domestic cats: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. We report the prevalence and hematological abnormalities of hemoplasma infection in 369 domestic cats from three different populations (blood donors, hospitalized cats and shelter cats) from Southern Brazil. Complete blood counts were performed at the time of blood collection, and DNA was extracted and tested by conventional PCR for each hemoplasma species. A total of 79 samples (21.40%) were positive for at least one species. The most prevalent hemoplasma was ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, with 50/369 (13.55%) positive cats, followed by ‘Candidatus Mycoplasma turicensis, 10/369 (2.71%), and Mycoplasma haemofelis, 8/369 (2.16%). Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum coinfection was observed in 4/369 (1.08%), whereas ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis in 5/369 (1.35%). Three cats (0.81%) were infected with all three hemoplasmas. There was no association between infection and the different populations. Anemia was associated with Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, but not with ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. Male cats and cats with outdoor access were more likely to be infected. Although ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum is believed to cause minimal or no hematological alterations, the infected cats studied herein were more likely to be anemic.

Três espécies de hemoplasmas são reconhecidas em gatos domésticos: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. A prevalência e alterações hematológicas associadas à infecção por hemoplasmas foi estudada, em 369 gatos domésticos de três populações distintas (doadores de sangue, hospitais e gatos de abrigo) do Sul do Brasil. Foram realizados hemogramas completos no momento da coleta de sangue e as amostras tiveram seu DNA extraído e testado por PCR convencional para cada espécie de hemoplasmas. Setenta e nove amostras (21,40%) foram positivas para pelo menos uma espécie. O mais prevalente foi ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum com 50/369 (13,55%) gatos positivos, seguidos por ‘Candidatus Mycoplasma turicensis com 10/369 (2,71%) e Mycoplasma haemofelis com 8/369 (2,16%). Coinfecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum foi observada em 4/369 (1,08%), enquanto ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis coinfectaram 5/369 (1,35%) gatos. Três (0,81%) gatos apresentaram infecção pelos três hemoplasmas. Não houve associação entre a infecção e as diferentes populações. Anemia foi associada com a infecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum, mas não com ‘Candidatus Mycoplasma turicensis. Gatos machos e com acesso à rua apresentaram maior probabilidade de serem infectados. Embora se acredite que ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum possa causar alterações hematológicas mínimas ou ausentes, gatos infectados encontrados neste estudo foram mais propensos à anemia.

Aspectos morfoquantitativos e ultraestruturais dos componentes do plexo mioentérico do intestino grosso de ratos submetidos à subnutrição (dieta padrão de Moçambique) e renutrição nos períodos pré e pós-natal

A fome e a subnutrição estão entre os mais devastadores problemas sociais e de saúde pública nos países em desenvolvimento, estando relacionadas a problemas socioeconômicos como pobreza, miséria, baixo nível educacional, ausência de programas de saúde, déficit no saneamento básico e tabus alimentares. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da dieta básica da população de Moçambique (DM) e da renutrição proteica, nos componentes do plexo mioentérico dos segmentos proximal e distal do intestino grosso de ratos Wistar de 21 e 42 dias. Para tanto, os animais foram divididos em sete grupos: o controle, dieta AIN-93G com adição de 20% de caseína (NN21 e NN42); Dieta de Moçambique (DM21 e DM42); Dieta Moçambique suplementada, acrescida de 20% de caseína (NM21 e NM42) e o grupo renutrido (RM42), animais do grupo DM21 que, a partir do 22º dia, receberam a dieta NM até atingirem 42 dias de vida. As amostras dos segmentos proximal e distal do intestino grosso, foram coletadas e submetidas às técnicas histoquímicas da NADH-diaforase e NADPHdiaforase e imunohistoquímica (ChAT, Substância P e VIP), para avaliação qualitativa e quantitativa dos neurônios do plexo mioentérico. A estrutura, ultraestrutura e morfometria dos componentes ganglionares e da parede e mucosa intestinal, foram avaliadas com o uso de técnicas rotineiras de histologia (HE, Picro-sírius e Weigert) e de microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e, dependendo do parâmetro a ser avaliado, utilizados dois ou três fatores (grupo, idade e segmento do intestino). Quando necessário, comparações múltiplas pelos métodos de Bonferroni ou Tukey foram aplicadas, com nível de significância p<0,05. A análise qualitativa mostrou que todos os grupos experimentais, independentemente da idade (21 e 42 dias) e segmento intestinal (proximal e distal), apresentaram as camadas histológicas e seus constituintes preservados. Os animais do grupo DM apresentaram os menores valores para: peso e comprimento; dados metabólicos; área da parede e mucosa intestinal; comprimento e área do intestino. A renutrição não foi capaz de recuperar esses parâmetros. As fibras colágenas do tipo I predominaram no grupo DM e as do tipo III no grupo RM. As fibras elásticas não foram detectadas na cápsula dos gânglios mioentéricos do grupo DM aos 21 e 42 dias. A imunorreatividade dos neurônios mioentéricos à ChAT, SP e VIP, mostrou-se fraca no grupo DM. Sob o aspecto ultraestrutural, o grupo DM exibiu um atraso no desenvolvimento celular. A densidade de neurônios reativos à NADH-d e NADPH-d foi maior em todos os grupos de 21 em comparação aos grupos de 42 dias, independente do segmento. O grupo DM apresentou uma densidade numérica neuronal maior em relação aos outros grupos, independente do segmento e idade. Por outro lado, quando se avaliou a área do perfil neuronal, os grupos de 42 dias exibiram uma área maior em relação aos animais de 21 dias, independente do segmento. Entre os grupos da mesma faixa etária, independente do segmento, a área neuronal dos animais foi maior no grupo NN, e menor no grupo DM. O grupo RM não recuperou esse parâmetro. A estimativa do número total de neurônios da NADH-d aumentou com a idade em todos os grupos. Considerando a mesma faixa etária, não foram detectadas diferenças entre os grupos. Já a estimativa neuronal para a NADPH-d foi maior no grupo DM, independentemente da idade.

Hunger and malnutrition are among the most devastating social and public health problems in developing countries, being related to socioeconomic problems such as poverty, misery, poor education, absence of health programs, deficit in basics sanitation and food taboos. The aim of the present study was to evaluate the effects of Mozambique populations regular diet (DM) and the protein refeeding in the components of the myenteric plexus of proximal and distal segments of the large intestine of Wistar rats 21 and 42 days old. Animals were divided into seven groups: control, AIN-93G diet with 20% casein addition (NN21 and NN42); Diet Mozambique (DM21 and DM42) and Diet Mozambique supplemented with 20% casein (NM21 and NM42) and re-nourished group (RM42), animals from DM21 group, 22 days old, that received the NM diet until they reach 42 days old. Proximal and distal segments samples of the large intestine were collected and submitted to NADH-diaforase and NADPH-diaforase histochemical techniques and to immunohistochemistry (ChAT, Substance P and VIP), in order to demonstrate myenteric neurons. The structure and ultra-structure of ganglion components and intestinal wall were assessed using routine histology techniques (HE, Picrosirius and Weigert) and scanning and transmission electron microscopy. Data was analyzed by the analysis of variance (ANOVA) and, depending on the parameter to be assessed, two or three factors were used (group, age and bowel segment). When necessary, multiple comparisons by Bonferroni or Tukey methods were applied, considering p <0.05 as significance level. Qualitative analysis showed that all groups, regardless of age (21 and 42 days), and intestinal segments (proximal and distal) showed histological layers and their constituents preserved. RM group did not recovered this parameter. DM group animals showed the smallest values for the following parameters: weight and length; metabolic data; intestinal mucosa and wall area; intestine length and area. Refeeding did not recovered these parameters. Type I collagen fibers were most frequent in DM group, whereas type III prevailed in RM group. Elastic fibers were not detected in the capsule of myenteric ganglion of DM group at 21 and 42 days. DM group showed low immune reactivity of myenteric neurons to ChAT, SP and VIP. As regards to ultrastructural aspects, DM group showed slow cellular development. Besides, NADH-d and NADPH-d analysis exhibited increased numeric neuronal density in 21 days old animals compared to 42 days old animals, despite segments. DM group showed higher neuronal numeric density than other groups, regardless of segment and age. On the other hand, when evaluating the neuronal profile area, 42 days groups showed greater area than 21 days animals, with both techniques and regardless of segment. Furthermore, DM group showed significantly lower neuronal area compared to the other groups, regardless of intestinal segment. RM group did not recovered this parameter. Total number of neurons directly increased according to age in all groups. No difference was found between groups of same age. NADPH-d neuronal estimative was higher in DM group, regardless of age.

Effects of ascorbic acid supplementation in ileum myenteric neurons of streptozotocin-induced diabetic rats / Efeitos da suplementação do ácido ascórbico nos neurônios mientéricos do íleo de ratos diabéticos induzidos por estreptozootocina

The exacerbation of the oxidative stress and of the polyol pathway which impair damage myenteric plexus are metabolic characteristics of diabetes. The ascorbic acid (AA) is an antioxidant and an aldose reductase inhibitor, which may act as neuroprotector. The effects of AA supplementation on the density and cellular body profile area (CP) of myenteric neurons in STZ-induced diabetes in rats were assessed. Four groups with five animals each were formed: normoglycemic (C); diabetic (D); AA-treated diabetic (DS) and AA-treated normoglycemic (CS). Dosagen of 50mg of AA were given, three times a week, for each animal (group DS and CS). Ninety days later and after euthanasia, the ileum was collected and processed for the NADPH-diaphorase technique. There were no differences (P>0.05) in the neuronal density among the groups. The CP area was lower (P<0.05) in the DS and CS groups, with a higher incidence of neurons with a CP area exceeding 200µm² for groups C and D. The AA had no influence on the neuronal density in the ileum but had a neuroprotective effect, preventing the increase in the CP area and allowing a higher number of neurons with a CP area with less than 200µm².(AU)

A exacerbação do estresse oxidativo e da via do poliol que comprometem o plexo mioentérico são alterações metabólicas características do diabetes. O ácido ascórbico (AA) é antioxidante e inibidor da aldose redutase, podendo atuar como neuroprotetor. Verificaram-se os efeitos da suplementação com AA sobre o número e a área do perfil do corpo celular (PC) de neurônios mioentéricos em ratos diabéticos induzidos por estreptozootocina. Formaram-se quatro grupos com cinco animais cada: normoglicêmico (C); diabético (D); diabético tratado com AA (DS); e normoglicêmico tratado com AA (CS). Três vezes por semana administrou-se 50mg de AA para cada animal (grupos DS e CS). Após 90 dias e eutanásia com tiopental, o íleo foi coletado e processado para a técnica da NADPH-diaforase. Não se observaram diferenças (P>0,05) na densidade neuronal entre os grupos. A área do PC foi menor (P<0,05) para os grupos DS e CS, com incidência maior de neurônios com área do PC superior a 200µm² para os grupos C e D. Concluiu-se que o AA não influenciou a densidade neuronal do íleo, mas foi neuroprotetor prevenindo o aumento na área do PC e possibilitando maior incidência de neurônios com área de PC inferior a 200µm².(AU)

Assessment of NADPH-diaphorase stained myenteric neurons of the jejunum of diabetic rats supplemented with ascorbic acid

The relation between hyperglycemia and diabetic neuropathy has already been demonstrated in some studies. Among the theories proposed for its etiology the oxidative stress stands out. The performance of nitric oxide as a link between the metabolic and vascular neuropathogenic factors that triggers the diabetic neuropathy has already been put forward. This study aimed to assess the quantification and measurements of the cell body profile area (CBPA) of NADPH-diaphorase reactive (NADPH-dp) myenteric neurons of the jejunum of diabetic rats (induced by streptozotocin) supplemented with Ascorbic Acid (AA). These changes in the myenteric neurons seem to be related to the gastrointestinal disturbances observed in diabetes mellitus (DM). Twenty male Wistar rats (Rattus norvegicus) were distributed in 4 groups (n=5): controls (C), control supplemented (CS), diabetic (D), and diabetic suplemented (DS). DM was induced by estreptozotocin (50mg/kg body wt). One week after the induction and confirmation of the DM (glycemia exam), animals of the groups CS and DS received 50mg of AA three times a week by gavage. After 90 days of experiment, the animals were anesthetized with lethal thiopental dose (40mg/kg) and the collected jejunum processed for the histochemistry NADPH-diaphorase technique. Whole-mount preparations were obtained for quantitative and morphometric analysis of the myenteric neurons. A quantity of jejunum neurons in the Group D (96±7.5) was not different (P>0.05) from Group DS (116±8.08), C (92±9.7), and CS (81±5.4), but in Group DS the quantity was higher (P<0.05) than in Group C and CS. The CBPA of neurons from Group D (189.50±2.68µm²) and DS (195.92±3.75µm²) were lower (P<0.05) than from Group C (225.13±4.37µm²) and CS (210.23±3.15µm²). The streptozotocin-induced DM did not change the jejunum-ileum area, the jejunum myenteric plexus space organization and the density of NADPH-dp ...(AU)

A relação entre hiperglicemia e neuropatia diabética foi demonstrada em várias pesquisas. Entre as teorias propostas para sua etiologia destaca-se o estresse oxidativo. O papel do óxido nítrico como elo entre os fatores neuropatogênicos metabólico e vascular que ativam a neuropatia diabética tem sido ressaltado. Este estudo objetivou avaliar a quantificação e a morfometria da área do perfil do corpo celular (CBPA) de neurônios mioentéricos NADPH-diaforase reativos (NADPH-dp) do jejuno de ratos diabéticos e suplementados com Ácido Ascórbico (AA), uma vez que alterações nos neurônios mioentéricos parecem estar relacionadas aos distúrbios gastrointestinais observados no diabetes mellitus (DM). Vinte ratos machos da linhagem Wistar (Rattus norvergicus) foram distribuídos em 4 grupos (n=5): controle (C), controle suplementado (CS), diabético (D) e diabético suplementado (DS). O DM foi induzido através de injeção de estreptozootocina (50mg/kg de peso corporal). Uma semana depois da indução e confirmação do DM (glicemia), animais dos grupos CS e DS receberam, via gavagem, 50mg de AA três vezes por semana. Após 90 dias de período experimental, os animais foram anestesiados com dose letal de thiopental intravenosa (40mg/kg) e o jejuno foi retirado e processado para a técnica histoquímica da NADPH-diaforase. Preparados de membrana foram obtidos para análises quantitativa e morfométrica dos neurônios mioentéricos. A quantidade de neurônios do jejuno do Grupo D (96±7,5) não diferiu (P>0,05) dos Grupos DS (116±8,08), C (92±9,7) e CS (81±5,4), mas no Grupo DS o número de neurônios foi superior (P<0,05) aos Grupos C e CS. A CBPA de neurônios do Grupo D (189,50±2,68µm²) e DS (195,92±3,75µm²) foi menor (P<0,05) do que a dos Grupos C (225,13±4,37µm²) e CS (210,23±3,15µm²). O DM induzido por estreptozootocina não alterou a área do jejuno-íleo, a organização espacial do plexo mioentérico e a densidade...(AU)

The number and profile of reactive NADH-d and NADPH-d neurons of myenteric plexus of six-month-old rats are different in the cecum portions / O número de neurônios e a área do perfil neuronal NADH-d e NADPH-d reativos do plexo mioentérico de ratos com seis meses de idade são diferentes nas diferentes porções e regiões do ceco

Whole-mount preparations were prepared and submitted to NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase histochemistry techniques. The myenteric plexus arrangement and the number of neurons were comparatively evaluated among the different portions of the cecum. The neurons from the apical and basal regions were distributed in classes at intervals of 100µm², the means of the corresponding intervals being compared. The ganglia, in both techniques, were often connected by fine bundles, which became thicker in the mesenteric region and in the region next to the cecal ampulla. The number of positive NADH-d neurons was higher than that of NADPH-d neurons in all portions, from both regions. The numbers of reactive NADH-d e NADPH-d neurons were significantly different among the different portions of the cecum, except for the antimesenteric basal and intermediate basal regions, considering the NADH-d neurons. The profile area for the reactive NADH-d e NADPH-d neurons was higher in the apical region than in the basal area. Differences in arrangement, distribution and size of positive NADH-d e NADPH-d neurons in the different cecum portions evidenced the importance of the subdivision of the analyzed organ.(AU)

Estudaram-se o arranjo do plexo mioentérico, o número de neurônios e a área do perfil do corpo celular (µm²) dos neurônios mioentéricos, nas regiões apical e basal do ceco de ratos Wistar com 6 meses de idade. Estas regiões foram subdivididas nas seguintes porções: apical mesentérica (AM); apical intermediária (AI); apical antimesentérica (AA); próximo à ampola cecal (PA); basal intermediária (BI), e basal antimesentérica (BA). Foram montados preparados de membrana que receberam as técnicas histoquímica de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d). O arranjo do plexo mioentérico e o número de neurônios foram avaliados comparativamente entre as diferentes porções das regiões do ceco. Os neurônios das regiões apical e basal foram distribuídos em classes com intervalos de 100µm², sendo comparadas às médias da mensuração dos pares. Os gânglios, em ambas as técnicas, apresentavam-se, em geral, conectados por feixes delicados, tornando-se mais espessos na porção mesentérica e naquela próxima à ampola cecal. O número de neurônios NADH-d positivos foi maior do que o de NADPH-d em todas as porções, de ambas as regiões. O número de neurônios reativos a NADH-d e NADPH-d foi significativamente diferente entre as diferentes porções do ceco, com exceção das comparações entre as porções basal antimesentérica e basal intermediária, para os primeiros; e entre a basal intermediária e porção próxima à ampola cecal, e comparando-se a apical mesentérica e porção próxima à ampola cecal, para os neurônios NADPH-d positivos. A área do perfil dos neurônios NADH-d e NADPH-d reativos foi maior na região apical do que na basal. Pela primeira vez, o número de neurônios do plexo mioentérico é reportado em porções pré-estabelecidas do ceco de ratos. Nossos resultados reiteram a importância da indicação precisa da porção estudada em pesquisas envolvendo este segmento intestinal.(AU)

Análise morfométrica e quantitativa dos neurônios do plexo mientérico do ceco de ratos submetidos a intensa carência de proteína / Análisis morfométrica y cuantitativa de las neuronas del plexo mientérico del ceco de ratas sometidos a una intensa carencia de proteína / Quantitative and morphometric analysis of myenteric neuron from the cecum of rats submitted to intensive protein deficiency

Avaliaram-se os efeitos crônicos de uma dieta severamente hipoprotéica, sobre aspectos quantitativos e morfométricos de neurônios mientéricos, NADPH-diaforase positivos do ceco de ratos jovens. Oito ratos foram divididos em dois grupos, sendo que para um dos grupos foi oferecida ração com teor protéico de 26% (controle) e, para o outro, ração com o teor protéico de 4%, mantendo-se o balanço vitamínico e mineral durante 12 semanas. Após eutanásia, o ceco de cada animal foi coletado e dissecado para confecção de preparados de membrana, os quais foram submetidos à técnica da NADPH-diaforase. Para contagem e mensuração destes neurônios, o ceco foi dividido em quatro regiões: apical mesentérica; apical antimesentérica; basal antimesentérica; próxima à ampola cecal. Não se observou alteração significativa para o peso dos animais, área do ceco e densidade populacional dos neurônios mientéricos no final do experimento. Por outro lado, em algumas regiões do ceco, os neurônios tiveram redução da área nuclear, com conseqüente redução da área do pericário(AU)

The chronicle effects of a severe hypoproteic diet on quantitative and morphometric aspects of NADPHdiaphorase-positive myenteric neurons from the cecum of young rats were assessed. Eight rats were divided into two groups. One group (control) was fed with 26%-protein chow and the other with 4%-protein chow during 12 weeks. The vitamin and mineral balance was kept. After euthanasia, the cecum of each animal was collected and dissected for the whole-mount preparation, which were submitted to NAPDH-diaphorase. The cecum was divided into four regions for counting and measurement of neurons: apical mesenteric, antimesenteric apical, basal antimesenteric, and next to the cecal ampulla. Significant alterations were not noted with respect to the weight of the animals, cecum area, and population density of myenteric neurons at the end of the experiment. On the other hand, in some regions of the cecum, the neurons presented a reduction of the nuclear area with resulting reduction of the soma area(AU)

Se evaluaron los efectos crónicos de una dieta severamente hipoprotéica, sobre aspectos cuantitativos y morfométricos de neuronas mientéricos, NADPH-diaforase positivos del ceco de ratas jóvenes. Ocho ratas fueron divididas en dos grupos, siendo que para uno de los grupos fue ofrecida ración con tenor proteico de 26% (control) y, para el otro, ración con el tenor proteico de 4%, manteniéndose el balance vitamínico y mineral durante 12 semanas. Tras eutanasia, El ceco de cada animal fue recolectado y disecado para confección de preparados de membrana, los cuales fueron sometidos a la técnica de la NADPH-diaforase. Para recuento y mensuración de estas neuronas, el ceco fue dividido en cuatro regiones: apical mesentérica, apical antimesentérica, basal antimesentérica y próxima a la ampolla cecal. No se observó alteración significativa en el peso de los animales, área del ceco y densidad poblacional de las neuronas mientéricas al final Del experimento. Por otro lado, en algunas regiones del ceco las neuronas tuvieron reducción del área nuclear, con consecuente reducción del área del pericario(AU)

Caraterização morfoquantitativa do plexo mioentérico do esôfago no modelo de distrofia muscular camundongo MDX / Morphoquantitative features of myenteric plexus of the oesophagus in MDX mice

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) [...]. Além dos graves distúrbios cardiorrespiratórios e da motricidade, o paciente apresenta disfunções do sistema digestório, caracterizadas pelas desordens da motilidade. Entretanto, sabe-se que tais disfunções não ocorrem no camundongo MDX. O objetivo deste estudo foi estimar a densidade numérica por área da população total de neurônios (QA[T]) e dos neurônios nitrérgicos (QA[N]); assim como a área de secção transversal média do corpo celular destes neurônios (A[T] e A[N]) do plexo mioentérico esofágico e a largura média das fibras estriadas (L) das camadas musculares. Foram utilizados 40 camundongos machos da linhagem C57BL/10 nas idades de 4 e 10 semanas, distribuídos entre grupos experimentais (MDX4 e MDX10), e controles (C4 e C10). As estimativas foram analisadas em preparados de membrana dos esôfagos, e técnicas histoquímicas de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d) foram utilizadas para evidenciar toda a população de neurônios e os neurônios nitrérgicos, respectivamente. Os resultados mostraram que a QA[T] foi significativamente maior no grupo MDX10 em relação ao C10 (p<0.05); enquanto a QA[N] foi menor no grupo MDX4 em relação ao C4 (p<0.05). A A[T] foi menor no grupo MDX10 em relação ao MDX4 e ao C10 (p<0.05); enquanto que para a A[N] não houve diferença significativa entre os grupos controle e experimental, e tampouco entre os grupos de 4 e de 10 semanas. A variável L foi maior nos grupos MDX4 e MDX10 em relação aos seus respectivos controles de mesma idade (p<0.05). Concluímos que no plexo mioentérico esofágico de camundongos MDX existe uma redução dos neurônios mediadores do relaxamento, especialmente em animais jovens (MDX4), provavelmente porque o organismo tenta manter íntegra a função peristáltica do órgão. Esse fato pode explicar a adaptação e ausência de disfunções esofágicas durante quase toda a vida desses animais

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) [...]. DMD is degenerative, progressive and a genetic X-linked disease. Besides the cardiomyopathy and the movement disorders, the patients have serious disfunctions in the alimentary system, characterized by motility disorders. However, it is known that such changes do not exist in MDX mice. The aim of this study was to estimate the neuronal numerical density/area of total (QA[T]) and nitregic neurons (QA[N]), the average cross-sectional area of total (A[T]) and nitregic (A[N]) neurons in myenteric plexus of the oesophagus and the average width of striped muscle of muscular layer (L). Forty C57BL/10 male mice were studied from four to ten weeks of age, divided into four groups: MDX mice formed the experimental groups (MDX4 and MDX10) and C57BL/10 male mice without the mutation formed the control groups (C4 and MDX10). Whole mounts preparations were obtained from the samples and histochemistry for NADH-diaphorase (NADH-d) and NADPH-diaphorase (NADPH-d) were used for morphometric evaluation. The results showed a significant increase of the QA[T] in the MDX10 than C10 (p<0.05), and a decrease of the QA[N] in MDX4 comparing to C4 (p<0.05). The A[T] decreased significantly in MDX10 comparing to both MDX4 and C10 (p<0.05), while no significant differences were observed among all the groups regarding the A[N]. The groups MDX4 and MDX10 showed a significant increase in L when compared to its controls at the same age (p<0.05). We conclude that in the myenteric plexus of the oesophagus in MDX mice there is a reduction of the inhibitory neurons, manly in the young animals (MDX4), probably to keep normal the peristaltic functions. Thus, it may explain the adaptation and the absence of oesophageal disfunction during almost the whole life in this animal model

Caraterização morfoquantitativa do plexo mioentérico do esôfago no modelo de distrofia muscular camundongo MDX / Morphoquantitative features of myenteric plexus of the oesophagus in MDX mice

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) [...]. Além dos graves distúrbios cardiorrespiratórios e da motricidade, o paciente apresenta disfunções do sistema digestório, caracterizadas pelas desordens da motilidade. Entretanto, sabe-se que tais disfunções não ocorrem no camundongo MDX. O objetivo deste estudo foi estimar a densidade numérica por área da população total de neurônios (QA[T]) e dos neurônios nitrérgicos (QA[N]); assim como a área de secção transversal média do corpo celular destes neurônios (A[T] e A[N]) do plexo mioentérico esofágico e a largura média das fibras estriadas (L) das camadas musculares. Foram utilizados 40 camundongos machos da linhagem C57BL/10 nas idades de 4 e 10 semanas, distribuídos entre grupos experimentais (MDX4 e MDX10), e controles (C4 e C10). As estimativas foram analisadas em preparados de membrana dos esôfagos, e técnicas histoquímicas de NADH-diaforase (NADH-d) e NADPH-diaforase (NADPH-d) foram utilizadas para evidenciar toda a população de neurônios e os neurônios nitrérgicos, respectivamente. Os resultados mostraram que a QA[T] foi significativamente maior no grupo MDX10 em relação ao C10 (p<0.05); enquanto a QA[N] foi menor no grupo MDX4 em relação ao C4 (p<0.05). A A[T] foi menor no grupo MDX10 em relação ao MDX4 e ao C10 (p<0.05); enquanto que para a A[N] não houve diferença significativa entre os grupos controle e experimental, e tampouco entre os grupos de 4 e de 10 semanas. A variável L foi maior nos grupos MDX4 e MDX10 em relação aos seus respectivos controles de mesma idade (p<0.05). Concluímos que no plexo mioentérico esofágico de camundongos MDX existe uma redução dos neurônios mediadores do relaxamento, especialmente em animais jovens (MDX4), provavelmente porque o organismo tenta manter íntegra a função peristáltica do órgão. Esse fato pode explicar a adaptação e ausência de disfunções esofágicas durante quase toda a vida desses animais (AU)

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) [...]. DMD is degenerative, progressive and a genetic X-linked disease. Besides the cardiomyopathy and the movement disorders, the patients have serious disfunctions in the alimentary system, characterized by motility disorders. However, it is known that such changes do not exist in MDX mice. The aim of this study was to estimate the neuronal numerical density/area of total (QA[T]) and nitregic neurons (QA[N]), the average cross-sectional area of total (A[T]) and nitregic (A[N]) neurons in myenteric plexus of the oesophagus and the average width of striped muscle of muscular layer (L). Forty C57BL/10 male mice were studied from four to ten weeks of age, divided into four groups: MDX mice formed the experimental groups (MDX4 and MDX10) and C57BL/10 male mice without the mutation formed the control groups (C4 and MDX10). Whole mounts preparations were obtained from the samples and histochemistry for NADH-diaphorase (NADH-d) and NADPH-diaphorase (NADPH-d) were used for morphometric evaluation. The results showed a significant increase of the QA[T] in the MDX10 than C10 (p<0.05), and a decrease of the QA[N] in MDX4 comparing to C4 (p<0.05). The A[T] decreased significantly in MDX10 comparing to both MDX4 and C10 (p<0.05), while no significant differences were observed among all the groups regarding the A[N]. The groups MDX4 and MDX10 showed a significant increase in L when compared to its controls at the same age (p<0.05). We conclude that in the myenteric plexus of the oesophagus in MDX mice there is a reduction of the inhibitory neurons, manly in the young animals (MDX4), probably to keep normal the peristaltic functions. Thus, it may explain the adaptation and the absence of oesophageal disfunction during almost the whole life in this animal model (AU)

Estudo morfométrico e estereológico do gânglio celíaco em cães sadios / Morphometric and stereological study of the celiac ganglia in healthy dogs

Nesta pesquisa o aspecto macroestrutural, microestrutural e histoquímico foram investigados em 6 cães clinicamente saudáveis para identificar a possível alteração na estrutura, morfométrica e parâmetros quantitativos de neurônios do complexo ganglionar celíaco. Nossa observação revela que o gânglio celíaco foi originado da origem da artéria celíaca e mostra um aspecto irregular sendo caracterizado como um complexo. Histoquimicamente, neurônios NADPH diaforase reativos foram identificados. Esta reação positiva, em animais saudáveis, permite-nos concluir que estes neurônios eram potencialmente nitrergicos, contudo, para confirmar o aspecto nitrergico para estes neurônios ele é necessário combinar métodos imunohistoquimicos.(AU)

In this research, the macrostructural, microstructural and histochemical aspects were Investigated in 6 clinacally health dogs to identify the possible alterations on the structure, morphometric and qualitative parameteres of neurons of the celiac ganglionar complex. Our observations revealed that the celiac ganglion was originated dose to the origin of the celiac artery and showed a irregular aspect, being caractherized as a complex. Histochemical/y, neurons NADPH diaphorase reactives were identified. This positive reaction, on health animais, led us to conclude this neurons were potentially nitrergic, besides, to confirm the nitrergic aspect for this neurons it isnecessary to combine immunohistochemical method.(AU)

Avaliação histoquímica, imuno-histoquímica e morfométrica do plexo mioentérico do jejuno e do colo de ratos Wistar durante o desenvolvimento pós-natal / Histochemical, immunohistochemical and morphometric evaluation of the myenteric plexus of jejunum and colon in Wistar rats during postnatal development

O objetivo desta pesquisa foi quantificar os neurônios mioentéricos do jejuno e do colo durante o desenvolvimento pós-natal de ratos Wistar utilizando morfometria com enfoque estereológico e analisar as mudanças na área ocupada por neurônios e axônios mediante Sistemas de Informação Geográfica (SIG). Foram usadas 20 fêmeas de ratos da linhagem Wistar, divididas em grupos de acordo com a idade pós-natal em dias (G0, G7, G21 e G60). A análise morfométrica foi realizada em preparados totais de membrana usando azul cuprolínico, histoquímica para acetilcolinesterase (AChE) e NADPH-diaforase (NADPH-d), e imuno-histoquímicas para VIP e substância P. Foram estimadas a densidade numérica neuronal/área de superfície serosa, o número total de neurônios por segmento e a área neuronal média. A análise da área ocupada por neurônios e axônios foi realizada a partir de imagens de NADPH-d e AChE. Ocorreu uma diminuição significativa na densidade neuronal/área, nos neurônios totais e nos neurônios nitrérgicos a partir de G7 no jejuno e de G0 no colo, e nos neurônios colinérgicos entre G0 e G7 no jejuno e G0 e G21 no colo. O número total de neurônios corados com azul cuprolínico aumentou significativamente no colo a partir de G7; houve aumento dos neurônios nitrérgicos entre G7 e G21 e nos neurônios colinérgicos entre G21 e G60. No jejuno somente houve aumento do número total de neurônios nitrérgicos entre G0 e G7. Também foi percebido um aumento significativo na área dos neurônios nitrérgicos a partir de G7 no jejuno e de G0 no colo, e dos neurônios colinérgicos entre G7 e G21 no jejuno e G0 e G21 no colo. A área ocupada pelos axônios aumentou entre os grupos G0 e G7, diminuiu entre G7 e G21 e aumentou de novo entre G21 e G60. Estes resultados demonstraram que os neurônios e os axônios sofrem mudanças morfológicas e químicas durante o desenvolvimento pós-natal do sistema nervoso entérico, provavelmente devido a fatores microambientais como os fatores de crescimento e de replicação, a alimentação e o próprio crescimento do intestino. É possível que a completa maturidade do intestino somente seja completada quando este finaliza o seu processo de crescimento

The aim of this study was to quantify jejunum and colon myenteric neurons during postnatal development in Wistar rats using morphometry and to analyse the changes in the area occupied by neurons and axons using Geographic Information Sistem (GIS). Twenty female Wistar rats divided in groups according to the age in days (G0, G7, G21 e G60) were used. Whole mount preparations using cuprolinic blue (CB), histochemistry for acetyl-cholinesterase (AChE) and NADPH-diaphorase (NADPH-d) and immunohistochemistry for VIP and substance P were used for morphometric evaluation. Neuronal numerical density/area of serosal surface, total number of neurons for segment and mean neuronal area were estimated. Analyses of the area ocuppied by neurons and axons were performed using images of NADPH-d and AChE. This study showed a significant decrease in the neuronal numerical density/area in total and nitrergic neurons from G7 in jejunum and G0 in colon, and in cholinergic neurons from G0 and G7 in jejunum and G0 and G21 in colon. In colon, total number of neurons increased significantly in cuprolinic blue stain from G7, in NADPH-d between G7 and G21 and in AChE between G21 and G60. In jejunum, there was a significant increase in the same parameter between G0 and G7 in NADPH-d. There was also a significant increase in the mean area of nitrergic neurons from G7 in jejunum and from G0 in colon, and in cholinergic neurons between G7 and G21 in jejunum and between G0 and G21 in colon. The area occupied by axons increased between G0 and G7, between G7 and G21 decreased and increased again between G21 and G60. This results showed that neurons and axons suffer morphologic and chemical changes during postnatal development in the enteric nervous system, probably due to micro-environmental factors as growth and replication factors, nutrition and growing of the intestine. It is possible that complete maturity of the intestine is achieved when it finishes its growing process

Evaluation of the population of NADPH-diaphorase positive myenteric neurons from the body of the stomach of diabetic rats induced by streptozotocin - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i1.1667 / Avaliação da população de neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do corpo do estômago de ratos com diabetes crônico induzido pela estreptozootocina - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i1.1667

The aim of this study was to analyze the morphoquantitative features of the nitrergic myenteric neurons from the body of the stomach of diabetic rats. The body of the stomach of five normoglicemic rats and of five diabetic rats were prepared as whole-mounts stained by the histochemical technique of NADPH-diaphorase. Decreased body weight and increased daily ingestion of water, fast glicemia and glycated hemoglobin were verified in diabetic animals. According to the data obtained, significant difference in the density of nitrergic neurons was not observed between the two groups, but the areas of the neuronal cell body profiles in the diabetic rats were significantly larger. Results showed that the streptozotocin that induced diabetes does not accelerate the death of the nitrergic neurons, but increases the expression of these cells

O presente estudo teve por objetivo analisar as características morfoquantitativas de neurônios mioentéricos nitrérgicos do corpo do estômago de ratos diabéticos. O corpo do estômago de 5 ratos normoglicêmicos e de 5 ratos diabéticos foi submetido a preparados de membrana corados pela técnica histoquímica da NADPH-diaforase. Verificaram-se, nos animais diabéticos, diminuição do peso corporal, aumento do consumo diário de água, da glicemia em jejum e da hemoglobina glicada. Com os dados obtidos, não foi observada diferença significativa na densidade de neurônios nitrérgicos entre os dois grupos, porém as áreas dos perfis celulares neuronais dos ratos diabéticos foram significativamente maiores. Constatou-se, portanto, que o diabetes induzido por estreptozootocina não acelera a morte dos neurônios nitrérgicos, contudo aumenta a expressão desses neurônios

Evaluation of the population of NADPH-diaphorase positive myenteric neurons from the body of the stomach of diabetic rats induced by streptozotocin - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i1.1667 / Avaliação da população de neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do corpo do estômago de ratos com diabetes crônico induzido pela estreptozootocina - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i1.1667

The aim of this study was to analyze the morphoquantitative features of the nitrergic myenteric neurons from the body of the stomach of diabetic rats. The body of the stomach of five normoglicemic rats and of five diabetic rats were prepared as whole-mounts stained by the histochemical technique of NADPH-diaphorase. Decreased body weight and increased daily ingestion of water, fast glicemia and glycated hemoglobin were verified in diabetic animals. According to the data obtained, significant difference in the density of nitrergic neurons was not observed between the two groups, but the areas of the neuronal cell body profiles in the diabetic rats were significantly larger. Results showed that the streptozotocin that induced diabetes does not accelerate the death of the nitrergic neurons, but increases the expression of these cells

O presente estudo teve por objetivo analisar as características morfoquantitativas de neurônios mioentéricos nitrérgicos do corpo do estômago de ratos diabéticos. O corpo do estômago de 5 ratos normoglicêmicos e de 5 ratos diabéticos foi submetido a preparados de membrana corados pela técnica histoquímica da NADPH-diaforase. Verificaram-se, nos animais diabéticos, diminuição do peso corporal, aumento do consumo diário de água, da glicemia em jejum e da hemoglobina glicada. Com os dados obtidos, não foi observada diferença significativa na densidade de neurônios nitrérgicos entre os dois grupos, porém as áreas dos perfis celulares neuronais dos ratos diabéticos foram significativamente maiores. Constatou-se, portanto, que o diabetes induzido por estreptozootocina não acelera a morte dos neurônios nitrérgicos, contudo aumenta a expressão desses neurônios

Efeitos do exercício sobre o envelhecimento dos neurônios mioentéricos do duodeno de ratos Wistar / Effects of the exercise on the ageing of the myenteric neurons in the duodenum of Wistar rats

Com o envelhecimento há aumento da incidência de problemas gastrointestinais relacionados com a motilidade intestinal. A atividade física pode promover mudanças funcionais significantes, atuando como minimizadora dos efeitos deletérios do processo de envelhecimento. O controle das funções gastrointestinais é feito pelo sistema nervoso entérico composto por um conjunto de neurônios intramurais, entretanto, nada se sabe sobre os efeitos da atividade física regular sobre o envelhecimento dos neurônios mioentéricos. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo analisar as alterações quantitativas e morfométricas causadas pelo envelhecimento e pela atividade física nos neurônios mioentéricos NADH e NADPH-diaforase positivos do duodeno de ratos de meia idade. E ainda verificar em microscopia de luz e eletrônica de transmissão as possíveis alterações na morfologia e ultraestrutura do plexo, e na espessura da túnica muscular. Para tanto, foram utilizados 45 ratos Wistar distribuídos em três grupos: C (seis meses de idade sedentário), S (doze meses de idade sedentário) e T (doze meses de idade submetidos à atividade física). Os animais do grupo T realizaram atividade física cinco vezes por semana, durante seis meses. Nenhuma alteração morfológica foi encontrada entre os grupos, entretanto verificou-se a membrana basal mais bem delineada e fibras colágenas mais agrupadas nos gânglios dos animais dos grupos C e T em relação aos animais do grupo S. Na análise quantitativa observou-se diminuição dos neurônios NADPH-diaforase positivos com o envelhecimento e com a prática de atividade física. Os neurônios NADH-diaforase positivos diminuíram com o envelhecimento, porém aumentaram com a atividade física (P>0,05). Nenhuma alteração significativa (P>0,05) foi verificada na área do perfil neuronal dos neurônios NADPH e NADH-diaforase positivos com o envelhecimento. Em relação à atividade física, observou-se, somente nos neurônios NADPH-diaforase positivos, diminuição significativa na área do perfil celular. Nenhuma alteração significativa (P>0,05) foi constatada na espessura da camada muscular do duodeno

With ageing, there is an increase in the incidence of gastrointestinal problems related to intestinal motility. Physical activity may promote significant functional alterations, acting to minimize the deleterious effects of the ageing process. The control of gastrointestinal functions is carried out by the enteric nervous system, composed of a network of intramural neurons. However, nothing is known about the effects of regular physical activity on the ageing of myenteric neurons. Therefore, the object of this study was to analyze the quantitative and morphological alterations caused by ageing and physical activity on the NADH and NADPH-diaphorase positive myenteric neurons in the duodenum of middle-aged rats and, furthermore, to verify, through light and transmission electron microscopy, any alterations in the morphology and ultrastructure of the plexus and the thickness of the muscular tunica. To this end, 45 Wistar rats were divided into three groups: group C (six months old - sedentary), group S (twelve months old - sedentary) and group T (twelve months old - submitted to physical activity). The animals of group T underwent physical activity five times a week for six months. No morphological alteration was found among the groups. However, it was found that the basal membrane had a stronger outline and collagen fibers were more grouped in the ganglia of the animals of groups C and T, compared to those of group S. In the quantitative analysis, a reduction in NADPH-diaphorase positive neurons with ageing and with the practice of physical exercise was observed. There was also a decrease in NADH-diaphorase positive neurons with ageing, although there was a slight increase with physical activity (P>0.05). No significant alteration was observed in the area of the neuronal profiles of the NADPH and NADH-diaphorase positive neurons with ageing (P>0.05). With regards to physical activity, a significant reduction in cellular profile area was only found in the NADPH-diaphorase positive neurons. No significant alteration was found in the thickness of the muscular layer of the duodenum (P>0.05). Key words: Myenteric plexus, ageing, physical activity