Phagocytotic activity and gene expression of leukocytes isolated from Astyanax lacustris / Atividade fagocítica e expressão gênica de leucócitos isolados de Astyanax lacustris

The constant intensification of aquaculture has considerable increased the stress levels of farmed fish and, consequently, the number and intensity of diseases outbreaks. Thus, studies on fish immune response, especially regarding the interaction of fish leukocytes with potential pathogens and xenobiotics are of great importance in order to develop new prophylactic and curative strategies. We isolated leukocytes from the head kidney of Astyanax lacustris­an important Neotropical fish species for aquaculture and a potential model for Neotropical aquaculture research­using a Percoll centrifugation protocol. The isolated leukocytes were incubated with lipopolysaccharide (LPS), and the expression of genes IL-1ß, IL-8, LysC, and LysG were measured. We assessed the phagocytotic activity of leukocytes using Congo red-dyed yeast, a novel and cost-effective protocol that has been developed in this study. The isolated leukocytes responded to LPS induction, exhibiting strong IL-1ß and IL-8 upregulation, two of the most important pro-inflammatory interleukins for vertebrates immune reponse. The optimal concentration of yeast for the phagocytic assay was 106 cells mL-1, resulting in acceptable phagocytic capacity (PC) but without excess of yeasts during the counting process, ensuring a high precision and accuracy of the method. To the best of our knowledge, the present study is the first to investigate the in vitro gene expression and phagocytic activity of leukocytes isolated from A. lacustris. Our findings will serve as a reference for future studies on the immunology and toxicology of Neotropical fish.

A constante intensificação da aquicultura tem aumentado consideravelmente os níveis de estresse dos animais cultivados e, consequentemente, o número e a intensidade dos surtos de doenças. Logo, estudos sobre a resposta imune dos peixes, especialmente relacionados com a interação dos leucócitos de peixes com potenciais patógenos e xenobióticos, são de grande importância para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e curativas. No presente trabalho, nós obtivemos sucesso ao isolar leucócitos oriundos do rim cranial de Astyanax lacustris ­ uma importante espécie de peixe Neotropical para a aquicultura e um modelo em potencial para pesquisas em aquicultura Neotropical ­ usando um protocolo de centrifugação com Percoll. Os leucócitos isolados foram incubados com lipossacarídeo (LPS) e, a expressão dos genes IL-1ß, IL-8, LysC, e LysG foi avaliada. Ainda, um novo protocolo para avaliação da atividade fagocítica dos leucócitos utilizando leveduras coradas com Vermelho Congo foi estabelecido. Os leucócitos isolados responderam à indução com LPS, exibindo up regulation dos genes IL-1ß e IL-8, duas das interleucinas pró-inflamatórias mais importantes para a resposta imune de vertebrados. Além do mais, a concentração ótima de leveduras para a avaliação da fagocitose foi de 106 células mL-1, resultando em uma capacidade fagocítica (PC) aceitável, mas sem excesso de leveduras durante o processo de contagem, garantindo maior precisão e eficácia do método. Até o presente momento, o presente estudo é o primeiro a investigar a expressão gênica e atividade fagocítica de leucócitos isolados de A. lacustris através da abordagem in vitro. Ainda, nossos resultados servirão de referência para futuros estudos em imunologia e toxicologia de peixes Neotropicais.

Optimal foraging of Neotropical otters (Carnivora: Mustelidae) in an urban river and predominance of generalist and sedentary fish in their diet

Lontra longicaudis Olfers, 1818 is a semi-aquatic carnivore widely distributed in the Neotropical region. Understanding their diet contributes to an indirect understanding of their ecology and the composition of the local fauna. To this end, we analyzed 109 fecal samples and identified 238 morphological structures; these samples were collected between May 2006 and September 2007 from the Santa Lúcia Biological Station (SLBS) in southeastern Brazil. The area is intersected by the Timbuí River, which arrives at the site after crossing the urban perimeter of the city of Santa Teresa in the state of Espírito Santo. We found a predominance of fish in the otters' diets (82%), mainly cichlids (50%), which are fish with sedentary habits and low mobility levels. The crustacean Trichodactylus fluviatilis Latreille, 1828 was the third most consumed taxon; this occurred mainly during the rainy season, corresponding to the crustacean's reproductive period, when it is more vulnerable to predation. Otters exhibited a seasonal variation in their prey selectivity. Furthermore, they displayed opportunistic foraging behavior, as the most preyed fish were those with both low mobility and a high frequency in the environment, followed by fish with high mobility and high frequency, and then those with low mobility and low frequency. We concluded that the feeding habits of the otters in the SLBS are in line with the optimal foraging theory since prey selection was optimized through the balance between net energy gained and the energy costs of foraging.

Microbiological featuring of two neotropical fish species from the quilombola area of maranhão state, Brazil / Caracterização microbiológica de duas espécies de peixes neotropicais oriundas de área quilombola maranhense, Brasil

The aim of study is to feature the microbiological quality of two neotropical fish species from the quilombola area of Maranhão State, Brazil. In order to do so, 21 samples of Hoplerythrinus unitaeniatus and 21 samples of Cichlasoma bimaculatum were captured in flooded environment. Collected fish were euthanized in laboratory environment; muscle fragments were removed for microbiological analyses focused on enumerating molds and yeasts, viable strict and facultative mesophilic microorganisms and coagulase-positive staphylococci; on counting total and thermotolerant coliforms; and on investigating Escherichia coli and Salmonella sp. Microbiological results were compared to the Brazilian legislation, which establishes the list of microbiological standards for food products. Among the assessed fish, 9.52% were classified as non-acceptable for human consumption, based on the Salmonella parameter. Enumerated coagulase-positive staphylococci ranged from < 10 to 3.9 x 104 CFU/g; 9.52% of assessed fish were classified as having intermediate standard for human consumption, whereas 4.76% were classified as non-acceptable for such a purpose. E. coli counting ranged from 3.6 to > 1,100MPN/g; 4.76% of assessed fish were classified as having intermediate standard for human consumption, whereas 4.76% were classified as non-acceptable for such a purpose. Total and thermotolerant coliforms' counting and the enumeration of viable strict and facultative aerobic microorganisms, as well as of molds and yeasts, have evidenced high microbial population rates; this finding suggests poor hygienic conditions at capture site, contaminated raw material and risk of incidence of enteropathogens. This finding has evidenced imbalance in the investigated environment, as well as compromised aquatic biodiversity.(AU)

Objetivou-se caracterizar a qualidade microbiológica de duas espécies de peixes neotropicais oriundas de área qui-lombola maranhense, Brasil. Para isso, foram capturadas 21 amostras de Hoplerythrinus unitaeniatus e 21 amostras de Cichlasoma bimaculatum de ambiente alagável. No laboratório, os peixes foram eutanasiados, procedida a retirada dos fragmentos mus-culares e realizada as análises microbiológicas: enumeração de bolores e leveduras, micro-organismos mesófilos aeróbios estri-tos e facultativos viáveis e de estafilococos coagulase positiva, quantificação de coliformes totais e termotolerantes, pesquisa de Escherichia coli e Salmonella sp. Os resultados microbiológicos obtidos foram comparados com a legislação brasileira que estabelece a lista de padrões microbiológicos para alimentos. Dos peixes avaliados, 9,52% foram considerados inaceitáveis para consumo humano para o parâmetro Salmonella. A enumeração de estafilococos coagulase positivavariou de <10 a 3,9 x 104 UFC/g, sendo 9,52% dos peixes considerados com padrão intermediário e 4,76% inaceitáveis para consumo. A quanti-ficação de E. coli variou de 3,6 a >1.100 NMP/g, sendo 4,76% considerados com padrão intermediário e 4,76% inaceitáveis para consumo. A quantificação de coliformes totais e termotolerantes e a enumeração de micro-organismos aeróbios estritos e facultativos viáveis e bolores e leveduras revelou elevadas populações microbianas o que sugere más condições higiênicas do local de captura, matéria-prima contaminada e risco da presença de enteropatógenos, demonstrando desequilíbrio no ambiente estudado com comprometimento da biodiversidade aquática.(AU)

A preliminary approach to embryonic development of Austrolebias wolterstorffi, an endangered neotropical annual fish species / Desenvolvimento embrionário de Austrolebias wolterstorffi, uma espécie de peixe anual neotropical criticamente ameaçada de extinção

Annual fish live exclusively in temporary wetlands and are among the shortest-lived vertebrates in the world. These fish persist in these habitats due to drought-resistant eggs, that which, through diapauses are able to detect stimuli from the environment to start the development processes. They are also able to direct their embryonic development in different trajectories with different development times. Our objective in this paper was to describe the different stages of embryonic development of Austrolebias wolterstorffi, a critically endangered annual fish. A total of 27 stages of embryonic development were identified for the two observed developmental pathways (direct and diapause 2). Of these 27 developmental stages observed, 24 were identical between the two types of trajectories and three different. A total of 90% of the embryos that completed their development proceeded normally, without pauses. One embryo had a different development from the others, entering diapause 2, with a pause in development for 48 h. Although the embryonic development of A. wolterstorffi is similar to that of other Neotropical annual fish species, the diapause 2 occurs when the embryo has a large body size and a well-developed brain, indicating that the lack of embryonic information of the genus Austrolebias may hide characteristics still undescribed or even different survival strategies than what has been observed for other annual fish.

Os peixes anuais vivem exclusivamente em áreas úmidas temporárias e estão entre os vertebrados de vida mais curta do mundo. Esses peixes persistem nesses habitats devido a ovos resistentes à seca, que, por meio de diapausas, são capazes de detectar estímulos do ambiente para iniciar os processos de desenvolvimento embrionário. Eles também são capazes de direcionar seu desenvolvimento embrionário em diferentes trajetórias com diferentes tempos de desenvolvimento. O objetivo deste trabalho foi descrever os diferentes estágios do desenvolvimento embrionário de Austrolebias wolterstorffi, um peixe anual criticamente ameaçado. Um total de 27 estágios de desenvolvimento embrionário foram identificados para as duas trajetórias de desenvolvimento observadas (direto e diapausa 2). Desses 27 estágios de desenvolvimento observados, 24 eram idênticos entre os dois tipos de trajetórias e três diferentes. Um total de 90% dos embriões que completaram seu desenvolvimento seguiu normalmente, sem pausas. Um embrião teve um desenvolvimento diferente dos demais, entrando na diapausa 2, com pausa no desenvolvimento de 48h. Embora o desenvolvimento embrionário de A. wolterstorffi seja semelhante ao de outras espécies de peixes anuais neotropicais, a diapausa 2 ocorre quando o embrião tem um corpo grande e um cérebro bem desenvolvido, indicando que a falta de informação embrionária do gênero Austrolebias pode escondem características ainda não descritas ou mesmo estratégias de sobrevivência diferentes das observadas para outros peixes anuais.

Fish responses to multiple scales in coastal blackwater Atlantic Forest streams in Southeast Brazil

Environmental factors act at multiple spatial scales in a hierarchical manner to shape the organization of biota. However, the relative influence of different scale-related factors is poorly known, especially in Atlantic Forest Blackwater streams. Therefore, we herein aimed to evaluate local, landscape and spatial factors that shape fish assemblages in 14 blackwater restinga coastal Atlantic Forest streams under natural conditions and verify species occurrence patterns among four sub-basins during the low-precipitation season. When we combined local, landscape and spatial factors, variance partitioning explained a high proportion of variation in species matrix. Local variables pH and Total Dissolved Solids explained most of the variability, and these were the most important factors in determining fish community structure. Significant differences in fish assemblage structure among the four sub-basins were observed, and Mimagoniates microlepis, Phalloceros harpagos, and Hollandichthys multifasciatus were the species that most contributed to this dissimilarity. The important contribution of local predictors, the high number of endemic species herein recorded, the presence of an endangered species (Spintherobolus broccae), and near pristine conditions, may be used as baseline conditions for the assessment of similar environments.

Fatores ambientais atuam em múltiplas escalas espaciais de forma hierárquica, moldando a organização da biota. Todavia, as influências relativas de fatores relacionados a diferentes escalas são ainda pouco conhecidas, especialmente em riachos de águas pretas da Mata Atlântica. Investigamos como os fatores locais, da paisagem e espaciais, moldam as assembleias de peixes em 14 riachos costeiros de restinga de águas pretas da Mata Atlântica sob condições naturais, verificando os padrões de ocorrência de espécies em quatro sub-bacias durante a estação de baixa precipitação. A partição de variância explicou uma alta proporção de variação na matriz de espécies ao combinar fatores locais, de paisagem e espaciais. As variáveis ​ locais pH e Sólidos Totais Dissolvidos explicaram a maior parte da variabilidade e foram os fatores mais importantes na estruturação da comunidade de peixes. Foram observadas diferenças significativas na estrutura da assembleia de peixes entre as quatro sub-bacias, sendo que Mimagoniates microlepis, Phalloceros harpagos e Hollandichthys multifasciatus foram as espécies que mais contribuíram para essa dissimilaridade. A importante contribuição dos preditores locais, o alto número de espécies endêmicas e a presença de uma espécie ameaçada (Spintherobolus broccae) indicam condições próximas das pristinas dos riachos, podendo estes ser usados como referência para a avaliação de ambientes semelhantes.

Functional diversity: a review on freshwater fish research

Functional diversity is an emergent approach in ecology that has been applied globally to better understand the relationships between organisms and the environment. However, assessing the functional diversity of freshwater fish is a challenge for scientists. Aiming to summarize the evolution of scientific knowledge on fish functional diversity, we performed a systematic review of the literature published from 1945 to 2021 using the Web of Science. Based on the 101 articles reviewed, we found that publications about functional diversity of fishes have increased over time, mainly in Neotropical, Indomalayan and Palearctic regions. Most studies were conducted in lotic ecosystems, especially to assess environmental impacts such as biological invasions and land use. Functional diversity has been assessed mainly by morphological traits that reflect feeding and locomotion dimensions. Functional richness was the most common index used in the studies. Our findings suggest that political neglect and lack of investments may hamper the research development in several places. The missing information about the functional traits of many species may limit the use of the functional approach. We also highlight the need for the incorporation of functional diversity in conservation programs once functional diversity is a key facet of biodiversity to maintain freshwater ecosystem functioning.

A diversidade funcional tem sido avaliada principalmente através de traços funcionais morfológicos que refletem as dimensões da alimentação e locomoção. A Riqueza Funcional foi a métrica mais comumente usada nos estudos. Esses resultados sugerem que a negligência política e a falta de investimentos podem dificultar o desenvolvimento de pesquisas em diversas regiões. A falta de informações sobre os traços funcionais de muitas espécies limita o uso da abordagem funcional. Destaca-se também a necessidade de incorporar a diversidade funcional em programas de conservação, uma vez que a diversidade funcional é uma faceta chave da biodiversidade para manter o funcionamento dos ecossistemas de água doce.

Diversity and conservation of fishes from karstic areas of the Jandaíra Formation in the Brazilian semiarid

Few studies have focused on non-troglomorphic fishes occurring in Brazilian caves, especially those in the Caatinga region. The present study is the first survey of fishes from karstic areas of the Jandaíra Formation in Rio Grande do Norte State, northeastern Brazil. This region is characterized by a high concentration of caves and a rich subterranean biodiversity, especially of troglobitic invertebrates, but remains considered a gap on the knowledge of the subterranean ichthyofauna in Brazil. Four field expeditions were carried out covering two dry and two rainy seasons, in 2018 and 2019, in 23 localities in small river basins along the western part of the Jandaíra Formation. A total of 829 fish specimens, none of them troglomorphic, was captured and identified as belonging to 25 species of 12 families and five orders. Amongst them, four species are endemic of the Mid-Northeastern Caatinga ecoregion, and two non-native species were recorded. Habitats were classified into three categories: superficial, associated to cave, and cave. Although no troglomorphic fish species was found in this study, we recorded 64.1% of the Apodi-Mossoró river ichthyofauna occurring in caves or associated to caves, corroborating the hypothesis that part of the ichthyofauna exploits these environments as a refuge during the dry season. In addition, we suggest conservation policies for the maintenance of subterranean and aquatic semiarid ecosystems in the Jandaira formation, which is currently under threat due to anthropogenic activities, such as mining and deforestation.(AU)

Early life history of two Neotropical Triportheidae fish (Characiformes)

The early ontogeny of Triportheus albus and T. angulatus, two fish species of Triportheidae, is described using morphological, meristic, and morphometric characters. These species are exploited by subsistence fisheries and have potential as an alternative source of fish, given the decline in the natural stocks of other commercially important fish species in the Amazon. The specimens were collected in the open water limnetic zone, under of the macrophyte stands, and in subsurface areas near sandbars in the Amazon basin. Intra and interspecific morphometric analyzes were performed to evaluate growth models between species. The combination of color pattern, body morphology, morphometric proportions and myomeres number distinguishes the species from each other and from other congeners. Some morphometric relationships related to head as snout length and eye diameter as well as length from the snout to the origins of anal and length from the snout to the origins of pelvic, related with standard length were different between the two species of Triportheus, reflecting different growth models between them. An identification key for larvae and juveniles of some species of Triportheus from the Eastern Amazon is presented.(AU)

A ontogenia inicial de Triportheus albus e T. angulatus, duas espécies de peixes pertencentes a Triportheidae, é descrita usando caracteres morfológicos, merísticos e morfométricos. Essas espécies são exploradas pela pesca de subsistência e têm potencial como fonte alternativa de pescado, dado o declínio nos estoques naturais de outras espécies de peixes comercialmente importantes na Amazônia. Os espécimes foram coletados na zona limnética de águas abertas, sob bancos de macrófitas e em áreas subsuperficiais próximas a bancos de areia na bacia amazônica. Análises morfométricas, intra e interespecíficas, foram realizadas para avaliar modelos de crescimento entre as espécies. A combinação do padrão de coloração, morfologia corporal, proporções morfométricas e número de miômeros distingue as espécies entre si e de outras congêneres. Algumas relações morfométricas relacionadas à cabeça, como comprimento do focinho e diâmetro do olho, assim como o comprimento do focinho à origem da nadadeira anal e o comprimento do focinho à origem da nadadeira pélvica, relacionadas ao comprimento padrão foram diferentes entre as duas espécies de Triportheus, refletindo modelos distintos de crescimento entre elas. Uma chave de identificação para larvas e juvenis de algumas espécies de Triportheus da Amazônia Oriental é apresentada.(AU)

Morphological and histometric features of the caudal kidney in piranha Pygocentrus nattereri (Characiformes: Serrasalmidae)

Pygocentrus nattereri is a widely distributed species in the Neotropical region and a potential bio-indicator. Kidneys have functions in fish physiology, allowing them to live in different environments. We aimed to compare the histological characteristics of caudal kidneys between males and females, associating them with the renosomatic index (RSI). For this purpose, 15 males and 14 females were used for biometric and histological analyses. Structural volumetric density (SVD), renal corpuscle histometric measures, and hemosiderin and lipofuscin deposit frequency in macrophages melanogenic (MMs) were assessed. No biometric differences were observed between the sexes, but body weight and standard length were correlated with RSI. The SVD showed difference in hematopoietic tissue between female and males, whereas the density of the other structures was not different. The RSI was positively associated with hematopoietic tissue and proximal tubule density in contrast to distal tubules, blood vessels, collecting ducts and MMs. Females exhibited a higher renal corpuscle area, glomerulus area, distal tubule diameter, collecting tubule area, and collecting tubule lumen area. These differences may be due to metabolic differences between males and females. Sex effect in P. nattereri may define punctual differences in future studies on the metabolism and immunity of this species.

Pygocentrus nattereri é uma espécie amplamente distribuída na região Neotropical e pode ser considerada como um potencial bioindicador ambiental. Os rins têm funções cruciais na fisiologia dos peixes, permitindo-lhes viver em diferentes ambientes. Nosso objetivo foi comparar as características histológicas dos rins excretores entre machos e fêmeas, associando-as ao índice renossomático (IRS). Para tanto, 15 machos e 14 fêmeas foram utilizados para análises biométricas e histológicas. Amostras do tecido renal foram processadas para densidade estrutural volumétrica, medidas histométricas do corpúsculo renal e frequência dos depósitos de hemossiderina e lipofuscina nos macrófagos melonogênicos (MMs). Não foram observadas diferenças biométricas entre os sexos, mas a massa corporal e o comprimento padrão foram correlacionados com IRS. Apenas a densidade estrutural volumétrica do tecido hematopoiético foi diferente entre machos e fêmeas. Não houve diferença nas demais estruturas. O IRS associou-se positivamente com o tecido hematopoiético e densidade dos túbulos proximais e negativamente com os túbulos distais, vasos sanguíneos, ductos coletores e MMs. As fêmeas apresentaram maior área do corpúsculo renal, área do glomérulo, diâmetro do túbulo distal, área do túbulo coletor e área do lúmen do túbulo coletor. Essas diferenças podem ser devida às diferenças metabólicas entre machos e fêmeas. Particularidade do efeito de sexo em P. nattereri pode definir diferenças pontuais em futuros estudos sobre o metabolismo e imunidade nesta espécie.

Fish functional trophic groups in headwater karst streams from the Upper Paraguay River basin

Data obtained by direct observation of organisms in their natural habitats can provide valuable contributions regarding intra- and inter-specific interactions, as well as spatial distribution and trophic relationships. However, relatively few such data are available for the Neotropical ichthyofauna relative to the great species diversity of this region. We present data on the ichthyofauna in karst environments of the Serra da Bodoquena, Upper Paraguay River basin regarding their categorization into functional trophic groups. We used direct observations that focused on the most frequent feeding tactics and their spatial (vertical and horizontal) distribution in the channel. We observed 83 fish species in 17 functional trophic groups. The greatest species richness was concentrated in the Characidae and Loricariidae in the categories Diurnal Backwater Drift Feeders and Grazers, respectively. Regarding horizontal depth stratification, we found a positive relationship between the association of small fish with the shallow marginal habitats. This work represents a contribution to a region known for its high tourist potential and to the important diversity of the entire ichthyofauna of the Upper Paraguay basin region that requires proper conservation strategies for sustaining these species.(AU)

Dados obtidos pela observação direta dos organismos em seus hábitats naturais podem fornecer valiosas contribuições com relação a interações intra e inter-específicas, além de distribuição espacial e relações tróficas. Entretanto, relativamente poucos dados estão disponíveis no que diz respeito à ictiofauna neotropical dada à grande diversidade dessa região. Apresentamos dados sobre a ictiofauna em ambientes cársticos da Serra da Bodoquena, bacia do alto rio Paraguai e a categorização das mesmas em grupos tróficos funcionais baseada em observações diretas relacionadas às táticas alimentares mais frequentes e à sua distribuição espacial (vertical e horizontal) no canal. Assim sendo, observamos 83 espécies de peixes alocadas em 17 grupos tróficos funcionais. A maior riqueza de espécies concentrou-se nas famílias Characidae e Loricariidae, abrangendo as categorias Catadores Diurnos de Itens Arrastados pela Corrente e Pastadores, respectivamente. Com relação à estratificação horizontal, encontramos a relação positiva entre a associação de peixes de pequeno porte com relação aos hábitats marginais. Esse trabalho representa uma contribuição a uma região conhecida pelo seu alto potencial turístico e à importante diversidade da ictiofauna da região da bacia do alto Paraguai que requer estratégias de conservação adequadas para sustentar essas espécies.(AU)

Phylogeography of Oligosarcus acutirostris (Characiformes: Characidae): testing biogeographic hypotheses in the Northeastern Mata Atlântica freshwater ecoregion

The Northeastern Mata Atlântica freshwater ecoregion (NMAF) is recognized for the high degree of endemism of its ichthyofauna, whose evolutionary and biogeographic histories are still poorly understood. Oligosarcus acutirostris is a freshwater fish species endemic to the NMAF, which is distributed in coastal rivers and streams draining Bahia, Espírito Santo, and part of Minas Gerais states in eastern Brazil. Its widespread distribution in currently isolated river basins along the NMAF prompted this study, which aimed to understand what scenarios would be involved in determining its current distribution pattern, and to contribute to a better understanding of the biogeographic history of the NMAF. For this, mitochondrial and nuclear DNA sequences were analyzed based on samples from different localities along the species distribution, including its type locality. Overall, phylogeographic analyses indicate a strong genetic structure within the species evidenced mainly by the non-sharing of haplotypes between most of the basins analyzed. According to the AMOVA results, the current distribution of haplotypes is better explained by the Pleistocene coastal paleodrainages. The results are also used to test and complement a biogeographic hypothesis previously proposed for the drainages of the NMAF.(AU)

A ecorregião de água doce Mata Atlântica Nordeste (NMAF) é reconhecida pelo alto grau de endemismo da sua ictiofauna, cujas histórias evolutiva e biogeográfica ainda são pouco compreendidas. Oligosarcus acutirostris é uma espécie de peixe de água doce endêmica da NMAF, que está distribuída em rios e riachos costeiros que drenam os estados da Bahia, Espírito Santo e parte de Minas Gerais, no leste do Brasil. Sua ampla distribuição em bacias atualmente isoladas ao longo da NMAF motivou este estudo, que teve como objetivos entender quais cenários estariam envolvidos na determinação do seu padrão atual de distribuição e contribuir para uma melhor compreensão da história biogeográfica da NMAF. Para isto, foram analisadas sequências de DNA nuclear e mitocondrial, a partir de amostras de diferentes localidades ao longo da distribuição da espécie, incluindo sua localidade tipo. No geral, as análises filogeográficas indicam forte estruturação genética na espécie, evidenciada principalmente pelo não compartilhamento de haplótipos entre a maioria das bacias analisadas. De acordo com os resultados da AMOVA, a distribuição atual dos haplótipos é melhor explicada pelas paleodrenagens costeiras do Pleistoceno. Os resultados obtidos também são utilizados para testar e complementar hipótese biogeográfica previamente proposta para as drenagens da NMAF.(AU)

Molecular characterization of Astyanax species (Characiformes: Characidae) from the upper Paraguaçu River basin, a hydrographic system with high endemism

Molecular tools have been employed to improve the knowledge about freshwater Neotropical fishes. Such approaches supporting studies of groups including species complexes such as Astyanax, one of the most diversified and taxonomically complex genus of the family Characidae. Here, we employed species delimitation analyses in four Astyanax species described for the upper Paraguaçu River basin, a drainage within Northeastern Mata Atlântica freshwater ecoregion with high endemism. We implemented single and multilocus approaches based on two mitochondrial and one nuclear markers. Cytochrome c Oxidase I sequences previously available for Astyanax species were also added to our dataset. The single locus analyses showed A. epiagos, A. rupestris, and A. aff. rupestris as different Molecular Operational Taxonomic Units (MOTUs), while A. brucutu and A. lorien were grouped. However, the multilocus approach distinguished these two species and showed congruence for the remaining single locus results. Astyanax aff. rupestris was separated into two MOTUs using both approaches, highlighting the need for an integrative taxonomic revision including A. aff. rupestris. These findings contribute to a better understanding of the diversity of this fish group in the upper Paraguaçu, identifying hidden diversity and reinforcing the relevance of this hydrographic system as a notable hotspot for ichthyofauna biodiversity endemism.(AU)

Ferramentas moleculares têm sido empregadas para melhorar o conhecimento sobre os peixes Neotropicais. Tais abordagens apoiam estudos de grupos que incluem complexos de espécies, como Astyanax, um dos gêneros mais diversificados e taxonomicamente complexos dentro da família Characidae. Neste estudo, nós empregamos análises de delimitação de espécies em quatro espécies de Astyanax recentemente descritas da bacia do alto rio Paraguaçu, uma drenagem dentro da ecorregião Mata Atlântica Nordeste que apresenta alto endemismo. Nós realizamos abordagens de loco único e multilocos baseadas em dois marcadores mitocondriais e um nuclear. Sequências de Citocromo c Oxidase I anteriormente disponíveis para espécies de Astyanax foram adicionadas ao nosso conjunto de dados. As análises de loco único mostraram A. epiagos, A. rupestris e A. aff. rupestris como diferentes Unidades Taxonômicas Operacionais Moleculares (MOTUs), enquanto A. brucutu e A. lorien foram agrupadas. Entretanto, a abordagem multilocos distinguiu estas duas espécies e mostrou congruência com os demais resultados das análises de loco único. Astyanax aff. rupestris foi separada em duas MOTUs usando ambas as abordagens, sugerindo a necessidade de uma revisão taxonômica integrativa incluindo A. rupestris e ambas A. aff. rupestris. Esses achados contribuem para uma melhor compreensão da diversidade desse grupo de peixes na bacia do rio Paraguaçu, identificando diversidade oculta e reforçando a relevância desse sistema hidrográfico como um notável hotspot de endemismo da biodiversidade da ictiofauna.(AU)

Helminths of South American fur seals (Arctocephalus australis) from the Subtropical Convergence Zone of the Southwestern Atlantic / Helmintos de lobos-marinhos-sul-americanos (Arctocephalus australis) da Zona de Convergência Subtropical do Atlântico Sudoeste

Parasites are important components of ecosystems and may contribute to the ecological aspects of their hosts and indicate the integrity of their environment. To identify the gastrointestinal helminths of the South American fur seal, Arctocephalus australis, 52 animals found dead on the Rio Grande do Sul coast, Southern Brazil, were necropsied. All studied animals were parasitized, and 104,670 specimens of helminths from three phyla and 14 taxa were collected. Adult specimens represented five of the identified species: Contracaecum ogmorhini, Adenocephalus pacificus, Stephanoprora uruguayense, Ascocotyle (Phagicola) longa, and Corynosoma australe; and one of the identified genera: Strongyloides sp. Immature forms represented the other eight taxa: Anisakidae gen. sp., Anisakis sp., Pseudoterranova sp., Contracaecum sp., Tetrabothriidae gen. sp., Cestoda gen. sp., Corynosoma cetaceum, and Bolbosoma turbinella. The acanthocephalan C. australe was the most prevalent and abundant parasite, whereas Strongyloides sp. had the highest intensity. This is the first record of the nematode Anisakis sp., digenean S. uruguayense, and acanthocephalan B. turbinella in this host. Trophic generalist species such as A. australis can be good indicators of the composition of the helminth fauna of their ecosystems, indicating the presence of zoonotic parasites transmitted by the consumption of fish.(AU)

Os parasitas são componentes importantes dos ecossistemas e podem contribuir com os aspectos ecológicos de seus hospedeiros e indicar a integridade de seus ambientes. Com o objetivo de identificar os helmintos gastrointestinais de Lobos-marinhos-sul-americanos, Arctocephalus australis, 52 animais, encontrados mortos no litoral do Rio Grande do Sul, sul do Brasil, foram necropsiados. Todos os animais estudados estavam parasitados, e 104.670 espécimes de helmintos de três filos e 14 táxons foram coletados. Foram representadas por espécimes adultos cinco espécies: Contracaecum ogmorhini, Adenocephalus pacificus, Stephanoprora uruguayense, Ascocotyle (Phagicola) longa, e Corynosoma australe; e um gênero: Strongyloides sp. Oito táxons foram representados por formas imaturas: Anisakidae gen. sp., Anisakis sp., Pseudoterranova sp., Contracaecum sp., Tetrabothriidae gen. sp., Cestoda gen. sp., Corynosoma cetaceum, e Bolbosoma turbinella. O acantocéfalo C. australe foi o parasita mais prevalente e abundante, enquanto Strongyloides sp. foi o de maior intensidade. Este é o primeiro registro do nematódeo Anisakis sp., do digenético S. uruguayense e do acantocéfalo B. turbinella neste hospedeiro. Espécies de elevado nível trófico como A. australis podem ser bons indicadores da composição da helmintofauna de seus ecossistemas, alertando-se para a presença de parasitas zoonóticos transmitidos pelo consumo de peixes.(AU)

Physical clutter affects the use of artificial ponds by the Lesser Bulldog Bat Noctilio albiventris (Chiroptera: Noctilionidae)

Bats frequently feed over water bodies, but the net value of the water bodies depends on characteristics such as the amount of physical clutter the water body has. More physical clutter may reduce the detection of prey by bats and may also increase energetic costs by increasing in the number of obstacles to avoid. Consequently, we hypothesized that increasing physical clutter affected the use of an artificial pond where the Lesser Bulldog Bat Noctilio albiventris, a Neotropical fishing bat, forages regularly over water. We experimentally tested this idea recording the number of passes and feeding buzzes emitted by the bats on different nights when we added two levels of obstacles over the water and on control nights with no obstacles. We only found differences between the treatment with the highest obstacle density and the control; there were fewer passes and less feeding buzzes with more obstacles. Therefore, the addition of obstacles did affect the foraging behavior of N. albiventris. Furthermore, we suggest that increasing physical clutter, as in our experiments, may be a cost-effective way to reduce conflicts between local fisher farmers and fishing bats in Neotropical rural areas.(AU)

Pre-copulatory bite wounds as evidence of aggressive competition for mating in the neotropical freshwater stingray Potamotrygon motoro / Lesões por mordidas pré-copulatórias como evidência de competição agressiva para acasalar na raia de água doce neotropical Potamotrygon motoro

Reproductive aspects of Amazonian freshwater stingrays are still poorly studied, however, it is known that the copulatory behavior in some species is related to the hydrometric seasons (high and low water). In order to assess the reproductive activity prior to copulation, we examined bite wounds in Potamotrygon motoro of Catalão Lake, in Amazonas state, Brazil. Specimens of both sexes showed wounds on the pectoral fins. Males presented a large amount of bite wounds, distributed randomly throughout the body, while females had more bite wounds on the posterior region. The higher number of wounds in males is assumed to indicate aggressive interactions among males in competition for females, caused by attempts to prevent other males from mating with the target female. The behavior is likely owed to the confinement of the stingrays in the lake during the low-water period.(AU)

Os aspectos reprodutivos das raias de água doce ainda são pouco estudados, no entanto, sabe-se que algumas espécies apresentam comportamento de cópula relacionado com as estações hidrométricas (águas altas e baixas). Com o intuito de avaliar as atividades reprodutivas que antecedem a cópula, nós examinamos as lesões por mordidas em Potamotrygon motoro do Lago Catalão, Amazonas. Espécimes de ambos os sexos apresentaram lesões nas nadadeiras peitorais. Os machos apresentaram uma maior quantidade de mordidas distribuídas aleatoriamente por todo o corpo, enquanto as fêmeas apresentaram mais lesões de mordidas na região posterior. Acreditamos que o maior número de lesões nos machos indica interações agressivas entre os machos em competição por fêmeas, causada por tentativas de impedir outros machos de acasalar com a fêmea alvo. Tal comportamento provavelmente deve-se ao confinamento das raias no lago durante o período de águas baixas.(AU)

Early development of two commercially valuable fish from the lower Amazon River, Brazil (Characiformes: Serrasalmidae)

We described the early development of Myloplus asterias and M. lobatus, two fish species of the Serrasalmidae using morphological, meristic, and morphometric characteristics. These herbivores serrasalmids are heavily fished because of their commercial importance in the Amazon. The individuals were collected between 2016 and 2020 in the limnetic zone of open water and macrophyte stands in the Lower Amazon River floodplain. We tested different growth models to identify the development pattern of these species. During the initial ontogeny, these two species can be differentiated mainly by the myomeres total number, 37 to 39 in M. asterias vs. 40 to 41 in M. lobatus, the pigmentation pattern, and dorsal-fin ray numbers. These characteristics are effective in distinguishing these species from other serrasalmids. The morphometric relationships were also different between these two species, showing distinct patterns in growth between the analyzed features. An identification key for larvae of some sympatric Serrasalmidae species from the Amazon basin is presented. Our expectation is that this study will contribute to the knowledge of the initial ontogeny and the biology of fish species in the Neotropical region.(AU)

Descrevemos o desenvolvimento inicial de Myloplus asterias e M. lobatus, duas espécies de peixes da família Serrasalmidae usando características morfológicas, merísticas e morfométricas. Esses serrasalmídeos herbívoros são fortemente pescados devido à sua importância comercial na Amazônia. Os indivíduos foram coletados entre 2016 e 2020 na zona limnética de águas abertas e em bancos de macrófitas na planície de inundação do baixo rio Amazonas. Testamos diferentes modelos de crescimento para identificar o padrão de desenvolvimento dessas espécies. Durante a ontogenia inicial, essas duas espécies podem ser diferenciadas pelo número total de miômeros; 37 a 39 em M. asterias vs. 40 a 41 em M. lobatus; pelo padrão de pigmentação e número de raios da nadadeira dorsal. Essas características são eficazes para distinguir essas espécies de outros serrasalmídeos. As relações morfométricas também foram diferentes entre as duas espécies, com distintos padrões de crescimento entre as características analisadas. Uma chave de identificação para larvas de algumas espécies simpátricas de Serrasalmidae da bacia amazônica é apresentada. Nossa expectativa é que este estudo contribua para o conhecimento da ontogenia inicial e da biologia das espécies de peixes da região Neotropical.(AU)

Impact of a large dam on reproduction of a non-migratory teleost species, Acestrorhynchus lacustris (Characiformes: Acestrorhynchidae)

Abstract The release of water from the reservoir hypolimnion, lower concentration of oxygen and the anthropogenic regulation of the river flow, could affect the reproduction of fish, especially migratory species. However, little is known about the effects of these changes in water on non-migratory species. In this sense, the reproduction of Acestrohynchus lacustris was evaluated in two sections of São Francisco River, Minas Gerais, Brazil. Section 1, located immediately downstream from Três Marias Dam (18°0931.65S and 45°1336.00W) and section 2, located at the confluence of the São Francisco and the Abaeté Rivers (18°0247.78S and 45°1057.95W). For this, we obtained the physico-chemical parameters of water of each study section. Additionally, biometric data and biological indices of all specimens were measured. Fecundity and follicles diameters were measured in females. Temperature, dissolved oxygen and flow showed lower values in section 1. Fish captured in this section, had lower values of GSI in both sexes, and females presented decreased values of fecundity and follicles diameter. This species showed reproductive activity in the two sections analyzed, however, in section 1 where the temperature and dissolved oxygen presented significant lower values, the reproductive capacity of A. lacustris, was negatively affected.

Resumo A liberação de água do hipolímnio do reservatório, baixa concentração de oxigênio e a regulação antropogênica do fluxo do rio podem afetar a reprodução de peixes, principalmente espécies migradoras. No entanto, pouco se sabe sobre os efeitos dessas mudanças nas condições da água em espécies não migradoras. A reprodução de Acestrohynchus lacustris foi avaliada em duas seções do rio São Francisco. Seção 1, localizada imediatamente a jusante da barragem de Três Marias e seção 2, localizada na confluência dos rios São Francisco e Abaeté. Para isso, foram obtidos os parâmetros físico-químicos da água de cada seção do estudo. Além disso, dados biométricos e índices biológicos de todos os peixes capturados foram obtidos. Adicionalmente, nas fêmeas foram medidos os diâmetros dos folículos vitelogênicos e a fecundidade. Temperatura, oxigênio dissolvido e fluxo apresentaram valores mais baixos na seção 1. Os peixes capturados nesta seção apresentaram menores valores de IGS em ambos os sexos, e as fêmeas apresentaram menores valores de fecundidade e diâmetro dos folículos. Essa espécie apresentou atividade reprodutiva nas duas seções analisadas, porém, na seção 1, onde os parâmetros da água apresentam piores condições para o processo reprodutivo de peixes, a capacidade reprodutiva de A. lacustris foi afetada negativamente.

Do cage fish farms interfere with the food aspects of the wild species Metynnis lippincottianus (Characiformes, Serrasalmidae)? / Pisciculturas em tanques-rede interferem sobre os aspectos alimentares da espécie silvestre Metynnis lippincottianus (Characiformes, Serrasalmidae)?

We evaluated the differences in the diet and trophic guild of Metynnis lippincottianus under the in-fluence of cage fish farms in the Neotropical reservoir. We collected samples from two areas (cage farm and control) in March and June 2019. Stomach contents were examined, and food items were identified and quantified using the volumetric method. Differences in diet composition were evaluated using PERMANOVA and SIMPER analyses, while trophic niche breadth was determined using PERMDISP. The trophic guild for each area was also determined. Significant differences in diet between cage farm and control areas were observed, due to consumption of pelleted feed, mi-crocrustaceans, Egeria sp., and filamentous algae. In both sampling areas, M. lippincottianus was classified as algivorous. Despite the pelleted feed consumption in the cage farm area, no differen-ces were observed in trophic niche breadth and the trophic guild. In addition, algae and macro-phytes still accounted for the majority of this species' diet in both areas, indicating partitioning of resources. This resource partitioning may favor coexistence, but it is worth mentioning that pelleted feed consumption still indicates the influence of cage fish farms on the diet of wild fish.(AU)

Avaliamos as diferenças na dieta e guilda trófica de Metynnis lippincottianus sob a influência de pis-ciculturas em um reservatório neotropical. Coletamos amostras de duas áreas (tanques-rede e con-trole) em março e junho de 2019. O conteúdo estomacal foi examinado e os itens alimentares foram identificados e quantificados usando o método volumétrico. As diferenças na composição da dieta foram avaliadas usando as análises PERMANOVA e SIMPER, enquanto a amplitude do nicho trófico foi determinada usando PERMDISP. A guilda trófica para cada área também foi determinada. Foram observadas diferenças significativas na dieta entre as áreas tanques e controle, devido ao consumo de ração, microcrustáceos, Egeria sp. e algas filamentosas. Em ambas as áreas de amostragem, M. lippincottianus foi classificado como algívoro. Apesar do consumo de ração na área tanque, não foram observadas diferenças na amplitude do nicho trófico e na guilda trófica. Além disso, algas e macrófitas ainda representam a maior parte da dieta desta espécie em ambas as áreas, indicando partilha de recursos. Essa partilha de recursos pode favorecer a coexistência, mas vale ressaltar que o consumo de ração ainda indica influências das pisciculturas em tanques-rede sob a dieta dos peixes silvestres.(AU)

Freshwater fishes of the Río de la Plata: current assemblage structure

Few studies have addressed the composition of fish assemblages of the freshwater Río de la Plata (RdlP) and have only been limited to species lists gathered over the last two centuries. As such inventories have never been reviewed or validated by fish sampling, the richness and structure of RdlP fish assemblage are poorly known. Hence, we conducted an exhaustive literature review and a fieldwork in six coastal points of Argentina to update the species composition and determine the hierarchical structure of the fish assemblage. From the 206 species registered in the literature, 48 were not confirmed, 13 were absent, five were taken as synonymized species, 29 were supported by literature and 107 were confirmed; one was an established exotic species, and three were a non-established exotic species. The findings reported here suggest that the fish assemblage currently comprises 141 species, including four new records. Analysis of fieldwork data in number and weight of fish captured resulted in an assemblage hierarchical structure of five dominant, 22 frequent, and 45 rare species; 16 dominant, 11 frequent, and 45 rare taxa, respectively. These results could be used as baseline to monitor, manage, and preserve neotropical fish species in their southern distribution boundary.

El conocimiento de los ensambles de peces del sector dulceacuícola del Río de la Plata (RdlP) es escaso y limitado a listas de especies de compilaciones realizadas en los últimos dos siglos. Como esos inventarios nunca han sido revisados o validados mediante muestreos de peces, el conocimiento respecto de la riqueza y la estructura de los ensambles del RdlP resulta deficiente. Para ordenar y mejorar la información acerca de la riqueza y estructura de los ensambles de peces del área se realizó una revisión bibliográfica y un muestreo de campo para actualizar la composición de especies y determinar la estructura jerárquica del ensamble de peces. De las 206 especies colectadas de acuerdo a la bibliografía 48 se categorizaron como no reconfirmadas, 13 como ausentes, cinco como especies sinonimizadas, 29 como soportadas por la literatura, 107 como confirmadas, una exótica establecida y tres exóticas no establecidas. Los resultados sugieren que el ensamble de peces actualmente está compuesto por 141 especies, incluyendo cuatro nuevos registros. El análisis de los datos en número y en peso de los peces colectados mostró 5 especies dominantes, 22 frecuentes y 45 raras; y 16 dominantes, 11 frecuentes y 45 raras, respectivamente. Los resultados de este trabajo pueden ser usados como línea de base para el monitoreo, manejo y conservación de las especies de peces neotropicales en su límite de distribución sur.

Assessment of potentially toxic metals in water, sediment, and the tissues of seven important fish species from neotropical brazilian river

Fish are often used as bioindicators of the presence of potentially toxic metals in aquatic ecosystems. The objective of these study was to quantify the levels of Cd, Cr, Cu, Hg, Pb and Zn in water and sediment samples from the Sorocaba River and musculature and gill samples of seven species of fish (Hoplosternum littorale, Pterygoplichthys ambrosettii, Hypostomus ancistroides, Geophagus iporangensis, Prochilodus lineatus, Psalidodon cf. fasciatus, and Rhamdia quelen. In addition, the Bioaccumulation factor and Bioconcentration factor were obtained. The water and sediment analysis indicates average concentrations of metals below the maximum limit allowed by Brazilian legislation. Results above the legislation were found for chromium, in 18 samples: eight gills and 10 muscles. The trophic group that presented the highest contamination was the iliophages, followed by insectivores. There were no significant differences between the trophic groups in the absorption of the analyzed metals except for Zn and Hg in fish gills. The bioaccumulation factor in the gills and muscles showed that Hg and Zn had the highest values for the sediment in most species studied. Future research is needed to broaden the assessment as fish are consumed and water collection for supply has recently started downstream of the studied area.(AU)

Peixes são frequentemente usados como bioindicadores da presença de metais potencialmente tóxicos em ecossistemas aquáticos. O objetivo deste estudo foi quantificar as concentrações de Cd, Cr, Cu, Hg, Pb e Zn em amostras de água e sedimento do rio Sorocaba e em amostras de musculatura e brânquias de sete espécies de peixes (Hoplosternum littorale, Pterygoplichthys ambrosettii, Hypostomus ancistroides, Geophagus iporangensis, Prochilodus lineatus, Psalidodon cf. fasciatus e Rhamdia quelen), pertencentes a diferentes níveis tróficos. Além disso, foi obtido o fator de bioacumulação e o fator de bioconcentração. A análise de água e sedimento indicaram concentrações médias de metais abaixo do limite máximo permitido pela legislação brasileira. Foram encontrados valores acima da legislação principalmente para o cromo: oito brânquias e 10 músculos. O grupo trófico que apresentou maior contaminação foi o iliófago, seguido pelos insetívoros. Não foi verificado diferenças significativas entre os grupos tróficos na absorção dos metais analisados, exceto para zinco e mercúrio em brânquias de peixes. O fator de bioacumulação nas brânquias e músculos mostrou que Hg e Zn apresentaram os maiores valores para o sedimento na maioria das espécies estudadas. Pesquisas futuras são necessárias para ampliar a avaliação à medida que os peixes são consumidos e a coleta de água para abastecimento começou recentemente a jusante da área de estudo.(AU)