Ornithodoros mimon colonizing a residence in Campinas, state of São Paulo, associated with human parasitism / Ornithodoros mimon colonizando uma residência em Campinas, estado de São Paulo, associado a parasitismo humano

Ornithodoros mimon is an argasid tick species usually associated with bats and marsupials and occasionally parasitizes humans inside their homes. This paper reports a tick infestation in a residence in the municipality of Campinas, located in the interior of the state of São Paulo (SP). This report increases O. mimon occurrence in SP and corroborates its anthropophilic activity. Further studies are needed to clarify its role as a vector of pathogens. We highlighted the presence of O. mimon in an area with a large human population (Campinas) associated with synanthropic animals.(AU)

Ornithodoros mimon é uma espécie de carrapato argasídeo, geralmente associada a morcegos e marsupiais, sendo ocasionalmente relatada parasitando humanos dentro de seus domicílios. Este trabalho relata a infestação por carrapatos em uma residência no município de Campinas, interior do estado de São Paulo (SP). O presente relato amplia a ocorrência de O. mimon no estado de SP, corroborando sua atividade antropofílica, sendo necessários mais estudos para esclarecer o seu possível papel como vetor de patógenos. Destaca-se a presença de O. mimon numa área de grande contingente humano (Campinas), associado a animais sinantrópicos.(AU)

Infestação por carrapatos Argasidae e Ixodidae em pequenos mamíferos silvestres da Estação Experimental Rafael Fernandes, Mossoró/RN

ABSTRACT: Few studies have assessed the diversity of ectoparasites and their associated hosts occurring within the Caatinga biome in northeastern Brazil. Considering this lack of knowledge, in this study we aimed to identify and determine the occurrence of ticks collected from small mammals at the Estação Experimental Rafael Fernandes, in Rio Grande do Norte state, Brazil. From January 2014 to February 2015, we captured 52 marsupials (38 Gracilinanus agilis and 14 Monodelphis domestica) and 10 rodents (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. and 1 Rattus norvegicus). We identified the ticks Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon and Ornithodoros sp. by a morphological study, the use of taxonomic keys, and the partial sequencing of the tick mitochondrial 16S rDNA gene. All the tick-host associations found in this study are reported for the first time in Rio Grande do Norte and constitute new ecological data concerning ectoparasites of small mammals in northeastern Brazil.

RESUMO: Poucos estudos avaliaram a diversidade de ectoparasitos e a associação deles com seus hospedeiros que ocorrem no bioma Caatinga, Nordeste do Brasil. Considerando-se essa falta de conhecimento, este estudo objetivou identificar e determinar a ocorrência de carrapatos coletados de pequenos mamíferos da Estação Experimental Rafael Fernandes, no Rio Grande do Norte, Brasil. De janeiro de 2014 a fevereiro de 2015 foram capturados 52 marsupiais (38 Gracilinanus agilis e 14 Monodelphis domestica) e 10 roedores (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. e 1 Rattus norvegicus). Foram identificados os carrapatos Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon e Ornithodoros sp., empregando estudo morfológico, chaves taxonômicas e sequenciamento parcial do gene mitocondrial 16S rDNA de carrapatos. Todas as associações carrapato-hospedeiro encontradas neste estudo são relatadas pela primeira vez no Rio Grande do Norte e constituem novos dados ecológicos aplicáveis aos ectoparasitos de pequenos mamíferos no nordeste do Brasil.

Gut transcriptome analysis on females of Ornithodoros mimon (Acari: Argasidae) and phylogenetic inference of ticks / Transcriptoma do intestino de fêmeas de Ornithodoros mimon (Acari: Argasidae) e inferência filogenética de carrapatos

Ornithodoros mimon is an argasid tick that parasitizes bats, birds and opossums and is also harmful to humans. Knowledge of the transcripts present in the tick gut helps in understanding the role of vital molecules in the digestion process and parasite-host relationship, while also providing information about the evolution of arthropod hematophagy. Thus, the present study aimed to know and ascertain the main molecules expressed in the gut of argasid after their blood meal, through analysis on the gut transcriptome of engorged females of O. mimon using 454-based RNA sequencing. The gut transcriptome analysis reveals several transcripts associated with hemoglobin digestion, such as serine, cysteine, aspartic proteases and metalloenzymes. The phylogenetic analysis on the peptidases confirmed that most of them are clustered with other tick genes. We recorded the presence a cathepsin O peptidase-coding transcript in ticks. The topology of the phylogenetic inferences, based on transcripts of inferred families of homologues, was similar to that of previous reports based on mitochondrial genome and nuclear rRNA sequences. We deposited 2,213 sequence of O. mimon to the public databases. Our findings may help towards better understanding of important argasid metabolic processes, such as digestion, nutrition and immunity.(AU)

Ornithodoros mimon é um carrapato argasídeo parasita de morcegos, aves e marsupiais, além de ser bastante agressivo aos humanos. O conhecimento dos transcritos presentes no intestino dos carrapatos auxilia no entendimento do papel de moléculas vitais no processo de digestão e na relação parasito-hospedeiro, além de fornecer também informações sobre a evolução dos artrópodes hematófagos. Desta maneira, o presente estudo teve como objetivo conhecer e identificar as principais moléculas expressas no intestino de uma espécie de carrapato argasídeo após o repasto sanguíneo, através de uma análise transcritômica descritiva do intestino de fêmeas ingurgitadas de O. mimon, utilizando um sequenciamento de RNA de nova geração da plataforma 454. Além de inferir a relação filogenética de carrapatos através de um conjunto de dados transcritômicos. O transcriptoma do intestino revelou diversos transcritos associados com a digestão da hemoglobina, como proteinases das classes serino, cisteína, aspártica e metalo. Registramos a presença de um transcrito de uma cisteína peptidase do tipo catepsina O em carrapatos. A inferência filogenética baseada em conjunto de dados transcritos homólogos tem uma resolução topológica similar a de outros conjuntos de dados moleculares. Foram depositados no banco de dados gênico público 2213 transcritos de O. mimon. Os achados obtidos no presente estudo podem contribuir para compreensão dos importantes processos, como digestão, nutrição e imunidade dos carrapatos da família Argasidae, além de fornecer informações sobre a filogenia da ordem Ixodida.(AU)

Infestação por carrapatos Argasidae e Ixodidae em pequenos mamíferos silvestres da Estação Experimental Rafael Fernandes, Mossoró/RN / Infestation by ticks Argasidae and Ixodidae on small wild mammals at the Experimental Station Rafael Fernandes, Mossoró/RN, Brazil

Poucos estudos avaliaram a diversidade de ectoparasitos e a associação deles com seus hospedeiros que ocorrem no bioma Caatinga, Nordeste do Brasil. Considerando-se essa falta de conhecimento, este estudo objetivou identificar e determinar a ocorrência de carrapatos coletados de pequenos mamíferos da Estação Experimental Rafael Fernandes, no Rio Grande do Norte, Brasil. De janeiro de 2014 a fevereiro de 2015 foram capturados 52 marsupiais (38 Gracilinanus agilis e 14 Monodelphis domestica) e 10 roedores (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. e 1 Rattus norvegicus). Foram identificados os carrapatos Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon e Ornithodoros sp., empregando estudo morfológico, chaves taxonômicas e sequenciamento parcial do gene mitocondrial 16S rDNA de carrapatos. Todas as associações carrapato-hospedeiro encontradas neste estudo são relatadas pela primeira vez no Rio Grande do Norte e constituem novos dados ecológicos aplicáveis aos ectoparasitos de pequenos mamíferos no nordeste do Brasil.(AU)

Few studies have assessed the diversity of ectoparasites and their associated hosts occurring within the Caatinga biome in northeastern Brazil. Considering this lack of knowledge, in this study we aimed to identify and determine the occurrence of ticks collected from small mammals at the Estação Experimental Rafael Fernandes, in Rio Grande do Norte state, Brazil. From January 2014 to February 2015, we captured 52 marsupials (38 Gracilinanus agilis and 14 Monodelphis domestica) and 10 rodents (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. and 1 Rattus norvegicus). We identified the ticks Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon and Ornithodoros sp. by a morphological study, the use of taxonomic keys, and the partial sequencing of the tick mitochondrial 16S rDNA gene. All the tick-host associations found in this study are reported for the first time in Rio Grande do Norte and constitute new ecological data concerning ectoparasites of small mammals in northeastern Brazil.(AU)

Infestação por carrapatos Argasidae e Ixodidae em pequenos mamíferos silvestres da Estação Experimental Rafael Fernandes, Mossoró/RN / Infestation by ticks Argasidae and Ixodidae on small wild mammals at the Experimental Station Rafael Fernandes, Mossoró/RN, Brazil

Poucos estudos avaliaram a diversidade de ectoparasitos e a associação deles com seus hospedeiros que ocorrem no bioma Caatinga, Nordeste do Brasil. Considerando-se essa falta de conhecimento, este estudo objetivou identificar e determinar a ocorrência de carrapatos coletados de pequenos mamíferos da Estação Experimental Rafael Fernandes, no Rio Grande do Norte, Brasil. De janeiro de 2014 a fevereiro de 2015 foram capturados 52 marsupiais (38 Gracilinanus agilis e 14 Monodelphis domestica) e 10 roedores (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. e 1 Rattus norvegicus). Foram identificados os carrapatos Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon e Ornithodoros sp., empregando estudo morfológico, chaves taxonômicas e sequenciamento parcial do gene mitocondrial 16S rDNA de carrapatos. Todas as associações carrapato-hospedeiro encontradas neste estudo são relatadas pela primeira vez no Rio Grande do Norte e constituem novos dados ecológicos aplicáveis aos ectoparasitos de pequenos mamíferos no nordeste do Brasil.(AU)

Few studies have assessed the diversity of ectoparasites and their associated hosts occurring within the Caatinga biome in northeastern Brazil. Considering this lack of knowledge, in this study we aimed to identify and determine the occurrence of ticks collected from small mammals at the Estação Experimental Rafael Fernandes, in Rio Grande do Norte state, Brazil. From January 2014 to February 2015, we captured 52 marsupials (38 Gracilinanus agilis and 14 Monodelphis domestica) and 10 rodents (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. and 1 Rattus norvegicus). We identified the ticks Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon and Ornithodoros sp. by a morphological study, the use of taxonomic keys, and the partial sequencing of the tick mitochondrial 16S rDNA gene. All the tick-host associations found in this study are reported for the first time in Rio Grande do Norte and constitute new ecological data concerning ectoparasites of small mammals in northeastern Brazil.(AU)

Carrapatos e Riquétsias associados a pequenos mamíferos em áreas endêmicas e não endêmicas para Febre Maculosa Brasileira

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é a enfermidade transmitida por carrapatos de maior importância médica da América Latina. Capivaras são hospedeiros primários para o carrapato vetor Amblyomma sculptum, e amplificadoras da bactéria Rickettsia rickettsii, causadora da FMB. Entretanto, o ciclo epidemiológico da doença pode envolver outros componentes. Nesse sentido, pequenos mamíferos podem atuar como hospedeiros alternativos para carrapatos e para a manutenção do agente. O objetivo do presente estudo foi comparar ixodofauna e riquétsias associadas a pequenos mamíferos de áreas endêmicas e não endêmicas para FMB. Para isso pequenos mamíferos foram capturados (2015-2018) em três áreas endêmicas (E) e três áreas não endêmicas (NE) com alto grau de antropização no estado de São Paulo, e em duas áreas não endêmicas com baixo grau de antropização (BIO), uma no estado do Mato Grosso e outra no estado do Mato Grosso do Sul. Todos os carrapatos em parasitismo nos pequenos mamíferos capturados foram coletados. Soro sanguíneo foi testado para anticorpos anti-riquétsias por Reação de Imunofluorescência Indireta; carrapatos e tecidos dos pequenos mamíferos tiveram DNA extraído e testado na PCR para Rickettsia. Foi realizada uma análise comparativa de fatores ambientais que pudessem alterar a população de carrapatos e pequenos mamíferos do local entre as áreas E e NE. Foram capturados 629 animais de 27 espécies diferentes. A prevalência de parasitismo nesses animais foi de 45,4% nas E, 39% nas NE e 22% nas BIO. Nas E foram coletados 2795 carrapatos (A. sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale e Ixodes loricatus); nas NE 1283 (Ixodes schulzei, I. loricatus, A. ovale, A. sculptum e A. dubitatum) e nas BIO 342 (A.sculptum, Amblyomma parvum, A. ovale, Ornithodoros mimon e I. loricatus). A. sculptum correspondeu a 81% dos carrapatos nas E, 10,7% nas NE e 43,8% nas BIO, ocorrendo majoritariamente no marsupial Didelphis sp. nas E e NE. Foram soropositivos 33,3% dos roedores e 19,2% dos marsupiais nas E, 15,7% e 10,3% nas NE e 12,6% e 11,2% nas BIO respectivamente. Nas E a taxa de infecção dos carrapatos testados pela PCR foi de 13,8%, nas NE 24,1% e nas BIO 48,6%. Nenhuma amostra de tecido foi positiva. As áreas NE apresentaram diferenças significativas na variável complexidade de sub-bosque, sendo mais complexo nessas áreas. A composição na comunidade de hospedeiros e carrapatos diferiu entre as três áreas estudadas. Evidencia-se maior circulação de riquétsias e maior número de A. sculptum nas E, apesar da similaridade na abundância do principal pequeno mamífero associado a ambos, Didelphis sp., entre as E e NE.

Brazilian spotted fever (BSF) is the most important vector-borne disease in Latin America. Capybaras are primary hosts for the tick vector Amblyomma sculptum, and amplifiers of the bacterium Rickettsia rickettsii, which causes BSF. However, the epidemiological cycle of the disease may involve other components. In this sense, small mammals can act as alternative hosts for ticks and for the maintenance of the agent. The objective of the present study was to compare ixodofauna and rickettsiae associated to small mammals from endemic and non- endemic areas for BSF. For this purpose, small mammals were caught (2015-2018) in three endemic areas (E) and in three non-endemic (NE) areas with a high degree of anthropogenic impact in the state of São Paulo, and in two non-endemic areas with a low degree of anthropogenic impact (BIO ), one in the state of Mato Grosso and another in the state of Mato Grosso do Sul. All ticks on parasitism in the captured small mammals were collected. Blood serum samples were tested for anti-Rickettsia spp. antibodies by Indirect Immunofluorescence Reaction. Ticks and small mammalian tissues had DNA extracted and tested in PCR for Rickettsia. A comparative analysis of environmental factors that could influence the tick and small mammal populations of the site between E and NE areas was carried out. We recorded 629 specimens of animals, belonging to 27 small mammal species. The prevalence of parasitism in these animals was 45.4% in E, 39% in NE and 22% in BIO. In the E, 2795 ticks were collected (A. sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale and Ixodes loricatus); in NE 1283 ticks (Ixodes schulzei, I. loricatus, A. ovale, A. sculptum and A. dubitatum) and in BIO 342 ticks (A.sculptum, Amblyomma parvum, A. ovale, Ornithodoros mimon and I. loricatus). Amblyomma sculptum corresponded to 81% of the ticks in the E, 10.7% in the NE and 43.8% in the BIO, occurring mainly in the marsupial Didelphis spp. in E and NE. As much as 33.3% of the rodents and 19.2% of the marsupials in the E, 15.7% and 10.3% in the NE and 12.6%, and 11.2% in the BIO, respectively, were seropositive for Rickettsia spp. In the E, the infection rate of the ticks tested by PCR was 13.8%, in NE 24.1% and in BIO 48.6%. No vertebrate tissue sample was positive for rickettsiae. The NE areas presented significant differences in the variable sub-forest complexity, being more complex in these areas. The composition in the host and tick community differed between the three areas studied. There is evidence of increased circulation of rickettsiae and greater numbers of A. sculptum in E, despite the similarity in the abundance of the main small mammal associated with both, Didelphis spp., between E and NE.

INFECÇÃO POR RIQUÉTSIAS EM CARRAPATOS DE AVES DA REGIÃO DO CERRADO E PANTANAL MATOGROSSENSE, CENTRO-OESTE, BRASIL

O envolvimento de diferentes espécies de carrapatos e animais selvagens, como as aves, desempenha um papel importante na epidemiologia de doenças transmitidas por carrapatos. Aves podem servir como reservatórios para algumas doenças transmitidas por carrapatos, além da possibilidade de transportar ectoparasitas hematófagos mecanicamente. Este estudo teve como objetivo mostrar a diversidade de carrapatos em aves e a detecção molecular de infecção por riquétsias em carrapatos do Pantanal e Cerrado, dois biomas brasileiros similares caracterizados por ciclos hidrológicos. Durante dois anos, de agosto de 2012 a maio de 2014, foram coletados carrapatos de aves e do ambiente, totalizando 14 visitas distribuídas em todos os ciclos hidrológicas. Ao todo, 674 aves foram capturadas de 113 espécies e 26 famílias. Destas, 71 aves estavam parasitadas (10,5%) e 155 carrapatos de sete espécies foram identificados (em ordem decrescente de prevalência): Amblyomma longirostre (Koch), Amblyomma nodosum Neumann, Amblyomma cajennense Fabricius, Amblyomma calcaratum Neumann, Ornithodoros mimon Kohls, Clifford & Jones, Amblyomma ovale Koch e Amblyomma triste Koch. Carrapatos de vida livre também foram coletados, sendo o Amblyomma cajennense sensu lato (s.l.) o mais comum. Além disso, nos descrevemos pela primeira vez a ocorrência de Ornithodoros mimon em aves e de A. triste em Passeriformes no Brasil. Análises moleculares mostraram que seis carrapatos A. longirostre estavam infectados por Candidatus Rickettsia amblyommii' e um A. nodosum infectado por Rickettsia parkeri-like, anteriormente descrita como Rickettsia sp. cepa NOD. Bactérias do grupo da febre maculosa (GFM) foram descritos pela primeira vez em carrapatos de aves capturadas no Pantanal, e o potencial risco destes agentes como possíveis patógenos de humanos deve ser considerado em estudos posteriores.

The involvement of different species of ticks and wild animals, such as birds, play an important role in the epidemiology of tick-borne diseases. Birds may serve as reservoirs for some tick-borne diseases, and may carry and spread hematophagous ectoparasites mechanically. This study aimed to show the diversity of ticks on birds and molecular detection of rickettsial infection in ticks from Pantanal and Cerrado, two similar Brazilian biomes characterized by hydrological seasons. During two years, August 2012 to May 2014, ticks were collected on birds and from the environment in total of 14 visits for collecting samples, distributed in all hydrological seasons. A total of 674 birds were captured representing 113 species from 26 families. In total, 71 birds were parasitized (10.5%), and 155 ticks of the following 7 tick species (in decreasing order of prevalence) were identified: Amblyomma longirostre (Koch), Amblyomma nodosum Neumann, Amblyomma cajennense Fabricius, Amblyomma calcaratum Neumann, Ornithodoros mimon Kohls, Clifford & Jones, Amblyomma ovale Koch, and Amblyomma triste Koch. Among free-living ticks collected in the environment, Amblyomma cajennense sensu lato (s.l.) was the most common. Further, herein we described, for the first time, occurrence of Ornithodoros mimon on birds and of Amblyomma triste on Passeriformes in Brazil. Molecular analyses revealed that six A. longirostre ticks were infected by Candidatus Rickettsia amblyommii, whereas one A. nodosum was infected by a Rickettsia parkeri-like agent, previously reported as Rickettsia sp. strain NOD. Spotted fever group (SFG) agents were, for the first time, reported in ticks from birds captured in Pantanal biome, and the potential involvement of these agents as human pathogens should be considered in further studies.

ANÁLISE TRANSCRITÔMICA DO INTESTINO DE FÊMEAS INGURGITADAS DE Ornithodoros mimon (ACARI: ARGASIDAE)

Ornithodoros mimon é um carrapato argasídeo parasita de quirópteras, aves e marsupiais, além de ser bastante agressivo aos humanos. O conhecimento dos transcritos presentes no intestino dos carrapatos auxilia no entendimento do papel de moléculas vitais no processo digestão e na relação parasito-hospedeiro, além de fornecer também informações sobre a evolução dos artrópodes hematófagos. Desta maneira, o presente estudo teve como objetivo conhecer e identificar as principais moléculas expressas no intestino de uma espécie de carrapato argasídeo após o repasto sanguíneo, através de uma análise transcritômica do intestino de fêmeas ingurgitadas de O. mimon. Sessenta fêmeas foram alimentadas e dissecadas para coleta o tecido intestinal. O RNAm da amostra do intestino foi extraído, purificado e quantificado. Esse serviu de molde para síntese do cDNA, que foi utilizado no pirosequenciamento. O transcritoma foi obtido através do método de montagem de novo do cDNA do tecido intestinal. Identificou-se 2235 sequências consensos (contigs) ou transcritos, dos quais 1729 apresentaram similaridade (hit) com sequências dos bancos de dados, enquanto que 506 não tiveram nenhuma similaridade. Os transcritos foram anotados e agrupados conforme as funções biológicas atribuídas as eles no processo de anotação gênica. Atividade catalítica, adesão e transporte foram as funções mais representativas com 780, 709 e 106 transcritos, respectivamente. Em uma análise não automatizada, os transcritos foram subcategorizados em 31 categorias. As categorias mais representativas foram desconhecido, atividade catalítica e transportadores-canais. Identificamos 103 transcritos digestivos associados à digestção de proteínas (67), carboidratos (19) e lipídios (17). Proteinases das classes serino, cisteíne, aspártica e metalo representaram as enzimas atuantes na digestão intracelular do constituinte proteíco do repasto sanguíneo. Genes associados com o transporte (hemelipoglicoproteína) e estocagem (ferritina) dos nutrientes resultantes da digestão foram encontrados bem expressos no trato digestivo. Registrou-se pela primeira vez a presença de uma cisteína peptidase do tipo catepsina O em carrapatos. Foram depositados no banco de dados gênico público 2213 transcritos de O. mimon. A análise filogenética das peptidases revelou que a maioria das proteinases de O. mimon é próxima aos genes codificadores de proteinases de carrapatos. Transcritos de catepsinas L de O. mimon parecem ter divergido de ancestrais recentes diferentes. A inferência filogenética baseada em conjunto de dados transcritos homólogos tem uma resolução topológica similar a de outros conjuntos de dados, como genoma mitocondrial e sequências nuclear de RNA ribossômico (rRNA). Os achados obtidos no presente estudo podem contribuir para compreensão dos importantes processos dos carrapatos argasídeos, como digestão, nutrição e imunidade, além de fornecer informações sobre a filogenia dos carrapatos.

Ornithodoros mimon is an argasid tick that parasitizes bats, birds and opossums and is also aggressive towards humans. It inhabits some countries in the Neotropical region. Knowledge of the transcripts present in the tick gut helps in understanding the role of vital molecules in the digestion process and parasite-host relationship, while also providing information about the evolution of arthropod hematophagy. Thus, the present study aimed to ascertain the main molecules expressed in the gut of argasid ticks after their blood meal, through analysis on the gut transcriptome of engorged females of O. mimon. Sixty females were fed and dissected to extract the gut tissue. The transcriptome was obtained through pyrosequencing and the de novo assembly method on mRNA of the gut tissue. We identified 2,235 contigs, of which 1,729 matched database sequences, while 506 did not present any hits. The transcripts were annotated and grouped according to their biological function. Catalytic, binding and transporter activity were the most representative functions, accounting for 780, 709 and 106 contigs, respectively. The transcripts were classified into 31 categories, using both bioinformatics and data curation practices. The most representative categories were, respectively, unknown, catalytic activity and transporter channels. One hundred and three (103) digestives transcritps associated to digestion of proteins (67), carbohydrates (19) and lipid (17) were identified in the transcriptome analysis. Peptidases associated with hemoglobin digestion, such as serine, cysteine, aspartic protease and metalloenzymes, were identified in the gut of the engorged females. Genes associated with transport (hemelipoglycoprotein) and storage (ferritin) of nutrients resulting from hemoglobin digestion, such as heme, were also found in the digestive tract. The presence of a cathepsin O-like cysteine peptidase was recorded in ticks, for the first time. Two thousand and two hundred thirteen (2213) transcripts were deposited to the Transcriptome Shotgun Assembly (TSA) portal of the NCBI.The phylogenetic analysis on the peptidases confirmed that most of them are clustered with other tick genes. Genes for cathepsin L in O. mimon appear to have diverged from other more common recent ancestors. The topology of the phylogenetic inferences, based on transcripts of inferred families of homologues, was similar to that of previous reports based on different datasets, such as mitochondrial genome and nuclear rRNA sequences. Our findings may help towards better understanding of important argasid metabolic processes, such as digestion, nutrition and immunity.

Epidemiological aspects of tick-borne diseases in wild and domestic animals of two environmental protection areas in the city of Natal, Rio Grande do Norte State, Brazil

O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência sorológica e molecular de Rickettsia, Ehrlichia, Hepatozoon e Babesia em carrapatos e mamíferos silvestres e domésticos, provenientes de duas unidades de conservação ambiental (UC) na cidade de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil. O período de coleta foi de outubro de 2012 a agosto de 2013. Os soros foram testados contra antígenos de Rickettsia spp. e Ehrlichia canis através da reação de imunofluorescência indireta. Amostras de tecido e carrapatos foram processadas para a detecção molecular dos patogenos. Foram capturados 27 marsupiais e quatro roedores para coleta de sangue, destes foram eutanásiados ate três animais de cada espécie e coletadas amostras de baço e pulmão. Paralelo, amostras de soro de 155 animais domésticos: 53 gatos que viviam nas UCs, 29 cães domiciliados no entorno das areas e 73 cães do Centro de Controle de Zoonoses do município, dos quais 20 tiveram amostras de baço coletadas. Foram detectados anticorpos para, pelo menos, uma das espécies de Rickettsia testadas em seis Didelphis albiventris e em um Rattus rattus, e 17 % (17/102) dos cães apresentaram anticorpos anti-E. canis e 13% (20/155) de todos os animais domésticos (cães e gatos) foram soropositivos para antígenos de Rickettsia spp. Três espécies de carrapatos (Amblyomma auricularium, Ixodes loricatus e Ornithodoros mimon) foram coletadas e um A. auricularium foi positivo para R. amblyommii pela PCR. Duas amostras de baço de D. albiventris amplificaram produtos de PCR para Ehrlichia spp. e amostras de baço de três D. albiventris e baço e pulmão de um Necromys lasiurus foram positivas para Babesia spp. pela PCR. Entre as 20 amostras de baço de cão submetidas a análises moleculares, oito foram positivas na PCR para E. canis e duas para H. canis.

The aim of this study was to determine the serologic and molecular occurrence of Rickettsia spp., Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. in ticks and domestic and wild animals from two conservation units in the city of Natal, Rio Grande do Norte State, Brazil. The collection period was between October 2012 and August 2013. Serum samples were tested against Rickettsia spp. antigens and Ehrlichia canis by Indirect fluorescent antibody test. Tissue samples and ticks were processed for molecular detection of the pathogens. Twenty-seven marsupials and four rodents were captured, and up to three animals of each species were euthanized. In addition, serum samples from 155 domestic animals: 53 cats living inside the units, 29 dogs domiciled around the areas and 73 dgos of the Zoonosis Control Center of the City (ZCC). Twenty dogs from ZCC were also euthanized and samples of spleen were obtained. Antibodies to at least one of the Rickettsia species tested were detected in six Didelphis albiventris and in one Rattus rattus; 17% (17/102) of the dogs presented antibodies to E. canis and 13% (20/155) of all tested domestic animals (dogs and cats) were seropositive for Rickettsia spp. antigens. Three species of ticks (Amblyomma auricularium, Ixodes loricatus and Ornithodoros mimon) were collected and one A. auricularium was positive for Rickettsia amblyommii by PCR. Two D. albiventris spleen samples amplified PCR products for Ehrlichia spp. Spleen samples from three D. albiventris and spleen and lung sample from one Necromys lasiurus were positive for Babesia spp. by PCR test. Among the 20 spleen samples from dogs subjected to molecular analysis, eight were positive by PCR for E. canis and two for H. canis.

Ecologia de carrapatos e riquétsias transmitidas por carrapatos em uma reserva natural de cerrado brasileiro

O Parque Nacional Grande Sertão Veredas (PNGSV) é uma das últimas reservas naturais de Cerrado do Brasil, localizada no noroeste de Minas Gerais. O presente estudo envolveu 24 meses de trabalho de campo, que incluiu oito campanhas ao parque, intervaladas de três meses. Dos 75 pequenos mamíferos capturados durante a pesquisa, 10 pertencem à ordem Didelphimorphia, família Didelphidae e 65 à ordem Rodentia, representados em sua maioria pela família Cricetidae, Echimyidae, Caviidae e Dasyproctidae, 48 (64%) deles estavam parasitados por carrapatos. Das 208 ninfas coletadas, 114 foram identificadas como A. parvum, 64 A. triste, 23 A. auricularium, 4 A. sculptum, 1 A. dubitatum, 1 A. naponense e 1 Amblyomma spp. A identificação de algumas larvas foram feitas por técnicas moleculares e das 1358 larvas a 93 foram identificadas como Ornithodoros mimon, seguido de 17 A. triste, 14 A. parvum, 4 A. auricularium, 3 A. sculptum e 1 Ixodes spp., restando 1226 larvas que não foram identificadas. Foram capturadas 717 aves pertencentes à 29 famílias, 9 ordens e 88 espécies. Destas, 74 aves estavam parasitadas somente por imaturos, num total de 247 espécimes, sendo 6 (2,43%) A. sculptum, 14 (5,7%) A. parvum, 29 (11,74%) A. triste, 1 (0,4%) A. dubitatum, 66 (26,72%) A. nodosum e 131 (53,03%) Amblyomma spp. 64 amostras foram submetidas a sorologia, apenas 20 (31,25%) soroconverteram para algum dos seis antígenos de Rickettsia testados e foi observado títulos quatro vezes maiores para R. parkeri em dois O. delator e um C. Tener. Foram coletados nas armadilhas de CO2 3050 carrapatos, sendo 2369 A. sculptum, 337 A. parvum, 233 A. triste, 13 A. dubitatum e 98 Amblyomma spp. O maior numero de carrapatos foram coletados no ponto 1 (1295/3050), seguido pelo ponto 2 (888/3050) e por ultimo o ponto 3 (867/3050). Foram coletados por arraste de flanela 1998 carrapatos, sendo 1511 A. sculptum, 77 A. parvum, 83 A. triste, um A. dubitatum e 326 Amblyomma spp. Os pontos com maior numero de carrapatos coletados por arraste de flanela foi o ponto 4 (663/1998), seguido de ponto 5 (456/1998), ponto 2 (402/1998), ponto 3 (302/1998) e por ultimo ponto 1 (175/1998). Foram coletados parasitando 21 humanos um total de 441 carrapatos, entre imaturos e adultos, sendo três espécies do gênero Amblyomma, R. microplus e D. nitens. Destes, 333 A. sculptum, 64 A. parvum, 3 A. auricularium (Conil, 1878), 2 R. microplus e 1 D. nitens. Nas propriedades rurais, de 36 caninos, 20 equinos e 12 bovinos foram coletados 1186 carrapatos, sendo 639 A. sculptum, 58 A. parvum, 4 A. triste, 17 A. tigrinum, um A. ovale, 17 R. sanguineus, 177 R. microplus, 91 D. nitens e 182 do gênero Amblyomma. De 12 A. triste foram obtidos cinco isolados de R. parkeri e de oito A. parvum quatro isolados de R. bellii, além de deteccao molecular de Candidatus R. andeanae em A. parvum e R. amblyommi em A. sculptum. Os resultados mostram a riqueza de espécie de pequenos mamíferos, aves, carrapatos e riquétsias encontrados na pequena area estudada no parque. Quando de sua abertura à visitação turística, deve-se ter em mente não apenas o risco de infestação por carrapatos, mas também a infecção por, pelo menos, quatro espécies de Rickettsia encontradas durante a pesquisa.

The Grande Sertão Veredas National Park (GSVNP) is one of the last natural reserves of Cerrado of Brazil, located in the northwest of Minas Gerais. This study involved 24 months of field work, which included eight campaigns at the park with intervals of three months. 75 small mammals were captured during the survey, 10 belong to the order Didelphimorphia, Didelphidae family and 65 to the Rodentia order, represented mostly by the Cricetidae family, Echimyidae, Caviidae and Dasyproctidae, 48 (64%) of them were infected by ticks. Of 208 nymphs collected, 114 were identified as A. parvum, 64 A. triste, 23 A. auricularium, 4 A. sculptum, 1 A. dubitatum, 1 A. naponense and 1 Amblyomma spp. Larvae identification were made by molecular techniques and of 1358, 93 larvae were identified as Ornithodoros mimon, followed by 17 A. triste, 14 A. parvum, 4 A. auricularium, 3 A. sculptum and 1 Ixodes spp, and 1226 not identified larvae. 717 birds were captured belonging to 29 families, 9 orders and 88 species. Of these, 74 birds were parasitized by only immature ticks, a total of 247 specimens, 6 (2.43%) A. sculptum, 14 (5.7%) A. parvum, 29 (11.74%) A. triste, 1 (0.4%) A. dubitatum, 66 (26.72%) A. nodosum and 131 (53.03%) Amblyomma spp. 64 samples were subjected to serology, only 20 (31.25%) seroconverted to any of the six Rickettsia antigens tested and was observed titles four fold for R. parkeri in two O. delator and one C. tener. 3050 ticks were collected in CO2 traps, 2369 A. sculptum, 337 A. parvum, 233 A. triste, 13 A. dubitatum and 98 Amblyomma spp. The highest number of ticks were collected in Point 1 (1295/3050), followed by Point 2 (888/3050) and last Point 3 (867/3050). 1998 ticks were collected by flannel dragging, 1511 A. sculptum, 77 A. parvum, 83 A. triste, one A. dubitatum and 326 Amblyomma spp. The points with higher number of collected ticks by flannel dragging was the point 4 (663/1998), followed by point 5 (456/1998), point 2 (402/1998), point 3 (302/1998) and finally point 1 (175/1998). 21 humans were found parasitizing by 441 ticks, between immature and adult, three species of the genus Amblyomma, R. microplus and D. nitens. Of these, 333 A. sculptum, 64 A. parvum, 3 A. auricularium, 2 R. microplus and one D. nitens. On farms, 1186 ticks were collected from 36 dogs, 20 horses and 12 cattle, of these 639 A. sculptum, 58 A. parvum, 4 A. triste, 17 A. tigrinum, one A. ovale, 17 R. sanguineus, 177 R. microplus, 91 D. nitens and 182 Amblyomma. From 12 A. triste we obtained five isolates of R. parkeri and from eight A. parvum four isolates of R. bellii, in addition to molecular detection of Candidatus R. andeanae in A. parvum and R. amblyommii in A. sculptum. The results show the richness of species of small mammals, birds, ticks and Rickettsia found in the small area studied in the park. When its opening to tourist visitation, should be borne in mind not only the risk of tick infestation, but also infection by at least four species of Rickettsia found during the search.

ECTOPARASITOS EM PEQUENOS MAMÍFEROS SILVESTRES DA ESTAÇÃO EXPERIMENTAL RAFAEL FERNANDES, RIO GRANDE DO NORTE, BRASIL

Os pequenos mamíferos silvestres, dentre eles os roedores e marsupiais, apresentam importância ecológica e epidemiológica por serem presas e predadores nas cadeias ecológicas, hospedeiros de ecto e endoparasitos e reservatórios de agentes patogênicos. No Nordeste do Brasil, poucos estudos avaliaram a diversidade de ectoparasitos e seus hospedeiros no bioma Caatinga. Objetivou-se identificar os hospedeiros e seus ectoparasitos, realizar morfometria e quetotaxia e determinar os índices parasitários de Prevalência, Abundância e Intensidade Média dos ectoparasitos coletados de roedores e marsupiais, procedentes da Estação Experimental Rafael Fernandes da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA). Capturou-se animais de janeiro de 2014 a fevereiro de 2015, em um fragmento de 26 hectares da Estação, divididos em seis transectos equidistantes (20m). Foram distribuídas armadilhas Tomahawk e Sherman em seis noites consecutivas de cada mês e em cem estações de captura. Os animais capturados foram identificados pela morfologia e submetidos à coleta dos ectoparasitos. Estes foram classificados com base em caracteres morfométricos, quetotaxia e chaves taxonômicas, além de extração de DNA, PCR e sequenciamento dos produtos amplificados. Foram capturados 78 pequenos mamíferos, dos quais 69 foram classificados na ordem Didelphimorphia: Gracilinanus agilis (Burmeister, 1854) e Monodelphis domestica (Wagner, 1842); e nove Rodentia: Wiedomys Hershkovitz, 1959, Thrichomys Trouessart, 1880 e Rattus norvegicus Berkenhout, 1769. Coletou-se ectoparasitos identificados como: Amblyomma (Koch, 1844), Amblyomma parvum Aragão, 1908, Amblyomma auricularium (Conil, 1878), Ornithodoros mimon Kohls, Clifford e Jones, 1969, Ornithodoros Kohls, Clifford e Jones 1837, Quadraseta Brennan, 1970, Eutrombicula Ewing, 1938, Metachiroecius Fain, 1996, Aeromychirus Fain, 1976, Amlistrophorus Fain, 1981, Radfordia Ewing, 1938, Listropsoralges aff. similis, Ornithonyssus pereirai (Fonseca, 1935), Tur lativentralis (Fonseca 1936), Polyplax spinulosa (Burmeister, 1839) e Eogyropus lenti lenti Werneck 1936. Quanto aos índices parasitários, observou-se que para os Ixodidae e Argasidae estudados, M. domestica apresentou maiores valores de parasitismo para A. auricularium; G. agilis, para O. mimon e Thrichomys sp., para A. parvum e A. auricularium. Quanto aos ácaros, a prevalência foi igual em M. domestica e para todos os seus Listrophoridae estudados. Igualmente, para os roedores, observou-se mesmo valor de prevalência para os ácaros Laelapidae e para os piolhos Polyplacidae em Thrichomys sp. Todos os registros dos pequenos mamíferos e ectoparasitos apresentados são inéditos para Mossoró, Rio Grande do Norte. Este estudo corrobora evidências da literatura dos ectoparasitos utilizarem marsupiais e roedores silvestres como hospedeiros em fases imaturas. Justifica a importância da manutenção de uma área de reserva legal no bioma Caatinga para conservação destes animais. Em adição, a presente pesquisa aumenta o conhecimento sobre ocorrência de Acari, Phthiraptera e sua associação ectoparasitária de vida selvagem, no Nordeste do Brasil.

Small wild mammals, including rodents and marsupials, have ecological and epidemiological importance for being prey and predators in ecological chains, hosts of ecto and endoparasites and pathogens reservoirs. In Northeast Brazil, only a few studies have evaluated the diversity of ectoparasites and their hosts in the Caatinga biome. This study aimed to identify the hosts and their ectoparasites, with morphometric analysis and chaetotaxy and to determine the rates of parasitic Prevalence, Abundance and Medium Intensity of ectoparasites collected from rodents and marsupials, proceeding from the Experimental Station Rafael Fernandes, Rio Grande do Norte, Brazil, at the Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA). The animals were captured between January 2014 and February 2015, in a fragment of 26 hectares, divided into six equally spaced transects (20m). Tomahawk and Sherman traps were distributed in six consecutive nights of each month and in 100 capture stations. The captured animals were identified by morphology and submitted to ectoparasites collection. All the collected ectoparasites were classified based on morphometric characters, chaetotaxy and taxonomic keys, as well as DNA extraction, PCR and sequencing of the amplified products. 78 small mammals were captured, from which 69 were classified as Didelphimorphia order: Gracilinanus agilis (Burmeister, 1854) and Monodelphis domestica (Wagner, 1842); and nine Rodentia: Wiedomys Hershkovitz, 1959, Thrichomys Trouessart, 1880 and Rattus norvegicus Berkenhout, 1769. It was collected ectoparasites identified as: Amblyomma (Koch, 1844), Amblyomma parvum, Aragão 1908, Amblyomma auricularium (Conil, 1878), Ornithodoros mimon Kohls, Clifford e Jones 1969, Ornithodoros Kohls, Clifford e Jones 1837, Quadraseta Brennan, 1970, Eutrombicula Ewing, 1938, Metachiroecius Fain, 1996, Aeromychirus Fain, 1976, Amlistrophorus Fain, 1981, Radfordia Ewing, 1938, Listropsoralges aff. similis, Ornithonyssus pereirai (Fonseca, 1935), Tur lativentralis (Fonseca 1936), Polyplax spinulosa (Burmeister, 1839) and Eogyropus lenti lenti (Werneck 1936). As for the parasitic rates were noted that for the Ixodidae and Argasidae studied, M. domestica presented higher parasitism values for A. auricularium; G. agilis, O. mimon and Thrichomys sp., to A. parvum and A. auricularium. As for mites, the prevalence was the same in M. domestica and to all its studied Listrophoridae. Also for rodents, it was observerd the same prevalence rate for Laelapidae mites and Polyplacidae lice in the Thrichomys sp. All of those records of small mammals and ectoparasites shown are unprecedented to Mossoró, Rio Grande do Norte. This study supports evidences from the literature that ectoparasites use marsupials and wild rodents as hosts for immature stages. Justifies the importance of maintaining a legal reserve area in the Caatinga biome for preservation of these animals. In addition, this research increases knowledge about the occurrence of Acari, Phthiraptera and its ectoparasitic association with the wildlife in Northeast Brazil.

Estudo do Ciclo Biológico de Ornithodoros mimon (Acari: Argasidae) em condições de laboratório

Ornithodoros mimon Kohls, Clifford & Jones, 1969 é um carrapato argasídeo parasito de Chiroptera, originalmente descrito de larvas coletadas sobre morcegos da Bolívia e Uruguai. No Brasil a espécie é bastante agressiva aos humanos e aos animais. Ninfas e adultos de O. mimon foram coletados do teto de uma residência em Araraquara, São Paulo, Brasil, cujos moradores estavam sendo picados pelos carrapatos. Uma vez em laboratório, os exemplares foram alimentados em coelhos da raça Nova Zelândia e mantidos em estufas de B.O.D. à 27ºC ± 1ºC e 90% de umidade. As fêmeas, após o acasalamento, realizaram posturas que resultaram em larvas que foram identificadas através da descrição original (Kohls et al., 1969) e também pela comparação com os parátipos (RML 50271-50274) depositados na Universidade da Georgia, USA. O ciclo biológico desta espécie foi obtido através da aquisição de duas gerações de carrapatos (F1 e F2) em laboratório, utilizando roedores e coelhos como hospedeiro. Os parâmetros biológicos de larva, ninfa e adulto de ambas as gerações foram observados e registrados a partir de infestações nos hospedeiros de laboratório. As larvas apresentaram um perfil de alimentação por dias no hospedeiro, enquanto que as ninfas e adultos por cerca de minutos. Registrou-se mudança de ninfas de primeiro ínstar (N1) para ninfas de segundo ínstar (N2) sem repasto sanguíneo. A espécie foi colonizada com sucesso e o seu ciclo biológico foi elucidado pela primeira vez. Assim, os achados obtidos no presente estudo contribuíram com informações para um melhor conhecimento da espécie, além de fornecer subsídios para manutenção de colônia em laboratório