Prognostic impact of alterations in E-cadherin and P-cadherin expression in canine mammary tumors

A expressão de caderinas tem sido correlacionada ao desenvolvimento e agressividade de neoplasias epiteliais, entretanto, em tumores mamários caninos, seu prognóstico de importância é incerto. Devido a esse fato, a expressão das moléculas de adesão intracelular E e P-caderina e a correlação com a sobrevida global foram analisadas em 25 tumores de glândula mamária canina. A redução da expressão da caderina-E foi correlacionada com o tipo histológico, alto grau histológico e taxa de sobrevida global. A coloração de P-caderina foi maior em tumores malignos, sem relação com outras características clínico-patológicas de agressividade. Os resultados deste estudo sugerem uma relação entre menor expressão de E e P-caderina e pior prognóstico em tumores mamários caninos, incluindo menor sobrevida global.

Prognostic impact of alterations in E-cadherin and P-cadherin expression in canine mammary tumors

A expressão de caderinas tem sido correlacionada ao desenvolvimento e agressividade de neoplasias epiteliais, entretanto, em tumores mamários caninos, seu prognóstico de importância é incerto. Devido a esse fato, a expressão das moléculas de adesão intracelular E e P-caderina e a correlação com a sobrevida global foram analisadas em 25 tumores de glândula mamária canina. A redução da expressão da caderina-E foi correlacionada com o tipo histológico, alto grau histológico e taxa de sobrevida global. A coloração de P-caderina foi maior em tumores malignos, sem relação com outras características clínico-patológicas de agressividade. Os resultados deste estudo sugerem uma relação entre menor expressão de E e P-caderina e pior prognóstico em tumores mamários caninos, incluindo menor sobrevida global.(AU)

Sucralfate enemas reduce the oxidative tissue damage and preserves the contents of E-cadherin and Β-catenin in colonic mucosa without fecal stream

ABSTRACT Purpose: To evaluate the effects of sucralfate enemas in tissue contents of E-cadherin and ?-catenin in an experimental diversion colitis. Methods: Thirty-six male Wistar rats were submitted to a proximal colostomy and a distal mucous fistula. They were allocated into three groups: first group received daily saline enemas (2 mL/day) and the two other groups daily enemas with sucralfate at dosage of 1 or 2 g/kg/day, respectively. Six animals of each group were euthanized after two weeks and six animals after four weeks. The inflammation of the excluded mucosa was evaluated by histological analysis. The oxidative damage was quantified by measurement of malondialdehyde tissue levels. The expression of E-cadherin and ?-catenin was identified by immunohistochemistry, and its contents were quantified by computer-assisted image analysis. Results: Sucralfate enemas reduced inflammation in animals subjected to treatment with 2 g/kg/day by four weeks, and the levels of oxidative damage in mucosa without fecal stream irrespective of concentration and time of intervention. E-cadherin and ?-catenin content increased in segments without fecal stream in those animals subjected to treatment with sucralfate. Conclusions: Sucralfate reduces the inflammation and oxidative stress and increases the tissue content of E-cadherin and ?-catenin in colonic mucosa devoid to the fecal stream.

Histological evaluation and E-cadherin and ß-catenin expression in kidney of dogs submitted to renal ischemia and reperfusion after chlorpromazine administration / Avaliação histológica e imunomarcação de E-caderina e ß-catenina em rins de cães submetidos a isquemia e referfusão renal após administração de clorpromazina

Renal ischemia can be associated with some urological procedures, such as renovascular surgery or kidney transplantation, that are often followed by acute renal failure. The aim of this study was to verify the E-cadherin and ß-catenin localization in canine kidney in different times of renal ischemia and reperfusion after chlorpromazine application. Twelve dogs were randomly distributed equally into two groups. GroupA with ischemia and reperfusion without chlorpromazine and groupB with ischemia and reperfusion treated by chlorpromazine. GroupB received intravenous chlorpromazine, 15 min before the artery obstruction, which lasted 1 hour. After this period, the clamps in the renal arteries were released and the organ remained in reperfusion for 2 hours. In each group, anti-E-cadherin and anti-ß-catenin antibodies were made in six tissue samples from renal parenchyma. E-cadherin and ß-catenin are differentially expressed in segments from cortex and medulla in dog's kidneys and the use of chlorpromazine did not alter the expression of both proteins. Occlusion of the left renal artery in dogs causes morphological alterations mainly in proximal convoluted tubules, beginning 30min after the start of ischemia and being aggravated after two hours of reperfusion. These results reveal that chlorpromazine did not change kidneys' histological aspect nor E-cadherin and ß-catenin expression.(AU)

A lesão renal isquêmica pode estar associada a procedimentos urológicos, tais como cirurgia renovascular, cirurgia renal extracorpórea ou transplante renal. Essa injúria, muitas vezes, é seguida de insuficiência renal aguda. O objetivo deste trabalho foi observar a localização da E-caderina e da ß-catenina em rim de cães, além de relacionar a expressão dessas proteínas das junções de aderência em diferentes tempos de isquemia e reperfusão com ou sem a aplicação de clorpromazina. Para tanto, foram utilizados 12 cães, distribuídos aleatoriamente em dois grupos de seis indivíduos: grupo A, com isquemia e reperfusão sem tratamento por clorpromazina, e o grupo B, com isquemia e reperfusão tratado por clorpromazina. No procedimento cirúrgico, foi realizada uma incisão paracostal esquerda para identificação e isolamento do rim esquerdo e da artéria renal esquerda. Após o isolamento da artéria, os animais de todos os grupos tiveram o vaso ocluído. Os animais do grupo B receberam clorpromazina via endovenosa, na dose de 5mg/kg, 15min antes da clampagem do vaso, que durou uma hora. Após este período, as artérias renais foram desobstruídas e os órgãos permaneceram em reperfusão por duas horas. Em cada grupo, foram extraídas seis amostras de parênquima renal, com utilização de agulha tru-cut, para marcação com anticorpos anti-E-caderina e anti-ß-catenina por meio de imunoistoquímica. E-caderina e ß-catenina são diferencialmente expressas em segmentos do córtex e da medula em rim de cães e o uso da clorpromazina não alterou a expressão das duas proteínas.(AU)

Histological evaluation and E-cadherin and ß-catenin expression in kidney of dogs submitted to renal ischemia and reperfusion after chlorpromazine administration / Avaliação histológica e imunomarcação de E-caderina e ß-catenina em rins de cães submetidos a isquemia e referfusão renal após administração de clorpromazina

Renal ischemia can be associated with some urological procedures, such as renovascular surgery or kidney transplantation, that are often followed by acute renal failure. The aim of this study was to verify the E-cadherin and ß-catenin localization in canine kidney in different times of renal ischemia and reperfusion after chlorpromazine application. Twelve dogs were randomly distributed equally into two groups. GroupA with ischemia and reperfusion without chlorpromazine and groupB with ischemia and reperfusion treated by chlorpromazine. GroupB received intravenous chlorpromazine, 15 min before the artery obstruction, which lasted 1 hour. After this period, the clamps in the renal arteries were released and the organ remained in reperfusion for 2 hours. In each group, anti-E-cadherin and anti-ß-catenin antibodies were made in six tissue samples from renal parenchyma. E-cadherin and ß-catenin are differentially expressed in segments from cortex and medulla in dog's kidneys and the use of chlorpromazine did not alter the expression of both proteins. Occlusion of the left renal artery in dogs causes morphological alterations mainly in proximal convoluted tubules, beginning 30min after the start of ischemia and being aggravated after two hours of reperfusion. These results reveal that chlorpromazine did not change kidneys' histological aspect nor E-cadherin and ß-catenin expression.(AU)

A lesão renal isquêmica pode estar associada a procedimentos urológicos, tais como cirurgia renovascular, cirurgia renal extracorpórea ou transplante renal. Essa injúria, muitas vezes, é seguida de insuficiência renal aguda. O objetivo deste trabalho foi observar a localização da E-caderina e da ß-catenina em rim de cães, além de relacionar a expressão dessas proteínas das junções de aderência em diferentes tempos de isquemia e reperfusão com ou sem a aplicação de clorpromazina. Para tanto, foram utilizados 12 cães, distribuídos aleatoriamente em dois grupos de seis indivíduos: grupo A, com isquemia e reperfusão sem tratamento por clorpromazina, e o grupo B, com isquemia e reperfusão tratado por clorpromazina. No procedimento cirúrgico, foi realizada uma incisão paracostal esquerda para identificação e isolamento do rim esquerdo e da artéria renal esquerda. Após o isolamento da artéria, os animais de todos os grupos tiveram o vaso ocluído. Os animais do grupo B receberam clorpromazina via endovenosa, na dose de 5mg/kg, 15min antes da clampagem do vaso, que durou uma hora. Após este período, as artérias renais foram desobstruídas e os órgãos permaneceram em reperfusão por duas horas. Em cada grupo, foram extraídas seis amostras de parênquima renal, com utilização de agulha tru-cut, para marcação com anticorpos anti-E-caderina e anti-ß-catenina por meio de imunoistoquímica. E-caderina e ß-catenina são diferencialmente expressas em segmentos do córtex e da medula em rim de cães e o uso da clorpromazina não alterou a expressão das duas proteínas.(AU)

Imunomarcação da transição epitélio-mesenquima na neoplasia mamária primária de cadelas e sua metástase em linfonodo / Epithelial to mesenchymal transition immunostaining in canine primary mammary tumor and lymph node

Os carcinomas mamários em cães apresentam alta capacidade metastática o que confere menor sobrevida para os pacientes com este tipo de neoplasia. O fenótipo transição epitélio-mesênquima, caracterizado pela troca dos filamentos intermediários de citoqueratina por vimentina, além da perda da proteína de adesão entre células (E-caderina) está relacionado com a maior ocorrência de metástase. Diante disto, objetivou-se avaliar, por meio de imunomarcações, a expressão de vimentina, citoqueratina e E-caderina nos tumores mamários caninos e suas metástases em linfonodo, a fim de avaliar o comportamento celular frente a esta neoplasia. Foram analisados cinco casos de neoplasias mamárias primárias caninas e suas respectivas metástases em linfonodos. Foram comparadas as médias de imunomarcações do grupo de neoplasias primárias com as médias do grupo metástase. Não houve diferença estatística nas imunomarcações da citoqueratina (p=0,1407) e E-caderina (p= 0,312) entre os grupos, apesar da média de expressão da E-caderina ter sido maior no grupo de metástases. A expressão da vimentina foi maior nos sítios das metástases (p=0,0462). Conclui-se que a expressão de vimentina aumenta no foco da metástase em relação aos seus respectivos tumores primários mamários caninos, caracterizando alteração estrutural celular, conferindo um fenótipo transição epitélio-mesênquima. Além da E-caderina apresentar fortes indícios de aumento no foco da metástase caracterizando maior adesão.(AU)

Mammary carcinomas in dogs have a high metastatic capacity which gives a shorter survival rate for patients with this type of tumor. The epithelial-mesenchymal transition phenotype, characterized by the trade of intermediary filaments of cytokeratin by vimentin, also by the loss of the adhesion protein between cells (E-cadherin) is associated with metastasis. Due to this fact, it was aimed to evaluate, by immunostaining, the expression of vimentin, cytokeratin and E-cadherin in canine mammary tumors and the metastasis in lymph node, in order to assess the cell behavior when facing this cancer. Five cases of canine mammary tumors and metastasis in lymph node were evaluated. The averages of immunostainings of the group of primary neoplasms were compared with the averages of the lymph node group. The results showed that immunostaining for cytokeratins (p=0,1407) and E-caderina (p=0,312) were not significant between the groups, despite the expression mean of cadherin was higher in the metastase group. The expression of vimentin (p=0,04) was greater at sites of metastases. It is concluded that the expression of vimentin increases in the focus of the metastase in relation to their respective primary canine mammary tumors, characterizing cellular structural alteration, conferring a transient epithelial-mesenchymal phenotype. And cadherin present strong evidence of increased focus on metastasis characterizing increased adhesion.(AU)

Imunomarcação da transição epitélio-mesenquima na neoplasia mamária primária de cadelas e sua metástase em linfonodo / Epithelial to mesenchymal transition immunostaining in canine primary mammary tumor and lymph node

Os carcinomas mamários em cães apresentam alta capacidade metastática o que confere menor sobrevida para os pacientes com este tipo de neoplasia. O fenótipo transição epitélio-mesênquima, caracterizado pela troca dos filamentos intermediários de citoqueratina por vimentina, além da perda da proteína de adesão entre células (E-caderina) está relacionado com a maior ocorrência de metástase. Diante disto, objetivou-se avaliar, por meio de imunomarcações, a expressão de vimentina, citoqueratina e E-caderina nos tumores mamários caninos e suas metástases em linfonodo, a fim de avaliar o comportamento celular frente a esta neoplasia. Foram analisados cinco casos de neoplasias mamárias primárias caninas e suas respectivas metástases em linfonodos. Foram comparadas as médias de imunomarcações do grupo de neoplasias primárias com as médias do grupo metástase. Não houve diferença estatística nas imunomarcações da citoqueratina (p=0,1407) e E-caderina (p= 0,312) entre os grupos, apesar da média de expressão da E-caderina ter sido maior no grupo de metástases. A expressão da vimentina foi maior nos sítios das metástases (p=0,0462). Conclui-se que a expressão de vimentina aumenta no foco da metástase em relação aos seus respectivos tumores primários mamários caninos, caracterizando alteração estrutural celular, conferindo um fenótipo transição epitélio-mesênquima. Além da E-caderina apresentar fortes indícios de aumento no foco da metástase caracterizando maior adesão.(AU)

Mammary carcinomas in dogs have a high metastatic capacity which gives a shorter survival rate for patients with this type of tumor. The epithelial-mesenchymal transition phenotype, characterized by the trade of intermediary filaments of cytokeratin by vimentin, also by the loss of the adhesion protein between cells (E-cadherin) is associated with metastasis. Due to this fact, it was aimed to evaluate, by immunostaining, the expression of vimentin, cytokeratin and E-cadherin in canine mammary tumors and the metastasis in lymph node, in order to assess the cell behavior when facing this cancer. Five cases of canine mammary tumors and metastasis in lymph node were evaluated. The averages of immunostainings of the group of primary neoplasms were compared with the averages of the lymph node group. The results showed that immunostaining for cytokeratins (p=0,1407) and E-caderina (p=0,312) were not significant between the groups, despite the expression mean of cadherin was higher in the metastase group. The expression of vimentin (p=0,04) was greater at sites of metastases. It is concluded that the expression of vimentin increases in the focus of the metastase in relation to their respective primary canine mammary tumors, characterizing cellular structural alteration, conferring a transient epithelial-mesenchymal phenotype. And cadherin present strong evidence of increased focus on metastasis characterizing increased adhesion.(AU)

CD45+, CD68+ and E-cadherin+ expressions in skin dogs naturally infected by Leishmania infantum

Background: In canine leishmaniasis (CanL), infection occurs through phlebotomine vectors that inoculate the protozoan Leishmania infantum into the skin that infected macrophages and activated dendritic cells (CD). Dogs with CanL present variable clinical manifestations, being common the presence of cutaneous lesions. The aim of this study was to evaluate the expression of CD45+ , CD68+ and E-cadherin+ associating the skin sentinels cells and to compare the clinical-dermatological manifestations in the skin of dogs naturally infected by L. infantum. Materials, Methods & Results: Dogs infected (n = 22) by L. infantum were divided into asymptomatic group (AD, n = 9), and symptomatic group (SD, n = 13), according criteria based on the presence or absence of skin changes. Dogs non-infected (CD, n = 5) were included as control group. Samples of skin biopsies collected from scapular region were processed by routine histology and labeled by immunohistochemistry with monoclonal antibodies against CD45+ , CD68+ and E-cadherin+ , and were described as none, mild, moderate and intense. SD presented keratoconjunctivitis, onychogryphose, lichenification, depigmentation, alopecia, hypotrichosis, erythematous dermatitis, exfoliative dermatitis, ulcerative dermatitis and crusted dermatitis, and the frequency these alterations was expressed as percentage. The results of hematological and [...](AU)

CD45+, CD68+ and E-cadherin+ expressions in skin dogs naturally infected by Leishmania infantum

Background: In canine leishmaniasis (CanL), infection occurs through phlebotomine vectors that inoculate the protozoan Leishmania infantum into the skin that infected macrophages and activated dendritic cells (CD). Dogs with CanL present variable clinical manifestations, being common the presence of cutaneous lesions. The aim of this study was to evaluate the expression of CD45+ , CD68+ and E-cadherin+ associating the skin sentinels cells and to compare the clinical-dermatological manifestations in the skin of dogs naturally infected by L. infantum. Materials, Methods & Results: Dogs infected (n = 22) by L. infantum were divided into asymptomatic group (AD, n = 9), and symptomatic group (SD, n = 13), according criteria based on the presence or absence of skin changes. Dogs non-infected (CD, n = 5) were included as control group. Samples of skin biopsies collected from scapular region were processed by routine histology and labeled by immunohistochemistry with monoclonal antibodies against CD45+ , CD68+ and E-cadherin+ , and were described as none, mild, moderate and intense. SD presented keratoconjunctivitis, onychogryphose, lichenification, depigmentation, alopecia, hypotrichosis, erythematous dermatitis, exfoliative dermatitis, ulcerative dermatitis and crusted dermatitis, and the frequency these alterations was expressed as percentage. The results of hematological and [...]

CORRELAÇÃO CLÍNICO PATOLÓGICA ENTRE AS IMUNOMARCAÇÕES DE E-CADERINA E RECEPTORES DE ESTRÓGENO NOS TUMORES DE MAMA EM CADELAS

O objetivo do trabalho é estabelecer uma correlação de variáveis clínicas com as neoplasias mamárias encontradas e sua correlação sobre marcadores tumorais, podendo assim, demandar um tratamento melhor estabelecido. A relação entre o receptor de estrogênio (ER) e a expressão epitelial da caderina (E-), detectada por características clínico-patológicas e métodos imunohistoquímicos, foi avaliada em 111 tumores mamários caninos. A maioria (n = 95; 85,58%) dos tumores eram histologicamente malignos e subclassificados como grau I (n = 42), grau II (n = 31) ou grau III (n = 22). Houve uma associação estatística significativa entre malignidade grau III e imunomarcação negativa para estrogênio (p = 0,01). Nenhuma associação significativa pôde ser estabelecida entre a classificação histológica (neoplasia, benigna ou maligna) e imunomarcação para ER e caderina-E. Vinte e um (22,10 %) de 95 tumores mamários malignos metastatizaram. O carcinoma mamário simples (n = 9) foi significativamente associado à expressão ER negativa (p = 0,03), sugerindo um prognóstico ruim. Esses achados enfatizam a necessidade de melhorar os fatores prognósticos nos tumores mamários caninos

The relationship between the oestrogen receptor (ER) and epithelial (E-) cadherin expression, as detected by clinicopathological features and immunohistochemical methods, was evaluated in 111 canine mammary tumours. The majority (n = 95; 85.58%) of tumours were histologically malignant and subclassified as grade I (n = 42), grade II (n=31), or grade III (n=2022). There was a significant statistical association between grade III malignancy and negativeimmunostaining for oestrogen (p= 0.01). No significant associations could be established between histological classification (neoplasm, benign or malignant) and immunostaining for 23 ER and E-cadherin. Twenty-one (22.10%) of 95 malignant mammary tumours had metastasized. Twenty-four simple mammary carcinoma (n = 9) was significantly associated with negative ER expression (p = 0.03), suggesting a poor prognosis. These findings emphasize the necessity of improving prognostic factors in canine mammary tumours.

Avaliação da concordância interobservadores de critérios morfológicos no diagnóstico de tumores de glândula hepatoide em cães e determinação do valor prognóstico de aspectos clínico-patológicos e marcadores imuno-histoquímicos

Diferentes estudos têm demonstrado uma variação importante na frequência diagnóstica dos tumores de glândula hepatoide em cães, possivelmente devido à ausência de critérios morfológicos claros e bem estabelecidos em seu diagnóstico. Não estão bem definidos os critérios clínico-patológicos associados ao comportamento biológico destas neoplasias. Alguns estudos levantam a hipótese de participação do mecanismo de transição epitélio-mesenquimal devido à frequente imunoexpressão de vimentina em tumores de glândula hepatoide, porém esta hipótese permanece sem comprovação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a concordância diagnóstica entre patologistas, assim como investigar o mecanismo de transição epitélio-mesenquimal e a taxa de proliferação celular por marcadores imuno-histoquímicos e, por fim, correlacioná-los com sobrevida para investigação de possíveis valores prognósticos. Cinco patologistas avaliaram 57 tumores de glândula hepatoide quanto ao diagnóstico e quanto a diversos critérios morfológicos e, com base nestes critérios, foram desenvolvidos algoritmos diagnósticos por meio de árvores de regressão por partição recursiva. Adicionalmente, foram investigadas as imunoexpressões de vimentina, pancitoqueratina, E-caderina e Ki-67 em 78 lesões, comparando-as entre glândulas normais, tumores benignos, tumores malignos e tumores malignos vasculoinvasivos/metastáticos. A sobrevida livre de recorrência local, recorrência da doença, sobrevida global e sobrevida doença-específica foram investigadas em 33 pacientes. Houve concordância média razoável em análise interobservador quanto ao diagnóstico (=0,54), com potencial de melhora para concordância média boa após aplicação de dois novos algoritmos diagnósticos (=0,64 e 0,65, respectivamente). Em relação aos marcadores imuno-histoquímicos, foram observadas maior expressão de vimentina e menor expressão de E-caderina em tumores malignos em comparação aos tumores benignos. Adicionalmente, observou-se uma forte correlação negativa entre a expressão de vimentina em células de reserva e expressão de pancitoqueratina em células diferenciadas (=-0,65, p<0,0001), além de maiores taxas de proliferação celular (Ki-67) e contagem de mitoses em tumores malignos em comparação com tumores benignos. Em análise univariada de sobrevida doença-específica, os fatores prognósticos foram a presença de invasão vascular ou metástase no momento do diagnóstico, o escore de E-caderina em células de reserva e diferenciadas, e o tamanho tumoral. Em relação ao tempo de sobrevida livre de doença, os fatores prognósticos foram a presença de invasão vascular ou metástase no momento do diagnóstico, escore de E-caderina em células de reserva e diferenciadas, perda de polaridade celular, grau de infiltração, histórico de doença recorrente, escore de morfologia fusiforme e proporção de células de reserva. Os resultados do presente estudo confirmaram que existe um grau de discordância diagnóstica entre patologistas que poderia explicar parte da variação observada na prevalência de carcinomas de glândula hepatoide em literatura, e de que existe potencial para melhora da concordância diagnóstica por meio dos algoritmos propostos. Ainda, os achados reforçaram a hipótese de que o mecanismo de transição epitélio-mesenquimal participa na progressão tumoral em neoplasias hepatoides em cães, explicando a frequente imunoexpressão de vimentina observada nestes tumores. Por fim, foi demonstrado que a presença de invasão vascular ou metástase no momento do diagnóstico tem impacto significativo na sobrevida dos animais, assim como há outras características clínicas, morfológicas e imuno-histoquímicas com valor prognóstico para recorrência da doença e sobrevida.

An important variation in the prevalence of canine hepatoid gland carcinoma is currently reported, likely due to lack of consistent and well-defined criteria. Additionally, clinical and pathological features predictive of biological behavior are not well defined. The epithelial-mesenchymal transition mechanism has been proposed as a possible explanation for the frequent expression of vimentin by neoplastic hepatoid gland cells, but this hypothesis remains elusive. The present study aimed to define the level of diagnostic agreement between different pathologists, investigate immunohistochemical and morphological features indicative of epithelial-mesenchymal transition, and to evaluate candidate features that might be predictive of biological behavior. Five pathologists diagnosed and classified morphological features for 57 hepatoid gland tumors, and diagnostic algorithms were built with recursive partitioning analysis. Additionally, vimentin, pancytokeratin, E-cadherin and ki-67 immunohistochemical expression were evaluated for 78 lesions, and expression levels were compared between normal glands, benign tumors, malignant tumors, and vasculo-invasive/metastatic tumors. Local recurrence free survival, disease free survival, overall survival and disease-specific survival were evaluated for 33 cases. There was a fair mean interobserver agreement for diagnosis (=0,54), that could potentially be improved to a good mean agreement with the use of two novel diagnostic algorithms (=0,64 and 0,65). Additionally, higher levels of vimentin expression and lower levels of E-cadherin expression were noted in malignant tumors, as compared to benign tumors, and there was a strong negative correlation between vimentin expression in reserve cells and pancytokeratin expression in differentiated cells (=-0,65, p<0,0001). Proliferation index (ki67) and mitotic count were higher for malignant tumors when compared to benign tumors. In univariate survival analysis, vascular invasion or metastasis at the time of diagnosis, E-cadherin score in differentiated and reserve cells and tumor size were predictive of disease-specific survival. Vascular invasion or metastasis at the time of diagnosis, E-cadherin score in differentiated and reserve cells, loss of cell polarity, grade of invasiveness, history of recurrent disease, spindle cell morphology score and proportion of reserve cells were predictive of disease-free survival. The results of this study demonstrate a level of diagnostic disagreement between pathologists that might explain, at least partially, the variation of prevalence of hepatoid gland carcinoma in current literature, and that this diagnostic agreement could potentially be improved. Also, these findings support the role of epithelial-mesenchymal transition in the progression of canine hepatoid gland tumors, and this mechanism could explain the frequent expression of vimentin in this particular neoplasia. Finally, it was shown that vascular invasion or metastasis at the time of diagnosis has a significant impact on survival, and that additional clinical, morphological and immunohistochemical features might also have predictive value for disease recurrence and survival.

CARACTERIZAÇÃO HISTOPATOLÓGICA E MARCADORES IMUNO-HISTOQUÍMICOS NO CÂNCER DE MAMA DE GATAS

As neoplasias mamárias das gatas podem ser malignas e agressivas, com predomínio de carcinomas, classificados em tubulopapilíferos, sólidos e cribriformes ou avaliados pelo grau histológico. Esse tipo de carcinoma tem poucos estudos relacionando índices proliferativos e apoptóticos com o tipo e a graduação histológica ou identificando marcadores para origem e composição celular como as citoqueratinas (CK14) e a alfa-actina de músculo liso (alfa-SMA) e para a expressão de moléculas que influenciam o comportamento dessas neoplasias como as caderinas, confrontando com o tipo histológico e sua graduação. Foram classificadas histologicamente e graduadas 31 amostras de carcinomas mamários de gatas, sendo submetidas a painel imuno-histoquímico com os anticorpos anti-Ki-67, anti-caspase 3 clivada, anti-CK14, anti-alfa-SMA, anti-E caderina e anti-P caderina. Predominaram as gatas SRD, com média de idade de 12 anos. O percentual dos tipos histológicos foi: 42%, 45,50% e 12,50% para os carcinomas tubulopapilíferos, sólidos e cribriformes. A graduação das neoplasias teve o percentual de 9,65%, 41,95% e 48,80%, para os graus I, II e III. Os carcinomas tubulopapilíferos mostraram índice mitótico inferior aos carcinomas sólidos, assim como os carcinomas de grau I em relação aos carcinomas de grau II e III. O imunofenótipo basal (células CK14 positivas) foi frequente nesses carcinomas e o imunofenótipo mioepitelial (alfa-SMA positivo ou alfa-SMA-CK14 positivo) não. A E-caderina teve baixa expressão e foi mais alta nos tumores de grau baixo, e a molécula de adesão P-caderina foi expressa pela maioria desses carcinomas, não havendo relação da sua expressão com o tipo histológico ou grau da neoplasia.

Mammary tumors of the cats can be malignant and aggressive, with a predominance of carcinomas, classified tubulopapillary, solid and cribriform or evaluated by histologic grade. This type of cancer has few studies relating proliferative and apoptotic indices with the type and histologic grading or identifying markers for source and cellular composition as cytokeratin (CK14) and smooth muscle alpha-actin (alpha-SMA) and expression molecules that influence the behavior of these neoplasms as cadherins, confronted with the histological type and their graduation. histologically they were classified and graded 31 samples of breast carcinomas cats, and subjected to immunohistochemistry panel with anti-Ki-67 antibodies, anti-cleaved caspase 3, anti-CK14, anti-alpha SMA, anti-E cadherin and anti-P-cadherin. Predominated SRD cats, with a mean age of 12 years. The percentage of histological types was 42%, 45.50% and 12.50% for tubulopapillary, solid and cribriform carcinomas. The grading of tumors had the percentage of 9.65%, 41.95% and 48.80%, for grades I, II and III. The tubulopapillary carcinomas showed mitotic index lower than the solid carcinomas, as well as grade I carcinomas compared to grade II and III carcinomas. Basal immunophenotype (CK14 positive cells) was common in these carcinomas and myoepithelial immunophenotype (positive alpha-SMA or alpha-SMA-positive CK14) does not. The E-cadherin expression was low and was higher in low-grade tumors, and the adhesion molecule P-cadherin was expressed by most of these carcinomas, no relation of their expression with the histological type or grade of the neoplasia. Ke

Expressão da E-caderina em carcinoma de células escamosas e no tumor de células basais de cães

The cadherins are a group of cellular adhesion molecules that are expressed on the surface of all epidermic layer. The E-cadherin is the main cadherin involved in epithelial cellular adhesion; the decrease in its expression is related to the progression of some types of cancer, to its metastatic characteristics, and to the prognosis, specially carcinomas. The squamous cell carcinoma and the basal cells tumors are a malignant epithelial neoplasm which affects dogs. The goal of this study was to evaluate E-cadherin's expression in canine tissues that were classified as squamous cell carcinoma or basal cell tumor, and to find a correlation with the biological behavior of the tumors. The squamous cell carcinomas showed significantly decreased expression of the molecule compared to the basal cell tumors when evaluated by Fisher's test (P=0.0039). Also, the more differentiated neoplastic cells had a higher intensity of color than the less differentiated ones. In conclusion, it is suggested that the reduced expression of E-cadherin in skin tumors may indicate greater power infiltrative and consequently poor prognosis in dogs.

As caderinas compreendem uma classe de moléculas de adesão celular expressa na superfície de todas as camadas epidérmicas. A E-caderina é a principal caderina envolvida na adesão celular epitelial. A redução de sua expressão está envolvida na progressão de alguns tipos de câncer, no potencial metastático e ainda na definição do prognóstico, principalmente nos carcinomas. O carcinoma de células escamosas e o tumor de células basais são neoplasias cutâneas malignas que afetam os cães. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão da E-caderina no carcinoma de células escamosas (n=20) e no tumor de células basais (n=15), buscando-se relacionar sua expressão ao comportamento biológico desses tumores. Os carcinomas de células escamosas apresentaram significativa redução da expressão da molécula comparado aos tumores de células basais, quando avaliado pelo teste de Fisher (P=0,0039). Também foi observado que células neoplásicas mais diferenciadas apresentaram coloração mais intensa que as menos diferenciadas. Em conclusão, sugere-se que a expressão reduzida da E-caderina em tumores cutâneos pode indicar maior poder infiltrativo e consequentemente mau prognóstico na espécie canina.

Expressão da E-caderina em carcinoma de células escamosas e no tumor de células basais de cães

The cadherins are a group of cellular adhesion molecules that are expressed on the surface of all epidermic layer. The E-cadherin is the main cadherin involved in epithelial cellular adhesion; the decrease in its expression is related to the progression of some types of cancer, to its metastatic characteristics, and to the prognosis, specially carcinomas. The squamous cell carcinoma and the basal cells tumors are a malignant epithelial neoplasm which affects dogs. The goal of this study was to evaluate E-cadherin's expression in canine tissues that were classified as squamous cell carcinoma or basal cell tumor, and to find a correlation with the biological behavior of the tumors. The squamous cell carcinomas showed significantly decreased expression of the molecule compared to the basal cell tumors when evaluated by Fisher's test (P=0.0039). Also, the more differentiated neoplastic cells had a higher intensity of color than the less differentiated ones. In conclusion, it is suggested that the reduced expression of E-cadherin in skin tumors may indicate greater power infiltrative and consequently poor prognosis in dogs.

As caderinas compreendem uma classe de moléculas de adesão celular expressa na superfície de todas as camadas epidérmicas. A E-caderina é a principal caderina envolvida na adesão celular epitelial. A redução de sua expressão está envolvida na progressão de alguns tipos de câncer, no potencial metastático e ainda na definição do prognóstico, principalmente nos carcinomas. O carcinoma de células escamosas e o tumor de células basais são neoplasias cutâneas malignas que afetam os cães. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão da E-caderina no carcinoma de células escamosas (n=20) e no tumor de células basais (n=15), buscando-se relacionar sua expressão ao comportamento biológico desses tumores. Os carcinomas de células escamosas apresentaram significativa redução da expressão da molécula comparado aos tumores de células basais, quando avaliado pelo teste de Fisher (P=0,0039). Também foi observado que células neoplásicas mais diferenciadas apresentaram coloração mais intensa que as menos diferenciadas. Em conclusão, sugere-se que a expressão reduzida da E-caderina em tumores cutâneos pode indicar maior poder infiltrativo e consequentemente mau prognóstico na espécie canina.

Expressão Gênica e Proteica de APC, E-caderina, ß-catenina e Caveolina-1 no Processo Carcinogênico da Próstata Canina e suas Metástases

As alterações na expressão de E-caderina, -catenina, APC e Caveolina-1 nas células epiteliais prostáticas têm sido estudados em humanos como mecanismos relacionados com progressão tumoral, invasão e metástase. Estas proteínas estão envolvidas no processo de adesão celular e ativação da via WNT canônica. No cão, a perda da expressão proteica de E-caderina e a translocação da -catenina da membrana para o citoplasma/núcleo foram descritas anteriormente em lesões prostáticas caninas. No entanto, nenhum estudo correlacionou alterações de expressão dessas proteínas com as proteínas APC e Caveolina-1. Devido ao prognóstico desfavorável do carcinoma prostático (CaP) no cão e a importância da identificação de novos marcadores prognósticos e preditivos, o presente estudo visou avaliar as expressões gênica e proteica de E-caderina, -catenina, APC e Caveolina-1 em diferentes lesões prostáticas caninas, além de avaliar o padrão de metilação do gene APC. Foram utilizados neste estudo 10 CaPs, 4 metástases de carcinoma prostático, 10 amostras de atrofia inflamatória proliferativa (PIA) e 10 próstatas normais de cães para análise imuno-histoquímica. Para a técnica de RT-qPCR forma utilizados 11 próstatas normais, 11 PIA, 17 CaPs e 3 metástases. Para análise de metilacão foram utilizadas seis próstatas normais, seis próstatas com PIA e 13 CaPs. Este estudo revelou aumento de expressão gênica e proteica de Caveolina-1 nas amostras de CaP e metástases, além de menor expressão nas amostras de carcinoma com escore de Gleason mais baixos. Identificou-se marcação membranosa de E-caderina e - catenina nas próstatas normais e perda heterogênea nas lesões estudadas. A expressão de - catenina apresentou diferença estatística (P<0,05) entre os grupos, e somente as amostras de carcinoma prostático e metástases apresentaram marcação citoplasmática e/ou nuclear. Discreta perda na expressão proteica de APC foi observada nos CaP, porém não houve alteração na análise de metilação da ilha CpG da região promotora do gene APC, sugerindo mecanismos diferentes de regulação do APC no homem e no cão. Estes resultados sugerem uma participação e interação das referidas proteínas durante a carcinogênese e metástase prostática.

Altered expressions of E-cadherin, -catenin, APC and Caveolin-1 in prostate epithelial cells has been studied in humans as mechanisms related with tumor progression, invasion and metastasis. These proteins are envolved in cell-cell cohesion and participate in the activation of the canonical WNT pathway. In dogs, membranous E-cadherin loss and translocation of -catenin from the membrane to cytoplasm/nucleus were described previously in canine prostatic lesions. However, no previous researches correlated these genes and their proteins with APC and Caveolin-1 expressions in canine prostatic lesions. Due to poor prognosis in canine prostate carcinoma (PC) and the need to develop new prognostic and predictive biomarkers, this study aims to evaluate gene and protein expression of E-cadherin, -catenin, APC and Caveolin-1 in different canine prostatic lesions, besides the methylation analysis of APC gene. We used 10 PC, 4 prostate metastasis, 10 proliferative inflammatory atrophy(PIA) and 10 canine normal prostates for immunohistochemistry. For RT-qPCR we used 11 normal prostate, 11 PIA, 17 PC and 4 metastasis. For methylation analysis, we used six normal prostates, 6 PIA and 13 PC. This study revealed increased Caveolin-1 gene and protein expression in PC and metastasis and lower expression were found in Gleason score lower grade. Membranous E-cadherin and - catenin staining was observed in normal prostates samples and heterogenous loss in other samples. - catenin expressions revealed statistical difference (P<0,05) between the groups, only PC and metastasis had cytoplasmic and/or nuclear pattern. Discrete loss of protein expression of APC in prostate carcinomas, there were no alteration in methylation analysis of APC promoter CpGs islands, suggesting men and dogs have different regulatory mechanisms of APC. These results suggests a participation and interaction of the proteins in carcinogenesis and prostate metastasis.

Expressão da caderina na discondroplasia tibial / Cadherin expression in the tibial dyschondroplasia

By immunohistochemistry the expression of a pan-cadherin antibody that recognizes a wide variety of cadherins in chondrocytes from normal and tibial dyschondroplasia (TD) growth plates was compared. Surprisingly, an upregulated expression that was not expected in TD lesion chondrocytes was observed. The reason for this apparent upregulation is not clear. The increased expression may simply be due to the particular phenotype of lesion chondrocytes, and cadherin may be involved in apoptosis of chondrocytes of TD lesion. Another possibility, is that a low level of calcium in the lesion may be responsible for the observed upregulation. The results of the present study suggest that the formation of the dyschondroplastic lesion is not merely due to the impaired terminal differentiation of lesion chondrocytes and that other mechanisms are probably involved in TD etiology. Further studies will be necessary to provide insight into the precise nature of the condition.(AU)

UPREGULATION OF ?-CATENIN AND CADHERIN EXPRESSION IN HEARTS OF MICE IN ACUTE AND CHRONIC PHASE OF EXPERIMENTAL Trypanosoma cruzi infection / AUMENTO DA EXPRESSÃO DE ?-CATENINA E CADERINA NO CORAÇÃO DE CAMUNDONGOS NA FASE AGUDA E CRÔNICA DA INFECÇÃO EXPERIMENTAL POR Trypanosoma cruzi

Adherens junctions proteins have also been envolved in pathological mechanism of chagasic myocardiopathy. Aimed to determine the nature of these alterations, ten Swiss Webster male mice, 25 days-old were infected with a Type III strain of Trypanosoma cruzi through intraperitoneal (IP) route with 1.0 x 104 trypomastigotes/mouse. Five infected mice were killed at 14th day (parasitemia peak) of infection (group A). Another five infected mice (group C), were killed three months after inoculation, representing the chronic phase of the infection. Ten mice were injected through IP route with sterile 0.9% sodium chloride solution and were maintained under the same general conditions of the other groups. Five mice were killed either on day 14 (group CA) and five were killed at the end of the third month (group CC), and served as uninfected controls. Adherens junctions were analyzed by total lysate of the hearts that were immunoblotted for pan-cadherin and -catenin. Western blot analysis revealed increases of cadherins in both acute (2.1-fold ± 0.89, p= 0.048) and chronic (2.1-fold ± 0.92, p= 0.05) phase versus its respective controls. In relation to -catenin the results showed the same pattern characterized by increases in its levels also in acute (6.8-fold ± 4.65, p= 0.047) and chronic (3.65-fold ± 1.93, p= 0.033) phase in relation to controls. Thus, these results point to the evolve

As proteínas das junções de aderência têm sido associadas ao mecanismo patológico da miocardiopatia chagásica. Objetivando determinar a natureza dessas alterações, infectaram-se dez camundongos machos Swiss Webster com 25 dias de idade por via intraperitoneal com uma cepa tipo III de Trypanosoma cruzi na dose de 1,0 x 104 tripomastigotas/camundongo. Cinco camundongos infectados foram sacrificados no 14 dia (pico de parasitemia) de infecção (grupo A) e outros cinco camundongos (grupo C) três meses após a inoculação, representando a fase crônica da infecção. Inocularam-se dez animais com solução estéril de cloreto de sódio 0,9%, sendo sacrificados no 14 dia (grupo CA) e cinco ao final do terceiro mês (grupo CC), para servirem como controles não-infectados. As junções de aderência foram analisadas a partir do lisado total dos corações submetido a western blotting para pan-caderina e -catenina. A análise do western blotting revelou aumento da expressão de pan-caderina na fase aguda (2,1x ± 0,89, p= 0,048) e crônica (2,1x ± 0,92, p= 0,05) quando comparadas com seus respectivos controles. Em relação à -catenin, os resultados mostraram o mesmo padrão caracterizado pelo aumento de seus níveis na fase aguda (6,8x ± 4,65, p= 0,047) e crônica (3,65x ± 1,93, p= 0,033) em comparação aos controles. Assim, estes resultados indicam a associação das proteínas de junção de aderência aos even

Immunohistochemical evaluation of e-cadherin, Ki-67 and PCNA in canine mammary neoplasias: correlation of prognostic factors and clinical outcome / Avaliação imuno-histoquímica da e-caderina, Ki-67 e PCNA nas neoplasias mamárias caninas: correlação dos fatores prognósticos com a evolução clínica

E-cadherin is a cell-cell adhesion molecule and low e-cadherin expression is related to invasiveness and may indicate a bad prognosis in mammary neoplasms. The expression of cell proliferation markers PCNA and especially Ki-67, has also proved to have a strong prognostic value in this tumor class. The expression of these markers was related to the clinical-pathological characteristics of 73 surgically removed mammary tumors in female dogs by immunohistochemistry. There was no statistical correlation between these markers and death by neoplasm, survival time and disease-free interval. However, the loss of e-cadherin expression and marked Ki-67 expression (p=0.016) were considered statistically significant for the diagnosis (p=0.032). When evaluated as independent factors, there was evidence of the relationship between the loss of e-cadherin expression and high PCNA expression with changes in the body status (divided into obese, normal and cachectic) of female dogs (p=0.030); there was also evidence of the relationship between pseudopregnancy and e-cadherin alone (p=0.021) and for ulceration and PCNA alone (p=0.035). The significant correlation between the markers expression and these well known prognostic factors used individually or in combination suggests their prognostic value in canine mammary tumors.(AU)

A e-caderina é uma molécula de adesão celular e a perda de sua expressão esta relacionada à invasão tumoral podendo indicar um prognóstico ruim nas neoplasias mamárias. A expressão dos marcadores de proliferação celular PCNA e especialmente o Ki-67, também têm mostrado forte valor prognóstico nesta classe tumoral. A expressão imuno-histoquímica destes marcadores foi relacionada com as características clinico-patológicas de 73 tumores removidos cirurgicamente de fêmeas caninas. Não houve correlação estatística entre estes marcadores e a morte por neoplasia, tempo de sobrevida e intervalo livre de doença. Entretanto, a perda da expressão da ecaderina e a forte expressão do Ki-67 (p=0,016) foram considerados estatisticamente significativos quando relacionados com o diagnóstico (p=0,032). Quando avaliados os fatores independentes, houve evidência de associação entre a perda de expressão da e-caderina e a alta expressão do PCNA com as mudanças no estado nutricional das cadelas (divididas em obesas, normais e caquéticas) (p=0,030); houve também evidência de associação entre a pseudociese e a expressão da e-caderina (p=0,021) e com a ulceração e a expressão do PCNA (p=0,035). A correlação significativa entre a expressão dos marcadores e estes, bem conhecidos fatores prognósticos usados individualmente ou em associação, sugere importante valor prognóstico destes marcadores nos tumores mamários caninos.(AU)

Assessment of staging, prognosis and mortality of colorectal cancer by tumor markers: receptor erbB-2 and cadherins / Avaliação do estadiamento, prognóstico e mortalidade do câncer colorretal mediante marcadores tumorais: receptor erbB-2 e caderinas

OBJETIVO: Avaliação da expressão tumoral das proteínas c-erbB-2 e E-caderina e sua relação com o prognóstico, estadiamento e grau de diferenciação celular, em doentes com câncer colo-retal . MÉTODOS: O estudo incluiu 117 doentes com média de idade de 63.1 anos e com acompanhamento médio de 28.1 meses. O intervalo livre de doença, sobrevida, índice de recidiva e mortalidade específica foram os parâmetros avaliados. Anticorpos anti-oncoproteína c-erbB-2 (Dako) foram utilizados pela técnica da estreptavidiva-biotina. Considerou-se como positiva a presença desta proteína quando mais de 10% das células tumorais estivessem coradas. A proteína E-caderina foi estudada pelo anticorpo anti-E-caderina (Dako), sendo computada como positiva a amostra que apresentasse 50% ou mais das células coradas. A análise estatística utilizou o teste do qui-quadrado de Pearson, o teste exato de Fischer, a curva de Kaplan-Meier, o teste de log-rank e o teste de Wilcoxon ( variante de Breslow),sendo estabelecido nível de significância de 5%( p<0,05). RESULTADOS: 52 de 108 doentes estudados para c-erbB-2 foram positivos (48,1%), 47 de 93 doentes estudados para E-caderina foram negativos (50,5%). Estes dados não mostraram relação com estadiamento TNM (tumor, nódulo e metástase), com o grau de diferenciação celular e índice de recidiva tumoral. O intervalo livre de doença para os doentes positivos para c-erbB-2 e negativos para E-caderina foi de 68.0 meses e não diferiu daqueles que foram negativos para c-erbB-2 e positivos para E-caderina ( 55.0 meses - p = 0.5510). A sobrevida média para os doentes positivos para c-erbB-2 e negativos para E-caderina foi 75 meses sem diferença estatisticamente significante com o outro grupo de comparação( 61 meses - p = 0.5256). A mortalidade específica foi de 20.0% dos casos e não se correlacionou com a expressão do c-erbB-2 (p=0,446) ou da E-caderina(p=0,883). CONCLUSÃO: A expressão das proteínas c-erbB-2 e E-caderina em doentes portadores de adenocarcinoma colo-retal não apresentou correlação com o estadiamento e grau de diferenciação celular. Não houve da mesma forma relação com o prognóstico, no que diz respeito ao índice de recidiva da doença, intervalo livre de doença, sobrevida e mortalidade específica.(AU)

Expressão de c-MYC, NKX3.1 e E-Caderina por Imuno-Histoquímica em Microarranjo de Tecido (TMA) de Lesões Pré- Neoplásicas e Neoplásicas na Próstata De Cães

A próstata canina pode utilizada como modelo para estudo comparativo de afecções desta glândula no homem, constituindo as únicas espécies em que o carcinoma de próstata (CaP) se desenvolve espontaneamente. A próstata canina é sede de diversos processos patológicos que comumente acometem cães adultos e idosos. O papel do oncogene c-MYC e supressores tumorais NKX3.1 e E-caderina são bem estabelecidos no processo de carcinogênese da próstata humana, no entanto, não há pesquisas que relatem a expressão proteica dessas proteínas na progressão do CaP canino. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar a expressão proteica de c-MYC, NKX3.1 e Ecaderina na próstata normal, com Hiperplasia Prostática Benigna (HPB), Atrofia Inflamatória Proliferativa (PIA) e CaP e avaliar o papel dessas proteínas no processo de gênese tumoral. O presente estudo foi realizado em uma plataforma de Microarranjo de Tecido (TMA) contendo diferentes lesões prostáticas. Foi realizada Imuno-histoquímica com os anticorpos c-MYC, NKX3.1 e E-caderina pelo método da peroxidase e DAB. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-quadrado ou teste de Fischer para determinar associação entre as variáveis. A proteína c-MYC apresentou maior expressão no CaP e na PIA quando comparada com a próstata normal e com HPB (p= 0,0068). Observou-se maior número de amostras com ausência da expressão do NKX3.1 no CaP (94.75% ) e PIA (100%) quando comparando com a próstata normal e HPB (p=0,0022). Em relação a E-caderina houve maior número de amostras positivas na HPB e próstata normal quando comparado CaP e a PIA, no entanto sem diferença estatística. O processo de gênese tumoral na próstata canina esta associado com o aumento de expressão proteica do c-MYC e a perda da expressão proteica do NKX3.1

The dog is the only species besides humans that develop spontaneous and naturally prostatic carcinoma (PCa) with high frequency. The canine model is primarily used for studies of molecular mechanisms of PCa and provides a natural animal model for studies of potential therapies. PCa in men presents CMYC oncogene mutation and reduced E-cadherin and NKX3.1 protein expression. In this context our objective was to evaluate NKX3.1, C-MYC and E-cadherin expression in benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammatory atrophy (PIA) and PCa in dogs and verify the role of these proteins in the progression to prostate cancer. A tissue microarray (TMA) slide was constructed and immunohistochemistry with antibodies C-MYC, NKX3.1 and E-cadherin was performed with peroxidase method and DAB. Chi-square or Fisher exact test was used to determine the association between the categorical variables. The evaluation of the C-MYC oncogene protein showed higher cytoplasmic positivity in canine PCa and PIA compared to BPH (p= 0.0068). We observed a decrease of NKX3.1 expression in 94.75% of PCa, 100% of PIA in comparison to BPH (p=0.0022). E-cadherin expression was higher in BPH and PIA in comparison to PCa, with no statistical difference. The carcinogenesis process of canine prostatic lesion may be related to gain of CMYC and loss of NKX3.1