Resumo
Os carrapatos são motivo de grande preocupação na medicina humana e veterinária, pois exercem ação espoliante e transmitem diversos patógenos para seus hospedeiros. As atividades exercidas por moléculas produzidas pela glândula salivar e o intestino destes artrópodes são primordiais para obtenção de sucesso alimentar e reprodutivo. Dentre as diversas atividades desempenhadas na saliva, destaca-se a inibição do sistema complemento que tem como possíveis papéis retardar ao máximo o aparecimento de uma resposta imune contra as proteínas salivares e proteger o epitélio intestinal do ataque das moléculas efetoras do sistema complemento presentes no sangue recém-ingerido. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a ação da saliva do carrapato Amblyomma cajennense sobre a via clássica do sistema complemento humano. Foi avaliado se saliva e o EGS de partenóginas e teleóginas de carrapatos de diferentes dias de alimentação são capazes de inibir a ação do sistema complemento. Para isto, foram utilizados ensaios de hemólise com hemácias de carneiros e soro humano para avaliar a ação na via clássica. Também foi mensurado o valor do pH intestinal de fêmeas de A. cajennense e a eficiência do sistema complemento e dos inibidores neste pH. Os resultados mostraram que a saliva e o EGS são capazes de inibir a hemólise pela via clássica do sistema complemento humano, porém a saliva se mostrou mais eficaz do que o EGS. O EGS de teleóginas e partenóginas inibem a hemólise, sendo o de partenóginas mais ativo. O EGS de A. cajennense, quando alimentados em camundongos, possuem maior inibição da via clássica na fase final de alimentação (últimas 48 horas de alimentação) e a atividade apresentou uma correlação positiva significativa (r=0,585, p<0,001) com o peso, diferente dos alimentados em equinos, onde a inibição é igual em carrapatos de diferentes pesos. O valor do pH encontrado no intestino de A. cajennense foi de 8,04 e a alcalinização das soluções do ensaio hemolítico para pH 8,0 não interfere na ativação da via clássica e na atuação dos inibidores do sistema complemento, sendo a inibição mais eficaz do que em pH 7,0. O conhecimento de quando estes inibidores são expressos na saliva e como eles agem, poderá ser utilizado em futuros experimentos na busca de novos métodos de controle para carrapatos.
Ticks are a major concern in human and veterinary medicine because they cause blood loss and transmit several pathogens to their hosts. The activity performed by molecules produced by the salivary gland and gut of these arthropods are crucial for them to obtain blood and reach reproductive success. Among various activities performed by saliva, the inhibition of the complement system is important by delaying an immune response against salivary proteins and protecting the intestinal epithelium from the complement system, present within the ingested blood. The overall objective of this study was to characterize the anti complement activity of Amblyomma cajennense saliva on the classical pathway of the human complement system. We evaluated whether the saliva and EGS from partially engorged and engorged ticks after different days of feeding are capable of inhibiting the action of the complement system. For this, hemolysis assays were performed with sheep red blood cells and human serum to evaluate the action in the classical pathway. We also measured the female A. cajennenses intestinal pH and the efficiency of the human complement system at this pH. The results showed that both the saliva and EGS are able to inhibit the classical pathway hemolysis of human complement system, but the tick saliva was more effective than the EGS. The EGS of partially engorged and engorged ticks inhibit hemolysis, with extracts from engorged ticks being more effective. The EGS from A. cajennense fed to mice, presented greater inhibition of the classical pathway when dissected towards the end of the feeding stage (last 48 hours during feeding) and the activity showed a significant positive correlation (r = 0.585, p <0.001) with total weight, unlike EGS obtained from ticks fed on horses, where the inhibition is equal in ticks of different weights. The pH found in the A. cajennenses gut was 8.04 and the adjustments of the haemolytical assays to alkaline conditions did not interfere with classical pathway activation and the role of complement inhibitors, with the most effective inhibition occurring at pH 7.0. The knowledge of when these inhibitors are expressed in tick saliva and how they act may be used in future experiments searching new methods of tick control.
Resumo
Considerando a grande importância do Rhipicephalus (Boophilus) microplus, na produção de bovinos, o presente estudo teve como objetivo avaliar a sazonalidade deste artrópode em bovinos mantidos em pastagem de Brachiaria decumbens. Para tanto, foi pesquisada a dinâmica populacional durante 12 meses no município de Formiga, Minas Gerais. Vinte e quatro bovinos com oito a 12 meses de idade foram submetidos à infestação natural pelo carrapato. Contagens de fêmeas parcialmente ingurgitadas, 4,5 a 8,0 mm (partenóginas), foram computadas do lado esquerdo de cada bovino, nos períodos -2,-1 e zero. Utilizando-se as médias das contagens de carrapatos nas referidas datas, efetuou-se a randomização, para obtenção de dois grupos com infestações equitativas, os quais foram mantidos em piquetes separados. Para estudo da sazonalidade, as contagens foram realizadas nos períodos 3, 7, 14, 21, 28, e a cada 14 dias, durante 12 meses. Para verificar a incidência ectoparasitária com os efeitos climáticos, foram colhidos do posto climatológico do município, os seguintes dados: temperatura máxima e mínima, precipitação pluvial e umidade relativa do ar. Tratamentos táticos foram realizados, via tópica (pulverização), com uma formulação contendo Cipermetrina 15% + Clorpirifos 25% + Butóxido de Piperonila 15 + Citronela 1%, em todas as datas nas quais as quantificações de carrapatos ultrapassavam 30 partenóginas, em média. Como coadjuvante ao projeto, foram, ainda, realizadas pesagens dos animais e colheitas de fezes para contagens de ovos por grama de fezes (OPG) a cada 28 dias, sendo os mesmos tratados, com Fosfato de Levamisole injetável, na dose de 4,7 mg/kg, atingindo média de OPG 300. A carga média parasitária por animal e os desvios padrões do grupo I foi de 18,7(±11,7) e para o grupo II de 25,9 (±22,6), sendo realizados 15 tratamentos carrapaticidas nos dois grupos. As contagens de OPG apresentaram-se mais elevadas nos meses de dezembro e maio, sendo realizados dois tratamentos em cada grupo, totalizando quatro tratamentos antihelminticos ao longo do estudo. Não houve diferença estatística entre as médias de peso dos dois grupos analisadas (p>0,05), assim como nas contagens OPGs (p>0,05). Os resultados revelaram ainda que os níveis de infestação por carrapatos dos dois grupos apresentaram padrões semelhantes, das 30 contagens, somente sete diferiram entre si pelo teste t (p0,05), com picos de parasitismo ocorrendo na mesma época e com concentração no período chuvoso. A menor carga parasitária ocorreu no inverno. No início da primavera (outubro) houve um pico de carrapatos, seguido de outro no final da primavera/início do verão (dezembro) e outro no verão (fevereiro). A partir do outono a carga parasitária declinou naturalmente com registro de um pico no outono (abril), e outro no inverno (julho). Caracterizando dessa maneira a possível presença de cinco gerações de carrapatos para a região do estudo, e a influência das variáveis climáticas analisadas nos níveis de infestação pelo R. (B.) microplus.
Considering the great importance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in cattle, the present study aimed to evaluate the seasonality of this arthropod in cattle maintained in pastures of Brachiaria decumbens . To that end, were investigated the population dynamics for 12 months in the city of Formiga, Minas Gerais. Twenty - four cattle with eight to 12 months of age were subjected to natural infestation by ticks. Counts of part ially engorged females, from 4,5 to 8, 0 mm (engorged) , were computed on the left side of e ach animal , at times - 2, - 1 and zero. Using the mean on those dates tick counts, randomization was executed , to obtain two groups with fair infestations , which were kept in separate paddocks . To study of seasonality , the counts were recorded at 3, 7, 14, 21 , 28, and every 14 days for 12 months. To check the ectoparasitic incidence with the climatic effects, were collected from the climatological station of the city, the following data: maximum and minimum temperature, rainfall and relative humidity. Tactical treatments were performed, topically (spray) with a formulation containing Cypermethrin 15 % + Chlorpyrifos 25% + Piperonyl butoxide 15 + Citronella 1% on all the dates on which tick measurements exceed 30 engorged on average. As an adjunct to the project, were also carried weights of animals and faeces samples for egg counts per gram of feces (EPG) e very 28 days, and they are treated with injectable Levamisole Phosphate at a dose of 4,7 mg/kg , reaching average of EPG 300. The mean parasite load per animal and group I standard deviation was 18,7 (± 11,7) and group II 25,9 (± 22,6) and were performed 15 acaricide treatments in both groups. The EPG counts were more elevated in the months of December and May, and made two treatments in each group, a total of four anthelmintic treatments throughout the study. There was no statistical difference between the mean weight of the two analyzed groups (p>0,05), as well as in EPGs (p>0,05) scores. The results also revealed that the infestation levels by ticks from both groups had similar patterns of the 30 counts, only seven differed by t-test (p0,05), with peaks of parasitism at the same time and concentration rainy season. The lower parasite load occurred in winter. In early spring (October) there was a peak of ticks, followed by another in late spring/early summer (December) and one in the summer (February). From the autumn the parasite load naturally declined to record a peak in autumn (April), and another in winter (July). Featuring thus the possible presence of five generations of ticks for the study area, and the influence of climatic variables in infestation levels by R. (B.) microplus.
Resumo
No significant difference was found for egg laying and egg embryonation from engorged female Boophilus microplus exposed to different intensities of diffuse daylight as filtered through "colorless" or amber-colored glasses. The countings of free larvae and of egg-shells were almost perfectly equivalent. Almost perfect correlation was also found between the weights of engorged females and either the number of eggs they produced, the number of hatched larvae and the resulting number of empty shells. The average egg number per miligram of engorged female ticks was 10 and this proportion did not differ for the smaller or the larger of the studied females. The proportion of shrivelled eggs, which is an index of dehydration, was higher for the smaller egg-masses as compared with the larger egg clumps and this seems to be a most plausible reason for the higher proportion of hatching in the larger masses of eggs.
Não se encontrou para Boophilüs microplus diferença significante de oviposição ou embriogênese, em função de maior ou menor intensidade de luz difusa do dia, filtrada por vidro "incolor" ou cor de âmbar. Encontrou-se equivalência quase perfeita entre contagem de larvas livres e de cascas vazias de que irromperam. Foi também quase perfeita a correlação entre o peso das partenóginas e tanto o número de ovos que vieram a produzir, como o número de larvas que deles nasceu e ainda o número de cascas vazias de ovos. O número médio de ovos foi 10 por miligrama de partenóginas, não diferindo esta relação para partenóginas menos ou mais pesadas. À proporção de ovos encarquilhados, índice de desidratação, foi maior para as massas menores de ovos, parecendo ser esta a explicação para a maior fertilidade média das massas maiores d"ovos.
Resumo
No significant difference was found for egg laying and egg embryonation from engorged female Boophilus microplus exposed to different intensities of diffuse daylight as filtered through "colorless" or amber-colored glasses. The countings of free larvae and of egg-shells were almost perfectly equivalent. Almost perfect correlation was also found between the weights of engorged females and either the number of eggs they produced, the number of hatched larvae and the resulting number of empty shells. The average egg number per miligram of engorged female ticks was 10 and this proportion did not differ for the smaller or the larger of the studied females. The proportion of shrivelled eggs, which is an index of dehydration, was higher for the smaller egg-masses as compared with the larger egg clumps and this seems to be a most plausible reason for the higher proportion of hatching in the larger masses of eggs.
Não se encontrou para Boophilüs microplus diferença significante de oviposição ou embriogênese, em função de maior ou menor intensidade de luz difusa do dia, filtrada por vidro "incolor" ou cor de âmbar. Encontrou-se equivalência quase perfeita entre contagem de larvas livres e de cascas vazias de que irromperam. Foi também quase perfeita a correlação entre o peso das partenóginas e tanto o número de ovos que vieram a produzir, como o número de larvas que deles nasceu e ainda o número de cascas vazias de ovos. O número médio de ovos foi 10 por miligrama de partenóginas, não diferindo esta relação para partenóginas menos ou mais pesadas. À proporção de ovos encarquilhados, índice de desidratação, foi maior para as massas menores de ovos, parecendo ser esta a explicação para a maior fertilidade média das massas maiores d"ovos.