In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line

Abstract Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 M). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.

Resumo O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 M). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.

The effect of Cissus quadrangularis Salisb. extract on maturation of rat mesenchymal stem cells / O efeito do extrato de Cissus quadrangularis Salisb. na proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais de rato

Degenerative diseases, such as osteoporosis, could be treated by stem cells. The aim of this study was to identify the gene expression of bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC) derived from Sprague Dawley rats and to assess the effect of Cissus quadrangularis Salisb. extract on their maturation into bone cells. The BM-MSC were divided into three groups: (a) BM-MSCs + osteoblast cell growth basal medium as the positive control; (b) BM-MSCs + Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM) + 0.3 mg/mL methanol extract of C. quadrangularis as methanol group; and (c) BM-MSC + DMEM + 0.3 mg/mL ethyl acetate extract of C. quadrangularis as ethyl acetate group. A relative quantification approach using was used to analyze the expression of the alp (alkaline phosphatase) gene, with the beta-actin gene was used to normalize the expression of the alp gene. The intra-assay variation was calculated to validate the RT-qPCR data. Our study found that the intra-assay variation value was acceptable, with most of the coefficients of variability (CV) value <5. Ethyl acetate solvent outperformed methanol solvent in extracting the active compound C. quadrangularis. In the ethyl acetate extract group, the expression of the alp gene increased three times compared to the positive control. In methanol extract group, the expression of alp gene was lower six times compared to positive control. This study suggests that C. quadrangularis extracts using ethyl acetate could induce the maturation of BM-MSCs. However, further studies are warrant to confirm this effect using different indicators.

Doenças degenerativas, como a osteoporose, podem ser tratadas por células-tronco. O objetivo deste estudo foi identificar a expressão gênica de células-tronco mesenquimais da medula óssea (BM-MSCs) derivadas de ratos Sprague Dawley, bem como sua proliferação e diferenciação em células ósseas afetadas pelo extrato de Cissus quadrangularis Salisb. As BM-MSCs foram divididas em três grupos: (1) BM-MSCs + meio basal de crescimento de osteoblastos como controle positivo; (2) BM-MSCs + meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) + extrato de metanol; e (3) BM-MSCs + DMEM + extrato de acetato de etila de C. quadrangularis. Uma abordagem de quantificação relativa foi usada para analisar a expressão do gene alp (fosfatase alcalina), com o gene da beta-actina sendo usado para normalizar a expressão do gene alp em cada tratamento. A variação intraensaio foi calculada para validar os dados de RT-qPCR. Os resultados mostraram que o valor da variação intraensaio é aceitável, com a maioria dos valores dos coeficientes de variabilidade (CV) < 5. Além disso, no tratamento T2, a expressão do gene alp aumentou três vezes em relação ao controle positivo. No tratamento T1, o gene alp apresentou nível de expressão seis vezes menor em comparação com o controle positivo. Além disso, o solvente acetato de etila superou o solvente metanol na extração do composto ativo C. quadrangularis Salisb. Este estudo demonstra que extratos de C. quadrangularis Salisb., particularmente com acetato de etila como solvente, podem induzir a proliferação e diferenciação de BM-MSCs. Com base na expressão do gene alp, C. quadrangularis tem o potencial de corrigir a perda óssea.

Culture of rat mesenchymal stem cells on PHBV-PCL scaffolds: analysis of conditioned culture medium by FT-Raman spectroscopy / Cultivo de células-tronco mesenquimais de rato sobre arcabouços de PHBV-PCL: análise do meio de cultura condicionado por espectroscopia de FT-Raman

Abstract Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37oC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

Resumo As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a análise. Não houve variações nas leituras entre as amostras estudadas, concluindo-se que a FT-Raman não atendeu às expectativas nas condições estudadas.

Evaluation of cell proliferation and apoptosis markers as predictive factors for electrochemotherapy in cutaneous squamous cell carcinoma of cats / Marcadores de proliferação celular e de apoptose como fatores preditivos à eletroquimioterapia em carcinoma de células escamosas cutâneo de gatos

ABSTRACT: Determining cell proliferation rates and tumor apoptosis through immunohistochemistry allows the evaluation of the biological behavior of the tumor, optimizing the patient's clinical course. This study aimed to analyze the immunohistochemical expression of Ki-67, COX-2 and caspase-3 and correlate them with the type of response to ECT in feline cutaneous squamous cell carcinoma (SCC), thus determining the predictive potential of these variables. For this, 13 samples of feline cutaneous SCC were evaluated before ECT, and statistical analyses of the correlation intensity between the variables were performed using the Spearman correlation coefficient, with a significance level of 95%. The results indicate a significant negative correlation between histopathological grade and response to ECT (ρ=-0.6; p=0.03); there was no significant correlation between Ki-67, COX-2 and caspase-3 immunoexpression with the response to ECT (ρ=-0.18; p=0.54/ρ=-0.23; p=0.44/ρ=-0.12; p=0.69, respectively). Therefore, the study shows that the histopathological grade, tumor size and staging, degree of cellular pleomorphism and degree of inflammatory infiltrate can be considered negative prognostic factors for cutaneous SCC and negative predictors for response to ECT. However, the markers Ki-67, COX-2 and caspase-3 are not considered predictive factors for the type of response to ECT. In addition, no relationship between these immunoexpressions and greater tumor aggressiveness was observed. The SCCs evaluated in this study showed significant COX-2 labeling, indicating a potential therapeutic target. ECT has been shown to be safe and effective for local control of feline cutaneous SCC but with reduced effectiveness in larger and invasive lesions.

RESUMO: A determinação das taxas de proliferação celular e apoptose tumoral por meio da imuno-histoquímica, permite avaliar o comportamento biológico tumoral, com otimização da evolução clínica do paciente. Este trabalho teve como objetivo analisar as expressões imuno-histoquímicas de Ki-67, COX-2 e caspase-3 e correlacioná-las com o tipo de resposta à EQT em carcinoma de células escamosas (CEC) cutâneo de felinos; assim, determinar o potencial preditivo destas variáveis. Para tanto, foram avaliadas 13 amostras de CEC cutâneo de felinos antes da EQT e as análises estatísticas quanto à intensidade de correlação entre as variáveis foram realizadas utilizando o coeficiente de correlação de Spearman, com nível de significância de 95%. Os resultados indicam que houve correlação negativa significativa entre o grau histopatológico e a resposta à EQT (ρ=-0,6; p=0,03); não houve correlação significativa entre as imunoexpressões de Ki-67, COX-2 e caspase-3 com a resposta à EQT (ρ=-0,18; p=0,54/ρ=-0,23; p=0,44/ρ=-0,12; p=0,69, respectivamente). Portanto, este estudo evidenciou que as variáveis grau histopatológico, tamanho e estadiamento tumorais, grau de pleomorfismo celular e grau do infiltrado inflamatório foram consideradas fatores prognósticos negativos para o CEC cutâneo e preditivos negativos para a resposta à EQT. Entretanto, os marcadores Ki-67, COX-2 e caspase-3 não foram considerados fatores preditivos para o tipo de resposta à EQT, assim como não foi observada relação entre essas imunoexpressões com maior agressividade tumoral. Os CECs avaliados neste estudo apresentaram importante marcação para COX-2, indicando um potencial alvo terapêutico. A EQT mostrou-se segura e efetiva para o controle local dos CECs cutâneos dos felinos, porém com efetividade reduzida em lesões maiores e invasivas.

In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line / Citotoxicidade in vitro de curcuminoides contra a linhagem de células HNO97 de câncer de cabeça e pescoço

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 μM). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.

O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 μM). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.

In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line / Citotoxicidade in vitro de curcuminoides contra a linhagem de células HNO97 de câncer de cabeça e pescoço

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 μM). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.(AU)

O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 μM). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.(AU)

Nasal leiomyosarcoma in a Quarter Horse / Leiomiossarcoma nasal em equino Quarto de Milha

ABSTRACT: We described the clinical and anatomopathological findings observed in a case of nasal leiomyosarcoma in a five-year-old male Quarter Mile horse, whose main complaints were decreased sports performance and bilateral purulent nasal discharge. The nodule was observed in the nasal cavity, obstructing the left nostril and associated with purulent drainage. The nodule was of irregular shape and yellow color, measuring 19.4 cm × 6.9 cm × 4.3 cm in size, with coalescent multifocal areas that were brownish, friable, opaque, and fetid. When cut, the surface was compact, grayish-white, and smooth with yellow, friable, irregular multifocal areas, measuring 1-3.2 cm in diameter. Histopathological examination showed spindle-shaped neoplastic cells, which was negative on Masson's trichromic stain. A diagnosis of leiomyosarcoma was established based on the morphotintorial aspects of neoplastic cells and confirmed through immunohistochemistry, with positive immunostaining for antibodies 1A4, HHF35, desmin, and S100. Leiomyosarcoma primarily affects the nasal cavity of horses and should be included in the differential diagnosis of diseases that affect the nasal cavity and cause nasal obstruction associated with dyspnea.

RESUMO: Descreve-se os achados clínicos e anatomopatológicos observados em um caso de leiomiossarcoma nasal em um equino, Quarto de Milha, macho, de cinco anos de idade, com queixa principal de diminuição do rendimento esportivo e secreção nasal purulenta bilateral. Na cavidade nasal, observou-se um nódulo obstruindo a narina esquerda associada à secreção purulenta. O nódulo era de superfície irregular, amarelada, brilhante, fibroelástica, medindo 19,4 x 6,9 x 4,3cm de tamanho, com áreas multifocais a coalescente acastanhadas, friáveis, opacas e fétidas. Ao corte, a superfície era compacta, branco-acinzentada e lisa com áreas multifocais amarelas, friáveis e irregulares, medindo 1-3,2 cm de diâmetro. No exame histopatológico foi observado proliferação de células neoplásicas fusiformes, que foram negativas na coloração de Tricrômico de Masson. O diagnóstico de leiomiossarcoma foi estabelecido com base nos aspectos morfotintoriais das células neoplásicas e confirmado através da imuno-histoquímica, no qual houve imunomarcação positiva para os anticorpos 1A4, HHF35, Desmina e S100. O leiomiossarcoma pode afetar primariamente a cavidade nasal de equinos, devendo ser incluído no diagnóstico diferencial de doenças que afetam a cavidade nasal e que provocam quadros de obstrução nasal associado a dispneia.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer

Abstract Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

A comparative analysis of anatomopathological features and COX-2 expression of mammary neoplasms with malignant mesenchymal components in female dogs / Análise comparativa das características anatomopatológicas e expressão de COX2 em neoplasias mamárias com componentes mesenquimais malignos em cadelas

ABSTRACT: Canine mammary neoplasms with malignant mesenchymal components, such as carcinosarcomas and sarcomas, belong to an uncommon and histologically heterogeneous group. Little is known about the biological behavior of these histogenic variants. This study aimed to compare the clinicopathological characteristics and the COX-2 immunohistochemical expression of different histologic subtypes of carcinosarcomas and sarcomas. Samples of 23 carcinosarcomas and 15 sarcomas from the mammary glands of female dogs were studied. Medical records were reviewed to obtain clinical data. Subsequently, histology microscope slides were analyzed to assess for mesenchymal subtypes, necrosis, vascular invasion, histologic grades, and lymph node metastasis. Immunohistochemistry was used to assess the COX-2 expression. The malignant mesenchymal proliferation was categorized into osteosarcomas (23/40), fibrosarcomas (5/40), liposarcomas (6/40) and chondrosarcomas (4/40). The osteosarcomatous differentiation was the most predominant type among the sarcomas and carcinosarcomas and was associated with vascular invasion (P=0.010) and lymph node metastases (P=0.014). High COX-2 expression was detected in 14.3% of the carcinosarcomas (carcinoma and/or sarcoma cells) and 27.3% of the sarcomas. The carcinosarcomas and sarcomas had similar clinical and pathological characteristics and developed as large tumors, with intratumoral necrosis and a predominance of high histologic grades, although the frequency of vascular invasion and lymph node metastasis was low. Osteosarcoma subtypes presented more aggressive characteristics than non-osteosarcoma subtypes.

RESUMO: Neoplasias mamárias caninas com componentes mesenquimais malignos, como carcinossarcomas e sarcomas, são um grupo de neoplasias pouco frequentes e histologicamente heterogêneas e pouco se sabe sobre o comportamento biológico das variantes histogênicas. O objetivo desse estudo é comparar as características anatomopatológicas e a expressão imunoistoquímica de COX-2 de diferentes subtipos histológicos de carcinossarcomas e sarcomas. Foram estudados 23 carcinosarcomas e 17 sarcomas da glândula mamária de cadelas. Os prontuários médicos foram revisados para obtenção de dados clínicos. Posteriormente, as lâminas histológicas foram avaliadas para acessar os subtipos mesenquimais, necrose, invasão vascular, grau histológico, metástase linfonodal. A imunoistoquímica foi realizada para avaliar a expressão de COX-2. Os tipos encontrados de proliferação mesenquimal maligna foram osteossarcoma (23/40), fibrossarcoma (7/40), lipossarcoma (6/40) e condrossarcoma (4/40). A diferenciação osteossarcomatosa foi predominante entre os sarcomas e carcinossarcomas e foi associado com invasão vascular (P=0,006) e metástase linfonodal (P=0,014). Uma expressão alta de COX-2 foi detectada em 14,3% dos carcinossarcomas (células carcinomatosas e/ou sarcomatosas) e 27,3% dos sarcomas. Os carcinossarcomas e sarcomas apresentaram características clínicas e patológicas semelhantes e se desenvolveram como tumores grandes, com necrose intratumoral e predomínio de alto grau histológico, mas com baixa frequência de invasão vascular e metástase distante. Os subtipos osteossarcomatosos apresentaram características mais agressivas quando comparados com subtipos não osteossarcomatosos.

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Abstract Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

Nasal leiomyosarcoma in a Quarter Horse / Leiomiossarcoma nasal em equino Quarto de Milha

We described the clinical and anatomopathological findings observed in a case of nasal leiomyosarcoma in a five-year-old male Quarter Mile horse, whose main complaints were decreased sports performance and bilateral purulent nasal discharge. The nodule was observed in the nasal cavity, obstructing the left nostril and associated with purulent drainage. The nodule was of irregular shape and yellow color, measuring 19.4 cm × 6.9 cm × 4.3 cm in size, with coalescent multifocal areas that were brownish, friable, opaque, and fetid. When cut, the surface was compact, grayish-white, and smooth with yellow, friable, irregular multifocal areas, measuring 1-3.2 cm in diameter. Histopathological examination showed spindle-shaped neoplastic cells, which was negative on Masson's trichromic stain. A diagnosis of leiomyosarcoma was established based on the morphotintorial aspects of neoplastic cells and confirmed through immunohistochemistry, with positive immunostaining for antibodies 1A4, HHF35, desmin, and S100. Leiomyosarcoma primarily affects the nasal cavity of horses and should be included in the differential diagnosis of diseases that affect the nasal cavity and cause nasal obstruction associated with dyspnea.

Descreve-se os achados clínicos e anatomopatológicos observados em um caso de leiomiossarcoma nasal em um equino, Quarto de Milha, macho, de cinco anos de idade, com queixa principal de diminuição do rendimento esportivo e secreção nasal purulenta bilateral. Na cavidade nasal, observou-se um nódulo obstruindo a narina esquerda associada à secreção purulenta. O nódulo era de superfície irregular, amarelada, brilhante, fibroelástica, medindo 19,4 x 6,9 x 4,3cm de tamanho, com áreas multifocais a coalescente acastanhadas, friáveis, opacas e fétidas. Ao corte, a superfície era compacta, branco-acinzentada e lisa com áreas multifocais amarelas, friáveis e irregulares, medindo 1-3,2 cm de diâmetro. No exame histopatológico foi observado proliferação de células neoplásicas fusiformes, que foram negativas na coloração de Tricrômico de Masson. O diagnóstico de leiomiossarcoma foi estabelecido com base nos aspectos morfotintoriais das células neoplásicas e confirmado através da imuno-histoquímica, no qual houve imunomarcação positiva para os anticorpos 1A4, HHF35, Desmina e S100. O leiomiossarcoma pode afetar primariamente a cavidade nasal de equinos, devendo ser incluído no diagnóstico diferencial de doenças que afetam a cavidade nasal e que provocam quadros de obstrução nasal associado a dispneia.

Acute toxicity of essential oils of Aloysia triphylla (L'Hér) Britton, Lippia gracilis Schauer, and Piper aduncum L. in Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) / Toxicidade aguda dos óleos essenciais de Aloysia triphylla (L'Hér) Britton, Lippia gracilis Schauer e Piper aduncum L. em Colossoma macropomum (Cuvier, 1818)

The aim of this study was to determine the acute toxicity of the essential oils (EOs) of Aloysia triphylla, Lippia gracilis and Piper aduncum in juvenile tambaqui (Colossoma macropomum), and evaluate the possible histopathological alterations in their gills. For the acute toxicity tests, juvenile tambaqui (n=24/treatment) were distributed in six treatments with three replicates, which comprised the control and five EO concentrations of A. triphylla (60, 80, 100, 120 and 140 mg L-1), L. gracilis (35, 40, 45, 50 and 55 mg L-1) and P. aduncum (42.5, 45, 47.5, 50 and 52.5 mg L-1), with an exposure period of 4 h. The mortality rate and severity of damage to the tambaqui gills were proportional to the increase in the concentration of the EO, with LC50-4 h values estimated at 109.57 mg L -1 for A. triphylla, 41.63 mg L -1 for L. gracilis and 48.17 mg L -1 for P. aduncum. The main morphological damages observed in the gills of the tambaqui exposed to the three EOs, were Grade I: hypertrophy and hyperplasia of lamellar epithelial cells, lamellar fusion, epithelial detachment, capillary dilation and constriction, proliferation of chloride cells and mucosal cells and edema; in low frequency Grade II damage as epithelial rupture and lamellar aneurysm. Necrosis (Grade III damage) was observed only in gill lamellae exposed to P. aduncum EO (47.5, 50.0 and 52.5 mg L-1). Concentrations of EOs below LC50-4 h can be used sparingly, for short periods of exposure for the treatment of diseases in tambaqui breeding.

O objetivo deste estudo foi determinar a toxicidade aguda dos óleos essenciais (OEs) de Aloysia triphylla, Lippia gracilis e Piper aduncum em juvenis de tambaqui (Colossoma macropomum), e avaliar as possíveis alterações histopatológicas em suas brânquias. Para os testes de toxicidade aguda, juvenis de tambaqui (n=24/tratamento) foram distribuídos em 6 tratamentos, com três repetições, sendo o controle e cinco concentração do OE de A. triphylla (60, 80, 100, 120 e 140 mg L-1), L. gracilis (35, 40, 45, 50 e 55 mg L-1) e P. aduncum (42,5, 45, 47,5, 50 e 52,5 mg L-1), com exposição de 4 h. A taxa de mortalidade e a severidade dos danos nas brânquias de tambaqui foram proporcionais ao aumento da concentração do OE, com os valores de CL50-4 h estimados em 109,57 mg L-1 para A. triphylla, em 41,63 mg L-1 para L. gracilis e em 48,17 mg L-1 para P. aduncum. Os principais danos morfológicos observados nas brânquias de tambaqui, expostos aos três OEs, foram os de grau I: hipertrofia e hiperplasia das células do epitélio lamelar, fusão lamelar, descolamento epitelial, dilatação e constrição capilar, proliferação de células de cloreto e de células mucosas e edema; em baixa frequência os de grau II como ruptura epitelial e aneurisma lamelar. Necrose (dano de grau III) foi observado somente nas lamelas branquiais expostas ao OE de P. aduncum (47,5, 50,0 e 52,5 mg L-1). Concentrações do OEs abaixo dos valores de CL50-4 h podem ser utilizados com parcimônia, em curtos períodos de exposição para o tratamento de doenças na criação de tambaqui.

Protective effect of Mucuna pruriens (L) DC. var. pruriens seed extract on apoptotic germ cells in ethanolic male rats / Efeito protetor de Mucuna pruriens (L) DC. var. extrato de semente de pruriens, em células germinativas apoptóticas em ratos machos etanólicos

Thai Mucuna pruriens (L.) DC. var pruriens (T-MP) seed containing levodopa (L-DOPA) and antioxidant capacity has been shown to improve sexual behavior and male reproductive parameters in rats treated with ethanol (Eth). However, its protective effect on testicular apoptotic germ cells has never been reported. This study aimed to investigate the potential effects of T-MP seed extract on expressions of caspase, proliferating cell nuclear antigen (PCNA), and dopamine D2 receptor (D2R) proteins in Eth rats. Thirty-six male Wistar rats were divided into four groups (9 animals/group), including control, Eth, T-MP150+Eth, and T-MP300+Eth, respectively. Control rats received distilled water, and Eth rats received Eth (3g/kg BW; 40%v/v). The T-MP groups were treated with T-MP seed extract at a dose of 150 or 300 mg/kg before Eth administration for 56 consecutive days. The results showed that the seminiferous tubule diameter and epithelial height were significantly increased in both T-MP treated groups compared to the Eth group. Additionally, the caspase-9 and -3, and PCNA expressions were decreased, but D2R expression was markedly increased in T-MP groups. It was concluded that T-MP seed extract could protect testicular apoptosis induced by Eth via changes in caspase, PCNA, and D2R protein expressions.

Thai Mucuna pruriens (L.) DC. var pruriens (T-MP) contendo levodopa (L-DOPA) e capacidade antioxidante demonstrou melhorar o comportamento sexual e os parâmetros reprodutivos masculinos em ratos tratados com etanol (Eth). No entanto, seu efeito protetor sobre células germinativas apoptóticas testiculares nunca foi relatado. Este estudo teve como objetivo investigar os efeitos potenciais do extrato de semente de T-MP na expressão de proteínas de caspase, antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e receptor de dopamina D2 (D2R) em ratos Eth. Trinta e seis ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos (9 animais/grupo), incluindo controle, Eth, T-MP150+Eth e T-MP300+Eth, respectivamente. Ratos controle receberam água destilada e ratos Eth receberam Eth (3g/kg PC; 40%v/v). Os grupos T-MP foram tratados com extrato de semente de T-MP na dose de 150 ou 300 mg/kg antes da administração de Eth por 56 dias consecutivos. Os resultados mostraram que o diâmetro dos túbulos seminíferos e a altura epitelial foram significativamente aumentados em ambos os grupos tratados com T-MP em comparação com o grupo Eth. Além disso, as expressões de caspase-9 e -3 e de PCNA diminuíram, mas a expressão de D2R aumentou acentuadamente nos grupos T-MP. Concluiu-se que o extrato de semente de T-MP pode proteger a apoptose testicular induzida por Eth através de alterações na expressão de proteínas caspase, PCNA e D2R.

Epidemiological and anatomopathological findings of type 1 and 2 abomasum ulcers in cattle with different comorbidities / Achados epidemiológicos e anatomopatológicos de úlceras do abomaso tipo 1 e 2 em bovinos com diferentes comorbidades primárias

This study aimed to investigate the epidemiological and pathological findings of type 1 and 2 abomasal ulcers in cattle with different primary comorbidities. A total of 201 animals; 40/201 (20%) were young cattle under the age of two years and 161/201 (80%) were adult cattle over the age of two years, which were hospitalized for clinical care 152/201 (75,62%), 19/201 (9,45%) obstetric care, 17/201 (8,46%) surgical care and 13/201 (6,47%) for anatomopathological diagnosis, being euthanized or had natural death. The diagnosis of ulcers was based on the result of the post-mortem examination (macroscopic and histopathological analysis). Histopathological examination was performed on 201 fragments of ulcers and classified as type 1 or type 2. Of these, 193/201 (96.01%) corresponded to type 1 ulcers, of which 12/193 (5.97%) corresponded to subtype 1a lesions, 101/193 (50.25%) to subtype 1b, 77/ 193 (38.31%) to subtype 1c, 03/193 (1.49%) to subtype 1d, while 08/201 (3.98%) were type 2 ulcers. The ulcers were characterized by a focal, focally extensive, multifocal or diffuse inflammatory process, mainly by mononuclear cells. Abomasitis associated with ulcerated mucosa was found in 160/201 (79.60%). In 26/201 (12.93%) the abomasitis had diffuse foci of multifocal lymphocytic proliferation by atypical lymphocytes. Digestive and reproductive comorbidities were seen more frequently in cattle with type 1 or type 2 ulcers. The Subtype 1b focal ulcers and subtype 1a and 1b multifocal ulcers were more prevalent. In addition to the presence of comorbidities, most cases occur in the dry period, associated with feeding with higher amounts of concentrates and silages.(AU)

Objetivou-se estudar os achados epidemiológico e anatomopatológico de úlceras do abomaso tipo 1 e 2 em bovinos com diferentes comorbidades primárias. Um total de 201 animais; 40/201 (20%) eram bovinos jovens com idade inferior a dois anos e 161/201 (80%) eram bovinos adultos com idade superior a dois anos, os quais foram internados para atendimento clínico 152/201 (75,62%), 19/201 (9,45%) obstétrico, 17/201 (8,46%) para atendimento clínico-cirúrgico e 13/201 (6,47%) para diagnóstico anatomopatológico, sendo eutanasiados ou tiveram morte natural. O diagnóstico das úlceras foi baseado no exame post-mortem (análise macroscópica e histopatológica). O exame histopatológico foi realizado em 201 fragmentos de úlceras e classificado como tipo 1 ou do tipo 2. Destes, 193/201 (96,01%) corresponderam a úlceras tipo 1, das quais, 12/193 (5,97%) corresponderam a lesões subtipo 1a, 101/193 (50,25%) a subtipo 1b, 77/193 (38,31%) a subtipo 1c, 03/193 (1,49%) ao subtipo 1d, enquanto 08/201 (3,98%) foram úlceras tipo 2. As úlceras foram caracterizadas por processo inflamatório focal, focalmente extenso, multifocais ou difusos, principalmente por células mononucleares. Abomasite associada à mucosa ulcerada foi encontrada em 160/201 (79,60%). Em 26/201 (12,93%) a abomasite apresentava focos difusos de proliferação linfocítica multifocal por linfócitos atípicos. As comorbidades digestivas e reprodutivas foram observadas com maior frequência em bovinos com úlceras tipo 1 ou tipo 2. As úlceras focais subtipo 1b e úlceras multifocais subtipo 1a e 1b foram mais prevalentes. Além da presença de comorbidades, a maioria dos casos ocorrerem no período seco, associados à alimentação com maiores aportes de concentrados e silagens.(AU)

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2"-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 " - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2’:4’,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4’, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2:4,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.(AU)

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.(AU)

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.(AU)

O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.(AU)

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer / Aumento da anexina V em resposta à combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como uma potente parada do ciclo celular do câncer colorretal

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.