Inhibitory activities of propolis, nisin, melittin and essential oil compounds on Paenibacillus alvei and Bacillus subtilis

Background: Natural products represent important sources of antimicrobial compounds. Propolis and compounds from essential oils comprise good examples of such substances because of their inhibitory effects on bacterial spores, including bee pathogens. Methods: Ethanol extracts of propolis (EEP) from Apis mellifera were prepared using different methods: double ultrasonication, double maceration and maceration associated with ultrasonication. Together with the antimicrobial peptides nisin and melittin, and compounds present in the essential oils of clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), assays were carried out on one Bacillus subtilis isolate and Paenibacillus alvei (ATCC 6344) against vegetative and sporulated forms, using the resazurin microtiter assay. Synergism with all the antimicrobials in association with tetracycline was verified by the time-kill curve method. Potassium and phosphate efflux, release of proteins and nucleic acids were investigated. Results: EEPs showed the same MIC, 156.25 µg/mL against B. subtilis and 78.12 µg/mL against P. alvei. The peptides showed better activities against B. subtilis (MIC of 12 µg/ mL for melittin and 37.50 µg/mL for nisin). Antimicrobials showed similar inhibitory effects, but cinnamaldehyde (39.06 µg/mL) showed the best action against P. alvei. Melittin and nisin showed the greatest capacity to reduce spores, regarding B. subtilis there was a 100% reduction at 6.25 and 0.78 µg/mL, respectively. Concerning P. alvei, the reduction was 93 and 98% at concentrations of 80 µg/mL of melittin and 15 µg/ mL of nisin. EEPs showed the highest effects on the protein release against B. subtilis and P. alvei. Nucleic acid release, phosphate and potassium efflux assays indicated bacterial cell membrane damage. Synergism between antimicrobials and tetracycline was demonstrated against both bacteria. Conclusion: All antimicrobials tested showed antibacterial activities against vegetative and sporulated forms of P. alvei and B. subtilis, especially nisin and melittin. Synergism with tetracycline and damage on bacterial cell membrane also occurred.(AU)

Replacement of performance enhancers by propolis ethanol extract in broiler diets

The present study was carried out to evaluate the substitution of synthetic performance enhancers by ethanolic propolis extract (EPE) in the diet of broilers and their effects on performance, carcass yield, noble cuts, viscera and bed quality. A completely randomized design was used, with four treatments and six replicates each, totaling 24 experimental plots with 20 birds each. The experimental treatments were: negative control, without the inclusion of performance improvement and EPE-free; positivecontrol, containing avilamycin performance enhancer; Inclusion of 0.1% of EPE and; Inclusion of 0.2% EPE. The analyzed data were submitted to analysis of variance and applied the SNK test at 5% probability. There was no effect of the inclusion of additives on feed intake and feed conversion in the periods from 1 to 7, 1 to 21,and from 1 to 42 days of age. Weight gain was lower in birds receiving feed with the inclusion of 0.1% EPE in the period from 1 to 7 days, not differing from the other treatments in the other evaluation periods. Carcass characteristics, cuts, and viscera and bed moisture were not influenced by the treatments used. The inclusion of ethanol extract from propolis as a performance enhancer up to 42 days of age provided similar results to the use of performance enhancers based on avilamycin, thus being an efficient substitute in poultry production.(AU)

Propolis in the control of bacterial bovine mastitis: a tool for the production of organic milk / Própolis no controle de mastite bovina bacteriana: uma ferramenta para a produção de leite orgânico

Bovine mastitis is one of the main causes of economic damage in dairy farms. Therefore, the control and prevention of microorganisms involved in this disease, mainly Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Streptococcus agalactiae, are essential. One of the most important steps for the prevention of the disease is the use of antiseptic products before and after the milking process to avoid bacteria from infecting the udder of the animal. Currently, the most used antiseptic product in dairy farms is iodine-based, and organic dairy farms, which follow several strict regulations, including the use of natural products whenever possible, are often forced to adopt non-natural antiseptic products, such as iodine-based ones, because of the lack of natural alternatives. Propolis, a natural substance produced by honeybees, has been extensively studied for its various properties, one of which is antimicrobial activity. Therefore, a new natural antiseptic product containing 1% propolis in 10% hydroalcoholic solution for the pre-dipping, and 10% glycerol solution added with 0.2% citronella oil for the post-dipping was analyzed for its capacity to reduce bacteria in vivo in order to prevent bovine mastitis, allowing its use on organic dairy farms. A total of 128 samples were analyzed in terms of bacterial growth for Enterobacteriaceae and Staphylococcus spp. using the spreadplate technique. The reduction in the bacterial concentration after the application of the products was compared between two antiseptic solutions, an iodine-based solution as the control and a propolis-based one as the natural alternative. The results obtained show a similar efficiency for both products in terms of total bacterial reduction, indicating considerable antimicrobial activity against bacteria most commonly associated with bovine mastitis. Molecular analysis was carried out for the identification of Streptococcus agalactiae; the PCR results were negative for the presence of S. agalactiae in all samples, indicating that the animals most likely did not have any form of the disease. The efficiency of the natural antiseptic was satisfactory, indicating an important find facilitating organic milk production worldwide, showcasing a natural antiseptic solution with efficient antimicrobial activity.(AU)

A mastite bovina é uma das principais causas de prejuízo econômico na indústria leiteira, portanto o controle e prevenção de microrganismos envolvidos nessa doença, principalmente Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae é essencial. Uma das principais etapas na prevenção dessa doença é o uso de produtos antissépticos antes e depois do processo de ordenha, a fim de evitar contaminação bacteriana no úbere do animal. Atualmente, o produto antisséptico mais utilizado na indústria leiteira é a base de iodo, e fazendas produtoras de leite orgânico, que precisam seguir uma série de regulações estritas, incluindo o uso de produtos naturais sempre que possível, são frequentemente forçadas a adotar antissépticos não-naturais, como os a base de iodo por falta de alternativas naturais. Própolis, uma substância natural produzidas por abelhas, tem sido extensivamente estudada por suas várias propriedades, sendo uma delas antimicrobiana. Portanto, um novo produto antisséptico natural contendo própolis à 1% em solução hidroalcóolica 10% para o pré-dipping, e glicerinada 10% adicionada de óleo de citronela à 0,2% para o pós-dipping, foi avaliada quanto a sua capacidade de reduzir bactérias in vivo e prevenir a mastite bovina, além de poder ser utilizado na indústria leiteira orgânica. Um total de 128 amostras foram analisadas em termos de crescimento bacteriano para Enterobacteriaceae e Staphylococcus spp. utilizando a técnica de plaqueamento em superfície, a redução da concentração bacteriana após a aplicação dos produtos foi comparada entre duas soluções antissépticas, uma solução a base de iodo servindo como controle, e uma solução a base de própolis como a alternativa natural. Os resultados obtidos mostraram uma eficiência similar entre os produtos à base de iodo e própolis em termos de redução bacteriana total, indicando uma grande atividade antibacteriana contra as bactérias mais comumente associadas com a mastite bovina. Realizou-se análise molecular para a identificação de Streptococcus agalactiae, os resultados da PCR foram negativos para a presença de S. agalactiae em todas as amostras, indicando que os animais provavelmente não possuíam nenhuma forma da doença. A eficiência do antisséptico natural foi satisfatória, indicando um achado importante para auxiliar o crescimento da indústria de leite orgânico de forma mundial, mostrando uma solução antisséptica natural com atividade antimicrobiana eficiente.(AU)

Revestimento edível usando alginato de sódio incorporado com óleo essencial de cravo e extrato de própolis verde na conservação de Mytella guyanensis / Edible coating using clove essential oil and green propolis extract incorporated sodium alginate on the conservation of Mytella guyanensis

Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do revestimento edível a base de extrato de própolis verde e óleo de cravo em amostras de sururu (Mytella guyanensis). Foram elaboradas três soluções de revestimento: óleo essencial de cravo a 2 mg.m-1(OEC); própolis verde a 2% (PV2%) e própolis verde a 2% + OEC a 2 mg. mL-1(PV2%+OEC). Sururu sem revestimento foi usado como controle. As amostras foram embaladas e armazenadas a 5°C por 12 dias e realizadas análises microbiológicas (bactérias aeróbias mesófilas, coliformes a 35°C e a 45°C) e físico-químicas (bases voláteis totais e pH) em intervalos de 0, 4, 8 e 12 dias. Os revestimentos edíveis apresentaram baixa redução na carga microbiana de mesófilos, porém com redução significativa (p<0,05) na redução de coliformes a 45°C ( PV2% > PV2%+OEC > OEC). A aplicação de revestimento edível a base de PV2% e PV2%+OEC é uma alternativa eficiente para a redução da carga microbiana de coliformes em amostras de sururu refrigerado.(AU)

Revestimento edível usando alginato de sódio incorporado com óleo essencial de cravo e extrato de própolis verde na conservação de Mytella guyanensis / Edible coating using clove essential oil and green propolis extract incorporated sodium alginate on the conservation of Mytella guyanensis

Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do revestimento edível a base de extrato de própolis verde e óleo de cravo em amostras de sururu (Mytella guyanensis). Foram elaboradas três soluções de revestimento: óleo essencial de cravo a 2 mg.m-1(OEC); própolis verde a 2% (PV2%) e própolis verde a 2% + OEC a 2 mg. mL-1(PV2%+OEC). Sururu sem revestimento foi usado como controle. As amostras foram embaladas e armazenadas a 5°C por 12 dias e realizadas análises microbiológicas (bactérias aeróbias mesófilas, coliformes a 35°C e a 45°C) e físico-químicas (bases voláteis totais e pH) em intervalos de 0, 4, 8 e 12 dias. Os revestimentos edíveis apresentaram baixa redução na carga microbiana de mesófilos, porém com redução significativa (p PV2%+OEC > OEC). A aplicação de revestimento edível a base de PV2% e PV2%+OEC é uma alternativa eficiente para a redução da carga microbiana de coliformes em amostras de sururu refrigerado.

Atividade antifúngica do extrato alcoólico de própolis, álcool de cereais e do óleo essencial de manjericão sobre Botrytis cinerea / Antifungal activity of propolis alcoholic extract, grain alcohol, and basil essential oil on Botrytis cinerea

A uva é uma fruta amplamente aceita pelos consumidores, além de ser produzida em larga escala no Brasil. Entretanto é uma cultura muito suscetível a perdas em pré-colheita ocasionadas por doenças e, entre elas, pode-se citar a podridão cinzenta do cacho, cujo agente causal é o fungo Botrytis cinerea. A busca por formas alternativas para o controle desse patógeno pode minimizar o uso de agrotóxicos, garantindo um alimento mais seguro. Objetivou-se avaliar o potencial antifúngico in vitro do extrato alcoólico de própolis, álcool de cereais e óleo essencial de manjericão (Ocimum basilicum), autoclavados ou não, sobre o crescimento micelial de Botrytis cinerea, ao longo do tempo de exposição. Os tratamentos avaliados foram: extrato alcoólico de própolis e álcool de cereais, ambos nas concentrações 0, 2,5, 6,25, 12,5%; e óleo essencial de manjericão, nas concentrações 0, 0,25, 0,50, 1%. Para a obtenção do crescimento micelial foram realizadas medidas em sentidos diametralmente opostos, com um paquímetro digital, durante 0, 24, 48, 72, 96, 120 e 144 h de exposição, para o cálculo da taxa de inibição do crescimento micelial (ICM, %). O experimento foi realizado em duplicata, sendo os tratamentos dispostos em esquema fatorial 4x7 (concentrações x tempos) e os dados foram analisados por comparação de médias (teste de Tukey, p ≤ 0,05), desdobrando a interação, quando significativa. Todos os tratamentos contendo óleo essencial de manjericão autoclavado e não autoclavado foram eficientes na inibição do crescimento micelial de B. cinerea. A autoclavagem do extrato alcoólico de própolis proporciona maior eficácia para o controle do patógeno do que a não autoclavagem. Para o álcool de cereais, a autoclavagem interfere na eficiência de controle de B. cinerea.

Grape is a fruit widely accepted by consumers, besides being produced in large scale in Brazil. However, it is a crop very susceptible to losses in pre-harvest and, among the main diseases responsible for these losses, we can mention the gray rot of the bunch, whose causal agent is the fungus Botrytis cinerea. The search for alternative ways to control this pathogen can minimize the use of agrochemicals, ensuring a safer food. The aim of this study was to evaluate the in vitro antifungal potential of propolis alcoholic extract, cereal alcohol and basil oil (Ocimum basilicum), autoclaved or not, on the mycelial growth of Botrytis cinerea, during the exposure time. The treatments evaluated were: alcoholic extract of propolis and cereal alcohol, both in concentrations 0.0, 2.5, 6.25, 12.5%; and basil oil, at concentrations 0.25, 0.50, 1.00%. In order to obtain the mycelial growth, measurements were carried out in diametrically opposite directions, with a digital caliper, during 0, 24, 48, 72, 96, 120 and 144 hours of exposure, to calculate the rate of inhibition of mycelial growth (IMG, %). The experiment was performed in duplicate, with the treatments arranged in a factorial scheme 4x7 (concentrations x times) and the data were analyzed by means comparison (Tukey's test, p ≤ 0.05), unfolding the interaction, when significant. All treatments containing autoclaved and non-autoclaved basil essential oil were efficient in inhibiting the mycelial growth of B. cinerea. The autoclaving of the propolis alcoholic extract provides greater efficacy for the control of the pathogen than non-autoclaving. For cereal alcohol, autoclaving interferes with the control efficiency of B. cinerea.

Atividade antifúngica do extrato alcoólico de própolis, álcool de cereais e do óleo essencial de manjericão sobre Botrytis cinerea / Antifungal activity of propolis alcoholic extract, grain alcohol, and basil essential oil on Botrytis cinerea

A uva é uma fruta amplamente aceita pelos consumidores, além de ser produzida em larga escala no Brasil. Entretanto é uma cultura muito suscetível a perdas em pré-colheita ocasionadas por doenças e, entre elas, pode-se citar a podridão cinzenta do cacho, cujo agente causal é o fungo Botrytis cinerea. A busca por formas alternativas para o controle desse patógeno pode minimizar o uso de agrotóxicos, garantindo um alimento mais seguro. Objetivou-se avaliar o potencial antifúngico in vitro do extrato alcoólico de própolis, álcool de cereais e óleo essencial de manjericão (Ocimum basilicum), autoclavados ou não, sobre o crescimento micelial de Botrytis cinerea, ao longo do tempo de exposição. Os tratamentos avaliados foram: extrato alcoólico de própolis e álcool de cereais, ambos nas concentrações 0, 2,5, 6,25, 12,5%; e óleo essencial de manjericão, nas concentrações 0, 0,25, 0,50, 1%. Para a obtenção do crescimento micelial foram realizadas medidas em sentidos diametralmente opostos, com um paquímetro digital, durante 0, 24, 48, 72, 96, 120 e 144 h de exposição, para o cálculo da taxa de inibição do crescimento micelial (ICM, %). O experimento foi realizado em duplicata, sendo os tratamentos dispostos em esquema fatorial 4x7 (concentrações x tempos) e os dados foram analisados por comparação de médias (teste de Tukey, p ≤ 0,05), desdobrando a interação, quando significativa. Todos os tratamentos contendo óleo essencial de manjericão autoclavado e não autoclavado foram eficientes na inibição do crescimento micelial de B. cinerea. A autoclavagem do extrato alcoólico de própolis proporciona maior eficácia para o controle do patógeno do que a não autoclavagem. Para o álcool de cereais, a autoclavagem interfere na eficiência de controle de B. cinerea.(AU)

Grape is a fruit widely accepted by consumers, besides being produced in large scale in Brazil. However, it is a crop very susceptible to losses in pre-harvest and, among the main diseases responsible for these losses, we can mention the gray rot of the bunch, whose causal agent is the fungus Botrytis cinerea. The search for alternative ways to control this pathogen can minimize the use of agrochemicals, ensuring a safer food. The aim of this study was to evaluate the in vitro antifungal potential of propolis alcoholic extract, cereal alcohol and basil oil (Ocimum basilicum), autoclaved or not, on the mycelial growth of Botrytis cinerea, during the exposure time. The treatments evaluated were: alcoholic extract of propolis and cereal alcohol, both in concentrations 0.0, 2.5, 6.25, 12.5%; and basil oil, at concentrations 0.25, 0.50, 1.00%. In order to obtain the mycelial growth, measurements were carried out in diametrically opposite directions, with a digital caliper, during 0, 24, 48, 72, 96, 120 and 144 hours of exposure, to calculate the rate of inhibition of mycelial growth (IMG, %). The experiment was performed in duplicate, with the treatments arranged in a factorial scheme 4x7 (concentrations x times) and the data were analyzed by means comparison (Tukey's test, p ≤ 0.05), unfolding the interaction, when significant. All treatments containing autoclaved and non-autoclaved basil essential oil were efficient in inhibiting the mycelial growth of B. cinerea. The autoclaving of the propolis alcoholic extract provides greater efficacy for the control of the pathogen than non-autoclaving. For cereal alcohol, autoclaving interferes with the control efficiency of B. cinerea.(AU)

Efects of the sazonality and method of collection on the production of propolis essential oil / Efeito da sazonalidade e método de coleta na produção de óleo essencial de própolis

Studies on essential oils of Brazilian propolis indicated the existence of significant differences in their qualitative composition. These differences may be influenced by the seasons and the production method. This work aims to evaluate the composition of essential oil from propolis produced in different seasons and collection method (shim, smart propolis collector and  plastic screen) on propolis collected by bees Apis mellifera. Fifteen hives of africanized bees Apis mellifera, housed in standard Langstroth hives, were randomly distributed and managed for the exclusively production of propolis. Before the beginning of the experiment, the nests were standardized as to the number of frames and creates. Five bee hives were randomly selected for each method of propolis production in the following treatments: T1- smart propolis collector (SPC); T2- plastic screen and T3- shim. The propolis were collected monthly in each treatment, and were cleaned, mixed and stored until the moment of the analysis of extraction of essential oil. Essential oil extraction was performed by hydrodistillation using Clevenger apparatus in a period of six hours. The oil extracted was split into aliquots and stored at 4-6C, and was subjected to chemical analysis by means of mass spectrometer coupled to a gas chromatograph (GC-MS), SHIMAZU brand, model QP5050A. The identifications of substances were made

O artigo não apresenta resumo em português.

Propolis and essential oils additives in the diets improved animal performance and feed efficiency of bulls finished in feedlot / Propolis e óleos essenciais na dieta melhoraram o desempenho animal e eficiência alimentar de bovinos não castrados terminados em confinamento

This work was realized to evaluate the effect of natural additives as propolis or essential oils addition on animal performance, feed intake, apparent digestibility and carcass characteristics of bulls finished in feedlot. Thirty bulls (½ Aberdeen Angus vs. ½ Nellore) were randomly assigned in one of three diets (control CON, propolis PRO and essential oils OIL) and kept in feedlot (individual pen) during 55 days. CON diet consists of 45% corn silage, 40% concentrate (cracked corn, soybean meal, limestone and mineral salt) and 15% glycerine. The PRO group received same diet that control plus 3 grams to animal day-1 of propolis dry added to the concentrate. The OIL oils group received same diet that control and 3 grams to animal day-1 of essential oils (cashew and castor oils) added to the concentrate. Final weight, average daily gain, feed efficiency and hot carcass weightwere better for bulls supplemented with essential oils and propolis than for bulls fed control diet. The feed intake, apparent digestibility, carcass conformation and tissue composition were unaffected by the additives addition. The addition of propolis and essential oils in the diets of bulls finished in feedlot improve animal performance and carcass weight.(AU)

Este trabalho foi realizado para avaliar o efeito da adição de própolis e óleos essenciais sobre o desempenho animal, ingestão de alimentos, digestibilidade aparente, características de carcaça de bovinos não castrados terminados em confinamento. Trinta bovinos (½ Aberdeen Angus vs. ½ Nelore) foram designados ao acaso para uma das três dietas (Controle CON, Própolis PRO e Óleos essenciais OIL) e mantidos em confinamento (baias individuais) durante 55 dias. A dieta CON era composta de 45% de silagem de milho, 40% de concentrado (milho moído, farelo de soja, calcário e sal mineral) e 15% de glicerina. O grupo PRO recebeu a mesma dieta que o grupo controle mais 3 gramas animal dia-1 propolis seco adicionado ao concentrado. O grupo OIL recebeu a mesma dieta que o controle mais gramas animal dia1 de óleos essenciais (óleos de mamona e caju) adicionados ao concentrado. O peso final, ganho médio diário, eficiência alimentar e peso de carcaça quente foram melhores para os bovinos suplementados com óleos essenciais e própolis do que para os animais da dieta controle. A ingestão de alimentos, digestibilidade aparente, conformação de carcaça e composição de tecidos não foram alterados pela adição de aditivos. A adição de própolis e óleos essenciais na dieta de bovinos melhorou o desempenho animal e peso de carcaça.(AU)

Propolis and essential oils additives in the diets improved animal performance and feed efficiency of bulls finished in feedlot / Propolis e óleos essenciais na dieta melhoraram o desempenho animal e eficiência alimentar de bovinos não castrados terminados em confinamento

This work was realized to evaluate the effect of natural additives as propolis or essential oils addition on animal performance, feed intake, apparent digestibility and carcass characteristics of bulls finished in feedlot. Thirty bulls (½ Aberdeen Angus vs. ½ Nellore) were randomly assigned in one of three diets (control CON, propolis PRO and essential oils OIL) and kept in feedlot (individual pen) during 55 days. CON diet consists of 45% corn silage, 40% concentrate (cracked corn, soybean meal, limestone and mineral salt) and 15% glycerine. The PRO group received same diet that control plus 3 grams to animal day-1 of propolis dry added to the concentrate. The OIL oils group received same diet that control and 3 grams to animal day-1 of essential oils (cashew and castor oils) added to the concentrate. Final weight, average daily gain, feed efficiency and hot carcass weightwere better for bulls supplemented with essential oils and propolis than for bulls fed control diet. The feed intake, apparent digestibility, carcass conformation and tissue composition were unaffected by the additives addition. The addition of propolis and essential oils in the diets of bulls finished in feedlot improve animal performance and carcass weight.

Este trabalho foi realizado para avaliar o efeito da adição de própolis e óleos essenciais sobre o desempenho animal, ingestão de alimentos, digestibilidade aparente, características de carcaça de bovinos não castrados terminados em confinamento. Trinta bovinos (½ Aberdeen Angus vs. ½ Nelore) foram designados ao acaso para uma das três dietas (Controle – CON, Própolis – PRO e Óleos essenciais – OIL) e mantidos em confinamento (baias individuais) durante 55 dias. A dieta CON era composta de 45% de silagem de milho, 40% de concentrado (milho moído, farelo de soja, calcário e sal mineral) e 15% de glicerina. O grupo PRO recebeu a mesma dieta que o grupo controle mais 3 gramas animal dia-1 propolis seco adicionado ao concentrado. O grupo OIL recebeu a mesma dieta que o controle mais gramas animal dia1 de óleos essenciais (óleos de mamona e caju) adicionados ao concentrado. O peso final, ganho médio diário, eficiência alimentar e peso de carcaça quente foram melhores para os bovinos suplementados com óleos essenciais e própolis do que para os animais da dieta controle. A ingestão de alimentos, digestibilidade aparente, conformação de carcaça e composição de tecidos não foram alterados pela adição de aditivos. A adição de própolis e óleos essenciais na dieta de bovinos melhorou o desempenho animal e peso de carcaça.

XXX - REVESTIMENTO Á BASE DE PROTEÍNA DE ARROZ COMO ALTERNATIVA PARA PROLONGAR A VIDA DE PRATELEIRA DE OVOS

A busca por tecnologias inovadoras que possam auxiliar na manutenção da qualidade interna dos ovos durante o armazenamento e também trazer melhoria nas propriedades da casca é de grande interesse por parte da indústria avícola. As vantagens do uso de revestimentos podem ser justificadas pela capacidade de proteger o alimento mecanicamente e ainda diminuir a degradação do produto, aumentando assim seu tempo de prateleira. O uso de diferentes revestimentos à base de proteína concentrada de arroz (PCA) (5, 10 ou 15%) e seus efeitos nas características de qualidade foram avaliadas em ovos convencionais (Experimento 1) e orgânicos (Experimento 2) e armazenados por oito semanas em temperatura ambiente. Posteriormente, a incorporação de extrato de própolis (0, 5 ou 10% Experimento 3) ou 1% de óleos essenciais (copaíba, melaleuca ou tomilho Experimento 4) aos revestimentos também foi avaliada, assim como o efeito de diferentes plastificantes (glicerol, propileno glicol ou sorbitol Experimento 5). Em todos os experimentos foram utilizados ovos íntegros, não férteis e de um dia, distribuídos em delineamentos inteiramente casualizados, com 12 repetições cada. Foram avaliados a perda de peso (%), Unidade Hagh (UH), índice de gema (IG) e pH do albúmen e gema. Os dados foram analisados utilizando o programa estatístico SAS (9.4, SAS Inst. Inc., Cary, NC, Estados Unidos). Os dados foram submetidos à análise de variância utilizando o PROC GLM. Eventuais diferenças entre médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. No experimento 1 foi possível observar que ovos não-revestidos apresentaram a maior perda de peso (8,28%), enquanto a proteína do arroz a 5% (5,60%), 10% (5,45%) e 15% (5,54%) foram eficientes na prevenção da perda de peso (P < 0,001). Os ovos que não receberam nenhum tipo de tratamento apresentaram os piores valores de (P < 0,001) UH (54,45), IG (0,28) e pH do albúmen (9,18). O uso dos revestimentos à base de PCA preservaram a qualidade interna dos ovos por até 4 semanas a mais quando comparado a ovos não revestidos. Resultados semelhantes foram encontrados no experimento 2, onde os mesmos revestimentos foram testando em ovos orgânicos. O uso do revestimento de PCA pode preservar a qualidade interna dos ovos por até 3 semanas a mais do que os ovos não revestidos. Ovos revestidos com proteína de arroz com e sem própolis (experimento 3) apresentaram resultados com qualidade interna similar durante as 6 semanas de armazenamento. Os revestimentos com proteína de arroz e óleos essenciais (experimento 4) foram eficientes na preservação da qualidade interna dos ovos por até 3 semanas a mais que os ovos sem revestimento. Ovos não revestidos apresentaram maior perda de peso (P < 0,001) (5,43%) quando comparado com ovos revestidos com PCA (4,23%) ou PCA enriquecido com melaleuca (4,10%), copaíba (3,90%) ou tomilho (4,08%). O uso do sorbitol como plastificante é mais eficiente na manutenção do controle do aumento do pH do albumen (9,13) quando comparado aos ovos não revestidos (9,52) ou revestidos com glicerol (9,20) ou propileno glicol (9,20) (P < 0,001) (experimento 5). A microscopia eletrônica de varredura demonstrou menor porosidade nas casca de ovos revestidos, indicando que o uso do revestimento pode fornecer uma barreira protetora contra a transferência de gases e umidade. O uso de revestimentos à base de proteína de arroz é uma opção interessante para auxíliar na manutenção da qualidade interna dos ovos armazenados uma vez que os resultados encontrados neste trabalho foram promissores.

The search for innovative technologies that can help in maintaining the internal quality of the eggs during storage and also bring improvement in the properties of the shell is of great interest on the part of the poultry industry. The advantages of using coatings can be justified by the ability to mechanically protect the food and further decrease the degradation of the product, thereby increasing its shelf life. The use of different coatings based on rice protein concentrated (RPC) (5, 10 or 15%) and their effects on quality characteristics were evaluated in conventional and organic eggs and stored for eight weeks at room temperature. Later, the incorporation of propolis extract (0, 5 or 10%) or 1% of essential oils (copaiba, melaleuca or thyme) to the coatings was also evaluated, as well as the effect of different plasticizers (glycerol, propylene glycol or sorbitol) . Inbreeding eggs were used in a completely randomized design with 12 replicates each. The weight loss (%), Hagh Unit (UH), yolk index (GI) and albumin and gem pH were evaluated. Statistical procedures were performed using SAS statistical software (9.4, SAS Inst. Inc., Cary, NC, United States). Data were submitted to analysis of variance using PROC GLM. Possible differences between averages were compared by the Tukey test at 5% probability.In the experiment 1, it was possible to observe that uncoated eggs had the highest weight loss (8.28%), while rice protein 5% (5.60%), 10% (5.45%) and 15% (5.54%) were efficient in preventing weight loss (P <0.001). The eggs that did not receive any treatment presented the worst values (P <0.001) HU (54,45), IG (0,28) and pH of the albumen (9,18). The use of PCA-based coatings preserved the internal quality of the eggs for up to 4 more weeks when compared to uncoated eggs. Similar results were found in Experiment 2, where the same coatings were tested on organic eggs. The use of the RPC coating can preserve the internal quality of the eggs for up to 3 weeks longer than uncoated eggs. Rice protein coated eggs with and without propolis (experiment 3) showed similar internal quality results during 6 weeks of storage. Rice protein coatings and essential oils (experiment 4) were efficient in preserving the internal quality of eggs for up to 3 weeks longer than uncoated eggs. Uncoated eggs presented greater weight loss (5.43%) when compared to eggs coated with RPC (4.23%) or RPC enriched with melaleuca (4.10%), copaiba (3.90%) or thyme (4%) (P <0.001). The use of sorbitol as a plasticizer is more efficient in maintaining control of the increase in albumen pH (9,13) when compared to uncoated eggs (9,52) or coated with glycerol (9,20) or propylene glycol (9, 20) (P <0.001) (experiment 5). Scanning electron microscopy demonstrated lower porosity in the coated eggshell, indicating that the use of the coating may provide a protective barrier against gas transfer and moisture. The use of rice protein coatings is an interesting option to help maintain the internal quality of stored eggs since the results found in this work were promising.

Produção, caracterização e estudo da estabilidade de filmes à base de gelatina e extrato de própolis vermelha enriquecidos com óleos essenciais de manjericão (Ocicum basilicum), cravo (Syzygium aromaticum) ou hortelã (Mentha piperita)

REYES, M. L. M. Produção, caracterização e estudo da estabilidade de filmes à base de gelatina e extrato de própolis vermelha enriquecidos com óleos essenciais de manjericão (Ocicum basilicum), cravo (Syzygium aromaticum) ou hortelã (Mentha piperita). 2017. 159 f. Tese (Doutorado) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. Os óleos essenciais e a própolis vermelha são reconhecidos pela atividade antimicrobiana e capacidade antioxidante, e têm sido utilizados em filmes à base de biopolímeros como agentes ativos. O objetivo geral desta tese foi o desenvolvimento de filmes à base de gelatina contendo extrato etanólico de própolis vermelha (EEP) e óleo essencial de cravo (OE cravo), de manjericão (OE manjericão) ou de hortelã (OE hortelã), e aplicação na conservação de carne bovina moída. O EEP e OE´s foram caracterizados em relação ao conteúdo de fenóis totais, atividade antioxidante (ABTS e DPPH) e atividade antimicrobiana contra bactérias Gram (+) S. aureus, L. monocytogenes e bactérias Gram (-) E. coli e S. enteritidis. Foram elaborados filmes com diferentes concentrações de OE´s (8 tratamentos) seguindo um delineamento experimental simplex com dois componentes, e quatro filmes controles: gelatina; gelatina e EEP, gelatina e OE cravo, gelatina e OE manjericão. Os filmes foram caracterizados em relação a conteúdo de fenóis, capacidade antioxidante, atividade antimicrobiana, umidade e solubilidade, propriedades mecânicas (tração e perfuração), propriedades óticas e barreira à luz, permeabilidade ao vapor de água (PVA). Também foram realizadas análises por espetroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), por difração de raios x (DXR), por calorimetria diferencial de varredura (DSC), e por microscopia eletrônica de varredura (SEM) e microscopia de força atômica (AFM). O filme ativo que apresentou melhor atividade antimicrobiana e capacidade antioxidante e os filmes controles, foram acondicionados a 4 °C e 58%UR por quatros semanas para avaliação da estabilidade antioxidante e antimicrobiana. Amostras de carne bovina moída foram recobertas com o filme ativo e filmes controles, e acondicionadas a 4 ± 2 °C por 10 dias, com avaliações nos dias 0, 3, 7 e 10 de parâmetros cromáticos, índice de peróxidos (IP) e atividade antimicrobiana frente a coliformes totais, aeróbios mesófilos e S. aureus. Observou-se que o EEP apresentou capacidade antioxidante e atividade antimicrobiana, dependentes do tratamento de extração. Foram adicionados no filme de gelatina o EO cravo e OE manjericão por apresentarem atividade antimicrobiana e capacidade antioxidante maior que OE hortelã. A adição de EEP e OE´s na matriz de gelatina proporcionou um aumento no conteúdo de fenóis totais nos filmes. As propriedades mecânicas foram alteradas com a adição dos OE´s e propriedades óticas e barreira a luz UV-Vis pela adição de EEP. A umidade, solubilidade, PVA não foram modificadas drasticamente com a adição dos compostos ativos. Propriedades térmicas, cristalinidade e os resultados das análises espectrofotométricas FTIR apresentaram discretas modificações. O filme ativo e filmes controles diminuíram o crescimento microbiano nas amostras de carne bovina moída comparado com à amostra controle, além de apresentar diminuição no IP ao longo do tempo. Pode-se concluir que a adição de EEP e OE´s melhorou algumas propriedades físicas, além de conferir atividade antimicrobiana e antioxidante aos filmes de gelatina que podem ser aplicados na conservação de alimentos de baixa ou intermediária umidade e susceptíveis à oxidação lipídica.

REYES, M. L. M. Production, characterization and stability study of gelatine-based films and red propolis extract enriched with essential oils of basil (Ocicum basilicum), clove (Syzygium aromaticum) or mint (Mentha piperita). 2017. 159 f. PhD Thesis Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. Essential oils and red propolis are recognized by its antimicrobial activity and antioxidant capacity, and have been used in films based on biopolymers as active agents. The general objective of this thesis was the development of gelatin-based films added with red propolis ethanolic extract (EEP) and essential oil of clove (OE clove), basil (OE basil) and mint (OE mint), and its application for conservation of ground beef. The EEP and OE's were characterized in relation to the total phenol content, antioxidant capacity (ABTS and DPPH) and antimicrobial activity against Gram (+) bacteria S. aureus, L. monocytogenes and Gram (-) bacteria E. coli and S. enteritidis. Films with different concentrations of EO clove and EO basil (8 treatments), following a simplex experimental design with two components, and four control films were prepared: gelatin, gelatin and EEP, gelatin and OE clove, gelatin and OE basil. The films were characterized in relation to phenols content, antioxidant capacity, antimicrobial activity, moisture and solubility, mechanical properties (tensile strength and puncture tests), optical properties and light barrier, water vapor permeability (WVP). Moreover, analyses were performed by fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), by X-ray diffraction (DXR), by differential scanning calorimetry (DSC), and by scanning electron microscopy (SEM) and atomic force microscopy (AFM). The active film that showed better antimicrobial and antioxidant capacity and controls films were stored at 4 °C and 58% RH for four weeks to evaluate antioxidant and antimicrobial stability. Ground beef were coated with active film and controls films and conditioned at 4 ± 2 ° C for 10 days, with evaluations on days 0, 3, 7 and 10 of the color parameters, peroxide value (PV) and antimicrobial activity against total coliforms, aerobic mesophiles and S. aureus. The EEP presented antioxidant capacity and antimicrobial activity, depending on the extraction treatment. OE clove and OE basil were added to the gelatin film because they presented antimicrobial activity and antioxidant capacity higher than OE mint. The addition of EEP and OE's in the gelatin matrix provoked an increase in the content of total phenols in films. The mechanical properties were altered with the addition of OE's and optical properties and UV-Vis light barrier by addition of EEP. The moisture, solubility, PVA did not change strongly with the addition of the active compounds. Thermal properties, crystallinity and FTIR spectrophotometric results presented slight modifications. The active film and control films decreased the microbial growth in ground beef samples compared to the control sample, besides showing decrease in the PV over time. It can be concluded that the addition of EEP and OE's improved some physical properties, besides conferring antimicrobial and antioxidant activity to the gelatin films that can be applied in the preservation of foods of low or intermediate moisture and susceptible to lipid oxidation.

Aditivos alimentares para tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) e seu potencial no combate aos efeitos da infecção por Aeromonas hydrophila

A piscicultura vem se destacando com seu crescimento acelerado. A elevada demanda na atividade, resultou em danos ambientais e baixa produtividade. Em função desse quadro, surge a necessidade de melhorar a resistência às doenças, as taxas de crescimento e um melhor aproveitamento da dieta fornecida, assim trouxe o uso de alternativas aos antimicrobianos em práticas de aquicultura. Com esse princípio, a presente pesquisa objetivou avaliar os efeitos do uso de aditivos naturais, como promotores de crescimento e imunoestimulantes, em tilápias do Nilo (Oreochomis niloticus), por meio de desafios sanitários com Aeromonas hydrophila. Para tanto foram testados o extrato etanólico de própolis (EEP), óleo essencial de orégano (OEO), Saccharomyces cerevisae (probiótico), Ascophyllum nodosum (prebiótico) e um simbiótico (em conjunto o mesmo pre- e probiótico) em rações para as tilápias. A pesquisa foi constituída de cinco experimentos in vivo. Tais experimentos foram realizados no Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal da Univasf, assim como o isolado utilizado foi proveniente da bacterioteca deste laboratório. Foram utilizados alevinos de tilápia do Nilo, alimentados com rações peletizadas, fabricadas exclusivamente para os estudos em questão. As condições ambientais para os animais foram mantidas nos limites adequados para a espécie, exceto para o experimento do probiótico (S. cerevisae), no qual foi usada também como fator de estresse. Após 30 dias de alimentação, foram realizados o desafio com A. hydrophila. Ao final dos experimentos, os alevinos, foram avaliados quanto aos parâmetros zootécnicos, sobrevivência, imunológico e microbiológicos. No experimento com o EEP, verificou-se que, não influenciou nos parâmetros de sobrevivência, desempenho e rendimento de carcaça dos alevinos, porém contribuiu na recuperação das lesões provocadas por A. hydrophila, como também foi observado uma maior diversidade no microbioma intestinal pela PCR-DGGE. Na escolha do óleo essencial, foi realizado um teste in vitro, para avaliar atividade antimicrobiana frente a 100 isolados de A. hydrophila: orégano (Origanum vulgare), alecrim (Rosmarinus officinalis) e pimenta do reino (Piper nigrum). O OEO foi o que apresentou melhor atividade e, ao ser testado in vivo, a dose 0,5 e 1% Kg ração-1, foram associados aos melhores parâmetros de desempenho. O OEO também contribuiu para uma maior diversidade de micro-organismos intestinais. Na experimentação com o probiótico, suas doses foram escolhidas a partir de recomendações fornecidas pelo fabricante, tal aditivo provocou mudanças no microbioma intestinal e, o nível de 6x108 UFC kg-1 S. cerevisiae teve melhor efeito sobre o desempenho, na utilização do alimento mesmo os peixes sob condições de estresse. A A. nodosum, embora seus valores de desempenho e sobrevivência tenham sido superiores ao grupo controle, estes não apresentaram diferença significativas, mas o aditivo contribuiu para uma melhor colonização de leveduras no intestino dos alevinos em comparação ao grupo controle. Quando na união ao probiótico (simbiótico), um efeito sinérgico foi observado. Apresentou melhoria no desempenho, sobrevivência e colonização do microbioma intestinal. Atuando como imunoestimulante e promotor de crescimento. Os alimentos funcionais aqui testados apresentam-se como potencial alimento funcional para a tilápia do Nilo.

Fish farming has been outstanding with its accelerated growth. The high demand in activity resulted in environmental damage and low productivity. Due to this framework, the need arises to improve disease resistance, growth rates and better use of the diet provided, and brought the use of alternatives to antimicrobials in aquaculture practices. With this principle, the present study aimed to evaluate the effects of the use of natural additives such as growth promoters and immune stimulants in Nile tilapia (Oreochomis niloticus) through health challenges with Aeromonas hydrophila. Therefore, we tested the ethanol extract of propolis (EEP), oregano essential oil (OEO), Saccharomyces cerevisiae (probiotic), Ascophyllum nodosum (prebiotic) and a symbiotic (together the same pre- and probiotics) in feeds for tilapia . The research consisted of five experiments "in vivo". Such experiments were carried out in the Laboratory of Microbiology and Immunology Animal UNIVASF, as well as isolate used was from the bacterioteca this laboratory. Fingerlings of Nile tilapia fed pelleted feed, manufactured exclusively for the studies in question. Environmental conditions for the animals were kept in the appropriate limits for the species, except for the probiotic of the experiment (S. cerevisiae), which was also used as a stress factor. After 30 days of feeding were performed the challenge with A. hydrophila. At the end of the experiments, the fingerlings were evaluated for the zootechnical, survival, immunological and microbiological parameters. In the experiment with the EEP, it was found that did not influence the survival parameters, performance and carcass yield of fingerlings, but contributed to the recovery of the lesions caused by A. hydrophila, it was also observed a greater diversity in the intestinal microbiome by PCR-DGGE. In the choice of essential oil, a test was performed "in vitro" to evaluate antimicrobial activity against 100 isolates of A. hydrophila: Oregano (Origanum vulgare), rosemary (Rosmarinus officinalis) and black pepper (Piper nigrum). The OEO showed the best activity and, when tested "in vivo", the dose and 0.5% and 1 kg feed-1, were associated with better performance parameters. The OEO also contributed to a greater diversity of intestinal microorganisms. In experimenting with the probiotic their doses were chosen from recommendations provided by the manufacturer, this amendment caused changes in the intestinal microbiome and the level of 6x108 CFU kg-1 S. cerevisiae had better effect on performance in the same food use fish under stress conditions. A A. nodosum, although their performance and survival values were higher than the control group, they showed no significant difference, but the additive contributed to a better colonization of yeast in the intestines of young fish in the control group. When the union to probiotic (symbiotic), a synergistic effect was observed. Showed improved performance, survival and colonization of the intestinal microbiome. Acting as immunostimulant and growth promoter. The here tested functional foods are presented as a potential functional food for Nile tilapia.

Chemical composition and antibacterial activity of Brazilian propolis essential oil

The present study aimed at investigating the chemical composition of essential oil extracted from Brazilian propolis and the susceptibility of Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermides, Streptococcus pyogenes and Escherichia coli to this substance. The essential oil was obtained by steam distillation of propolis and examined by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). In addition, the agar diffusion method using filter paper disks was employed. Antibacterial activity was measured as equivalent diameters of inhibition zones (in millimeters) after incubation at 37ºC for 24 hours. From the 26 identified constituents, Beta-caryophyllene (12.7 percent), acetophenone (12.3 percent) and Beta-farnesene (9.2 percent) were found to be major components. New components, namely linalool, methyl hydrocinnamate, ethyl hydrocinnamate, alfa-ylangene, gama-elemene and valencene, are reported for the first time to be present in propolis essential oil. This oil also exhibited antibacterial activity.(AU)

Efects of the sazonality and method of collection on the production of propolis essential oil / Efeito da sazonalidade e método de coleta na produção de óleo essencial de própolis

Studies on essential oils of Brazilian propolis indicated the existence of significant differences in their qualitative composition. These differences may be influenced by the seasons and the production method. This work aims to evaluate the composition of essential oil from propolis produced in different seasons and collection method (shim, smart propolis collector and  plastic screen) on propolis collected by bees Apis mellifera. Fifteen hives of africanized bees Apis mellifera, housed in standard Langstroth hives, were randomly distributed and managed for the exclusively production of propolis. Before the beginning of the experiment, the nests were standardized as to the number of frames and creates. Five bee hives were randomly selected for each method of propolis production in the following treatments: T1- smart propolis collector (SPC); T2- plastic screen and T3- shim. The propolis were collected monthly in each treatment, and were cleaned, mixed and stored until the moment of the analysis of extraction of essential oil. Essential oil extraction was performed by hydrodistillation using Clevenger apparatus in a period of six hours. The oil extracted was split into aliquots and stored at 4-6C, and was subjected to chemical analysis by means of mass spectrometer coupled to a gas chromatograph (GC-MS), SHIMAZU brand, model QP5050A. The identifications of substances were made

O artigo não apresenta resumo em português.