Acute intoxication with single oral dose of ochratoxin A (OTA) causes leukopenia, heteropenia, lymphopenia and lymphoid depletion in the bursa of Fabricius in broiler chicks / Intoxicação aguda com dose oral única de ocratoxina A (OTA) causa leucopenia, heteropenia, linfopenia e depleção linfoide na bolsa de Fabricius em pintainhos de corte

Ochratoxin A (OTA) is a mycotoxin produced by species of Penicillium and Aspergillus, agricultural product contaminants. Chronic and sub-chronic OTA intoxication by chickens ingesting contaminated feed, leads to health damages due to its hepatotoxic, nephrotoxic, cytotoxic, immunotoxic, gastrotoxic, and possibly carcinogenic effects. As there are few data on acute intoxication, the present study evaluated the effects of a single acute OTA intoxication dose on immunological and hematological parameters in chicks. Sixteen one-day-old chicks were used, separated into two groups (n=8). A single dose of OTA (1400 µg kg-1 body weight) was administered, via gavage, for the OTA group and one dose of sterile PBS for the control group. On the 13th day, blood samples were collected to assess hematological and biochemical parameters, and on the 14th day, euthanasia and collection of lymphoid organs were performed. The animals of the OTA group demonstrated a significant decrease in total circulating leukocytes (p<0.001) with heteropenia (p<0.001) and lymphopenia (p=0.023), decrease hematocrit (p=0.020), hemoglobin (p=0.032), and plasma IgA (p =0.044), and increased plasma uric acid level (p=0.045), in relation to the control group. In addition, the animals intoxicated with OTA showed depletion of lymphoid cells in the bursa of Fabricius (p=0.016), but not in the thymus or spleen (p>0.05), compared to the control. For the other parameters: total plasma proteins, plasma IgY levels, and anti-Newcastle Disease Virus (NDV) vaccine titers from matrices, there were no significant differences between the analyzed groups (p>0.05), although there was a worsening tendency in contaminated animals. In conclusion, even a single acute OTA intoxication at a high dose, leads to the suppression of the systemic immune response, also affecting some hematological or biochemical parameters in chicks.

Ocratoxina A (OTA) é uma micotoxina produzida por espécies de Penicillium e Aspergillus, contaminantes de produtos agrícolas. Intoxicação crônica e subcrônica por OTA em frangos que ingerem ração contaminada, levam à danos à saúde devido aos seus efeitos hepatotóxicos, nefrotóxicos, citotóxicos, imunotóxicos, gastrotóxicos e possivelmente carcinogênicos. Como há poucos dados sobre intoxicação aguda, o presente estudo avaliou os efeitos de uma dose única de intoxicação aguda por OTA sobre parâmetros imunológicos e hematológicos em pintainhos. Foram utilizados 16 pintainhos de um dia de idade, separados em dois grupos (n=8). Uma dose única de OTA (1400 µg kg-1 de peso corporal) foi administrada, via gavagem, para o grupo OTA e uma dose de PBS estéril para o grupo controle. No 13º dia foram coletadas amostras de sangue para avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos, e no 14º dia foi realizada a eutanásia e coleta de órgãos linfoides. Os animais do grupo OTA demonstraram diminuição significativa do total de leucócitos circulantes (p<0,001) com heteropenia (p<0,001) e linfopenia (p=0,023), diminuição do hematócrito (p=0,020), hemoglobina (p=0,032) e IgA plasmática (p=0,044) e aumento do nível plasmático de ácido úrico (p=0,045), em relação ao grupo controle. Além disso, os animais intoxicados com OTA apresentaram depleção de células linfóides na bolsa de Fabricius (p=0,016), mas não no timo ou baço (p>0,05), em relação ao controle. Para os demais parâmetros: proteínas totais do plasma, níveis plasmáticos de IgY e títulos de vacinas contra o Vírus da Doença de Newcastle (NDV) das matrizes, não houve diferenças significativas entre os grupos analisados (p>0,05), embora tenha havido uma tendência de piora nos animais contaminados. Em conclusão, mesmo uma intoxicação única aguda por OTA em alta dose, leva à supressão da resposta imune sistêmica, afetando também alguns parâmetros hematológicos ou bioquímicos em pintainhos.

Uso de corante alimentício na marcação de ração estéril para camundongos e seu emprego nas análises de controle microbiológico / Use of food coloring in sterile action marking for mice and its use in microbiological control analyzes

A ração peletizada é amplamente utilizada na alimentação camundongos e o seu controle da qualidade é extremamente importante para a saúde dos animais. Todavia, para verificar em quanto tempo a ração perde a qualidade higiênico-sanitária é necessário averiguar inicialmente, o tempo que cada pellet permanece no comedouro, coletando-o no tempo certo para que a análise tempo/qualidade da ração seja realizada corretamente. Desse modo, antes de iniciar quaisquer verificações da qualidade da ração em função do tempo, devemos buscar uma forma de marcar esse alimento de forma inócua. Para definir uma maneira adequada de marcação da ração, foi realizado um experimento, impregnando pellets com corantes alimentícios do tipo anilina líquida, um corante orgânico que pode ser aplicado em qualquer alimento para efeito de tingimento. Após serem marcadas as rações foram colocadas em gaiolas e o experimento realizado em triplicata, com 5 camundongo em cada gaiola. Foi realizado também o teste de inocuidade dos corantes frente a bactérias Gram negativas e Gram positivas, para evidenciar interferência no crescimento bacteriano, o que invalidaria futuros estudos de controle da qualidade das rações. Assim, através da coloração da ração com corante alimentício verificou-se o tempo de exposição das rações nos comedouros das gaiolas de camundongos, palatabilidade e preferência/repulsa dos animais por determinada cor, além da inocuidade desses corantes frente as bactérias. Os resultados obtidos aprovaram a utilização desse corante, em estudos de controle microbiológico da ração em função do tempo de exposição, além da utilização desta metodologia para futuros experimentos, inclusive com outros animais.

Pelletized feed is widely used in mouse feeding and their quality control is extremely important for animal health. However, to check how long the feed loses hygienic-sanitary quality it is necessary to initially check the time each pellet remains in the feeder, collecting it at the right time so that the time / feed quality analysis is performed correctly. Therefore, before beginning any time-quality checks on feed quality, we should look for a way to mark this food harmlessly. To define an appropriate way of marking the feed, an experiment was performed, impregnating pellets with liquid aniline-type food colorings, an organic colorant that can be applied to any food for dyeing purposes. After being marked the rations were placed in cages and the experiment performed in triplicate, with 5 mice in each cage. A harmlessness test against Gram negative and Gram positive bacteria was also performed to show interference in bacterial growth, which would invalidate future studies of feed quality control. Thus, through the coloring of the feed with food dye it was verified the time of exposure of the feed in the feeders of the cages of mice, palatability and preference / repulsion of the animals by certain color, besides the harmlessness of these dyes against the bacteria. The obtained results approved the use of this dye in studies of microbiological control of the feed as a function of the exposure time, besides the use of this methodology for future experiments, including with other animals.

Uso de corante alimentício na marcação de ração estéril para camundongos e seu emprego nas análises de controle microbiológico / Use of food coloring in sterile action marking for mice and its use in microbiological control analyzes

A ração peletizada é amplamente utilizada na alimentação camundongos e o seu controle da qualidade é extremamente importante para a saúde dos animais. Todavia, para verificar em quanto tempo a ração perde a qualidade higiênico-sanitária é necessário averiguar inicialmente, o tempo que cada pellet permanece no comedouro, coletando-o no tempo certo para que a análise tempo/qualidade da ração seja realizada corretamente. Desse modo, antes de iniciar quaisquer verificações da qualidade da ração em função do tempo, devemos buscar uma forma de marcar esse alimento de forma inócua. Para definir uma maneira adequada de marcação da ração, foi realizado um experimento, impregnando pellets com corantes alimentícios do tipo anilina líquida, um corante orgânico que pode ser aplicado em qualquer alimento para efeito de tingimento. Após serem marcadas as rações foram colocadas em gaiolas e o experimento realizado em triplicata, com 5 camundongo em cada gaiola. Foi realizado também o teste de inocuidade dos corantes frente a bactérias Gram negativas e Gram positivas, para evidenciar interferência no crescimento bacteriano, o que invalidaria futuros estudos de controle da qualidade das rações. Assim, através da coloração da ração com corante alimentício verificou-se o tempo de exposição das rações nos comedouros das gaiolas de camundongos, palatabilidade e preferência/repulsa dos animais por determinada cor, além da inocuidade desses corantes frente as bactérias. Os resultados obtidos aprovaram a utilização desse corante, em estudos de controle microbiológico da ração em função do tempo de exposição, além da utilização desta metodologia para futuros experimentos, inclusive com outros animais.(AU)

Pelletized feed is widely used in mouse feeding and their quality control is extremely important for animal health. However, to check how long the feed loses hygienic-sanitary quality it is necessary to initially check the time each pellet remains in the feeder, collecting it at the right time so that the time / feed quality analysis is performed correctly. Therefore, before beginning any time-quality checks on feed quality, we should look for a way to mark this food harmlessly. To define an appropriate way of marking the feed, an experiment was performed, impregnating pellets with liquid aniline-type food colorings, an organic colorant that can be applied to any food for dyeing purposes. After being marked the rations were placed in cages and the experiment performed in triplicate, with 5 mice in each cage. A harmlessness test against Gram negative and Gram positive bacteria was also performed to show interference in bacterial growth, which would invalidate future studies of feed quality control. Thus, through the coloring of the feed with food dye it was verified the time of exposure of the feed in the feeders of the cages of mice, palatability and preference / repulsion of the animals by certain color, besides the harmlessness of these dyes against the bacteria. The obtained results approved the use of this dye in studies of microbiological control of the feed as a function of the exposure time, besides the use of this methodology for future experiments, including with other animals.(AU)

Avaliação da Resposta Inflamatória na Infecção por Brachyspira hyodysenteriae em Leitões Tratados com Nutracêutico

O presente estudo buscou elucidar os mecanismos envolvidos na ação protetiva e terapêutica conferida por nutracêuticos a base de fibras insolúveis sobre o trato gastrointestinal de suínos experimentalmente inoculados com B. hyodysenteriae. Foram utilizadas técnicas de qPCR, isolamento bacteriano, histopatologia, mensuração da concentração de enzimas antioxidantes recuperadas de raspado de mucosa intestinal e recuperação sérica de Fitc Dextran. Para realização do estudo foram utilizados 40 leitões de 21 dias de idade, randomizados e separados em quatro grupos: controle negativo, não inoculados com B. hyodysenteriae e não suplementados com aditivo neutracêutico (CN) (n=10); grupo suplementado com nutracêutico 7 dias antes da inoculação com B. hyodysenteriae (NAI) (n=10); grupo suplementado com nutracêutico após a inoculação com B. hyodysenteriae (NPI) (n=10); e controle positivo, inoculados com B. hyodysenteriae e não suplementados com nutracêutico (CP) (n=10). Os animais foram aclimatados as instalações por 7 dias, recebendo ração e água ad libitum. Quatorze dias após a chegada, os leitões foram inoculados com B. hyodysenteriae, por três dias consecutivos, ou inoculados com caldo BHI estéril (CN). Após 14 dias da primeira inoculação, os animais foram eutanasiados e necropsiados. Os resultados relacionados a sinais clínicos, eliminação de B. hyodysenteriae nas fezes dos suínos, além de manifestações de lesões macroscópicas, microscópicas e permeabilidade intestinal demonstraram que o uso de nutracêuticos a base de fibras insolúveis na alimentação de suínos inoculados experimentalmente com B. hyodysenteriae não foi determinante na prevenção ou tratamento de DS, não contribuindo para manutenção da integridade intestinal ou redução na eliminação do agente. Da mesma forma, as concentrações de enzimas antioxidantes Glutationa-S-transferase e Superóxido Dismutase foram superiores nos grupos CP e CN, sugerindo que o nutracêutico não forneceu proteção adicional contra o estresse oxidativo durante a DS. Entretanto, as concentrações de proteínas teciduais e lipoperoxidação apresentaram valores similares entre o grupo CN e os dois grupos com nutracêuticos, demonstrando redução do estresse oxidativo nesses grupos durante a manifestação de DS.

The aim of this study was to elucidate mechanisms involved in the protective and therapeutic action conferred by nutraceuticals based on insoluble fibers on the gastrointestinal tract of pigs experimentally inoculated with B. hyodysenteriae. The samples were tested by qPCR, bacterial isolation and histopathology, in addition were performed to mensured antioxidant enzymes concentration recovered from intestinal mucosa scraping and FITC Dextran serum recovery, administered orally to the animals. Forty 21-day-old piglets were randomized and separated into four groups: negative control, not inoculated with B. hyodysenteriae and not supplemented with nutraceutical additive (CN) (n = 10); group supplemented with nutraceuticals 7 days before inoculation with B. hyodysenteriae (NAI) (n = 10); group supplemented with nutraceutical after inoculation with B. hyodysenteriae (NPI) (n = 10); and positive control, inoculated with B. hyodysenteriae and not supplemented with nutraceutical (CP) (n = 10). Fourteen days after arrival the animals were inoculated with B. hyodysenteriae during three consecutive days and the negative inoculated group received sterile BHI broth (CN). After 14 days post inoculation, all animals were euthanized and necropsied. The results related to clinical signs, fecal shedding of B. hyodysenteriae, gross lesions, microscopic lesions and intestinal permeability suggested that the use of insoluble fiber nutraceuticals in the feed of pigs experimentally inoculated by B. hyodysenteriae was not decisive in the prevention or treatment of DS, did not contributed to the maintenance of intestinal integrity nor to the reduction of elimination of the agent. The results regarding the concentrations of antioxidant enzymes Glutathione-S-transferase and Superoxido dismutase were higher in the CP and CN groups, suggesting that the nutraceutical did not provide additional protection against oxidative stress during DS. However, the concentrations of tissue proteins and lipoperoxidation were reduced in nutraceutical groups, indicating the positive effect on the oxidative stress during the onset of DS.

Óleos de copaíba (Copaifera officinalis) e coco virgem (Coccus nucifera) como nutracêuticos para tambaquis (Colossoma macropomum)

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos nutracêuticos do oleorresina de copaíba (ORC) (Copaifera officinalis) e o óleo de coco virgem (OCV) (Cocccus nucifera L). Para tanto foram realizados três experimentos: No experimento 1 avaliou-se os efeitos in vitro do oleorresina de copaíba sobre os seguintes patógenos: fungo Saprolegnia parasitica (teste 1); bactérias gram negativas Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., e Klebsiella pneumoniae, as bacterias gram positivas Micrococcus luteus e Streptococcus agalactiae; (teste 2), e protozoário Ichthyophthirius multifiliis (teste 3). Para todos os testes in vitro foi realizado uma emulsão de ORC, para facilitar a diluição em meio de cultura. Para os testes 1 e 3 foram utilizados nove tratamentos: (0; 50,6; 101,2; 202,4; 404,7; 607,1; 809,4 e 1011,8 mg ORC/litro) e Tween 80 na maior concentração utilizada. Para o teste 2 foram utilizados dez tratamentos (0, 50,6; 101,2, 202,36; 404,72; 607,08; 809,44 e 1011,8 mg/L), um controle positivo contendo 3mg/L de enrofloxacina e um contendo Tween 80 na maior concentração utilizada. Nesses experimentos in vitro, os halos de crescimento ou inibição foram medidos, e os experimentos tiveram duração de 96h para fungo, 24 h para bactérias e 4 h para o protozoário. No experimento 2, avaliou-se in vivo, os efeitos da suplementação de ORC e OCV em dietas para juvenis de Colossoma macropomum. Para esses experimentos foi realizado um delineamento em fatorial 4x2 sendo quatro níveis de ORC (0, 500, 2.000, 3.500 mg/kg de ração) e dois níveis de substituição de óleo de soja pelo óleo de coco (0 ou 50%) por 90 dias, onde foram avaliados mensalmente, os parâmetros zootécnicos e ao final do experimento, os parâmetros sanguíneos e histológicos. No experimento 3, avaliou-se a resistência de C. macropomum suplementados com ORC e OCV contra a infecção por A. hydrophila, realizado em delineamento contendo 8 tratamentos: T1= ração sem suplementação; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2.000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3.500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2.000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3.500 ORC, mais um controle injetado com solução de cloreto de sódio estéril, que foram alimentados por 90 dias. Após o período de suplementação, os peixes foram desafiados com Aeromonas hydrophila, na concentração de 1 x 106 UFC.g-1. O uso de ORC reduziu o crescimento micelial de S. parasitica quando em concentrações superiores a 50,6 mg/L, e teve efeito inibitório no crescimento de S. agalactiae, M. luteus e K. pneumoniae, a partir de 202,4 mg/L. Além disso, apresentou eficácia de 80% contra I. multifiliis em concentrações superiores a 101,2 mg ORC/litro. Dietas com diferentes concentrações de óleo, tiveram efeitos nos parâmetros zootécnicos durante 60 dias de suplementação. No entanto, após os 90 dias de suplementação dietária com óleos houve aumento do peso total e da biomassa dos peixes. Dietas contendo 2.000 e 3.500 de mg/kg ORC aumentaram o número de linfócitos e leucócitos totais, enquanto a dieta suplementada com 50% de OCV causou aumento do número de linfócitos. Houve efeito sinergico entre os óleos, com aumento de neutrófilos e monócitos. O aumento das concentrações de ORC resultou em alterações hepáticas que podem estar relacionados a um efeito hepatóxico. O aumento da suplementação conjunta do ORC e OCV tende a reduzir os sinais clínicos da aeromoniose, reduzindo assim, as taxas de mortalidade, apesar disso os efeitos da infecção por A. hydrophila causaram uma alta hemolização do sangue que impossibilitando as análises hematimétricas e leucocitárias. A avaliação histológica corroborou o observado pela taxa de mortalidade, onde em conjunto, os óleos reduziram os efeitos proporcionados pela infecção por A. hydrophila. Em conclusão, o ORC apresenta grande potencial para substituição de quimioterápicos na aquicultura, atuando contra importantes patógenos e sua aplicação na alimentação de C. macropomum promoveu, ao longo prazo, o aumento do desempenho, melhorias hematológicas e resistência a Aeromonas hydrophila quando incluída a 2000mg/kg ração em conjunto com OCV. Apesar disso, mais pesquisas devem ser realizadas para avaliar possíveis efeitos hepatotóxicos de altas concentrações de ORC e seus compostos isolados na alimentação de peixes.

The aim of the present study was to evaluate the nutraceutical effects of copaiba oleoresin (ORC) (Copaifera officinalis) and virgin coconut oil (OCV) (Cocccus nucifera L). For that, three experiments were carried out: In experiment 1, the in vitro effects of copaiba oleoresin on the following pathogens were evaluated: the fungus Saprolegnia parasitica (test 1); gram negative bacteria Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., and Klebsiella pneumoniae, the gram positive bacteria Micrococcus luteus and Streptococcus agalactiae; (test 2), and protozoan Ichthyophthirius multifiliis (test 3). For all in vitro tests, an ORC emulsion was performed to facilitate dilution in culture medium. For tests 1 and 3, nine treatments were used: (0; 50.6; 101.2; 202.4; 404.7; 607.1; 809.4 and 1011.8 mg ORC/liter) and Tween 80 in the highest concentration used. For test 2, ten treatments were used (0, 50.6; 101.2, 202.36; 404.72; 607.08; 809.44 and 1011.8 mg/L), a positive control containing 3mg/L of enrofloxacin and one containing Tween 80 at the highest concentration used. In these in vitro experiments, the growth or inhibition halos were measured, and the experiments lasted 96 h for fungus, 24 h for bacteria and 4 h for the protozoan. In experiment 2, the in vivo effects of ORC and OCV supplementation in diets for Colossoma macropomum juveniles were evaluated. For these experiments, a 4x2 factorial design was carried out, with four levels of ORC (0, 500, 2,000, 3,500 mg/kg of feed) and two levels of replacement of soybean oil by coconut oil (0 or 50%) for 90 days, where the zootechnical parameters were monthly evaluated and, at the end of the experiment, the blood and histological parameters. In experiment 3, the resistance of C. macropomum supplemented with ORC and OCV against A. hydrophila infection was evaluated, carried out in a design containing 8 treatments: T1= feed without supplementation; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3,500 ORC, plus a control injected with sterile sodium chloride solution, which were fed for 90 days. After the supplementation period, the fish were challenged with Aeromonas hydrophila, at a concentration of 1 x 106 CFU.g-1. The use of ORC reduced the mycelial growth of S. parasitica when at concentrations above 50.6 mg/L, and had an inhibitory effect on the growth of S. agalactiae, M. luteus and K. pneumoniae, from 202.4 mg /L. In addition, it showed 80% efficacy against I. multifiliis at concentrations above 101.2 mg ORC/liter. Diets with different oil concentrations had effects on zootechnical parameters during 60 days of supplementation. However, after 90 days of dietary supplementation with oils, there was an increase in the total weight and biomass of the fish. Diets containing 2000 and 3500 mg/kg ORC increased the number of lymphocytes and total leukocytes, while the diet supplemented with 50% OCV caused an increase in the number of lymphocytes. There was a synergistic effect between the oils, with an increase in neutrophils and monocytes. The increase in ORC concentrations resulted in hepatic changes that may be related to a hepatoxic effect. The increase in the joint supplementation of ORC and OCV tends to reduce the clinical signs of aeromoniosis, thus reducing the mortality rates, although the effects of the infection by A. hydrophila caused a high hemolysis of the blood that made it impossible to analyze hematimetric and leukocytes. The histological evaluation corroborated what was observed by the mortality rate, where together, the oils reduced the effects provided by the infection by A. hydrophila. In conclusion, ORC has great potential for replacing chemotherapeutic agents in aquaculture, acting against important pathogens and its application in C. macropomum feeding promoted, in the long term, increased performance, hematological improvements and resistance to Aeromonas hydrophila when included at 2000mg /kg feed together with OCV. Despite this, more research should be carried out to evaluate possible hepatotoxic effects of high concentrations of ORC and its isolated compounds in fish feed.

Efeito do uso isolado e do mix de bactérias probióticas suplementadas na dieta de juvenis de tambaqui Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) e tilápia do Nilo Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758)

A intensificação da piscicultura continental nacional exige o aprimoramento e desenvolvimento de estratégias produtivas sustentáveis para a produção de suas espécies, e o tambaqui e a tilápia se destacam no mercado nacional e do continente Latino Americano. Como medidas de incrementar o desempenho produtivo, sanitário e ambiental, o uso de probióticos possibilita a melhora na digestão dos animais, otimização das atividades enzimática, inibe o crescimento de agentes patogênicos e promove o equilíbrio da microflora intestinal, porém a maioria dos esforços se limita ao uso de monocepas para finalidades benéficas, sendo escassas as análises e os efeitos benéficos de uma combinação de probióticos em animais aquáticos. Desta forma, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar os efeitos do uso de uma formulação probiótica multicepas (mix) durante a recria de juvenis de Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus, sobre os parâmetros de desempenho zootécnico e sanitário. Para isso, foram utilizados 400 alevinos de tambaqui (1,13±0,01g 4,17±0,99cm) e 240 de tilápias (6,71±0,93g e 61,88±1,44mm) que foram alimentados durante 120 e 90 dias, respectivamente, com as dietas contendo a inclusão de: Enterococcus faecium (1) 2x106 UFC.g-1 na ração; Enterococcus faecium (2) 1x108 UFC.g-1 na ração; Bacillus cereus 2.8x106 UFC.g -1 na ração e uma formulação multicepas 1x108 UFC.g -1 na ração, além da dieta base. A formulação multicepas foi resultado da melhor resposta in vitro da interação entre as bactérias utilizadas de forma a não haver antagonismos. Durante o período de suplementação, o desempenho produtivo dos animais foi acompanhado a cada 30 dias, a partir de biometrias periódicas até o termino do experimento, e posteriormente foram realizadas as análises dos parâmetros microbiológicos, índice hepatossomático, esplenossomático, viscerossomático e hematológicos. Após a suplementação dietética, 90 tambaquis e 54 tilápias, foram infectados por injeção intraperitoneal de Aeromonas hydrophila e Streptococcus agalactiae na concentração de 1,8x108 UFC.g-1 de peixe e 1,7x107 UFC.g-1 de peixe, respectivamente, além de dois grupos controle, um positivo que representou animais do grupo isento de probiótico injetados com o patógeno e o negativo que foi injetado com solução estéril de NaCl (0,65%). As respostas inflamatórias com A. hydrophila e S. agalactiae foram monitoradas durante 96 h para registro dos sinais clínicos das doenças para intensidade infecciosa e mortalidade acumulada. Durante e ao término do período experimental, foram avaliados os parâmetros hematológicos para a contagem de células vermelhas, células totais, células leucocitárias, trombócitos e bioquímica sanguínea dos animais moribundos e sobreviventes. Para o tambaqui, o uso das dietas que continham os probióticos promoveu melhora no desempenho produtivo a partir dos 90 dias experimentais (p<0,05), e se mantiveram até o final de 120 dias para os parâmetros de comprimento total (15,30±0,29mm), comprimento padrão (12,20±0,45cm), peso (62,21±1,41g) e ganho de peso (27,54±0,70g). Resultado semelhante de desempenho foi observado nas tilápias, onde o uso de probióticos melhorou (p<0,05) o desempenho dos animais, com os espécimes do tratamento contendo B. cereus apresentaram o maior ganho de peso e ganho de comprimento, seguido do tratamento multicepas, com as maiores taxas de sobrevivência. Para as análises microbiológicas, tanto para o tambaqui como para a tilápia, o uso de multicepas probióticas (mix) na ração, apresentou isenção de bactérias potencialmente patogênicas no intestino dos animais ao final de 120 e 90 dias de produção, respectivamente. Em ambos os experimentos, o uso de probióticos na disponibilidade de cepa única ou mix, determinaram melhorias hematológicas. Para o tambaqui os tratamentos que continham B. cereus e mix determinaram melhoria no sistema imune com aumento nas contagens de trombócitos, linfócitos e neutrófilos. Para as tilápias alimentadas com as dietas contendo o mix probiótico, maiores valores para hematócrito (33,5±7,6 x106.µL-1), hemoglobina (13,8±1,3 g.dL-1) e proteína total (5,3±0,4 g.dL-1) foram observados. As dietas contendo os probióticos na ração influenciaram de forma positiva a resistência dos animais contra os patógenos A. hydrophila e S. agalactiae. Na infecção dos tambaquis com A. hydrophila, os tratamentos com B. cereus e mix na dieta obtiveram os menores registros de mortalidade (26 e 20%, respectivamente) e maiores concentrações (p<0,05) de leucócitos e trombócitos. Para as tilápias com S. agalactiae, as unidades que continham E. faecium (1), B. cereus e mix obtiveram as maiores taxas de sobrevivência após o período agudo infeccioso. Dessa forma, com os resultados alcançados com a pesquisa, o uso de probióticos na administração em cepa única e multicepas mix, melhoraram os parâmetros produtivos durante 120 e 90 dias, na produção de tambaquis e tilápias, respectivamente, e sanitários contra as infecções agudas e patogênicas. Ressalta-se, que as respostas de desempenho e profiláticas nos tratamentos que continham a inclusão de multicepas mix, foram capazes de promover efeitos promissores aos animais confinados, devido a um efeito sinérgico entre as bactérias utilizadas, mesmo em concentrações menores que às recomendadas de cada cepa para uso na aquicultura. Além disso, a formulação multicepas promoveu uma modulação na microbiota intestinal com ausência de cepas potencialmente patogênicas nos animais suplementados.

The intensification of national continental fish farming requires the improvement and development of sustainable production strategies for the production of their species, and tambaqui and tilapia stand out in the national market and in the Latin American continent. As measures to increase productive, sanitary and environmental performance, the use of probiotics makes it possible to improve the digestion of animals, optimize enzymatic activities, inhibit the growth of pathogens and promote the balance of the intestinal microflora, but most efforts are limited. to the use of single strains for beneficial purposes, and there are few analyzes and beneficial effects of a combination of probiotics in aquatic animals. Thus, the present research aimed to evaluate the effects of the use of a multi-strain probiotic formulation (mix) during the rearing of Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus juveniles, on the parameters of zootechnical and sanitary performance. For this, 400 tambaqui fingerlings (1.13±0.01g 4.17±0.99cm) and 240 tilapia (6.71±0.93g and 61.88±1.44mm) were fed during 120 and 90 days, respectively, with diets containing: Enterococcus faecium (1) 2x106 CFU.g-1 in the diet; Enterococcus faecium (2) 1x108 CFU.g-1 in the diet; Bacillus cereus 2.8x106 CFU.g -1 in the ration and a multistrain formulation 1x108 CFU.g -1 in the ration, in addition to the base diet. The multistrain formulation was the result of the best in vitro response to the interaction between the bacteria used so that there were no antagonisms. During the period of supplementation, the productive performance of the animals was monitored every 30 days, from periodic biometrics until the end of the experiment, and later analyzes of the microbiological parameters, hepatosomatic, splenosomatic, viscerosomatic and hematological indexes were carried out. After dietary supplementation, 90 tambaquis and 54 tilapia were infected by intraperitoneal injection of Aeromonas hydrophila and Streptococcus agalactiae at a concentration of 1.8x108 CFU.g-1 of fish and 1.7x107 CFU.g-1 of fish, respectively, in addition to of two control groups, one positive that represented animals from the probiotic-free group injected with the pathogen and the negative that was injected with sterile NaCl solution (0.65%). Inflammatory responses with A. hydrophila and S. agalactiae were monitored for 96 h to record clinical signs of disease for infectious intensity and cumulative mortality. During and at the end of the experimental period, hematological parameters were evaluated for counting red cells, total cells, leukocyte cells, thrombocytes and blood biochemistry of the dying and surviving animals. For tambaqui, the use of diets containing probiotics promoted an improvement in productive performance from the 90 experimental days (p<0.05), and remained until the end of 120 days for the parameters of total length (15.30 ±0.29mm), standard length (12.20±0.45cm), weight (62.21±1.41g) and weight gain (27.54±0.70g). A similar result of performance was observed in tilapia, where the use of probiotics improved (p<0.05) the performance of the animals, with the specimens of the treatment containing B. cereus showed the highest weight gain and length gain, followed by the treatment multiceps, with the highest survival rates. For the microbiological analysis, both for tambaqui and for tilapia, the use of probiotic multi-strains (mix) in the ration showed an exemption of potentially pathogenic bacteria in the animals' intestines at the end of 120 and 90 days of production, respectively. In both experiments, the use of probiotics in the availability of single strain or mix, determined hematological improvements. For tambaqui, treatments containing B. cereus and mix determined improvement in the immune system with increased counts of thrombocytes, lymphocytes and neutrophils. For tilapia fed diets containing the probiotic mix, higher values for hematocrit (33.5±7.6 x106.µL-1), hemoglobin (13.8±1.3 g.dL-1) and total protein ( 5.3±0.4 g.dL-1) were observed. Diets containing probiotics in the ration positively influenced the resistance of animals against the pathogens A. hydrophila and S. agalactiae. In the infection of tambaqui with A. hydrophila, the treatments with B. cereus and mix in the diet had the lowest mortality records (26 and 20%, respectively) and the highest concentrations (p<0.05) of leukocytes and thrombocytes. For tilapia with S. agalactiae, the units containing E. faecium (1), B. cereus and mix had the highest survival rates after the acute infectious period. In this way, with the results achieved with the research, the use of probiotics in the administration in single strain and multi-strain mix, improved the productive parameters during 120 and 90 days, in the production of tambaquis and tilapia, respectively, and sanitary against acute and pathogen house It is noteworthy that the performance and prophylactic responses in treatments that contained the inclusion of multi-strain mix were able to promote promising effects to confined animals, due to a synergistic effect between the bacteria used, even at concentrations lower than those recommended for each strain for use in aquaculture. In addition, the multi-strain formulation promoted a modulation in the intestinal microbiota with the absence of potentially pathogenic strains in the supplemented animals.

Probiotics: viable and inactivated cells on the performance, microflora and blood parameters of piglets

The objective of the current work was to evaluate the use of oral probiotics comprised of viable and inactivated Lactobacillus spp. (referred to herein as "pool" of Lactobacillus spp.) on the performance, intestinal microbiota and blood parameters of piglets from birth to 35 days of age. Lactation piglets (n=108), with an average initial weight of 1.41kg, and nursery piglets (n=72), with an average initial weight of 5.47kg, were included in the study and distributed in a randomized complete block design. The treatments were as follows: Control: 1mL MRS broth + 1mL sterile saline; Active: 1 mL probiotics ("pool" of Lactobacillus spp. and Lactobacillus plantarum) activated in MRS broth + 1 ml saline; Inactive: 1 mL inactivated probiotics containing MRS broth + 1mL saline. Treatments were not observed to affect total and daily weight gain of piglets during lactation. Differences were observed between treatments for feed intake, daily feed intake as well as total and daily weight gain from 21 to 35 days of age. Counts of lactic acid bacteria and coliforms were not affected by treatment or age. With the exception of globulin, blood parameters are also not affected. In the nursery phase the probiotic treatment with inactivated cells means a viable alternative for use primarily by the performance obtained for weight gain; however probiotics supplementation did not influence the microbiological counts and blood parameters.

Objetivou-se com este trabalho avaliar o uso oral de probióticosLactobacillus spp viáveis e inativadas ("pool" deLactobacillus spp.), sobre o desempenho, a microbiota intestinal, e parâmetros sanguíneos de leitões do nascimento aos 35 dias de idade. Foram utilizados na fase de aleitamento 108 leitões com peso médio inicial de 1,41kg e, na creche, 72 leitões com peso médio inicial de 5,47kg, distribuídos em um delineamento experimental de blocos ao acaso. Os tratamentos foram: Controle: 1 mL de caldo MRS + 1 mL de solução salina estéril; Ativo: 1 mL de probiótico ("pool" de Lactobacillus spp. e Lactobacillus plantarum) ativados no caldo MRS + 1 mL de solução salina; Inativo: 1mL de probiótico contendo células inativadas no caldo MRS + 1 mL de solução salina. Os tratamentos não influenciaram o ganho de peso total e diário dos leitões no aleitamento. Dos 21 aos 35 dias de idade, observou-se diferença entre os tratamentos para consumo de ração, consumo de ração diário, ganho de peso total e diário. As contagens de bactérias ácido-láticas e coliformes não foram influenciadas pelos tratamentos e idades. Com exceção da globulina, os demais parâmetros sanguíneos analisados não são influenciados. Na fase de creche o tratamento probiótico com células inativadas significa uma alternativa viável para uso principalmente pelo desempenho obtido para ganho de peso; no entanto os tratamentos probióticos não influenciam as contagens microbiológicas e os parâmetros sanguíneos.

Probiotics: viable and inactivated cells on the performance, microflora and blood parameters of piglets

The objective of the current work was to evaluate the use of oral probiotics comprised of viable and inactivated Lactobacillus spp. (referred to herein as "pool" of Lactobacillus spp.) on the performance, intestinal microbiota and blood parameters of piglets from birth to 35 days of age. Lactation piglets (n=108), with an average initial weight of 1.41kg, and nursery piglets (n=72), with an average initial weight of 5.47kg, were included in the study and distributed in a randomized complete block design. The treatments were as follows: Control: 1mL MRS broth + 1mL sterile saline; Active: 1 mL probiotics ("pool" of Lactobacillus spp. and Lactobacillus plantarum) activated in MRS broth + 1 ml saline; Inactive: 1 mL inactivated probiotics containing MRS broth + 1mL saline. Treatments were not observed to affect total and daily weight gain of piglets during lactation. Differences were observed between treatments for feed intake, daily feed intake as well as total and daily weight gain from 21 to 35 days of age. Counts of lactic acid bacteria and coliforms were not affected by treatment or age. With the exception of globulin, blood parameters are also not affected. In the nursery phase the probiotic treatment with inactivated cells means a viable alternative for use primarily by the performance obtained for weight gain; however probiotics supplementation did not influence the microbiological counts and blood parameters.

Objetivou-se com este trabalho avaliar o uso oral de probióticosLactobacillus spp viáveis e inativadas ("pool" deLactobacillus spp.), sobre o desempenho, a microbiota intestinal, e parâmetros sanguíneos de leitões do nascimento aos 35 dias de idade. Foram utilizados na fase de aleitamento 108 leitões com peso médio inicial de 1,41kg e, na creche, 72 leitões com peso médio inicial de 5,47kg, distribuídos em um delineamento experimental de blocos ao acaso. Os tratamentos foram: Controle: 1 mL de caldo MRS + 1 mL de solução salina estéril; Ativo: 1 mL de probiótico ("pool" de Lactobacillus spp. e Lactobacillus plantarum) ativados no caldo MRS + 1 mL de solução salina; Inativo: 1mL de probiótico contendo células inativadas no caldo MRS + 1 mL de solução salina. Os tratamentos não influenciaram o ganho de peso total e diário dos leitões no aleitamento. Dos 21 aos 35 dias de idade, observou-se diferença entre os tratamentos para consumo de ração, consumo de ração diário, ganho de peso total e diário. As contagens de bactérias ácido-láticas e coliformes não foram influenciadas pelos tratamentos e idades. Com exceção da globulina, os demais parâmetros sanguíneos analisados não são influenciados. Na fase de creche o tratamento probiótico com células inativadas significa uma alternativa viável para uso principalmente pelo desempenho obtido para ganho de peso; no entanto os tratamentos probióticos não influenciam as contagens microbiológicas e os parâmetros sanguíneos.

Probióticos: células viáveis e inativadas no desempenho, microbiota e parâmetros sanguíneos em leitões / Probiotics: viable and inactivated cells on the performance, microflora and blood parameters of piglets

Objetivou-se com este trabalho avaliar o uso oral de probióticos Lactobacillus spp viáveis e inativadas (pool de Lactobacillus spp.), sobre o desempenho, a microbiota intestinal, e parâmetros sanguíneos de leitões do nascimento aos 35 dias de idade. Foram utilizados na fase de aleitamento 108 leitões com peso médio inicial de 1,41kg e, na creche, 72 leitões com peso médio inicial de 5,47kg, distribuídos em um delineamento experimental de blocos ao acaso. Os tratamentos foram: Controle: 1 mL de caldo MRS + 1 mL de solução salina estéril; Ativo: 1 mL de probiótico (pool de Lactobacillus spp. e Lactobacillus plantarum) ativados no caldo MRS + 1 mL de solução salina; Inativo: 1mL de probiótico contendo células inativadas no caldo MRS + 1 mL de solução salina. Os tratamentos não influenciaram o ganho de peso total e diário dos leitões no aleitamento. Dos 21 aos 35 dias de idade, observou-se diferença entre os tratamentos para consumo de ração, consumo de ração diário, ganho de peso total e diário. As contagens de bactérias ácido-láticas e coliformes não foram influenciadas pelos tratamentos e idades. Com exceção da globulina, os demais parâmetros sanguíneos analisados não são influenciados.(AU)

The objective of the current work was to evaluate the use of oral probiotics comprised of viable and inactivated Lactobacillus spp. (referred to herein as pool of Lactobacillus spp.) on the performance, intestinal microbiota and blood parameters of piglets from birth to 35 days of age. Lactation piglets (n=108), with an average initial weight of 1.41kg, and nursery piglets (n=72), with an average initial weight of 5.47kg, were included in the study and distributed in a randomized complete block design. The treatments were as follows: Control: 1mL MRS broth + 1mL sterile saline; Active: 1 mL probiotics ("pool" of Lactobacillus spp. and Lactobacillus plantarum) activated in MRS broth + 1 ml saline; Inactive: 1 mL inactivated probiotics containing MRS broth + 1mL saline. Treatments were not observed to affect total and daily weight gain of piglets during lactation. Differences were observed between treatments for feed intake, daily feed intake as well as total and daily weight gain from 21 to 35 days of age. Counts of lactic acid bacteria and coliforms were not affected by treatment or age. With the exception of globulin, blood parameters are also not affected.(AU)

Probióticos: células viáveis e inativadas no desempenho, microbiota e parâmetros sanguíneos em leitões / Probiotics: viable and inactivated cells on the performance, microflora and blood parameters of piglets

Objetivou-se com este trabalho avaliar o uso oral de probióticos Lactobacillus spp viáveis e inativadas (pool de Lactobacillus spp.), sobre o desempenho, a microbiota intestinal, e parâmetros sanguíneos de leitões do nascimento aos 35 dias de idade. Foram utilizados na fase de aleitamento 108 leitões com peso médio inicial de 1,41kg e, na creche, 72 leitões com peso médio inicial de 5,47kg, distribuídos em um delineamento experimental de blocos ao acaso. Os tratamentos foram: Controle: 1 mL de caldo MRS + 1 mL de solução salina estéril; Ativo: 1 mL de probiótico (pool de Lactobacillus spp. e Lactobacillus plantarum) ativados no caldo MRS + 1 mL de solução salina; Inativo: 1mL de probiótico contendo células inativadas no caldo MRS + 1 mL de solução salina. Os tratamentos não influenciaram o ganho de peso total e diário dos leitões no aleitamento. Dos 21 aos 35 dias de idade, observou-se diferença entre os tratamentos para consumo de ração, consumo de ração diário, ganho de peso total e diário. As contagens de bactérias ácido-láticas e coliformes não foram influenciadas pelos tratamentos e idades. Com exceção da globulina, os demais parâmetros sanguíneos analisados não são influenciados.

The objective of the current work was to evaluate the use of oral probiotics comprised of viable and inactivated Lactobacillus spp. (referred to herein as pool of Lactobacillus spp.) on the performance, intestinal microbiota and blood parameters of piglets from birth to 35 days of age. Lactation piglets (n=108), with an average initial weight of 1.41kg, and nursery piglets (n=72), with an average initial weight of 5.47kg, were included in the study and distributed in a randomized complete block design. The treatments were as follows: Control: 1mL MRS broth + 1mL sterile saline; Active: 1 mL probiotics ("pool" of Lactobacillus spp. and Lactobacillus plantarum) activated in MRS broth + 1 ml saline; Inactive: 1 mL inactivated probiotics containing MRS broth + 1mL saline. Treatments were not observed to affect total and daily weight gain of piglets during lactation. Differences were observed between treatments for feed intake, daily feed intake as well as total and daily weight gain from 21 to 35 days of age. Counts of lactic acid bacteria and coliforms were not affected by treatment or age. With the exception of globulin, blood parameters are also not affected.

Ascophyllum nodosum in the diet of tilapia (Oreochromis niloticus) and its effect after inoculation of Aeromonas hydrophila / Ascophyllum nodosum na dieta de tilapia (Oreochromis niloticus)e o efeito dela depois da inoculação com Aeromonas hydrophila

The objective of this study was to evaluate the effect of Ascophyllum nodosum brown seaweed meal (FAM) on the health of Nile tilapia submitted to inoculation with Aeromonas hydrophila. The experiment was conducted for a period of 40 days using 120 Nile tilapia fingerlings, with age of 40 days, distributed in 20 tanks. A diet including Ascophyllum nodosum seaweed meal at 20g.kg-1 and a control diet (without FAM) were provided which constituted the treatments. Thirty days after beginning the experiment, A. hydrophila was inoculated by bacterial inoculum diluted in sterile saline solution at a concentration of 10(6) CFU ml-1. Except for the width, which was greater for the treatment with the provision of FAM (P<0.05), there was no influence on the performance parameters of the fingerlings, but the occurrence of lesions in animals inoculated with A. hydrophila and fed with FAM was lower and they also exhibited a decline in the lesions in a shorter period of time than the control group. FAM prevents hepatopancreatic congestion in infected animals. Ascophyllum nodosum brown seaweed meal reduced the number of lesions in fish in a shorter time when compared to the control group.(AU)

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da farinha de alga marinha marrom Ascophyllum nodosum (FAM) em alevinois de tilápias do Nilo sob desafio sanitário com inoculação de Aeromonas hydrophila. O experimento foi realizado durante um período de 40 dias com a utilização de 120 alevinos de tilápia do Nilo, distribuídos em 20 aquários. Foi fornecida uma ração com inclusão da farinha da alga marinha Ascophyllum nodosum a 20g.kg ração-1 e uma ração testemunha (sem FAM), que constituiram os tratamentos. Após 30 dias experimentais foi realizada a inoculação de Aeromonas hydrophila por meio de um preparado de inóculo bacteriano com diluição em solução salina estéril a concentração de 106 UFC/ml. Exceto para a largura, que foi maior para o tratamento com o fornecimento da FAM (P<0,05), não houve influência sobre parâmetros de desempenho dos alevinos, mas a ocorrência de lesões nos animais inoculados com A. hydrophila e alimentados com FAM foi menor e, eles também exibiram um declínio das lesões em um menor período de tempo em relação ao grupo controle. FAM impediu a congestão hepatopancreática em animais infectados. A farinha de alga marinha marrom Ascophyllum nodosum reduziu o número de lesões nos peixes em menor tempo quando comparado ao controle.(AU)

Viabilidade in vitro do parasito intestinal Neoechinorhynchus buttnerae (Acantocephala) de Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) e seu controle com óleos essenciais

Este estudo teve como objetivo validar um protocolo para cultivo de Neoechinorhyncus buttnerae (Acanthocephala), parasito de Colossoma macropomum e avaliar a eficácia in vitro e in vivo dos óleos essenciais de Mentha piperita, Lippia alba e Zengiber officinale no seu controle. Para o cultivo in vitro, os parasitos foram obtidos a partir de peixes naturalmente parasitados, e distribuídos em placas de cultura de 6 poços distribuídos nos seguintes tratamentos em triplicata: NaCl a 0,9%; água do tanque estéril; L-15 Leibovitz meio de cultura; L-15 Leibovitz + ágar 2% meio de cultura; Meio de cultura RPMI 1640; RPMI 1640 + agar 2% de meio de cultura. As placas contendo os parasitas foram mantidas a 24°, 28° e 32°C. Os resultados do cultivo in vitro, mostraram que o meio de cultura que apresentou a melhor sobrevivência nas três temperaturas foi o meio RPMI e a temperatura considerada ideal foi a de 24°, pois os parasitos obtiveram um periodo mais longo de vida sem apresentar alterações morfológicas. Para o ensaio in vitro tambaquis naturalmente parasitados foram necropsiados para retirada dos acantocéfalos. Os parasitos foram expostos a cinco diferentes concentrações (360, 540, 720, 1440, 2880 mg L-1 ) dos óleos essenciais de Mentha, Lippia e Zingiber, diluídas em Tween 80 a 3% 1g:10 mL). Observou-se atividade anti-helmíntica nas maiores concentrações, sendo que o óleo essencial de Mentha apresentou a melhor atividade contra N. buttnerae, pois em menor concentração (540 mg L-1 ) foi capaz de inibir 100% em apenas 120 minutos, poucos minutos a mais que as concentrações mais fortes. Os óleos essenciais de Lippia e Zingiber apresentaram 100% de atividade anti-helmíntica nas concentrações de 1440 e 2880 mg L-1 . Para os ensaios in vivo foram utilizados 210 juvenis de tambaqui, os quais foram alimentados por 30 dias com as dietas experimentais: controle (três réplicas), óleo essencial de Mentha 0,54 g kg-1 (três réplicas), Mentha 2,88g kg-1 (três réplicas); óleo essencial de Lippia 1,44 g kg-1 (três réplicas), Lippia 2,88 g kg-1 (três réplicas) e óleo essencial de Zingiber 1,44 g kg-1 (três réplicas), Zingiber 2,88 g kg-1 (três réplicas). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, constituído por sete tratamentos em 21 unidades experimentais (10 peixes por tanque). A prevalência dos parasitos em peixes tratados com óleos essenciais de Mentha 0,54 g kg-1; Mentha 2,88 g kg-1 e Lippia 2,88 g kg-1 foi 84%, 84% e 88,46% respectivamente. O cálculo da eficácia resultou em 85,46% e 70,03% nos animais que tiveram a dieta suplementada com Mentha nas concentrações de 0,54 e 2,88 g kg-1 respectivamente, 67,10% e 56,93% em Lippia 1,44 e 2,88 g kg-1 respectivamente e 11,70% e 5,19% em Zingiber 1,44 e 2,88 g kg-1 respectivamente. Os números totais de eritrócitos (RBC) e trombócitos foram 9 maiores em peixes tratados com Mentha 0,54 g kg-1 e Zingiber 1,44 g kg-1. A concentração de glicose foi significativamente maior nos peixes que não tiveram suplementação do óleo essencial. Devido a alta eficácia e ao resultado positivo sobre os parâmetros hematológicos analisados e ao ganho de peso, recomenda-se o uso do óleo essencial de Mentha 0,54 g kg-1 administrados na ração para o controle de acantocéfalos.

This study aimed to validate a protocol for the cultivation of Neoechinorhyncus buttnerae (Acanthocephala), a parasite of Colossoma macropomum and to evaluate the in vitro and in vivo efficacy of the essential oils of Mentha piperita, Lippia alba and Zengiber officinale in its control. For in vitro culture, the parasites were obtained from naturally parasitized fish, and distributed in 6-well culture plates distributed in the following treatments in triplicate: 0.9% NaCl; sterile tank water; L-15 Leibovitz culture medium; L-15 Leibovitz + agar 2% culture medium; RPMI 1640 culture medium; RPMI 1640 + agar 2% culture medium. Plaques containing the parasites were maintained at 24 °, 28 ° and 32 ° C. The in vitro culture results showed that the culture medium that showed the best survival at the three temperatures was the RPMI medium and the temperature considered ideal was 24 °, as the parasites obtained a longer period of life without presenting morphological changes. For the in vitro assay naturally parasitized tambaquis were necropsied for removal of the acantocephalan. The parasites were exposed to five different concentrations (360, 540, 720, 1440, 2880 mg L-1 ) of Mentha, Lippia and Zingiber essential oils, diluted in 3% Tween 80 1g: 10ml). It was observed anthelmintic activity at the highest concentrations, and Mentha essential oil showed the best activity against N. buttnerae, because at a lower concentration (540 mg L-1 ) it was able to inhibit 100% in only 120 minutes, few minutes longer than the strongest concentrations. The essential oils of Lippia and Zingiber presented 100% of anthelmintic activity in the concentrations of 1440 and 2880 mg L-1 . For the in vivo tests, 210 tambaqui juveniles were used, which were fed for 30 days with the experimental diets: control (three replicates), Mentha essential oil 0.54 g kg-1 (three replicates), Mentha 2.88 g kg-1 (three replicates); Lippia essential oil 1.44 g kg-1 (three replicates), Lippia 2.88 g kg-1 (three replicates) and Zingiber essential oil 1.44 g kg-1 (three replicates), Zingiber 2.88 g kg-1 (three replicates). The experimental design was completely randomized, consisting of seven treatments in 21 experimental units (10 fish per tank). The prevalence of parasites in fish treated with essential oils of Mentha 0.54 g kg-1; Mentha 2.88 g kg-1 and Lippia 2.88 g kg-1 was 84%, 84% and 88.46% respectively. Efficacy was calculated as 85.46% and 70.03% in the animals fed the Mentha supplemented diet at concentrations of 0.54 and 2.88 g kg -1, respectively, 67.10% and 56.93%, respectively. Lippia 1.44 and 2.88 g kg-1 respectively and 11.70% and 5.19% in Zingiber 1.44 and 2.88 g kg-1 respectively. Total numbers of erythrocytes (RBC) and thrombocytes were higher in fish treated with Mentha 0.54 g kg-1 and Zingiber 1.44 g kg -1. Glucose concentration was significantly higher in fish 11 that did not have essential oil supplementation. Due to the high efficacy and the positive result on the haematological parameters analyzed and the weight gain, it is recommended the use of the essential oil of Mentha 0.54 g kg-1 administered in the diet for the control of acantocephalan.

Acute inflammatory response in Nile tilapia fed probioticLactobacillus plantarum in the diet / Resposta inflamatória aguda em tilápia do Nilo alimentada com probiótico, Lactobacillus plantarum na dieta

The present study evaluated the acute inflammatory response induced bycarrageenin (500 μg) injected in the swim bladder of Nile tilapia, after fed or not probioticsupplemented diet. Fifty four fish were distributed in six treatments and three replicates: GroupA: Fish fed unsupplemented diet: 0.5 mL saline-injected fish; fish injected with 500 μgcarrageenin diluted in 0.5 mL saline; Non-injected. Group B: Fish fed probiotic supplementeddiet: saline-injected fish; carrageenin-injected fish; Non-injected. Fifteen days after feeding thefish were injected with carrageenin or saline. After six hours, inflammatory exudate wascollected, as well as the blood for hematocrit, red blood cell (RBC) and white blood cell (WBC)counts, differential count of leucocytes and phagocytic activity in the blood. Supplementationwith probiotic did not influence the RBC, hematocrit and the numbers of lymphocytes andbasophils in the blood. The number of neutrophils was significantly higher in supplemented fishinjected with carrageenin. Glucose concentration in supplemented and non-injected fish washigher than that observed in the saline injected ones. Probiotic potentialized the migration ofcells to the inflammatory focus in the animals injected with the carrageenin irritant. In fishinjected with saline and carrageenin occurred the greatest phagocytic activity in the blood inrelation to those treatments. (AU)

Este trabalho avaliou a resposta inflamatóriaaguda induzida por injeção de carragenina (500 g) na bexiga natatória de tilápia do Nilosuplementada ou não com probiótico na ração. Cinquenta e quatro animais foram distribuídosem seis tratamentos com três repetições: Grupo A: peixes alimentados com ração nãosuplementada:Controle (injeção de 0,5 mL de solução salina estéril); Carragenina (injeção de500 μg de carragenina); Não-injetada. Grupo B: peixes alimentados com ração suplementadacom probiótico: Controle; Carragenina; Não-injetada. Após 15 dias de alimentação foi injetadocarragenina ou salina. Após 6h, realizou-se a coleta de exsudato e sangue para determinação dohematócrito, contagens totais de eritrócitos, leucócitos, contagem diferencial de leucócitos eatividade fagocitária no sangue. A suplementação com probiótico na ração não influenciou onúmero total de eritrócitos, o hematócrito e os números de linfócitos e basófilos no sangue dosanimais. O número de neutrófilos foi maior nos peixes suplementados com probiótico einjetados com carragenina. A glicose nos peixes suplementados com probiótico não-injetados foimaior do que nos injetados com salina. A suplementação com probiótico potencializou amigração de células para o foco inflamatório nos injetados com o flogógeno carragenina. Empeixes injetados com salina e carragenina, ocorreu maior atividade fagocitária no sangue em relação aos demais tratamentos.(AU)

The effect of iron supplementation in the diet of Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) armadillos in captivity

Armadillos of the species Dasypus novemcinctus have been used as an experimental model of leprosy. Besides non-human primates, they are the only species naturally infected with Mycobacterium leprae and when experimentally inoculated, reproduce the lepromatous form of the disease producing large quantities of bacilli. This species has been maintained in captivity by numerous researchers and specific housing and feeding requirements have been developed to guarantee their survival during long experimental periods. In the "Lauro de Souza Lima" Institute, armadillos receive dog food, ground beef, boiled eggs and vitamin C. However, despite the balanced diet, anemia has been observed in some captive animals, especially in armadillos inoculated with M. leprae in advanced stages of infection. Thus, the objective of the present study was to evaluate the effect of iron sulfate supplementation in the feed provided for armadillos, both inoculated and non-inoculated with M. leprae, by means of the evaluation of their hematological profile. Fourteen armadillos received 10 mg/animal of iron sulfate (Hematofer®) diluted in sterile water mixed with their daily feed for 50 days. Hemograms and serum iron dosages for each armadillo were performed before and after supplementation. The hematocrit values increased significantly after iron supplementation, both in armadillos inoculated and non-inoculated with M. leprae. It is possible that the amount of iron in the feed is insufficient for the formation of hemoglobin, leading to microcytic anemia. Dietary supplementation with iron sulfate reversed this state, showing the importance of understanding the metabolism of exotic species for their maintenance in captivity, and thus ensuring their well-being.

O tatu da espécie Dasypus novemcinctus tem sido utilizado como modelo experimental para a hanseníase. Eles são a única espécie, além de primatas não humanos, que se apresentam naturalmente infectados pelo Mycobacterium leprae. Estes tatus, quando experimentalmente inoculados, reproduzem a forma virchoviana da hanseníase produzindo grandes quantidades de bacilos. Esta espécie tem sido mantida em cativeiro por vários pesquisadores, no entanto, alguns cuidados são necessários para garantir a sobrevivência destes por longos períodos experimentais, tais como alojamento e alimentação. No Instituto Lauro de Souza Lima, os animais em cativeiro recebem ração canina, carne bovina, ovos cozidos e vitamina C, mesmo assim, tem-se observado o desenvolvimento de quadros de anemia nestes animais, principalmente nos inoculados com o M. leprae, em estados avançados da infecção. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com sulfato ferroso na alimentação fornecida aos tatus, inoculados e não inoculados com M. leprae, por meio de avaliação de seu perfil hematológico. Foram utilizados 14 animais que receberam 10 mg/animal de sulfato ferroso (Hematofer®) diluídos em água estéril e misturados diariamente à ração por 50 dias. Foram feitos hemograma e dosagem de ferro sérico de cada animal antes e após a suplementação. Os valores de hematócrito aumentaram significativamente após a suplementação, tanto nos animais inoculados como nos não inoculados com M. leprae. É possível que a quantidade de ferro na alimentação seja insuficiente para a formação da hemoglobina, levando a um quadro de anemia microcítica. A suplementação da dieta com sulfato ferroso reverteu este quadro, mostrando a importância de se conhecer o metabolismo de espécies exóticas para manutenção destas em cativeiro, assegurando seu bem estar.

The effect of iron supplementation in the diet of Dasypus novemcinctus (Linnaeus, 1758) armadillos in captivity

Armadillos of the species Dasypus novemcinctus have been used as an experimental model of leprosy. Besides non-human primates, they are the only species naturally infected with Mycobacterium leprae and when experimentally inoculated, reproduce the lepromatous form of the disease producing large quantities of bacilli. This species has been maintained in captivity by numerous researchers and specific housing and feeding requirements have been developed to guarantee their survival during long experimental periods. In the "Lauro de Souza Lima" Institute, armadillos receive dog food, ground beef, boiled eggs and vitamin C. However, despite the balanced diet, anemia has been observed in some captive animals, especially in armadillos inoculated with M. leprae in advanced stages of infection. Thus, the objective of the present study was to evaluate the effect of iron sulfate supplementation in the feed provided for armadillos, both inoculated and non-inoculated with M. leprae, by means of the evaluation of their hematological profile. Fourteen armadillos received 10 mg/animal of iron sulfate (Hematofer®) diluted in sterile water mixed with their daily feed for 50 days. Hemograms and serum iron dosages for each armadillo were performed before and after supplementation. The hematocrit values increased significantly after iron supplementation, both in armadillos inoculated and non-inoculated with M. leprae. It is possible that the amount of iron in the feed is insufficient for the formation of hemoglobin, leading to microcytic anemia. Dietary supplementation with iron sulfate reversed this state, showing the importance of understanding the metabolism of exotic species for their maintenance in captivity, and thus ensuring their well-being.

O tatu da espécie Dasypus novemcinctus tem sido utilizado como modelo experimental para a hanseníase. Eles são a única espécie, além de primatas não humanos, que se apresentam naturalmente infectados pelo Mycobacterium leprae. Estes tatus, quando experimentalmente inoculados, reproduzem a forma virchoviana da hanseníase produzindo grandes quantidades de bacilos. Esta espécie tem sido mantida em cativeiro por vários pesquisadores, no entanto, alguns cuidados são necessários para garantir a sobrevivência destes por longos períodos experimentais, tais como alojamento e alimentação. No Instituto Lauro de Souza Lima, os animais em cativeiro recebem ração canina, carne bovina, ovos cozidos e vitamina C, mesmo assim, tem-se observado o desenvolvimento de quadros de anemia nestes animais, principalmente nos inoculados com o M. leprae, em estados avançados da infecção. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com sulfato ferroso na alimentação fornecida aos tatus, inoculados e não inoculados com M. leprae, por meio de avaliação de seu perfil hematológico. Foram utilizados 14 animais que receberam 10 mg/animal de sulfato ferroso (Hematofer®) diluídos em água estéril e misturados diariamente à ração por 50 dias. Foram feitos hemograma e dosagem de ferro sérico de cada animal antes e após a suplementação. Os valores de hematócrito aumentaram significativamente após a suplementação, tanto nos animais inoculados como nos não inoculados com M. leprae. É possível que a quantidade de ferro na alimentação seja insuficiente para a formação da hemoglobina, levando a um quadro de anemia microcítica. A suplementação da dieta com sulfato ferroso reverteu este quadro, mostrando a importância de se conhecer o metabolismo de espécies exóticas para manutenção destas em cativeiro, assegurando seu bem estar.

Ração suplementada com vitaminas C e E influencia a resposta inflamatória aguda em tilápia do Nilo / Vitamin C and E supplemented diet influences the acute inflammatory response in Nile tilapia

Este estudo avaliou o hemograma e a resposta inflamatória aguda em tilápia do Nilo alimentada com 500mg de vitamina C e 500mg de vitamina E/kg de ração. Após 30 dias de alimentação com a dieta suplementada com as vitaminas, 500µg de carragenina, 3mg de lipopolissacarídeo (LPS)/kg de peixe e 0,5ml de solução salina estéril (controle) foram injetados na bexiga natatória dos animais. Seis horas após, os peixes foram anestesiados para coleta de amostras sangüíneas e análise da resposta inflamatória. Peixes injetados com carragenina e LPS apresentaram as maiores contagens totais de leucócitos no sangue, sendo que a suplementação vitamínica na ração provocou redução no número total de trombócitos nos injetados com carragenina. A taxa de glicose, o número de eritrócitos, o hematócrito e o cortisol não sofreram influência da suplementação vitamínica na ração. A suplementação vitamínica provocou redução no número de neutrófilos no sangue dos animais injetados com LPS. Nos peixes injetados com carragenina e LPS alimentados com vitaminas, houve maior migração de células para o sítio inflamado. O LPS provocou maior migração de células em comparação com os demais tratamentos, principalmente por macrófagos. A suplementação vitamínica provocou aumento no número de trombócitos no exsudato em peixes injetados com carragenina e LPS.(AU)

This study evaluated the haematology and acute inflammatory response in Nile tilapia fed with 500mg vitamin C and 500 mg vitamin E/kg dry ration. Thirty days after feeding with supplemented diet, 500µg carrageenin, 3mg lipopolysacharide (LPS)/kg body weight and 0.5ml sterile saline solution (control) were injected in the swim bladder. Six hours after the fish were anesthetized to collect blood and analysis of the inflammatory response. Fish injected with carrageenin and LPS showed the highest counts of total leucocytes in blood and, the vitamin supplementation provoked reduction in the number of total thrombocytes in the carrageenin injected fish. Glucose, erythrocyte number, hematocrit and cortisol were not influenced by the vitamin supplmentation. The addition of vitamins in the diet caused reduction in the number of neutrophils in LPS injected fish. Once more, fish injected with carrageenin and LPS fed vitamins showed higher migration of leucocytes to the inflamed site. LPS provoked the highest migration of inflammatory cells, mainly by macrophages when compared to the other treatments. Vitamin supplementation increased the number of thrombocytes in the inflammatory exsudate in carrageenin and LPS injected fish.(AU)

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxinogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 101 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparando-se os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados produziram aflatoxina B1, todos os isolados de A. ochraceus produziram ocratoxina A e nenhum isolado de A. niger foi detectado como produtor de ocratoxina através do método de screening utilizado. A avaliação fúngica realizada com o emprego de 3 meios de cultura tornou claro que a detecção de fungos é dependente do meio de cultura utilizado. A Aw do alimento e do meio também devem ser consideradas para que as análises microbiológicas possam detectar ou valorar a micobiota que, efetivamente, está contaminando o alimento