Gender-based incidence, recovery period, and mortality rate of COVID-19 among the population of district Attock, Pakistan / Incidência baseada em gênero, período de recuperação e taxa de mortalidade de COVID-19 entre a população do distrito de Attock, Paquistão

Abstract COVID-19 is reported as an extremely contagious disease with common symptoms of fever, dry cough, sore throat, and tiredness. The published literature on incidence and gender-wise prevalence of COVID-19 is scarce in Pakistan. Therefore, the present study was designed to compare the distribution, incubation period and mortality rate of COVID-19 among the male and female population of district Attock. The data were collected between 01 April 2020 and 07 December 2020 from the population of district Attock, Pakistan. A total of 22,962 individuals were screened and 843 were found positive for RT-qPCR for SARS-CoV-2. The confirmed positive cases were monitored carefully. Among the positive cases, the incidence of COVID-19 was 61.7% among males and 38.2% among females. The average recovery period of males was 18.89±7.75 days and females were 19±8.40 days from SARS-CoV-2. The overall mortality rate was 8.06%. The death rate of male patients was significantly higher (P<0.05) compared to female patients. Also, the mortality rate was higher (P<0.05) in male patients of 40-60 years of age compared to female patients of the same age group. Moreover, the mortality rate significantly increased (P<0.05) with the increase of age irrespective of gender. In conclusion, the incidence and mortality rate of COVID-19 is higher in males compared to the female population. Moreover, irrespective of gender the mortality rate was significantly lower among patients aged <40 years.

Resumo Covid-19 é relatada como uma doença extremamente contagiosa com sintomas comuns de febre, tosse seca, dor de garganta e cansaço. A literatura publicada sobre incidência e prevalência de Covid-19 com base no gênero é escassa no Paquistão. Portanto, o presente estudo teve como objetivo comparar a distribuição, o período de incubação e a taxa de mortalidade de Covid-19 entre a população masculina e feminina do distrito de Attock. Os dados foram coletados entre 1 de abril de 2020 e 7 de dezembro de 2020 da população do distrito de Attock, Paquistão. Um total de 22.962 indivíduos foi selecionado, e 843 foram considerados positivos para RT-qPCR para SARS-CoV-2. Os casos positivos confirmados foram monitorados cuidadosamente. Entre os casos positivos, a incidência de Covid-19 foi de 61,7% no sexo masculino e 38,2% no feminino. O período médio de recuperação dos homens foi de 18,89 ± 7,75 dias e das mulheres 19 ± 8,40 dias do SARS-CoV-2. A mortalidade geral foi de 8,06%. A taxa de mortalidade de pacientes do sexo masculino foi significativamente maior (P < 0,05) em comparação com pacientes do sexo feminino. Além disso, a taxa de mortalidade foi maior (P < 0,05) em pacientes do sexo masculino com 40-60 anos de idade em comparação com pacientes do sexo feminino da mesma faixa etária. Além disso, a taxa de mortalidade aumentou significativamente (P < 0,05) com o aumento da idade, independentemente do sexo. Em conclusão, a incidência e a taxa de mortalidade de Covid-19 são maiores no sexo masculino em comparação com a população feminina. E também, independentemente do sexo, a taxa de mortalidade foi significativamente menor entre os pacientes com idade < 40 anos.

Distinct carbapenems susceptibility profiles in isogenic isolates of Klebsiella pneumoniae presenting Ompk36 disruption and expression of down-regulated blaKPC-2 / Perfis distintos de suscetibilidade a carbapenêmicos em isolados isogênicos de Klebsiella pneumoniae apresentando interrupção de Ompk36 e expressão de blaKPC-2 negativamente regulada

The isolation of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae in hospitals is a major public health threat, increasing patient hospitalization costs, morbidity and mortality. Therefore, this work investigated the resistance mechanisms that produced different carbapenems susceptibility profiles in two isogenic strains of K. pneumoniae isolated from the same patient in a public hospital in Recife, Pernambuco. The genes that encode the main porins in K. pneumoniae, ompK35 and ompK36, and several beta-lactamase genes were analyzed. The expression of these genes was evaluated by quantitative real time PCR (polymerase chain reaction) with reverse transcriptase (RT-qPCR). SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate­polyacrylamide gel electrophoresis) was performed to analyze the outer membrane proteins. The analysis of the ompK36 genetic environment disclosed an IS903 insertion sequence disrupting this gene in the ertapenem resistant isolate (KPN133). The blaKPC-2 gene showed down-regulated expression in both isolates. Our findings show that changes in porins, especially OmpK36, are more determinant to carbapenems susceptibility profile of bacterial isolates than variations in blaKPC gene expression.

O isolamento de Klebsiella pneumoniae multirresistente em hospitais é uma grande ameaça à saúde pública, aumentando os custos de internação, morbidade e mortalidade dos pacientes. Portanto, este trabalho investigou os mecanismos de resistência que produziram diferentes perfis de suscetibilidade aos carbapenêmicos em duas cepas isogênicas de K. pneumoniae isoladas do mesmo paciente em um hospital público em Recife, Pernambuco. Foram analisados ​​os genes que codificam as principais porinas em K. pneumoniae, ompK35 e ompK36, e diversos genes de beta-lactamases. A expressão desses genes foi avaliada por PCR (reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real) com transcriptase reversa (RT-qPCR). SDS-PAGE (dodecil sulfato de sódio-poliacrilamida gel eletroforese) foi realizada para analisar as proteínas da membrana externa. A análise do ambiente genético ompK36 revelou uma sequência de inserção IS903 interrompendo este gene no isolado resistente ao ertapenem (KPN133). O gene blaKPC-2 apresentou expressão negativamente regulada em ambos os isolados. Nossos achados mostram que alterações nas porinas, especialmente OmpK36, são mais determinantes no perfil de suscetibilidade aos carbapenêmicos de isolados bacterianos do que variações na expressão do gene blaKPC.

Early maturation of corpus luteum in rabbits - effect of sildenafil citrate on luteolytic capacity in the early luteal period

Background: Prostaglandin F2 alpha (PGF2 α) binds to the specific receptor (PTGFR) on the corpus luteum (CL) in mammals, inducing regression of the CL structure (luteolysis) and initiating a new cycle. While PGF2 α is effective only on mature CL, the immature CL structure (early luteal phase) resists PGF2 α. In this study, sildenafil citrate, which is used to increase blood flow in the genital organs for treating specific pregnancy issues in women, was administered during the early luteal phase in a rabbit model to test the hypothesis of enhancing blood flow to the CL, thereby promoting earlier maturation and enabling a response to PGF2 α. Materials, Methods & Results: The study was conducted in 2 sub-studies: clinical and molecular. A large number of rabbits were initially included in the sub-studies to ensure a sufficient number of pseudo-pregnant rabbits. Ovulation in rabbits was induced with buserelin acetate and was considered as day 0 of the study. The sub-studies were continued with rabbits whose pseudo-pregnancies were confirmed according to progesterone (P4 ) results. As a result, the studies were continued with a total of 41 pseudo-pregnant New Zealand female rabbits, 21 of which were included in the clinical sub-study and 20 in the molecular sub-study. In both sub-studies, on day 3 of the luteal period, rabbits in the treatment group received 5 mg/kg sildenafil citrate and all rabbits received a single dose of exogenous PGF2 α on day 4 to induce luteolysis. In the clinical sub-study, echotexture and intraovarian blood flow changes in the ovaries were determined by ultrasonography (USG) examination. In the molecular sub-study, the expression changes of Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1A) and Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) related to angiogenesis, Steroidogenic Acute Regulatory Protein (StAR) related to P4 metabolism, Prostaglandin-Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2) related to prostaglandin (PG) mechanism and 15-Hydroxyprostaglandin Dehydrogenase (HPGD) genes at mRNA level were determined using Real Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) in CL tissues obtained with ovariohysterectomy (OVH) at 1 and 12 h after PGF2 α injection. In addition, blood samples were collected for determine P4 levels from all rabbits. In the clinical sub-study; there was no difference between the groups in mean gray values (MGV), whereas there was a significant decrease in both pulsatile index (PI) and resistance index (RI) values at 40 min after PGF2 α injection (P < 0.05). In the molecular sub-study, it was determined that sildenafil citrate had no significant effect (P > 0.05) on the expression levels 1 and 12 h after PGF2 α injection. According to the results of the molecular sub-study, no significant effect of sildenafil citrate on the mRNA expression levels in the investigated genes was detected (P > 0.05). However, within each group, differences were found according to OVH time after PGF2 α injection. It was observed that PTGS2 and HPGD mRNA expressions decreased at the 12th h compared to the 1st h, while HIF1A expression increased (P < 0.05). Discussion: According to the results obtained from clinical and molecular sub-studies, it was determined that a single dose of sildenafil citrate (5 mg/kg) applied on the 3rd day of the luteal period did not contribute to the maturation process of the CL, did not increase blood flow, and was insufficient to break the resistance of the CL against PGF2 α applied on the 4th day of the luteal period. However, a significant decrease in the PI value at the 40th min after PGF2 α injection suggests that sildenafil citrate has a supportive effect, and that this decrease is also seen in the RI value, suggesting that its effect is insufficient against the vasoconstrictive effect of PGF2 α.

Reference gene stability in the Longissimus thoracis et lumborum muscle of Colombian Creole sheep / Estabilidade de genes de referência no músculo Longissimus thoracis et lumborum de ovelhas crioulas colombianas

The Colombian Creole sheep breed has a high economic and social importance for Colombia. Both males and females of this breed are multipurpose animals, and evaluating the production and meat quality of both sexes is important for small farmers in Colombia. This requires the use of tools that help to evaluate critical production points, such as Real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR), which is a widely used molecular tool for the relative quantification of candidate genes in various tissues. For its correct use, the use of housekeeping genes with stable expression, so-called "reference genes", is required. However, recent studies have shown that the expression of these reference genes can vary among tissues and can be modulated by breed, sex, or external stimuli. Likewise, there is little information regarding the expression of these genes in the Longissimus thoracis et lumborum muscle of male and female Colombian Creole sheep. In this study, the stability in the expression of seven reference genes (ACTB, YWHAZ, SDHA, GAPDH, TUBB2A, B2M, and PGK1) in the Longissimus thoracis et lumborum muscle of male and female Colombian Creole sheep was compared since they are used in RT-qPCR studies to determine the most stable ones for this breed. Twelve animals, six males and six females, with a body weight of 26 ± 4 kg and 12 ± 3 months of age, were used under grazing conditions. Biopsies of the Longissimus thoracis et lumborum muscle were taken, from which RNA was extracted and cDNA was synthesized. Expression was determined using RT-qPCR, and its stability was analyzed by computational algorithms using the geNorm, Normfinder, and BestKeeper software packages, which were integrated using the RefFinder software package. The results indicate that GAPDH, ACTB, and SDHA have the highest stability, whereas the most variable expression was found for B2M. These data provide the basis for more precise results in RT-qPCR studies of gene expression in the muscle of Colombian Creole sheep.(AU)

A raça de ovinos Crioula Colombiana tem grande importância econômica e social para a Colômbia. Avaliar a produção e a qualidade da carne de machos e fêmeas é importante para pequenos produtores do país e, assim, faz necessário o uso ferramentas que ajudam a avaliar os pontos críticos de produção, como a reação em cadeia da polimerase em tempo real (Real-time quantitative polymerase chain reaction [RT-qPCR]). Esta é uma ferramenta molecular amplamente usada para a quantificação relativa de genes candidatos em vários tecidos. Para o seu uso correto, é necessário o uso de genes com expressão estável denominados genes de referência. No entanto, estudos recentes têm mostrado que a expressão desses genes de referência pode variar entre os tecidos e pode ser modulada por raça, sexo ou estímulos externos. Da mesma forma, existem poucas informações sobre a expressão desses genes no músculo Longissimus thoracis et lumborum de ovinos machos e fêmeas da raça Crioula Colombiana. Neste estudo foi comparada a estabilidade na expressão de sete genes de referência (ACTB, YWHAZ, SDHA, GAPDH, TUBB2A, B2M e PGK1) no músculo Longissimus thoracis et lumborum de ovinos Crioulo Colombiano machos e fêmeas, por serem genes utilizados em estudos de RT-qPCR visando determinar os mais estáveis para esta raça. Doze animais com peso corporal de 26 ± 4 kg e 12 ± 3 meses de idade foram utilizados em condições de pastejo. Foram realizadas biópsias do músculo Longissimus thoracis et lumborum, de onde o RNA foi extraído e o cDNA foi sintetizado. A expressão foi determinada usando RT-qPCR e sua estabilidade foi analisada por algoritmos computacionais usando geNorm, Normfinder e BestKeeper pacote de software, os quais foram integrados usando RefFinder pacote de software. Os resultados indicam que GAPDH, ACTB e SDHA apresentam maior estabilidade, enquanto a expressão mais variável foi para B2M. Esses dados fornecem a base para resultados mais precisos em estudos de RT-qPCR de expressão gênica em músculos defeminino ovinos da raça Crioula Colombiana.(AU)

Efficacy of disinfectants to inactivate H1N1 influenza A virus isolated from pigs / Eficácia de desinfetantes para inativar o vírus da influenza A H1N1 isolado de suínos

The aim of this study was to access the efficacy of four disinfectants to inactivate influenza A [H1N1] 0 hour and 72 hours after disinfectant dilution. A pandemic H1N1 influenza virus isolated from a pig with respiratory disease was used to obtain inoculums containing 6.4log10 EID50/mL; 5.4log10 EID50/mL; 4.4log10 EID50/mL and 3.4log10 EID50/mL. Suspension test was composed of 400µL of viral inoculum, 100µL of organic load and 500µL of each individually diluted disinfectant and incubated for ten minutes of contact time. After a neutralizing step, each mixture was filtered on a 0.22µm membrane and 0.2mL was inoculated in six 9-day-old embryo chicken egg through allantoic route. The allantoic fluid from eggs was harvest for RT-PCR and hemagglutination test. The experiment was repeated 72 hours after disinfectant dilution. On the first assessment with fresh disinfectant, influenza virus was inactivated by oxidizing compost disinfectant and phenolic disinfectant in all virus concentrations, the quaternary ammonium compound (QAC) and glutaraldehyde association inactivated the virus up to a concentration of 5.4log10 EID50/mL. QAC disinfectant did not eliminate virus viability. Seventy-two hours after disinfectants were diluted, oxidizing compost disinfectant and QAC and glutaraldehyde association disinfectant demonstrated the same result as the evaluation with fresh disinfectant solution. Phenolic disinfectant inactivated viral inoculum up to a concentration of 5.4log10 EID50/mL. QAC had no effect on inactivating 3.4log10 EID50/ mL of influenza virus. In conclusion, three of the four disinfectants tested were effective to inactivate pandemic H1N1 influenza virus in the presence of organic load. Test result performed 72hours after disinfectant dilution suggest a decrease in the effectiveness of one disinfectant.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia de quatro desinfetantes em inativar o vírus da influenza A [H1N1] 0-hora e 72-horas após a diluição dos produtos. Um vírus H1N1 pandêmico isolado previamente de um suíno com doença respiratória foi utilizado e foram obtidas quatro concentrações de inóculo contendo 6,4log10 EID50/mL; 5,4log10 EID50/mL; 4,4log10 EID50/mL and 3,4log10 EID50/mL. Para compor o teste em suspensão foram adicionados 400µL de inóculo viral, 100µL de matéria orgânica e 500µL de cada desinfetante diluído individualmente e a mesma foi incubada por 10 minutos. Após a etapa neutralizante, a suspensão foi filtrada em membrana 0,22µm e 0,2mL foi inoculado em seis ovos de galinha embrionados de nove dias de incubação, via rota alantóide. O fluido alantóide foi colhido após 72 horas para testes de hemaglutinação e RTPCR. O mesmo protocolo experimental foi repetido usando as soluções desinfetantes 72 horas após a diluição. O vírus da influenza foi inativado pelo composto oxidante e também pelo desinfetante fenólico em todas as concentrações virais testadas 0-hora após diluição. O desinfetante com associação de amônia quaternária e glutaraldeído inativou o vírus na concentração de até 5,4log10 EID50/mL. O desinfetante à base de amônia quaternária não inativou o vírus. Os resultados 72-horas após a diluição não diferiram quando comparado com 0-hora, exceto o desinfetante fenólico, o qual inativou o vírus da influenza somente até a concentração 5,4log10 EID50/ mL. Concluindo, três dos quatro desinfetantes testados foram efetivos ao inativar o vírus da influenza [H1N1] pandêmico na presença de matéria orgânica. Os resultados do teste com produtos diluídos após 72 horas sugerem redução da efetividade em, pelo menos, um desinfetante.

Diarreia Epidêmica Suína (PED), enfermidade exótica no Brasil mas emergente nas Américas / Porcine Epidemic Diarrhea (PED), exotic disease in Brazil but emerging in the Americas / Diarrea Epidemica Suina (PED), enfermedad exotica en Brasil, pero emergente el las Américas

Surtos recentes da Diarreia Epidêmica Suína (PED, em inglês) têm sido descritos em diversos países, sobretudo na China e Estados Unidos, e tem provocado significativo impacto econômico à suinocultura mundial. Como a doença se disseminou também pela América do Sul, afetando Peru, Colômbia e Equador, o conhecimento sobre a enfermidade é de extrema relevância para manutenção do status livre da doença no Brasil. A PED é causada por vírus da família Coronaviridae, caracterizando-se por diarreia líquida profusa e vômitos, de intensidade variável, sendo mais graves em leitões neonatos. A RT-PCR tem sido a técnica de diagnóstico mais empregada, mas a sorologia e a imuno-histoquímica também podem ser utilizadas. A vacina comercial disponível nos Estados Unidos é considerada de alto custo e efetividade intermediária e, por isso, protocolos rígidos de biossegurança são fundamentais para dificultar a entrada do agente no rebanho. Estudos recentes têm se intensificado no sentido de elucidar a epidemiologia da doença, uma vez que a via de disseminação viral entre rebanhos ainda não se encontra totalmente estabelecida e o impacto econômico causado pela alta mortalidade, sobretudo de animais lactentes, compromete sensivelmente a produção de carne suína nos países afetados.

Recent outbreaks of Porcine Epidemic Diarrhea (PED) has been described in several countries, mainly in China and the United States, and it has causing significative economic impact to the swine industry worldwide. As the virus spread also in South America, affecting Peru, Colombia and Ecuador, knowledge about the disease is extremely important to maintain the free status of the disease in Brazil. PED is caused by a virus from Coronaviridae family, and is characterized by profuse liquid diarrhea and vomit, varying in severity, being more severe in newborn piglets. The RT-PCR has been the most used diagnostic technique, but serology and immunohistochemistry can also be used. The commercial available vaccine is considered costly and with intermediate effectiveness, consequently complementary biosecurity rules are important to hinder the entry of the agent into the herd. Many studies have been conducted in order to elucidate the epidemiology of the disease, since the route of viral spread among herds is not yet fully established and the economic impact due to high mortality, especially in young animals, significantly impairs the production of pork in affected countries.

Brotes recientes de la Diarrea Epidémica Suína (PED, en inglés) han sido descritos en diversos países, sobre todo en China y Estados Unidos, y ha provocado un significativo impacto económico a la suinocultura mundial. Como la enfermedad también se diseminó en América del Sur, afectando a Perú, Colombia y Ecuador, el conocimiento sobre la enfermedad es de extrema relevancia para el mantenimiento del estatus libre de la enfermedad en el Brasil. La PED es causada por el virus de la familia Coronaviridae, caracterizándose por diarrea liquida profusa y vómito, de intensidad variable, siendo más grave en lechones neonatos. La RT-PCR ha sido la técnica de diagnóstico más utilizada, pero la serología e inmunohistoquímica también pueden ser utilizadas. La vacuna comercial disponible en los Estados Unidos es considerada de alto costo y efectividad intermedia, por eso, protocolos rígidos de bioseguridad son fundamentales para dificultar la entrada del agente en el rebaño. Estudios recientes se han intensificado en el sentido de dilucidar la epidemiologia de la enfermedad, una vez que la vía de diseminación viral entre rebaños aún no se encuentra completamente establecida y el impacto económico causado por la alta mortalidad, sobre todo de animales lactantes, compromete sensiblemente la producción de carne suína en los países afectados.

Diarreia Epidêmica Suína (PED), enfermidade exótica no Brasil mas emergente nas Américas / Porcine Epidemic Diarrhea (PED), exotic disease in Brazil but emerging in the Americas / Diarrea Epidemica Suina (PED), enfermedad exotica en Brasil, pero emergente el las Américas

Surtos recentes da Diarreia Epidêmica Suína (PED, em inglês) têm sido descritos em diversos países, sobretudo na China e Estados Unidos, e tem provocado significativo impacto econômico à suinocultura mundial. Como a doença se disseminou também pela América do Sul, afetando Peru, Colômbia e Equador, o conhecimento sobre a enfermidade é de extrema relevância para manutenção do status livre da doença no Brasil. A PED é causada por vírus da família Coronaviridae, caracterizando-se por diarreia líquida profusa e vômitos, de intensidade variável, sendo mais graves em leitões neonatos. A RT-PCR tem sido a técnica de diagnóstico mais empregada, mas a sorologia e a imuno-histoquímica também podem ser utilizadas. A vacina comercial disponível nos Estados Unidos é considerada de alto custo e efetividade intermediária e, por isso, protocolos rígidos de biossegurança são fundamentais para dificultar a entrada do agente no rebanho. Estudos recentes têm se intensificado no sentido de elucidar a epidemiologia da doença, uma vez que a via de disseminação viral entre rebanhos ainda não se encontra totalmente estabelecida e o impacto econômico causado pela alta mortalidade, sobretudo de animais lactentes, compromete sensivelmente a produção de carne suína nos países afetados.(AU)

Recent outbreaks of Porcine Epidemic Diarrhea (PED) has been described in several countries, mainly in China and the United States, and it has causing significative economic impact to the swine industry worldwide. As the virus spread also in South America, affecting Peru, Colombia and Ecuador, knowledge about the disease is extremely important to maintain the free status of the disease in Brazil. PED is caused by a virus from Coronaviridae family, and is characterized by profuse liquid diarrhea and vomit, varying in severity, being more severe in newborn piglets. The RT-PCR has been the most used diagnostic technique, but serology and immunohistochemistry can also be used. The commercial available vaccine is considered costly and with intermediate effectiveness, consequently complementary biosecurity rules are important to hinder the entry of the agent into the herd. Many studies have been conducted in order to elucidate the epidemiology of the disease, since the route of viral spread among herds is not yet fully established and the economic impact due to high mortality, especially in young animals, significantly impairs the production of pork in affected countries.(AU)

Brotes recientes de la Diarrea Epidémica Suína (PED, en inglés) han sido descritos en diversos países, sobre todo en China y Estados Unidos, y ha provocado un significativo impacto económico a la suinocultura mundial. Como la enfermedad también se diseminó en América del Sur, afectando a Perú, Colombia y Ecuador, el conocimiento sobre la enfermedad es de extrema relevancia para el mantenimiento del estatus libre de la enfermedad en el Brasil. La PED es causada por el virus de la familia Coronaviridae, caracterizándose por diarrea liquida profusa y vómito, de intensidad variable, siendo más grave en lechones neonatos. La RT-PCR ha sido la técnica de diagnóstico más utilizada, pero la serología e inmunohistoquímica también pueden ser utilizadas. La vacuna comercial disponible en los Estados Unidos es considerada de alto costo y efectividad intermedia, por eso, protocolos rígidos de bioseguridad son fundamentales para dificultar la entrada del agente en el rebaño. Estudios recientes se han intensificado en el sentido de dilucidar la epidemiologia de la enfermedad, una vez que la vía de diseminación viral entre rebaños aún no se encuentra completamente establecida y el impacto económico causado por la alta mortalidad, sobre todo de animales lactantes, compromete sensiblemente la producción de carne suína en los países afectados.(AU)

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil / Diagnóstico molecular de vírus aviários em passeriformes campestres e cardeais-amarelos Gubernatrix cristata cativos no Brasil

Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.(AU)

Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.(AU)

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil / Diagnóstico molecular de vírus aviários em passeriformes campestres e cardeais-amarelos Gubernatrix cristata cativos no Brasil

Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.(AU)

Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.(AU)

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil

ABSTRACT: Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.

RESUMO: Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.

Cattle rabies: the effect of clinical evolution, viral genetic lineage, and viral load on the severity of histological lesions / Raiva bovina: relação do curso clínico, da linhagem genética do vírus e carga viral com a intensidade de lesões histológicas

Our objective was the characterization and staging of histological lesions in different anatomical sites of the central nervous system (CNS) of rabid cattle. The severity of the lesions was compared with the clinical stages of the disease, the variants of viral isolates, and with the load of virus. Thirty-one spontaneously affected rabid cattle the state of Santa Catarina underwent clinical follow-up and were eventually necropsied. CNS tissues were sampled and submitted to direct fluorescent antibody technique (DFAT), immunohistochemistry (IHC), routine histopathology with hematoxylin and eosin stain (HE), reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), and polymerase chain reaction in quantitative reverse transcriptase in real time (qRT-PCR). Affected cattle were allotted in four groups according to their clinical stage when euthanized: G1, euthanized while standing; G2, euthanized when in sternal recumbence; G3, euthanized when in lateral recumbence; and G4, affected cattle with natural death. In order to evaluate the degree of severity of the lesions and the presence of Negri bodies (NBs), the brain was sectioned at 9 sites. Additionally, spinal cord and trigeminal ganglion sections were examined. The intensity of the lesions was graded as either absent, mild, moderate, or marked, and the presence or absence of the NBs was noted. Histological lesions were characterized by lymphocytic and monocytic meningoencephalitis with NBs in 28 cases. In all analyzed groups, intensities of histological lesions ranging from mild to severe were observed. Brain regions with the highest inflammatory lesion intensity were the medulla at the level of obex, followed by the colliculus and thalamus. NBs were observed in a higher percentage in the cerebellum, followed by medulla at the obex level, striatum complex, and frontal telencephalon. The duration of the clinical course of the disease did not influence the intensity of the inflammatory lesion, but it did influence the presence of NBs, with a higher percentage of these inclusions in cattle that died naturally than in euthanized cattle. All isolated rhabdovirus included in this study were genetically compatible with samples from hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation by qRT-PCR did not demonstrate a correlation between lesion intensity and the amount of virus.(AU)

Nosso objetivo foi a caracterização e estadiamento de lesões histológicas em diferentes locais anatômicos do sistema nervoso central (SNC) de bovinos raivosos. A gravidade das lesões foi comparada com os estágios clínicos da doença, as variantes dos isolados virais e com a quantidade de vírus. Trinta e um bovinos do estado de Santa Catarina, afetados naturalmente por raiva, foram acompanhados clinicalmente e, ao final, necropsiados. Os tecidos do SNC foram amostrados e submetidos a imunofluorescência direta, imunohistoquímica, histopatologia de rotina, reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) e reação em cadeia da polimerase em transcriptase reversa quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Os bovinos afetados foram distribuídos em quatro grupos, de acordo com sua fase clínica: G1, eutanasiados quando ainda se mantinham em pé; G2, eutanasiados quando em decúbito esternal; G3, eutanasiados quando em decúbito lateral; e G4, bovinos afetados com morte natural. Para avaliar o grau de gravidade das lesões e a presença de corpúsculos de Negri (CNs), o cérebro foi seccionado em 9 locais. Além disso, seções da medula espinhal e do gânglio trigêmeo foram examinadas. A intensidade das lesões foi graduada como ausente, leve, moderada ou acentuada, e a presença ou ausência dos CNs foi anotada. Lesões histológicas foram caracterizadas por meningoencefalite linfocítica e monocítica com CNs em 28 casos. Em todos os grupos analisados foram observadas intensidades de lesões histológicas variando de leve a grave. As regiões cerebrais com maior intensidade de lesão inflamatória foram o bulbo no nível do obex, seguido do colículo e tálamo. CNs foram mais prevalentes no cerebelo, seguido pelo bulbo ao nível do óbex, corpo estriado e telencéfalo frontal. A duração do curso clínico da raiva não influenciou a intensidade da lesão inflamatória, mas influenciou a presença de CNs, com maior porcentagem dessas inclusões em bovinos que morreram naturalmente do que em bovinos sacrificados. Todos os isolados rabdovírus obtidos neste estudo eram geneticamente compatíveis com amostras provenientes de morcegos hematófagos Desmodus rotundus.(AU)

Cattle rabies: the effect of clinical evolution, viral genetic lineage, and viral load on the severity of histological lesions / Raiva bovina: relação do curso clínico, da linhagem genética do vírus e carga viral com a intensidade de lesões histológicas

Our objective was the characterization and staging of histological lesions in different anatomical sites of the central nervous system (CNS) of rabid cattle. The severity of the lesions was compared with the clinical stages of the disease, the variants of viral isolates, and with the load of virus. Thirty-one spontaneously affected rabid cattle the state of Santa Catarina underwent clinical follow-up and were eventually necropsied. CNS tissues were sampled and submitted to direct fluorescent antibody technique (DFAT), immunohistochemistry (IHC), routine histopathology with hematoxylin and eosin stain (HE), reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), and polymerase chain reaction in quantitative reverse transcriptase in real time (qRT-PCR). Affected cattle were allotted in four groups according to their clinical stage when euthanized: G1, euthanized while standing; G2, euthanized when in sternal recumbence; G3, euthanized when in lateral recumbence; and G4, affected cattle with natural death. In order to evaluate the degree of severity of the lesions and the presence of Negri bodies (NBs), the brain was sectioned at 9 sites. Additionally, spinal cord and trigeminal ganglion sections were examined. The intensity of the lesions was graded as either absent, mild, moderate, or marked, and the presence or absence of the NBs was noted. Histological lesions were characterized by lymphocytic and monocytic meningoencephalitis with NBs in 28 cases. In all analyzed groups, intensities of histological lesions ranging from mild to severe were observed. Brain regions with the highest inflammatory lesion intensity were the medulla at the level of obex, followed by the colliculus and thalamus. NBs were observed in a higher percentage in the cerebellum, followed by medulla at the obex level, striatum complex, and frontal telencephalon. The duration of the clinical course of the disease did not influence the intensity of the inflammatory lesion, but it did influence the presence of NBs, with a higher percentage of these inclusions in cattle that died naturally than in euthanized cattle. All isolated rhabdovirus included in this study were genetically compatible with samples from hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation by qRT-PCR did not demonstrate a correlation between lesion intensity and the amount of virus.(AU)

Nosso objetivo foi a caracterização e estadiamento de lesões histológicas em diferentes locais anatômicos do sistema nervoso central (SNC) de bovinos raivosos. A gravidade das lesões foi comparada com os estágios clínicos da doença, as variantes dos isolados virais e com a quantidade de vírus. Trinta e um bovinos do estado de Santa Catarina, afetados naturalmente por raiva, foram acompanhados clinicalmente e, ao final, necropsiados. Os tecidos do SNC foram amostrados e submetidos a imunofluorescência direta, imunohistoquímica, histopatologia de rotina, reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) e reação em cadeia da polimerase em transcriptase reversa quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Os bovinos afetados foram distribuídos em quatro grupos, de acordo com sua fase clínica: G1, eutanasiados quando ainda se mantinham em pé; G2, eutanasiados quando em decúbito esternal; G3, eutanasiados quando em decúbito lateral; e G4, bovinos afetados com morte natural. Para avaliar o grau de gravidade das lesões e a presença de corpúsculos de Negri (CNs), o cérebro foi seccionado em 9 locais. Além disso, seções da medula espinhal e do gânglio trigêmeo foram examinadas. A intensidade das lesões foi graduada como ausente, leve, moderada ou acentuada, e a presença ou ausência dos CNs foi anotada. Lesões histológicas foram caracterizadas por meningoencefalite linfocítica e monocítica com CNs em 28 casos. Em todos os grupos analisados foram observadas intensidades de lesões histológicas variando de leve a grave. As regiões cerebrais com maior intensidade de lesão inflamatória foram o bulbo no nível do obex, seguido do colículo e tálamo. CNs foram mais prevalentes no cerebelo, seguido pelo bulbo ao nível do óbex, corpo estriado e telencéfalo frontal. A duração do curso clínico da raiva não influenciou a intensidade da lesão inflamatória, mas influenciou a presença de CNs, com maior porcentagem dessas inclusões em bovinos que morreram naturalmente do que em bovinos sacrificados. Todos os isolados rabdovírus obtidos neste estudo eram geneticamente compatíveis com amostras provenientes de morcegos hematófagos Desmodus rotundus.(AU)

cDNA Cloning of a Bovine Insulin-like growth factor-1 from Egyptian Buffalos and Expression of its Recombinant Protein in Escherichia coli / Clonagem de cDNA de um fator-1 de crescimento semelhante à insulina bovina de búfalos egípcios e expressão de sua proteína recombinante em Escherichia coli

Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) is regarded as a crucial clinically significant therapeutic agent against several pathological conditions. Recently, recombinant DNA (rDNA) technology has enabled the production of many drugs of rDNA-origin including IGF-1. Securing a readily available supply of IGF-1 is invaluable to clinical research and biotechnological domains. In this work, the cloning of a full-length bovine IGF-1 cDNA and the successful expression of its cognate recombinant IGF-1 protein is reported. Single-strand cDNA was prepared from liver tissues, through the specific reverse transcription (RT) of IGF-1 mRNA. Subsequently, a PCR amplicon of ~543bp was successfully amplified. Recombinant pTARGET™ vector harboring IGF-1 insert was successfully cloned into competent E. coli JM109 cells. SDS-PAGE analysis revealed that the recombinant IGF-1 has been expressed at the expected size of 7.6kDa. The outcome provides a robust basis for transecting the recombinant pTARGETTM vector, harboring the IGF-1 cDNA insert, into mammalian cells. Optimal initial glucose concentration was found to be 10g/l with corresponding protein concentration of 6.2g/l. The proliferative biological activity crude recombinant IGF-1 protein was verified on HeLa cell lines. This is envisaged to facilitate large-scale production of recombinant IGF-1 protein, thereby enabling thorough investigation of its clinical and pharmaceutical effects.(AU)

O fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1) é considerado um agente terapêutico clinicamente significativo contra várias condições patológicas. Recentemente, a tecnologia de DNA recombinante (rDNA) permitiu a produção de muitos medicamentos de origem rDNA, incluindo o IGF-1. Garantir um suprimento prontamente disponível de IGF-1 é inestimável para pesquisas clínicas e domínios biotecnológicos. Neste trabalho, relata-se a clonagem de um cDNA de IGF-1 bovino de comprimento total e a expressão bem-sucedida de sua proteína IGF-1 recombinante cognata. O cDNA de cadeia simples foi preparado a partir de tecidos do fígado, por meio da transcrição reversa específica (RT) do mRNA de IGF-1. Posteriormente, um amplificador de PCR de ~ 543pb foi amplificado com sucesso. O vetor pTARGET™ recombinante contendo a inserção de IGF-1 foi clonado com sucesso em células competentes E. coli JM109. A análise por SDS-PAGE revelou que o IGF-1 recombinante foi expresso no tamanho esperado de 7,6kDa. O resultado fornece uma base robusta para a transferência do vetor pTARGETTMTM recombinante, abrigando a inserção de cDNA de IGF-1 em células de mamíferos. Verificou-se que a concentração inicial ideal de glicose é 10g/L, com a concentração de proteína correspondente de 6,2g/L. A proteína IGF-1 recombinante bruta de atividade biológica proliferativa foi verificada nas linhas celulares HeLa. É previsto que isso facilite a produção da proteína IGF-1 recombinante em larga escala, permitindo, assim, uma investigação completa dos seus efeitos clínicos e farmacêuticos.(AU)

cDNA Cloning of a Bovine Insulin-like growth factor-1 from Egyptian Buffalos and Expression of its Recombinant Protein in Escherichia coli / Clonagem de cDNA de um fator-1 de crescimento semelhante à insulina bovina de búfalos egípcios e expressão de sua proteína recombinante em Escherichia coli

Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) is regarded as a crucial clinically significant therapeutic agent against several pathological conditions. Recently, recombinant DNA (rDNA) technology has enabled the production of many drugs of rDNA-origin including IGF-1. Securing a readily available supply of IGF-1 is invaluable to clinical research and biotechnological domains. In this work, the cloning of a full-length bovine IGF-1 cDNA and the successful expression of its cognate recombinant IGF-1 protein is reported. Single-strand cDNA was prepared from liver tissues, through the specific reverse transcription (RT) of IGF-1 mRNA. Subsequently, a PCR amplicon of ~543bp was successfully amplified. Recombinant pTARGET™ vector harboring IGF-1 insert was successfully cloned into competent E. coli JM109 cells. SDS-PAGE analysis revealed that the recombinant IGF-1 has been expressed at the expected size of 7.6kDa. The outcome provides a robust basis for transecting the recombinant pTARGETTM vector, harboring the IGF-1 cDNA insert, into mammalian cells. Optimal initial glucose concentration was found to be 10g/l with corresponding protein concentration of 6.2g/l. The proliferative biological activity crude recombinant IGF-1 protein was verified on HeLa cell lines. This is envisaged to facilitate large-scale production of recombinant IGF-1 protein, thereby enabling thorough investigation of its clinical and pharmaceutical effects.(AU)

O fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1) é considerado um agente terapêutico clinicamente significativo contra várias condições patológicas. Recentemente, a tecnologia de DNA recombinante (rDNA) permitiu a produção de muitos medicamentos de origem rDNA, incluindo o IGF-1. Garantir um suprimento prontamente disponível de IGF-1 é inestimável para pesquisas clínicas e domínios biotecnológicos. Neste trabalho, relata-se a clonagem de um cDNA de IGF-1 bovino de comprimento total e a expressão bem-sucedida de sua proteína IGF-1 recombinante cognata. O cDNA de cadeia simples foi preparado a partir de tecidos do fígado, por meio da transcrição reversa específica (RT) do mRNA de IGF-1. Posteriormente, um amplificador de PCR de ~ 543pb foi amplificado com sucesso. O vetor pTARGET™ recombinante contendo a inserção de IGF-1 foi clonado com sucesso em células competentes E. coli JM109. A análise por SDS-PAGE revelou que o IGF-1 recombinante foi expresso no tamanho esperado de 7,6kDa. O resultado fornece uma base robusta para a transferência do vetor pTARGETTMTM recombinante, abrigando a inserção de cDNA de IGF-1 em células de mamíferos. Verificou-se que a concentração inicial ideal de glicose é 10g/L, com a concentração de proteína correspondente de 6,2g/L. A proteína IGF-1 recombinante bruta de atividade biológica proliferativa foi verificada nas linhas celulares HeLa. É previsto que isso facilite a produção da proteína IGF-1 recombinante em larga escala, permitindo, assim, uma investigação completa dos seus efeitos clínicos e farmacêuticos.(AU)

Monitoring of Newcastle disease in poultry at migratory birds landing sites: Mangue Seco and Cacha Pregos between 2013 and 2014 / Monitoramento da doença de Newcastle em aves domésticas nos sítios de pouso de aves migratórias: Mangue Seco e Cacha Pregos entre 2013 e 2014

The poultry industry has been considered one of the most efficient agricultural activities, placing Brazil in the ranking of the largest producers of chicken meat. However, a threat to the poultry production chain is the entrance of Newcastle disease virus (NDV) in the country, which would bring huge economic and social losses. Monitoring of the virus was conducted in domestic poultry (Gallus gallus domesticus) farms on the migratory birds landing sites Mangue Seco and Cacha Pregos between 2013 and 2014 to control Newcastle disease (NCD) in these locations. Activities in health education, filling the questionnaire to define the sanitary profile of the farms, georeferenced registration and collection of blood samples, cloacal and tracheal swabs of the backyard birds were the epidemiological surveillance actions performed. A total of 133 serum samples were analyzed in Mangue Seco and 81 in Cacha Pregos. The results showed that both Mangue Seco (63.4%) and Cacha Pregos (88.9%) presented reactive animals for the NDV. The results of real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and viral isolation analyses were negative, proving that the domestic poultry were not eliminating the virus at the time of sample collection. The high percentage of reactive animals by indirect ELISA test in both epidemiological units studied suggests the presence of NDV circulating lentogenic strain, since there was no death registration and the birds did not have characteristic symptoms of the disease.(AU)

A avicultura tem sido considerada uma das atividades agrícolas mais eficientes, colocando o Brasil no ranking dos maiores produtores de carne de frango. No entanto, uma ameaça à cadeia produtiva da avicultura é a entrada do vírus da doença de Newcastle (NDV) no país, o que acarretaria enormes prejuízos econômicos e sociais. O monitoramento do vírus foi realizado em granjas de aves domésticas (Gallus gallus domesticus) nos locais de desembarque de aves migratórias de Mangue Seco e Cacha Pregos entre 2013 e 2014 para controlar a doença de Newcastle (DCNT) nesses locais. Atividades de educação em saúde, preenchimento de questionário para definição do perfil sanitário das fazendas, cadastro georreferenciado e coleta de amostras de sangue e swabs cloacal e traqueal de aves de quintal foram as ações de vigilância epidemiológica realizadas. Um total de 133 amostras de soro foram analisadas em Mangue Seco e 81 em Cacha Pregos. Os resultados mostraram que tanto Mangue Seco (63,4%) quanto Cacha Pregos (88,9%) apresentaram animais reativos para o NDV. Os resultados da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) e das análises de isolamento viral foram negativos, comprovando que as aves domésticas não estavam eliminando o vírus no momento da coleta das amostras. O alto percentual de animais reativos pelo teste ELISA indireto em ambas as unidades epidemiológicas estudadas sugere a presença de cepa lentogênica circulante de NDV, uma vez que não houve registro de óbito e as aves não apresentavam sintomas característicos da doença.(AU)

Monitoring of Newcastle disease in poultry at migratory birds landing sites: Mangue Seco and Cacha Pregos between 2013 and 2014 / Monitoramento da doença de Newcastle em aves domésticas nos sítios de pouso de aves migratórias: Mangue Seco e Cacha Pregos entre 2013 e 2014

The poultry industry has been considered one of the most efficient agricultural activities, placing Brazil in the ranking of the largest producers of chicken meat. However, a threat to the poultry production chain is the entrance of Newcastle disease virus (NDV) in the country, which would bring huge economic and social losses. Monitoring of the virus was conducted in domestic poultry (Gallus gallus domesticus) farms on the migratory birds landing sites Mangue Seco and Cacha Pregos between 2013 and 2014 to control Newcastle disease (NCD) in these locations. Activities in health education, filling the questionnaire to define the sanitary profile of the farms, georeferenced registration and collection of blood samples, cloacal and tracheal swabs of the backyard birds were the epidemiological surveillance actions performed. A total of 133 serum samples were analyzed in Mangue Seco and 81 in Cacha Pregos. The results showed that both Mangue Seco (63.4%) and Cacha Pregos (88.9%) presented reactive animals for the NDV. The results of real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and viral isolation analyses were negative, proving that the domestic poultry were not eliminating the virus at the time of sample collection. The high percentage of reactive animals by indirect ELISA test in both epidemiological units studied suggests the presence of NDV circulating lentogenic strain, since there was no death registration and the birds did not have characteristic symptoms of the disease.(AU)

A avicultura tem sido considerada uma das atividades agrícolas mais eficientes, colocando o Brasil no ranking dos maiores produtores de carne de frango. No entanto, uma ameaça à cadeia produtiva da avicultura é a entrada do vírus da doença de Newcastle (NDV) no país, o que acarretaria enormes prejuízos econômicos e sociais. O monitoramento do vírus foi realizado em granjas de aves domésticas (Gallus gallus domesticus) nos locais de desembarque de aves migratórias de Mangue Seco e Cacha Pregos entre 2013 e 2014 para controlar a doença de Newcastle (DCNT) nesses locais. Atividades de educação em saúde, preenchimento de questionário para definição do perfil sanitário das fazendas, cadastro georreferenciado e coleta de amostras de sangue e swabs cloacal e traqueal de aves de quintal foram as ações de vigilância epidemiológica realizadas. Um total de 133 amostras de soro foram analisadas em Mangue Seco e 81 em Cacha Pregos. Os resultados mostraram que tanto Mangue Seco (63,4%) quanto Cacha Pregos (88,9%) apresentaram animais reativos para o NDV. Os resultados da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) e das análises de isolamento viral foram negativos, comprovando que as aves domésticas não estavam eliminando o vírus no momento da coleta das amostras. O alto percentual de animais reativos pelo teste ELISA indireto em ambas as unidades epidemiológicas estudadas sugere a presença de cepa lentogênica circulante de NDV, uma vez que não houve registro de óbito e as aves não apresentavam sintomas característicos da doença.(AU)

Saúde única e COVID-19: revisão sobre o potencial dos animais como reservatórios do vírus / One health and COVID-19: review of the potential of animals to be reservoirs of the virus / Salud única y COVID-19: revisión del potencial de los animales para ser reservorios del virus

A doença COVID-19, causada pelo agente SARS-COV-2, provém da mutação do vírus SARS-COV de origem animal, tornando-se relevante não somente por causar infecções em humanos como também por apresentar um possível caráter zoonótico. Com essa possibilidade, estudos buscam a comprovação da presença do agente em diversas espécies de animais domésticos e quais as similaridades entre essas e o ser humano. Revisão de literatura de diversas publicações científicas abrangendo a possibilidade de os animais serem reservatórios do agente do novo coronavírus, bem como, acentuar a importância da saúde única no controle de doenças através da pesquisa de publicações, foram realizadas até 10 de Junho de 2020. Em estudos realizados com animais de companhia, cães e gatos, testados através do exame de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR), que permite identificar a presença do agente infeccioso no material genético do paciente, alguns dos animais avaliados apresentaram resultado positivo para o novo coronavírus. Contudo, em relação a animais de produção, até o momento, não foram detectados animais positivos para o novo coronavírus, sugerindo que estes não são suscetíveis a esta infecção. Com esta revisão, ressalta-se que é notório o potencial zoonótico do novo coronavírus a partir de estudos já existentes, porém ainda são necessários mais estudos abordando esta temática. Ademais, evidencia-se a importância da ação da saúde única de forma multiprofissional, na qual atuam médicos, enfermeiros, médicos veterinários, entre tantos, diante de todas fontes envolvidas na disseminação de doenças, como o COVID-19.

The disease COVID-19, caused by the agent SARS-COV-2, comes from the mutation of the SARS-COV virus of animal origin, becoming relevant not only for causing infections in humans but also for having a possible zoonotic character. With this possibility, studies seek to prove the presence of the agent in several species of domestic animals and what are the similarities between these and the human being. An literature review of several scientific publications covering the possibility of animals being reservoirs of the new coronavirus agent, as well as to emphasize the importance of unique health in disease control through the search of publications made up to 10 June 2020. In studies with companion animals, dogs and cats, tested using the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) test, which allows the presence of the infectious agent in the genetic material of patients, some of the animals evaluated tested positive for the new coronavirus. However, in relation to production animals, so far, no positive animals have been detected for the new coronavirus, suggesting that they are not susceptible to this infection. With this review, it is emphasized that the zoonotic potential of the new coronavirus is notorious from existing studies, but further studies addressing this theme are still needed. In addition, the importance of a single health action in a multidisciplinary way is evidenced, in which doctors, nurses, veterinarians, among many, before all sources involved in the spread of diseases, such as COVID-19.

La enfermedad COVID-19, causada por el agente SARS-COV-2, proviene de la mutación del virus SARS-COV de origen animal, volviéndose relevante no solo por causar infecciones en humanos sino también por tener un posible carácter zoonótico. Con esta posibilidad, los estudios buscan demostrar la presencia del agente en varias especies de animales domésticos y cuáles son las similitudes entre estos y el ser humano. Se realizó una revisión de la literatura de varias publicaciones científicas, que cubre la posibilidad de que los animales sean reservorios del nuevo agente de coronavirus, así como enfatiza la importancia de una salud única en el control de enfermedades a través de la investigación de publicaciones realizadas hasta el 10 de junio de 2020 En estudios realizados con animales de compañía, perros y gatos, probados mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), que permite la presencia del agente infeccioso en el material genético del paciente, algunos de los animales evaluados mostró resultados positivos para el nuevo coronavirus. Sin embargo, en relación con los animales de granja, hasta el momento, no se han detectado animales positivos para el nuevo coronavirus, lo que sugiere que no son susceptibles a esta infección. Con esta revisión, se enfatiza que el potencial zoonótico del nuevo coronavirus es notorio por los estudios existentes, pero aún se necesitan más estudios que aborden este tema. Además, se evidencia la importancia de una sola acción de salud de manera multidisciplinaria, en la que los médicos, enfermeras, veterinarios trabajan, entre muchos, antes de que todas las fuentes involucradas en la propagación de enfermedades, como COVID-19.

Saúde única e COVID-19: revisão sobre o potencial dos animais como reservatórios do vírus / One health and COVID-19: review of the potential of animals to be reservoirs of the virus / Salud única y COVID-19: revisión del potencial de los animales para ser reservorios del virus

A doença COVID-19, causada pelo agente SARS-COV-2, provém da mutação do vírus SARS-COV de origem animal, tornando-se relevante não somente por causar infecções em humanos como também por apresentar um possível caráter zoonótico. Com essa possibilidade, estudos buscam a comprovação da presença do agente em diversas espécies de animais domésticos e quais as similaridades entre essas e o ser humano. Revisão de literatura de diversas publicações científicas abrangendo a possibilidade de os animais serem reservatórios do agente do novo coronavírus, bem como, acentuar a importância da saúde única no controle de doenças através da pesquisa de publicações, foram realizadas até 10 de Junho de 2020. Em estudos realizados com animais de companhia, cães e gatos, testados através do exame de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR), que permite identificar a presença do agente infeccioso no material genético do paciente, alguns dos animais avaliados apresentaram resultado positivo para o novo coronavírus. Contudo, em relação a animais de produção, até o momento, não foram detectados animais positivos para o novo coronavírus, sugerindo que estes não são suscetíveis a esta infecção. Com esta revisão, ressalta-se que é notório o potencial zoonótico do novo coronavírus a partir de estudos já existentes, porém ainda são necessários mais estudos abordando esta temática. Ademais, evidencia-se a importância da ação da saúde única de forma multiprofissional, na qual atuam médicos, enfermeiros, médicos veterinários, entre tantos, diante de todas fontes envolvidas na disseminação de doenças, como o COVID-19.(AU)

The disease COVID-19, caused by the agent SARS-COV-2, comes from the mutation of the SARS-COV virus of animal origin, becoming relevant not only for causing infections in humans but also for having a possible zoonotic character. With this possibility, studies seek to prove the presence of the agent in several species of domestic animals and what are the similarities between these and the human being. An literature review of several scientific publications covering the possibility of animals being reservoirs of the new coronavirus agent, as well as to emphasize the importance of unique health in disease control through the search of publications made up to 10 June 2020. In studies with companion animals, dogs and cats, tested using the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) test, which allows the presence of the infectious agent in the genetic material of patients, some of the animals evaluated tested positive for the new coronavirus. However, in relation to production animals, so far, no positive animals have been detected for the new coronavirus, suggesting that they are not susceptible to this infection. With this review, it is emphasized that the zoonotic potential of the new coronavirus is notorious from existing studies, but further studies addressing this theme are still needed. In addition, the importance of a single health action in a multidisciplinary way is evidenced, in which doctors, nurses, veterinarians, among many, before all sources involved in the spread of diseases, such as COVID-19.(AU)

La enfermedad COVID-19, causada por el agente SARS-COV-2, proviene de la mutación del virus SARS-COV de origen animal, volviéndose relevante no solo por causar infecciones en humanos sino también por tener un posible carácter zoonótico. Con esta posibilidad, los estudios buscan demostrar la presencia del agente en varias especies de animales domésticos y cuáles son las similitudes entre estos y el ser humano. Se realizó una revisión de la literatura de varias publicaciones científicas, que cubre la posibilidad de que los animales sean reservorios del nuevo agente de coronavirus, así como enfatiza la importancia de una salud única en el control de enfermedades a través de la investigación de publicaciones realizadas hasta el 10 de junio de 2020 En estudios realizados con animales de compañía, perros y gatos, probados mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), que permite la presencia del agente infeccioso en el material genético del paciente, algunos de los animales evaluados mostró resultados positivos para el nuevo coronavirus. Sin embargo, en relación con los animales de granja, hasta el momento, no se han detectado animales positivos para el nuevo coronavirus, lo que sugiere que no son susceptibles a esta infección. Con esta revisión, se enfatiza que el potencial zoonótico del nuevo coronavirus es notorio por los estudios existentes, pero aún se necesitan más estudios que aborden este tema. Además, se evidencia la importancia de una sola acción de salud de manera multidisciplinaria, en la que los médicos, enfermeras, veterinarios trabajan, entre muchos, antes de que todas las fuentes involucradas en la propagación de enfermedades, como COVID-19.(AU)

Campylobacter jejuni and Campylobacter coli originated from chicken carcasses modulate their transcriptome to translate virulence genes in human cells / Campylobacter jejuni e Campylobacter coli originadas de carcaças de frango modulam seu transcriptoma para traduzir genes de virulência em células humanas

The aim was to determine the spread of genetically similar profiles of Campylobacter in chicken carcasses and evaluate their ability to produce transcripts for ciaB, dnaJ, p19 and sodB genes, before and after cultivation in Caco-2 cells. The strains used were isolated from 420 samples of chicken carcasses chilled and frozen ready for marketing. The species were identified by PCR-multiplex, the phylogeny was determined by RAPD-PCR and the presence of transcripts was performed by RT-PCR. We identified 74 (17.6%) of Campylobacter strains, being 55 (74.3%) C. jejuni and 19 (25.7%) C. coli. The phylogenetic relationship demonstrated heterogeneity between isolates of the same species, with absence of clones, indicating the high level of diversity of circulating genotypes. The gene transcription showed conflicting results before and after the culture in Caco-2 cell, so that before cultivation isolates showed greater capacity to transcribe genes related to survival and after the interaction with human cells, the strains showed higher potential to transcribe genes associated with virulence. The result of this study contributes to the understanding of how these seemingly fragile microorganisms are the most prevalent bacterial agents in human gastroenteritis.(AU)

O objetivo foi determinar a disseminação de perfis geneticamente semelhantes de Campylobacter em carcaças de frango e avaliar sua capacidade de produzir transcritos para os genes ciaB, dnaJ, p19 e sodB, antes e após o cultivo em células Caco-2. As cepas utilizadas foram isoladas de 420 amostras de carcaças de frango resfriadas e congeladas prontas para comercialização. As espécies foram identificadas por PCR-multiplex, a filogenia foi determinada por RAPD-PCR e a presença de transcritos foi realizada por RT-PCR. Identificamos 74 (17,6%) das cepas de Campylobacter, sendo 55 (74,3%) C. jejuni e 19 (25,7%) C. coli. A relação filogenética demonstrou heterogeneidade entre isolados da mesma espécie, com ausência de clones, indicando o alto nível de diversidade dos genótipos circulantes. A transcrição gênica mostrou resultados conflitantes antes e após a cultura em células Caco-2, de modo que, antes do cultivo, os isolados apresentaram maior capacidade de transcrever genes relacionados à sobrevivência e após a interação com células humanas, as linhagens apresentaram maior potencial para transcrever genes associados à virulência. O resultado deste estudo contribui para a compreensão de como esses microrganismos aparentemente frágeis são os agentes bacterianos mais prevalentes na gastroenterite humana.(AU)

Campylobacter jejuni and Campylobacter coli originated from chicken carcasses modulate their transcriptome to translate virulence genes in human cells / Campylobacter jejuni e Campylobacter coli originadas de carcaças de frango modulam seu transcriptoma para traduzir genes de virulência em células humanas

The aim was to determine the spread of genetically similar profiles of Campylobacter in chicken carcasses and evaluate their ability to produce transcripts for ciaB, dnaJ, p19 and sodB genes, before and after cultivation in Caco-2 cells. The strains used were isolated from 420 samples of chicken carcasses chilled and frozen ready for marketing. The species were identified by PCR-multiplex, the phylogeny was determined by RAPD-PCR and the presence of transcripts was performed by RT-PCR. We identified 74 (17.6%) of Campylobacter strains, being 55 (74.3%) C. jejuni and 19 (25.7%) C. coli. The phylogenetic relationship demonstrated heterogeneity between isolates of the same species, with absence of clones, indicating the high level of diversity of circulating genotypes. The gene transcription showed conflicting results before and after the culture in Caco-2 cell, so that before cultivation isolates showed greater capacity to transcribe genes related to survival and after the interaction with human cells, the strains showed higher potential to transcribe genes associated with virulence. The result of this study contributes to the understanding of how these seemingly fragile microorganisms are the most prevalent bacterial agents in human gastroenteritis.(AU)

O objetivo foi determinar a disseminação de perfis geneticamente semelhantes de Campylobacter em carcaças de frango e avaliar sua capacidade de produzir transcritos para os genes ciaB, dnaJ, p19 e sodB, antes e após o cultivo em células Caco-2. As cepas utilizadas foram isoladas de 420 amostras de carcaças de frango resfriadas e congeladas prontas para comercialização. As espécies foram identificadas por PCR-multiplex, a filogenia foi determinada por RAPD-PCR e a presença de transcritos foi realizada por RT-PCR. Identificamos 74 (17,6%) das cepas de Campylobacter, sendo 55 (74,3%) C. jejuni e 19 (25,7%) C. coli. A relação filogenética demonstrou heterogeneidade entre isolados da mesma espécie, com ausência de clones, indicando o alto nível de diversidade dos genótipos circulantes. A transcrição gênica mostrou resultados conflitantes antes e após a cultura em células Caco-2, de modo que, antes do cultivo, os isolados apresentaram maior capacidade de transcrever genes relacionados à sobrevivência e após a interação com células humanas, as linhagens apresentaram maior potencial para transcrever genes associados à virulência. O resultado deste estudo contribui para a compreensão de como esses microrganismos aparentemente frágeis são os agentes bacterianos mais prevalentes na gastroenterite humana.(AU)