Redescription and expansion of the geographic distribution of Phenacorhamdia nigrolineata (Siluriformes: Heptapteridae)

Phenacorhamdia nigrolineata is redescribed, and the expansion of its geographic distribution is presented based on abundant new records. Morphological analysis, meristic comparison and osteological description were performed. No one autapomorphy was identified for P. nigrolineata, but the species is identified by an exclusive combination of characters of coloration of the body, morphometric and meristic data (snout length, maxillary and outer mental barbels length; number of vertebrae). A discussion of its geographic distribution, coloration pattern of the body, the putative relationships among some species of the genus, and its conservation status are presented.(AU)

Phenacorhamdia nigrolineata é redescrita e a expansão de sua distribuição geográfica é apresentada com base em abundantes novos registros. Foram realizadas análises morfológicas, comparação merística e descrição osteológica. Nenhuma autapomorfia foi identificada para P. nigrolineata, mas a espécie é identificada por uma combinação exclusiva de caracteres de colorido do corpo, dados morfométricos e merísticos (comprimento do focinho, comprimento dos barbilhões maxilares e mentais externos; número de vértebras). Uma discussão dessa distribuição geográfica, padrão de coloração do corpo, as supostas relações entre algumas espécies do gênero e seu estado de conservação são apresentados.(AU)

Two records of xanthism in Corallus hortulana (Serpentes: Boidae) in Bolivia with comments on the yellow, patternless morphotype / Dos registros de xantismo en Corallus hortulana (Serpentes: Boidae) en Bolivia con comentarios sobre el morfotipo amarillo sin patrón

Snakes display a wide range of skin colors and patterns, acting in ecological, behavioral, and physiological roles. Xanthism has been reported in numerous snake species, including many neotropical taxa. Corallus hortulana is a polychromatic species widely distributed throughout South America. Yellow, patternless individuals, while rare, have been recognized as within the species' polychromatic range. We report the first yellow, patternless specimens of Corallus hortulana collected in Bolivia and discuss whether these individuals fit the criteria of xanthism.(AU)

Las serpientes muestran una amplia gama de colores y patrones de piel, actuando en roles ecológicos, de comportamiento y fisiológicos. Además, se ha informado xantismo en numerosas especies de serpientes, incluidos muchos taxones neotropicales. Corallus hortulana es una especie policromática ampliamente distribuida en América del Sur. Los individuos amarillos sin patrón, aunque raros, se han reconocido dentro del rango policromático de la especie. Reportamos los primeros especímenes amarillos sin patrón de Corallus hortulana recolectados en Bolivia y discutimos si estos individuos cumplen con los criterios de xantismo.(AU)

Granulomatous rhinitis by Neoconidiobolus lamprauges in a mule / Rinite granulomatosa por Neoconidiobolus lamprauges em uma mula

ABSTRACT: Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 μm (± 3.63 μm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

RESUMO: A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 μm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

Colorações de malhas de sombreamento sobre a fenologia, biometria e características físico-químicas de Physalis peruviana L. em sistema orgânico de produção / Colors of shadowing meshes on phenology, biometrics and physicochemical characteristics of Physalis peruviana L. in organic production system

Objetivou-se neste trabalho verificar a influência de distintas colorações de malhas de sombreamento sobre a fenologia, biometria e características físico-químicas de Physalis peruviana L em sistema orgânico de produção. O experimento foi realizado na área experimentalda UFFS, campus Laranjeiras do Sul ­PR, no setor de Horticultura. Como material vegetal foram utilizadas mudas de P. peruviana L. produzidas em estufa agrícola da área didática experimental. O delineamento experimental foi em blocos completamente casualizados, em esquema unifatorial, com quatro malhas de sombreamento (azul, preta, vermelha e branca) + testemunha (sem cobertura), com quatro repetições. Para a fenologia não houve influência estatística das colorações de malhas de sombreamento. Plantas com maior altura e menordiâmetro de caule foram verificadas com o uso da malha de sombreamento da coloração azul. Houve alterações sobre a firmeza de frutos, massa com cálice, diâmetro, altura e sólidos solúveis em função da cor da malha de sombreamento. Conclui-se que as malhasde sombreamento de diferentes colorações não interferem na fenologia de P. peruviana, mas alteram ascaracterísticas biométricas e físico-químicas das frutas, sendo a de coloração vermelha a que proporcionou os melhores resultados, não sendo recomendada autilização da malha de coloração azul.(AU)

The objective of this work was to verify the influence of different colors of shading meshes onthe phenology, biometry and physicochemical characteristics of Physalis peruvianain an organic production system. The experiment was carried out in the experimental area of UFFS, campus Laranjeiras do Sul -PR, in the Horticulture sector. As plant material, seedlings of Physalis peruvianaL. produced in an agricultural greenhouse in the experimental teaching area were used. The experimental design was in completely randomized blocks, in a one-factor scheme, with four shading meshes (blue, black, red andwhite) + control (no cover), with four replications. For the phenology there was no statistical influence of the shading mesh colors. Plants with greater height and smaller diameter were verified using the blue color shading mesh. There were changes in fruit firmness, mass with calyx, diameter, height and soluble solids depending on the type of shading. It is concluded in this work that shading nets of different colors do not affect the phenology of the P. peruviana, but they change the biometric and physicochemical characteristics of fruits, with red color being the ones that provide the best results, the use of the blue colored mesh is not recommended.(AU)

Variations in heterochromatin content reveal important polymorphisms for studies of genetic improvement in garlic (Allium sativum L.)

Abstract Allium sativum L. is an herb of the Alliaceae family with a specific taste and aroma and medicinal and nutraceutical properties that are widely marketed in several countries. Brazil is one of the largest importers of garlic in the world, despite of its production is restricted and limited to internal consumption. Thus, explore the genetic diversity of commercial garlic conserved at germplasm banks is essential to generate additional genetic information about its economically important crop. A suitable tool for this purpose is the cytogenetic characterisation of these accessions. This study aimed to characterise the cytogenetic diversity among seven accessions of garlic from a Germplasm Bank in Brazil. The karyotypes were obtained by conventional staining and with chromomycin A3 (CMA) and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) fluorochromes. All accessions analysed showed chromosome number 2n = 16, karyotype formula 6M+2SM, symmetrical karyotypes, reticulate interphase nuclei, and chromosomes with uniform chromatin condensation from prophase to metaphase. The fluorochromes staining showed differences in the amount and distribution of heterochromatin along the chromosomes and between accessions studied. Based on the distribution pattern of these small polymorphisms, it was possible to separate the seven accessions into three groups. It was also possible to differentiate some of the accessions individually. One of the results obtained showed a heteromorphic distension of the nucleolar organiser region observed on the chromosome pairs 6 or 7 with peculiar characteristics. It was suggested for example, that the heteromorphic block of heterochromatin (CMA+++/DAPI-) on chromosome 6 of the Branco Mineiro Piauí accession can be used as a marker to identify this genotype or may be associated with some character of economic interest.

Resumo Allium sativum L. é uma erva da família Alliaceae com sabor e aroma específicos e propriedades medicinais e nutracêuticas amplamente comercializada em diversos países. O Brasil é um dos maiores importadores de alho do mundo, apesar da sua produção ser restrita e limitada ao consumo interno. Assim, explorar a diversidade genética do alho comercial conservado em bancos de germoplasma é essencial para fornecer informações genéticas adicionais acerca dessa cultura economicamente importante. Uma ferramenta adequada para esse fim é a caracterização citogenética desses acessos. Este estudo teve como objetivo caracterizar a diversidade citogenética entre sete acessos de alho de um Banco de Germoplasma no Brasil. Os cariótipos foram obtidos por coloração convencional e com os fluorocromos de cromomicina A3 (CMA) e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI). Todos os acessos analisados apresentaram número cromossômico 2n = 16, fórmula cariotípica 6M + 2SM, cariótipos simétricos, núcleos reticulados em intérfase e cromossomos com condensação uniforme da cromatina da prófase para a metáfase. A coloração com fluorocromos mostrou diferenças na quantidade e distribuição de heterocromatina ao longo dos cromossomos e entre os acessos estudados. Com base no padrão de distribuição desses pequenos polimorfismos, foi possível separar os sete acessos em três grupos. Também foi possível diferenciar individualmente alguns dos acessos. Um dos resultados obtidos mostrou distensão heteromórfica da região organizadora nucleolar observada nos pares dos cromossomos 6 ou 7 com características peculiares. Foi sugerido, por exemplo, que o bloco heteromórfico de heterocromatina (CMA +++ / DAPI-) no cromossomo 6 do acesso Branco Mineiro Piauí pode ser usado como um marcador para identificar esse genótipo ou pode estar associado a algum caráter de interesse econômico.

Granulomatous rhinitis by Neoconidiobolus lamprauges in a mule / Rinite granulomatosa por Neoconidiobolus lamprauges em uma mula

Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 µm (± 3.63 µm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 µm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

Variations in heterochromatin content reveal important polymorphisms for studies of genetic improvement in garlic (Allium sativum L. ) / Conteúdo de heterocromatina revela polimorfismos importantes para o melhoramento genético do alho (Allium sativum L. )

Abstract Allium sativum L. is an herb of the Alliaceae family with a specific taste and aroma and medicinal and nutraceutical properties that are widely marketed in several countries. Brazil is one of the largest importers of garlic in the world, despite of its production is restricted and limited to internal consumption. Thus, explore the genetic diversity of commercial garlic conserved at germplasm banks is essential to generate additional genetic information about its economically important crop. A suitable tool for this purpose is the cytogenetic characterisation of these accessions. This study aimed to characterise the cytogenetic diversity among seven accessions of garlic from a Germplasm Bank in Brazil. The karyotypes were obtained by conventional staining and with chromomycin A3 (CMA) and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) fluorochromes. All accessions analysed showed chromosome number 2n = 16, karyotype formula 6M+2SM, symmetrical karyotypes, reticulate interphase nuclei, and chromosomes with uniform chromatin condensation from prophase to metaphase. The fluorochromes staining showed differences in the amount and distribution of heterochromatin along the chromosomes and between accessions studied. Based on the distribution pattern of these small polymorphisms, it was possible to separate the seven accessions into three groups. It was also possible to differentiate some of the accessions individually. One of the results obtained showed a heteromorphic distension of the nucleolar organiser region observed on the chromosome pairs 6 or 7 with peculiar characteristics. It was suggested for example, that the heteromorphic block of heterochromatin (CMA+++/DAPI-) on chromosome 6 of the "Branco Mineiro Piauí" accession can be used as a marker to identify this genotype or may be associated with some character of economic interest.

Resumo Allium sativum L. é uma erva da família Alliaceae com sabor e aroma específicos e propriedades medicinais e nutracêuticas amplamente comercializada em diversos países. O Brasil é um dos maiores importadores de alho do mundo, apesar da sua produção ser restrita e limitada ao consumo interno. Assim, explorar a diversidade genética do alho comercial conservado em bancos de germoplasma é essencial para fornecer informações genéticas adicionais acerca dessa cultura economicamente importante. Uma ferramenta adequada para esse fim é a caracterização citogenética desses acessos. Este estudo teve como objetivo caracterizar a diversidade citogenética entre sete acessos de alho de um Banco de Germoplasma no Brasil. Os cariótipos foram obtidos por coloração convencional e com os fluorocromos de cromomicina A3 (CMA) e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI). Todos os acessos analisados ​​apresentaram número cromossômico 2n = 16, fórmula cariotípica 6M + 2SM, cariótipos simétricos, núcleos reticulados em intérfase e cromossomos com condensação uniforme da cromatina da prófase para a metáfase. A coloração com fluorocromos mostrou diferenças na quantidade e distribuição de heterocromatina ao longo dos cromossomos e entre os acessos estudados. Com base no padrão de distribuição desses pequenos polimorfismos, foi possível separar os sete acessos em três grupos. Também foi possível diferenciar individualmente alguns dos acessos. Um dos resultados obtidos mostrou distensão heteromórfica da região organizadora nucleolar observada nos pares dos cromossomos 6 ou 7 com características peculiares. Foi sugerido, por exemplo, que o bloco heteromórfico de heterocromatina (CMA +++ / DAPI-) no cromossomo 6 do acesso "Branco Mineiro Piauí" pode ser usado como um marcador para identificar esse genótipo ou pode estar associado a algum caráter de interesse econômico.

Gastroesophageal tube of the Iguana iguana (Iguanidae): histological description, histochemical and immunohistochemical analysis of 5-HT and SS cells

Abstract The work aims were to describe the histological and histochemical structure of the gastroesophageal tube of Iguana iguana and verify the occurrence and distribution of immunoreactive serotonin (5-HT) and somatostatin (SS) cells. Fragments of the gastrointestinal tract (GIT) of five iguanas were which underwent standard histological and immunohistochemistry technique. Immunoreactive cells for 5-HT and SS were quantified using the STEPanizer. The oesophagus has ciliated columnar pseudostratified epithelium with staining Alcian blue (AB) + and goblet cells highly reactive to periodic acid Schiff (PAS). In the cervical oesophagus, the numerical density of 5-HT cells per unit area (QA [5-HT cells]/µm2) was 4.6x10-2 ± 2.0 and celomatic oesophagus presented QA = 4.0x10-2 ± 1.0. The epithelium of the stomach is simple columnar, PAS and AB +. The cranial and middle regions of the stomach presented (QA [5-HT cells]/µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 and the caudal region, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. The SS cells were only observed in the caudal stomach, with numerical density (QA [SS cells]/µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9 In I. iguana, variation was observed in terms of the distribution of mucus secretions and the pattern of occurrence of serotonin and somatostatin-secreting enteroendocrine cells in the TGI, which possibly will result in an interspecific adaptive response.

Resumo Os objetivos do trabalho foram descrever a estrutura histológica e histoquímica do tubo gastroesofágico da Iguana iguana e verificar a ocorrência e distribuição de células serotonina (5-HT) e somatostatina (SS) imunorreativas. Fragmentos do trato gastrointestinal (TGI) de cinco iguanas foram submetidos à técnica histológica e imunohistoquímica padrão. As células imunorreativas para 5-HT e SS foram quantificadas usando o STEPanizer. O esôfago apresenta epitélio pseudoestratificado colunar ciliado Alcian blue (AB) positivo, com células caliciformes altamente reativas ao ácido periódico de Schiff (PAS). No esôfago cervical, a densidade numérica de células 5-HT por unidade de área (QA [células 5-HT] / µm2) foi de 4.6x10-2 ± 2.0 e o esôfago celomático apresentou QA = 4.0x10-2 ± 1.0. O epitélio do estômago é colunar simples, PAS e AB positivo. As regiões cranial e média do estômago apresentaram (QA [células 5-HT] / µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 e a região caudal, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. As células SS foram observadas apenas no estômago caudal, com densidade numérica (QA [células SS] / µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9. Em I. iguana, foi observada variações em termos da distribuição das secreções de muco e padrão de ocorrência das células enteroendócrinas secretoras de serotonina e somatostatina no TGI, o que possivelmente reflete uma resposta adaptativa interespecifica.

Relationship of semen quality to inbreeding and gait of Colombian Creole horses / Relação da qualidade do sêmen com endogamia e marcha de cavalos crioulos colombianos

ABSTRACT: High consanguinity among equines has negative effects on semen quality, thus resulting in low motility and high levels of abnormality in the spermatozoa. However, such a relationship has not been studied in Colombian Creole horses, which have been subjected to particular selection practices focusing mainly on their gait. This research assessed the relationship of semen quality to inbreeding and gait of Colombian Creole horses. Semen was collected from 50 horses using the artificial vagina method. Sperm motility and kinematics were assessed with a computerized analysis system (SCA®). Sperm vitality (SV) and abnormal morphology (AM) were assessed via the eosin-nigrosin staining test. Functional membrane integrity (FMI) was assessed via the hypo-osmotic swelling test (HOST). Genealogies and consanguinity analysis was conducted using the Breeders Assistant for Horses program. An average of 3.6 ± 0.4 % was reported for the inbreeding coefficient (Ft). A decrease in sperm motility and kinematics was reported, which was associated with an increase in consanguinity (P < 0.05). Furthermore, differences in consanguinity were found based on gait. Similarly, a relationship between horse gait and semen quality (P < 0.05) was found. Authors concluded that semen quality of Colombian Creole horses has been affected by inbreeding and its relationship with genetic selection based on gait.

RESUMO: A alta consanguinidade entre equinos tem efeitos negativos na qualidade do sêmen, resultando em baixa motilidade e altos níveis de anormalidade nos espermatozóides. No entanto, tal relação não foi estudada em cavalos crioulos colombianos, que tem sido submetidos a práticas de seleção específicas com foco principalmente em sua marcha. O objetivo desta pesquisa foi avaliar o relação da qualidade do sêmen com endogamia e marcha de cavalos crioulos colombianos. O sêmen foi coletado de 50 cavalos pelo método da vagina artificial. A motilidade e a cinética dos espermatozoides foram avaliadas com um sistema de análise computadorizado (SCA®). A vitalidade do esperma (VE) e a morfologia anormal (MA) foram avaliadas por meio do teste de coloração com eosina-nigrosina. A integridade funcional da membrana (IFM) foi avaliada por meio do test hipo-osmótico (HOST). A análise de genealogias e consanguinidade foi conduzida usando o programa Breeders Assistant for Horses. Uma média de 3,6 ± 0,4% foi encontrada para o coeficiente de endogamia (Ft). Uma diminuição na motilidade e cinética dos espermatozoides, que foi associada a um aumento na consanguinidade (P < 0,05). Além disso, diferenças na consanguinidade foram encontradas com base na marcha. Da mesma forma, foi encontrada uma relação entre a marcha do cavalo e a qualidade do sêmen (P < 0,05). Os autores concluíram que a qualidade do sêmen de cavalos crioulos colombianos foi afetada pela endogamia e sua relação com a seleção genética baseada na marcha.

Fungal diseases in dogs and cats in Northeastern Brazil / Doenças fúngicas em cães e gatos no Nordeste do Brasil

ABSTRACT: In this retrospective study, the clinical and anatomopathological findings of fungal diseases in dogs and cats in Northeastern Brazil are described. During the study period, 6,827 histopathological examinations (4,090 necropsies and 2,737 biopsies) of companion animals were reviewed, and fungal infections were diagnosed in 54 cases. Of these, 32 cases were diagnosed in cats and 22 in dogs. Sporotrichosis was the most prevalent mycosis (19/54), followed by dermatophytosis (9/54), cryptococcosis (8/54), candidiasis (7/54), and phaeohyphomycosis (4/54). Other diseases had two cases each, including aspergillosis, mucormycosis, and histoplasmosis, whereas coccidioidomycosis occurred once. Mycoses were diagnosed through microscopic lesions associated with the histomorphological characteristics of the agent, as evidenced by routine and special histochemical stains. They were occasionally confirmed by immunohistochemistry and microbiological cultivation. This retrospective study showed that despite being uncommon, fungal diseases are important causes of death in dogs and cats in the region, with cats being the most affected species and sporotrichosis being the most prevalent mycosis. Clinical signs were correlated with the portal of entry of the infection associated with localized or disseminated superficial and deep skin lesions or affecting parenchymal organs, especially in systemic infections. Microscopic lesions were mainly characterized by pyogranulomatous inflammation associated with fungal structures. In dogs, mycoses occurred mainly owing to an immunological impairment secondary to canine distemper virus co-infection.

RESUMO: Neste estudo retrospectivo, são descritos os achados clínicos e anatomopatológicos das doenças fúngicas em cães e gatos no Nordeste do Brasil. Durante o período de estudo, foram revisados 6.827 exames histopatológicos (4.090 necropsias e 2.737 biópsias) de animais de companhia e diagnosticados 54 casos de infecções fúngicas. Destes, 32 casos foram diagnosticados em gatos e 22 em cães. A esporotricose foi a micose mais prevalente (19/54), seguida pela dermatofitose (9/54), criptococose (8/54), candidíase (7/54) e feo-hifomicose (4/54). Outras doenças tiveram dois casos cada, incluindo aspergilose, mucormicose e histoplasmose, enquanto a coccidioidomicose ocorreu uma vez. As micoses foram diagnosticadas por meio das lesões microscópicas associadas às características histomorfológicas do agente, evidenciadas pelas colorações de rotina e histoquímicas especiais, e ocasionalmente confirmadas pela imuno-histoquímica e cultivo microbiológico. Esse estudo retrospectivo demonstrou que apesar de incomuns, as doenças fúngicas são importantes causas de morte em cães e gatos da região, sendo os gatos a espécie mais afetada e a esporotricose, a micose mais prevalente. Os sinais clínicos estavam correlacionados com a porta de entrada da infecção, associados a lesões cutâneas localizadas ou disseminadas superficiais e profundas ou afetando órgãos parenquimatosos, especialmente em infecções sistêmicas. As lesões microscópicas eram caracterizadas principalmente por inflamação piogranulomatosa associada a estruturas fúngicas. Nos cães, as micoses ocorreram principalmente devido ao comprometimento imunológico secundária a coinfecção pelo vírus da cinomose canina.

Variations in heterochromatin content reveal important polymorphisms for studies of genetic improvement in garlic (Allium sativum L) / Conteúdo de heterocromatina revela polimorfismos importantes para o melhoramento genético do alho (Allium sativum L)

Allium sativum L. is an herb of the Alliaceae family with a specific taste and aroma and medicinal and nutraceutical properties that are widely marketed in several countries. Brazil is one of the largest importers of garlic in the world, despite of its production is restricted and limited to internal consumption. Thus, explore the genetic diversity of commercial garlic conserved at germplasm banks is essential to generate additional genetic information about its economically important crop. A suitable tool for this purpose is the cytogenetic characterisation of these accessions. This study aimed to characterise the cytogenetic diversity among seven accessions of garlic from a Germplasm Bank in Brazil. The karyotypes were obtained by conventional staining and with chromomycin A3 (CMA) and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) fluorochromes. All accessions analysed showed chromosome number 2n= 16, karyotype formula 6M+2SM, symmetrical karyotypes, reticulate interphase nuclei, and chromosomes with uniform chromatin condensation from prophase to metaphase. The fluorochromes staining showed differences in the amount and distribution of heterochromatin along the chromosomes and between accessions studied. Based on the distribution pattern of these small polymorphisms, it was possible to separate the seven accessions into three groups. It was also possible to differentiate some of the accessions individually. One of the results obtained showed a heteromorphic distension of the nucleolar organiser region observed on the chromosome pairs 6 or 7 with peculiar characteristics. It was suggested for example, that the heteromorphic block of heterochromatin (CMA+++/DAPI-) on chromosome 6 of the "Branco Mineiro Piauí" accession can be used as a marker to identify this genotype or may be associated with some character of economic interest.

Allium sativum L. é uma erva da família Alliaceae com sabor e aroma específicos e propriedades medicinais e nutracêuticas amplamente comercializada em diversos países. O Brasil é um dos maiores importadores de alho do mundo, apesar da sua produção ser restrita e limitada ao consumo interno. Assim, explorar a diversidade genética do alho comercial conservado em bancos de germoplasma é essencial para fornecer informações genéticas adicionais acerca dessa cultura economicamente importante. Uma ferramenta adequada para esse fim é a caracterização citogenética desses acessos. Este estudo teve como objetivo caracterizar a diversidade citogenética entre sete acessos de alho de um Banco de Germoplasma no Brasil. Os cariótipos foram obtidos por coloração convencional e com os fluorocromos de cromomicina A3 (CMA) e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI). Todos os acessos analisados apresentaram número cromossômico 2n = 16, fórmula cariotípica 6M + 2SM, cariótipos simétricos, núcleos reticulados em intérfase e cromossomos com condensação uniforme da cromatina da prófase para a metáfase. A coloração com fluorocromos mostrou diferenças na quantidade e distribuição de heterocromatina ao longo dos cromossomos e entre os acessos estudados. Com base no padrão de distribuição desses pequenos polimorfismos, foi possível separar os sete acessos em três grupos. Também foi possível diferenciar individualmente alguns dos acessos. Um dos resultados obtidos mostrou distensão heteromórfica da região organizadora nucleolar observada nos pares dos cromossomos 6 ou 7 com características peculiares. Foi sugerido, por exemplo, que o bloco heteromórfico de heterocromatina (CMA +++ / DAPI-) no cromossomo 6 do acesso “Branco Mineiro Piauí” pode ser usado como um marcador para identificar esse genótipo ou pode estar associado a algum caráter de interesse econômico.

Metastatic gallbladder adenocarcinoma in a cat

Biliary neoplasms are uncommon in cats and affect older animals. A 12-year-old female crossbreed cat showed prostration, lethargy, apathy, and severe jaundice. Ultrasonography showed distention of the gallbladder associated with severe obstruction of the bile ducts with thickening of the biliary wall, forming amorphous masses of irregular contour and heterogeneous appearance directed to the lumen measuring up to 2 cm. Necropsy showed a gallbladder with a yellowish and soft nodule measuring 3 × 3 cm, compressing the extrahepatic bile duct, occluding the passage of bile. There were also firm, yellowish multifocal to coalescing nodules in the liver, ranging from 0.5 to 1 cm, affecting 10% of the organ, in addition to lungs with firm, yellowish multifocal nodules ranging from 0.2 to 0.5 cm, affecting 20% of the organ. Histologically, gallbladder and bile ducts had malignant epithelial neoplastic proliferation, which was organized into multiple papillary and ductal projections, separated by moderate fibrovascular stroma compatible with gallbladder adenocarcinoma. The liver and lungs also contained neoplastic structures with a ductal appearance and papilliform projections identical to those observed in the gallbladder. The immunohistochemical examination (IHC) showed intense positive staining of epithelial neoplastic cells for pan-cytokeratin (AE1/AE3) and no staining for vimentin (Clone V9). The diagnosis of gallbladder adenocarcinoma with metastasis in the liver and lungs was established based on the clinical, macroscopic, histopathological, and immunohistochemical findings.(AU)

Impact of high-fat diet consumption during prolonged period of pregnancy on placenta structures and umbilical vascular growth in goats

This study aimed to verify the impact of high-fat diet consumption for a prolonged period on oxidative stress, fetal growth, umbilical vascular system, and placental structures in pregnant goats. Twenty-two pregnant goats were grouped into the control diet (n= 11) and fat diet (n = 11). Flaxseed meal was added to the fat diet, replacing the corn grain of concentrate, from gestational day 100 to delivery date. Diets were isonitrogenous and isoenergetic, differing in fat content (2.8% vs. 6.3% dry matter). The fat group showed higher feed intake and total plasma lipid levels than the control group (P < 0.001). No difference was found in placentome, and umbilical vascular development. Fat diet-fed goats exhibited a lower systolic peak in the umbilical artery. At delivery, placental traits were similar with the exception of the cotyledon width (P = 0.0075), which was smaller in the fat group and cotyledon surface (P = 0.0047) for multiple pregnancy of fat diet. Cotyledonary epithelium showed more intense staining of lipid droplets and a greater area for lipofuscin staining in the fat group compared to control group (P < 0.001). The mean live weight of the kids was lower in the fat group in the first week after delivery than in control group. Thus, in goats, the continuous administration of a high-fat diet during pregnancy does not appear to modify the fetal-maternal vascular structures but has an impact on a part of the placental structure; therefore, its use must be carefully evaluated.(AU)

Circular RNA protein tyrosine kinase 2 aggravates pyroptosis and inflammation in septic lung tissue by promoting microRNA-766/eukaryotic initiation factor 5A axis-mediated ATP efflux

Purpose: Sepsis is characterized by an acute inflammatory response to infection, often with multiple organ failures, especially severe lung injury. This study was implemented to probe circular RNA (circRNA) protein tyrosine kinase 2 (circPTK2)-associated regulatory mechanisms in septic acute lung injury (ALI). Methods: A cecal ligation and puncture-based mouse model and an lipopolysaccharides (LPS)-based alveolar type II cell (RLE-6TN) model were generated to mimic sepsis. In the two models, inflammation- and pyroptosisrelated genes were measured. Results: The degree of lung injury in mice was analyzed by hematoxylin and eosin (H&E) staining and the apoptosis was by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling staining. In addition, pyroptosis and toxicity were detected in cells. Finally, the binding relationship between circPTK2, miR-766, and eukaryotic initiation factor 5A (eIF5A) was detected. Data indicated that circPTK2 and eIF5A were up-regulated and miR-766 was down-regulated in LPS-treated RLE-6TN cells and lung tissue of septic mice. Lung injury in septic mice was ameliorated after inhibition of circPTK2. Conclusion: It was confirmed in the cell model that knockdown of circPTK2 effectively ameliorated LPS-induced ATP efflux, pyroptosis, and inflammation. Mechanistically, circPTK2 mediated eIF5A expression by competitively adsorbing miR-766. Taken together, circPTK2/ miR-766/eIF5A axis ameliorates septic ALI, developing a novel therapeutic target for the disease.

Variations in heterochromatin content reveal important polymorphisms for studies of genetic improvement in garlic (Allium sativum L) / Conteúdo de heterocromatina revela polimorfismos importantes para o melhoramento genético do alho (Allium sativum L)

Allium sativum L. is an herb of the Alliaceae family with a specific taste and aroma and medicinal and nutraceutical properties that are widely marketed in several countries. Brazil is one of the largest importers of garlic in the world, despite of its production is restricted and limited to internal consumption. Thus, explore the genetic diversity of commercial garlic conserved at germplasm banks is essential to generate additional genetic information about its economically important crop. A suitable tool for this purpose is the cytogenetic characterisation of these accessions. This study aimed to characterise the cytogenetic diversity among seven accessions of garlic from a Germplasm Bank in Brazil. The karyotypes were obtained by conventional staining and with chromomycin A3 (CMA) and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) fluorochromes. All accessions analysed showed chromosome number 2n= 16, karyotype formula 6M+2SM, symmetrical karyotypes, reticulate interphase nuclei, and chromosomes with uniform chromatin condensation from prophase to metaphase. The fluorochromes staining showed differences in the amount and distribution of heterochromatin along the chromosomes and between accessions studied. Based on the distribution pattern of these small polymorphisms, it was possible to separate the seven accessions into three groups. It was also possible to differentiate some of the accessions individually. One of the results obtained showed a heteromorphic distension of the nucleolar organiser region observed on the chromosome pairs 6 or 7 with peculiar characteristics. It was suggested for example, that the heteromorphic block of heterochromatin (CMA+++/DAPI-) on chromosome 6 of the "Branco Mineiro Piauí" accession can be used as a marker to identify this genotype or may be associated with some character of economic interest.(AU)

Allium sativum L. é uma erva da família Alliaceae com sabor e aroma específicos e propriedades medicinais e nutracêuticas amplamente comercializada em diversos países. O Brasil é um dos maiores importadores de alho do mundo, apesar da sua produção ser restrita e limitada ao consumo interno. Assim, explorar a diversidade genética do alho comercial conservado em bancos de germoplasma é essencial para fornecer informações genéticas adicionais acerca dessa cultura economicamente importante. Uma ferramenta adequada para esse fim é a caracterização citogenética desses acessos. Este estudo teve como objetivo caracterizar a diversidade citogenética entre sete acessos de alho de um Banco de Germoplasma no Brasil. Os cariótipos foram obtidos por coloração convencional e com os fluorocromos de cromomicina A3 (CMA) e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI). Todos os acessos analisados apresentaram número cromossômico 2n = 16, fórmula cariotípica 6M + 2SM, cariótipos simétricos, núcleos reticulados em intérfase e cromossomos com condensação uniforme da cromatina da prófase para a metáfase. A coloração com fluorocromos mostrou diferenças na quantidade e distribuição de heterocromatina ao longo dos cromossomos e entre os acessos estudados. Com base no padrão de distribuição desses pequenos polimorfismos, foi possível separar os sete acessos em três grupos. Também foi possível diferenciar individualmente alguns dos acessos. Um dos resultados obtidos mostrou distensão heteromórfica da região organizadora nucleolar observada nos pares dos cromossomos 6 ou 7 com características peculiares. Foi sugerido, por exemplo, que o bloco heteromórfico de heterocromatina (CMA +++ / DAPI-) no cromossomo 6 do acesso “Branco Mineiro Piauí” pode ser usado como um marcador para identificar esse genótipo ou pode estar associado a algum caráter de interesse econômico.(AU)

Molecular Epidemiology of Plasmodium species in Conflicted Federally Administered Tribal Area (FATA) Pakistan

Abstract Military conflicts have been significant obstacles in detecting and treating infectious disease diseases due to the diminished public health infrastructure, resulting in malaria endemicity. A variety of violent and destructive incidents were experienced by FATA (Federally Administered Tribal Areas). It was a struggle to pursue an epidemiological analysis due to continuing conflict and Talibanization. Clinical isolates were collected from Bajaur, Mohmand, Khyber, Orakzai agencies from May 2017 to May 2018. For Giemsa staining, full blood EDTA blood samples have been collected from symptomatic participants. Malaria-positive microscopy isolates were spotted on filter papers for future Plasmodial molecular detection by nested polymerase chain reaction (nPCR) of small subunit ribosomal ribonucleic acid (ssrRNA) genes specific primers. Since reconfirming the nPCR, a malariometric study of 762 patients found 679 positive malaria cases. Plasmodium vivax was 523 (77%), Plasmodium falciparum 121 (18%), 35 (5%) were with mixed-species infection (P. vivax plus P. falciparum), and 83 were declared negative by PCR. Among the five agencies of FATA, Khyber agency has the highest malaria incidence (19%) with followed by P. vivax (19%) and P. falciparum (4.1%). In contrast, Kurram has about (14%), including (10.8%) P. vivax and (2.7%) P. falciparum cases, the lowest malaria epidemiology. Surprisingly, no significant differences in the distribution of mixed-species infection among all five agencies. P. falciparum and P. vivax were two prevalent FATA malaria species in Pakistans war-torn area. To overcome this rising incidence of malaria, this study recommends that initiating malaria awareness campaigns in school should be supported by public health agencies and malaria-related education locally, targeting children and parents alike.

Resumo Os conflitos militares têm sido obstáculos significativos na detecção e tratamento de doenças infecciosas devido à diminuição da infraestrutura de saúde pública, resultando na endemicidade da malária. Uma variedade de incidentes violentos e destrutivos foi vivida pelas FATA (áreas tribais administradas pelo governo federal). Foi uma luta buscar uma análise epidemiológica devido ao conflito contínuo e à talibanização. Isolados clínicos foram coletados de agências Bajaur, Mohmand, Khyber e Orakzai, de maio de 2017 a maio de 2018. Para a coloração de Giemsa, amostras de sangue completo com EDTA foram coletadas de participantes sintomáticos. Isolados de microscopia positivos para malária foram colocados em papéis de filtro para futura detecção molecular plasmódica por reação em cadeia da polimerase aninhada (nPCR) de primers específicos de genes de subunidade ribossômica de ácido ribonucleico (ssrRNA). Desde a reconfirmação do nPCR, um estudo malariométrico de 762 pacientes encontrou 679 casos positivos de malária. Plasmodium vivax foi 523 (77%), Plasmodium falciparum 121 (18%), 35 (5%) eram com infecção de espécies mistas (P. vivax mais P. falciparum) e 83 foram declarados negativos por PCR. Entre as cinco agências da FATA, a agência Khyber tem a maior incidência de malária (19%), seguida por P. vivax (19%) e P. falciparum (4,1%). Em contraste, Kurram tem cerca de 14%, incluindo 10,8% casos de P. vivax e 2,7% P. falciparum, a epidemiologia de malária mais baixa. Surpreendentemente, não há diferenças significativas na distribuição da infecção de espécies mistas entre todas as cinco agências. P. falciparum e P. vivax foram duas espécies prevalentes de malária FATA na área devastada pela guerra no Paquistão. Para superar essa incidência crescente de malária, este estudo recomenda que o início de campanhas de conscientização sobre a malária na escola deve ser apoiado por agências de saúde pública e educação relacionada com a malária localmente, visando crianças e pais.

Effects of neutrophil extracellular traps during human respiratory syncytial virus infection in vitro

Abstract The human respiratory syncytial virus (hRSV) is the most common cause of severe lower respiratory tract diseases in young children worldwide, leading to a high number of hospitalizations and significant expenditures for health systems. Neutrophils are massively recruited to the lung tissue of patients with acute respiratory diseases. At the infection site, they release neutrophil extracellular traps (NETs) that can capture and/or inactivate different types of microorganisms, including viruses. Evidence has shown that the accumulation of NETs results in direct cytotoxic effects on endothelial and epithelial cells. Neutrophils stimulated by the hRSV-F protein generate NETs that are able to capture hRSV particles, thus reducing their transmission. However, the massive production of NETs obstructs the airways and increases disease severity. Therefore, further knowledge about the effects of NETs during hRSV infections is essential for the development of new specific and effective treatments. This study evaluated the effects of NETs on the previous or posterior contact with hRSV-infected Hep-2 cells. Hep-2 cells were infected with different hRSV multiplicity of infection (MOI 0.5 or 1.0), either before or after incubation with NETs (0.516 g/mL). Infected and untreated cells showed decreased cellular viability and intense staining with trypan blue, which was accompanied by the formation of many large syncytia. Previous contact between NETs and cells did not result in a protective effect. Cells in monolayers showed a reduced number and area of syncytia, but cell death was similar in infected and non-treated cells. The addition of NETs to infected tissues maintained a similar virus-induced cell death rate and an increased syncytial area, indicating cytotoxic and deleterious damages. Our results corroborate previously reported findings that NETs contribute to the immunopathology developed by patients infected with hRSV.

Resumo O vírus sincicial respiratório humano (hRSV) é a causa mais comum de doenças graves do trato respiratório inferior em crianças pequenas em todo o mundo, resultando em grande número de hospitalizações e gastos significativos para os sistemas de saúde. Neutrófilos são recrutados em massa para o tecido pulmonar de pacientes com doenças respiratórias agudas. No local da infecção, eles liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) que podem capturar e/ou inativar diferentes tipos de microrganismos, incluindo vírus. Evidências demonstraram que o acúmulo de NETs resulta em efeitos citotóxicos diretos nas células endoteliais e epiteliais. Os neutrófilos estimulados pela proteína F do vírus sincicial respiratório (hRSV-F) geram NETs que são capazes de capturar partículas virais, reduzindo assim sua transmissão. No entanto, a produção maciça de NETs obstrui as vias aéreas e aumenta a gravidade da doença. Assim, um maior conhecimento sobre os efeitos das NETs durante as infecções por hRSV é essencial para o desenvolvimento de novos tratamentos específicos e eficazes. Este estudo avaliou os efeitos das NETs no contato prévio ou posterior à infecção de células Hep-2 com hRSV. As células Hep-2 foram infectadas com diferentes quantidades de hRSV (multiplicidade de infecção ou MOI 0,5 ou 1,0), antes ou após a incubação com NETs (0,516 g/mL). Células infectadas e não tratadas mostraram redução da viabilidade celular e intensa coloração com azul de tripano, que foi acompanhada pela formação de sincícios numerosos e grandes. O contato prévio entre as NETs e as células não resultou em efeito protetor. As células em monocamadas mostraram um número e área de sincícios reduzidos, mas a morte celular foi semelhante àquela apresentada por células infectadas e não tratadas. A adição de NETs aos tecidos infectados manteve taxa de morte celular e formação de sincícios semelhantes àqueles induzidos pelo vírus em células não tratadas, indicando danos citotóxicos e deletérios. Nossos resultados corroboram achados relatados anteriormente de que as NETs contribuem para a imunopatologia desenvolvida por pacientes infectados com hRSV.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa- ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of 6.9, 7.6, 7.1, 6.9, 6.7, and 7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 g / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 g / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa- [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de 6,9, 7,6, 7,1, 6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 g / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 g / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract

Abstract Many soil microorganisms i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence analysis. Finally, the isolates were identified as B. cereus accession number LC538271and K. pneumoniae accession number MT078679. Analysis of bacterial extract S20 through GC-MS indicated the presence of 8 compounds of diverse nature and structure. Present study suggests that wastes of pharmaceutical and poultry feed industry may have antibiotic producing bacteria. These bacteria could be utilized for the production of antibiotics. B. cereus and K. pneumoniae isolated from wastes of poultry feed and pharmaceutical industries have the potential to produce antibiotics and could be used to control the microbial growth.

Resumo Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S rRNA. Finalmente, os isolados foram identificados como B. cereus número de acesso LC538271 e K. pneumoniae número de acesso MT078679. A análise do extrato bacteriano S20 por meio de GC-MS indicou a presença de oito compostos de natureza e estrutura diversas. O presente estudo sugere que resíduos da indústria farmacêutica e de ração para aves podem conter bactérias produtoras de antibióticos. Essas bactérias podem ser utilizadas para a produção de antibióticos B. cereus e K. pneumoniae isolados de resíduos de rações de aves e indústrias farmacêuticas têm potencial para produzir antibióticos e podem ser usados para controlar o crescimento microbiano.

Real-time PCR quantification and histopathological findings of Mycoplasma hyopneumoniae infection in the lungs of pigs slaughtered in São Luís, Maranhão, Brazil / Quantificação por PCR em tempo real e achados histopatológicos da infecção por Mycoplasma hyopneumoniae em pulmão de suínos abatidos na cidade de São Luís, Maranhão, Brasil

ABSTRACT: Porcine enzootic pneumonia (PES), mainly caused by the bacteria Mycoplasma hyopneumoniae, is the main cause of respiratory problems in pigs. Infection by M. hyopneumoniae leads to production losses and the predisposition of affected animals to secondary infections, which may result in the condemnation of carcasses and organs due to lung lesions at the time of slaughter. The objective of the research was to evaluate the infection by M. hyopneumoniae in pigs submitted to slaughter in São Luís Island/MA, using molecular and histopathological diagnostic methods. One hundred fifty lung samples were collected from inspected (n=65) and non-inspected (n=85) slaughter pigs on São Luís Island, Maranhão, from July 2019 to August 2021. Of the 150 DNA samples collected, 121 showed an amplified product for Cyt B in the PCR assay. Thus, 121 samples were submitted to qPCR of M. hyopneumoniae, of which 44 (36.36%) showed positive results. The mean amount of bacterial load ranged from 1.20 × 101 to 7.20 × 104, with a mean of 1.73 × 104 copies. Of the reagent samples, 81.81% (36 samples) were obtained from non-inspected slaughter, while 18.18% (8 samples) were obtained from slaughterhouses. In the histopathological analysis, 44 positive qPCR samples were evaluated, of which 28 (63.63%) presented results compatible with the main inflammatory process associated with the presence of M. hyopneumoniae, that is, bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia (BALT). Three samples that showed the highest bacterial load (qPCR: 5.63 × 10³, 2.19 × 104 and 7.23 × 104) showed more evident lesions in this study. The microscopic findings associated with the quantifications indicated a relationship between the amount of bacterial load and the presence of microscopic lesions; higher bacterial load in lung tissue is associated with increased histopathologic staining for BALT hyperplasia. In conclusion, the results point to the circulation of the etiological agent in the sampled animals and the need for preventive measures on pig farms in Maranhão with the involvement of producers, sanitary defense and inspection agencies.

RESUMO: A pneumonia enzoótica suína (PES), causada principalmente pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae, é a principal causa de problemas respiratórios em suínos. A infecção por M. hyopneumoniae leva a perdas produtivas e a predisposição dos animais acometidos a infecções secundárias, o que pode resultar em condenação de carcaças e órgãos por lesões pulmonares no momento do abate. O objetivo da pesquisa foi avaliar a infecção por M. hyopneumoniae em suínos submetidos ao abate na Ilha de São Luís, por meio de métodos diagnósticos moleculares e histopatológicos. Para isso, foram coletadas 150 amostras de pulmão de suínos de abate inspecionado (n=65) e não inspecionado (n=85) na Ilha de São Luís/Maranhão, no período de julho de 2019 a agosto de 2021. Das 150 amostras de DNA coletadas, 121 apresentaram produto amplificado para Cyt B no ensaio de PCR. Assim, 121 amostras foram submetidas à qPCR de M. hyopneumoniae, das quais 44 (36,36%) apresentaram resultados positivos. A quantidade média de carga bacteriana variou de 1,20 × 101 a 7,20 × 104, com média de 1,73 × 104 cópias. Das amostras reagentes, 81,81% (36 amostras) foram obtidas de abate não inspecionado, enquanto 18,18% (8 amostras) foram obtidas em abatedouro. Na análise histopatológica, foram avaliadas 44 amostras positivas para qPCR, das quais 28 (63,63%) apresentaram resultados compatíveis com o principal processo inflamatório associado à presença de M. hyopneumoniae, ou seja, hiperplasia do tecido linfóide associado ao brônquio (BALT). Três amostras que apresentaram maior carga bacteriana (qPCR: 5,63 × 10³, 2,19 × 104 e 7,23 × 104) foram mais evidentes neste estudo. Os achados microscópicos associados às quantificações indicaram uma relação entre a quantidade de carga bacteriana e a presença de lesão microscópica; a maior carga bacteriana no tecido pulmonar está associada a maior alteração histopatológica para hiperplasia BALT. Em conclusão, os resultados obtidos sinalizam para a circulação do agente etiológico nos animais amostrados e a necessidade de medidas preventivas nas criações de suínos do estado do Maranhão com envolvimento dos produtores, órgãos de defesa sanitária e inspeção.